胶质瘤干细胞

摘要： 目的探索溶质运载蛋白16A家族成员10(SLC16A10)在胶质瘤干细胞(GSC)中的功能,为针对GSC的脑胶质瘤治疗提供新的潜在靶点。方法387GSC培养于含10%胎牛血清的DMEM培养基中7 d,分化为387非干性肿瘤细胞(387NSTC),RT-qPCR检测387GSC和387NSTC中SLC16A10、性别决定区Y框蛋白2(SOX2)、少突细胞谱系转录因子2(Olig2)和神经胶质纤维酸性蛋白(GFAP)mRNA水平。构建靶向SLC16A10基因的干涉质粒,并进行慢病毒包装。慢病毒感染387GSC 48 h,嘌呤霉素(2 mg·L^(-1))筛选2 d,Western印迹法检测SLC16A10蛋白表达水平,验证敲低效果。CellTiter-Glo试剂盒检测敲低SLC16A10后387GSC相对细胞活力和肿瘤细胞球形成数目。免疫荧光法检测387GSC中SLC16A10蛋白的细胞定位。结果与387GSC相比,387NSTC中SLC16A10 mRNA水平显著降低(P<0.01),同时肿瘤干细胞标志物SOX2和Olig2 mRNA水平表达显著降低(P<0.01),非干细胞标志物GFAP表达显著升高(P<0.01),表明387GSC已分化为387NSTC。敲低SLC16A10后,387GSC相对细胞活力显著下降(P<0.01),肿瘤细胞球数目明显减少(P<0.01)。免疫荧光法结果表明,387GSC中SLC16A10未定位于细胞核。结论SLC16A10在387GSC中高表达,其敲低后387GSC增殖及肿瘤自我更新能力均被显著抑制,提示SLC16A10在脑胶质瘤发生发展中发挥重要作用。

摘要： 目的 探讨人脑胶质瘤组织内的胶质瘤干细胞(GSCs)标志物CDl33、肿瘤相关巨噬细胞(TAMs)标志物CD68和PD-L1在不同病理分级脑胶质瘤组织中表达及其相关性。方法 选取脑胶质瘤患者68例,根据病理分级不同,分为低级别组34例(WHOⅢ级、Ⅳ级),高级别组34例(WHOⅠ级、Ⅱ级),取两组标本进行石蜡包埋切片,应用免疫荧光法检测不同病理分级脑胶质瘤组织内CD68和PD-L1蛋白的含量;采用实时荧光定量PCR技术检测两组脑胶质瘤组织内的CDl33、PD-L1和CD68 mRNA的表达,并分析其与临床病理级别的相关性。结果 在高级别组脑胶质瘤组织中CD133、CD68和PD-L1表达量较低级别组升高,差异显著(P<0.001)。在脑胶质瘤组织内CD133、PD-L1和CD68的表达与不同病理分级呈正相关(P<0.001)。结论 PD-L1在胶质瘤组织内主要通过肿瘤微环境中的TAMs进行表达;脑胶质瘤的恶性程度与CDl33、PD-L1和CD68表达密切相关。

摘要： 目的:探究转录因子TWIST对胶质瘤干细胞侵袭、迁移的影响,并探讨与微小RNA(microRNA,miR)-145之间的关系。方法:以人神经胶质瘤细胞U251为研究对象,提取干细胞并经免疫荧光染色CD133、胶质纤维酸性蛋白(glial fibrillary acidic protein, GFAP)鉴定。实验分组:对照组、过表达对照组、TWIST过表达组、沉默对照组、TWIST沉默组,分别用pcDNA3、pcDNA3-TWIST、pGPH1-shNC、pGP-TWIST-shRNA转染提取并鉴定后的干细胞。实时荧光定量PCR(RT-qPCR)法检测各细胞中TWIST mRNA和miR-145水平;蛋白质免疫印迹实验检测细胞中TWIST、基质金属蛋白酶(matrix metalloproteinase, MMP)-2、MMP-9蛋白水平;Transwell检测细胞侵袭和迁移情况;划痕实验检测细胞迁移情况;双荧光素酶鉴定miR-145与TWIST的靶向关系。结果:干细胞分选与鉴定:CD133阳性干细胞约占5.6%左右;分选后细胞用CD133和GFAP染色显示双阳性。与对照组相比,TWIST过表达组细胞中TWIST mRNA和蛋白水平,细胞侵袭、迁移数量,愈合率,细胞中MMP-2、MMP-9蛋白水平升高(P0.05)。miR-145与TWIST存在结合位点并经双荧光素酶靶向关系验证。结论:升高TWIST能够促进胶质瘤干细胞侵袭、迁移,且能靶向miR-145发挥作用。

摘要： 目的研究GRK5-Moesin通路在胶质瘤中的分布特点及作用。方法采用慢病毒转染法制备GRK5上调/下调的胶质瘤细胞系,Western blot和qRT-PCR鉴定转染效果,Western blot分析GRK5改变对Moesin表达的影响。免疫荧光分析GRK5与Moesin在胶质瘤组织中的亚细胞定位及分布特征。采用CCK-8法、细胞划痕法、Transwell法和流式细胞术分别检测U87细胞增殖、迁移、侵袭和凋亡情况。结果GRK5、Moesin及CD44共定位于胶质母细胞瘤的细胞膜。GRK5-Moesin-CD44在胶质瘤壁龛结构中富集表达。GRK5-Moesin与胶质瘤血管关系密切,但各血管中的GRK5和Moesin分布位置存在差异。靶向GRK5-Moesin可影响U87胶质瘤细胞生物学活性。结论GRK5-Moesin可促进胶质母细胞瘤的恶性进展,并且与胶质瘤干细胞关系密切。

摘要： 目的 探讨核因子-κB(NF-κB)抑制剂四氢化吡咯二硫代氨基甲酸酯(PDTC)对胶质瘤干细胞放射治疗增敏的效用。方法 用无血清悬浮培养法培养胶质瘤干细胞,培养后,将细胞分成C组(加二甲基亚砜30μmol/L)、PDTC组(30μmol/L,加PDTC)、放疗组(8 Gy,加二甲基亚砜30μmol/L)和PDTC联合放疗组。采用Western blot比较各组放疗后36 h、48 h、72h胶质瘤干细胞中NF-κB蛋白表达及细胞凋亡情况。结果 X线照射后,胶质瘤干细胞中NF-κB蛋白表达明显增加,与C组比较差异有显著性(P<0.05),而PDTC可下调NF-κB蛋白表达,差异有统计学意义(P<0.05)。PDTC组、放疗组和联合组的胶质瘤干细胞凋亡率与C组比较,依次半圆(1.50±0.16)倍、(2.48±0.15)倍、(6.55±0.24)倍。结论 NF-κB通路在胶质瘤干细胞的放射治疗中起关键作用,并可以作为对胶质瘤干细胞放疗增加敏感性的重要靶点。

摘要： 目的 构建基于脂肪源性干细胞的alphastatin肽胶质瘤靶向载体并检测其体外抗血管生成作用。方法 构建alphastatin肽慢病毒表达载体并转染脂肪源性干细胞(adipose derived stem cell, ADSCs),构建基于ADSCs的alphastatin肽胶质瘤靶向载体,流式细胞仪检测alphastatin肽胶质瘤靶向载体干细胞表面标志物表达情况,Western blotting及ELISA法分别检测alphastatin肽胶质瘤靶向载体中及细胞培养上清液中alphastatin肽表达情况;细胞迁移实验检测alphastatin肽胶质瘤靶向载体对CD133+胶质瘤干细胞趋向性;体外管腔形成实验检测alphastatin肽胶质瘤靶向载体在体外对内皮细胞血管生成的影响。结果 经转染后alphastatin肽胶质瘤靶向载体表达干细胞表面标志物与普通脂肪源性干细胞相比无明显变化;Western blotting结果显示,alphastatin肽胶质瘤靶向载体能够成功表达alphastatin肽;ELISA结果显示,在alphastatin肽胶质瘤靶向载体培养上清液中可检出alphastatin肽分泌[FLAG质量浓度(54.65±5.63)mg/L];细胞迁移实验显示,alphastatin肽胶质瘤靶向载体与普通脂肪源性干细胞对CD133+胶质瘤干细胞趋向性差异无统计学意义[迁移细胞数(106.67±2.41)个/HPF vs.(109.47±2.55)个/HPF,P>0.05];管腔形成实验显示,alphastatin肽胶质瘤靶向载体在体外能抑制内皮细胞介导的血管生成[管腔计数(7.27±0.31)个/HPF vs.(19.40±1.71)个/HPF,P<0.01]。结论 在构建基于ADSCs的alphastatin肽胶质瘤靶向载体过程中,靶向载体干细胞生物学特性及肿瘤趋向性无明显改变,且能够稳定表达并分泌alphastatin肽并在体外对内皮细胞介导的血管生成具有抑制作用。

摘要： 目的 观察miR-182靶向调控PI3K/AKT/FOXO3a信号通路对胶质瘤干细胞(GSCs)生物学行为的影响,并研究其作用机制.方法 成功从胶质瘤患者病灶组织中分离出GSCs并予以培养、传代及鉴定,分为空白对照组(生理盐水溶液)、miR-182 mimics组(细胞转染miR-182 mimics)及阴性对照组(细胞转染无意义序列),细胞转染后倒置荧光显微镜下观察miR-182 mimics的转染效率,检测各组miR-182 mRNA表达水平及增殖、迁移、侵袭、凋亡等生物学行为改变,同时检测PI3K/AKT/FOXO3a信号通路相关蛋白(PI3K、p-AKT、FOXO3a)表达水平.结果 miR-182 mimics组miR-182 mR-NA表达水平明显高于空白对照组及阴性对照组(P0.05);miR-182 mimics组细胞转染后24、48及72 h时的细胞增殖率及迁移、侵袭能力明显高于空白对照组及阴性对照组(P0.05);miR-182 mimics组胶质瘤干细胞转染miR-182 mimics后PI3K、p-AKT蛋白表达水平明显高于空白对照组和阴性对照组(P0.05).结论 miR-182可能通过激活活化PI3K/AKT/FOXO3a信号通路而起到增强GSCs增殖、迁移及侵袭能力和抑制细胞凋亡的作用,可能作为临床治疗胶质瘤的新靶点.

摘要： 目的 探讨SNORA31在胶质瘤干细胞?(GSCs)?中的表达以及抑制GSCs血管生成拟态的作用机制.方法 对中国脑胶质瘤基因组图谱(CGGA)数据库中的患者预后数据与SNORA31表达量进行生存分析.采用qRT-PCR检测GSCs中SNORA31表达.敲减SNORA31后Western?blotting检测促红细胞生成素肝细胞受体A2(EphA2)表达,细胞外调节蛋白激酶1/2(ERK1/2)和磷酸肌醇3激酶(PI3K)表达与磷酸化水平;CCK8和Transwell检测GSCs增殖、迁移和侵袭的变化;基质胶三维管形成实验检测血管生成拟态能力的变化.结果 与亲本细胞比较,SNORA31在GSCs中的表达显著增高?(P?

摘要： 胶质母细胞瘤(glioblastoma multiforme,GBM)是成人最常见的颅内原发性恶性肿瘤,中位生存期约15个月[1]。目前,新诊断的GBM标准治疗包括最大化安全切除、替莫唑胺化疗联合同步放疗等[2]。即使采用综合治疗,很短时间内仍不可避免地出现复发,预后不良。由于肿瘤的异质性、化疗耐药性、血脑屏障(blood-brain barrier,BBB)等因素,使得GBM的传统治疗面临巨大的挑战。

摘要： 目的探讨胶质瘤干细胞(GSCs)外泌体(exo)对胶质瘤U87细胞侵袭、迁移的影响。方法取对数生长期U87细胞,应用干细胞培养液分离、培养胶质瘤U87细胞中GSCs并提取、鉴定GSCs-exo。取对数生长期U87细胞随机分为4组:对照组和高、中、低GSCs-exo浓度组(分别加入20、40、80μg/ml的GSCs-exo)。Transwell实验检测U87细胞侵袭能力,划痕实验检测U87细胞迁移能力,免疫印记法检测U87细胞磷脂酰肌醇-3激酶(PI3K)/蛋白激酶B(Akt)、L1CAM的表达水平。结果成功分离GSCs并获得GSCs-exo。GSCs-exo组U87侵袭细胞数、细胞迁移率明显高于对照组(P<0.05),L1CAM、PI3K及p-AKt/Akt表达水平明显高于对照组(P<0.05),而且均呈浓度依赖性(P<0.05)。结论GSCs-exo可促进胶质瘤侵袭与转移,其机制可能与上调L1CAM、PI3K表达,促进Akt磷酸化有关。

摘要： EGFRvⅢ是胶质瘤中EGFR的主要突变体.EGFRvⅢ与胶质瘤干细胞关系密切,但其分子机制尚不清楚.在此,认为色素上皮衍生因子(PEDF)是介导EGFRvⅢ诱导的胶质瘤干细胞的重要分泌因子.EGFRvⅢ通过STAT3磷酸化诱导PEDF的表达和分泌,增强胶质瘤干细胞(GSCs)的自我更新能力.PEDF通过Notch1切割来维持GSC的自我更新,而Noch1(NICD)的胞内结构域(NICD)通过与其启动子区域的相互作用而诱导Sox2的表达.沉默PEDF在GSCs中的表达会降低GSCs的自我更新能力和致瘤潜能,并提高小鼠的存活率.此外,只有表达EGFRvⅢ的GSCs具有较高的PEDF水平,才能沿胼胝体浸润.观察显示PEDF表达与胶质母细胞瘤患者预后不良有关,提示PEDF是治疗浸润性GSCs的新靶点.

摘要： 胶质瘤肿瘤间质中源于宿主的细胞可被胶质瘤干细胞诱导恶变,本文旨在初步探索这些恶变细胞的放射敏感性及可能的分子机制.提出双色荧光示踪的胶质瘤原位移植模型在肿瘤活体成像及研究肿瘤细胞侵袭、转移、肿瘤血管生成和肿瘤周边微环境中宿主固有细胞被激活等方面，具有更高的实用价值。在胶质瘤微环境中，肿瘤间质恶变的宿主少突胶质细胞ihBTC2对射线更加抵抗，可能与Notch信号通路激活密切相关，这对进一步研究肿瘤间质细胞与肿瘤放疗敏感性之间的关系有重要价值，为进一步探索胶质瘤耐辐射的新机制提供参考依据。

摘要： 本研究旨在探讨调节胶质瘤干细胞Cathepsin L及自噬活性对胶质瘤干细胞(glioma stem cells,GSCs)辐射敏感性的影响及Cathepsin L及自噬活性对胶质瘤干细胞与辐射抗性的关键联系.研究发现，体内和体外实验中抑制Cathepsin L活性后再联合X射线处理GSCs, GSCs出现生长阻滞，GSGs移植瘤生长局限，干细胞表面标志表达减少，出现凋亡和线粒体膜电位下降，DNA损伤修复减慢，DNA修复相关蛋白DNA-PKcs和p-ATM的表达量降低:体内和体外实验中用Resveratrol联合X射线处理GSCs, GSCs出现生长阻滞，GSCs移植瘤生长受抑制，DNA损伤修复减慢，凋亡和自噬水平上调。本研究结果提示，调控自噬/Cathepsin L活性对GSCs的辐射敏感性起着重要作用，本实验结果为胶质瘤治疗提供了有效的作用靶点。

摘要： 胶质瘤干细胞概念的提出使我们更深入的认识了胶质瘤的发病机制,对胶质瘤干细胞进行全面了解、鉴定将为该病的治疗带来新的契机.作为鉴定干细胞的分子标记物就显得尤为重要,是进一步证实胶质瘤干细胞存在和选择抗肿瘤靶向药物的关键.本文就胶质瘤干细胞标记物的研究进展作一综述.

摘要： 目的：O6甲基鸟嘌呤DNA甲基转移酶(O6methylguanine DNA methyltranferase，MGMT)是恶性胶质瘤烷化剂类化疗耐药的重要机制之一；同样，胶质瘤干细胞(gliomastem cells，GSCs)也被认为是肿瘤复发、耐药的根源。本研究探讨临床常用抗肿瘤药物干扰素-α／β对于MGMT阳性胶质瘤干细胞的作用，观察其是否能增敏替莫唑胺(Temozolomide，TMZ)化疗及其可能机制。方法：采用“悬浮克隆球形成法”对胶质瘤细胞株U251、SKMG-4进行诱导，获得MGMT 阳性的胶质瘤干细胞U251G、SKMG-4G；应用CCK-8法检测干扰素-α／β联合替莫唑胺对MGMT阳性胶质瘤干细胞的杀伤效应；分别应用逆转录PCR(RT-PCR)、Western-blot检测干扰素-α／β作用后，MGMT阳性胶质瘤干细胞MGMT、NF-Kappa B表达的变化。结果：应用悬浮克隆球形成法，成功将U251、SKMG-4诱导为U25lG、SKMG一4G，Western-blot检测显示胶质瘤干细胞中MGMT蛋白表达明显增高。对MGMT阳性胶质瘤干细胞体外杀伤实验显示，干扰素-α／β作用后提高了替莫唑胺的化疗敏感性，杀伤效应显著增强；RT-PCR、Western-blot检测结果表明，干扰素-α／β作刚后，MGMT阳性胶质瘤干细胞NF-KB、MGMT在mRNA及蛋白水平表达均明显降低。结论：对于MGMT刚性的胶质瘤干细胞，干扰素-α／β能够显著增敏替英唑胺的化疗效应，显示出较好的杀伤作用。其机制可能是干扰素-α／β干预后，下调NF-KB的转录，从而降低了MGMT的转录表达，逆转替莫唑胺的化疗耐药。

摘要： 目的:探讨胶质瘤干细胞(GSC)对替莫唑胺(TMZ)的敏感性及可能的耐药机制。rn 方法:新鲜多形性胶质母细胞瘤(GBM)标本培养后获得GSC。免疫荧光技术检测未分化GSC的CD133及分化生长GSC的GFAP的表达，MTS法检测对替莫唑胺的敏感性，流式细胞技术对CD133阳性细胞的比例进行定量，荧光标记的甲基化特异性PCR分析MGMT启动子区域的甲基化状态，Westernblot检测抑癌基因PTEN的表达。rn 结果:(1)5例GBM标本中成功获得GSC，符合肿瘤干细胞定义。(2)5个GSC细胞株多数对TMZ不敏感。其中，T509的半数抑制浓度(IC50)为22.3 μmol／L(敏感)，T411的IC50为286.3 μmol／L(中度敏感)，其余3个细胞株T402，T405及T509的IC50皆大于1000μmol／L(不敏感)。(3)CD133 阳性细胞比例大于10％的GSC细胞株对TMZ不敏感。(4)MGMT启动子区域呈去甲基化状态的GSC对TMZ不敏感或仅为中度敏感。(5)5个GSC细胞株中，PTEN表达水平差异大，与GSC对TMZ的敏感性无明显关联。rn 结论:GSC对TMZ普遍耐药，与MGMT启动子区域甲基化状态及CD133阳性细胞有关，而与PTEN蛋白表达水平无明显关联。

摘要： 本研究观察活血化瘀方剂对BTSCs的侵袭行为及肿瘤侵袭相关基因表达的影响,试图探寻能够抑制BTSCs侵袭扩散的有效方剂.本研究采用Boyden侵袭小室的方法测定C6BTSCs的体外侵袭力，结果表明受活血化癖中药作用的C6BTSC细胞体外侵袭能力受到明显抑制。

摘要： 目的：检测CDl33、Nestin、CD31和VEGF在胶质母细胞瘤干细胞和肿瘤微血管系统中的表达，探讨脑胶质母细胞瘤干细胞在肿瘤血管的生成中所起的作用。方法：(1)采用免疫组织化学SP法检测CD133和Nestin在70例胶质母细胞瘤组织中的表达。(2)采用免疫荧光双染法检测CD133／CD31、CD133／Nestin、Nestin／CD31和VEGF／CD31的共表达情况，计算CD133+细胞、CDl33+血管、Nemin+细胞和Nestin+血管所占的百分率，并进行统计学分析。结果：CD133+肿瘤干细胞或Nestin+肿瘤干细胞不仅在脑胶质母细胞瘤中有表达，并且表达于血管内皮细胞。在CD133+肿瘤干细胞或Nestin+肿瘤干细胞分布的区域有丰富的CD133+血管或Nestin+血管表达，同时可见肿瘤干细胞包绕着血管生长。并且，CD133+细胞或Nestin+细胞的百分比与CDl33+血管(r=0．482，P=0．002)或Nestin+血管(r=0．390，P=0．015)的表达呈正相关。免疫荧光双染可见，CD133+细胞或Nestin+细胞聚集于CD31+血管周围，并且，CD133+／CD31+、Nestin+／CD31+细胞共表达于血管内皮细胞。同时，我们还发现VEGF和CD31能够在胶质母细胞瘤干细胞中得到共表达。结论：在本研究中发现，血管内皮细胞可表达肿瘤干细胞的标记物，与此同时，在脑胶质母细胞瘤干细胞中同样可表达血管内皮细胞标记物，因此，肿瘤内微血管可能来源于肿瘤干细胞的分化，并且肿瘤干细胞聚集于微血管周围生长呈巢状分布。

摘要： 目的:探索CD133阳性细胞和Nestin阳性细胞在人脑星形细胞瘤组织中的局部分布特征。rn 方法:采用免疫组织化学方法定位胶质瘤干细胞，光镜观察CD133阳性细胞和Nestin阳性细胞在瘤组织中的分靠特征。rn 结果:1、WHO级别不同的脑星形细胞瘤之间和同一肿瘤组织不同区域中CD133阳性细胞的分布表现出极大的变异性，且具有其特异的局部解剖学特征:阳性细胞一般同绕微血管分布，单个阳性细胞常常紧贴在血管外壁上，在瘤周水肿明显的区域中单个阳性细胞也可散在分布而不依附在血管外壁上，簇状或巢状分布一般都是近血管分布，而且阳性细胞的形态也不一致;CD133无论在新生发芽的肿瘤性血管内皮细胞上还是在成熟的血管上均无表达;2、Nestin阳性细胞在瘤组织中的分布具有与CD133阳性细胞一样的局部解剖学特征，但是Nestin还可在新生发芽的肿瘤性血管内皮细胞上表达。rn 结论:CD133及Nestin阳性细胞在脑星形细胞瘤组织局部分布呈近微血管和富集于水肿区特征;肿瘤新生血管内皮细胞为Nestin阳性细胞。

摘要： 本实用新型公开了一种胶质瘤患者原代肿瘤细胞及神经干细胞分离试剂盒，涉及试剂盒技术领域，包括分体的大试剂盒和小试剂盒，所述大试剂盒和小试剂盒均包括盒体以及与所述盒体卡扣连接的盒盖，所述盒体的底部设有缓冲层A，在所述缓冲层A的上部设有固定层A，在所述盒盖的顶部设有缓冲层B，在所述缓冲层B的下部设有固定层B，固定层A和固定层B均设有多个限位孔，固定层B的限位孔与固定层A的限位孔数量及位置相同，大试剂盒的固定层A设有14个限位孔，小试剂盒的固定层A设有8个限位孔，限位孔用于放置装有试剂的试剂瓶。具有方便携带、便于储运、成功率高、成本低的特点。

摘要： 本发明公开了细胞培养技术领域的一种胶质瘤干细胞培养用胶质瘤组织无菌剔除破碎装置及破碎方法，包括底板，底板上端表面滑动连接有滑动板且底板上表面左右两侧位置对称固定连接有固定板，左右两侧固定板之间位置设有驱动块，驱动块底端位置设有研磨机构；底板表面后侧位置设有剔除机构，剔除机构用于剔除胶质瘤组织被研磨机构研磨破碎后不合格的部分剔除掉；该装置通过分段式的研磨破碎胶质瘤组织，可以有效地提升胶质瘤组织的研磨破碎效果，同时将胶质瘤组织中含有的其他组织一同研磨破碎，可以便于将胶质瘤组织中含有其他组织的部分剔除掉，从而可以有效地提升胶质瘤干细胞培养的效果。

摘要： 本发明提供KMT5A在调控胶质瘤干细胞特性及胶质瘤诊治中的应用，属于生药医药和分子生物学技术领域。本发明研究发现KMT5A(赖氨酸甲基转移酶5A)基因及其表达产物在胶质瘤干细胞中表达上调，且与胶质瘤分级的增加呈正相关；KMT5A的表达量与胶质瘤的预后相关。并且通过调控KMT5A的表达可控制胶质瘤干细胞成球能力(GSC stemness)及肿瘤干细胞标志物的表达水平。同时，研究进一步发现，在胶质瘤干细胞中KMT5A特异性抑制剂UNC0379可以通过抑制其催化的组蛋白4赖氨酸20位甲基化修饰(H4K20me1)进而抑制胶质瘤细胞的增殖，因此具有良好的实际应用之价值。

摘要： 本发明提供制备靶向胶质瘤和胶质瘤干细胞的抗原组合物的方法，所述方法包括：(1)提供分离的含有胶质瘤干细胞和胶质瘤细胞的细胞群；(2)扩增所述细胞群中的胶质瘤干细胞；(3)对上述扩增之后的细胞群进行冻融裂解处理；从而得到含有胶质瘤干细胞裂解物和胶质瘤细胞裂解物的抗原组合物。本发明还提供含有由上述方法制备的抗原组合物、树突状细胞以及CpG寡核苷酸的疫苗，该疫苗在制备用于治疗胶质瘤的药物中的应用。本发明的抗原组合物和疫苗能够同时靶向胶质瘤和胶质瘤干细胞，从而能够有效杀伤残留的胶质瘤干细胞及胶质瘤细胞，抑制胶质瘤复发。

摘要： 本发明公开了NUP98基因作为胶质瘤干细胞特异性分子标志物和胶质母细胞瘤治疗及预后靶点的应用，NUP98调控DNA损伤修复是与转录因子P65的结合，并调控P65的转录活性来实现，NUP98过表达与脑肿瘤患者低生存率相关。NUP89表达水平作为胶质母细胞瘤的标志物，NUP89作为胶质母细胞瘤标志物的诊断准确性为93％，诊断特异性为100％，敏感性为85.4％。

摘要： 本发明提供一种促胶质瘤干细胞分化的过表达BMP4的神经干细胞的制备方法，其中，所述方法包括通过获取BMP4基因片段，构建到病毒载体上，转染人神经干细胞制备成过表达BMP4的神经干细胞，体外实验中与胶质瘤干细胞共培养，BMP-4与BMP受体结合活化，可以促进胶质瘤干细胞分化，体内实验中能转移到肿瘤病灶位，抑制胶质瘤的生长和转移复发；本发明还提供了过表达BMP4的神经干细胞及其治疗胶质瘤的临床应用，该神经干细胞将能诱导胶质瘤干细胞分化治疗，对胶质瘤降低恶性程度，从而达到靶向清除胶质瘤干细胞的目的。

摘要： 本发明涉及一种来源于人的干细胞样脑胶质瘤细胞株及其用途，该细胞株命名为G1335，保藏号为CGMCC No:7403，具有胶质瘤细胞的典型形态；具有染色体高度突变特性；具有形成神经球特性；长期维持体外稳定生长状态；表达脑胶质瘤和肿瘤干细胞表面标志分子；具有高度耐药性和体内成瘤特点；IL-6信号和CD40信号肿瘤环境因素促进G1335生长、迁移和肿瘤血管生成的恶性生物学行为，能够表达神经干细胞标志nestin、肿瘤干细胞标志CD133和星形胶质细胞标志GFAP。该G1335为关于脑胶质瘤干细胞生长、分化、侵袭、迁移和形成新生血管以及细胞内信号转导等病理机理的体内外研究提供一个稳定可靠的细胞模型；此外还为靶向脑胶质瘤干细胞的各种天然药物和合成药物的筛选及作用机理的体内外研究提供稳定的重复性好的细胞模型。

摘要： 本发明提供一种CD133+脑胶质瘤干细胞抗原负载的树突状细胞的制备方法、该CD133+脑胶质瘤干细胞抗原负载的树突状细胞在制备抗脑胶质瘤药物中的应用，以及包括该CD133+脑胶质瘤干细胞抗原负载的树突状细胞的疫苗。由本发明提供的CD133+脑胶质瘤干细胞抗原负载的树突状细胞以及包括该CD133+脑胶质瘤干细胞抗原负载的树突状细胞的免疫组合物制备的药物，能够在体内和体外杀死引起脑胶质瘤复发的脑胶质瘤干细胞，从而为克服脑胶质瘤耐药性、根治脑胶质瘤的复发和转移提供了可能。

摘要： 本发明提供了促进胶质瘤干细胞凋亡的小分子抑制剂及其用途。所述小分子抑制剂为OSMI‑1，本发明证明了小分子抑制剂OSMI‑1在促进胶质瘤干细胞凋亡中的新用途，因此可将其用于制备治疗胶质母细胞瘤的药物组合物。

摘要： 本发明属于胶质瘤技术，具体涉及一种应用CRISPR/Cas9和split GFP双分子荧光互补技术标记胶质瘤干细胞标志物LGR5的方法及试剂盒，克服因缺乏高特异性的抗体，使得现有方法无法准确检测LGR5在GSCs中的内源蛋白表达水平的难题。本发明巧妙的应用CRISPR/Cas9技术用较小的亚基GFP11标记LGR5蛋白，同时构建稳定表达较大亚基GFP1‑10蛋白的GSCs。当两个片段在同一细胞内，这两个部分能够稳定地相互作用，产生具有发光功能的GFP，从而可检测胶质瘤干细胞中的LGR5内源表达水平。其检测方法稳定性好，便于推广。