CD133

摘要： 背景:肝癌干细胞是导致癌细胞形成、更新和增殖的原因,寻找针对肝癌干细胞治疗的关键靶点,并进一步拓展肝癌综合治疗手段是重要研究课题。目的:观察β-catenin基因沉默后CD133+HepG2细胞干性转录因子变化,探讨β-catenin调控肝癌干细胞干性的作用机制。方法:采用免疫磁珠筛选CD133+HepG2细胞,然后经干细胞培养基诱导、扩增方案获得CD133+HepG2肝癌干细胞,流式细胞术鉴定CD133+HepG2细胞阳性率,RNA干扰技术构建沉默β-catenin基因表达的β-catenin-shRNA慢病毒质粒,转染CD133+HepG2肝癌干细胞72 h,荧光标记并评估转染效率。确认β-catenin沉默后,平板克隆形成实验观察CD133+HepG2肝癌干细胞增殖情况,流式细胞术检测CD133+HepG2肝癌干细胞的细胞周期,qRT-PCR和Western blot检测干性转录因子SOX2,NANOG,OCT4的mRNA及蛋白表达水平。结果与结论:与空白对照组和病毒空载组相比,病毒干扰组的细胞克隆形成能力明显降低,G_(0)/G_(1)期细胞百分比明显增多,S期和G_(2)/M期细胞百分比降低,NANOG、SOX2、OCT4的蛋白和mRNA表达水平明显降低(P<0.05),提示下调β-catenin表达可能对抑制肝癌干细胞的干性水平具有潜在作用。

摘要： 髓质海绵肾(MSK)是一种肾脏畸形,通常表现为肾钙质沉着症和复发性肾结石等,同时需要使用昂贵且耗时的静脉尿路造影(IVU)进行诊断。尽管IVU仍然是目前诊断MSK的金标准,但其他方法如多层螺旋CT(MDCT)、核磁共振成像(MRI)、乃至生物标志物正在迅速崛起,为MSK的早期检测和诊断提供了希望。本文对MSK最新的影像学检查、生物标志物的诊断方法进行综述。

摘要： 目的构建偶联CD133核酸适体载紫杉醇的聚乳酸-乙醇酸-聚乙二醇(PLGA-PEG)纳米载体(N-Pac-CD133)拟清除肺癌干细胞。方法采用乳液/溶剂蒸发的方法制备N-Pac-CD133,同时对N-Pac-CD133进行表征,利用磁珠分离法分离出CD133^(+)肺癌干细胞后并对该群体的肺癌干细胞特异性进行检测,同时对肺癌细胞的靶向性和杀伤活性进行检测。小鼠体内接种A549肿瘤后,肿瘤治疗分组:生理盐水,空纳米载体链接CD133核酸适体(N-CD133),紫杉醇,负载紫杉醇的纳米载体(N-Pac)和N-Pac-CD133,8只/组,5 mg/kg紫杉醇,分别于第10、15和20天进行注射。在第40天时,处死小鼠后,对肿瘤进行摘除并称重,同时测量小鼠的体质量。结果 N-Pac-CD133的粒径为100 nm左右,包封率>80%,载药量>8%,在48 h内都显示出持续的药物释放。肺癌细胞的CD133^(+)细胞群体表现出肺癌干细胞的特征:更快的肺癌生长速度(30 d,P=0.001)和更高的肿瘤干细胞基因表达:OV6(P<0.001)、CD133(P=0.001)、OCT3/4(P=0.002)、EpCAM(P=0.04)、NANOG(P=0.005)和CD44(P=0.02)。与非靶向N-Pac和紫杉醇相比,N-Pac-CD133对肺癌干细胞的靶向性(P<0.001)和细胞毒性作用显著增强。另外,N-PacCD133可显著减少肿瘤球的形成(P<0.001)。在治疗终点时,取小鼠肿瘤并对肿瘤进行称量,N-Pac-CD133治疗组和其他治疗组相比,肿瘤体质量显著减小(P<0.001)。结论 CD133核酸适体可以促进紫杉醇纳米载体靶向递送至CD133^(+)肺癌干细胞并杀伤肺癌干细胞。N-Pac-CD133可能是一种有效的靶向肺癌干细胞的治疗手段。

摘要： 目的通过生物信息学方法筛选出CD133^(+)与CD133^(-)人原代胃癌细胞的差异表达基因(DEGs),寻找可能参与胃癌发生的关键基因。方法根据人CD133^(+)和CD133^(-)人原代胃癌细胞的转录组数据,以|log2FC|≥1,P<0.05为标准筛选DEGs;用Metascape对DEGs进行基因本体论(GO)富集及京都基因和基因组数据库(KEGG)通路富集分析,利用STRING数据库及Cytoscape 3.8.0软件构建蛋白质^(-)蛋白质相互作用(PPI)网络,筛选核心基因;利用肿瘤基因组图谱(TCGA)数据库分析核心基因与胃癌患者总生存率的关系。结果在CD133^(+)与CD133^(-)人原代胃癌细胞间筛选出305个DEGs,其中下调的DEGs 227个,上调的DEGs 78个;这些DEGs主要参与钙离子通道调节、DNA复制及DNA的代谢过程;KEGG通路分析提示DEGs主要富集于IL^(-)17信号通路、RNA运输以及MAPK信号通路;PPI筛选出20个关键基因,其中趋化因子8(CXCL8)、TCP1伴侣蛋白亚基2(CCT2)、核糖体产物因子2(RPF2)、蛋白酶体20S亚基α4(PSMA4)、胞质伴侣素6A(CCT6A)、蛋白酶体26S亚基(PSMD12)以及凝聚素Ⅰ复合物亚基G(NCAPG)表达与胃癌患者的总生存率负相关,RUNX家族转录因子2表达与胃癌患者的总生存率正相关(P<0.05)。结论获得CD133^(+)与CD133^(-)人原代胃癌细胞的305个DEGs及20个核心基因。

摘要： 目的探讨缺氧诱导因子-1α(HIF-1α)诱导肝癌细胞中干细胞标志物CD133表达的分子机制及意义。方法将HepG2细胞随机分为空白对照组、对照组和实验组,空白对照组HepG2细胞不做转染,对照组和实验组HepG2细胞分别转染空载体慢病毒pHBLV-ZsGreen-Puro和HIF-1α高表达慢病毒pHBLV-HIF1A-3flag-ZsGreen-Puro。使用荧光显微镜观察对照组和实验组细胞中绿色荧光蛋白(GFP)的表达,并计算转染效率;采用Western blot法检测3组细胞中HIF-1α蛋白及蛋白激酶B(Akt)/核因子-κB(NF-κB)信号通路蛋白磷酸化蛋白激酶B(p-Akt)、Akt、p-p65、p65蛋白的相对表达量,流式细胞术检测对照组和实验组CD133阳性细胞率。另取实验组细胞随机分为HepG2-HIF-1α组、Akt激酶抑制剂组和NF-κB信号通路抑制剂组,Akt激酶抑制剂组和NF-κB信号通路抑制剂组细胞分别给予终浓度为0.4、0.8、1.6、3.2、6.3、12.5、25.0μmol·L^(-1) Akt激酶抑制剂及终浓度为3.0、6.0、12.5、25.0、50.0、100.0、200.0、400.0μmol·L^(-1) NF-κB信号通路抑制剂干预;采用四甲基偶氮唑盐法检测Akt激酶抑制剂组和NF-κB信号通路抑制剂组细胞活力,流式细胞术检测HepG2-HIF-1α组、Akt激酶抑制剂组和NF-κB信号通路抑制剂组CD133阳性细胞率的变化。结果对照组和实验组GFP阳性细胞比例显著高于空白对照组(P0.05)。实验组细胞中HIF-1α相对表达量显著高于空白对照组及对照组(P0.05)。对照组和实验组CD133阳性细胞率分别为(4.42±0.29)%、(15.43±0.41)%,实验组CD133阳性细胞率显著高于对照组(t=22.160,P0.05);3.0、6.0、12.5、25.0、50.0、100.0、200.0、400.0μmol·L^(-1) NF-κB信号通路抑制剂组细胞活力比较差异无统计学意义(F=2.300,P>0.05)。Akt激酶抑制剂组和NF-κB信号通路抑制剂组CD133阳性细胞率低于HepG2-HIF-1α组(t=10.170、8.932,P0.05)。结论HIF-1α可通过Akt/NF-κB信号通路促进肝癌细胞中干细胞标志物CD133的表达,增加肝癌细胞的干细胞特性。

摘要： 目的 探讨骨肉瘤干细胞差异表达microRNA(miRNA)及其对骨肉瘤干细胞的干性特性(自我更新、侵袭、凋亡)的影响。方法 采用无血清悬浮培养法和流式分选术分离鉴定骨肉瘤干细胞;分别采用成球实验、体外侵袭鉴定骨肉瘤干细胞的干性特性;高通量测序检测骨肉瘤干细胞中差异表达miRNA;采用定量逆转录PCR(qRT-PCR)技术检测相关差异表达miRNA的情况,验证miRNA结果;相关miRNA抑制剂干扰后,分别进行成球实验和侵袭实验检测miRNA对骨肉瘤干细胞自我更新、侵袭能力和细胞凋亡的影响。结果 成功分离Saos-2的CD133^(+)和CD133^(+)细胞,具有较强的自我更新能力和侵袭能力。与CD133^(+)细胞相比,CD133^(+)细胞的高表达miRNAs共有15个;低表达miRNAs共有2个。采用qPCR技术验证高通量测序差异表达miRNA相关结果,CD133^(+)亚群中miR-33b-3p、miR-3648、miR-4442、miR-5091表达上调,miR-3143、miR-3150a-5p表达下调。抑制相关高表达miRNA(miR-33b-3p、miR-3648、miR-4442、miR-5091)表达后,CD133^(+)细胞的自我更新能力和侵袭均下降,细胞凋亡上升。结论 骨肉瘤干细胞中具有多种差异表达miRNA,其对骨肉瘤干细胞的干性特性具有调控作用。

摘要： BACKGROUND Oxidized low-density lipoprotein(ox-LDL),which is abnormally increased in the serum of colorectal cancer(CRC)patients consuming a high-fat diet(HFD),may be one of the risk factors for the development of CRC.Ox-LDL exerts a regulatory effect on macrophages and may influence CRC through the tumor microenvironment.The role of ox-LDL in CRC remains unclear.AIM To investigate the role of ox-LDL through macrophages in HFD associated CRC.METHODS The expression of ox-LDL and CD206 was detected in colorectal tissues of CRC patients with hyperlipidemia and HFD-fed mice by immunofluorescence.We stimulated the macrophages with 20μg/mL ox-LDL and assessed the expression levels of CD206 and the cytokines by cell fluorescence and quantitative polymerase chain reaction.We further knocked down LOX-1,the surface receptor of ox-LDL,to confirm the function of ox-LDL in macrophages.Then,LoVo cells were co-cultured with the stimulated macrophages to analyze the CD44 and CD133 expression by western blot.RESULTS The expression of ox-LDL and the CD206 was significantly increased in the stroma of colorectal tissues of CRC patients with hyperlipidemia,and also upregulated in the HFD-fed mice.Moreover,an increased level of CD206 and decreased level of inducible nitric oxide synthase were observed in macrophages after ox-LDL continuous stimulation.Such effects were inhibited when the surface receptor LOX-1 was knocked down in macrophages.Ox-LDL could induce CD206+macrophages,which resulted in high expression of CD44 and CD133 in co-cultured LoVo cells.CONCLUSION Ox-LDL stimulates CD206+macrophages to upregulate CD44 and CD133 expression in HFD related CRC.

摘要： 目的探讨化生性乳腺癌(metaplastic breast cancer,MBC)中SOX9、CD133和EpCAM的表达、相互关系及临床意义。方法采用生物信息学技术分析MBC中SOX9表达与常见乳腺癌肿瘤干细胞标志物的相关性。采用免疫组化EnVision两步法检测42例MBC组织中SOX9、CD133和EpCAM的表达,分析三者表达的相关性及与临床病理特征的关系。结果生物信息学技术分析GEO数据集中SOX9与CD44、CD24、EpCAM、CD133和ALDH1表达的相关性,结果显示SOX9和CD133、EpCAM表达呈正相关(r_(s)=0.540,P<0.01;r_(s)=0.554,P<0.01)。MBC中SOX9、CD133和EpCAM均呈弥漫阳性,阳性率分别为83.3%、73.8%和88.1%。SOX9、CD133和EpCAM在MBC化生成分中的免疫组化评分中位数为4、4.5和6,平均数分别为5±3.4、4.5±2.7和6±3.5。SOX9表达与淋巴结转移、远处转移、TNM高分期呈正相关(P均<0.05),与无进展生存期(progression-free survival,PFS)呈负相关(P<0.05)。CD133表达与远处转移呈正相关(P<0.05),与PFS呈负相关(P<0.05)。EpCAM表达与淋巴结转移、患者年龄呈正相关(P均<0.05),与PFS呈负相关(P<0.05)。EpCAM在两种以上化生成分MBC中的表达高于单一化生成分(P<0.05)。SOX9表达和CD133及EpCAM表达均呈正相关(r_(s)=0.502,P<0.01;r_(s)=0.529,P<0.01)。SOX9、CD133和EpCAM在化生性成分中的表达均高于浸润性癌非特殊型成分(P<0.01)。多因素分析显示,SOX9与患者PFS密切相关,是影响患者预后的独立危险因素(HR=29.023,P<0.05)。结论SOX9与MBC干性特征关系密切,可作为MBC进展和预后的潜在生物学标志物。

摘要： 目的分析泛素蛋白D(UBD)、CD133在胃癌组织中的表达及相关性。方法收集102例胃癌患者的胃癌组织标本及对应癌旁组织(距离病变部位﹥3 cm)标本。比较肿瘤组织及癌旁组织中UBD、CD133的表达情况,并进行相关性分析,分析胃癌组织中UBD和CD133的表达情况与患者临床特征的关系。结果UBD、CD133在胃癌组织中的阳性表达率均明显高于癌旁组织,差异均有统计学意义(P﹤0.01)。Spearman相关性分析结果显示,UBD和CD133在胃癌组织中的表达呈正相关(r=0.613,P﹤0.01)。UBD、CD133阳性胃癌患者胃癌组织中肿瘤大小≥5 cm、肿瘤分期为T_(4b)期、分化程度为低分化和有淋巴结转移患者比例均高于UBD、CD133阴性患者,差异均有统计学意义(P﹤0.05)。结论UBD和CD133蛋白在胃癌组织中异常高表达,两者表达呈正相关,且与临床特征关系密切。

摘要： 目的探讨CD133与PANTR1在乳腺癌中的表达特征及其与细胞体外增殖和侵袭能力的关系。方法选取380例女性乳腺癌患者为研究对象,于术中取其癌组织(癌组织组)与癌旁正常组织(癌旁正常组织组),运用逆转录聚合酶链式反应(PT-PCR)法检测2组的CD133与PANTR1 mRNA相对量表达。同时取人乳腺癌(MCF-7)细胞进行培养,并划分为对照组、CD133过表达组、PANTR1过表达组、CD133抑制组以及PANTR1抑制组,探究各组细胞增殖与侵袭能力的差异。结果癌组织组的CD133与PANTR1 mRNA相对表达量[(0.023±0.002)、(0.018±0.002)]均高于癌旁正常组织组[(0.006±0.001)、(0.005±0.001)],有统计学差异(P<0.05)。CD133、PANTR1过表达组细胞增殖倍数[(10.54±1.45)、(10.26±1.13)]与侵袭细胞数[(43.88±3.69)个、(45.67±4.28)个]均高于对照组[(6.84±0.69)、(23.25±2.15)个],而CD133、PANTR1抑制组的细胞增殖倍数[(5.23±0.25)、(5.17±0.34)]与侵袭细胞数[(18.35±1.64)个、(18.13±1.22)个]均低于对照组[(6.84±0.69)、(23.25±2.15)个],有统计学差异(P<0.05)。结论CD133及PANTR1在乳腺癌组织内呈高表达,可增强乳腺癌细胞体外增殖与侵袭能力。

摘要： 目的:检测脑肿瘤干细胞(brain tumor stem cell，BTSC)标记物CD133、Nestin和增殖细胞核标记物PCNA在74例脑胶质瘤中的表达，探讨肿瘤干细胞生存的微环境——壁龛的组成、形态及其在脑肿瘤组织中的分布。rn 方法:(1)采用免疫组织化学SP法检测CD133在74例胶质瘤组织中的表达。(2)采用免疫荧光双染法检测CD133分别与PCNA、Nestin共表达情况，计算CD133+细胞、CD133+血管和CD133+壁龛所占的百分率，并与肿瘤病理分级进行相关性分析。rn 结果:按照WHO2000年的神经系统肿瘤分类分级标准所有标本分为Ⅱ级22例，Ⅲ级27例，Ⅳ级25例，随着肿瘤级别的升高，CD133阳性率明显增加(F=107.692，P=0.000)，CD133+细胞聚集于壁龛内生长;CD133+壁龛在各级别胶质痛中均有表达，在低级别组中，CD133+壁龛阳性率较低，壁龛内增殖细胞较少，与相邻壁龛之间界限清晰，并且，周围血管分布较少。在高级别组中，CD133+壁龛阳性率高，壁龛之间无明显界限，壁龛内细胞增殖活跃，周围可见丰富的CD133+血管分布。壁龛中除CD133+／Nestin+BTSC外，可见CD133+／Nestin-细胞、CD133+／PCNA+细胞等亚群细胞，CD133+壁龛的百分比与CD133+血管的表达呈正相关(r=0.537，P=0.000)，并且在不同级别的胶质瘤中CD133+壁龛百分比差异具有显著性(F=6.413，P=0.003)。rn 结论:在脑胶质瘤组织中存在着由BTSC和一些亚群细胞组成的壁龛结构，CD133+血管对于壁龛结构的维持起着非常重要的作用，并且，随着肿瘤级别的升高，CD133+壁龛百分比差异有显著性。

摘要： 目的:检测脑肿瘤干细胞(brain tumor stem cell，BTSC)标记物CD133、Nestin和增殖细胞核标记物PCNA在74例脑胶质瘤中的表达，探讨肿瘤干细胞生存的微环境——壁龛的组成、形态及其在脑肿瘤组织中的分布。rn 方法:(1)采用免疫组织化学SP法检测CD133在74例胶质瘤组织中的表达。(2)采用免疫荧光双染法检测CD133分别与PCNA、Nestin共表达情况，计算CD133+细胞、CD133+血管和CD133+壁龛所占的百分率，并与肿瘤病理分级进行相关性分析。rn 结果:按照WHO2000年的神经系统肿瘤分类分级标准所有标本分为Ⅱ级22例，Ⅲ级27例，Ⅳ级25例，随着肿瘤级别的升高，CD133阳性率明显增加(F=107.692，P=0.000)，CD133+细胞聚集于壁龛内生长;CD133+壁龛在各级别胶质痛中均有表达，在低级别组中，CD133+壁龛阳性率较低，壁龛内增殖细胞较少，与相邻壁龛之间界限清晰，并且，周围血管分布较少。在高级别组中，CD133+壁龛阳性率高，壁龛之间无明显界限，壁龛内细胞增殖活跃，周围可见丰富的CD133+血管分布。壁龛中除CD133+／Nestin+BTSC外，可见CD133+／Nestin-细胞、CD133+／PCNA+细胞等亚群细胞，CD133+壁龛的百分比与CD133+血管的表达呈正相关(r=0.537，P=0.000)，并且在不同级别的胶质瘤中CD133+壁龛百分比差异具有显著性(F=6.413，P=0.003)。rn 结论:在脑胶质瘤组织中存在着由BTSC和一些亚群细胞组成的壁龛结构，CD133+血管对于壁龛结构的维持起着非常重要的作用，并且，随着肿瘤级别的升高，CD133+壁龛百分比差异有显著性。

摘要： 目的:检测脑肿瘤干细胞(brain tumor stem cell，BTSC)标记物CD133、Nestin和增殖细胞核标记物PCNA在74例脑胶质瘤中的表达，探讨肿瘤干细胞生存的微环境——壁龛的组成、形态及其在脑肿瘤组织中的分布。rn 方法:(1)采用免疫组织化学SP法检测CD133在74例胶质瘤组织中的表达。(2)采用免疫荧光双染法检测CD133分别与PCNA、Nestin共表达情况，计算CD133+细胞、CD133+血管和CD133+壁龛所占的百分率，并与肿瘤病理分级进行相关性分析。rn 结果:按照WHO2000年的神经系统肿瘤分类分级标准所有标本分为Ⅱ级22例，Ⅲ级27例，Ⅳ级25例，随着肿瘤级别的升高，CD133阳性率明显增加(F=107.692，P=0.000)，CD133+细胞聚集于壁龛内生长;CD133+壁龛在各级别胶质痛中均有表达，在低级别组中，CD133+壁龛阳性率较低，壁龛内增殖细胞较少，与相邻壁龛之间界限清晰，并且，周围血管分布较少。在高级别组中，CD133+壁龛阳性率高，壁龛之间无明显界限，壁龛内细胞增殖活跃，周围可见丰富的CD133+血管分布。壁龛中除CD133+／Nestin+BTSC外，可见CD133+／Nestin-细胞、CD133+／PCNA+细胞等亚群细胞，CD133+壁龛的百分比与CD133+血管的表达呈正相关(r=0.537，P=0.000)，并且在不同级别的胶质瘤中CD133+壁龛百分比差异具有显著性(F=6.413，P=0.003)。rn 结论:在脑胶质瘤组织中存在着由BTSC和一些亚群细胞组成的壁龛结构，CD133+血管对于壁龛结构的维持起着非常重要的作用，并且，随着肿瘤级别的升高，CD133+壁龛百分比差异有显著性。

摘要： 目的:检测脑肿瘤干细胞(brain tumor stem cell，BTSC)标记物CD133、Nestin和增殖细胞核标记物PCNA在74例脑胶质瘤中的表达，探讨肿瘤干细胞生存的微环境——壁龛的组成、形态及其在脑肿瘤组织中的分布。rn 方法:(1)采用免疫组织化学SP法检测CD133在74例胶质瘤组织中的表达。(2)采用免疫荧光双染法检测CD133分别与PCNA、Nestin共表达情况，计算CD133+细胞、CD133+血管和CD133+壁龛所占的百分率，并与肿瘤病理分级进行相关性分析。rn 结果:按照WHO2000年的神经系统肿瘤分类分级标准所有标本分为Ⅱ级22例，Ⅲ级27例，Ⅳ级25例，随着肿瘤级别的升高，CD133阳性率明显增加(F=107.692，P=0.000)，CD133+细胞聚集于壁龛内生长;CD133+壁龛在各级别胶质痛中均有表达，在低级别组中，CD133+壁龛阳性率较低，壁龛内增殖细胞较少，与相邻壁龛之间界限清晰，并且，周围血管分布较少。在高级别组中，CD133+壁龛阳性率高，壁龛之间无明显界限，壁龛内细胞增殖活跃，周围可见丰富的CD133+血管分布。壁龛中除CD133+／Nestin+BTSC外，可见CD133+／Nestin-细胞、CD133+／PCNA+细胞等亚群细胞，CD133+壁龛的百分比与CD133+血管的表达呈正相关(r=0.537，P=0.000)，并且在不同级别的胶质瘤中CD133+壁龛百分比差异具有显著性(F=6.413，P=0.003)。rn 结论:在脑胶质瘤组织中存在着由BTSC和一些亚群细胞组成的壁龛结构，CD133+血管对于壁龛结构的维持起着非常重要的作用，并且，随着肿瘤级别的升高，CD133+壁龛百分比差异有显著性。

摘要： 目的:检测脑肿瘤干细胞(brain tumor stem cell，BTSC)标记物CD133、Nestin和增殖细胞核标记物PCNA在74例脑胶质瘤中的表达，探讨肿瘤干细胞生存的微环境——壁龛的组成、形态及其在脑肿瘤组织中的分布。rn 方法:(1)采用免疫组织化学SP法检测CD133在74例胶质瘤组织中的表达。(2)采用免疫荧光双染法检测CD133分别与PCNA、Nestin共表达情况，计算CD133+细胞、CD133+血管和CD133+壁龛所占的百分率，并与肿瘤病理分级进行相关性分析。rn 结果:按照WHO2000年的神经系统肿瘤分类分级标准所有标本分为Ⅱ级22例，Ⅲ级27例，Ⅳ级25例，随着肿瘤级别的升高，CD133阳性率明显增加(F=107.692，P=0.000)，CD133+细胞聚集于壁龛内生长;CD133+壁龛在各级别胶质痛中均有表达，在低级别组中，CD133+壁龛阳性率较低，壁龛内增殖细胞较少，与相邻壁龛之间界限清晰，并且，周围血管分布较少。在高级别组中，CD133+壁龛阳性率高，壁龛之间无明显界限，壁龛内细胞增殖活跃，周围可见丰富的CD133+血管分布。壁龛中除CD133+／Nestin+BTSC外，可见CD133+／Nestin-细胞、CD133+／PCNA+细胞等亚群细胞，CD133+壁龛的百分比与CD133+血管的表达呈正相关(r=0.537，P=0.000)，并且在不同级别的胶质瘤中CD133+壁龛百分比差异具有显著性(F=6.413，P=0.003)。rn 结论:在脑胶质瘤组织中存在着由BTSC和一些亚群细胞组成的壁龛结构，CD133+血管对于壁龛结构的维持起着非常重要的作用，并且，随着肿瘤级别的升高，CD133+壁龛百分比差异有显著性。

摘要： 目的:检测脑肿瘤干细胞(brain tumor stem cell，BTSC)标记物CD133、Nestin和增殖细胞核标记物PCNA在74例脑胶质瘤中的表达，探讨肿瘤干细胞生存的微环境——壁龛的组成、形态及其在脑肿瘤组织中的分布。rn 方法:(1)采用免疫组织化学SP法检测CD133在74例胶质瘤组织中的表达。(2)采用免疫荧光双染法检测CD133分别与PCNA、Nestin共表达情况，计算CD133+细胞、CD133+血管和CD133+壁龛所占的百分率，并与肿瘤病理分级进行相关性分析。rn 结果:按照WHO2000年的神经系统肿瘤分类分级标准所有标本分为Ⅱ级22例，Ⅲ级27例，Ⅳ级25例，随着肿瘤级别的升高，CD133阳性率明显增加(F=107.692，P=0.000)，CD133+细胞聚集于壁龛内生长;CD133+壁龛在各级别胶质痛中均有表达，在低级别组中，CD133+壁龛阳性率较低，壁龛内增殖细胞较少，与相邻壁龛之间界限清晰，并且，周围血管分布较少。在高级别组中，CD133+壁龛阳性率高，壁龛之间无明显界限，壁龛内细胞增殖活跃，周围可见丰富的CD133+血管分布。壁龛中除CD133+／Nestin+BTSC外，可见CD133+／Nestin-细胞、CD133+／PCNA+细胞等亚群细胞，CD133+壁龛的百分比与CD133+血管的表达呈正相关(r=0.537，P=0.000)，并且在不同级别的胶质瘤中CD133+壁龛百分比差异具有显著性(F=6.413，P=0.003)。rn 结论:在脑胶质瘤组织中存在着由BTSC和一些亚群细胞组成的壁龛结构，CD133+血管对于壁龛结构的维持起着非常重要的作用，并且，随着肿瘤级别的升高，CD133+壁龛百分比差异有显著性。

摘要： 目的:检测脑肿瘤干细胞(brain tumor stem cell，BTSC)标记物CD133、Nestin和血管内皮细胞标记物CD31在65例脑胶质瘤中的表达，利用形态学方法分析肿瘤干细胞在脑肿瘤组织中的分布及其与肿瘤微血管的关系。rn 方法:(1)采用免疫组织化学SP法检测CD133和Nestin在65例胶质瘤组织中的表达。(2)采用免疫荧光双染法检测CD133／CD31、Nestin／CD31和CD133／Nestin共表达情况。计算CD133+肿瘤干细胞、CD133+血管、Nestin+肿瘤干细胞和Nestin+血管所占的百分率，并进行统计学分析。rn 结果:按照WHO2000年的神经系统肿瘤分类分级标准所有标本分为Ⅱ级18例，Ⅲ级23例，Ⅳ级24例。CD133+肿瘤干细胞或Nestin+肿瘤干细胞在各级别胶质瘤中均有表达，并且均可表达于血管内皮细胞。低级别组中，在CD133+肿瘤干细胞或Nestin+肿瘤干细胞分布的区域可见CD133+血管或Nestin+血管分布较少。在高级别组中，该区域则有丰富的CD133+血管或Nestin+血管分布，同时可见肿瘤干细胞包绕着血管生长。并且，CD133+细胞或Nestin+细胞的百分比与CD133+血管(r=0.945，P=0.000)或Nestin+血管(r=0.727,P=0.000)的表达呈正相关。在免疫荧光双染中发现，CD133+细胞或Nestin+细胞均聚集于CD31+血管周围，并且，可发现CD133+／CD31+、Nestin+／CD31+细胞共表达于血管内皮细胞。rn 结论:在脑胶质瘤组织中，血管内皮细胞可表达肿瘤干细胞的标记物，因此认为，肿瘤内微血管可能来源于肿瘤干细胞的分化，并且肿瘤干细胞聚集于微血管周围生长呈巢状分布。随着肿瘤病理级别的升高，CD133+肿瘤干细胞或Nestin+肿瘤干细胞的百分比与CD133+血管或Nestin+血管的表达呈正相关。

摘要： 目的:检测脑肿瘤干细胞(brain tumor stem cell，BTSC)标记物CD133、Nestin和血管内皮细胞标记物CD31在65例脑胶质瘤中的表达，利用形态学方法分析肿瘤干细胞在脑肿瘤组织中的分布及其与肿瘤微血管的关系。rn 方法:(1)采用免疫组织化学SP法检测CD133和Nestin在65例胶质瘤组织中的表达。(2)采用免疫荧光双染法检测CD133／CD31、Nestin／CD31和CD133／Nestin共表达情况。计算CD133+肿瘤干细胞、CD133+血管、Nestin+肿瘤干细胞和Nestin+血管所占的百分率，并进行统计学分析。rn 结果:按照WHO2000年的神经系统肿瘤分类分级标准所有标本分为Ⅱ级18例，Ⅲ级23例，Ⅳ级24例。CD133+肿瘤干细胞或Nestin+肿瘤干细胞在各级别胶质瘤中均有表达，并且均可表达于血管内皮细胞。低级别组中，在CD133+肿瘤干细胞或Nestin+肿瘤干细胞分布的区域可见CD133+血管或Nestin+血管分布较少。在高级别组中，该区域则有丰富的CD133+血管或Nestin+血管分布，同时可见肿瘤干细胞包绕着血管生长。并且，CD133+细胞或Nestin+细胞的百分比与CD133+血管(r=0.945，P=0.000)或Nestin+血管(r=0.727,P=0.000)的表达呈正相关。在免疫荧光双染中发现，CD133+细胞或Nestin+细胞均聚集于CD31+血管周围，并且，可发现CD133+／CD31+、Nestin+／CD31+细胞共表达于血管内皮细胞。rn 结论:在脑胶质瘤组织中，血管内皮细胞可表达肿瘤干细胞的标记物，因此认为，肿瘤内微血管可能来源于肿瘤干细胞的分化，并且肿瘤干细胞聚集于微血管周围生长呈巢状分布。随着肿瘤病理级别的升高，CD133+肿瘤干细胞或Nestin+肿瘤干细胞的百分比与CD133+血管或Nestin+血管的表达呈正相关。

摘要： 目的:检测脑肿瘤干细胞(brain tumor stem cell，BTSC)标记物CD133、Nestin和血管内皮细胞标记物CD31在65例脑胶质瘤中的表达，利用形态学方法分析肿瘤干细胞在脑肿瘤组织中的分布及其与肿瘤微血管的关系。rn 方法:(1)采用免疫组织化学SP法检测CD133和Nestin在65例胶质瘤组织中的表达。(2)采用免疫荧光双染法检测CD133／CD31、Nestin／CD31和CD133／Nestin共表达情况。计算CD133+肿瘤干细胞、CD133+血管、Nestin+肿瘤干细胞和Nestin+血管所占的百分率，并进行统计学分析。rn 结果:按照WHO2000年的神经系统肿瘤分类分级标准所有标本分为Ⅱ级18例，Ⅲ级23例，Ⅳ级24例。CD133+肿瘤干细胞或Nestin+肿瘤干细胞在各级别胶质瘤中均有表达，并且均可表达于血管内皮细胞。低级别组中，在CD133+肿瘤干细胞或Nestin+肿瘤干细胞分布的区域可见CD133+血管或Nestin+血管分布较少。在高级别组中，该区域则有丰富的CD133+血管或Nestin+血管分布，同时可见肿瘤干细胞包绕着血管生长。并且，CD133+细胞或Nestin+细胞的百分比与CD133+血管(r=0.945，P=0.000)或Nestin+血管(r=0.727,P=0.000)的表达呈正相关。在免疫荧光双染中发现，CD133+细胞或Nestin+细胞均聚集于CD31+血管周围，并且，可发现CD133+／CD31+、Nestin+／CD31+细胞共表达于血管内皮细胞。rn 结论:在脑胶质瘤组织中，血管内皮细胞可表达肿瘤干细胞的标记物，因此认为，肿瘤内微血管可能来源于肿瘤干细胞的分化，并且肿瘤干细胞聚集于微血管周围生长呈巢状分布。随着肿瘤病理级别的升高，CD133+肿瘤干细胞或Nestin+肿瘤干细胞的百分比与CD133+血管或Nestin+血管的表达呈正相关。

摘要： 目的:检测脑肿瘤干细胞(brain tumor stem cell，BTSC)标记物CD133、Nestin和血管内皮细胞标记物CD31在65例脑胶质瘤中的表达，利用形态学方法分析肿瘤干细胞在脑肿瘤组织中的分布及其与肿瘤微血管的关系。rn 方法:(1)采用免疫组织化学SP法检测CD133和Nestin在65例胶质瘤组织中的表达。(2)采用免疫荧光双染法检测CD133／CD31、Nestin／CD31和CD133／Nestin共表达情况。计算CD133+肿瘤干细胞、CD133+血管、Nestin+肿瘤干细胞和Nestin+血管所占的百分率，并进行统计学分析。rn 结果:按照WHO2000年的神经系统肿瘤分类分级标准所有标本分为Ⅱ级18例，Ⅲ级23例，Ⅳ级24例。CD133+肿瘤干细胞或Nestin+肿瘤干细胞在各级别胶质瘤中均有表达，并且均可表达于血管内皮细胞。低级别组中，在CD133+肿瘤干细胞或Nestin+肿瘤干细胞分布的区域可见CD133+血管或Nestin+血管分布较少。在高级别组中，该区域则有丰富的CD133+血管或Nestin+血管分布，同时可见肿瘤干细胞包绕着血管生长。并且，CD133+细胞或Nestin+细胞的百分比与CD133+血管(r=0.945，P=0.000)或Nestin+血管(r=0.727,P=0.000)的表达呈正相关。在免疫荧光双染中发现，CD133+细胞或Nestin+细胞均聚集于CD31+血管周围，并且，可发现CD133+／CD31+、Nestin+／CD31+细胞共表达于血管内皮细胞。rn 结论:在脑胶质瘤组织中，血管内皮细胞可表达肿瘤干细胞的标记物，因此认为，肿瘤内微血管可能来源于肿瘤干细胞的分化，并且肿瘤干细胞聚集于微血管周围生长呈巢状分布。随着肿瘤病理级别的升高，CD133+肿瘤干细胞或Nestin+肿瘤干细胞的百分比与CD133+血管或Nestin+血管的表达呈正相关。

摘要： 本发明涉及与CD3特异性结合并与至少另一种抗原例如CD123特异性结合的抗体样结合蛋白。本发明还涉及与CD123特异性结合并与至少另一种抗原特异性结合的抗体样结合蛋白。本发明进一步涉及抗CD3抗体和抗CD123抗体。本发明还涉及包含本发明抗体样结合蛋白、抗CD3抗体或抗CD123抗体的药物组合物和其治疗癌症的用途。本发明进一步涉及包含编码所述抗体样结合蛋白、抗CD3或抗CD123抗体的序列的分离的核酸、载体和宿主细胞和所述抗CD123抗体作为诊断工具的用途。

摘要： 本发明涉及一种检测CD105、CD144、CD34、KDR、Annexin V和CD63的试剂在制备检测血液中的内皮及内皮祖细胞释放的细胞外囊泡的试剂中的应用，从循环系统中分别分离出EC‑MVs、EPC‑MVs、EC‑EXs和EPC‑EXs。该方法突破了以往用单特异性抗体的方法且提取出来的细胞MVs和EXs比现有技术的特异性和敏感性高。此外，本发明利用纳米微粒追踪分析术(NTS)针对细胞MVs和EXs进行特异性抗体micro‑beads方法结合荧光量子点(Q‑dots)方法进行检测。该方法能快速，准确，客观分析复杂样本例如血液中EC‑MVs,EPC‑MVs,EC‑EXs和EPC‑EXs的水平，有传统分析方法例如流式所不具备的优势。因此，本发明为进一步研究MVs和EXs作为疾病的生物标记物提供了特异和敏感的方法。

摘要： 本发明公开了一种同时高效扩增CD3+CD56+CIK细胞和CD3‑CD56+NK细胞的方法，步骤为：用含自体血浆的无血清培养基调整分离的PBMC浓度加入Anti‑CD16抗体、IL‑2、IL‑15后转入T175培养瓶中培养，后再加入Anti‑CD3抗体、Anti‑CD137抗体，根据细胞的生长情况，每隔2天补充含自体血浆、IL‑2和IL‑15的无血清培养基，控制细胞浓度约1.5×106/ml，培养14～21天后可同时获得大量较高纯度的CD3+CD56+CIK和CD3‑CD56+NK细胞，且总细胞数量能达到临床用于肿瘤过继性细胞免疫治疗所需细胞数量的有效值。本发明简便、有效，细胞杀伤活性高。

摘要： 本发明目的在于提供对各种疾病发挥优异的治疗效果的新型的间充质干细胞及包含该间充质干细胞的新型的药物组合物、以及它们的制备方法。本发明为表达选自由CD201、CD46、CD56、CD147和CD165组成的组中的至少1种细胞表面标记物的间充质干细胞。表达上述特定标记物的间充质干细胞为CD29、CD73、CD90、CD105和CD166阳性，维持了未分化性。

摘要： 本发明涉及抗CD3抗体、抗CD123抗体和与CD3和/或CD123特异性结合的双特异性抗体，具体涉及与CD3特异性结合并与至少另一种抗原例如CD123特异性结合的抗体样结合蛋白。本发明还涉及与CD123特异性结合并与至少另一种抗原特异性结合的抗体样结合蛋白。本发明进一步涉及抗CD3抗体和抗CD123抗体。本发明还涉及包含本发明抗体样结合蛋白、抗CD3抗体或抗CD123抗体的药物组合物和其治疗癌症的用途。本发明进一步涉及包含编码所述抗体样结合蛋白、抗CD3或抗CD123抗体的序列的分离的核酸、载体和宿主细胞和所述抗CD123抗体作为诊断工具的用途。

摘要： 本发明涉及抗CD3抗体、抗CD123抗体和与CD3和/或CD123特异性结合的双特异性抗体，具体涉及与CD3特异性结合并与至少另一种抗原例如CD123特异性结合的抗体样结合蛋白。本发明还涉及与CD123特异性结合并与至少另一种抗原特异性结合的抗体样结合蛋白。本发明进一步涉及抗CD3抗体和抗CD123抗体。本发明还涉及包含本发明抗体样结合蛋白、抗CD3抗体或抗CD123抗体的药物组合物和其治疗癌症的用途。本发明进一步涉及包含编码所述抗体样结合蛋白、抗CD3或抗CD123抗体的序列的分离的核酸、载体和宿主细胞和所述抗CD123抗体作为诊断工具的用途。

摘要： 本发明涉及结合CD3和CD137(4‑1BB)的抗原结合分子，包含所述抗原结合分子的组合物及其使用方法。本发明提供了抗原结合分子，其包含能够结合CD3和CD137(4‑1BB)但不同时结合CD3和CD137的抗体可变区，以及与不同于CD3和CD137的第三抗原结合的可变区。这些抗原结合分子通过与三种不同抗原的结合而表现出由这些抗原结合分子诱导的增强的T细胞依赖性细胞毒活性。

摘要： 本发明涉及与CD3特异性结合并与至少另一种抗原例如CD123特异性结合的抗体样结合蛋白。本发明还涉及与CD123特异性结合并与至少另一种抗原特异性结合的抗体样结合蛋白。本发明进一步涉及抗CD3抗体和抗CD123抗体。本发明还涉及包含本发明抗体样结合蛋白、抗CD3抗体或抗CD123抗体的药物组合物和其治疗癌症的用途。本发明进一步涉及包含编码所述抗体样结合蛋白、抗CD3或抗CD123抗体的序列的分离的核酸、载体和宿主细胞和所述抗CD123抗体作为诊断工具的用途。

摘要： 本发明总体涉及特异性结合至少CD3的抗体、可活化抗体、多特异性抗体和多特异性可活化抗体，以及制备这些抗体、可活化抗体、多特异性抗体和/或多特异性可活化抗体和在各种治疗、诊断和预防适应症中使用这些抗体、可活化抗体、多特异性抗体和/或多特异性可活化抗体的方法。

摘要： 本发明公开了一种同时高效扩增CD3+CD56+CIK细胞和CD3-CD56+NK细胞的方法，步骤为：用含自体血浆的无血清培养基调整分离的PBMC浓度加入Anti-CD16抗体、IL-2、IL-15后转入T175培养瓶中培养，后再加入Anti-CD3抗体、Anti-CD137抗体，根据细胞的生长情况，每隔2天补充含自体血浆、IL-2和IL-15的无血清培养基，控制细胞浓度约1.5×106/ml，培养14～21天后可同时获得大量较高纯度的CD3+CD56+CIK和CD3-CD56+NK细胞，且总细胞数量能达到临床用于肿瘤过继性细胞免疫治疗所需细胞数量的有效值。本发明简便、有效，细胞杀伤活性高。