细胞周期阻滞

摘要： 目的研究莪术醇抗T47D乳腺癌细胞增殖的作用机制。方法采用MTT法检测不同剂量莪术醇(0、6.25、12.5、25、50、100μg/mL)对T47D乳腺癌细胞增殖的抑制作用。以莪术醇(12.5、25、50、100μg/mL)干预T47D乳腺癌细胞后,采用倒置相差显微镜观察细胞形态;采用流式细胞仪检测细胞周期及活性氧(ROS)水平;采用实时荧光定量聚合酶链反应(qRT-PCR)法检测增殖细胞核抗原(PCNA)、细胞周期调控因子p21和细胞周期蛋白依赖性激酶2(CDK2)的mRNA表达水平;采用Westernblot法检测CDK2、CDK6、细胞周期蛋白D(Cyclin D)、PCNA、核转录因子E2-相关因子(Nrf2)、Kelch样ECH关联蛋白1(Keap1)的蛋白表达水平。另将细胞分为2组,其中一组加入不同剂量莪术醇,另外一组加入33μg/mL莪术醇干预6、12、24、48 h,根据以上2组结果确定最佳氧化时间和给药浓度后,另设空白对照组、N-乙酰半胱氨酸(NAC)组(单用ROS抗氧化剂NAC)、莪术醇组(单用莪术醇)、莪术醇联合NAC组(采用ROS抗氧化剂NAC预处理,再加入莪术醇),检测细胞周期及ROS荧光强度。结果莪术醇能使T47D乳腺癌细胞增殖抑制率显著升高(P<0.05或P<0.01),并呈一定的剂量和时间依赖趋势。莪术醇能将T47D乳腺癌细胞周期阻滞于G1期,并使ROS水平显著增加(P<0.05或P<0.01);ROS抗氧化剂NAC能够逆转莪术醇的上述诱导作用(P<0.01)。qRT-PCR结果显示,莪术醇能下调PCNA和CDK2 mRNA的表达,并上调p21 mRNA的表达(P<0.05或P<0.01)。Westernblot结果显示,莪术醇能显著下调Keap1、Nrf2、CDK2、CDK6和Cyclin D的蛋白表达(P<0.05或P<0.01);ROS抗氧化剂NAC能够逆转莪术醇对上述蛋白表达的下调作用(P<0.05或P<0.01)。结论莪术醇可能通过诱导氧化应激和细胞周期阻滞,发挥抑制T47D乳腺癌细胞增殖的作用。

摘要： 目的探讨丹参酮ⅡA对人膀胱癌J82细胞增殖与凋亡效应及作用机制。方法以不同浓度(1、2、3、5、8μmol/L)的丹参酮ⅡA处理J82细胞48 h,先后采用细胞计数试剂盒(CCK-8)检测法检测梯度剂量的丹参酮ⅡA对J82细胞半数抑制率(IC50)的测定及细胞增殖的影响,流式细胞术及Annex V/PI染色检测法用于检测丹参酮ⅡA对J82细胞凋亡及细胞周期的影响,免疫印迹法(Western-blotting)检测与细胞;周亡相关的蛋白cyclin Dl、Bel-xL、caspase3、caspase8、caspase9、P65表达的差异。结果丹参酮ⅡA能够抑制人膀耽癌J82细胞的活性,且具有浓度依赖性(P<0.05),半数抑制浓度(IC50)为4.16μmol/L。1、3μmol/L丹参酮ⅡA处理组的G1期细胞百分比分别为(47.98%±1.49%)、(54.94%±3.39%),均高于对照组(42.22%±0.48%)(均P<0.05),且3μmol/L组高于1 pmol/L组(P<0.05);3μmol/L组的S期细胞百分比(33.19%±4.17%)低于对照组(46.32%±2.14%)(P<0.05)。1、3、5μmol/L组的总凋亡率分别为11.23%、14.84%、18.42%,均高于对照组的3.26%(P<0.05),且呈剂量依赖性(P<0.05)。1、3 pmol/L组的caspase3蛋白相对表达量分别为(0.39±0.02)、(0.52±0.03),均高于对照组的0.26±0.02(P<0.05);caspase9蛋白相对表达量分别为(0.18±0.03)、(0.33±0.12),均高于对照组的0.02±0.02(P<0.05);3μmol/L组两种蛋白的表达量均高于1μmol/L组(P<0.05)。结论丹参酮ⅡA在体外可抑制J82细胞增殖,G1/S期阻滞可能是其中的机制之一,同时可能通过线粒体途径诱导J82细胞凋亡。

摘要： 目的:探究HMGA1对肝癌细胞增殖、迁移及细胞周期的影响。方法:通过生物信息学、qRT-PCR、蛋白质印迹法分析HMGA1在正常肝组织与肝癌组织、正常肝细胞与肝癌细胞中的表达及其表达量与患者生存期的关系;通过GO和KEGG通路分析HMGA1及其相关基因在肝癌细胞生理活动中可能发挥的作用;MTT、克隆形成、Transwell实验及流式细胞术用于分析下调HMGA1对肝细胞癌的增殖、迁移、凋亡和细胞周期的影响。结果:与正常肝组织比较,肝癌组织HMGA1表达上调,且表达水平与患者生存期呈负相关;筛选得出451个正相关基因和398个负相关基因在TCGA-LIHC和GSE15765两个数据集中都具有统计学意义,KEGG和GO分析结果表明HMGA1及其相关基因参与组成细胞组分,并主要影响肿瘤细胞的分裂增殖、转录调控、氧化还原过程和代谢过程等;下调HMGA1抑制肝癌细胞的细胞活力、迁移,诱导细胞凋亡并阻滞细胞周期;敲低HMGA1使肿瘤体积缩小、重量减轻。结论:HMGA1可能作为原癌基因促进肝癌细胞的生长。

摘要： 目的探讨HSP90抑制剂AUY-922逆转人神经母细胞瘤细胞对二代ALK抑制剂TAE684耐药的机制。方法MTT法检测AUY-922对携有ALK F1174L基因突变的人神经母细胞瘤细胞SH-SY5Y和KELLY增殖的影响。流式细胞技术检测AUY-922对SH-SY5Y和KELLY细胞周期的影响。Western blot检测AUY-922对SH-SY5Y和KELLY细胞周期蛋白Cdc2、ALK蛋白及下游信号通路p-Akt、p-Erk和p-stat3的影响。结果AUY-922能显著抑制SH-SY5Y和KELLY细胞的增殖,IC_(50)分别约为0.30和0.12μmol/L。流式细胞技术检测发现,AUY-922能剂量依赖性地引起SH-SY5Y和KELLY细胞发生G_(2)/M期阻滞。Western blot结果显示,AUY-922能剂量依赖性地降解SH-SY5Y和KELLY细胞中的Cdc2和ALK蛋白,同时降低下游信号通路p-Akt、p-Erk和p-stat3水平。结论HSP90抑制剂AUY-922逆转人神经母细胞瘤ALK抑制剂耐药的作用可能与其引起耐药细胞发生G_(2)/M期周期阻滞、降解ALK蛋白和抑制下游信号通路有关。

摘要： 目的研究泛醇-细胞色素C还原酶亚基2(QCR2)对宫颈癌SiHa细胞株周期阻滞的影响,并探讨相关机制。方法取对数期SiHa细胞,脂质体转染法将QCR2 siRNA、control siRNA转染至SiHa细胞,设为QCR2 siRNA组、control siRNA组,未经处理细胞设空白组。采用qRT-PCR、Western blot检测QCR2、p53 mRNA与蛋白相对表达量;碘化丙啶(PI)染色检测细胞周期。取QCR2 siRNA组细胞,以终浓度50 nmol/L泛素-蛋白酶体抑制剂PS341干预,设为QCR2 siRNA+PS341组,另取QCR2 siRNA组细胞以等量生理盐水(NS)干预,设为QCR2 siRNA+NS组。Western blot检测p53蛋白相对表达量;免疫共沉淀实验检测p53泛素化水平。结果荧光显微镜下观察,QCR2 siRNA组、control siRNA组转染效率均大于80%;与空白组、control siRNA组比较,QCR2 siRNA组QCR2 mRNA与蛋白相对表达量均降低(P<0.05),G_(0)/G_(1)占比升高(P<0.05),S、G_(2)/M占比降低(P<0.05);p53 mRNA相对表达量组间比较,差异无统计学意义;与空白组、control siRNA组比较,QCR2 siRNA组p53蛋白相对表达量升高(P<0.05);与空白组、QCR2 siRNA+PS341组比较,QCR2 siRNA组、QCR2 siRNA+NS组p53蛋白相对表达量升高(P<0.05);与空白组、control siRNA组比较,QCR2 siRNA组p53泛素化程度降低(P<0.05)。结论沉默QCR2可将SiHa细胞阻滞在G_(0)/G_(1)期,其机制可能与抑制p53泛素化,提高其蛋白表达有关。

摘要： 皮蛋是中国传统食品,其水解物具有抗氧化、抗炎和抗癌等功效,具有良好的医学前景,但目前皮蛋发挥抗癌功效的途径及作用机制尚不清楚。探究了皮蛋模拟胃肠道消化物(preserved eggs simulated gastrointestinal digests,PESD)对人肝癌HepG2细胞增殖和细胞周期的影响。将皮蛋经体外模拟胃肠道消化处理后,进行细胞实验,用CCK-8法进行细胞增殖分析,研究PESD对HepG2细胞存活率的影响,采用碘化丙啶(propidium iodide,PI)染色标记的方法,通过流式细胞术测定PESD对HepG2细胞周期的影响,用western blot法测定细胞周期相关调控蛋白的表达。研究发现:PESD以剂量依赖性方式对HepG2细胞增殖进行抑制,IC_(50)为4.17 mg/mL;PESD处理显著增加了S期细胞的占比(P<0.05),使HepG2细胞阻滞于S期;4 mg/mL的PESD处理HepG2细胞24 h后,细胞中cyclin A、cyclin E、ATM、chk2和CDC25A的蛋白表达水平上升(P<0.05),而CDK2蛋白表达水平下降(P<0.05)。研究认为,皮蛋模拟胃肠道消化物是以剂量依赖性的方式来抑制人肝癌HepG2细胞的增殖,主要是通过ATM-chk2-CDC25A信号通路,上调cyclin A和cyclin E蛋白的表达,下调CDK2蛋白的表达来实现人肝癌HepG2细胞阻滞于S期,影响人肝癌HepG2细胞周期进程,抑制癌细胞的增殖。研究结果旨在为皮蛋抗癌作用机制的阐明提供一定的理论基础。

摘要： 中药重楼具有清热解毒、消肿止痛、凉肝定惊的功效,临床常用于抗炎、抗菌、抗病毒及抗肿瘤等。重楼的主要药效成分为甾体皂苷类化合物,总称为重楼皂苷。重楼皂苷具有多种药理活性,特别是其抗肿瘤作用已引起了广泛的关注。近年来,关于其抗胶质瘤活性和作用机制的研究也越来越多。目前报道的具有抗胶质瘤活性的重楼皂苷包括重楼皂苷I(D)、II、III(薯蓣皂苷)、VI、VII和H等,它们可显著诱导胶质瘤细胞程序性死亡。其作用机制主要涉及以下几个方面:通过线粒体通路和死亡受体通路诱导胶质瘤细胞凋亡、通过释放促炎因子诱导胶质瘤细胞焦亡、通过复合物途径诱导胶质瘤细胞坏死;诱导胶质瘤细胞周期阻滞主要通过调节细胞周期蛋白和细胞周期蛋白依赖性蛋白激酶的表达水平;诱导胶质瘤细胞自噬主要通过调节与自噬有关的细胞因子如微管相关蛋白1轻链3(microtubule-associated protein 1 light chain 3,LC3)、自噬相关基因Beclin-1和泛素结合蛋白P62,从而调控AKT-mTORC1信号通路;以及通过调节上皮间质转化过程中的相关蛋白抑制胶质瘤细胞迁移侵袭。通过这些作用机制,重楼皂苷抑制胶质瘤细胞增殖从而发挥抗胶质瘤作用,同时重楼皂苷和化疗药物如替莫唑胺等联合使用可以逆转胶质瘤细胞耐药性从而增加肿瘤细胞对化疗药物的敏感性。本文对重楼皂苷抗胶质瘤的作用机制进行综述,为其作为抗胶质瘤药物的深入研发提供参考。

摘要： Cd胁迫下植物细胞内会出现不同形式的DNA损伤(如碱基错配、DNA单/双链断裂和甲基化),DNA损伤会迅速诱导DNA损伤响应(DDR)信号,如ATM、ATR及其下游的信号通路包括细胞周期阻滞、细胞内复制、细胞凋亡以及不同形式的DNA修复途径(如同源重组修复HR、DNA错配修复MMR).植物细胞DNA MMR系统中的异源二聚体MutSα(MSH2/MSH6)、MutSβ(MSH2/MSH3)、MutSg(MSH2/MSH7)、MutLα(MLH1/PMS1)与有关酶如增殖细胞核抗原(PCNA)、DNA复制因子C(RFC)、DNA核酸外切酶1(EXO1)、单链结合蛋白(RPA)、核酸内切酶FEN1、DNA聚合酶delta(d)和DNA连接酶相互作用,启动DNA MMR反应,从而在感知Cd诱导的DNA损伤、修复DNA损伤、激活细胞周期检验点、确保基因组DNA的稳定性和DNA复制的精确性等方面发挥关键作用.然而,MutS缺失的植物细胞会绕过DNA MMR系统参与的细胞周期阻滞,从而严重影响植物的耐Cd性能.本文重点介绍了植物DNA MMR系统对Cd胁迫的响应以及表观遗传对DNA MMR系统的调控作用机理.

摘要： 目的·探索冬凌草甲素对Jurkat细胞增殖的抑制作用及其机制.方法·采用CCK-8法、流式细胞术、瑞士吉姆萨染色、蛋白质印迹法,检测冬凌草甲素处理后Jurkat细胞的增殖情况、细胞周期、凋亡情况及有丝分裂相关蛋白激酶表达情况.蛋白质印迹法检测冬凌草甲素处理后,Jurkat细胞中Polo样蛋白激酶1(Polo-like kinase 1,PLK1)下游蛋白的磷酸化水平.通过计算机模拟、免疫沉淀、蛋白质印迹法、细胞热力学迁移实验方法研究冬凌草甲素与PLK1的结合方式及结合位点.组间比较采用t检验,P<0.05为差异具有统计学意义.结果·冬凌草甲素通过上调PLK1蛋白含量并促进其激酶活性,从而诱导Jurkat细胞发生G2/M期阻滞;冬凌草甲素可与PLK1蛋白直接结合抑制其通过泛素蛋白酶体途径降解;如PLK1蛋白的Cys67或Cys133氨基酸残基发生突变则抑制冬凌草甲素与其直接结合,且抑制冬凌草甲素对PLK1蛋白的稳定作用.结论·冬凌草甲素通过直接结合PLK1蛋白抑制其泛素化修饰及降解,促进其活性,诱导Jurkat细胞发生G2/M期阻滞;PLK1蛋白的Cys67和Cys133位点是蛋白与冬凌草甲素结合的关键位点.

摘要： 生长阻滞和 DNA 损伤基因45A(growth arrest and DNA damage-inducible 45A,GADD45A)是第 1 个被发现的由P53激活的应激诱导基因,同时也是P63、P73、BRCA1及MYC的靶标基因.GADD45A作为DNA损伤修复基因,受P53依赖(电离辐射诱导)和独立于P53(紫外线诱导)的途径调节,参与DNA损伤修复、细胞周期阻滞、凋亡、自噬、血管形成等生物学功能,与肿瘤发生发展密切相关.在大多数肿瘤的治疗中,化疗药物直接或者间接(如脱甲基化、乙酰化)上调其表达水平,提高癌细胞药物敏感性;同时,在放射治疗过程,过表达GADD45A可干预放射抵抗.然而,在少数肿瘤的治疗中,GADD45A的表达反而能够提高癌细胞的存活率.本文主要对GADD45A在肿瘤治疗中所发挥的作用及机制进行综述.

摘要： 目的：本试验旨在构建表达猪传染性胃肠炎病毒(TGEV)N蛋白的真核重组质粒,探讨TGEV N蛋白在TGEV诱导的细胞周期阻滞和凋亡中的作用.rn 方法：提取PK-15细胞的总RNA,扩增得到TGEV N基因,并将N 基因克隆至真核表达载体pEGFP-N1,双酶切及测序鉴定正确后,将构建的N基因真核表达载体转染至PK-15细胞,通过流式细胞术、western blot等方法检测TGEV N蛋白在TGEV诱导的细胞周期和细胞凋亡中的作用.rn 结果：TGEV N蛋白可将细胞周期阻滞在S期和G2/M期，诱导细胞发生凋亡;TGEV N蛋白可下调cyclin B1,cdc2和cdk2的表达，上调p53和p21，导致促凋亡分子Bax从细胞浆转位到了线粒体、线粒体中蛋白Cyt c释放到细胞浆，活化Caspase-3。rn 结论：本研究成功构建了表达猪TGEV N蛋白的真核重组表达质粒，该蛋白通过调控cyclin A-cdk2和cyclin B1-cdc2使细胞周期阻滞在S期和G2/M期，并通过诱导促凋亡分子Bax和线粒体蛋白Cytc的转位，进而激活Caspase-3引起细胞凋亡。

摘要： 目的:探讨LincRNA-p21通过p21诱导食管癌细胞周期阻滞的调控及其可能的机制. 方法:应用RT-qPCR技术,检测LincRNA-p21在两株食管癌细胞株(EC109和EC9706)与一株永生化食管上皮细胞(Het-1A)中的表达情况.过表达LincRNA-p21及其阴性对照的慢病毒成功转染食管癌EC109后,通过流式细胞术检测食管癌EC109细胞的周期分布,EdU染色法分析EC109细胞的增殖改变.采用RT-qPCR和Western Blot技术分别检测LincRNA-p21下游基因p21的mRNA水平和蛋白表达水平. 结果:与Het-1A相比,在EC109和EC9706中LincRNA-p21和p21的mRNA水平分别为Het-1A的0.183和0.325倍(p＜0.05);p21的mRNA水平分别为Het-1A的0.480和0.423倍.慢病毒转染后,LincRNA-p21相对表达量增加约14860倍(p＜0.05),p21-mRNA上调约2.83倍(p＜0.05),流式细胞术周期分布结果显示,LincRNA-p21和阴性对照G1期细胞百分率分别(52.48±0.72)％和(54.92±1.52)％,S期分别(34.61±0.40)％和(32.54±0.80)％(p＜0.05),G2期分别(12.91±0.32)％和(12.54±0.85)％,EdU增殖分析结果显示两组细胞增值率分别为(44.40±1.73)％、(64.69±3.78)％.RT-qPCR和WB结果表明,过表达LincRNA-p21上调p21的mRNA水平和蛋白表达水平,下调cyclin D蛋白水平. 结论:LincRNA-p21促进p21表达,LincRNA-p21可能通过p21诱导食管癌EC109细胞G1/S期阻滞.

摘要： 探讨小檗碱对果糖诱导下肾小管上皮细胞凋亡的影响.持续的高果糖刺激可诱导肾小管上皮细胞的凋亡，引起细胞周期阻滞。小檗碱能过下调CHOP,caspasel2蛋白的表达，降低细胞的凋亡，缓解细胞周期阻滞现象，其机制可能与下调CHOP,caspasel2表达有关。

摘要： 目的:采用基因介入治疗技术针对AFP阳性肝癌提出有效可行的治疗方法,使治疗基因产物专一地杀伤肝癌细胞,而不损害正常的肝脏细胞及其他正常细胞,提高治疗效果,避免毒副作用.rn 方法:将AFP启动子、沉默子和远端增强子Ⅲ组合为1.2kb的AFP基因调控序列,去除pEGFP—N1质粒的CMV启动子序列,连接AFP基因调控序列作为新的启动子,构建pAFP—EGFP载体.将构建好的pAFP—EGFP分别转染HepG2、SMMC7721、HeLa细胞,荧光显微镜下观察荧光蛋白表达强度.引入P53基因片段,构建pAFP—P53-EGFP重组质粒,转染HepG2、SMMC7721、HeLa细胞,以未转染的HepG2、SMMC7721、HeLa细胞做对照,用Westernblot方法检测P53蛋白表达量的差异,流式细胞仪分析各组细胞周期和凋亡率.rn 结果:pAFP—EGFP构建成功且在HepG2、SMMC7721、HeLa细胞中荧光蛋白表达强度具有显著性差异.pAFP—P53-EGFP重组质粒转染HepG2、SMMC7721、HeLa细胞,HepG2细胞P53蛋白的表达量要明显高于转染的SMMC7721、HeLa细胞及未转染的HepG2、SM MC7721、HeLa细胞.流式细胞分析法检测转染pAFP—P53-EGFP重组质粒的HepG2细胞凋亡率及G1期细胞高于SMMC7721、HeLa细胞,差异显著(p<0.05).而HepG2的S期细胞明显低于SMMC7721、HeLa细胞(p<0.05).rn 结论:pAFP—EGFP和pAFP—P53-EGFP可以在AFP阳性细胞中相对专一表达,并且pAFP—P53-EGFP可相对专一的诱导AFP阳性细胞凋亡及G1期细胞周期阻滞.

摘要： 目的探讨PMBE体外抑制LoVo细胞生长的作用特点和机理.方法 通过MTT、显微镜术、凝胶电泳和流式细胞术研究PMBE抑制细胞生长的特点和凋亡鉴定,运用免疫组化和RT-PCR探究相关分子机理.结果 PMBE能时间-剂量依赖地抑制LoVo细胞的体外生长;PMBE处理后,流式细胞检测发现LoVo细胞周期阻滞于G1或S期,同时可检测到亚二倍体峰的出现,荧光镜检和透射电镜观察可看到LoVo细胞的核皱缩、边集甚或碎裂,以及凋亡小体形成,其基因组经过凝胶电泳呈现典型的梯形Ladder;RT-PCR和免疫组化结果显示PMBE处理可上调LoVo细胞中p53和p21基因的转录,下调Bcl-2的蛋白表达.结论 PMBE通过上调p53和p21阻滞细胞周期和下调Bcl-2诱导细胞凋亡双重机制抑制LoVo细胞的体外生长,为进一步探索相关信号传导通路奠定了基础.

摘要： 人肝癌细胞系hep G2置于37□,含5％CO2的湿润气体环境下培养.指数生长期的细胞用Coγ射线(剂量率为0.30Gy/min)作如下照射:低剂量(5cGy)照射,高剂量(3Gy)照射以及5cGy照射后4小时或8小时再3Gy照射,同时设未照射的对照组.照射后一定时间,收集细胞,用美国贝克曼库尔特公司的流式细胞仪(Coulter Epics XL)测定细胞周期.

摘要： 土贝母是一种抗癌药物.本实验研究了从土贝母中分离、纯化活性成分苷甲对HL-60细胞周期和凋亡的影响,为临床使用提供了理论依据.

摘要： 胶质母细胞瘤是一种发病率高且治愈困难的恶性脑肿瘤,严重威胁着人类的健康.蟾毒配基类化合物具有显著的抗肿瘤活性,研究结果显示,沙蟾毒精和嚏根草苷元可选择性地抑制细胞瘤的生长,在低浓度时诱导U-87细胞周期G2/M期阻滞,随着浓度升高后,引起细胞的坏死.进一步研究发现,沙蟾毒精和嚏根草苷元通过下调Cyclin B1,Cdc25C和survivin调控细胞周期G2/M的阻滞.本文对沙蟾毒精和嚏根草苷元两个配基成分的研究,初步阐明了其体外抗胶质母细胞瘤U-87细胞的作用机制.

摘要： 胶质母细胞瘤是一种发病率高且治愈困难的恶性脑肿瘤,严重威胁着人类的健康.蟾毒配基类化合物具有显著的抗肿瘤活性,研究结果显示,沙蟾毒精和嚏根草苷元可选择性地抑制细胞瘤的生长,在低浓度时诱导U-87细胞周期G2/M期阻滞,随着浓度升高后,引起细胞的坏死.进一步研究发现,沙蟾毒精和嚏根草苷元通过下调Cyclin B1,Cdc25C和survivin调控细胞周期G2/M的阻滞.本文对沙蟾毒精和嚏根草苷元两个配基成分的研究,初步阐明了其体外抗胶质母细胞瘤U-87细胞的作用机制.

摘要： 胶质母细胞瘤是一种发病率高且治愈困难的恶性脑肿瘤,严重威胁着人类的健康.蟾毒配基类化合物具有显著的抗肿瘤活性,研究结果显示,沙蟾毒精和嚏根草苷元可选择性地抑制细胞瘤的生长,在低浓度时诱导U-87细胞周期G2/M期阻滞,随着浓度升高后,引起细胞的坏死.进一步研究发现,沙蟾毒精和嚏根草苷元通过下调Cyclin B1,Cdc25C和survivin调控细胞周期G2/M的阻滞.本文对沙蟾毒精和嚏根草苷元两个配基成分的研究,初步阐明了其体外抗胶质母细胞瘤U-87细胞的作用机制.

摘要： 用于治疗癌症的CDK4/6抑制剂和mTOR抑制剂的组合。

摘要： 公开通过遏制细胞的细胞周期并随后将所述细胞转化为iPSC产生诱导多能干细胞iPSC的方法。

摘要： 本发明公开了一种基于有机质谱检测技术的细胞周期标记和鉴定方法，属于细胞生物学技术领域。利用两类小分子标签：DNA靶向分子和微管靶向分子对细胞进行标记，优化后的标记条件能对活细胞进行标记。该类标签与有机质谱检测技术具有良好的适配性，适用于有机质谱分析的多种离子化模式，其离子化过程的解离效率高，质谱响应好。标签信号和细胞内源性脂质信号能够同时作为细胞周期区分和鉴定依据，对G0/G1、S、G2、M细胞周期阶段具有良好的区分和鉴定效果。这种方法在单细胞周期鉴定的同时，能够收集单细胞代谢物信息，进而能够在特定细胞周期阶段研究细胞代谢相关活动，在干细胞分析、肿瘤诊断和系统生物学研究等领域都具有广阔的应用前景。

摘要： 用于治疗癌症的CDK4/6抑制剂和mTOR抑制剂的组合。

摘要： 本发明提供了一种细胞周期阻滞剂6BAR在人肺癌细胞中的应用，属于生物化学与分子生物学技术领域。一种细胞周期阻滞剂6BAR在人肺癌细胞中的应用，步骤如下：细胞复苏；(2)细胞培养；(3)药物配制；(4)处理细胞；(5)检测细胞增殖抑制率；(6)检测细胞周期。本发明的数据建立在核苷类似物可干扰肿瘤细胞的DNA合成和DNA合成中需要的嘌呤、嘧啶、嘌呤核苷酸和嘧啶核苷酸的合成抑制了肿瘤细胞的存活和复制的基础之上。

摘要： 本发明提供了一种细胞周期阻滞剂6BAR在人乳腺癌细胞中的应用，属于生物化学与分子生物学技术领域。一种细胞周期阻滞剂6BAR在人乳腺癌细胞株中的应用，步骤如下：(1)细胞复苏；(2)细胞培养；(3)药物配制；(4)处理细胞；(5)检测细胞增殖抑制率；(6)检测细胞周期。本发明的数据建立在核苷类似物可干扰肿瘤细胞的DNA合成和DNA合成中需要的嘌呤、嘧啶、嘌呤核苷酸和嘧啶核苷酸的合成抑制了肿瘤细胞的存活和复制的基础之上。

摘要： 本发明提供了一种细胞周期阻滞剂KR在人肺癌细胞中的应用，属于生物化学与分子生物学技术领域。一种细胞周期阻滞剂KR在人肺癌细胞中的应用，步骤如下：细胞复苏；(2)细胞培养；(3)药物配制；(4)处理细胞；(5)检测细胞增殖抑制率；(6)检测细胞周期。本发明的数据建立在KR可以上调CDKN1A引起ATP耗竭，导致细胞周期阻滞在G0/G1期，有非常显著的体外增殖抑制活性的基础之上。

摘要： 本发明提供了一种细胞周期阻滞剂KR在人乳腺癌细胞中的应用，属于生物化学与分子生物学技术领域。一种细胞周期阻滞剂KR在人乳腺癌细胞中的应用，步骤如下：(1)细胞复苏；(2)细胞培养；(3)药物配制；(4)处理细胞；(5)检测细胞增殖抑制率；(6)检测细胞周期。本发明的有益效果：本发明的数据建立在KR可以上调CDKN1A引起ATP耗竭，导致DNA合成受阻，细胞周期阻滞在S期，有非常显著的体外增殖抑制活性的基础之上。

摘要： 本发明属于小分子RNA应用技术领域，公开了一种针对细胞周期的抗肿瘤药物及其在针对细胞周期抗肿瘤药物中的应用。药物成分包括hsa‑miR‑320a抑制物，所述hsa‑miR‑320a为一种小分子RNA，其核苷酸序列为：5’‑AAAAGCUGGGUUGAGAGGGCGA‑3’，5’‑AAAGCUG‑3’为hsa‑miR‑320a的种子区序列，本发明肿瘤细胞缺氧模型中hsa‑miR‑320a的表达通过其靶基因DAB2和RBM24阻止缺氧导致的G2期阻滞，是hsa‑miR‑320a减少缺氧导致的细胞周期阻滞并保护细胞免于死亡的治疗效果。有助于提升针对细胞周期抗肿瘤药物的疗效，为hsa‑miR‑320a提供了新的应用领域，有助于加强针对细胞周期抗肿瘤药物的疗效，在肿瘤治疗领域发挥重要作用。

摘要： 本发明属于医疗技术领域，公开了一种PI3K‑AKT信号通路介导氯硝柳胺对结肠癌细胞周期阻滞和凋亡诱导作用的测定方法。本发明通过MTT实验结果表明氯硝柳胺对不同的结肠癌细胞有明显的增殖抑制作用，且抑制作用在一定程度上呈现出时间和剂量效应，不同结肠癌细胞的IC50值略有不同。流式细胞术结果显示氯硝柳胺能阻滞结肠癌HCT116细胞于G2/M期，DAPI荧光染色显示氯硝柳胺诱导结肠癌HCT116细胞凋亡。氯硝柳胺可能通过PI3K‑AKT信号通路阻滞细胞增殖和诱导细胞凋亡，从而抑制肿瘤细胞增殖发挥抗肿瘤作用；同时，本发明提供的对结肠癌细胞进行分离及培养方法，所得结肠癌细胞：数量多、纯度高、活性好，细胞成活率达95％以上，细胞纯度达96％以上。