毒力基因

摘要： 【目的】调查产生生物被膜的金黄色葡萄球菌流行病学特征,探究生物被膜形成能力与分子型之间的相关性,为治疗动物金黄色葡萄球菌感染提供理论依据。【方法】以广东省兽药研制与安全评价重点实验室保存的98株金黄色葡萄球菌为研究对象,用结晶紫半定量法测定所有菌株生物被膜形成能力,将产膜菌株进行22种常见抗菌药的最小抑菌浓度测定,通过金黄色葡萄球菌常见3种(spa、MLST和PFGE)分型方式进行分子分型,并分析产膜能力与分子型之间的相关性,最后通过全基因组测序技术分析生物被膜产生菌株中耐药基因和毒力基因携带状况。【结果】结晶紫半定量结果显示,98株金黄色葡萄球菌中能产生生物被膜的菌株共计23株,占23.47%。包括牛乳源22株(占比25.29%,22/87),其中14株(占比60.87%,14/22)来自浙江奶牛养殖场,8株(占比39.13%,8/22)来自福建奶牛养殖场,以及猪源1株(占比9.10%,1/11),来自广东屠宰场,说明牛乳源金黄色葡萄球菌产膜潜力高于猪源;将产膜能力划分为强、中、弱3个等级,23株产膜菌株中,其中强产膜菌株2株(占比8.70%,2/23),中产膜菌株9株(占比39.13%,9/23),以及弱产膜菌株12株(占比52.17%,12/23)。药敏试验显示,牛乳源产膜菌株对所有受试抗菌药物敏感,而猪源产膜菌株对青霉素、阿莫西林、头孢噻呋、头孢西丁、恩诺沙星、环丙沙星、克林霉素、多西环素、红霉素、氟苯尼考、复方新诺明、泰妙菌素、替米考星13种抗菌药均表现出耐药;spa分型结果显示,98株金黄色葡萄球菌共获得8种spa型,产膜的23株金黄色葡萄球菌占其中3种:1株t2922型来自广东猪源,14株t2119来自浙江牛乳源,8株t189来自福建牛乳源;MLST分型结果显示,98株菌共分为9种ST型,其中6种ST型不具有产生生物被膜的能力,分别为ST398、ST522、ST705、ST1651、ST479和ST151,仅3种ST型的菌株具有生物被膜产生能力,分别为ST9、ST7和ST188。结果表明,强产膜菌株分子型主要为ST7-t2119,中产膜菌株主要为ST7-t2119和ST188-t189,弱产膜菌株为ST9-t2922、ST7-t2119和ST188-t189;同时结合PCA分析不同ST型组间差异性发现,弱产膜菌株的ST型能与中强产膜菌株很好的区分开来,只有特定ST型的金黄色葡萄球菌才具有产生生物被膜的能力。23株产膜菌株PFGE分型全部成功,结果显示,广东、福建、浙江三省产膜菌株共分为3种PFGE型,且PFGE型存在地域分布特征,同一地区的分离株可能存在克隆传播,但克隆株之间生物被膜产生能力有明显差异;全基因组测序结果显示,产膜菌株中耐药基因和毒力基因根据分子型不同携带情况呈现多样性。【结论】不同来源的金黄色葡萄球菌有不同程度产生生物被膜的潜力,且均携带多种不同的产膜基因,牛乳源金黄色葡萄球菌产膜潜力远远高于猪源;菌株能否产膜与ST型存在强相关性,特定的ST型如ST9、ST7和ST188更容易产生生物被膜。

摘要： 目的分析复发性尿路感染(rUTI)患者致病性大肠埃希菌分子分型、毒力基因和耐药性。方法收集分离自上海市第六人民医院60例rUTI患者的大肠埃希菌菌株,采用脉冲场凝胶电泳(PFGE)、多位点序列分型(MLST)和种系发育分型方法进行克隆分型,采用聚合酶链反应(PCR)和测序法分析其常见毒力基因(feoB、chuA、iutA、iroN、ireA、fimH、foc、sfa、aer和cnf),并分析大肠埃希菌对13种常用抗菌药物的耐药性。结果根据PFGE结果,将60例rUTI患者分为复发组和再感染组,纳入分离自复发组的30株和再感染组的60株大肠埃希菌。纳入菌株的主要MLST型别为ST131型和ST405型,主要种系发育分型为B2型和D型。在10种毒力基因中,feoB所占比例最高(98.8%),其次是fimH(93.3%)。复发组iutA携带率高于再感染组(P=0.020)。2个组临床分离菌株抗菌药物耐药性模式无明显差异(P>0.05)。结论ST131和ST405是上海市第六人民医院rUTI患者致病性大肠埃希菌的主要MLST型别,常见毒力基因为feoB和fimH,iutA在复发患者中携带率较高,可将其作为降低尿路感染持留的治疗靶点。

摘要： 2020年5月,新疆和田地区某驴场0~6月龄驴驹爆发腹泻病,主要表现为体温升高、剧烈腹泻、严重脱水、精神不振等症状,严重者陆续死亡,使用多种药物和方法治疗效果均不理想。为了解驴驹腹泻粪源大肠杆菌致病与耐药情况,从该驴场采集病驹腹泻粪样,采用麦康凯培养基进行筛选,利用16SrDNA序列分析和生化试验对大肠杆菌进行鉴定,用PCR法检测9种毒力基因和13种耐药基因,小鼠攻毒试验检测致病性,Kirby-Bauer纸片扩散法进行药物敏感性检测。结果表明,3份驴驹腹泻粪源样本中共分离出3株大肠杆菌,共检出3种毒力基因,分别为fyuA(66.7%)、irp2(100%)、iucD(100%);所有大肠杆菌对小鼠均有致病性且致病力极强;3株大肠杆菌对头孢噻吩、头孢唑林、链霉素和氯霉素等13种临床常用抗生素高度耐药(100%),仅对头孢吡肟与头孢西丁高度敏感;共检出bla_(CTX-M-1)(100%)、bla_(TEM)(100%)、tetG(100%)、bla_(SHV)(100%)、aadA1(66.7%)、sul1(66.7%)和cmlA(66.7%)7个耐药基因。综上,腹泻驴驹粪源大肠杆菌的致病力较强,且耐药性极高,可能是造成该驴场驴驹腹泻的主要原因。

摘要： 【目的】研究金银花、连翘及金银花-连翘药对(金银花-连翘1∶1)对北疆地区携带fneB毒力基因的马链球菌马亚种(Streptococcus equi subsp.equi,SEE)耐药基因和毒力基因的影响。【方法】首先对1 g/mL的金银花、连翘及金银花-连翘药对(金银花-连翘1∶1)水提物进行中药配比浓度梯度试验,然后与携带fneB毒力基因的L1菌株、lytA+fneB+ply毒力基因的D1菌株和qnrA+bla_(TEM)+fneB基因的Y1菌株3种SEE菌株共培养,检测中药对SEE菌株耐药基因bla_(TEM)、qnrA及毒力基因ply、fneB的影响;将192只SPF级昆明小鼠均分为16组:空白对照组(生理盐水)、金银花组、连翘组、金银花-连翘1∶1组、阴性对照组(Y1、L1和D1菌株组)及3种菌株分别与金银花、连翘和金银花-连翘1∶1共培养组,各组药物或菌液经腹腔注射0.5 mL进行小鼠体内抑菌试验,检测药物对小鼠的致病性和fneB毒力基因的影响。【结果】中药最适配比浓度为中药水提物∶THB培养基∶待测菌液(D_(600 nm)值均为0.6)为1000μL∶500μL∶20μL;与中药水提取物共培养的3株SEE菌株均未检出耐药基因和毒力基因,且菌株形态结构均未发生改变。小鼠致病性试验结果显示,阴性对照组的小鼠成活率分别为16.7%、8.3%和0;而L1+连翘、L1+金银花共培养组小鼠存活率分别为83.3%、75.0%,金银花-连翘1∶1药对与3株SEE菌株共培养组小鼠成活率分别为41.7%、16.7%、50.0%;小鼠病理解剖结果显示,除接种SEE菌株的小鼠肝脏肿大淤血、边缘钝圆外,其余各组肝脏均正常。小鼠体内fneB毒力基因检测结果显示,Y1+金银花、Y1+连翘、Y1+金银花-连翘1∶1、L1+金银花、L1+金银花-连翘1∶1、D1+金银花、D1+连翘、D1+金银花-连翘组均携带fneB毒力基因,L1+连翘组未检出fneB毒力基因,表明小鼠体内SEE菌株有重新获得fneB毒力基因的能力,出现菌种反毒复壮,其机制有待进一步研究。【结论】金银花、连翘及金银花-连翘药对能够减弱SEE菌株的毒力基因和耐药基因,从而对马腺疫疾病的防治具有指导意义,为减抗、替抗提供理论支撑。

摘要： 为鉴定一起花边鸭突然发病死亡的病原,从发病鸭中分离到一株致病菌GZZY2019,分离菌在鲜血培养基中呈现圆形、表面光滑、边缘规则、半透明的露滴状小菌落;革兰氏染色镜检显示,分离菌为革兰氏阴性短杆菌;生化鉴定结果显示,分离菌能发酵葡萄糖、甘露醇等,鸟氨酸、尿素、吲哚等试验阳性;细菌种特异性鉴定结果与多杀性巴氏杆菌相符;荚膜分型鉴定结果仅扩增出约1050bp的基因片段,与荚膜血清A型相符;动物回归试验显示,该分离菌具有较强的致病性;16s rDNA基因序列比对显示该分离菌与多杀性巴氏杆菌LSBS1(GenBank登录号:MN080875.1)同源性高达99.93%;毒力基因检测结果显示该菌能检出kmt1、hgbA、pfhA、nanB、ptfA等毒力因子;药敏试验结果显示,GZZY2019对头孢他啶、丁胺卡那及氯霉素等6种药物耐药。

摘要： 为明确湖南某养殖基地中华倒刺鲃大量死亡的原因,本研究采用常规方法从患病中华倒刺鲃肝脏、肾脏和脾脏等组织及腹水中分离出一株优势菌AH32,并对其进行形态学、生理生化特性、16S rRNA基因测序鉴定;利用K-B法检测菌株AH32对30种药物的耐药性;利用PCR分析该菌的多位点序列分型及检测该菌携带的毒力基因;通过动物人工感染实验分析菌株致病性。结果显示,AH32株为革兰氏阴性短杆菌;生化鉴定结果显示,AH32株对葡萄糖、麦芽糖、七叶苷等反应均为阳性,对乳糖、尿素、蜜二糖等反应均为阴性;16S rRNA基因序列与嗜水气单胞菌ATCC7966的同源性为99.78%。综合菌株理化和分子特征,确定该分离菌为嗜水气单胞菌。多位点序列分型(MLST)分析表明,AH32株的序列型为ST251。药敏试验显示该分离菌对复方新诺明、氟苯尼考等19种抗菌药物敏感,对链霉素、呋喃唑酮、氨苄西林等11种抗菌药物中度敏感或耐药。经鉴定,该菌株的毒力基因型为alt+aer-aha+ahp+lip+ela+。人工感染试验结果显示,AH32株对中华倒刺鲃具有较强的致病性,人工感染实验鱼的临床症状与自然发病症状相同,且从实验中华倒刺鲃的肝脏、肾脏、脾脏和腹水中可重新分离到该嗜水气单胞菌。本研究首次报道了嗜水气单胞菌对中华倒刺鲃具有致病性,可选用恩诺沙星、氟苯尼考和多西环素防治该菌的感染,为中华倒刺鲃的病害防治和健康养殖提供参考依据。

摘要： 研究旨在鉴定引起犊牛呼吸系统疾病的细菌性病原,选择38份采集自阿克苏地区某规模化牛场病牛病料组织,进行细菌分离鉴定、16S rRNA基因鉴定、动物试验以及PCR扩增等。结果显示,分离株对营养要求很低,在麦康凯琼脂培养基上形成粉红色、边缘整齐、表面光滑湿润的菌落;在伊红美蓝琼脂上产生黑色带金属光泽的菌落;综合生化试验结果等确定分离株为肠外致病性大肠杆菌。将分离株注入小鼠体内,从死亡小鼠的肺脏和肝脏中可分离得到相同种类菌株。毒力扩增结果显示,分离株中毒力基因hlyF的携带率最高,为46.15%;ST、LT、Stx1、eae等4种毒力基因携带率为0;fimC、fyuA和ompC的携带率依次为38.46%、34.61%和11.53%。研究表明,阿克苏地区存在犊牛肺源致病性大肠杆菌,各规模化养殖牛场需引起重视。

摘要： 为了解草鱼Ctenopharyngodon idellus养殖过程中维氏气单胞菌Aeromonas veronii的流行季节及不同时期维氏气单胞菌毒力基因携带情况及防治方法,从福建省顺昌县某养殖场患病草鱼肝脏、肾脏、脾脏等组织分离得到7株致病菌进行研究。通过细菌分离培养、革兰氏染色镜检、生化鉴定、毒力基因、药敏试验、16S rRNA与gyrB基因测序对分离菌株进行分析。结果显示,从草鱼体内分离到的7株致病菌在培养基中呈圆形、表面湿润光滑、边缘整齐的淡黄色菌落;菌落周围呈β-溶血;革兰氏镜检呈阴性短杆菌;16S rRNA、gyrB基因序列分析结合生化鉴定及质谱鉴定,鉴定结果均为维氏气单胞菌;8种毒力基因扩增结果显示,分离菌株均携带Lip、Act、aerA、Alt、Exu及Fla 6种毒力基因;药敏试验结果显示,各菌株对8种抗菌药物敏感性一致,对盐酸土霉素、甲砜霉素、氟苯尼考、磺胺甲噁唑、磺胺二甲氧嘧啶、交沙霉素及恩诺沙星7种药物相对敏感,对氨苄西林钠、硫酸新霉素、磺胺嘧啶、磺胺间甲氧嘧啶、强力霉素及红霉素6种药物相对耐药。

摘要： 目的:了解厦门市水产品中副溶血性弧菌和溶藻弧菌的污染状况以及毒力基因携带情况。方法:采集厦门市售的3类210批鲜活水产品,进行副溶血性弧菌及溶藻弧菌检测分析,并采用多重荧光PCR的方法对分离得到的弧菌菌株进行毒力基因(tdh、trh、tlh)分析。结果:市售鲜活水产品的副溶血性弧菌及溶藻弧菌的总检出率分别为81.9%(172/210)、81.4%(171/210)。贝类水产品的副溶血性弧菌及溶藻弧菌检出率均最高,分别为84.4%(76/90)、90.0%(81/90);贝类水产品、海水鱼溶藻弧菌检测率均显著高于淡水鱼(P<0.05)。批发企业的弧菌污染程度最高,检出率分别是88.6%(39/44)、86.49%(38/44),批发企业的副溶血性弧菌检出率显著高于零售店(P<0.05)。从水产品中分离得到的172株副溶血性弧菌均不携带tdh基因,1.2%(2/172)菌株携带trh基因,所有菌株均携带tlh基因;171株溶藻弧菌均不携带tdh、trh基因,5.3%(9/171)菌株携带tlh基因。结论:厦门市售鲜活水产品副溶血性弧菌和溶藻弧菌的污染程度较高,部分菌株携带毒力基因,提示水产品中存在一定的食品安全风险。

摘要： 为了解不同环节禽源空肠弯曲杆菌携带状况及其耐药性与致病性,从肉鸡养殖环节和屠宰环节采集600份样品并分离到241株空肠弯曲杆菌,采用微量肉汤稀释法和PCR方法对分离菌株进行耐药性和毒力基因检测。结果显示:分离菌株对环丙沙星、萘啶酸、四环素的耐药情况尤为严重,耐药率分别为97.75%、96.78%、95.18%;养殖环节分离菌株耐药性比屠宰环节严重,分离菌株对环丙沙星、四环素的耐药率高达100%,对萘啶酸的耐药率为98.67%,对阿奇霉素、红霉素、泰利霉素的耐药率较屠宰环节菌株高约35.00%;分离菌株除未检测到VirBII基因且neuB基因携带率较低外,其他14种毒力基因携带率都较高,有11种毒力基因的携带率达90%以上。将分离菌株接种小白鼠进行致病性试验,发现菌株对小白鼠具有一定致病性。结果表明,禽源弯曲杆菌耐药严重且有一定致病力,应加强对该菌的研究和控制。

摘要： 为了解上海及周边地区猪源沙门氏菌的血清型分布、毒力基因及分子分型情况,我们对21株临床分离到的猪源沙门氏菌用沙门氏菌属诊断血清鉴定血清型;采用多重聚合酶链式反应,检测17个主要的毒力基因;应用脉冲场凝胶电泳(PFGE)技术进行分子分型,探寻21株沙门氏菌之间的亲缘关系.结果显示,21株沙门氏菌中,19株血清型为7∶c∶5,1株为4∶i∶2,1株未鉴定出;21株沙门氏菌的17个毒力基因中检出16个,菌株之间无差别;经PFGE后,每个菌株产生13到18条电泳条带,用Bionumerics软件进行聚类分析表明,21株猪源沙门菌相似度在77％～100％,可分为2种不同的基因型,其中A型有19株,B型2株,21株的亲缘关系较近.本次实验分离的沙门氏菌血清型以7:c∶5为主,含有16个主要的毒力基因,A型为优势基因型.

摘要： 目的：了解分离自动物源性食品沙门氏菌的血清型分布、耐药特性、毒力基因携带情况以及分子分型特征. 方法：对分离自动物源性食品的沙门氏菌进行血清凝集分型,通过脉冲场凝胶电泳技术对分离株进行基因分型,利用MIC法测定分离株的耐药性,并对分离株携带的毒力基因进行PCR扩增. 结果：39株分离自动物源性食品的沙门氏菌分属于5个群,9种血清型,优势血清型为肠炎沙门氏菌.经脉冲场凝胶电泳分型,按照80％相似度,39株沙门氏菌聚类为15个簇群.39株沙门氏菌中具有耐药性的菌株占69.23％,耐药率由高到低依次为氨苄西林(64.10％),萘啶酸(61.54％)、头孢唑啉(38.46％)、庆大霉素(28.21％)、四环素(28.21％)、氯霉素(20.51％)、环丙沙星(17.95％)、甲氧苄氨嘧啶/磺胺甲噁唑(17.95％)、头孢噻肟(17.95％)、头孢他啶(7.69％)和头孢西丁(7.69％).10种毒力基因的检出率由高到低依次为hilA(100％)、invH(100％)、sop B(100％)、sop E(100％)、stn(89.74％)、rhuM(84.62％)、spvB(66.67％)、spvC(66.67％)、sugR(53.85％)、pefA(38.46％). 结论：本地区食源性沙门氏菌分离株的血清型和基因型呈多样性分布,毒力基因携带率高,并且具有多重耐药的特点.

摘要： 细菌耐药已经成为全球公共卫生问题,给抗感染治疗带来了严峻挑战.MRSA是医院感染性疾病的重要致病菌,呈现多重耐药现象,经验用药和常规用药常常引起治疗失败.鉴于不同地区MRSA的耐药基因和毒力基因各不相同,本课题主要分析MRSA在山西的流行趋势,耐药基因与毒力基因型别,为临床合理用药,提高治愈率提供依据.

摘要： 为了研究秦皇岛地区鸡致病性大肠杆菌(Escherichia coli,E.coli)地方流行株的优势血清型、毒力基因和致病性,本研究采用常规的鉴定方法和16SrRNA PCR的方法,采集秦皇岛地区不同养鸡场83份病鸡的组织中分离鉴定出56株E.coli.人工感染1龄雏鸡试验表明:46株分离株为致病性E.coli.采用玻片凝集试验、PCR方法分别测定致病性E.coli分离株的血清型分布和16种毒力基因携带情况.结果表明:定型的42株致病性E.coli分离株包括11种血清型,以O78、O89、O142及O1为优势血清型;46株致病性E.coli分离株中以irp2、fuyA、ompT、Issa、iutA、iroN和hlyF毒力基因检出率较高,在89.1％～100％之间,其他毒力基因检出率为22％～72％.选择优势血清型代表株QH1(O78)、QH1(O89)、QH1(O142)和QH1(O1)人工感染1日龄雏鸡,计算半数致死量(LD50),确定其致病性.结果表明:QH1(O78)致病性最强,对1日龄的雏鸡的LD50为3.16×106CFU/mL,对14、49日龄雏鸡的LD50分别为1.07×107CFU/mL、5×108CFU/mL.本研究为秦皇岛地区鸡致病性E.coli地方流行株防控提供了实验依据.

摘要： 本实验室采集屠宰猪肺脏222份,屠宰猪扁桃体180份,采用血琼脂和PCR方法进行多杀性巴氏杆菌(P.multocida)的分离鉴定,结果分离到4株F型P.multocida.对分离的4株F型P.multocida进行毒力基因检测以及小鼠的致病性研究,结果发现4株菌均含有ptfA,pfhA、fimA、sodA、sodC、ompA、ompH、oma87、plpB、exbB、exbD、tonB、hgbB、Fur、nanH、hsf-1和hsf-2毒力基因,但tadD、toxA、hgbA、nanB、pmHAS、tbpA毒力基因均为阴性.将4株菌培养基同倍数稀释后,测得攻毒小鼠的剂量分别为4cfu/只、5cfu/只、11cfu/只和17cfu/只,可导致小鼠在60h内全部死亡,显示了这4株菌对小鼠有极强的致病力.病理切片显示,攻毒小鼠有明显的肺泡充血、脾淋巴细胞凋亡、肾小管和肾小球萎缩等病理变化.本实验首次在湖南地区分离到猪源荚膜血清F型P.multocida,并进行了较为详细的生物学特性研究,为国内P.multocida的流行情况和生猪多杀性巴氏杆菌病的防控补充了参考资料.

摘要： 本研究旨在分离鉴定来自北京某奶牛场死亡奶牛肺脏的1株疑似病原菌CVCC3982,并测定其致病性.通过分离培养获得疑似病原菌,采用Biolog鉴定系统和16S rDNA序列分析对其进行了鉴定,人工接种CD-1小鼠测定了其致病性,合成引物对其主要毒力基因进行了检测.结果泉示,该疑似病原菌为革兰氏阳性杆菌,俘溶血,Biolog鉴定结果泉示其为化脓隐秘杆菌,其16S rDNA序列与化脓隐秘杆菌模式菌株NCTC5224的同源性达100％,系统发育分析泉示其与化脓隐秘杆菌处于同一分支.腹腔注射该菌可致小鼠死亡.分离菌株基因组中含有溶血素(PLO)基因,神经氨酸酶H(NanH)基因,神经氨酸酶H(NanH)基因,菌毛基因(fimA,fimC和fimE),但缺失胶原结合蛋自(CbpA)基因和菌毛fimG基因.结果表明该分离菌株为化脓隐秘杆菌且具有致病性.

摘要： 副猪嗜血杆菌(H.parasuis)在通常情况下感染健康的猪,也是革拉泽氏病(Gl(a)sser's disease)主要致病原因.H.parasuis的致病性尚未研究透彻,猪草拉泽氏病(Gl(a)sser's disease)的预防与控制任然面临挑战.研究证明了外膜蛋白(OMP)、脂多糖(LPS)及多种基因与H.parasuis的致病性有关联.本试验的主要目的是为了筛选出有效的H.parasuis毒力因子抑制剂,为该病的预防和控制提供新的方向和理论基础.采用对H.parasuis进行分离鉴定和培养、提取RNA、Total RNA质量的检测、通过荧光定量PCR研究黄芩苷对H.parasuis的生长及潜在的毒力相关基因表达量的影响等实验方法.结果通过荧光定量PCR分析发现,黄芩苷对标准株H.parasuis毒力基因表达都有良好的抑制作用.能够有效抑制多种毒力基因的表达,通过抑制基因的表达,降低H.parasuis毒力.由此得出结论:黄芩苷对标准株H.parasuis毒力基因的表达有良好的抑制作用.

摘要： 沙门氏菌在世界范围内是引起肠道感染性疾病的重要病原菌,既能感染人类和动物,也能引起食源性疾病.猪是人感染沙门氏菌的一个重要来源,被沙门氏菌污染的猪肉产品可通过饮食感染人,也可通过直接接触使人感染.断奶仔猪正处于免疫力缺乏的时期,断奶与运输应激提高了病原菌在体内的定殖能力,此时仔猪极易感染沙门氏菌、产肠毒素大肠杆菌等条件致病菌.肠炎沙门氏菌亚种引起的疾病主要流行在发展中国家和地区,而且,沙门氏菌耐药菌株的产生对抗生素疗法产生了较严重的威胁.沙门氏菌血清型的复杂性,给检测及防治带来了较大困难.沙门氏菌感染会引起猪体温升高、呕吐、腹泻、自限性胃肠炎等临床症状,还能引起黏膜及黏膜下层充血、肠绒毛破损、大量炎性细胞和中性粒细胞浸润等肠道损伤性病理变化.沙门氏菌能够成功入侵并幸存于宿主细胞内与其毒力基因密切相关,不同的毒力基因发挥着不同的致病作用.研究分离鉴定了华北地区多个猪场腹泻仔猪肠内容物中的沙门氏菌,采用SC增菌液对沙门氏菌进行培养,能够抑制其他肠道菌的过度生长.用SS琼脂和XLD琼脂平板在温箱中培养18～24 h后,在SS琼脂和XLD琼脂平板上中央呈黑色的菌落可能为沙门氏菌,也可能为奇异变形杆菌,应仔细辨别.该研究还进行了毒力基因检测,对其致病力进行了初步分析.

摘要： 了解北京地区儿童金黄色葡萄球菌皮肤软组织感染(skin and soft tissue infections,SSTIs)临床分离株的分子学分型、相关毒力基因携带和耐药情况.

摘要： 本文主要分析MRSA在山西尤其山西大医院的流行趋势，耐药基因与毒力基因型别，为临床合理用药，提高治愈率提供依据。研究结果可以有效控制感染菌株流行，减缓耐药谱迅速扩大，对个体化用药和开发新裂扰生素具有重要意义。

摘要： 本发明为“人工合成的对鳞翅目害虫高毒力的mcry1Ba、mcry1Ia基因序列及基因组合”，属生物防治技术领域。本发明提供的两种对鳞翅目害虫具有高毒力的Bt cry1Ba基因和Btcry1Ia基因的人工优化、改造并合成的新的DNA序列(见序列表SEQ ID NO1和SEQ ID NO2)，以利用植物偏好的密码子序列，提高Bt cry1Ba基因和Bt cry1Ia基因在转基因过程中的转化成功率，同时提高在转基因植物中的表达量和稳定表达的特性，通过双基因的组合应用提高基因的杀虫活性。本发明利用组成型表达的启动子构建了新的植物表达载体，转化率高，表达量高且稳定，可用于转基因植物的研究。

摘要： 本发明公开了一种与布氏杆菌毒力相关的基因及其在布氏杆菌毒力评价及制备弱毒布氏杆菌中的应用。本发明首先利用蛋白结构域及3D结构预测鉴定到一种与布氏杆菌毒力相关的基因——abcS基因。利用RecA同源重组的方法，以卡那霉素抗性基因作为筛选标记替换abcS基因，构建了布氏杆菌abcS基因缺失株M28ΔabcS。荧光定量PCR试验表明，M28ΔabcS突变株中毒力因子四型分泌系统的表达严重下降。利用Balb/c小鼠持留感染模型评价了布氏杆菌abcS基因对布氏杆菌M28毒力的影响。结果显示：abcS基因缺失显著降低感染时脾脏的肿胀，同时严重影响细菌在小鼠脾脏内复制存活的能力，证实该基因是布氏杆菌M28的毒力相关基因。本发明的提出为布氏杆菌疫苗和药品的研发，提供了新的技术手段。

摘要： 本发明提供了一种基于抗性基因及毒力因子基因评价水体健康风险的方法，该方法基于宏基因组测序分析，通过对测序数据的组装和分箱，得到微生物基因组草图，从中识别出潜在的耐药性致病菌(PARB)，并评价样品中潜在PARB的丰度、多样性和风险等级，对PARB含有ARGs和VFGs的数量及类型进行评估，从而确定环境中潜在的PARB的量及健康风险水平。本发明方法基于宏基因组测序，能够在基因组层面上识别出潜在的PARB，且呈现出较高的可信度，避免了传统纯培养法耗时且易受培养条件影响的限制，能够广泛应用于水体健康风险评价。

摘要： 申请人已经鉴定了新的DON应答孤儿基因(ENST1‑SEQ ID NO：1)及其启动子，其具有DON应答元件，其可以用于驱动FHB抗性基因的表达。申请人已经分离了来自于小麦的基因的两个变体，其与ENST1具有约94％的同源性。申请人已经表明该基因具有大于62％核苷酸序列同一性的同源物，该基因存在于节节麦、二穗短柄草、草甸羊茅、大麦和小麦中。

摘要： 本发明为“人工合成的对鳞翅目害虫高毒力的mcry1Ba、mcry1Ia基因序列及基因组合”，属生物防治技术领域。本发明提供的两种对鳞翅目害虫具有高毒力的Bt cry1Ba基因和Btcry1Ia基因的人工优化、改造并合成的新的DNA序列(见序列表SEQ ID NO1和SEQ ID NO2)，以利用植物偏好的密码子序列，提高Bt cry1Ba基因和Bt cry1Ia基因在转基因过程中的转化成功率，同时提高在转基因植物中的表达量和稳定表达的特性，通过双基因的组合应用提高基因的杀虫活性。本发明利用组成型表达的启动子构建了新的植物表达载体，转化率高，表达量高且稳定，可用于转基因植物的研究。

摘要： 本发明公开了一种与布鲁氏菌毒力相关的基因及其在布鲁氏菌毒力评价以及制备弱毒布鲁氏菌中的应用。本发明利用同源重组的方法，以卡那霉素基因替换布鲁氏菌M28核糖体基因L31，构建了布鲁氏菌L31基因缺失株M28ΔL31。利用巨噬细胞RAW264.7和Babl/c小鼠模型评价了布鲁氏菌L31基因对布鲁氏菌M28毒力的影响。结果显示：L31基因缺失后并不会对M28的生长产生影响，但能显著下调强毒株M28在鼠巨噬细胞系RAW264.7和小鼠脾脏内复制生存的能力，M28ΔL31中将L31基因回补后其毒力能够恢复到野生株水平，证实该基因是布鲁氏菌M28的毒力相关基因。本发明的提出预示该毒力基因可能用于布鲁氏菌新疫苗的研发，具有潜在的应用价值。

摘要： 本发明公开了一种基于宏基因组的临床重要致病菌毒力基因检测的方法和系统。该方法包括：S10，建立临床致病菌毒力基因数据库；S20，获取临床样本宏基因组测序原始数据，对其预处理获得目标数据；S30，利用预设宏基因组测序数据多重比对注释系统分析目标数据，鉴定毒力基因；S40，建立重要毒力基因‑毒力因子‑表征(功能/临床表型)关联数据库；S50，利用预设临床自动化报告系统，基于毒力基因鉴定结果和关联数据库，生成毒力基因鉴定报告。该系统能够对不同类型(脑脊液等)的临床感染样本的宏基因组测序数据进行毒力基因鉴定，一次性鉴定样本中多种病原菌的多个重要毒力基因，具有较好的灵敏性和准确性，帮助医生及时进行诊断、治疗和预后。

摘要： 本发明公开了一种与布鲁氏菌毒力相关的基因及其在布鲁氏菌毒力评价以及制备弱毒布鲁氏菌中的应用。本发明利用同源重组的方法，以卡那霉素基因替换布鲁氏菌M28核糖体基因L31，构建了布鲁氏菌L31基因缺失株M28ΔL31。利用巨噬细胞RAW264.7和Babl/c小鼠模型评价了布鲁氏菌L31基因对布鲁氏菌M28毒力的影响。结果显示：L31基因缺失后并不会对M28的生长产生影响，但能显著下调强毒株M28在鼠巨噬细胞系RAW264.7和小鼠脾脏内复制生存的能力，M28ΔL31中将L31基因回补后其毒力能够恢复到野生株水平，证实该基因是布鲁氏菌M28的毒力相关基因。本发明的提出预示该毒力基因可能用于布鲁氏菌新疫苗的研发，具有潜在的应用价值。

摘要： 本发明提供了同时检测幽门螺旋杆菌耐药位点、毒力基因分型及质子泵抑制剂代谢基因分型的试剂盒，具体的本发明基于多重PCR‑飞行时间质谱检测6种常用的幽门螺杆菌抗生素的16个耐药基因位点变异、2种毒力基因5个位点、及2种质子泵药物代谢基因的3个位点，并提供了配套引物、探针组合及试剂盒。

摘要： 本发明公开了一种基于宏基因组的临床重要致病菌毒力基因检测的方法和系统。该方法包括：S10，建立临床致病菌毒力基因数据库；S20，获取临床样本宏基因组测序原始数据，对其预处理获得目标数据；S30，利用预设宏基因组测序数据多重比对注释系统分析目标数据，鉴定毒力基因；S40，建立重要毒力基因‑毒力因子‑表征(功能/临床表型)关联数据库；S50，利用预设临床自动化报告系统，基于毒力基因鉴定结果和关联数据库，生成毒力基因鉴定报告。该系统能够对不同类型(脑脊液等)的临床感染样本的宏基因组测序数据进行毒力基因鉴定，一次性鉴定样本中多种病原菌的多个重要毒力基因，具有较好的灵敏性和准确性，帮助医生及时进行诊断、治疗和预后。