抗药性,肿瘤

摘要： 目的探讨miR-34a的表达水平对乳腺癌细胞多柔比星(DOX)耐药性的影响及其分子机制。方法通过实时荧光定量PCR(qPCR)法检测miR-34a在乳腺癌细胞(MCF-7)和DOX耐药细胞株(MCF-7/ADR)中的表达,通过转染miR-34a mimics或者miR-34a inhibitor调控其表达水平;CCK-8法筛选DOX处理细胞的半数有效抑制浓度(IC50),检测细胞存活率;流式细胞术检测细胞凋亡情况;ENCORI网站预测miR-34a靶基因Akt的结合位点;Western blot检测蛋白激酶B(Akt)、Bcl-2及Bax蛋白的表达。结果与MCF-7细胞株相比,MCF-7/ADR细胞株中miR-34a的基础表达水平降低(P<0.01)。与NC inhibitor组相比,miR-34a inhibitor组中miR-34a表达水平降低(P<0.01)。DOX处理MCF-7及MCF-7/ADR细胞的IC50分别为0.895 mg/L和13.607 mg/L。miR-34a与Akt基因3′UTR区可能存在结合位点。经DOX处理后,miR-34a inhibitor组细胞存活率显著升高,细胞凋亡率降低,p-Akt/Akt和Bcl-2/Bax蛋白表达水平升高(P<0.05)。与NC mimics组相比,miR-34a mimics组中miR-34a表达水平升高(P<0.01)。经DOX处理后,miR-34a mimics组中细胞存活率降低,细胞凋亡率升高,p-Akt/Akt和Bcl-2/Bax蛋白水平降低(P<0.01)。结论 miR-34a在MCF-7/ADR中的表达下调,可能通过激活Akt/Bcl-2通路,减少细胞凋亡,进而增强细胞对DOX的耐药性。

摘要： 针对伴有表皮生长因子受体(EGFR)敏感突变的非小细胞肺癌,基于小分子抑制剂的靶向治疗在临床上取得了极大成效,但仍面临着原发耐药/不敏感的问题.初始治疗的有效比例及疗效深度决定了患者的远期生存.本文梳理了关于原发耐药的主要机制,包括突变亚型结构、原发T790M、合并突变、免疫状态等的影响及其相互关系,以及目前有效药物的证据,提出了多基因分型、精准靶向、"鸡尾酒"疗法等克服原发耐药的管理策略,并展望了该领域的发展趋势,为同行们的临床实践及科研方向提供思路.

摘要： 白血病是我国儿童发病率最高的血液恶性肿瘤,而感染是该类患儿最常见的并发症,严重影响白血病患儿的治疗效果,延长其住院时间,增加其治疗费用及复发率,并且是白血病儿童早期死亡的主要原因.近年来,随着抗菌药物的广泛应用,白血病儿童感染耐药率逐年升高,且多重耐药菌(multi-drug resistant bacteria,MDR)感染常见,对白血病儿童产生极大危害.因此,提高对儿童白血病合并MDR感染的认识非常重要.而 目前国内外尚无关于这方面的系统综述,故本文就目前儿童白血病合并MDR感染的现状、高危因素、机制和防治措施作一系统综述,希望有助于降低其发病率及病死率.

摘要： 外泌体是一种直径为50～100 nm的胞外囊泡,内含多种生物活性成分.因其在介导细胞间的信息传递中的作用而受到广泛关注.大量研究证实外泌体与肿瘤之间有着密切的联系,能够在肿瘤的发生、发展以及肿瘤的耐药等方面起调控作用.众所周知,肿瘤耐药是限制肿瘤治疗疗效的关键,而肿瘤耐药产生的原因包括宿主环境因素以及肿瘤细胞遗传性状的改变.近期研究发现外泌体参与了肿瘤化疗耐药的产生过程.本文就外泌体在肿瘤发生、发展及化疗耐药中的研究进展综述如下.

摘要： 外泌体是一种直径为50~100 nm的胞外囊泡,内含多种生物活性成分。因其在介导细胞间的信息传递中的作用而受到广泛关注。大量研究证实外泌体与肿瘤之间有着密切的联系,能够在肿瘤的发生、发展以及肿瘤的耐药等方面起调控作用。众所周知,肿瘤耐药是限制肿瘤治疗疗效的关键,而肿瘤耐药产生的原因包括宿主环境因素以及肿瘤细胞遗传性状的改变。近期研究发现外泌体参与了肿瘤化疗耐药的产生过程。本文就外泌体在肿瘤发生、发展及化疗耐药中的研究进展综述如下。

摘要： 目的 探讨富半胱氨酸61(CCN1)降低结肠癌细胞对5-氟尿嘧啶(5-FU)化疗敏感性的作用及其分子机制.方法 收集结肠癌及癌旁组织,体外培养结肠癌细胞和正常结肠上皮细胞、HCT-116细胞和5-FU耐药细胞,RT-qPCR检测SCD1和CCN1 mRNA的表达水平;培养HCT-116细胞,分别转染pcDNA3.1和CCN1表达载体,或感染shCtrl和shCCNl慢病毒,加入5-FU后用CCK-8方法检测细胞活力,Western blot和RT-qPCR检测SCD1蛋白和mRNA表达水平,油红O染色方法检测细胞脂质含量;Western blot检测转录因子FoxO1在细胞核和细胞质中的分布情况,荧光素酶报告基因检测CCN1和FoxO1对SCD1启动子转录活性的影响.结果 与对照组相比,结肠癌组织、细胞系及HCT-116/5-FU细胞中SCD1的表达水平均上调(均P ＜ 0.05);过表达CCN1能够降低细胞对5-FU的敏感性,增加细胞内脂质沉积,上调SCD1的表达水平(P＜0.05);敲降CCN1则显著增加细胞对5-FU的敏感性,降低细胞内脂质含量,下调SCD1的表达水平(P＜0.05);CCN1能够促进FoxO1出核,激活或抑制FoxO1活性能够促进或下调SCD1的表达水平和启动子活性(P＜0.05).结论 CCN1可能通过激活FoxO1活性上调SCD1的表达从而抑制结肠癌细胞对5-FU的敏感性.

摘要： 胃癌是我国最常见的恶性肿瘤之一,其发生机制复杂,目前尚无良好的方法对胃癌进行诊断和治疗.而研究表明微小RNA(miRNA)在胃癌中存在异常表达,参与胃癌相关基因的调控,对胃癌的发生发展、诊断、治疗等各个过程均有影响,一直是研究的一大热点.本文旨在对微小RNA与胃癌诊断、治疗的关系以及治疗中产生的耐药性等问题进行综述,为后续研究和临床诊治奠定基础.

摘要： 目的 研究微小RNA-144-3p(miRNA-144-3p)靶向调控配对盒基因8(PAX8)对甲状腺癌细胞顺铂耐药性的影响.方法 体外培养人甲状腺癌细胞株FTC-133,并构建对顺铂耐药的人甲状腺癌细胞株FTC-133,采用反转录PCR(RT-PCR)检测FTC-133细胞和顺铂耐药FTC-133细胞中miRNA-144-3p相对表达量.将顺铂耐药FTC-133细胞分为A组、B组、C组,A组不作任何处理,B组转染空质粒,C组转染pCDNA3.1+miRNA-144-3p质粒,采用RT-PCR检测各组miRNA-144-3p、PAX8相对表达量,采用MTT法检测各组顺铂耐药细胞的半数抑制浓度(IC50)值;采用CCK-8法检测各组增殖率,采用流式细胞术检测各组凋亡率.结果 顺铂耐药FTC-133细胞中miRNA-144-3p相对表达量显著高于FTC-133细胞[(0.93 ±0.24)vs(0.26±0.04),P ＜ 0.05];B组顺铂耐药FTC-133细胞IC50值、增殖率、凋亡率及miRNA-144-3p、PAX8相对表达量与A组比较差异无统计学意义(P ＞0.05);C组顺铂耐药FTC-133细胞IC50值、增殖率及miRNA-144-3p相对表达量显著高于B组(P＜0.05),细胞凋亡率、PAX8相对表达量显著低于B组(P ＜0.05).结论 miRNA-144-3p过表达可能通过下调PAX8基因表达而增加甲状腺癌细胞的顺铂耐药性,促进甲状腺癌细胞增殖并抑制其凋亡.

摘要： 目的 通过生物信息学方法挖掘与卵巢上皮性癌(卵巢癌)耐药相关的可作为竞争性内源RNA (ceRNA)的长链非编码RNA (lncRNA),并进行临床验证.方法 (1)挖掘与卵巢癌相关的lncRNA并构建ceRNA调控网络:综合应用文本挖掘、数据预测和网络构建等生物信息学方法,建立与卵巢癌耐药相关的潜在ceRNA调控网络,即lncRNA-微小RNA(miRNA)-mRNA调控网络.(2)临床验证:收集2008年6月至2016年10月在广西医科大学附属肿瘤医院行肿瘤细胞减灭术的卵巢癌患者共95例,其中铂类药物耐药患者54例(耐药组),铂类药物敏感患者41例(敏感组),采用实时荧光定量PCR技术检测两组卵巢癌组织中lncRNA的表达,分析lncRNA表达对卵巢癌患者预后的影响,并分析lncRNA表达对卵巢癌耐药的诊断效能.结果 (1)文本挖掘初步筛选出25个与卵巢癌发生、发展相关的差异表达lncRNA;亚细胞定位分析发现,有8个lncRNA存在于细胞质中;通过进一步数据挖掘、共线文献分析,预测其中的两个lncRNA分子[即生长阻滞特异性转录因子5(GAS5)和HOXC基因座转录因子(HOTAIR)]可作为关键ceRNA分子;构建ceRNA调控网络,GAS5与miRNA(即miR139-5p、miR-24-3p)及mRNA[即乳腺癌易感基因1(BRCA1)、肿瘤蛋白p53(TP53)、表皮生长因子受体(EGFR)、B细胞淋巴瘤2基因(BCL-2)、细胞癌基因(FOS)、H-Ras蛋白(HRAS)]组成ceRNA调控网络,HOTAIR与miRNA(即miR-30a-5p)及mRNA[即磷酸肌醇3激酶调控亚基2(PIK3R2)、TP53、丝蛋白(VIM)]组成ceRNA调控网络.(2)实时荧光定量PCR技术检测显示,与敏感组(设为1.0)比较,耐药组卵巢癌组织中GAS5的表达水平为2.1±1.6, HOTAIR的表达水平为3.5±1.9,两组分别比较,差异均有统计学意义(P=0.011,P＜0.01);Cox回归模型多因素分析显示,GAS5、HOTAIR表达为影响卵巢癌患者无病进展生存率和总生存率的独立危险因素(P＜0.05).GAS5与HOTAIR联合检测诊断卵巢癌的受试者工作特征(ROC)曲线下面积(AUG)为0.871,显著高于GAS5单独检测和HOTAIR单独检测(AUC分别为0.678、0.863),分别比较,差异均有统计学意义(P均＜0.05).结论 GAS5与HOTAIR高表达与卵巢癌耐药密切相关,可作为卵巢癌化疗反应的潜在预测指标;GAS5与HOTAIR联合检测对卵巢癌患者具有一定的诊断效能.这种利用ceRNA调控网络预测关键分子的方法,为卵巢癌的诊断和治疗提供了新的思路.

摘要： 目的 探讨木香烃内酯对慢性粒细胞白血病耐药细胞株K562/ADR多柔比星敏感性的影响及其机制.方法 取对数生长期K562/ADR细胞,分别以不同浓度木香烃内酯、多柔比星以及两药联合作用72 h,CCK-8法检测细胞增殖情况,计算细胞增殖率,获得两药半数抑制浓度(IC50).以10 μmol/L木香烃内酯、10 μmol/L多柔比星及两药联合作用于K562/ADR细胞48 h,流式细胞术检测细胞凋亡率,蛋白质印迹法检测p38-MAPK通路相关蛋白的表达水平.结果 木香烃内酯与多柔比星联用组细胞增殖率均低于相应浓度两药单用组,差异均有统计学意义(均P＜ 0.05).多柔比星对K562/ADR细胞的IC50为(13.50±0.86) μmol/L,木香烃内酯为(7.30±0.55)μmol/L,差异有统计学意义(t=7.044,P=0.002).流式细胞术检测结果显示,10 μmol/L木香烃内酯和10 μmol/L多柔比星联用组K562/ADR细胞凋亡率均高于空白对照组、木香烃内酯单用组以及多柔比星单用组[(19.68±3.21)％比(2.96±0.87)％、(9.34±2.89)％、(9.18±2.13)％],差异均有统计学意义(均P＜ 0.01).与10 μmol/L木香烃内酯单用组和10 μmol/L多柔比星单用组相比,两药联用组凋亡抑制蛋白bcl-2表达下调,bad、p-p38、cleaved-caspase-3及cleaved-PARP蛋白的表达水平上调.结论 木香烃内酯可增强多柔比星对慢性粒细胞白血病K562/ADR细胞增殖的抑制作用,促进多柔比星诱导细胞凋亡,其可能通过调控p38-MAPK通路逆转K562/ADR细胞的耐药性.

摘要： 本发明属于植物基因工程技术领域，具体涉及一种喀斯特炭疽菌及其在橡胶炭疽病研究领域的应用。本申请于海南省橡胶树上首次发现喀斯特炭疽的发生，分离得到的菌株为C.karstii。生物学特性测定发现，该菌株最适生长温度为28°C，致死温度为35°C；最适生长pH为6；光暗交替利于菌落生长；果胶、蛋白胨分别为最适碳源和氮源。致病力评价发现其对PR107、RRIM600、热研7‑33‑97和大丰95四个主推品种均有较强致病力；抗药性评价结果表明，菌株HcgHNQZ1736对甾醇脱甲基抑制剂类(DMIs)杀菌剂咪鲜胺锰盐不具抗药性，对苯并咪唑类杀菌剂多菌灵表现出高抗药性。

摘要： 本发明提供一种柑橘木虱抗药性监测装置和抗药性测定方法，用于解决现有技术中柑橘木虱抗药性实验操作繁琐，效率低的问题；包括：底座、支撑架、柑橘木虱投放系统、药物喷洒系统和保温系统。所述支撑架固定安装在所述底座上，所述支撑架上设有横向运动模组，所述横向运动模组上设有纵向运动模组。所述柑橘木虱投放系统设置在所述纵向运动模组上，所述柑橘木虱投放系统包括暗箱、暗管和第一伸缩元件，所述保温系统包括保温罩和保温灯，通过所述柑橘木虱投放系统和所述药物喷洒系统能够自动向所述培养管中投放特定数目的柑橘木虱和自动喷洒特定浓度的农药，并且可以用于短期培养柑橘木虱，提高了实验效率，节省人力和时间。

摘要： 本发明涉及灰飞虱抗药性雌激素相关受体基因LSERR、降低灰飞虱抗药性的基因片段及其应用。该灰飞虱抗药性雌激素相关受体基因LSERR的序列如SEQ ID NO.1所示。该降低灰飞虱抗药性的基因片段序列如SEQ ID NO.3所示。该基因片段用于降低灰飞虱抗药性。本发明可用于检测灰飞虱的抗药性，并实现对灰飞虱的抗药性治理。

摘要： 本发明涉及灰飞虱抗药性羧酸酯酶基因LSCE12、降低灰飞虱抗药性的基因片段及其应用。该灰飞虱抗药性羧酸酯酶基因LSCE12的序列如SEQ ID NO.1所示。该降低灰飞虱抗药性的基因片段序列如SEQ ID NO.3所示。该基因片段用于降低灰飞虱抗药性。本发明可用于检测灰飞虱的抗药性，并实现对灰飞虱的抗药性治理。

摘要： 本发明涉及灰飞虱抗药性基因CYP6AY3v2、降低灰飞虱抗药性的基因片段及其应用。该灰飞虱抗药性基因CYP6AY3v2的序列如SEQ ID NO.1所示。该降低灰飞虱抗药性的基因片段序列如SEQ ID NO.3所示。该基因片段用于降低灰飞虱抗药性。本发明可用于检测灰飞虱的抗药性，并实现对灰飞虱的抗药性治理。

摘要： 本发明提供一种可集采集、饲养与试验操作于一体的茶小绿叶蝉抗药性监测装置，包括筒盖、筒身、连接环和筒座依次连接形成的中空筒体，连接环套设在筒身与筒座外，筒盖中央开设有第一通孔，第一通孔向筒体内延伸有一内筒，内筒底端开口，内筒内放置有一载物杯，筒座上密布有第二通孔。本发明还提供了一种方便单人操作的茶小绿叶蝉抗药性测定方法，其步骤包括用药剂处理茶小绿叶蝉后，观察茶小绿叶蝉的存活情况。本发明的有益效果在于：各个部件便于拆卸，可方便地进行采集、饲养和试验操作；设有内筒，内筒内放置有一载物杯，可防止茶小绿叶蝉逃出；本发明茶小绿叶蝉采集、饲养和监测方法单人即可完成大批量的实验操作，减小了实验误差。

摘要： 本发明提供一种柑橘木虱抗药性监测装置和抗药性测定方法，用于解决现有技术中柑橘木虱抗药性实验操作繁琐，效率低的问题；包括：底座、支撑架、柑橘木虱投放系统、药物喷洒系统和保温系统。所述支撑架固定安装在所述底座上，所述支撑架上设有横向运动模组，所述横向运动模组上设有纵向运动模组。所述柑橘木虱投放系统设置在所述纵向运动模组上，所述柑橘木虱投放系统包括暗箱、暗管和第一伸缩元件，所述保温系统包括保温罩和保温灯，通过所述柑橘木虱投放系统和所述药物喷洒系统能够自动向所述培养管中投放特定数目的柑橘木虱和自动喷洒特定浓度的农药，并且可以用于短期培养柑橘木虱，提高了实验效率，节省人力和时间。

摘要： 本发明属于植物基因工程技术领域，具体涉及一种喀斯特炭疽菌及其在橡胶炭疽病研究领域的应用。本申请于海南省橡胶树上首次发现喀斯特炭疽的发生，分离得到的菌株为C.karstii。生物学特性测定发现，该菌株最适生长温度为28°C，致死温度为35°C；最适生长pH为6；光暗交替利于菌落生长；果胶、蛋白胨分别为最适碳源和氮源。致病力评价发现其对PR107、RRIM600、热研7‑33‑97和大丰95四个主推品种均有较强致病力；抗药性评价结果表明，菌株HcgHNQZ1736对甾醇脱甲基抑制剂类(DMIs)杀菌剂咪鲜胺锰盐不具抗药性，对苯并咪唑类杀菌剂多菌灵表现出高抗药性。

摘要： 本发明涉及灰飞虱抗药性雌激素相关受体基因LSERR、降低灰飞虱抗药性的基因片段及其应用。该灰飞虱抗药性雌激素相关受体基因LSERR的序列如SEQ ID NO.1所示。该降低灰飞虱抗药性的基因片段序列如SEQ ID NO.3所示。该基因片段用于降低灰飞虱抗药性。本发明可用于检测灰飞虱的抗药性，并实现对灰飞虱的抗药性治理。

摘要： 本发明涉及灰飞虱抗药性基因CYP6AY3v2、降低灰飞虱抗药性的基因片段及其应用。该灰飞虱抗药性基因CYP6AY3v2的序列如SEQ ID NO.1所示。该降低灰飞虱抗药性的基因片段序列如SEQ ID NO.3所示。该基因片段用于降低灰飞虱抗药性。本发明可用于检测灰飞虱的抗药性，并实现对灰飞虱的抗药性治理。