拟南芥
拟南芥的相关文献在1992年到2023年内共计3016篇,主要集中在植物学、分子生物学、农作物
等领域,其中期刊论文2266篇、会议论文71篇、专利文献679篇;相关期刊443种,包括生命科学研究、生物技术通报、西北植物学报等;
相关会议51种,包括第三届“模式生物与人类健康”发育遗传学全国学术研讨会、中国遗传学会第九次全国会员代表大会暨学术研讨会、第七届全国环境化学学术大会等;拟南芥的相关文献由7232位作者贡献,包括刘选明、董金皋、赵小英等。
拟南芥
-研究学者
- 刘选明
- 董金皋
- 赵小英
- 杨仲南
- 宋纯鹏
- 李唯奇
- 邢继红
- 曹树青
- 唐冬英
- 任春梅
- 侯丙凯
- 王磊
- 郭新红
- 周玉萍
- 张森
- 田长恩
- 陈丽梅
- 安国勇
- 秦跟基
- 瞿礼嘉
- 赵淑清
- 顾红雅
- 刘志斌
- 王凤茹
- 李旭锋
- 杨毅
- 杨红玉
- 阳成伟
- 康定明
- 王棚涛
- 郑成超
- 仪慧兰
- 余迪求
- 周索
- 张慧
- 施卫明
- 王宗华
- 王瑞刚
- 王静
- 瓮巧云
- 陈章良
- 韩榕
- 张卫
- 李娜
- 李家洋
- 李晶
- 李霞
- 李韶山
- 秦广雍
- 胡向阳
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杨丽萍;
韩晗;
石淼;
闵菲;
丁晓月;
金太成
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摘要:
干旱、低温、盐胁迫和重金属污染等非生物胁迫,对植物的生长发育会产生严重的抑制作用.在这些条件下,植物细胞内各种代谢过程会有一定程度的受损或不工作,将会导致活性氧(Reactive oxygen species,ROS)在植物体内过量积累.过氧化氢是植物体内中最稳定形式的活性氧之一,植物体内积累过量的过氧化氢会严重威胁植物细胞的膜系统.在本实验中,选取了野生型拟南芥(Arabidopsis thaliana)为材料,分别进行低温处理、盐处理和干旱处理,并通过对未处理的和非生物胁迫处理的植物中过氧化氢含量变化进行比较分析.实验结果表明,胁迫处理后,拟南芥植物体内的过氧化氢含量不同程度地增加,为深入研究植物对逆境响应的分子机制奠定研究基础.
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孟颖;
邢蕾蕾;
曹晓红;
郭光艳;
柴建芳;
秘彩莉
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摘要:
4-香豆酸辅酶A连接酶(4CL;EC 6.2.1.12)位于苯丙烷途径分支点的上游,是苯丙烷代谢途径的核心酶,可产生木质素、黄酮类等化合物,这些化合物对植物的生长发育及环境适应性均具有重要作用。在双子叶植物中,有关4CL的研究较多,而在单子叶植物尤其是作物中的研究相对较少。本研究利用RACE技术从普通小麦中克隆了一个4CL基因Ta4CL1。系统发育分析表明,Ta4CL1与水稻、玉米和高粱等植物中在木质素合成中具有重要作用的4CLs聚成一类;利用Ta4CL1过表达、拟南芥4CLs突变体at4cl1、at4cl3和at4cl14cl3及其功能回复株系进行的分析表明,Ta4CL1与At4CL1功能相似,在植物木质素合成中具有重要作用,但未参与黄酮类化合物生物合成的调控过程;Ta4CL1是转基因拟南芥中4CL酶活性的主要贡献者。过表达Ta4CL1的转基因拟南芥叶片增大、茎更粗;Ta4CL1的表达还受茉莉酸甲酯(Methyl jasmonic acid,MeJA)、赤霉素(Gibberellin,GA)和生长素(Indoleacetic acid,IAA)等激素处理的影响。本研究为利用基因工程将Ta4CL1应用于改善小麦秸秆的利用效率提供了理论依据。
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滕霄;
郭伟岳;
李茹;
李攀;
张雨飞;
冀芦沙
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摘要:
CRISPR/Cas9系统在植物遗传改良及功能基因研究中有着非常重要的作用.本研究中,根据拟南芥糖基转移酶家族中同工酶UGT79B2/79B3的前体序列,设计针对靶基因UGT79B2/79B3的特异的sgRNA引导序列,构建ugt79b2/79b3-Cas9双突变植物表达载体,并转化到根癌农杆菌GV3101中.将含有目标载体的GV3101活化后,花浸染法浸染拟南芥.以后代阳性株系DNA作为模板,送公司测序.99株阳性转基因株系中分子鉴定发现有24株发生突变,其中只有1株发生ugt79b2/79b3双突变.该研究结果为拟南芥糖基转移酶ugt79b2/79b3突变体的功能开发提供了基础研究与方法支持.
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孟颖;
邢蕾蕾;
曹晓红;
郭光艳;
柴建芳;
秘彩莉
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摘要:
4-香豆酸辅酶A连接酶(4CL;EC 6.2.1.12)位于苯丙烷途径分支点的上游,是苯丙烷代谢途径的核心酶,可产生木质素、黄酮类等化合物,这些化合物对植物的生长发育及环境适应性均具有重要作用。在双子叶植物中,有关4CL的研究较多,而在单子叶植物尤其是作物中的研究相对较少。本研究利用RACE技术从普通小麦中克隆了一个4CL基因Ta4CL1。系统发育分析表明,Ta4CL1与水稻、玉米和高粱等植物中在木质素合成中具有重要作用的4CLs聚成一类;利用Ta4CL1过表达、拟南芥4CLs突变体at4cl1、at4cl3和at4cl14cl3及其功能回复株系进行的分析表明,Ta4CL1与At4CL1功能相似,在植物木质素合成中具有重要作用,但未参与黄酮类化合物生物合成的调控过程;Ta4CL1是转基因拟南芥中4CL酶活性的主要贡献者。过表达Ta4CL1的转基因拟南芥叶片增大、茎更粗;Ta4CL1的表达还受茉莉酸甲酯(Methyl jasmonic acid,MeJA)、赤霉素(Gibberellin,GA)和生长素(Indoleacetic acid,IAA)等激素处理的影响。本研究为利用基因工程将Ta4CL1应用于改善小麦秸秆的利用效率提供了理论依据。
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杨佳慧;
孙玉萍;
陆雅宁;
刘欢;
卢存福;
陈玉珍
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摘要:
端粒酶是真核生物中维持染色体末端DNA完整性的一类特殊逆转录酶,研究拟南芥AtTERT对大肠杆菌生长及非生物胁迫的影响,为深入研究TERT蛋白非端粒功能奠定基础。将拟南芥AtTERT转入大肠杆菌,成功构建pET32a-AtTERT原核表达载体,优化诱导条件,纯化并鉴定GST-AtTERT融合蛋白,运用Western blotting验证,同时采用点板法检测转AtTERT大肠杆菌的非生物胁迫抗性。结果表明,优化诱导条件为感受态细胞Transetta(DE3)诱导温度20°C、诱导剂(IPTG)浓度为0.5 mmol/L;纯化的GST-AtTERT融合蛋白相对分子量大小为156 kD;Western blotting验证结果显示在诱导全菌、上清及沉淀中均出现并与预期分子量大小结果一致的蛋白条带。转AtTERT重组菌在NaCl(400和500 mmol/L)、甘露醇(400和600 mmol/L)和H_(2)O_(2)(0.4 mmol/L)的LB固体培养基上的存活率显著高于空载对照菌,而利用液氮反复冻融6次时,转AtTERT重组菌存活率显著低于空载对照菌。转AtTERT大肠杆菌NaCl盐胁迫、甘露醇渗透胁迫、过氧化氢氧化胁迫抗性增强,但低温抗性减弱,表明拟南芥AtTERT具有抗非生物胁迫的非端粒功能。
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裴锌锌;
陈虹宇;
李晓;
刘华杰;
李华
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摘要:
硫化氢(H_(2)S)对植物根系生长有调控作用,为了解H_(2)S调控植物根长与表观遗传调控的相关性,采用不同浓度外源NaHS(H_(2)S供体)处理拟南芥和小麦,检测H_(2)S对二者根长、组蛋白去乙酰化酶(HDACs)活性及相关基因表达的影响。结果表明,外源H_(2)S处理均可抑制拟南芥和小麦主根生长,诱导HDACs活性,调控HDACs基因表达。在拟南芥中,AtHDA2、AtHDA7、AtHDA8、AtHDA14表达受50μmol/L NaHS处理抑制,150μmol/L NaHS处理可特异性诱导AtHDA5、AtHDA6、AtHDA19和AtSRT1的表达,但NaHS处理对AtHDT1、AtHDT2、AtHDT3和AtHDT4的表达无显著影响。在小麦中,TaHDA9和TaHDA19均受100μmol/L NaHS处理显著诱导表达,TaHDA20在200μmol/L NaHS处理下显著上调表达,而TaHDA2、TaHDA6、TaHDA8、TaHDA18、TaSRT2、TaHDT1和TaHDT2均在100、200μmol/L NaHS处理下显著下调表达,50~400μmol/L NaHS对TaHDA14和TaHDT3的表达均有抑制作用。值得注意的是,HDACs家族中HDA2表达对H_(2)S的响应在拟南芥和小麦中均随H_(2)S浓度增加呈先降低后升高的趋势,HDA19表达随H_(2)S浓度增加均呈先升高后降低的趋势。综上,H_(2)S可能通过调节HDACs基因表达介导植物根系生长。
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徐洁娜;
夏明慧;
樊婷婷
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摘要:
探索盐胁迫作用机理并将其运用到农业生产领域中,对培育耐盐作物具有非常重要的现实意义。土壤环境中过量的Na+会干扰植物根对其他离子的吸收,导致植物生理代谢紊乱、离子失衡。在拟南芥中,已有研究证明HKT1基因在盐胁迫信号通路中扮演十分重要的角色,控制着Na+的吸收、转运和储存。文章通过正向和反向遗传学手段,发现一个转录因子MYBX在分子水平正向调控基因HKT1的表达,并通过构建HKT1过表达载体、获得含有测序正确质粒的农杆菌、侵染拟南芥突变体mybx,最终筛选获得1300-HKT1/mybx转基因植株,从而可以进一步验证MYBX和HKT1之间的关系。
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樊星;
宋兴舜;
邢倩
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摘要:
YY1(YIN AND YANG1)基因作为一种锌指蛋白转录因子,在动物、植物体内均有表达。在动物的生长发育过程中,YY1在胚胎的形成与发育分化、肿瘤的发生发展等生理过程中发挥功能;在植物体内,YY1已被证实与ABA信号通路以及植物抗逆有关。本文综述了近年来转录因子YY1基因在动物、植物等不同领域的研究进展,并对其在植物领域上的未来研究方向进行分析和展望。
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贾容容;
杨亚婷;
姬新宇;
张净然;
田喜元
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摘要:
本文以野生型拟南芥Col-0及NRT1.1突变体nrt1.1-1和chl1-5为材料,通过在培养基中添加不同浓度的蔗糖,研究了蔗糖对拟南芥根系偏斜程度的影响。结果表明,0,3%蔗糖处理野生型与突变体拟南芥的根系偏斜角度有显著性差异,突变体根系偏斜角度分别是野生型的1.34-1.80倍(nrt1.1-1)和1.71-2.05倍(chl1-5)。野生型与突变体拟南芥的根系偏斜角度均表现为随蔗糖浓度的增加而增加,并在2%蔗糖处理达到最高。但3%蔗糖处理时,野生型Col-0根系偏斜角度有显著性下降,而NRT1.1突变体没有显著性变化。该研究为深入研究氮代谢调控碳代谢提供理论依据。
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徐婷婷;
任仕超;
宋秀芬;
刘春明
- 《第三届“模式生物与人类健康”发育遗传学全国学术研讨会》
| 2014年
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摘要:
在植物种子中胚胎和胚乳组织之间存在着密切的相互作用从而保证两者的协调发育,然而迄今为止人们对参与胚胎与胚乳交流的信号分子却知之甚少.在我们的研究中,利用基因启动子融合GFP荧光标记基因的表达构建转化拟南芥植株,在转基因植株种子中观察到CLAVATA3/EMBRYO SURROUNDING REGION(CLE)多肽激素家族的成员CLE-E特异在胚胎外表皮细胞中动态表达,而胚乳中无可见信号.
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周李娜;
高翔
- 《第三届“模式生物与人类健康”发育遗传学全国学术研讨会》
| 2014年
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摘要:
Lrp1基因是拟南芥SHI基因家族的一员,之前被认为仅在侧根原基处表达.采用PCR扩增的方法克隆了拟南芥Lrp1基因启始密码子上游约3.6kb的DNA片段,并将其克隆到植物表达载体pBI101.1中,将重组质粒转化野生型(Col)拟南芥并筛选纯合子.Lrp1promoter-GUS分析显示Lrp1在众多组织中均有表达,包括地上部分.在主根和侧根原基处检测到了强烈的GUS表达,这一结果表明,Lrp1在侧根发育调控中可能起到作用.
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郭磊;
刘春明
- 《第三届“模式生物与人类健康”发育遗传学全国学术研讨会》
| 2014年
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摘要:
双受精是高等植物特有的生命过程,两个精细胞被花粉管传递到胚囊后,其中一个与中央细胞融合形成胚乳,另一个与卵细胞融合形成合子.合子激活是一个受到精细调控的过程.为了研究这一过程,实验室通过诱变拟南芥种子构建了一个合子败育的突变体库.其中,EMBRYONIC FACTOR6(FAC6)缺失突变体呈现合子败育的表型,同时胚乳细胞核分裂也出现异常.通过图位克隆和测序的方法,发现FAC6编码一个具有Zinc finger结构域的蛋白质.为了研究FAC6在双受精过程中的表达模式,制备了FAC6融合绿色荧光蛋白(GFP)的构建并得到了转基因植株。荧光信号显示FAC6在受精前的配子体发育过程中持续表达,同时在受精后的胚胎胚乳发育过程中也是持续表达。利用转基因植株与野生型植株进行正反交实验,结果表明无论FAC6作为父本还是母本在受精后的胚胎胚乳发育过程中都有表达。前人的研究表明动物中的FAC6同源蛋白具有促进泛素修饰蛋白的活性。通过体外泛素修饰体系发现拟南芥FAC6也具有泛素连接酶活性。体内体外实验结果表明FAC6可以特异地泛素修饰细胞周期相关蛋白并促进其降解。在FAC6突变体发育停滞的胚珠中,细胞周期蛋白GUS(β-glucuronidase)信号过量累积。以上研究结果显示,具有泛素连接酶活性的FAC6在双受精前后都有表达,并可能通过调控细胞周期相关蛋白的降解进而调控拟南芥胚胎胚乳发育。
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何丽君
- 《第三届“模式生物与人类健康”发育遗传学全国学术研讨会》
| 2014年
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摘要:
本研究主要根据转基因技术设计,以高大乔木胡杨和模式植物拟南芥为研究材料.通过花序侵染法,以农杆菌为介导将胡杨大片段基因转移到模式植物拟南芥中.研究中利用SilwetL-77作为侵染液,在不同浓度,不同时间下,将农杆菌中携带的胡杨大片段基因转入到拟南芥中,将获得的转化后的种子进行抗性培养基的筛选,通过对可能的阳性转化子进行DNA的提取,验证胡杨基因是否转入到拟南芥中,将阳性转化子进行抗性培养基筛选,分子检测、并筛选表型变化的突变体.为了更进一步研究胡杨基因组学,必须获得可以稳定遗传且携带胡杨基因的纯合子,还需要继续培养阳性转化子,进行抗性筛选和传代遗传差异筛选.rn 主要研究结果如下:rn (1)最佳农杆菌菌种活化培养条件是YEP液体培养基,活化时间24h时。最佳转化体系为300ulSilwetL-77/L侵染液侵染7min和500ulSilwet L-77/L侵染液侵染lmin。rn (2)在转化的862个克隆株系中,通过抗性培养基筛选并提取了约1500个转化子的DNA,其中大部分表现出阳性,获得了171个株系的阳性转化子。筛选过程中得到的最佳消毒法为酒精消毒法。rn (3)在多次的筛选及后代观察中获得了7个具有表型变化的突变体。rn (4)在针对拟南芥的培养中,做了一定的改动,使得它在特定的环境条件下生长,以便发育强壮利于转化。rn 本文对胡杨基因库的完善具有很大的贡献,也为研究胡杨基因组的作用提供了理论依据。
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Liu Ying;
刘颖;
Lin Juan;
林娟;
Zhou Xiaoli;
周小丽;
Liu Muqing;
刘木清
- 《2013上海照明科技及应用趋势论坛》
| 2013年
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摘要:
由于LED作为第四代新型光源具有电源电压低、光效高、体积小、稳定性强、波长范围窄、响应时间快、环保、寿命长及冷光源等优点.在设施农业中作为植物光源有广阔的发展前景.为了研究不同光照条件下拟南芥生长情况,将拟南芥分别放置在荧光灯和LED灯光照环境下进行生长实验.结果显示:当光量子通量密度在64μmol·m-2·s附近时,荧光灯下的拟南芥叶绿素含量略低于LED灯下的叶绿素a+b平均含量;LED光照下的拟南芥主根长度比在荧光灯条件下约长20mm,且其侧根数量多于在荧光灯下的侧根数量.在LED光照环境下,光量子通量密度从14μmol·m-2·s到375μmol·m-2·s变化时,拟南芥根系长度在200μmol·m-2·s左右达到最高,并随着光量子通量密度增高而逐渐降低,而侧根的数量则随着光量子通量密度的增高而增高。
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余迪求;
陈利钢;
胡彦如
- 《中国遗传学会第九次全国会员代表大会暨学术研讨会》
| 2013年
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摘要:
植物病毒是导致粮食、油料、蔬菜、果树、花卉产量下降和品质变劣的重要原因,由于在农业生产上对植物病毒病的防治非常困难,植物病毒病素有"植物癌症"之称.植物病毒成功侵染寄主植物之后,从最初侵染的细胞移动到相邻的健康细胞而完成局部侵染,随后经输导组织进行快速的长距离运输,引起系统侵染.最近的研究发现,拟南芥WRKY8基因在调控植物病毒TMV-Cg系统侵染、运输和积累方面具有重要功能.其主要研究结果表明通过表达分析发现,拟南芥WRKY8基因受ABA及伤害诱导表达,而受病毒TMV-Cg抑制表达,同时WRKY8基因突变后促进了植物病毒TMV-Cg在植株系统性叶片中的运输和积累,这些结果暗示WRKY8基因作为正调控因子参与抗病毒响应过程.WRKY8因子与VQ9蛋白在细胞核内相互作用形成蛋白复合物。VQ9蛋白定位于细胞核,也受高盐胁迫的强烈诱导。体外结合试验(EMSA)证实,VQ9蛋白能降低WRKYB因子的DNA结合能力,从而拮抗WRKY8的转录激活功能。表型分析表明,VQ9基因突变后植物耐高盐胁迫的能力显著增强.同时,结果表明WRKY8能直接调控抗性相关基因RD29A.此外,WRKY8与VQ9还参与调控了植物在高盐胁迫下的Na+/K+离子动态平衡。
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邴雷;
李晶岚;
李晓旭;
赵宝存;
沈银柱;
黄占景;
葛荣朝
- 《中国遗传学会第九次全国会员代表大会暨学术研讨会》
| 2013年
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摘要:
研究表明,丝氨酸/苏氨酸蛋白激酶是生物酶中的一个大家族,参与环境胁迫信号的传递是其重要功能之一.TaSTK是筛选获得的一个盐诱导后表达增强的小麦基因,通过在拟南芥中的异源功能验证,表明TaSTK基因的过量表达能够显著提高转基因拟南芥的耐盐性.拟南芥丝氨酸/苏氨酸蛋白激酶基因AtSTK是与小麦耐盐相关基因TaSTK高度同源的蛋白激酶基因.本研究对基因AtSTK进行了克隆和功能研究.结果发现,AtSTK基因的过量表达可以明显提高拟南芥对盐、PEG和ABA胁迫的耐受性.生理特性检测表明,AtSTK的过量表达造成拟南芥质膜透性显著降低,脯氨酸含量明显升高,MDA含量下降,这也许是AtSTK过表达造成拟南芥抗逆性提高的生理原因.在高浓度的外源ABA条件下,AtSTK基因的过量表达明显拮抗了ABA对种子萌发的抑制作用。亚细胞定位结果表明,AtSTK普遍分布于细胞质和细胞核。组织表达特异性检测表明,AtSTK基因在拟南芥的生长点具有较强表达。信号通路的RT-PCR检测表明,AtSTK可能主要通过拟南芥的MAPK信号通路传递盐胁迫信号。从拟南芥基因组DNA扩增获得AtSTK基因的全长启动子序列,并根据启动子结构分析结果,对其启动子序列进行了5’端系列缺失。然后在拟南芥中利用GUS报告基因,对这一系列5'端序列缺失启动子序列的启动能力进行了检测,同时对其转基因拟南芥200mmo1/L NaCI盐胁迫后的启动能力也进行了检测。最终确定AtSTK基因启动子-99bp~-180bp和-457bp~-779bp区域有增强子作用,位于-115位点的CAAT框可能对基因表达起到了增强作用。启动子片段一旦缺失-29位点的TATA框,会造成其启动下游基因表达的能力丧失。
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陈金焕;
夏新莉;
尹伟伦
- 《全国农业生物化学与分子生物学第十四届学术研讨会》
| 2015年
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摘要:
干旱、盐碱等逆境胁迫是限制林木生长、发育和分布的主要环境因子,作为一种植物应激激素,ABA在干旱、寒冷、高盐等逆境胁迫响应中起重要的调节作用.以荒漠乔木胡杨为研究对象,对胡杨ABA信号途径中的重要因子进行挖掘与鉴定.从干旱和ABA处理的两种胁迫诱导cDNA文库中筛选出拟ABA信号通路中的调控因子,根据相似性比对,命名为PeHAB1,通过构建植物表达载体将PeHAB1在拟南芥中进行异源转化,发现过量表达PeHAB1导致转基因植物对ABA的敏感性降低,对水分胁迫的耐受力降低.由此推断,PeHAB1在胡杨中可能作为负调控因子调控ABA信号。进一步以PeHAB1为诱饵蛋白,在酵母文库中进行互作蛋白筛选,筛选出与PeHAB1拟相互作用的PYL家族成员,命名为PePYL4,PYL4隶属于PYR/PYL/RCAR家族,在拟南芥中该家族成员被鉴定为ABA受体。由此推断,胡杨中存在以PYL-ABA-PP2C为模式的ABA信号通路。为确定PYL-PP2C之间的互作规律,对PeHAB1的重要位点进行的突变,确定出决定PeHAB1-PePYL4互作的主要氨基酸位点。该研究为进一步解析胡杨这一高抗树种的ABA信号调控机制奠定了基础。
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LI Long;
李龙;
葛伟;
GE Wei;
程占超;
CHEN Zhanchao;
吴惠俐;
WU Huili;
李雪平;
LI Xueping;
牟少华;
MU Shaohua;
高健;
GAO Jian
- 《第十一届中国林业青年学术年会第8分会场》
| 2014年
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摘要:
根据同源克隆法分别克隆得到PheWRKY1和PheWRKY2.实时定量PCR方法分析表明,外施抗病信号分子水杨酸(SA)和茉莉酸(JA)和紫外线B辐射均可以诱导PheWRKY1增强表达;外施脱落酸(ABA)和干旱胁迫,Phe WRKY1表达无明显变化.对PheWRKY1基因构建植物过表达载体并转化模式植物拟南芥.转基因植株表现出不同的形态学特征,根系发达、叶片肥大、茎粗壮,提前开花且结种不良.用丁香假单胞菌(简称DC3000)分别侵染转基因株系以及野生型拟南芥后发现,转基因株系的病斑被局限在一个区域内,无明显黄化坏死组织.对转基因株系的叶绿素荧光参数分析表明被侵染的转基因株系整体光合性能和利用同等光强的能力优于被侵染的野生型植株.病原菌侵染下PheWRKY1基因所调控的下游抗病相关基因的表达发生了变化.荧光定量PCR结果显示,在被侵染叶片和未被侵染叶片中,转基因和野生植株的抗病相关基因PRI,PR2,PR5,NPR1表达都有所增加,但是转基因株系中这些基因表达变化更为强烈.对Phe WRKY2基因组织特异性表达分析表明.在实生苗中,叶中相对表达量最高,茎次之,跟最低.对毛竹实生苗缺磷处理后的相对表达量研究发现,在处理初期基因表达量变化不大;处理后96h,基因转录水平表达量是未处理的4.31倍.将Phe WRKY2在拟南芥中过表达,对所获转基因植株耐低磷特性进行了初步研究.酵母单杂交实验表明PheWRKY2基因在酵母体内具有转录激活活性.转基因株系开花提前,与野生型相比对低磷条件的敏感性低,能更有效地利用难溶性有机磷.