α-淀粉酶

摘要： 采用超声法提取蓝莓叶多酚,测定纯化前后提取物中总酚含量。以对α-淀粉酶和α-葡萄糖苷酶抑制作用为评价指标研究其体外降血糖活性,并运用液相色谱-质谱联用(LC-MS)法对蓝莓叶多酚的化学成分进行鉴定。通过不同的温度和不同的pH处理蓝莓叶多酚,探究它的稳定性。以阿卡波糖为阳性对照,半数抑制浓度(IC_(50))为α-淀粉酶和α-葡萄糖苷酶抑制活性评价指标,测定提取物的抑制活性。最后经酶促动力学与Lineweaver-Burk双倒数法探讨蓝莓叶多酚的抑制类型。结果表明,蓝莓叶多酚纯化后总酚含量、α-淀粉酶和α-葡萄糖苷酶抑制率分别较纯化前增加了41.19%、138.70%和12.42%。蓝莓叶多酚在低温(30~50°C)和偏酸性(pH 2.0~8.0和3.0~5.0)环境下比较稳定,能够保持较高的α-淀粉酶和α-葡萄糖苷酶抑制活性。蓝莓叶多酚对α-淀粉酶和α-葡萄糖苷酶的IC_(50)分别为10.926和7.276μg/mL。动力学结果表明蓝莓叶多酚对两种酶的抑制作用均为混合型可逆抑制。以上结果表明蓝莓叶多酚提取物具有良好的体外降血糖活性,为蓝莓叶研究与开发提供理论性依据。

摘要： 多糖和寡糖是巴戟天的重要活性成分,对巴戟天的药用功效起着重要影响。该研究以发酵巴戟天为原料,通过探究发酵巴戟天中多糖和寡糖对α-葡萄糖苷酶和α-淀粉酶活性的抑制效果,并结合IR-HepG2细胞实验来评价这2种有效成分的降血糖作用。结果表明:发酵巴戟天中的多糖和寡糖单独或复配使用时,都能较好地抑制α-葡萄糖苷酶和α-淀粉酶的活性,且多糖的酶活性抑制能力强于寡糖。当多糖和寡糖复配的质量浓度大于0.5 IC_(50)时,其对α-葡萄糖苷酶活性抑制存在显著的协同作用。此外,这2种有效组分都可一定程度地改善IR-HepG2细胞的胰岛素抵抗作用,促进IR-HepG2细胞对葡萄糖的摄取,且与质量浓度成正相关关系。该研究为发酵巴戟天活性成分的降血糖作用机制及效果提供了有价值的科学依据。

摘要： 探究茶多酚对α-淀粉酶的抑制特性并分析其分子作用机制。采用抑制动力学的方法评价茶多酚对α-淀粉酶的抑制作用;通过荧光色谱法及圆二色谱法观察茶多酚对α-淀粉酶空间结构和稳定性的影响;利用分子对接技术,探究茶多酚与α-淀粉酶之间的分子相互作用。结果表明,茶多酚对于α-淀粉酶的活性具有明显的抑制作用,竞争类型为非竞争性抑制,半抑制浓度为1.35 mg/mL;茶多酚对α-淀粉酶具有荧光猝灭效应,其最大发射波长(λ_(max))出现红移,α-淀粉酶的二级结构由层状结构向螺旋结构转变,其稳定性显著降低;茶多酚通过氢键、疏水相互作用等与α-淀粉酶形成稳定复合物,从而降低了酶的催化活性。研究结果表明,茶多酚具有作为α-淀粉酶抑制剂的潜在价值。

摘要： 【目的】研究刺玫果醇提物对降糖酶的抑制作用及其在不同加工条件下的稳定效果,筛选出最优级分,为刺玫果开发应用提供合理的参考。【方法】以刺玫果为试材,分别用体积分数为30%、50%、70%、90%的乙醇提取刺玫果活性成分,比色法测定黄酮、多酚、多糖含量。分析刺玫果醇提物对α-葡萄糖苷酶、α-淀粉酶的抑制作用,通过IC_(50)筛选抑制效果最优级分,并研究了不同温度、自然光、紫外光、pH以及不同金属离子对刺玫果醇提物稳定性的影响。【结果】刺玫果不同醇提物中,70%醇提物对α-葡萄糖苷酶抑制作用显著(IC_(50)为1.905 mg/mL),50%醇提物对α-淀粉酶的抑制作用显著(IC_(50)为10.212 mg/mL),不同因素条件对刺玫果醇提物黄酮、多酚、多糖稳定性有一定的影响。低温有助于刺玫果稳定性的保持;随着光照时间的增加,黄酮、多酚稳定性逐渐下降,多糖则无显著影响,紫外辐射对刺玫果醇提物稳定性的影响最为显著;刺玫果醇提物在pH值2.0~6.0的酸性条件下能较好地保持多酚、多糖稳定性,pH值4.0~8.0条件下利于黄酮稳定;醇提液黄酮对Na^(+)稳定,K^(+)、Mg^(2+)均不稳定,与其他离子相比,Cu^(2+)的破坏性更为明显;多酚对低浓度的K^(+)、Mg^(2+)稳定;K^(+)对刺玫果醇提物多糖无显著影响,低浓度的Na^(+)、Mg^(2+)对多糖稳定性影响小,Cu^(2+)影响显著。【结论】70%刺玫果醇提物对α-葡萄糖苷酶的抑制效果优于α-淀粉酶,不同加工条件下稳定性更好,为刺玫果储藏加工产业的应用研究奠定基础。

摘要： 以莲藕为原料,以可溶性固形物含量为指标,采用单因素试验和正交试验研究高温淀粉酶对莲藕淀粉的酶解作用,得出适宜的酶解条件;以酶解后的莲藕汁为主要原料,制作橙味莲藕饮料,通过单因素和正交试验研究橙汁、白糖和水添加量对饮料的影响。研究结果如下:高温α-淀粉酶作用温度为95°C,时间为60 min,酶的添加量0.75‰,在此条件下,酶解后的莲藕汁可溶性固形物含量为11.6%;10 ml的莲藕汁,添加5 ml的橙汁,1 g的白糖,5 ml的纯净水,饮料感官评分为75分。

摘要： 本文旨在利用中强电场强化α-淀粉酶催化的玉米淀粉水解。以还原糖含量为指标,考察电场强度、频率、缓冲液浓度、酶液比等因素对淀粉酶解效率的影响,并利用扫描电子显微镜、X射线衍射仪、差示扫描量热仪和热重分析仪表征酶解产物的结构和热性质。结果表明,电场强度、缓冲液浓度和酶液比显著影响淀粉酶解效率,但电场频率的影响不明显。当电场强度低于5 V/cm时,淀粉的酶解程度较小,酶解产物保持淀粉原有的颗粒和结晶结构,淀粉热稳定性略有降低;但随着电场强度的进一步增加,淀粉水解程度加剧,淀粉颗粒发生破裂、结晶峰逐渐消失、相对结晶度降低,糊化温度先增加后降低、热稳定性显著降低。

摘要： 为了探讨麦谷蛋白和麦醇溶蛋白对猪胰α-淀粉酶(PPA)的抑制动力学特征。通过测定半抑制浓度(IC50),结合Dixon方程和Cornish-Bowden方程,探究麦谷蛋白和麦醇溶蛋白对PPA的抑制类型及抑制机理。结果表明,麦谷蛋白对PPA的抑制作用属于混合型竞争性抑制,麦醇溶蛋白对PPA的抑制作用属于竞争性抑制。麦谷蛋白和麦醇溶蛋白的竞争性抑制常数(Kic)分别为(20.533±3.582),(49.619±5.949)mg/mL,麦谷蛋白的反竞争性抑制常数(Kiu)为(49.358±9.779)mg/mL。麦谷蛋白和麦醇溶蛋白的IC50值分别为(14.014±1.089),(33.193±0.621)mg/mL。对于麦谷蛋白而言,Kic比Kiu小,表明麦谷蛋白与游离PPA的结合要比与淀粉和PPA形成的中间产物的结合更紧密。麦谷蛋白较麦醇溶蛋白对PPA抑制作用更强。总之,麦谷蛋白和麦醇溶蛋白均可以抑制淀粉酶的活性,从而延缓淀粉类食品的消化。研究结果将丰富典型蛋白质组分调控食物淀粉消化的机理,为碳水化合物限制饮食体系低GI食品的开发提供理论指导。

摘要： 以枯草芽孢杆菌发酵液产α-淀粉酶为对象,考察发酵液营养组成成分条件。在发酵培养基组成单因素试验的基础上,结合Plackett-Burman筛选试验、营养组分最低添加量、最陡爬坡试验和响应面Box-Benhnken试验方法,选择出对试验结果具有显著影响的因素,建立各显著性因素的二次回归方程模型,根据试验实际情况,得到最佳发酵营养成分配方:糖蜜25.0 g/L、酵母粉7.6 g/L、硫酸锰6.0 g/L、磷酸二氢钾7.0 g/L、胰蛋白胨8.0 g/L、氯化钠3 g/L、磷酸二氢钠5 g/L、磷酸氢二钾1 g/L,平均发酵液淀粉酶酶活为(2084±21)U/g。调整后实测值与二次回归方程预测值吻合良好。

摘要： 研究旨在考察纳米脂质体对α-淀粉酶活性的影响。采用3,5-二硝基水杨酸法评价了纳米脂质体浓度、超声时间、pH、离子强度、温度等5个因素在纳米脂质体影响α-淀粉酶酶活中的作用。试验结果表明:纳米脂质体可以有效提高α-淀粉酶的活性,随着其浓度的增加,α-淀粉酶与纳米脂质体复合物的酶活从267U/mg增加到343U/mg;随着超声时间的增加,复合物的酶活从366U/mg降低到342U/mg。在一定范围内,离子强度的增大可以提高复合物的酶活;在高温、强酸或强碱环境中,复合物的酶活均低于游离α-淀粉酶。研究结果为纳米脂质体在改善α-淀粉酶酶活中的应用提供了理论指导。

摘要： 为评价野梧桐种子的生物活性,采用Folin-Ciocalteu比色法测定野梧桐种子石油醚提取物(Ⅰ)和95%乙醇提取物(Ⅱ)及其乙酸乙酯萃取物(Ⅲ)和正丁醇萃取物(Ⅳ)的总酚含量;采用体外活性测试方法,分别对其α-淀粉酶、α-葡萄糖苷酶和醛糖还原酶抑制活性及抗氧化活性(DPPH、ABTS和FRAP法)进行评价。结果表明:乙酸乙酯萃取物总酚含量最高,达到(679.84±14.65)mmol·g^(-1);除石油醚提取物(Ⅰ)外,Ⅱ、Ⅲ和Ⅳ均具有一定的酶抑制活性及抗氧化活性,其中乙酸乙酯萃取物(Ⅲ)活性最为显著,对α-淀粉酶、α-葡萄糖苷酶和醛糖还原酶的半数抑制浓度(IC_(50))分别为0.106、0.087、0.058 mg·mL^(-1),清除DPPH、ABTS自由基的IC分别为0.047、0.031 mg·mL^(-1),FRAP值为12.118 mmol·g^(-1)。这说明野梧桐种子可应用于Ⅱ型糖尿病及其慢性并发症的防治,酚类成分可能是其主要活性成分。

摘要： 餐厨垃圾中含有大量的有机碳源,具有资源化回收利用的潜力.本文以三相分离后的餐厨固渣为研究对象,采用酶法和和等电点沉淀法分离餐厨垃圾中的有机碳源.结果显示,α-淀粉酶和γ-淀粉酶的协同作用能够有效分离餐厨固渣中的碳源.单因素实验基础上采用Box-Behnken响应曲面法优化酶解关键参数,在温度57.6°C、pH值6.25、底物浓度20％(以TS计)、酶添加量0.8％、α-淀粉酶和γ-淀粉酶添加比3:1的最优条件下,碳源提取率高达76.9％.复合酶解过程符合Michaelis-Menten动力学模型,米氏常数Km为31.7g·L-1,最大反应速率Vm为16.5g·(L·h)-1.采用等电点提高碳源纯度,提取液中总碳水化合物和还原糖浓度最终可分别达到61.5±2.6g·L-1和21.1±0.9g·L-1,碳氮比(C/N)从17.9增加至24.3,有潜力用于污水处理厂反硝化或者其它生物转化过程.

摘要： 餐厨垃圾中含有大量的有机碳源,具有资源化回收利用的潜力.本文以三相分离后的餐厨固渣为研究对象,采用酶法和和等电点沉淀法分离餐厨垃圾中的有机碳源.结果显示,α-淀粉酶和γ-淀粉酶的协同作用能够有效分离餐厨固渣中的碳源.单因素实验基础上采用Box-Behnken响应曲面法优化酶解关键参数,在温度57.6°C、pH值6.25、底物浓度20％(以TS计)、酶添加量0.8％、α-淀粉酶和γ-淀粉酶添加比3:1的最优条件下,碳源提取率高达76.9％.复合酶解过程符合Michaelis-Menten动力学模型,米氏常数Km为31.7g·L-1,最大反应速率Vm为16.5g·(L·h)-1.采用等电点提高碳源纯度,提取液中总碳水化合物和还原糖浓度最终可分别达到61.5±2.6g·L-1和21.1±0.9g·L-1,碳氮比(C/N)从17.9增加至24.3,有潜力用于污水处理厂反硝化或者其它生物转化过程.

摘要： 餐厨垃圾中含有大量的有机碳源,具有资源化回收利用的潜力.本文以三相分离后的餐厨固渣为研究对象,采用酶法和和等电点沉淀法分离餐厨垃圾中的有机碳源.结果显示,α-淀粉酶和γ-淀粉酶的协同作用能够有效分离餐厨固渣中的碳源.单因素实验基础上采用Box-Behnken响应曲面法优化酶解关键参数,在温度57.6°C、pH值6.25、底物浓度20％(以TS计)、酶添加量0.8％、α-淀粉酶和γ-淀粉酶添加比3:1的最优条件下,碳源提取率高达76.9％.复合酶解过程符合Michaelis-Menten动力学模型,米氏常数Km为31.7g·L-1,最大反应速率Vm为16.5g·(L·h)-1.采用等电点提高碳源纯度,提取液中总碳水化合物和还原糖浓度最终可分别达到61.5±2.6g·L-1和21.1±0.9g·L-1,碳氮比(C/N)从17.9增加至24.3,有潜力用于污水处理厂反硝化或者其它生物转化过程.

摘要： 餐厨垃圾中含有大量的有机碳源,具有资源化回收利用的潜力.本文以三相分离后的餐厨固渣为研究对象,采用酶法和和等电点沉淀法分离餐厨垃圾中的有机碳源.结果显示,α-淀粉酶和γ-淀粉酶的协同作用能够有效分离餐厨固渣中的碳源.单因素实验基础上采用Box-Behnken响应曲面法优化酶解关键参数,在温度57.6°C、pH值6.25、底物浓度20％(以TS计)、酶添加量0.8％、α-淀粉酶和γ-淀粉酶添加比3:1的最优条件下,碳源提取率高达76.9％.复合酶解过程符合Michaelis-Menten动力学模型,米氏常数Km为31.7g·L-1,最大反应速率Vm为16.5g·(L·h)-1.采用等电点提高碳源纯度,提取液中总碳水化合物和还原糖浓度最终可分别达到61.5±2.6g·L-1和21.1±0.9g·L-1,碳氮比(C/N)从17.9增加至24.3,有潜力用于污水处理厂反硝化或者其它生物转化过程.

摘要： 餐厨垃圾中含有大量的有机碳源,具有资源化回收利用的潜力.本文以三相分离后的餐厨固渣为研究对象,采用酶法和和等电点沉淀法分离餐厨垃圾中的有机碳源.结果显示,α-淀粉酶和γ-淀粉酶的协同作用能够有效分离餐厨固渣中的碳源.单因素实验基础上采用Box-Behnken响应曲面法优化酶解关键参数,在温度57.6°C、pH值6.25、底物浓度20％(以TS计)、酶添加量0.8％、α-淀粉酶和γ-淀粉酶添加比3:1的最优条件下,碳源提取率高达76.9％.复合酶解过程符合Michaelis-Menten动力学模型,米氏常数Km为31.7g·L-1,最大反应速率Vm为16.5g·(L·h)-1.采用等电点提高碳源纯度,提取液中总碳水化合物和还原糖浓度最终可分别达到61.5±2.6g·L-1和21.1±0.9g·L-1,碳氮比(C/N)从17.9增加至24.3,有潜力用于污水处理厂反硝化或者其它生物转化过程.

摘要： 餐厨垃圾中含有大量的有机碳源,具有资源化回收利用的潜力.本文以三相分离后的餐厨固渣为研究对象,采用酶法和和等电点沉淀法分离餐厨垃圾中的有机碳源.结果显示,α-淀粉酶和γ-淀粉酶的协同作用能够有效分离餐厨固渣中的碳源.单因素实验基础上采用Box-Behnken响应曲面法优化酶解关键参数,在温度57.6°C、pH值6.25、底物浓度20％(以TS计)、酶添加量0.8％、α-淀粉酶和γ-淀粉酶添加比3:1的最优条件下,碳源提取率高达76.9％.复合酶解过程符合Michaelis-Menten动力学模型,米氏常数Km为31.7g·L-1,最大反应速率Vm为16.5g·(L·h)-1.采用等电点提高碳源纯度,提取液中总碳水化合物和还原糖浓度最终可分别达到61.5±2.6g·L-1和21.1±0.9g·L-1,碳氮比(C/N)从17.9增加至24.3,有潜力用于污水处理厂反硝化或者其它生物转化过程.

摘要： 本研究用不同浓度的Cu2+、Zn2+处理白刺花种子,结果表明:Cu2+、Zn2+对白刺花种子中α-淀粉酶、根的伸长都有抑制作用,其中Cu2+的抑制作用最为强烈.抑制作用都是随浓度的增加而增强.除了低于0.6mg·mL-的Zn2+对白刺花种子的萌发起促进作用外,浓度高于0.6mg·mL-1的Zn2+和Cu2+对白刺花种子的萌发都起抑制作用,抑制作用随浓度增加而增强.用枯草杆菌蛋白酶处理白刺花种子,结果发现枯草杆菌蛋白酶对白刺花种子的萌发、α-淀粉酶、根的伸长都有抑制作用.

摘要： 本研究用不同浓度的Cu2+、Zn2+处理白刺花种子,结果表明:Cu2+、Zn2+对白刺花种子中α-淀粉酶、根的伸长都有抑制作用,其中Cu2+的抑制作用最为强烈.抑制作用都是随浓度的增加而增强.除了低于0.6mg·mL-的Zn2+对白刺花种子的萌发起促进作用外,浓度高于0.6mg·mL-1的Zn2+和Cu2+对白刺花种子的萌发都起抑制作用,抑制作用随浓度增加而增强.用枯草杆菌蛋白酶处理白刺花种子,结果发现枯草杆菌蛋白酶对白刺花种子的萌发、α-淀粉酶、根的伸长都有抑制作用.

摘要： 本研究用不同浓度的Cu2+、Zn2+处理白刺花种子,结果表明:Cu2+、Zn2+对白刺花种子中α-淀粉酶、根的伸长都有抑制作用,其中Cu2+的抑制作用最为强烈.抑制作用都是随浓度的增加而增强.除了低于0.6mg·mL-的Zn2+对白刺花种子的萌发起促进作用外,浓度高于0.6mg·mL-1的Zn2+和Cu2+对白刺花种子的萌发都起抑制作用,抑制作用随浓度增加而增强.用枯草杆菌蛋白酶处理白刺花种子,结果发现枯草杆菌蛋白酶对白刺花种子的萌发、α-淀粉酶、根的伸长都有抑制作用.

摘要： 本研究用不同浓度的Cu2+、Zn2+处理白刺花种子,结果表明:Cu2+、Zn2+对白刺花种子中α-淀粉酶、根的伸长都有抑制作用,其中Cu2+的抑制作用最为强烈.抑制作用都是随浓度的增加而增强.除了低于0.6mg·mL-的Zn2+对白刺花种子的萌发起促进作用外,浓度高于0.6mg·mL-1的Zn2+和Cu2+对白刺花种子的萌发都起抑制作用,抑制作用随浓度增加而增强.用枯草杆菌蛋白酶处理白刺花种子,结果发现枯草杆菌蛋白酶对白刺花种子的萌发、α-淀粉酶、根的伸长都有抑制作用.

摘要： 本发明提供了一种编码显示出碱性α-淀粉酶活性的碱性支链淀粉酶的DNA片段、具有3号序列所描述的氨基酸序列和编码该淀粉酶的DNA片段的碱性α-淀粉酶、具有4号序列所描述的氨基酸序列和编码该支链淀粉酶的DNA片段的碱性支链淀粉酶、包含所述DNA片段的重组DNA以及包含该重组DNA的转化过的微生物。本发明的技术使得可以大量生产显示出碱性α-淀粉酶活性的碱性支链淀粉酶。

摘要： 本发明公开了涉及变体α-淀粉酶的组合物和方法。所述变体α-淀粉酶可用于例如淀粉液化和糖化、用于清洁衣物、餐具和其他应用中的含淀粉污渍、用于纺织物处理(例如退浆)、在动物饲料中用于改善消化率以及用于烘培和酿造。

摘要： 本发明提供了一种来自棒曲霉(Aspergillus？clavatus)的真菌α-淀粉酶(AcAmy1)。AcAmy1的最佳pH为4.5，并且在30-75°C下有效，从而允许所述酶以与葡糖淀粉酶和支链淀粉酶的组合用于糖化反应中。这消除了对将糖化反应实施为分批过程的所述需求，在所述分批过程中必须对所述pH和温度进行重新调整，以便最佳地使用所述α-淀粉酶或葡糖淀粉酶。AcAmy1还催化淀粉底物糖化为低聚糖组合物，所述低聚糖组合物与所述由来自白曲霉(Aspergillus？kawachii)的α-淀粉酶催化的糖化产物相比，显著地富含DP2和(DP1+DP2)。这有利于发酵生物例如在同时糖化和发酵工艺中对所述低聚糖组合物的利用。

摘要： 本发明提供了一种编码显示出碱性α－淀粉酶活性的碱性支链淀粉酶的DNA片段、具有3号序列所描述的氨基酸序列和编码该淀粉酶的DNA片段的碱性α－淀粉酶、具有4号序列所描述的氨基酸序列和编码该支链淀粉酶的DNA片段的碱性支链淀粉酶、包含所述DNA片段的重组DNA以及包含该重组DNA的转化过的微生物。本发明的技术使得可以大量生产显示出碱性α－淀粉酶活性的碱性支链淀粉酶。

摘要： 一种生产含有修饰淀粉内容物的植物产品的方法，产品包括较高直链淀粉与支链淀粉之比，增加中间物质，或者支链淀粉具有较少分支化或改变的分支化模式。也提供了用于该方法中的DNA构建物和转化的植物细胞。优选的方法使用来自产黄菌的异淀粉酶，更优选与编码ADP葡萄糖焦磷酸化酶基因组合。也公开了来自产黄菌和被转化细菌的基因和包含其衍生物的植物细胞。

摘要： 本发明低温淀粉酶生产方法技术领域，具体的说是一种低温淀粉酶菌株、低温淀粉酶的生产方法，包括如下步骤：S1:于顶部入口处添加玉米粉、小麦粉、酵母膏、中蜂蜜、蛋白胨的混合物，然后再将盛放有中间气单孢菌的惰性气体罐上的加料管与发酵机的加料口连接，使得中间气单孢菌进入发酵机的内部，最后加入适量的去离子水，发酵时长为2‑3d，温度为15‑25°C；S2:发酵完后进行发酵液的取用时，将注射针管从发酵机的加料口插入，此时调节驱动橡胶圆环使得橡胶筒的底部上移，用注射针管吸出菌落；本发明大大减小了橡胶筒内溶液与空气的接触机会，从而可防止发酵液发生污染，且进行下一批的菌落的培养时，可直接从加料口注入原料，进而可实现持续化生产。

摘要： 本发明公开了一种不依赖钙离子α‑淀粉酶的分离纯化方法，将10％(v/v)芽孢杆菌(Bacillus sp.)BH 072种子液接于LB产酶发酵培养基中，在初始培养温度为37°C，摇床转速160rpm条件下，培养24h，得到粗酶液。采用硫酸铵沉淀法至溶液硫酸铵终饱和浓度达到80％(w/v)使酶充分沉淀，复溶，透析；利用阴离子交换层析和凝胶过滤层析等步骤纯化α‑淀粉酶，同时进行酶学性质分析，纯α‑淀粉酶的分子量为68kDa，比酶活为975U/mg，纯化倍数达到21.2倍，最适pH为6.5、最适温度为65°C，且α‑淀粉酶活性不依赖钙离子。本方法得到的α‑淀粉酶纯度高、纯化倍数高。

摘要： 本发明公开了生产重组混合异淀粉酶、α淀粉酶和葡葡萄糖淀粉酶方法。属生物技术领域。首先从解淀粉假单胞杆菌基因组中扩增异淀粉酶基因，从地衣芽孢杆菌基因组中扩增α淀粉酶基因，从大麦基因组中扩增α淀粉酶基因，从黑曲霉菌基因组中扩增葡萄糖淀粉酶基因；分别构建含异淀粉酶、两种α淀粉酶和葡萄糖淀粉酶基因的枯草芽孢杆菌表达载体、毕赤酵母表达载体和酿酒酵母表达载体；构建工程菌：将枯草芽孢杆菌表达载体转化枯草芽孢杆菌基因组，将毕赤酵母表达载体转化毕赤酵母基因组，将酿酒酵母表达载体转化酿酒酵母基因组；发酵工程菌生产重组混合异淀粉酶、α淀粉酶和葡萄糖淀粉酶。这些酶的混合应用能显著地加强水解淀粉为葡萄糖的作用。生产混合酶的优越性在于，将常规需要几道工序分别生产异淀粉酶、α淀粉酶和葡萄糖淀粉酶，转变为一道工序生产这三种酶的混合酶，起到显著地减少能耗和降低生产成本的作用。

摘要： 本发明公开了生产重组混合异淀粉酶、α淀粉酶和葡葡萄糖淀粉酶方法。属生物技术领域。首先从解淀粉假单胞杆菌基因组中扩增异淀粉酶基因，从地衣芽孢杆菌基因组中扩增α淀粉酶基因，从大麦基因组中扩增α淀粉酶基因，从黑曲霉菌基因组中扩增葡萄糖淀粉酶基因；分别构建含异淀粉酶、两种α淀粉酶和葡萄糖淀粉酶基因的枯草芽孢杆菌表达载体、毕赤酵母表达载体和酿酒酵母表达载体；构建工程菌：将枯草芽孢杆菌表达载体转化枯草芽孢杆菌基因组，将毕赤酵母表达载体转化毕赤酵母基因组，将酿酒酵母表达载体转化酿酒酵母基因组；发酵工程菌生产重组混合异淀粉酶、α淀粉酶和葡萄糖淀粉酶。这些酶的混合应用能显著地加强水解淀粉为葡萄糖的作用。生产混合酶的优越性在于，将常规需要几道工序分别生产异淀粉酶、α淀粉酶和葡萄糖淀粉酶，转变为一道工序生产这三种酶的混合酶，起到显著地减少能耗和降低生产成本的作用。

摘要： 一种α淀粉酶及高产α淀粉酶的诱变菌株。本发明提供了一种黑曲霉突变株，其保藏编号为CGMCC No. 11336。本发明通过紫外诱变方法获得的突变菌株黑曲霉Aom1能够高效表达来源于米曲霉的α淀粉酶，其发酵上清液的酶活高达778.2 CU/mL，是出发菌株的2.56倍；而且，突变菌株黑曲霉Aom1表达的α淀粉酶的最适作用pH为6.0，最适作用温度为50°C，与出发菌株相比，酶学性质没有发生变化。此外，本发明所述黑曲霉Aom1是食品安全菌（GRAS），因此其分泌表达的α淀粉酶也可应用于食品添加剂领域，进一步拓宽了所述α淀粉酶的市场空间。