谷胱甘肽转移酶

摘要： 以绿豆为材料,运用生物信息学、转录组学和酶学等分析方法,对绿豆GST家族基因结构及其表达蛋白的特征进行分析,并检测镉(Cd)胁迫下GST基因表达谱和酶活性变化。结果表明,绿豆基因组中包含有93个GST基因,分为Tau、Phi、Lambda、Theta、Zeta、DHAR、EF1Bg、GHRs、mPGES2和TCHQD等10类,以Phi和Tau类基因数最多;不同类基因结构存在较大差异,Tau类和TCHQD类含有2个外显子,Phi类和GHRs类分别含3和5个外显子,其余基因外显子数目在6~10个。其中只有40个基因在绿豆中表达,31个基因在根、茎、叶中都有表达,6个基因选择性表达。Cd胁迫上调大多数基因的表达量,根、茎、叶中被显著上调的GST基因分别为10、8和4个,平均上调倍数为2.17、2.25和3.26;Cd胁迫显著升高根和茎中GST酶活分别达2.14和1.27倍,与基因表达量的变化一致。表明绿豆根中GST基因及其酶活在Cd胁迫响应中起最主要作用。研究结果为植物GST基因的进一步研究和在植物抗逆中生物技术应用提供了科学资料。

摘要： 目的:探讨蟛蜞菊水煎液对慢性阻塞性肺疾病(COPD)模型大鼠血清、肺组织、清肿瘤坏死因子α(TNF-α)、白细胞介素8(IL-8)、白细胞介素6(IL-6)、超氧化物歧化酶(SOD)、谷胱甘肽转移酶(GSH-Px)含量的影响。方法:雄性SD大鼠分为5组:空白组(n=7)、模型组(n=7)、蟛蜞菊高剂量组(6.3 g/kg,n=7)、蟛蜞菊中剂量组(3.15 g/kg,n=6)、蟛蜞菊低剂量组(1.575 g/kg,n=7);采用脂多糖(LPS)气管滴注联合烟熏制备COPD大鼠模型,历时11周。造模第8周开始干预,直至造模结束,共4周;干预结束取材,苏榛-伊红(HE)染色观察气管、肺组织病理形态变化,检测肺组织、TNF-α、IL-6、IL-8含量,SOD、GSH-Px活力。结果:与模型组大鼠比较,蟛蜞菊各剂量组大鼠气管黏膜结构破坏及肺气肿病变程度明显改善,肺组织、血清中高水平的IL-6、IL-8、TNF-α均不同程度降低;SOD、GSH-Px活力不同程度升高。其中,蟛蜞菊高剂量组大鼠降低肺组织、血清TNF-α、IL-6、IL-8效果最显著,蟛蜞菊中剂量组提高SOD、GSH-Px活力效果最显著,与模型组大鼠比较,差异均有统计学意义(P<0.01)。结论:蟛蜞菊水煎液能够改善COPD模型大鼠肺气肿样病变,其机理可能与抗炎、提高抗氧化酶活力有关。

摘要： 谷胱甘肽转移酶(谷胱甘肽硫转移酶)(GSTs)是一类广泛分布于微生物、植物、昆虫、鱼以及哺乳动物,在诸多生物学过程中发挥重要作用的蛋白超家族,具有解毒和清除过氧化物双重功能.近年来,国内外研究人员进一步对GST在生物化学、结构生物学、分子生物学、进化生物学以及基因组学等层面进行了大量的分析和研究.本文将针对有关GST的研究展开综述,以期为深入开展哺乳动物GST基因适应和进化研究提供借鉴.

摘要： 目的 探讨谷胱甘肽硫转移酶M1(GSTM1)和谷胱甘肽硫转移酶M2(GSTM2)在甲状腺滤泡癌(FTC)中的表达及其临床意义.方法 收集基因表达综合(GEO)数据库中甲状腺滤泡性肿瘤基因芯片GSE82208数据,共52例样本,包括FTC 27例,甲状腺滤泡性腺瘤(FA)25例.提取基因矩阵数据并整理,利用R语言Limma包筛选出FTC和FA间差异表达基因.收集2000年1月至2020年12月辽宁省丹东市第一医院手术切除的FTC及FA标本各56例.采用免疫组织化学SABC法检测FTC和FA标本中GSTM1、GSTM2蛋白的表达水平,分析二者与FTC患者临床病理因素间的关系及二者间的相互关系.结果 基于GEO数据库数据,共获得40个FTC和FA间差异表达基因;其中FTC中表达上调9个,分别为GSTM1、GSTM2、COL6A2、CUX2、CLUH、TSC2、OGDHL、ACADVL、SDHA;表达下调31个.免疫组织化学法检测显示,在手术切除FTC标本中,GSTM1、GSTM2阳性率分别为71.4％(40/56)、80.4％(45/56),在FA中阳性率分别为23.2％(13/56)、14.3％(8/56),差异均有统计学意义(x2值分别为26.11、49.03,均P＜ 0.01).FTC中GSTM1和GSTM2蛋白表达与临床分期、浸润程度及远处转移均有关(均P＜0.05),与性别、年龄和肿瘤长径均无关(均P＞ 0.05).FTC中GSTM1和GSTM2表达呈正相关(r=0.384,P=0.004).结论 FTC中GSTM1和GSTM2表达水平升高,二者可能相互作用,参与FTC的发生、发展.

摘要： 基于Ag-Au球形纳米笼具有类似过氧化物酶的活性,建立了一种比色检测GSH和GST的方法.Ag-Au纳米笼催化TMB和H_(2)O_(2)反应,652 nm处观察到清晰的紫外吸收峰,溶液从无色(TMB)变为蓝色(oxTMB).当GSH存在时,oxTMB被GSH还原成TMB,652 nm处吸光度降低,颜色由蓝色变浅.当GST存在时,GST特异性结合GSH,有效地抑制oxTMB被GSH还原,导致652 nm处的吸光度增大,溶液颜色由无色变为蓝色.在最佳反应条件下,GSH和GST的检测线性范围分别为0.5~1.0μmol/L(R^(2)=0.986)和1~50 mg/L(R^(2)=0.999).该方法具有较好的选择性,将该方法用于实际血清样品中GSH和GST的检测,得到了满意的结果.

摘要： 植物谷胱甘肽转移酶(GSTs)在正常生长条件下的细胞代谢以及由于重金属胁迫所带来的解毒过程中,都发挥着重要作用.为了进一步研究BvGST基因在能源甜菜镉逆境胁迫中的功能,本研究利用RT-PCR的方法,从能源甜菜体内克隆获得了Beta vulgaris glutathione S-transferase(BvGST,LOC104898671)基因.利用酵母表达载体构建pYES2-BvGST重组质粒,并转化到酵母InVSc1中.SqRT-PCR结果表明,与内参基因ACT1相比,BvGST基因可以受到半乳糖的诱导从而适量表达.当施加0.5 mmol/L CdCl2逆境胁迫后,适量表达BvGST重组菌的生长状态和趋势要明显优于对照菌株(转化pYES2的酵母),并具有相对更高的Cd耐受性.因此可以推断,能源甜菜BvGST基因在镉逆境胁迫过程中发挥着重要的作用,并有可能通过GST介导的氧化逆境的活性解毒,从而参与到细胞对重金属镉离子的代谢平衡调控过程中.

摘要： 目的 探讨微小RNA?25?3p(miR?25?3p)靶向甘油磷酸二酯酶磷酸结构域5(GDPD5)对乳腺癌细胞顺铂耐药性的影响及分子机制.方法 本研究起止时间为2018年10月至2019年6月,人乳腺癌细胞MCF?7和乳腺癌顺铂耐药细胞MCF?7/DDP购于中国科学院上海细胞研究所,采用实时荧光定量PCR(qRT?PCR)和蛋白质印迹法(Western blot)检测正常乳腺癌细胞MCF?7和乳腺癌顺铂耐药细胞MCF?7/DDP中miR?25?3p、GDPD5和谷胱甘肽巯基转移酶π(GST-π)的表达水平.四甲基偶氮唑盐比色(MTT)法检测过表达miR?25?3p或过表达miR?25?3p联合顺铂对MCF?7/DDP细胞的增殖抑制作用,蛋白质印迹法检测GDPD5、GST?π和细胞周期蛋白D1(Cyclin D1)蛋白的表达水平.双荧光素酶报告基因实验和蛋白质印迹法验证miR?25?3p和GDPD5的靶向关系.结果 与MCF?7细胞相比,MCF?7/DDP细胞中miR?25?3p的表达显著下调,GDPD5和GST?π的表达显著上调.过表达miR?25?3p后,MCF?7/DDP细胞存活率显著降低[(50.36±5.04)％比(100.00±10.11)％],CyclinD1相对表达水平降低(0.40±0.05)比(1.12±0.11),GST?π表达水平降低(0.35±0.04)比(1.15±0.12);且过表达miR?25?3p可降低MCF?7/DDP细胞的顺铂耐药性.miR?25?3p可靶向负性调控GDPD5的表达.过表达GDPD5可部分逆转miR?25?3p对MCF?7/DDP细胞增殖和顺铂耐药性的影响.结论 miR?25?3p通过靶向下调GDPD5抑制MCF?7/DDP细胞存活,进而降低MCF?7/DDP细胞对顺铂的耐药性.

摘要： 目的探讨谷胱甘肽硫转移酶M1(glutathione S-transferase M1,GSTM1)基因多态性与中国人群头颈恶性肿瘤易感性的关系。方法计算机检索Web of Science、Pubmed、Embase、CNKI、VIP和万方等中英文数据库,检索时限从建库截至2018年12月,由两名耳鼻咽喉头颈外科专业研究生按照纳入排除标准严格筛选文献并提取资料,采用NOS量表评价纳入研究文献的质量,应用Stata 12.0软件进行Meta分析,采用优势比(odds ratio,OR)及95%可信区间(95%confidence interval,95%CI)描述关联强度,并按照肿瘤部位、地区及对照来源进行亚组分析。结果纳入文献21篇,其中包含3735例病例组和4995对照组,Meta分析结果显示:GSTM1无效基因型与中国人群头颈恶性肿瘤发病风险增加具有相关性(OR=1.78,95%CI:1.47-2.16);亚组分析表明,GSTM1无效基因型可能增加中国大陆人群头颈恶性肿瘤的发病风险(OR=2.02,95%CI:1.68-2.43),尤其是鼻咽癌(OR=1.53,95%CI=1.32-1.78)和喉癌(OR=2.56,95%CI=1.82-3.59),且在医院为基础的病例对照研究(OR=2.48,95%CI=1.56-3.96)和社区为基础的病例对照研究(OR=1.68,95%CI=1.32-2.15)中均有统计学意义。结论在中国人群中GSTM1基因多态性与头颈恶性肿瘤易感性相关联。

摘要： 本研究从已构建的云南野生黄牡丹花瓣转录组数据库中得到了10个与花青素苷转运相关的谷胱甘肽转移酶(GST)蛋白同源性高的Unigene序列,分别命名为PlGST1～10.利用RT-PCR和RACE技术对PlGST1～10最大阅读框(ORF)序列扩增并进行氨基酸序列比较和系统进化树分析,结果显示PlGST5可能与花青素苷转运相关,包含一个675bp的开放阅读框,编码一个224个氨基酸的蛋白,含有2个内含子和3个外显子,属于phi型GST;其氨基酸序列与葡萄VvGST4、矮牵牛PhAn19、仙客来CkmGST3、拟南芥AtTT19、瓜叶菊ScGST3和香石竹DcGSTF2等花青素苷转运GST具有较高的相似性.PlGST5在不同花色的花发育时期及盛开期的不同组织的qRT-PCR分析表明PlGST5在含有花青素苷积累较多的组织中高丰度表达,在黄牡丹和紫牡丹的盛开期表达量最高,而在'赵粉'和'玉板白'的花发育早期表达量最高.本研究推测PlGST5参与黄牡丹花青素苷转运,为今后深入探讨黄牡丹花色形成机制奠定理论基础.

摘要： 活性氮导致肝脏微粒体谷胱甘肽转移酶1(MGST1)修饰激活是近年来研究热点之一,由于其半胱氨酸 (Cys49) 可感受亲电子剂等而被修饰,担任"感受器"角色,行使对机体的保护作用。以过氧亚硝酸盐和S-亚硝基谷胱甘肽为代表的活性氮,可引起MGST1的酪氨酸(Tyr92)和Cys49发生若干种修饰,包括硝基化、S-亚硝酰化、谷胱甘肽化、巯基氧化等,均可介导酶激活,其中Tyr92的硝基化修饰可望揭示MGST1的"第二个感受器",与机体对硝基化应激的保护机制相关.

摘要： 通过人工污染土壤的方法,设计芘的暴露浓度为0、60、120、240、480、960 μg·kg-1.暴露实验进行1、3、7和14 d后,分别检测蚯蚓内脏中细胞色素P450含量、谷胱甘肽转移酶(GST)、超氧化物歧化酶(SOD)、过氧化物酶(POD)、过氧化氢酶(CAT)活性和丙二醛(MDA)含量.结果表明,在供试浓度范围内,蚯蚓内脏中各生化指标对污染物暴露指示的敏感性存在差异:其中P450含量、GST和SOD活性最为敏感;POD和CAT活性次之;而MDA含量未对低剂量的芘暴露起到明显的指示作用.研究同时发现,低剂量污染物暴露的时间效应要强于剂量效应的影响.因而,在进行生态毒性诊断时,采用多指标和多时段的检测对增强指示的灵敏性和有效性尤为重要.

摘要： 本文对谷胱甘肽-S-转移酶同源基因其中的一个GST新基因进行了EST分析和克隆，结果表明该基因编码区全长663bp.以该基因推导的氨基酸序列与其他物种的GSTs进行相似性比较和系统发育分析，发现此基因为delta家族的成员，并命名为BmGSTd3.RT-PCR结果表明，BmGSTd3基因在家蚕五龄第三天的8个组织中都有表达，中肠和表皮的表达丰度较高.并且在辛硫磷处理家蚕后的72h内，BmGSTd3基因的转录水平在分析的各个时间段都有轻度的上调.对BmGSTd3基因的5'侧翼区的调控序列进行了预测，共发现了8个可能的转录调控元件.据此推测，BmGSTd3基因在辛硫磷应激中的转录上调可能与5'侧翼区的转录调控元件有关.

摘要： 利用模式生物拟南芥作为实验材料,通过测定谷胱甘肽-抗坏血酸代谢相关酶(GST、GPX、APX、GR、DHAR、MDHAR)的活性和GSH、ASA、MDA含量以及生物量等来研究过量表达具有过氧化物酶活性的盐地碱蓬谷胱甘肽转移酶基因(GST基因)对盐胁迫下转基因拟南芥氧化损伤的影响.结果显示,转基因拟南芥比野生型具有较高的GST、GPX以及MDHAR酶活性;前者还具有较多的还原型谷胱甘肽和抗坏血酸,并且谷胱甘肽库氧化水平较野生型高.盐胁迫不但部分抑制了野生型拟南芥的生长,同时也导致了大量脂质过氧化物的积累;而盐胁迫对转基因拟南芥的生长抑制不明显,也没有较多的脂质过氧化物的积累.结果表明,过量表达盐地碱蓬谷胱甘肽转移酶基因提高了转基因拟南芥依赖于还原型谷胱甘肽的过氧化物清除途径,同时有可能改变了GSH和ASA的代谢途径,这两方面的作用导致了转基因拟南芥氧化损伤的降低,使转基因拟南芥在盐胁迫下保持较好的生长态势。

摘要： 万寿菊粗提物在0.02g/ml剂量时对朱砂叶螨、烟粉虱体内的GSTs起一诱导的作用;在0.04g/ml剂量时对朱砂叶螨体内的GSTs有一抑制作用,而对烟粉虱的抑制作用不明显.在0.02~0.08g/ml的剂量下,万寿菊粗提物对朱砂叶螨体内GSTs的影响要敏感于烟粉虱.

摘要： 按窝组法将实验小鼠分为对照组,乙醇组,醒酒发酵乳饮料+乙醇组,醒酒发酵乳饮料组四组.通过测定不同组小鼠肝/体重百分比及肝匀浆提取液中醇脱氢酶(ADH)、谷胱甘肽转移酶(GST)和SOD酶的活性,探讨了该醒酒发酵乳饮料的醒酒机理.结果表明,摄入乙醇前灌给该醒酒发酵乳饮料能增强小鼠脏脏中ADH、GST和SOD酶的活性,促进乙醇在体内的代谢,具有一定的保肝作用.

摘要： 本发明公开了一种酶活提高的谷胱甘肽S‑转移酶突变体及其应用。谷胱甘肽‑S‑转移酶的突变体SlGST T1K228A,R230A，其氨基酸序列如SEQ ID NO.3所示。本发明通过定点突变将第228位的赖氨酸(Lys)和第230位的精氨酸(Arg)突变成丙氨酸(Ala)，获得谷胱甘肽S‑转移酶的突变体SlGST T1K228A,R230A，通过原核表达和蛋白纯化得到谷胱甘肽S‑转移酶及其突变体SlGST T1K228A,R230A蛋白，通过酶活检测发现，突变体SlGST T1K228A,R230A酶活性明显提高。本发明可以为生物化学及分子生物学方面针对谷胱甘肽S‑转移酶的进一步研究提供技术参考。

摘要： 本发明公开了一种人谷胱甘肽-S-转移酶Pi的纯化方法，其方法步骤为：(1)将含表达载体pET-28a/hGSTpi的E.coli BL21/DE3菌株接种于LB固体培养基，振荡培养，离心收集菌体；(2)按每g菌体沉淀加入PH7.9的结合缓冲液重悬收集菌体沉淀，经超声破碎、离心后取上清液，用缓冲液洗脱；(3)将洗脱上清用透析液1透析去咪唑，再用透析液2透析测定酶活性；(4)用PBS缓冲液透析，用凝血酶水解切割His6标签，获得人谷胱甘肽-S-转移酶hGSTpi。本发明方法纯化得到的hGSTpi重组蛋白纯度高，且空气氧化形成的无活性二聚体少，hGSTpi在炎症治疗中的应用，不仅能有效控制炎症，而且对机体免疫系统的影响小，副作用极小。

摘要： 本发明涉及铜纳米簇合成技术领域，尤其涉及一种谷胱甘肽硫转移酶保护铜纳米簇的制备方法及其在金霉素检测中的应用，具体步骤如下：以谷胱甘肽硫转移酶为模板，在特定的pH条件下制备谷胱甘肽硫转移酶‑铜纳米簇原液，进一步进行透析纯化。在325nm激发波长下，铜纳米簇呈现蓝色荧光，在400nm处有发射峰；以硫酸奎宁为标准参照物，谷胱甘肽硫转移酶‑铜纳米簇的相对量子产率为1.36％；铜纳米簇作为一种有效的环境友好型荧光探针可用于检测溶液中的金霉素(CTC)。本发明的荧光铜纳米簇具有独特的光物理特性、价格低廉、几乎无毒且具有优异的生物相容性，检测金霉素方法快速简单、检测灵敏度好，是应用于生物和医学领域的理想荧光纳米材料。

摘要： 本发明公开了一种酶活提高的谷胱甘肽S‑转移酶突变体及其应用。谷胱甘肽‑S‑转移酶的突变体SlGST T1K228A,R230A，其氨基酸序列如SEQ ID NO.3所示。本发明通过定点突变将第228位的赖氨酸(Lys)和第230位的精氨酸(Arg)突变成丙氨酸(Ala)，获得谷胱甘肽S‑转移酶的突变体SlGST T1K228A,R230A，通过原核表达和蛋白纯化得到谷胱甘肽S‑转移酶及其突变体SlGST T1K228A,R230A蛋白，通过酶活检测发现，突变体SlGST T1K228A,R230A酶活性明显提高。本发明可以为生物化学及分子生物学方面针对谷胱甘肽S‑转移酶的进一步研究提供技术参考。

摘要： 本发明公开了一种谷胱甘肽巯基转移酶作为防治AFB1致鸭肝脏损伤解毒酶的应用，本发明对鸭GSTs酶家族中10种GST进行了试验，筛选出了有解毒效果的GST和GST3，提供了GST和GST3作为防治AFB1致动物肝脏损伤靶标酶的应用。本发明的谷胱甘肽巯基转移酶(GST或GST3)能有效抑制或缓解AFB1诱导的雏鸭肝脏毒性作用，主要与其能够催化AFBO生成无毒的AFBO‑GSH的代谢有关。本发明的GST和GST3可以作为治疗AFB1致鸭肝脏损伤药物及新型饲料添加剂开发提供新的的靶标基因。

摘要： 本发明涉及作为谷胱甘肽－S－转移酶(GST)和NADPH醌氧化还原酶(NQO)的诱导物的5－亚氨基－5H－[1，2，4]－二噻唑－3－基－胺和[1，2，4]－二噻唑烷－3，5－二亚基－二胺衍生物，制备这些化合物的方法，和用于合成所述的[1，2，4]－二噻唑啉(烷)衍生物的新中间体。本发明还涉及本文公开的化合物在生产用于治疗和预防与一般的细胞毒性尤其是细胞凋亡有关的有害状况的药物中的应用。本发明涉及通式(I)的化合物，其中各符号具有说明书中给出的含义。

摘要： 本发明公开了一种人谷胱甘肽－S－转移酶Pi的纯化方法，其方法步骤为：(1)将含表达载体pET－28a/hGSTpi的E.coli BL21/DE3菌株接种于LB固体培养基，振荡培养，离心收集菌体；(2)按每g菌体沉淀加入pH7.9的结合缓冲液重悬收集菌体沉淀，经超声破碎、离心后取上清液，用缓冲液洗脱；(3)将洗脱上清用透析液1透析去咪唑，再用透析液2透析测定酶活性；(4)用PBS缓冲液透析，用凝血酶水解切割His6标签，获得人谷胱甘肽－S－转移酶hGSTpi。本发明方法纯化得到的hGSTpi重组蛋白纯度高，且空气氧化形成的无活性二聚体少，hGSTpi在炎症治疗中的应用，不仅能有效控制炎症，而且对机体免疫系统的影响小，副作用极小。

摘要： 本发明涉及金铂纳米簇合成技术领域，尤其涉及一种谷胱甘肽硫转移酶‑金铂纳米簇的制备方法及其在金霉素检测中的应用，具体步骤如下：以谷胱甘肽硫转移酶为模板，在特定的pH条件下制备谷胱甘肽硫转移酶‑金铂纳米簇原液，进一步进行透析纯化。在375nm激发波长下，金铂纳米簇呈现红色荧光，在470nm和656nm处分别有两个发射峰；金铂纳米簇作为一种有效的环境友好型比率荧光探针可用于检测溶液中的金霉素(CTC)。本发明的金铂纳米簇具有独特的光物理特性、几乎无毒和优异的生物相容性，检测金霉素快速简单、检测灵敏度好，是应用于生物和医学领域的理想荧光纳米材料。

摘要： 本发明属于分子育种技术领域，公开了一种谷胱甘肽S转移酶基因MiGST1在提高芒果维生素C含量中的应用。所述基因MiGST1的核苷酸序列如SEQIDNO：1所示。本发明通过QTL定位、基因注释和代谢合成途径分析表明，编码谷胱甘肽S转移酶(GST)的MiGST1基因为抗坏血酸生物合成相关基因，MiGST1可以显著提高芒果果实抗坏血酸含量。GST酶活性检测表明，抗坏血酸含量随着谷胱甘肽S转移酶活性的增强而增加。通过分析谷胱甘肽S转移酶活性、基因表达和基因结构进一步验证了结果。这些发现阐明芒果中抗坏血酸的复杂调控机制。

摘要： 本发明公开了一种人溶菌酶-谷胱甘肽转移酶融合蛋白、表达载体及其应用。所述融合蛋白的碱基序列如SEQ ID No.3所示，其编码的蛋白质的氨基酸序列如SEQ ID No.4所示。试验表明，所述融合蛋白具有较好的抑菌性，可以作为添加剂应用于动物饲料中。