羧酸酯酶

摘要： 为明确工业大麻秸秆乙醇提取物抑制大豆胞囊线虫的作用机理,采用浸泡法研究其对大豆胞囊线虫体内的总糖、甘油和蛋白质含量以及解毒酶活性等生理生化指标的影响,结果表明:二龄幼虫虫体内总糖含量和甘油含量随乙醇提取物处理时间的延长呈上升趋势,处理24 h时分别较对照升高了96.2%和33.5%,达极显著差异;可溶性蛋白含量随处理时间的延长逐渐下降,处理24 h时,比对照降低了26.3%,差异达到极显著水平。乙酰胆碱酯酶活性、羧酸酯酶活性、谷胱甘肽S-转移酶活性随处理时间的延长均逐渐下降,处理24 h时,三种酶活性较对照降低了61.1%、51.3%和45.4%,差异极显著。工业大麻秸秆乙醇提取物可导致线虫体内糖代谢出现紊乱,降低线虫的抗逆能力,并削弱了线虫对毒害物质的降解能力,这些可能是线虫死亡的原因。本研究为工业大麻防治大豆胞囊线虫病奠定理论基础。

摘要： 【目的】探究星豹蛛Pardosa astrigera羧酸酯酶基因PaCarE1-4是否与其代谢溴氰菊酯有关。【方法】采用RT-PCR技术克隆星豹蛛4个羧酸酯酶基因PaCarE1-4 cDNA序列,通过生物信息学软件分析其序列特性。采用RT-qPCR技术测定这4个羧酸酯酶基因在星豹蛛雌雄成蛛不同组织(头胸部、腹部和足)以及在不同浓度(LC_(10)=5.151 mg/L;LC_(30)=8.619 mg/L;LC_(50)=12.311 mg/L)溴氰菊酯胁迫12 h和LC_(30)浓度溴氰菊酯胁迫2,4,8,12,24和48 h雄成蛛中的相对表达水平。【结果】克隆获得星豹蛛羧酸酯酶基因PaCarE1-4(GenBank登录号分别为MZ643212,MZ643214,MZ643215和MZ643216)的全长cDNA序列,开放阅读框(ORF)分别长1653,1803,1827和1818 bp,分别编码550,600,608和605个氨基酸。组织表达谱结果表明,PaCarE1和PaCarE2在星豹蛛雌雄成蛛腹部中的表达量最高,且在雄成蛛腹部中的表达量高于雌成蛛中的;PaCarE3和PaCarE4在雌雄成蛛头胸部中的表达量最高,且PaCarE3在雌成蛛头胸部中的表达量高于雄成蛛中的,PaCarE4在雄成蛛头胸部中的表达量高于雌成蛛中的。LC_(30)浓度溴氰菊酯胁迫12 h诱导了星豹蛛雄成蛛中PaCarE1的表达,LC_(10)和LC_(30)浓度溴氰菊酯胁迫12 h诱导了PaCarE2的表达。LC_(30)浓度溴氰菊酯胁迫不同时间后,与对照组(丙酮处理组)相比,星豹蛛雄成蛛中PaCarE4的表达量与对照组均无显著差异,而PaCarE1的表达量在处理后2,8和12 h,PaCarE2的表达量在处理后12 h,以及PaCarE3的表达量在处理后24 h显著上调。【结论】羧酸酯酶基因PaCarE1,PaCarE2和PaCarE3可以被溴氰菊酯诱导表达,表明其可能参与星豹蛛对溴氰菊酯的代谢过程。本研究结果有助于了解星豹蛛对外源物质的代谢机理,为这一捕食性天敌的保护提供了新思路。

摘要： [目的]深入预测CCE001a蛋白结构与生物学功能。[方法]使用生物信息学方法预测CCE001a基因所编码的蛋白质,预测其功能与结构。[结果]该蛋白的总氨基酸残基数为556个,分子式为C 2865 H 4321 N 737 O 811 S 23,蛋白的等电点pI为5.32,带正电的氨基酸残基(Arg+Lys)为58个,带负电的氨基酸残基(Asp+Glu)为75个,蛋白不稳定系数为35.22,脂肪系数为75.91,总平均亲水性系数为-0.262;CCE001a蛋白有一个脱氢酶超家族(cl21494)结构域;经分析显示,α-螺旋、无规律的卷曲是这种蛋白质的主要二次结构,分别占31.35%和46.49%,还包括3.96%的β-转角和18.20%的扩展延伸链。经过三级结构学预测表明,该蛋白包括α-螺旋、β-转角;该蛋白亚细胞被确认为定位在内质网内,存在着信号肽的序列,初步可以认为是具有分泌力的亲水蛋白,且没有出现跨膜蛋白,共有37个磷酸化位点,1个N-糖基化位点。[结论]该研究可为研究CCE001a的解毒机制提供理论基础。

摘要： 目的 研究白细胞介素(IL)-33对RAW264.7巨噬细胞羧酸酯酶(CESs)的作用和细胞极化状态的影响。方法 以不同浓度IL-33刺激RAW264.7细胞,通过Western blotting检测CESs的蛋白表达,CCK-8检测CESs活性变化,油红O检测细胞脂质沉积。检测M1型巨噬细胞标志物诱导型一氧化氮合酶iNOS、IL-1β、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)和M2型巨噬细胞标志物CD206、IL-10等的表达,评价其极化状态。结果 IL-33剂量依赖性地显著下调巨噬细胞CES1的蛋白表达水平,且对CES1和CES2的代谢活性均产生抑制作用(P<0.05);IL-33干预后,巨噬细胞中三酰甘油(TG)、总胆固醇(TC)及低密度脂蛋白胆固醇(LDL-C)等出现不同程度升高(P<0.05)。IL-33刺激后,RAW264.7小鼠巨噬细胞的CD206蛋白表达显著增多,而iNOS的蛋白表达无明显变化。结论 IL-33刺激后促进巨噬细胞向M2型转化,显著抑制RAW264.7巨噬细胞中CES1的表达及活性,增加巨噬细胞脂质沉积。

摘要： 目的将茶树油制备成微囊乳液,评价其对水蛭的驱避效果并阐明驱避机理。方法以吐温20作为增溶剂制备茶树油水溶液。司盘80作为乳化剂制备得茶树油乳液,以明胶、海藻酸钠作为囊材,采用复凝聚法制备茶树油微囊,对微囊的粒径、形貌及结合方式等进行表征。将微囊分散到茶树油乳液中即得茶树油微囊乳液。采用滤纸圈法、水中驱避试验考察比较茶树油微囊乳液、茶树油水溶液、空白微囊及阳性药物驱蚊酯对日本医蛭在不同环境中的驱避作用及茶树油微囊乳液的驱避时长。以体内乙酰胆碱酯酶(AchE)、谷胱甘肽S转移酶(GST)和羧酸酯酶(CarE)活性变化为指标,阐明茶树油微囊乳液对水蛭的驱避机理。结果优化得到复凝聚产率较高的明胶与海藻酸钠最佳配比处方,成功制备粒径分布不均一、包封率较高的微囊。根据正交设计筛选出最优处方,制备得分散均匀、稳定均一茶树油微囊乳液。药效学实验表明其驱避时间长、驱避效率高。茶树油微囊乳液通过提高水蛭体内AchE活性、抑制GST及CarE活性发挥驱避作用。结论茶树油微囊乳液可避免茶树油挥发,延长驱避水蛭的有效作用时间,为天然精油作为驱避剂研发提供新思路,具有广阔的市场前景。

摘要： 从昆明安宁采集思茅松毛虫茧至室内羽化、孵化,将发育至3龄幼虫作为试虫,基于Probit回归法对其进行Bt制剂毒力测定分析,利用最佳检测时间点的致死中浓度(LC_(50))对其进行感染,在感染后不同时间显微镜检中肠组织病变,同时测定血淋巴的酚氧化酶(PO)、羧酸酯酶(CarE)和乙酰胆碱酯酶(AChE)等活性,探究苏云金杆菌(Bt)对思茅松毛虫幼虫中肠组织和血淋巴酶活性的影响,分析其作用机制。结果表明:48 h是Bt制剂毒力测定的最佳检测时间,其LC_(50)为13.024 IU/μL;中肠典型病变包括:柱状细胞伸长变形、杯状细胞数量明显增多及其胞腔显著扩大、围食膜逐渐消失等;Bt感染后幼虫血淋巴CarE、AChE和PO的酶活性显著升高,其中AChE最为明显。

摘要： 羧酸酯酶作为人体内重要的水解酶,在催化酯类、酰胺类以及硫酯类化合物的代谢中起重要作用,外源性药物如氯吡格雷和环境毒物代谢如西维因也需要羧酸酯酶的参与。因此羧酸酯酶的检测也成为研究热点。荧光探针具有反应迅速,灵敏度高,操作简便等优点。本文以咔唑为原料合成了一种用于最大吸收波长为428 nm,最大发射波长为598 nm,斯托克斯位移为170 nm用于检测羧酸酯酶的荧光探针。

摘要： 羧酸酯酶(CES)是一种α/β-丝氨酸水解酶,能通过水解酯或酰胺来代谢药物(如卡培他滨)和农药(如拟除虫菊酯),或者是代谢内源性酯(如胆固醇酯)。本研究基于咔唑为原料,制备一种turn-off荧光探针TX-01用于检测羧酸酯酶,并通过探针分子与羧酸酯酶反应前后的荧光强度变化检测该酶的活性。该有机小分子荧光探针的最大吸收波长为423 nm,最大发射波长为580 nm,斯托克斯位移为157 nm,其与羧酸酯酶反应前呈橙黄色荧光,反应后荧光淬灭。

摘要： 【目的】研究新疆不同地理种群棉蚜3种酶的活性及抗药性的差异。【方法】测定新疆库尔勒、五家渠、石河子、奎屯、哈密地区棉蚜和实验室敏感种群羧酸酯酶、谷胱甘肽-S-转移酶、乙酰胆碱酯酶活性,并分析3种酶活性与吡虫啉抗性之间的关系。【结果】库尔勒、五家渠、石河子、奎屯和哈密地区乙酰胆碱酯酶和谷胱甘肽-S-转移酶的比活力比值分别为4.2、2.7、2.3、2.5、2.1倍和2.3、1.5、1.3、2.5、2.1倍,差异显著(P<0.05);羧酸酯酶比活力比值为6.5、4.2、3.4、2.7、1.2倍,除哈密地区相对接近外,其余地区均明显高于1.0,差异显著(P<0.05),2种棉蚜关键解毒酶和1种神经传导关键性酶与抗药性之间存在一定相关性。【结论】各地理种群棉蚜3种酶活性均显著高于敏感种群(P<0.05),且彼此之间存在差异性,羧酸酯酶在棉蚜感受到吡虫啉杀虫剂胁迫时极有可能起到重要作用。

摘要： 为提高毕赤酵母重组菌产伏马毒素B1(fumonisin B1,FB1)羧酸酯酶的摇瓶发酵水平,以酶活力为指标,对发酵条件和培养基进行优化.通过单因素试验对发酵条件进行优化.通过Plackett-Burman试验筛选出关键培养基成分,再进行正交试验建立试验数据样本,最后建立误差反向传播神经网络模型进行预测并寻找最优发酵培养基组成.经优化得到的发酵条件:诱导温度28°C,初始pH 6.0,每24 h补加体积分数为1％的甲醇,诱导96 h;优化后发酵培养基组成:蛋白胨23 g/L、KH2PO444 g/L、PTM4(Pichia trace minerals 4)微量元素溶液1.5 mL/L、K2 SO47.15 g/L、MgSO4·7H2 O 5.85 g/L和酵母粉5 g/L.FB1羧酸酯酶酶活力达到402 U/mL以上,较优化前提高了1.19倍.优化后显著提高了重组菌株的产酶能力,研究结果为FB1羧酸酯酶发酵罐优化提供了基础数据.

摘要： 目的:初步考察5种中药成份黄芩苷、穿心莲内酯、橙皮苷、茶多酚及黄豆苷元在体外对羧酸酯酶1(CES1)和羧酸酯酶2(CES2)活性的影响.方法:采用CES1、CES2特异性探针咪达普利和伊立替康(CPT-11)及其代谢产物咪达普利拉和SN-38,在大鼠肝微粒体孵育体系中初步考察上述5种中药成份抑制两种CESs活性强度.结果:上述5种中药成份在100μM浓度下对CES1、CES2活性均无显著抑制作用(P＜0.05).结论:黄芩苷、穿心莲内酯、橙皮苷、茶多酚及黄豆苷元在体外不影响CESs活性,体内实验有待进一步开展.

摘要： 在蚊虫中，抗药性产生的原因主要分为两个方面，代谢抗性和靶标抗性。羧酸酯酶在蚊虫代谢抗性中起着重要的作用，本文系统阐述了当前蚊虫羧酸酯酶抗性的分子机理。

摘要： 昆虫羧酸酯酶(CarE)属于酯酶超基因家族重要一员,通过菝酸酯酶基因的扩增和点突变,提高羧酸酯酶对农药的代谢活性.其在昆虫对有机磷和氨基甲酸酯类农药的代谢过程中起着重要作用.本文就羧酸酯酶的命名原则、昆虫体内存在部位及其与昆虫抗性的关系进行简要综述.

摘要： 为了研究野桑蚕(Bombyx mandarina)与家蚕(Bombyx mori)对杀虫剂抗性差异的分子机理，采用RT-PCR和RACE方法克隆了野桑蚕羧酸酯酶基因BmmCarE-4的5个选择性剪切变体序列和BmmCarE-5的两个变体序列。利用半定量RT-PCR方法研究了这两个羧酸酯酶基因的组织表达特征，结果表明BmmCarE-4和BmmCarE-5具有相似的组织表达特性。这两个羧酸酯酶基因在中肠中表达量最高，在丝腺和头部表达量次之，在脂肪体和血液中表达量较低。基因组结构分析表明BmmCarE-4和BmmcarE-5处在同一个转录单元上，而且共享部分N端外显子序列。氨基酸序列同源性分析表明BmmCarE-4和BmmCarE-5的7个剪切变体间的氨基酸序列相似性都达52％以上，推测这两个野桑蚕羧酸酯酶基因是由其中一个基因通过基因加倍复制产生的。

摘要： 羧酸酯酶能水解众多药物和农药并具有广泛的底物选择性，需要有适合的底物去衡量其水解谱。为了发展新的酯酶底物，一种含有α-氰基的酯类作为荧光酯酶报告底物被用来衡量酯酶的水解活性，这种底物具有水解后生成具有荧光化合物的特性。本文运用这种策略合成了溴氰菊酯和高效氯氰菊酯报告荧光底物并测定了不同品系棉蚜羧酸酯酶代谢活性。结果表明：氧化乐果棉蚜抗性和敏感品系棉蚜羧酸酯酶对溴氰菊酯报告荧光底物的代谢活性分别为10.0和3.4pmol.min-1.mg-1：对高效氯氰菊酯报告荧光底物的代谢活性分别为4.0和2.4 pmol.min-1.mg1，抗性品系羧酸酯酶对溴氰菊酯和高效氯氰菊酯报告荧光底物的代谢活性分别为敏感品系的2.94和1.67倍；溴氰菊酯棉蚜抗性和敏感品系羧酸酯酶对溴氰菊酯报告荧光底物的代谢活性分别为7.6和6.2pmol.min-1.mg1；对高效氯氰菊酯报告荧光底物的代谢活性分别为9.3和5.2pmol.min-1.mg-1，抗性品系羧酸酯酶对溴氰菊酯和高效氯氰菊酯报告荧光底物的代谢活性分别为敏感品系的1.23和1.79倍。这种衍生的报告荧光底物能够衡量昆虫羧酸酯酶的水解活性，从而从代谢水平来监测昆虫对有机磷和菊酯类农药的抗性水平。

摘要： 在室内研究了云斑天牛成虫取食不同植物对其取食量、存活、产卵量及羧酸酯酶活力的影响。结果表明，云斑天牛成虫以野蔷薇为补充营养源时，其取食量、寿命及每雌产卵量为最高；对其幼虫寄主柳树的取食量及寿命远低于取食野蔷薇，但产卵量仍可达每雌18粒；而云斑天牛成虫几乎不取食其幼虫寄主杨树，每雌产卵仅3粒。但与取食野蔷薇相比，取食柳树或杨树对其成虫血淋巴中的羧酸酯酶活力并没有抑制作用。

摘要： 通过从标准寄主甘蓝分别向嗜食寄主(烟草、棉花和菜豆)和非嗜食寄主(辣椒和玉米)上转接烟粉虱24h后,测定烟粉虱体内酯酶、羧酸酯酶和乙酰胆碱酯酶的活性变化,结果表明:转接不同寄主后烟粉虱羧酸酯酶和乙酰胆碱酯酶的米氏常数(Km)无显著差异,酶活最大反应速度(Vmax)发生了显著差异,对可能导致这种变化的原因进行了讨论分析。

摘要： 本文以底物浓度、反应温度、反应时间、pH作因子,采用正交设计的方法确定意大利蜜蜂(Apismellifera)羧酸酯酶活力测定的最佳条件.羧酸酯酶的测定参照Hama等的比色测定法,以α-NA为底物,测定反应物在600nm下的光密度值,计算蜜蜂羧酸酯酶的比活力.结果表明各因子对反应体系酶活力的影响大小依次为pH＞温度＞反应时间＞酶浓度＞底物浓度.蜜蜂羧酸酯酶的最佳反应条件为酶终浓度0.3个腹部/mL、底物终浓度4×10-4mol/L、pH值7.0、温度35°C、时间10min.

摘要： 为了解析家蚕解毒机制，研究了家蚕在常用农药氰戊菊酯和杀虫双诱导下主要解毒酶的变化。分别给家蚕5龄幼虫添食2种农药，采用酶活性测定和荧光定量PCR(qRT-PCR)技术对家蚕不同组织的羧酸酯酶(CarE)和谷胱甘肽-S-转移酶(GSTs)的活性和基因表达进行研究。结果显示，在分别添食农药后的3-12 h 内，家蚕5龄幼虫均出现中毒症状。不同组织不同时间的CarE 活性在农药处理组中大多受到抑制，而不同组织不同时间GSTs 活性在24h 以前的农药处理组中也受到抑制，但24h以后得到增强；荧光定量PCR技术（qRT-PCR）分析显示CarE-16和Gst-delta在多种组织中都有表达，并且农药处理组不同时间的相对表达量多大低于对照组，但脂肪体等少数组织Gst-delta的相对表达量具有高于对照组的趋势。

摘要： 室内测定比较了B型烟粉虱辛硫磷抗性品系、阿克泰抗性品系和敏感品系体内乙酰胆碱酯酶和羧酸酯酶活性的差异。发现B型烟粉虱辛硫磷抗性品系和阿克泰抗性品系体内乙酰胆碱酯酶活性和羧酸酯酶活性高于敏感品系且差异极显著,而三个烟粉虱品系体内谷胱甘肽-S-转移酶活性差异不显著。通过RT-PCR扩增的方法,获得了编码辛硫磷抗性品系、阿克泰抗性品系和敏感品系烟粉虱乙酰胆碱酯酶的一段约720bp的cDNA片段。与敏感品系相比,该片段上辛硫磷抗性品系有4处核苷酸发生突变,阿克泰抗性有5处发生突变。与敏感品系该片段的编码框相比,辛硫磷抗性品系有3处氨基酸发生变化,阿克泰抗性品系有5处发生变化,而两个抗性烟粉虱品系间仅有1处氨基酸不同。表明B型烟粉虱抗有机磷和烟碱类化学制剂的机制可能具有相关性。

摘要： 一种羧酸酯酶的活性和羧酸酯酶抑制剂的活性的检测方法，属于生物技术领域。解决现有的酶活性检测方法灵敏度比较低、易出现假阳性信号、方法复杂、价格昂贵和耗时长的问题。该羧酸酯酶活性的检测方法是将底物分子和不同浓度羧酸酯酶反应，得到水解产物；将得到的水解产物、硝酸银溶液、聚阴离子溶液和带正电荷的小分子探针溶液混合，对羧酸酯酶的活性进行荧光检测。本发明还提供一种羧酸酯酶抑制剂的活性的检测方法。该方法具有更高的灵敏度，检测限为0.05mU/mL，比现有的某些检测方法低1或2个数量级，同时实验证明该方法具有很好的选择性、简便、成本低。

摘要： 分泌人羧酸酯酶2单克隆抗体的杂交瘤细胞株及人羧酸酯酶2的单克隆抗体，它涉及一种杂交瘤细胞株及单克隆抗体。它制备出分泌人羧酸酯酶2单克隆抗体的杂交瘤细胞株及人羧酸酯酶2的单克隆抗体，为人羧酸酯酶2的进一步研究提供了一种有力的工具。细胞株制备：(一)制备免疫原；(二)动物免疫；(三)制备滋养细胞；(四)制备脾细胞；(五)骨髓瘤细胞预处理；(六)混合；(七)细胞融合；(八)融合细胞培养；(九)克隆化阳性杂交瘤细胞，即得到分泌人羧酸酯酶2单克隆抗体的杂交瘤细胞株。抗体制备：(一)接种杂交瘤细胞株；(二)收集含有抗体的腹水；(三)纯化抗体；(四)透析，即得到人羧酸酯酶2的单克隆抗体。

摘要： 本发明提出了一种用于检测羧酸酯酶的荧光探针及其制备方法与专用检测试剂盒，该荧光探针为2‑[2‑4‑乙酰氧基‑苯基)‑乙烯基]‑3‑乙基‑1,1‑二甲基‑1H‑苯并[e]吲哚，本发明基于羧酸酯酶可与乙酰氧基发生水解反应，将乙酰氧基作为特异性响应基团，半花菁类染料作为荧光团，半花菁类染料荧光团自身具有良好的荧光性质，具有较长的发射波长，设计了一种半花菁类荧光探针，本设计的试剂盒与羧酸酯酶反应后溶液呈现粉红色并且发出强烈的荧光，灵敏度高，该显色反应仅在羧酸酯酶存在的条件下发生，其他常见的活性氧、氨基酸、酶类物种不产生干扰。

摘要： 本发明公开了用于检测羧酸酯酶1的新型BODIPY荧光探针及其制备方法与应用。本发明的小分子荧光探针是利用苯甲酰氯和氟硼二吡咯，通过有机合成反应制备得到。该新型BODIPY荧光探针是基于氟硼二吡咯的发光母核设计而成，在3位活泼甲基上通过克脑文盖尔缩合反应引入N‑乙基咔唑‑3‑甲醛基，延伸BODIPY荧光团的共轭结构，使发射波长红移到近红外区域。然后用苯甲酰氯取代8号位，形成酯键，对羧酸酯酶1具有识别性。本发明的新型BODIPY荧光探针具有较好的生物相容性，具有荧光量子产率高、摩尔吸收系数大、荧光谱峰窄，灵敏度高、光稳定性好等优异性能，能够实现对羧酸酯酶1(CES1)和农药残留的检测。

摘要： 一种羧酸酯酶的活性和羧酸酯酶抑制剂的活性的检测方法，属于生物技术领域。解决现有的酶活性检测方法灵敏度比较低、易出现假阳性信号、方法复杂、价格昂贵和耗时长的问题。该羧酸酯酶活性的检测方法是将底物分子和不同浓度羧酸酯酶反应，得到水解产物；将得到的水解产物、硝酸银溶液、聚阴离子溶液和带正电荷的小分子探针溶液混合，对羧酸酯酶的活性进行荧光检测。本发明还提供一种羧酸酯酶抑制剂的活性的检测方法。该方法具有更高的灵敏度，检测限为0.05mU/mL，比现有的某些检测方法低1或2个数量级，同时实验证明该方法具有很好的选择性、简便、成本低。

摘要： 分泌人羧酸酯酶2单克隆抗体的杂交瘤细胞株及人羧酸酯酶2的单克隆抗体，它涉及一种杂交瘤细胞株及单克隆抗体。它制备出分泌人羧酸酯酶2单克隆抗体的杂交瘤细胞株及人羧酸酯酶2的单克隆抗体，为人羧酸酯酶2的进一步研究提供了一种有力的工具。细胞株制备：(一)制备免疫原；(二)动物免疫；(三)制备滋养细胞；(四)制备脾细胞；(五)骨髓瘤细胞预处理；(六)混合；(七)细胞融合；(八)融合细胞培养；(九)克隆化阳性杂交瘤细胞，即得到分泌人羧酸酯酶2单克隆抗体的杂交瘤细胞株。抗体制备：(一)接种杂交瘤细胞株；(二)收集含有抗体的腹水；(三)纯化抗体；(四)透析，即得到人羧酸酯酶2的单克隆抗体。

摘要： 本发明涉及基因工程技术领域，尤其涉及嗜热羧酸酯酶突变体及其应用。本发明提供的嗜热羧酸酯酶突变体由嗜热乌氏芽孢杆菌的嗜热型羧酸酯酶突变而来，其最适pH为8.0，最适温度60°C，在pH 8.0条件下，70°C的条件下热稳定性良好，60°C孵育60h后，仍保留40％左右的的残留酶活性。且在70°C保温1h，该羧酸酯酶仍具有良好的酶活，适于工业上应用的要求，该突变体在酵母中的表达酶活为387U/mg，其应用空间更广。

摘要： 本发明属于生物医药技术领域，公开了一种测定羧酸酯酶1活性的特异性荧光探针底物及其制备方法和应用。该探针底物可用于不同种属来源的细胞或组织样本中CES1酶活性的定量检测，还可用于CES1调控剂的快速筛选，同时可以作为实验动物在体及整体CES1的探针底物，评估代谢酶CES1的个体及种属差异。本发明还公开了该探针底物的制备方法。本发明CES1荧光探针底物检测CES1单酶体外活性具有高特异性，高灵敏度，高检测便利性及高通量检测性，与荧光探针相比具有不同的检测方式，基本不受生物基质的干扰，且具有更高的选择性和精确性。

摘要： 本发明涉及生物工程技术领域，尤其涉及羧酸酯酶的用途。本发明发现，SEQ ID NO：1所示的EstPS1酶具有良好的对酯类物质降解的活性，倾向于降解短链对硝基苯脂肪酸酯类，且在高温下能够保持良好的酶活力。研究表明，该酶在60、70、80、90和100°C的酶活半衰期分别是14h，2h，31min，10min。即使将酶液放置在沸水浴煮沸10min，酯酶仍保留19％的残留酶活。

摘要： 本发明涉及基因工程技术领域，尤其涉及嗜热羧酸酯酶突变体及其应用。本发明提供的嗜热羧酸酯酶突变体由嗜热乌氏芽孢杆菌的嗜热型羧酸酯酶突变而来，其最适pH为8.0，最适温度60°C，在pH 8.0条件下，70°C的条件下热稳定性良好，60°C孵育60h后，仍保留40％左右的的残留酶活性。且在70°C保温1h，该羧酸酯酶仍具有良好的酶活，适于工业上应用的要求，该突变体在酵母中的表达酶活为387U/mg，其应用空间更广。