急性T淋巴细胞白血病

摘要： 背景儿童急性T淋巴细胞白血病(T-ALL)在现有危险度分层治疗方案中,预后存在差异。目的探究儿童急性T-ALL的生物学特征及其与临床表现、早期治疗反应及长期预后的相关性。设计回顾性队列研究。方法回顾性分析2008年3月至2018年9月首都医科大学附属北京儿童医院收治、使用CCLG-ALL-2008方案治疗的初诊为T-ALL患儿白血病免疫标志和融合基因的特征,及其与患儿临床表现、早期治疗反应和长期预后的相关性。主要结局指标无事件生存(EFS)和总生存(OS)。结果101例T-ALL患儿进入本文分析,其中男76例(75.2%)。SIL-TAL1是最常见的融合基因(21.8%,22/101),SIL-TAL1阳性患儿纳入高危的比例显著高于阴性者。干细胞标志CD34的表达率为45.5%(46/101)。表达免疫标志CD2者与初诊外周血高WBC计数相关;表达CD34者与强的松反应不良及第15 d高微小残留病(MRD)相关;表达CD33者与诱导结束时形态学不缓解及高MRD相关;表达CD10者强的松治疗反应良好者多。单因素生存分析显示,SIL-TAL1阳性、强的松治疗反应不良、治疗第15 d骨髓形态学不缓解、第33 d高MRD及高危危险度与不良的EFS和OS相关(P均<0.05),其中第33 d MRD≥1%和SIL-TAL1融合基因阳性亦是EFS和OS的独立预后影响因素,危险比分别为第33 d MRD≥1%对EFS为1.96(95%CI:1.114~3.452,P=0.020),对OS为2.062(95%CI:1.138~3.734,P=0.017);SIL-TAL1阳性对EFS为2.536(95%CI:1.053~6.104,P=0.038),对OS为2.921(95%CI:1.144~7.457,P=0.025)。结论T-ALL是一组异质性疾病,在以MRD为分层依据的治疗方案中,SIL-TAL1和治疗早期MRD对预测患儿长期预后有一定价值。

摘要： 目的探讨异基因造血干细胞移植(allogeneic hematopoietic stem cell transplantation,allo-HSCT)治疗急性T淋巴细胞白血病(T cell acute lymphoblastic leukemia,T-ALL)和急性T淋巴母细胞淋巴瘤(T cell acute lymphoblastic lymphoma,T-LBL)的疗效及预后。方法回顾性分析2014—2019年于航天中心医院接受allo-HSCT的50例T-ALL/LBL患者的临床资料,分析其临床疗效、并发症及预后。结果50例患者中男性41例,女性9例,中位年龄20.5岁(范围:9.0~63.0岁);单倍体移植44例,脐血移植2例,同胞全合移植4例;T-ALL 40例,T-LBL 10例;移植前处于完全缓解(CR)状态16例,处于未完全缓解(非CR)状态34例。移植后,中位随访20个月(范围:1~84个月),存活23例,死亡27例;移植后24个月的总生存率和无复发生存率分别为50.0%和44.0%,36个月的总生存率和无复发生存率分别为45.5%和40.0%。随访期间,共有20例患者复发,复发率为40.0%(20/50)。移植前获CR、无髓外病变、无中枢神经系统受累的患者预后较好,而移植前有无基因突变、不同预处理方案、有无急性/慢性GVHD患者的总生存期及无复发生存期组间比较差异无统计学意义(均P>0.05)。结论在这项小样本、无对照的临床研究中,T-ALL/LBL患者在缓解期行allo-HSCT可能较挽救性移植的生存预后有所改善,其中复发为移植失败的主要原因。

摘要： 目的:探讨Notch1基因在急性T淋巴细胞白血病(T-ALL)患者外周血单个核细胞(PBMC)中的表达及其对NF-κB通路的作用。方法:选取T-ALL患者67例作为试验组,以67例健康体检者作为对照。采用qRT-PCR分析PBMC中Notch1和NF-κB通路(IκBα、IKKβ)mRNA表达量,分析Notch1的表达水平与T-ALL患者临床指标和预后之间的关联,以及Notch1与NF-κB通路mRNA表达水平的关联。沉默Jurkat细胞中的Notch1基因,qRT-PCR分析Notch1、IκBα和IKKβ mRNA表达,Western blot分析Notch1、磷酸化IκBα(p-IκBα)和磷酸化IKKβ(p-IKKβ)蛋白表达。结果:T-ALL组PBMC中Notch1 mRNA表达水平高于健康组,差异有统计学意义(P<0.05)。Notch1表达水平与LDH水平、白细胞水平和危险度分级之间呈显著正相关(r=0.102,P=0.025;r=0.247,P=0.019;r=0.429,P=0.006),而与年龄和性别无显著相关性。Notch1与IκBα mRNA水平呈显著负相关(r=-0.754,P=0.039),与IKKβ mRNA水平呈显著正相关(r=0.738,P=0.002)。Notch1低表达组中位总生存时间为(18.5±2.2)个月,显著长于高表达组的(12.7±3.4)个月(χ;=1.677,P=0.038)。沉默Notch1可显著上调IκBα mRNA和p-IκBα蛋白水平(P<0.05),显著下调IKKβ mRNA和p-IKKβ蛋白水平(P<0.05)。结论:Notch1基因在T-ALL患者血浆PBMC中高表达,与患者LDH水平、白细胞水平和危险度分级等临床指标和生存率相关,Notch1可能通过NF-κB通路发挥作用。

摘要： 目的 探讨长非编码RNA-LUNAR1在成人急性T淋巴细胞白血病中的表达及其临床意义。方法 采用实时定量荧光PCR检测长非编码RNA-LUNAR1在25例健康人对照组、34例初治T-ALL组和19例T-ALL治疗缓解后复发患者组骨髓内淋巴细胞中的表达水平;采用流式细胞术(Annexin V/PI双染法)检测经过柔红霉素分别处理且LUNAR1基因呈高、低表达的2例复发T-ALL患者的肿瘤细胞凋亡情况;通过NCBI数据库获取T-ALL患者中预后资料与LUNAR1基因表达数据,COX回归分析高表达LUNAR1基因与临床预后不良的相关性。结果 与健康人对照组相比,LncRNA-LUNAR1在初治T-ALL组患者骨髓内淋巴细胞中高表达(5.61±2.75 vs 0.35±0.27,t=6.93,P<0.001),且复发患者骨髓内淋巴细胞中的LncRNA-LUNAR1基因的表达水平显著高于初发患者(23.95±9.79 vs 5.61±2.75,t=7.52,P<0.001);使用柔红霉素处理复发T-ALL患者肿瘤细胞后,高表达LncRNA-LUNAR1基因的T-ALL细胞凋亡情况显著低于LncRNA-LUNAR1基因低表达的细胞(4.06%vs 10.70%,P<0.05)。Cox比例风险模型显示,T-ALL患者LncRNA-LUNAR1基因高表达与临床预后不良相关(HR=1.86,P=0.002)。结论 成人T-ALL中异常高表达的长非编码RNA-LUNAR1基因与T-ALL的发病及复发密切相关,可预示疾病的预后及转归。LncRNA-LUNAR1有望成为潜在检测的T-ALL发病及复发的分子靶标。

摘要： 目的探讨lncRNA XIST通过miR-375-Notch1轴调控急性淋巴细胞白血病(T-acute lymphocytic leukemia,T-ALL)细胞增殖和侵袭的影响。方法以2018年6月—2021年3月收治的57例T-ALL患者为观察对象(T-ALL组),另选55例同期健康体检者为对照组。qRT-PCR检测T-ALL组和对照组及T-ALL T淋巴细胞CCRF-CEM细胞株中lncRNA XIST水平;对CCRF-CEM细胞转染si-lncRNA XIST以沉默lncRNA XIST、转染miR-375模拟物以过表达miR-375;采用CCK-8法、Transwell侵袭实验法及流式细胞术检测CCRF-CEM细胞的增殖、侵袭及凋亡情况;荧光素酶报告基因方法检测lncRNA XIST靶基因;Western blot检测Notch1、ADAM-17、Hes1蛋白表达。结果与对照组比较,T-ALL组的lncRNA XIST、Notch1 mRNA表达明显增加(P<0.05),而miR-375水平明显下降(P<0.05),且T-ALL组患者Notch1蛋白水平明显高于对照组(P<0.001)。转染si-lncRNA XIST沉默lncRNA XIST后,CCRF-CEM细胞增殖数量、侵袭能力明显下降(P<0.05),细胞凋亡明显增加(P<0.05)。荧光素酶报告基因显示miR-375是lncRNA XIST的靶点。CCRF-CEM细胞转染miR-375后,细胞增殖数量、侵袭能力明显下降(P<0.05),细胞凋亡明显增加(P<0.05)。转染si-lncRNA XIST可以明显上调miR-375水平、下调Notch1 mRNA水平,同时下调Notch1、ADAM-17、Hes1蛋白表达。结论lncRNA XIST在T-ALL患者中呈高表达,可能通过miR-375-Notch1轴影响白血病细胞生物学功能。

摘要： 目的 比较亲缘单倍型造血干细胞移植(HIDT)和同胞相合造血干细胞移植(MSDT)治疗完全缓解期(CR)急性T淋巴细胞白血病(T-ALL)的疗效.方法 回顾性分析2012年5月至2017年5月间在河北燕达陆道培医院接受HIDT(81例)和MSDT(17例)的CR期T-ALL患者的临床特点和预后.结果 HIDT组、MSDT组移植后100 dⅡ～Ⅳ度急性GVHD发生率分别为51.9％ (95％ CI42.0％～64.0％)、29.4％ (95％CI 14.1％～61.4％) (P=0.072),Ⅲ/Ⅳ度急性GVHD发生率分别为9.8％(95％CI 5.1％～19.1％)、11.8％(95％CI3.2％ ～ 43.3％)(P=1.000),巨细胞病毒(CMV)血症发生率分别为53.1％(95％CI43.3％～65.2％)、29.4％ (95％CI 14.1％～61.4％)(P=0.115),EB病毒(EBV)血症发生率分别为35.8％(95％CI26.8％～47.9％)、11.8％ (95％ CI 3.2％～43.3％)(P=0.048).HIDT、MSDT两组移植后5年总生存(OS)率分别为60.5％(95％CI5.4％～49.0％)、68.8％(95％CI11.8％～40.0％) (P=0.315),无白血病生存(LFS)率分别为58.0％(95％CI 5.5％～46.5％)、68.8％ (95％ CI11.8％～40.0％) (P=0.258),累积复发率分别为16.1％ (95％ CI 9.8％～ 26,4％)、11.8％ (95％ CI3.2％～43.3％)(P=0.643),非复发死亡率(NRM)分别为25.9％(95％CI17.9％～37.5％)、l9.4％(95％CI6.9％～54.4％)(P=0.386).结论 对于CR期T-ALL患者,当缺乏合适供者时,HIDT可作为替代选择.

摘要： 目的·探索冬凌草甲素对Jurkat细胞增殖的抑制作用及其机制.方法·采用CCK-8法、流式细胞术、瑞士吉姆萨染色、蛋白质印迹法,检测冬凌草甲素处理后Jurkat细胞的增殖情况、细胞周期、凋亡情况及有丝分裂相关蛋白激酶表达情况.蛋白质印迹法检测冬凌草甲素处理后,Jurkat细胞中Polo样蛋白激酶1(Polo-like kinase 1,PLK1)下游蛋白的磷酸化水平.通过计算机模拟、免疫沉淀、蛋白质印迹法、细胞热力学迁移实验方法研究冬凌草甲素与PLK1的结合方式及结合位点.组间比较采用t检验,P<0.05为差异具有统计学意义.结果·冬凌草甲素通过上调PLK1蛋白含量并促进其激酶活性,从而诱导Jurkat细胞发生G2/M期阻滞;冬凌草甲素可与PLK1蛋白直接结合抑制其通过泛素蛋白酶体途径降解;如PLK1蛋白的Cys67或Cys133氨基酸残基发生突变则抑制冬凌草甲素与其直接结合,且抑制冬凌草甲素对PLK1蛋白的稳定作用.结论·冬凌草甲素通过直接结合PLK1蛋白抑制其泛素化修饰及降解,促进其活性,诱导Jurkat细胞发生G2/M期阻滞;PLK1蛋白的Cys67和Cys133位点是蛋白与冬凌草甲素结合的关键位点.

摘要： 目的 探讨微小RNA(miR)-92a-3p对急性T淋巴细胞白血病(T-ALL)SupT1细胞增殖的影响及其机制.方法 将体外培养的SupT1细胞分为未转染组(正常培养)、阴性对照组(转染阴性对照)、模拟物组(转染miR-92a-3p模拟物)和抑制剂组(转染miR-92a-3p抑制剂),采用实时荧光定量PCR(RT-qPCR)检测SupT1细胞中miR-92a-3p表达水平,噻唑蓝(M T T)实验检测SupT1细胞增殖活力,流式细胞仪检测SupT1细胞周期分布情况,Western blot检测SupT1细胞中果蝇翅膀边缘出现缺口(NOTCH)信号通路相关蛋白NOTCH1、NOTCH配体Jagged1和效应分子Hes1蛋白表达情况,双荧光素酶报告基因(DLR)实验检测miR-92a-3p和NOTCH1的靶向关系.结果 与阴性对照组比较,模拟物组SupT1细胞中miR-92a-3p表达水平、G0/G1期细胞所占百分比明显升高,且细胞增殖活力和细胞在S期、G2/M期所占百分比及细胞中N O T C H1、Jagged1、Hes1蛋白表达水平均明显降低(P0.05);DLR实验结果证实miR-92a-3p可与NOTCH1靶向结合.结论 miR-92a-3p可通过诱导细胞周期阻滞抑制SupT1细胞增殖,其作用机制可能与靶向调控NOTCH信号通路有关.

摘要： 目的 探讨微小RNA(miR)-27a-3p对急性T淋巴细胞白血病(T-ALL)Jurkat细胞增殖和凋亡的影响及其机制.方法 将体外培养的T-ALL Jurkat细胞分为未转染组(未处理)、miR-NC组(转染阴性对照miR-NC)和miR-27a-3p组(转染miR-27a-3p模拟物),采用实时荧光定量PCR(qRT-PCR)检测细胞中miR-27a-3p表达水平,噻唑蓝(M T T)法检测细胞增殖,流式细胞仪检测细胞凋亡,Western blot检测细胞中B淋巴细胞瘤-2(Bcl-2)、Bcl-2相关X蛋白(Bax)和X染色体连锁的凋亡抑制基因(XIAP)蛋白表达水平,比色法检测细胞半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶(caspase)-3活性,双荧光素酶报告基因(DLR)实验检测miR-27a-3p和XIAP的靶向关系.结果 与未转染组或miR-NC组比较,miR-27a-3p组细胞中miR-27a-3p表达水平、细胞凋亡率、细胞中Bax表达水平和caspase-3活性均明显升高,而细胞增殖活力和细胞中Bcl-2、XIA P蛋白表达水平均明显降低(P0.05).DLR实验证实miR-27a-3p可与XIAP靶向结合.结论 miR-27a-3p可抑制T-ALL Jurkat细胞增殖并诱导细胞凋亡,其作用机制可能与靶向调控XIA P表达有关.

摘要： 急性T细胞淋巴细胞白血病(T-ALL)是急性淋巴细胞白血病(ALL)的一个较少见亚型.既往认为T-ALL患儿的预后较急性B淋巴细胞白血病(B-ALL)患儿差,随着治疗方案的改进,包括改善甲氨蝶呤(MTX)治疗剂量、安全应用某些新药、测定微小残留病(MRD)、研究基因突变对预后的影响、对高危患者早期识别等,T-ALL患儿的预后已接近B-ALL患儿,5年无事件生存(EFS)率达到80％.

摘要： 目的：探讨低剂量茴香霉素(ANS)与地塞米松(DEX)联合作用能否逆转急性T-淋巴细胞白血病(ALL)CEM-C1细胞的糖皮质激素(GC)耐药性及其分子机制.方法：分别用1μmol/L DEX、低剂量ANS(0.1μmol/L)及1μmol/L DEX联合0.1μmol/L ANS作用于DEX耐药的T-ALL CEM-C1细胞(DEX敏感细胞株CEM-C7为对照)24h后,MTT法检测细胞生长抑制率的变化;瑞士-姬姆萨染色观察细胞形态学的变化;AnnexinV-PI双染-流式细胞术检测细胞凋亡率的改变;PI单染-流式细胞术检测细胞周期各时相的分布变化;Western blot分析糖皮质激素受体(GR)Ser211位点磷酸化状态、p38-MAPK及JNK磷酸化状态、细胞凋亡相关蛋白及细胞周期相关蛋白的表达变化.为了进一步地探讨DEX联合ANS诱导CEM-C1细胞凋亡的具体机制,用GR、p38-MAPAK及JNK的抑制剂分别提前孵育CEM-C1细胞1h,然后再用1μmol/L DEX联合0.1μmol/L ANS处理CEM-C1细胞.至特定的时间点后,再分析上述各项指标的变化情况.结果：1.与单用DEX或ANS相比,DEX联合低剂量ANS对CEM-C7和CEM-C1细胞的生长抑制、凋亡诱导及细胞周期阻滞作用均有明显的协同效应;Western blot检测则发现联合用药组中促凋亡蛋白Bim的表达上调程度、caspase-3的活化程度及抗凋亡蛋白Bcl-2、Mcl-1的表达下调程度均较单一用药组显著;同时联合用药组中细胞周期调节蛋白CyclinA、CyclinD1和c-myc蛋白的表达下调程度及p27、p21蛋白的表达上调程度亦较单一用药组显著.2.单用DEX对GR(ser211)磷酸化、p38-MAPK及JNK的活化无影响,单用ANS则可轻微激活p38-MAPK及JNK而对GR(ser211)磷酸化无影响,但低剂量ANS联合DEX则可使GR(ser211)、p38-MAPK及JNK磷酸化显著增强,表现为明显的协同效应.3.p38-MAPK的特异性抑制剂SB203580可完全阻断低剂量ANS联合DEX所诱导的p38-MAPK的活化、部分阻断Bim的上调及Mcl-1的下调,并部分逆转低剂量ANS与DEX联合诱导的细胞凋亡,但对GR(Ser211)磷酸化几乎无影响;JNK的特异性抑制剂SP600125可完全阻断低剂量ANS联合DEX诱导的JNK的活化,但对其诱导的Bim的上调、Mcl-1的下调、GR(ser211)磷酸化几乎无影响,也不能逆转低剂量ANS与DEX联合诱导的细胞凋亡;GR的抑制剂RU486则可完全阻断低剂量ANS联合DEX所诱导的GR(ser211)磷酸化、p38-MAPK、JNK的活化,以及Bim的上调、Mcl-1的下调,并完全逆转低剂量ANS与DEX联合诱导的细胞凋亡.结论：低剂量ANS与DEX联合对GC耐药的T-ALL CEM-C1细胞有强烈的生长抑制、凋亡诱导及细胞周期阻滞作用,且二者具有明显的协同效应,其分子机制可能与低剂量ANS联合DEX激活CEM-C1细胞中的GR(ser211)、p38-MAPK及JNK信号通路有关,并且活化的GR(ser211)为p38-MAPK和JNK的上游信号分子.总之,低剂量ANS与DEX联合通过激活GR(ser211)-p38-MAPK/JNK信号通路,进而经线粒体凋亡途径及对细胞周期相关蛋白的调控诱导了CEM-C1细胞凋亡和周期阻滞,从而实现了对CEM-C1细胞GC耐药的逆转.

摘要： 目的：探讨低剂量茴香霉素(ANS)与地塞米松(DEX)联合作用能否逆转急性T-淋巴细胞白血病(ALL)CEM-C1细胞的糖皮质激素(GC)耐药性及其分子机制.方法：分别用1μmol/L DEX、低剂量ANS(0.1μmol/L)及1μmol/L DEX联合0.1μmol/L ANS作用于DEX耐药的T-ALL CEM-C1细胞(DEX敏感细胞株CEM-C7为对照)24h后,MTT法检测细胞生长抑制率的变化;瑞士-姬姆萨染色观察细胞形态学的变化;AnnexinV-PI双染-流式细胞术检测细胞凋亡率的改变;PI单染-流式细胞术检测细胞周期各时相的分布变化;Western blot分析糖皮质激素受体(GR)Ser211位点磷酸化状态、p38-MAPK及JNK磷酸化状态、细胞凋亡相关蛋白及细胞周期相关蛋白的表达变化.为了进一步地探讨DEX联合ANS诱导CEM-C1细胞凋亡的具体机制,用GR、p38-MAPAK及JNK的抑制剂分别提前孵育CEM-C1细胞1h,然后再用1μmol/L DEX联合0.1μmol/L ANS处理CEM-C1细胞.至特定的时间点后,再分析上述各项指标的变化情况.结果：1.与单用DEX或ANS相比,DEX联合低剂量ANS对CEM-C7和CEM-C1细胞的生长抑制、凋亡诱导及细胞周期阻滞作用均有明显的协同效应;Western blot检测则发现联合用药组中促凋亡蛋白Bim的表达上调程度、caspase-3的活化程度及抗凋亡蛋白Bcl-2、Mcl-1的表达下调程度均较单一用药组显著;同时联合用药组中细胞周期调节蛋白CyclinA、CyclinD1和c-myc蛋白的表达下调程度及p27、p21蛋白的表达上调程度亦较单一用药组显著.2.单用DEX对GR(ser211)磷酸化、p38-MAPK及JNK的活化无影响,单用ANS则可轻微激活p38-MAPK及JNK而对GR(ser211)磷酸化无影响,但低剂量ANS联合DEX则可使GR(ser211)、p38-MAPK及JNK磷酸化显著增强,表现为明显的协同效应.3.p38-MAPK的特异性抑制剂SB203580可完全阻断低剂量ANS联合DEX所诱导的p38-MAPK的活化、部分阻断Bim的上调及Mcl-1的下调,并部分逆转低剂量ANS与DEX联合诱导的细胞凋亡,但对GR(Ser211)磷酸化几乎无影响;JNK的特异性抑制剂SP600125可完全阻断低剂量ANS联合DEX诱导的JNK的活化,但对其诱导的Bim的上调、Mcl-1的下调、GR(ser211)磷酸化几乎无影响,也不能逆转低剂量ANS与DEX联合诱导的细胞凋亡;GR的抑制剂RU486则可完全阻断低剂量ANS联合DEX所诱导的GR(ser211)磷酸化、p38-MAPK、JNK的活化,以及Bim的上调、Mcl-1的下调,并完全逆转低剂量ANS与DEX联合诱导的细胞凋亡.结论：低剂量ANS与DEX联合对GC耐药的T-ALL CEM-C1细胞有强烈的生长抑制、凋亡诱导及细胞周期阻滞作用,且二者具有明显的协同效应,其分子机制可能与低剂量ANS联合DEX激活CEM-C1细胞中的GR(ser211)、p38-MAPK及JNK信号通路有关,并且活化的GR(ser211)为p38-MAPK和JNK的上游信号分子.总之,低剂量ANS与DEX联合通过激活GR(ser211)-p38-MAPK/JNK信号通路,进而经线粒体凋亡途径及对细胞周期相关蛋白的调控诱导了CEM-C1细胞凋亡和周期阻滞,从而实现了对CEM-C1细胞GC耐药的逆转.

摘要： 目的：探讨低剂量茴香霉素(ANS)与地塞米松(DEX)联合作用能否逆转急性T-淋巴细胞白血病(ALL)CEM-C1细胞的糖皮质激素(GC)耐药性及其分子机制.方法：分别用1μmol/L DEX、低剂量ANS(0.1μmol/L)及1μmol/L DEX联合0.1μmol/L ANS作用于DEX耐药的T-ALL CEM-C1细胞(DEX敏感细胞株CEM-C7为对照)24h后,MTT法检测细胞生长抑制率的变化;瑞士-姬姆萨染色观察细胞形态学的变化;AnnexinV-PI双染-流式细胞术检测细胞凋亡率的改变;PI单染-流式细胞术检测细胞周期各时相的分布变化;Western blot分析糖皮质激素受体(GR)Ser211位点磷酸化状态、p38-MAPK及JNK磷酸化状态、细胞凋亡相关蛋白及细胞周期相关蛋白的表达变化.为了进一步地探讨DEX联合ANS诱导CEM-C1细胞凋亡的具体机制,用GR、p38-MAPAK及JNK的抑制剂分别提前孵育CEM-C1细胞1h,然后再用1μmol/L DEX联合0.1μmol/L ANS处理CEM-C1细胞.至特定的时间点后,再分析上述各项指标的变化情况.结果：1.与单用DEX或ANS相比,DEX联合低剂量ANS对CEM-C7和CEM-C1细胞的生长抑制、凋亡诱导及细胞周期阻滞作用均有明显的协同效应;Western blot检测则发现联合用药组中促凋亡蛋白Bim的表达上调程度、caspase-3的活化程度及抗凋亡蛋白Bcl-2、Mcl-1的表达下调程度均较单一用药组显著;同时联合用药组中细胞周期调节蛋白CyclinA、CyclinD1和c-myc蛋白的表达下调程度及p27、p21蛋白的表达上调程度亦较单一用药组显著.2.单用DEX对GR(ser211)磷酸化、p38-MAPK及JNK的活化无影响,单用ANS则可轻微激活p38-MAPK及JNK而对GR(ser211)磷酸化无影响,但低剂量ANS联合DEX则可使GR(ser211)、p38-MAPK及JNK磷酸化显著增强,表现为明显的协同效应.3.p38-MAPK的特异性抑制剂SB203580可完全阻断低剂量ANS联合DEX所诱导的p38-MAPK的活化、部分阻断Bim的上调及Mcl-1的下调,并部分逆转低剂量ANS与DEX联合诱导的细胞凋亡,但对GR(Ser211)磷酸化几乎无影响;JNK的特异性抑制剂SP600125可完全阻断低剂量ANS联合DEX诱导的JNK的活化,但对其诱导的Bim的上调、Mcl-1的下调、GR(ser211)磷酸化几乎无影响,也不能逆转低剂量ANS与DEX联合诱导的细胞凋亡;GR的抑制剂RU486则可完全阻断低剂量ANS联合DEX所诱导的GR(ser211)磷酸化、p38-MAPK、JNK的活化,以及Bim的上调、Mcl-1的下调,并完全逆转低剂量ANS与DEX联合诱导的细胞凋亡.结论：低剂量ANS与DEX联合对GC耐药的T-ALL CEM-C1细胞有强烈的生长抑制、凋亡诱导及细胞周期阻滞作用,且二者具有明显的协同效应,其分子机制可能与低剂量ANS联合DEX激活CEM-C1细胞中的GR(ser211)、p38-MAPK及JNK信号通路有关,并且活化的GR(ser211)为p38-MAPK和JNK的上游信号分子.总之,低剂量ANS与DEX联合通过激活GR(ser211)-p38-MAPK/JNK信号通路,进而经线粒体凋亡途径及对细胞周期相关蛋白的调控诱导了CEM-C1细胞凋亡和周期阻滞,从而实现了对CEM-C1细胞GC耐药的逆转.

摘要： 目的：探讨低剂量茴香霉素(ANS)与地塞米松(DEX)联合作用能否逆转急性T-淋巴细胞白血病(ALL)CEM-C1细胞的糖皮质激素(GC)耐药性及其分子机制.方法：分别用1μmol/L DEX、低剂量ANS(0.1μmol/L)及1μmol/L DEX联合0.1μmol/L ANS作用于DEX耐药的T-ALL CEM-C1细胞(DEX敏感细胞株CEM-C7为对照)24h后,MTT法检测细胞生长抑制率的变化;瑞士-姬姆萨染色观察细胞形态学的变化;AnnexinV-PI双染-流式细胞术检测细胞凋亡率的改变;PI单染-流式细胞术检测细胞周期各时相的分布变化;Western blot分析糖皮质激素受体(GR)Ser211位点磷酸化状态、p38-MAPK及JNK磷酸化状态、细胞凋亡相关蛋白及细胞周期相关蛋白的表达变化.为了进一步地探讨DEX联合ANS诱导CEM-C1细胞凋亡的具体机制,用GR、p38-MAPAK及JNK的抑制剂分别提前孵育CEM-C1细胞1h,然后再用1μmol/L DEX联合0.1μmol/L ANS处理CEM-C1细胞.至特定的时间点后,再分析上述各项指标的变化情况.结果：1.与单用DEX或ANS相比,DEX联合低剂量ANS对CEM-C7和CEM-C1细胞的生长抑制、凋亡诱导及细胞周期阻滞作用均有明显的协同效应;Western blot检测则发现联合用药组中促凋亡蛋白Bim的表达上调程度、caspase-3的活化程度及抗凋亡蛋白Bcl-2、Mcl-1的表达下调程度均较单一用药组显著;同时联合用药组中细胞周期调节蛋白CyclinA、CyclinD1和c-myc蛋白的表达下调程度及p27、p21蛋白的表达上调程度亦较单一用药组显著.2.单用DEX对GR(ser211)磷酸化、p38-MAPK及JNK的活化无影响,单用ANS则可轻微激活p38-MAPK及JNK而对GR(ser211)磷酸化无影响,但低剂量ANS联合DEX则可使GR(ser211)、p38-MAPK及JNK磷酸化显著增强,表现为明显的协同效应.3.p38-MAPK的特异性抑制剂SB203580可完全阻断低剂量ANS联合DEX所诱导的p38-MAPK的活化、部分阻断Bim的上调及Mcl-1的下调,并部分逆转低剂量ANS与DEX联合诱导的细胞凋亡,但对GR(Ser211)磷酸化几乎无影响;JNK的特异性抑制剂SP600125可完全阻断低剂量ANS联合DEX诱导的JNK的活化,但对其诱导的Bim的上调、Mcl-1的下调、GR(ser211)磷酸化几乎无影响,也不能逆转低剂量ANS与DEX联合诱导的细胞凋亡;GR的抑制剂RU486则可完全阻断低剂量ANS联合DEX所诱导的GR(ser211)磷酸化、p38-MAPK、JNK的活化,以及Bim的上调、Mcl-1的下调,并完全逆转低剂量ANS与DEX联合诱导的细胞凋亡.结论：低剂量ANS与DEX联合对GC耐药的T-ALL CEM-C1细胞有强烈的生长抑制、凋亡诱导及细胞周期阻滞作用,且二者具有明显的协同效应,其分子机制可能与低剂量ANS联合DEX激活CEM-C1细胞中的GR(ser211)、p38-MAPK及JNK信号通路有关,并且活化的GR(ser211)为p38-MAPK和JNK的上游信号分子.总之,低剂量ANS与DEX联合通过激活GR(ser211)-p38-MAPK/JNK信号通路,进而经线粒体凋亡途径及对细胞周期相关蛋白的调控诱导了CEM-C1细胞凋亡和周期阻滞,从而实现了对CEM-C1细胞GC耐药的逆转.

摘要： 目的：探讨低剂量茴香霉素(ANS)与地塞米松(DEX)联合作用能否逆转急性T-淋巴细胞白血病(ALL)CEM-C1细胞的糖皮质激素(GC)耐药性及其分子机制.方法：分别用1μmol/L DEX、低剂量ANS(0.1μmol/L)及1μmol/L DEX联合0.1μmol/L ANS作用于DEX耐药的T-ALL CEM-C1细胞(DEX敏感细胞株CEM-C7为对照)24h后,MTT法检测细胞生长抑制率的变化;瑞士-姬姆萨染色观察细胞形态学的变化;AnnexinV-PI双染-流式细胞术检测细胞凋亡率的改变;PI单染-流式细胞术检测细胞周期各时相的分布变化;Western blot分析糖皮质激素受体(GR)Ser211位点磷酸化状态、p38-MAPK及JNK磷酸化状态、细胞凋亡相关蛋白及细胞周期相关蛋白的表达变化.为了进一步地探讨DEX联合ANS诱导CEM-C1细胞凋亡的具体机制,用GR、p38-MAPAK及JNK的抑制剂分别提前孵育CEM-C1细胞1h,然后再用1μmol/L DEX联合0.1μmol/L ANS处理CEM-C1细胞.至特定的时间点后,再分析上述各项指标的变化情况.结果：1.与单用DEX或ANS相比,DEX联合低剂量ANS对CEM-C7和CEM-C1细胞的生长抑制、凋亡诱导及细胞周期阻滞作用均有明显的协同效应;Western blot检测则发现联合用药组中促凋亡蛋白Bim的表达上调程度、caspase-3的活化程度及抗凋亡蛋白Bcl-2、Mcl-1的表达下调程度均较单一用药组显著;同时联合用药组中细胞周期调节蛋白CyclinA、CyclinD1和c-myc蛋白的表达下调程度及p27、p21蛋白的表达上调程度亦较单一用药组显著.2.单用DEX对GR(ser211)磷酸化、p38-MAPK及JNK的活化无影响,单用ANS则可轻微激活p38-MAPK及JNK而对GR(ser211)磷酸化无影响,但低剂量ANS联合DEX则可使GR(ser211)、p38-MAPK及JNK磷酸化显著增强,表现为明显的协同效应.3.p38-MAPK的特异性抑制剂SB203580可完全阻断低剂量ANS联合DEX所诱导的p38-MAPK的活化、部分阻断Bim的上调及Mcl-1的下调,并部分逆转低剂量ANS与DEX联合诱导的细胞凋亡,但对GR(Ser211)磷酸化几乎无影响;JNK的特异性抑制剂SP600125可完全阻断低剂量ANS联合DEX诱导的JNK的活化,但对其诱导的Bim的上调、Mcl-1的下调、GR(ser211)磷酸化几乎无影响,也不能逆转低剂量ANS与DEX联合诱导的细胞凋亡;GR的抑制剂RU486则可完全阻断低剂量ANS联合DEX所诱导的GR(ser211)磷酸化、p38-MAPK、JNK的活化,以及Bim的上调、Mcl-1的下调,并完全逆转低剂量ANS与DEX联合诱导的细胞凋亡.结论：低剂量ANS与DEX联合对GC耐药的T-ALL CEM-C1细胞有强烈的生长抑制、凋亡诱导及细胞周期阻滞作用,且二者具有明显的协同效应,其分子机制可能与低剂量ANS联合DEX激活CEM-C1细胞中的GR(ser211)、p38-MAPK及JNK信号通路有关,并且活化的GR(ser211)为p38-MAPK和JNK的上游信号分子.总之,低剂量ANS与DEX联合通过激活GR(ser211)-p38-MAPK/JNK信号通路,进而经线粒体凋亡途径及对细胞周期相关蛋白的调控诱导了CEM-C1细胞凋亡和周期阻滞,从而实现了对CEM-C1细胞GC耐药的逆转.

摘要： 目的：探讨低剂量茴香霉素(ANS)与地塞米松(DEX)联合作用能否逆转急性T-淋巴细胞白血病(ALL)CEM-C1细胞的糖皮质激素(GC)耐药性及其分子机制.方法：分别用1μmol/L DEX、低剂量ANS(0.1μmol/L)及1μmol/L DEX联合0.1μmol/L ANS作用于DEX耐药的T-ALL CEM-C1细胞(DEX敏感细胞株CEM-C7为对照)24h后,MTT法检测细胞生长抑制率的变化;瑞士-姬姆萨染色观察细胞形态学的变化;AnnexinV-PI双染-流式细胞术检测细胞凋亡率的改变;PI单染-流式细胞术检测细胞周期各时相的分布变化;Western blot分析糖皮质激素受体(GR)Ser211位点磷酸化状态、p38-MAPK及JNK磷酸化状态、细胞凋亡相关蛋白及细胞周期相关蛋白的表达变化.为了进一步地探讨DEX联合ANS诱导CEM-C1细胞凋亡的具体机制,用GR、p38-MAPAK及JNK的抑制剂分别提前孵育CEM-C1细胞1h,然后再用1μmol/L DEX联合0.1μmol/L ANS处理CEM-C1细胞.至特定的时间点后,再分析上述各项指标的变化情况.结果：1.与单用DEX或ANS相比,DEX联合低剂量ANS对CEM-C7和CEM-C1细胞的生长抑制、凋亡诱导及细胞周期阻滞作用均有明显的协同效应;Western blot检测则发现联合用药组中促凋亡蛋白Bim的表达上调程度、caspase-3的活化程度及抗凋亡蛋白Bcl-2、Mcl-1的表达下调程度均较单一用药组显著;同时联合用药组中细胞周期调节蛋白CyclinA、CyclinD1和c-myc蛋白的表达下调程度及p27、p21蛋白的表达上调程度亦较单一用药组显著.2.单用DEX对GR(ser211)磷酸化、p38-MAPK及JNK的活化无影响,单用ANS则可轻微激活p38-MAPK及JNK而对GR(ser211)磷酸化无影响,但低剂量ANS联合DEX则可使GR(ser211)、p38-MAPK及JNK磷酸化显著增强,表现为明显的协同效应.3.p38-MAPK的特异性抑制剂SB203580可完全阻断低剂量ANS联合DEX所诱导的p38-MAPK的活化、部分阻断Bim的上调及Mcl-1的下调,并部分逆转低剂量ANS与DEX联合诱导的细胞凋亡,但对GR(Ser211)磷酸化几乎无影响;JNK的特异性抑制剂SP600125可完全阻断低剂量ANS联合DEX诱导的JNK的活化,但对其诱导的Bim的上调、Mcl-1的下调、GR(ser211)磷酸化几乎无影响,也不能逆转低剂量ANS与DEX联合诱导的细胞凋亡;GR的抑制剂RU486则可完全阻断低剂量ANS联合DEX所诱导的GR(ser211)磷酸化、p38-MAPK、JNK的活化,以及Bim的上调、Mcl-1的下调,并完全逆转低剂量ANS与DEX联合诱导的细胞凋亡.结论：低剂量ANS与DEX联合对GC耐药的T-ALL CEM-C1细胞有强烈的生长抑制、凋亡诱导及细胞周期阻滞作用,且二者具有明显的协同效应,其分子机制可能与低剂量ANS联合DEX激活CEM-C1细胞中的GR(ser211)、p38-MAPK及JNK信号通路有关,并且活化的GR(ser211)为p38-MAPK和JNK的上游信号分子.总之,低剂量ANS与DEX联合通过激活GR(ser211)-p38-MAPK/JNK信号通路,进而经线粒体凋亡途径及对细胞周期相关蛋白的调控诱导了CEM-C1细胞凋亡和周期阻滞,从而实现了对CEM-C1细胞GC耐药的逆转.

摘要： 目的：探讨低剂量茴香霉素(ANS)与地塞米松(DEX)联合作用能否逆转急性T-淋巴细胞白血病(ALL)CEM-C1细胞的糖皮质激素(GC)耐药性及其分子机制.方法：分别用1μmol/L DEX、低剂量ANS(0.1μmol/L)及1μmol/L DEX联合0.1μmol/L ANS作用于DEX耐药的T-ALL CEM-C1细胞(DEX敏感细胞株CEM-C7为对照)24h后,MTT法检测细胞生长抑制率的变化;瑞士-姬姆萨染色观察细胞形态学的变化;AnnexinV-PI双染-流式细胞术检测细胞凋亡率的改变;PI单染-流式细胞术检测细胞周期各时相的分布变化;Western blot分析糖皮质激素受体(GR)Ser211位点磷酸化状态、p38-MAPK及JNK磷酸化状态、细胞凋亡相关蛋白及细胞周期相关蛋白的表达变化.为了进一步地探讨DEX联合ANS诱导CEM-C1细胞凋亡的具体机制,用GR、p38-MAPAK及JNK的抑制剂分别提前孵育CEM-C1细胞1h,然后再用1μmol/L DEX联合0.1μmol/L ANS处理CEM-C1细胞.至特定的时间点后,再分析上述各项指标的变化情况.结果：1.与单用DEX或ANS相比,DEX联合低剂量ANS对CEM-C7和CEM-C1细胞的生长抑制、凋亡诱导及细胞周期阻滞作用均有明显的协同效应;Western blot检测则发现联合用药组中促凋亡蛋白Bim的表达上调程度、caspase-3的活化程度及抗凋亡蛋白Bcl-2、Mcl-1的表达下调程度均较单一用药组显著;同时联合用药组中细胞周期调节蛋白CyclinA、CyclinD1和c-myc蛋白的表达下调程度及p27、p21蛋白的表达上调程度亦较单一用药组显著.2.单用DEX对GR(ser211)磷酸化、p38-MAPK及JNK的活化无影响,单用ANS则可轻微激活p38-MAPK及JNK而对GR(ser211)磷酸化无影响,但低剂量ANS联合DEX则可使GR(ser211)、p38-MAPK及JNK磷酸化显著增强,表现为明显的协同效应.3.p38-MAPK的特异性抑制剂SB203580可完全阻断低剂量ANS联合DEX所诱导的p38-MAPK的活化、部分阻断Bim的上调及Mcl-1的下调,并部分逆转低剂量ANS与DEX联合诱导的细胞凋亡,但对GR(Ser211)磷酸化几乎无影响;JNK的特异性抑制剂SP600125可完全阻断低剂量ANS联合DEX诱导的JNK的活化,但对其诱导的Bim的上调、Mcl-1的下调、GR(ser211)磷酸化几乎无影响,也不能逆转低剂量ANS与DEX联合诱导的细胞凋亡;GR的抑制剂RU486则可完全阻断低剂量ANS联合DEX所诱导的GR(ser211)磷酸化、p38-MAPK、JNK的活化,以及Bim的上调、Mcl-1的下调,并完全逆转低剂量ANS与DEX联合诱导的细胞凋亡.结论：低剂量ANS与DEX联合对GC耐药的T-ALL CEM-C1细胞有强烈的生长抑制、凋亡诱导及细胞周期阻滞作用,且二者具有明显的协同效应,其分子机制可能与低剂量ANS联合DEX激活CEM-C1细胞中的GR(ser211)、p38-MAPK及JNK信号通路有关,并且活化的GR(ser211)为p38-MAPK和JNK的上游信号分子.总之,低剂量ANS与DEX联合通过激活GR(ser211)-p38-MAPK/JNK信号通路,进而经线粒体凋亡途径及对细胞周期相关蛋白的调控诱导了CEM-C1细胞凋亡和周期阻滞,从而实现了对CEM-C1细胞GC耐药的逆转.

摘要： 目的：白藜芦醇是一种富含于多种食物尤其红葡萄皮中的天然多酚类化合物,具有广泛的生物学活性,对多种实体肿瘤均具有抑制作用,因而临床可用于肿瘤的化学预防及治疗.儿童急性T-淋巴细胞白血病(T-ALL)约占儿童ALL的20％-30％,其糖皮质激素耐药率及临床复发率均较高.因此寻找有效的、毒副作用小的新的药物对提高儿童T-ALL治疗具有重要临床意义.本文探讨白藜芦醇对T-ALL的作用及其分子机制.方法：以T-ALL糖皮质激素(GC)耐药的细胞株CEM-C1-15,Jurkat,Molt-4和GC敏感细胞株CEM-C7-14为研究对象,MTT法测定白藜芦醇对上述细胞的生长抑制作用;用单丹磺酰戊二胺(monodansylcadaverin,MDC)荧光染色检测自噬泡、透射电镜检测检测自噬体的形成,Annexin V/PI双染及流式细胞术检测细胞凋亡;Westem blot检测白藜芦醇作用后细胞周期调节蛋白(cyclin A,Cyclin D,p21,p27)变化,Bcl-2家族促凋亡蛋白(Bim、Bad、Bax)、抗凋亡蛋白(Bcl-2、Mcl-1)的变化及Caspase-3活化状态,自噬特异性标志蛋白LC3-Ⅱ及Beclin-1变化,以及Akt/mTOR/p70S6k-4EBP-1和p38-MAPK信号通路活化状态的改变.结果：(1)白黎芦醇显著抑制CEM-CL-15,Jurkat,Molt-4和CEM-C7-14细胞的增殖，呈时间及浓度依赖性，白藜芦醇对4株T-LL细胞增殖的抑制程度依次为Jurkat细胞>Molt-细胞>CEM-CL-15细胞>CEM-C7-14细胞;(2)白黎芦醇诱导T-ALL细胞阻滞于GO/G1期，并伴有细胞周期调节蛋白周期素A(Cyclin A)及周期素D1(cyclin D1)的表达下调，而周期素依赖的激酶抑制剂p21及p27表达则显著上调;(3)白藜芦醇通过上调促凋亡蛋白Bax,Bim,Bad表达，下调抗凋亡蛋白Mcl-1，Bc1-2的表达诱导细胞凋亡以及活化Caspase-3诱导T-ALL细胞凋亡;同时通过上调自噬相关蛋白LC3-"及Beclin1的表达而诱导T-ALL细胞自噬;(4)白黎芦醇诱导T-LL细胞凋亡及自噬的过程伴有显著受抑的Akt/mTOR/p70S6k-4EBP-1信号路径(磷酸化Akt、磷酸化mTOR,磷酸化p70S6k、及磷酸化4EBP-，均显著下调)，同时有p38-MAPK信号路径的激活(磷酸化p38表达上调);(5)采用p38特异性抑制剂SB203580可部分抑制白藜芦醇诱导的T-ALL细胞凋亡和自噬，表现为:①抑制p38-MAPK的活化也抑制了白葵芦醇诱导的T-ALL细胞抗凋亡蛋白(Mcl-1,Bcl-2)表达的下调，并轻度抑制了Caspase-3的活化，但对促凋亡蛋白表达的影响不明显;②抑制p38-MAPK的活化也同时轻度下调了白藜芦醇诱导的T一LL细胞自噬相关蛋白Beclin-，及LC-31!的表达;(6)细胞自噬特异性抑制剂3-MA在抑制白藜芦醇诱导的T-LL细胞自噬的同时显著地增加了白藜芦醇诱导的T-ALL细胞的凋亡。结论：白藜芦醇可抑制T-ALL细胞增殖，诱导细胞周期阻滞及细胞凋亡和自噬，其机制可能与抑制Akt/mTOR/p70S6K/4E-BP1信号通路和激活P38-MAPK信号通路有关;抑制自噬可增强白藜芦醇诱导的T-LL细胞凋亡，提示细胞自噬可能是白藜芦醇作用TT-LL细胞的一种自我保护机制。

摘要： 目的：白藜芦醇是一种富含于多种食物尤其红葡萄皮中的天然多酚类化合物,具有广泛的生物学活性,对多种实体肿瘤均具有抑制作用,因而临床可用于肿瘤的化学预防及治疗.儿童急性T-淋巴细胞白血病(T-ALL)约占儿童ALL的20％-30％,其糖皮质激素耐药率及临床复发率均较高.因此寻找有效的、毒副作用小的新的药物对提高儿童T-ALL治疗具有重要临床意义.本文探讨白藜芦醇对T-ALL的作用及其分子机制.方法：以T-ALL糖皮质激素(GC)耐药的细胞株CEM-C1-15,Jurkat,Molt-4和GC敏感细胞株CEM-C7-14为研究对象,MTT法测定白藜芦醇对上述细胞的生长抑制作用;用单丹磺酰戊二胺(monodansylcadaverin,MDC)荧光染色检测自噬泡、透射电镜检测检测自噬体的形成,Annexin V/PI双染及流式细胞术检测细胞凋亡;Westem blot检测白藜芦醇作用后细胞周期调节蛋白(cyclin A,Cyclin D,p21,p27)变化,Bcl-2家族促凋亡蛋白(Bim、Bad、Bax)、抗凋亡蛋白(Bcl-2、Mcl-1)的变化及Caspase-3活化状态,自噬特异性标志蛋白LC3-Ⅱ及Beclin-1变化,以及Akt/mTOR/p70S6k-4EBP-1和p38-MAPK信号通路活化状态的改变.结果：(1)白黎芦醇显著抑制CEM-CL-15,Jurkat,Molt-4和CEM-C7-14细胞的增殖，呈时间及浓度依赖性，白藜芦醇对4株T-LL细胞增殖的抑制程度依次为Jurkat细胞>Molt-细胞>CEM-CL-15细胞>CEM-C7-14细胞;(2)白黎芦醇诱导T-ALL细胞阻滞于GO/G1期，并伴有细胞周期调节蛋白周期素A(Cyclin A)及周期素D1(cyclin D1)的表达下调，而周期素依赖的激酶抑制剂p21及p27表达则显著上调;(3)白藜芦醇通过上调促凋亡蛋白Bax,Bim,Bad表达，下调抗凋亡蛋白Mcl-1，Bc1-2的表达诱导细胞凋亡以及活化Caspase-3诱导T-ALL细胞凋亡;同时通过上调自噬相关蛋白LC3-"及Beclin1的表达而诱导T-ALL细胞自噬;(4)白黎芦醇诱导T-LL细胞凋亡及自噬的过程伴有显著受抑的Akt/mTOR/p70S6k-4EBP-1信号路径(磷酸化Akt、磷酸化mTOR,磷酸化p70S6k、及磷酸化4EBP-，均显著下调)，同时有p38-MAPK信号路径的激活(磷酸化p38表达上调);(5)采用p38特异性抑制剂SB203580可部分抑制白藜芦醇诱导的T-ALL细胞凋亡和自噬，表现为:①抑制p38-MAPK的活化也抑制了白葵芦醇诱导的T-ALL细胞抗凋亡蛋白(Mcl-1,Bcl-2)表达的下调，并轻度抑制了Caspase-3的活化，但对促凋亡蛋白表达的影响不明显;②抑制p38-MAPK的活化也同时轻度下调了白藜芦醇诱导的T一LL细胞自噬相关蛋白Beclin-，及LC-31!的表达;(6)细胞自噬特异性抑制剂3-MA在抑制白藜芦醇诱导的T-LL细胞自噬的同时显著地增加了白藜芦醇诱导的T-ALL细胞的凋亡。结论：白藜芦醇可抑制T-ALL细胞增殖，诱导细胞周期阻滞及细胞凋亡和自噬，其机制可能与抑制Akt/mTOR/p70S6K/4E-BP1信号通路和激活P38-MAPK信号通路有关;抑制自噬可增强白藜芦醇诱导的T-LL细胞凋亡，提示细胞自噬可能是白藜芦醇作用TT-LL细胞的一种自我保护机制。

摘要： 目的：白藜芦醇是一种富含于多种食物尤其红葡萄皮中的天然多酚类化合物,具有广泛的生物学活性,对多种实体肿瘤均具有抑制作用,因而临床可用于肿瘤的化学预防及治疗.儿童急性T-淋巴细胞白血病(T-ALL)约占儿童ALL的20％-30％,其糖皮质激素耐药率及临床复发率均较高.因此寻找有效的、毒副作用小的新的药物对提高儿童T-ALL治疗具有重要临床意义.本文探讨白藜芦醇对T-ALL的作用及其分子机制.方法：以T-ALL糖皮质激素(GC)耐药的细胞株CEM-C1-15,Jurkat,Molt-4和GC敏感细胞株CEM-C7-14为研究对象,MTT法测定白藜芦醇对上述细胞的生长抑制作用;用单丹磺酰戊二胺(monodansylcadaverin,MDC)荧光染色检测自噬泡、透射电镜检测检测自噬体的形成,Annexin V/PI双染及流式细胞术检测细胞凋亡;Westem blot检测白藜芦醇作用后细胞周期调节蛋白(cyclin A,Cyclin D,p21,p27)变化,Bcl-2家族促凋亡蛋白(Bim、Bad、Bax)、抗凋亡蛋白(Bcl-2、Mcl-1)的变化及Caspase-3活化状态,自噬特异性标志蛋白LC3-Ⅱ及Beclin-1变化,以及Akt/mTOR/p70S6k-4EBP-1和p38-MAPK信号通路活化状态的改变.结果：(1)白黎芦醇显著抑制CEM-CL-15,Jurkat,Molt-4和CEM-C7-14细胞的增殖，呈时间及浓度依赖性，白藜芦醇对4株T-LL细胞增殖的抑制程度依次为Jurkat细胞>Molt-细胞>CEM-CL-15细胞>CEM-C7-14细胞;(2)白黎芦醇诱导T-ALL细胞阻滞于GO/G1期，并伴有细胞周期调节蛋白周期素A(Cyclin A)及周期素D1(cyclin D1)的表达下调，而周期素依赖的激酶抑制剂p21及p27表达则显著上调;(3)白藜芦醇通过上调促凋亡蛋白Bax,Bim,Bad表达，下调抗凋亡蛋白Mcl-1，Bc1-2的表达诱导细胞凋亡以及活化Caspase-3诱导T-ALL细胞凋亡;同时通过上调自噬相关蛋白LC3-"及Beclin1的表达而诱导T-ALL细胞自噬;(4)白黎芦醇诱导T-LL细胞凋亡及自噬的过程伴有显著受抑的Akt/mTOR/p70S6k-4EBP-1信号路径(磷酸化Akt、磷酸化mTOR,磷酸化p70S6k、及磷酸化4EBP-，均显著下调)，同时有p38-MAPK信号路径的激活(磷酸化p38表达上调);(5)采用p38特异性抑制剂SB203580可部分抑制白藜芦醇诱导的T-ALL细胞凋亡和自噬，表现为:①抑制p38-MAPK的活化也抑制了白葵芦醇诱导的T-ALL细胞抗凋亡蛋白(Mcl-1,Bcl-2)表达的下调，并轻度抑制了Caspase-3的活化，但对促凋亡蛋白表达的影响不明显;②抑制p38-MAPK的活化也同时轻度下调了白藜芦醇诱导的T一LL细胞自噬相关蛋白Beclin-，及LC-31!的表达;(6)细胞自噬特异性抑制剂3-MA在抑制白藜芦醇诱导的T-LL细胞自噬的同时显著地增加了白藜芦醇诱导的T-ALL细胞的凋亡。结论：白藜芦醇可抑制T-ALL细胞增殖，诱导细胞周期阻滞及细胞凋亡和自噬，其机制可能与抑制Akt/mTOR/p70S6K/4E-BP1信号通路和激活P38-MAPK信号通路有关;抑制自噬可增强白藜芦醇诱导的T-LL细胞凋亡，提示细胞自噬可能是白藜芦醇作用TT-LL细胞的一种自我保护机制。

摘要： 本发明公开了一种治疗T细胞急性淋巴细胞白血病的复方纳米制剂及制备方法和应用，该纳米制剂由一定比例的抑制剂与ABT‑737的混合物、聚乳酸‑聚羟基乙酸、乙腈、聚乙烯醇组成。步骤是：（1）将聚乳酸‑聚羟基乙酸聚合物，IRAK1/4抑制剂和ABT‑737溶解在乙腈溶液中，得混合溶液；（2）将混合溶液在聚乙烯醇溶液中乳化以形成乳液，使用微型探针超声波仪在冰浴上乳化，得乳液；（3）将乳液在室温下搅拌，得抑制剂和复方纳米颗粒；（4）将复方纳米颗粒在超速离心机超速离心，用蒸馏水洗涤，冻干保存，得抑制剂和纳米颗粒。还涉及复方纳米制剂的应用。配方合理，使用方便，延长了药物的代谢时间；增加了药物在肿瘤细胞中的吸收，从而进一步增强了药物的协同作用。

摘要： 本发明提供一种人急性B淋巴细胞白血病细胞株HXEX‑ALL1，于2017年10月25日保存于中国典型培养物保藏中心，保藏编号为CCTCC NO：C2017232。该细胞株为原代建株的人急性B淋巴细胞白血病细胞株，是具高致瘤性的人急性B淋巴细胞白血病细胞株。该细胞株为复发难治人急性淋巴细胞白血病的研究和生物医药研发提供新的细胞模型，可用于建立人源化急性淋巴细胞白血病动物模型、急性淋巴细胞白血病发生机制及复发难治机制研究平台、急性淋巴细胞白血病新药研发和筛选平台和急性淋巴细胞白血病免疫学及微生物学研究平台等。在探索人急性淋巴细胞白血病发病机制、复发难治机制和药物研发应用中有广阔的前景和较大的实用价值。

摘要： 本发明提供一种人急性T淋巴细胞白血病糖皮质激素耐药细胞株CEM‑C7/HDR及其构建方法和应用，其保藏编号为CCTCC NO：C2017233，该细胞株以急性T淋巴细胞白血病糖皮质激素敏感细胞株CEM‑C7‑14为诱导对象，模拟急性T淋巴细胞白血病细胞在骨髓中生存环境，采用0.25μM地塞米松1次诱导培养得到对糖皮质激素稳定耐药的细胞株CEM‑C7/HDR，其对地塞米松的半数抑制浓度是亲本细胞的1500倍以上。本发明为复发难治人急性淋巴细胞白血病的研究和生物医药研发提供新的细胞模型，在探索人急性T淋巴细胞白血病糖皮质激素耐药的发病机制、复发难治机制和逆转耐药药物研发的应用中有较大的实用价值。

摘要： 本发明提供一种人急性B淋巴细胞白血病糖皮质激素耐药细胞株及其构建方法和应用，其细胞名称是人急性B淋巴细胞白血病细胞株NALM‑6/HDR，保藏编号为CCTCCNO：C2017234；先将人急性B淋巴细胞白血病细胞株NALM‑6置于低氧条件下培养后，一次性加入0.25μM地塞米松，然后继续低氧培养，最后置于常氧条件下扩大培养，从而获得人急性B淋巴细胞白血病糖皮质激素耐药细胞株NALM‑6/HDR。本发明为复发难治人急性淋巴细胞白血病的研究和生物医药研发提供新的细胞模型，在探索人急性B淋巴细胞白血病糖皮质激素耐药的发病机制、复发难治机制和逆转耐药药物研发的应用中有较大的实用价值。

摘要： 本发明涉及流式细胞术领域，具体讲，涉及一种用于监测急性B淋巴细胞白血病微小残留病灶的流式细胞术试剂盒及监测方法。本发明的试剂盒包括26个抗体，针对骨髓B细胞的发育模式和ALL‑B常见的异常表达。结合全光谱流式细胞仪，可一管panel完成以上所有检测，方便快捷，省时省力，操作简单。

摘要： 本发明公开了治疗T细胞急性淋巴细胞白血病(T‑ALL)的药物组合物，所述组合物中包括抑制WTAP表达的活性成分和抑制JMJD6表达的活性成分。本发明的药物组合物通过同时抑制WTAP和JMJD6的表达，能够协同的抑制T‑ALL细胞的增殖。

摘要： 本发明公开了一种抗CD47单克隆抗体抗阿霉素耐药的急性淋巴细胞白血病细胞的应用，涉及抗CD47单克隆抗体具有治疗阿霉素耐药的急性淋巴细胞白血病的活性。从健康供体中制备PBMC来源的巨噬细胞。通过抗体依赖性细胞介导的吞噬作用（ADCP）来检测抗CD47单克隆抗体介导的细胞吞噬。通过构建耐阿霉素急性淋巴细胞白血病细胞株Nalm6‑Luc/ADR皮下移植瘤小鼠模型和全身异种移植小鼠模型，用抗CD47单克隆抗体作用于模型小鼠，观察抗CD47单克隆抗体体内治疗阿霉素耐药的急性淋巴细胞白血病的作用。

摘要： 在一个方面，本公开提供了化合物(II)、组合物和向有此需要的患者施用所述化合物和组合物的方法。在另一个方面，本发明涉及用于治疗癌症例如淋巴白血病的化合物和组合物。本公开进一步提供了抑制两种磷酸肌醇3‑激酶(PI3K)同工型γ和δ的化合物、包含所述化合物的药物组合物和使用所述化合物和药物组合物治疗、改善和/或预防非霍奇金淋巴瘤的方法。

摘要： 本发明公开了一种双黄连用于诱导人急性T淋巴细胞白血病细胞凋亡的方法，成功实现了利用双黄连来抑制白血病细胞增殖，促进白血病细胞的凋亡，这对于后期药物临床研究，进一步优化白血病患者的治疗方案具有重要的指导意义。

摘要： 本发明涉及生物医药技术领域，公开了一种急性T淋巴细胞白血病阿糖胞苷耐药细胞株构建方法，包括：A.将白血病细胞Jurkat细胞悬浮于培养基中，放置在培养箱中培养；B.将Jurkat细胞持续培养在含有0.02μg/ml Ara‑C的完全培养基中，每2‑3天换液；C.Jurkat细胞能在0.02μg/ml Ara‑C作用下稳定增殖时，逐渐提高Ara‑C的浓度，反复传代培养，直至在1μg/ml的Ara‑C浓度下稳定存活，得到耐Jurkat/Ara‑C细胞株；检测其耐药倍数；D.用无Ara‑C的完全培养基继续培养Jurkat/Ara‑C细胞株1个月，再次检测耐药倍数；为白血病的研究提供新的细胞模型。