少突胶质前体细胞

摘要： 背景:胶质母细胞瘤是成人常见的恶性脑肿瘤,目前尚缺乏有效的治疗方法,临床预后不良。目的:观察单次高剂量放疗对神经胶质母细胞瘤的疗效,以及少突胶质前体细胞修复放射性脑损伤的可行性。方法:通过质粒转染构建可表达荧光素酶(Luc)的人源性U-87 MG肿瘤细胞系。15只Fisher 344大鼠制备Luc-U-87 MG神经胶质母细胞瘤模型,随机分为肿瘤模型组(n=3)、放疗组(n=6)和放疗+细胞移植组(n=6),后两组放疗方式为单次80 Gy辐射;放疗后5周,放疗+细胞移植组大鼠联合少突胶质前体细胞移植治疗。利用活体成像的方法监测肿瘤细胞的生长;MRI观察放疗引起的脑组织影像学变化;采用Kaplan-Meier生存分析明确细胞移植对放疗大鼠生存率的影响;对移植细胞的存活及分化情况进行组织学观察。结果与结论:①体外生物成像示转染后的U-87 MG细胞与Luc底物产生反应发出生物信号,信号强度与转染细胞的数量呈线性正相关;②动物活体成像结果显示,肿瘤模型大鼠的颅内胶质母细胞瘤信号持续上升直至接种第5周(全部死亡);放疗大鼠在治疗后2周,肿瘤信号开始衰减,4周后未见肿瘤发光信号;③放疗后5周,T2WI上可见放疗大鼠坏死的肿瘤组织;10周后未见肿瘤显影,但出现脑组织损伤信号,少突胶质前体细胞移植大鼠脑组织未见类似信号;15周后,放疗组和放疗+细胞移植组大鼠在T2WI上均可见高、低混杂的组织损伤信号,但放疗+细胞移植组的损伤信号程度明显低于单纯放疗组;④生存分析结果显示模型组、放疗组及放疗+细胞移植组大鼠的中位生存期分别为30 d,114.5 d和232.5 d,各组大鼠的中位生存期之间差异均有显著性意义(P<0.01);⑤组织学观察到存活的移植细胞,呈多极样,部分细胞表达髓鞘碱性蛋白,且放疗+细胞移植组的髓鞘碱性蛋白表达明显高于放疗组(P<0.01);⑥上述结果表明,单次高剂量放疗可有效治疗大鼠人源性神经胶质母细胞瘤,少突胶质前体细胞移植可通过修复放射性脑损伤延长放疗大鼠的生存期,促进髓鞘化是其修复损伤脑组织的机制之一。

摘要： 背景:脱髓鞘疾病是以神经髓鞘脱失为主、神经元胞体及轴突相对损伤较轻为特征的一种疾病.正常生理条件下,髓鞘脱失后机体会自发地进行髓鞘再生,但在病理条件下,该过程会因多种因素被抑制,导致髓鞘再生不完全或失败,使脱髓鞘发展,病情持续加重.目的:文章强调了少突胶质细胞在髓鞘再生过程中的重要性,以及如何从少突胶质细胞的角度开展以药物和细胞为基础的脱髓鞘疾病药物的研发,以期为脱髓鞘疾病的药物开发提供新的途径.方法:利用PubMed、GeenMedical和中国知网等数据库检索、筛选与少突胶质细胞和脱髓鞘疾病相关或涉及少突胶质前体细胞、少突胶质细胞相关功能以及髓鞘再生方面的文献,英文检索词为"oligodendrocyte,demyelinating disease",中文检索词为"少突胶质细胞、脱髓鞘疾病",检索时间从各数据库建库至2021-05-01,共纳入参考文献142篇.结果 与结论:①少突胶质细胞在脱髓鞘疾病中对于髓鞘再生的作用至关重要,炎性微环境中,少突胶质细胞的功能会受到损伤并损害轴突传导,维持少突胶质细胞在中枢神经系统中的功能对于脱髓鞘疾病的治疗至关重要.②目前,针对脱髓鞘疾病新的治疗策略层出不穷,主要以预防炎症为主.如通过生物信息技术手段筛选出可用的小分子化合物或经美国食品和药物管理局批准的药物为筛选对象开发出可以靶向调节髓鞘再生不同阶段内在或外在信号的药物,以及移植具有分化为少突胶质细胞能力的中枢神经系统干细胞至病灶区域的细胞疗法.现行研究的治疗切入点各有千秋,研发出低成本、低不良反应、高药物疗效、高效益的治疗策略还将面临艰巨的挑战.

摘要： 2022年5月11日,浙江大学医学院刘冲研究员团队在《自然》(Nature)发表了题为“Olfactory sensory experience regulates gliomagenesis via neuronal IGF1”的研究论文(DOI:10.1038/s41586-022-04719-9),明确嗅觉感知可以通过激活对应功能神经环路的活动直接调控恶性胶质瘤发生。研究人员构建并系统分析了一个模拟成人少突胶质前体细胞(OPC)作为细胞起源的原发胶质瘤小鼠遗传学模型。

摘要： 目的评价冷藏保存时间对人少突胶质前体细胞生物学特性的影响。方法取生长状态良好的第3代人少突胶质前体细胞,按照4×10^(7) mL^(-1)细胞浓度重悬于含有10 g/L人血清白蛋白的50 g/L葡萄糖保存介质中,置于2~8°C冷链运输箱中保存24 h、48 h、72 h,与新鲜制备的少突胶质前体细胞(即冷藏保存0 h细胞)比较,评价冷藏保存时间对细胞活率、增殖能力、迁移能力、免疫表型及分化能力的影响。将冷藏保存24 h的少突胶质前体细胞移植到脑白质损伤大鼠侧脑室内,观察移植细胞在体内成髓鞘情况。结果与冷藏保存0 h细胞比较,冷藏保存24 h、48 h细胞活率没有显著差异,冷藏保存72 h细胞活率明显下降(P<0.05);通过CCK8法检测各组细胞增殖能力,结果显示冷藏保存24 h和48 h细胞增殖能力与冷藏保存0 h的细胞比较无显著差异,冷藏保存72 h细胞增殖能力显著下降(P<0.05);细胞体外迁移和分化结果显示,与冷藏保存0 h细胞比较,冷藏保存24 h的细胞迁移和分化能力无显著差异,冷藏保存48 h和72 h,细胞迁移和分化能力显著下降。体内实验证实,冷藏保存24 h的少突胶质前体细胞在体内可以分化为产髓鞘碱性蛋白的少突胶质细胞。结论人少突胶质前体细胞在含有10 g/L人血白蛋白的50 g/L葡萄糖保存介质中冷藏保存24 h,细胞活率、迁移和分化能力较好,因此,建议少突胶质前体细胞制剂冷藏保存24 h内移植,以确保最佳治疗效果。

摘要： 人脐带间充质干细胞human umbilical cord⁃derived mesenchymal stem cells(hUC⁃MSCs)乳酸脱氢酶lactate dehydrogenase(LDH)三级淋巴结构tertiary lymphoid structures(TLS)Stroop色词测验Stroop Color⁃Word Test(SCWT)少突胶质前体细胞oligodendrocyte precursor cells(OPCs)神经干细胞neural stem cells(NSCs)神经系统免疫相关不良反应neurologic immune⁃related adverse events(NirAEs)神经炎性斑neuritic plaques(NPs)[老年斑senile plaques(SPs)]神经元胞质包涵体neuronal cytoplasmic inclusion(NCI)神经元核内包涵体neuronal intranuclear inclusion(NII)神经原纤维缠结neurofibrillary tangles(NFTs)肾上腺脑白质营养不良adrenoleukodystrophy(ALD).

摘要： 背景:少突胶质前体细胞移植是治疗早产儿脑白质损伤的关键措施之一,目前国内外缺乏人胎脑来源神经干细胞诱导的少突胶质前体细胞在不同器皿中培养比较的研究.目的:观察不同细胞培养器皿(6孔板、24孔板和T25培养瓶)对人胎脑来源神经干细胞系诱导培养的人少突胶质前体细胞和前-少突胶质细胞形态的影响.方法:采用6孔板、24孔板和T25培养瓶作为培养器皿培养人少突胶质前体细胞和前-少突胶质细胞,免疫荧光染色和流式细胞术对人少突胶质前体细胞的特性进行鉴定,普通光学显微镜观察细胞形态,依据细胞形态进行计数并统计分析.结果与结论:①少突胶质前体细胞胞体呈圆形,双极突起呈串珠样结构;前-少突胶质细胞突起多于2极但不分叉;②与T25培养瓶、24孔板相比,6孔板中双极串珠样的少突胶质前体细胞比例最高,差异有显著性意义(P<0.05),其次依次为T25培养瓶、24孔板;与T25培养瓶、6孔板相比,24孔板中前-少突胶质细胞的比例最高,差异有显著性意义(P<0.01),其次依次为T25培养瓶、6孔板;③6孔板中培养的细胞渣滓少,形态、活力和长势比其他培养皿更佳;④从形态学角度分析,6孔板更适宜于少突胶质前体细胞的生长,24孔板更适宜于前-少突胶质细胞的生长.

摘要： 背景:少突胶质前体细胞是治疗脑白质损伤的种子细胞,建立高效稳定的体外培养方法是临床应用的重要前提.目的:探讨少突胶质前体细胞培养过程中的形态变化.方法:采用4批人少突胶质前体细胞从第2代体外传代培养至第7代,每次传代前在光学显微镜下拍200倍视野照片5张,根据细胞形态将少突胶质前体细胞分为双极类细胞(少突胶质前体细胞)、多极类细胞(晚期少突胶质前体细胞)和极上分叉类细胞(未成熟少突胶质细胞)3个类型,分别计算各类型细胞占总细胞数的比例,从而比较各个代数之间细胞形态有无差异.结果与结论:少突胶质前体细胞从第2代传代至第7代过程中,包含双极类细胞、多极类细胞和极上分叉类细胞3种类型,其中以双极类细胞和多极类细胞为主,剩余可见少量极上分叉类细胞.各代细胞中的双极类细胞比例、多极类细胞比例及极上分叉类细胞比例差异无显著性意义(P>0.05).结果表明,采用细胞形态分类计数方法初步评估得出少突胶质前体细胞在培养过程中形态无变化.

摘要： 背景:少突胶质前体细胞移植是治疗早产儿脑白质损伤的关键措施之一,目前国内外缺乏人胎脑来源神经干细胞诱导的少突胶质前体细胞在不同器皿中培养比较的研究。目的:观察不同细胞培养器皿(6孔板、24孔板和T25培养瓶)对人胎脑来源神经干细胞系诱导培养的人少突胶质前体细胞和前-少突胶质细胞形态的影响。方法:采用6孔板、24孔板和T25培养瓶作为培养器皿培养人少突胶质前体细胞和前-少突胶质细胞,免疫荧光染色和流式细胞术对人少突胶质前体细胞的特性进行鉴定,普通光学显微镜观察细胞形态,依据细胞形态进行计数并统计分析。结果与结论:①少突胶质前体细胞胞体呈圆形,双极突起呈串珠样结构;前-少突胶质细胞突起多于2极但不分叉;②与T25培养瓶、24孔板相比,6孔板中双极串珠样的少突胶质前体细胞比例最高,差异有显著性意义(P <0.05),其次依次为T25培养瓶、24孔板;与T25培养瓶、6孔板相比,24孔板中前-少突胶质细胞的比例最高,差异有显著性意义(P <0.01),其次依次为T25培养瓶、6孔板;③6孔板中培养的细胞渣滓少,形态、活力和长势比其他培养皿更佳;④从形态学角度分析,6孔板更适宜于少突胶质前体细胞的生长,24孔板更适宜于前-少突胶质细胞的生长。

摘要： 背景:少突胶质前体细胞是治疗脑白质损伤的种子细胞,建立高效稳定的体外培养方法是临床应用的重要前提。目的:探讨少突胶质前体细胞培养过程中的形态变化。方法:采用4批人少突胶质前体细胞从第2代体外传代培养至第7代,每次传代前在光学显微镜下拍200倍视野照片5张,根据细胞形态将少突胶质前体细胞分为双极类细胞(少突胶质前体细胞)、多极类细胞(晚期少突胶质前体细胞)和极上分叉类细胞(未成熟少突胶质细胞)3个类型,分别计算各类型细胞占总细胞数的比例,从而比较各个代数之间细胞形态有无差异。结果与结论:少突胶质前体细胞从第2代传代至第7代过程中,包含双极类细胞、多极类细胞和极上分叉类细胞3种类型,其中以双极类细胞和多极类细胞为主,剩余可见少量极上分叉类细胞。各代细胞中的双极类细胞比例、多极类细胞比例及极上分叉类细胞比例差异无显著性意义(P>0.05)。结果表明,采用细胞形态分类计数方法初步评估得出少突胶质前体细胞在培养过程中形态无变化。

摘要： 目的 研究钠-钾-氯共转运体1(NKCC1)抑制剂布美他尼(Bumetanide)对脊髓原代少突胶质前体细胞(OPCs)增殖的影响及其机制.方法 振摇及差速贴壁法培养大鼠脊髓原代OPCs,使用NKCC1抑制剂布美他尼干预.免疫荧光法鉴定细胞及其NKCC1表达;EdU细胞增殖检测试剂盒检测细胞增殖;流式细胞术检测细胞周期;Western blot检测丝裂原活化蛋白激酶(MAPKs)信号通路蛋白p-p38,p-ERK,p-JNK表达.结果 免疫荧光实验显示纯化培养的OPCs 95％ 以上表达NG2+A2B5,且能分化为少突胶质细胞;OPCs 100％ 表达NKCC1.EdU结果显示,与对照组相比,布美他尼干预6、12和24 h时,OPCs EdU阳性率增高[6 h:(9.00±0.39)％vs.(20.50±0.47)％,12 h:(10.33±0.33)％vs.(20.66±0.48)％,24 h:(11.30±0.34)％vs.(20.87±0.46)％,n=4,均P<0.01];流式细胞术结果显示,与对照组相比,布美他尼干预6、12和24 h时,S期细胞比例增多[6 h:(10.57±0.48)％v s.(19.75±0.32)％,12 h:(10.38±0.54)％vs.(20.12±0.58)％,24 h:(10.53±0.55)％vs.(20.35±0.43)％,n=4,均P<0.01].Western blot检测显示,与对照组相比,布美他尼干预6、12和24 h时,p-p38表达上升,p-ERK表达下降(均P<0.01),p-JNK无明显差异.结论 NKCC1抑制剂布美他尼促进脊髓原代OPCs增殖,其机制可能是通过上调p38/MAPKs信号通路,下调ERK/MAPKs信号通路来实现.

摘要： 少突胶质前体细胞(oligodendrocyte precursor cells,OPCs)是存在于中枢神经系统中的一类大胶质细胞,其表达NG2硫酸软骨素多聚糖蛋白,因此又称为NG2细胞.在哺乳动物胚胎生长及发育的进程中,中枢神经系统中的神经干细胞(neural stem cell,Nsc)可分裂分化为少突胶质前体细胞,分化完成的OPC存在于大脑和脊髓中,在室管膜下区含量丰富.在出生后的第一周,一部分OPC在白质区开始进行终末分化,失去迁移能力,完成分化进程成为成熟的少突胶质细胞(oligodendrocyte,OL)[1],在成人的神经系统中,仍存在约占中枢神经细胞2-9％的未分化OPCs,在髓鞘的修复发挥作用[2].

摘要： 研究体外条件下，咪康唑对少突胶质前体细胞生长增殖能力，细胞形态和细胞纯度及细胞分化能力的影响。结果表明，咪康唑可促进OPC的生长增殖，并可提高OPC的纯度，然而，在体外条件下，本实验并未发现其可促进OPC分化为OL。

摘要： 目的：本研究旨在探究一种简单、易行、成本低廉的少突胶质前体细胞培养方法.方法：取新生24h内的新生SD大鼠的大脑皮层,并将其剪碎、消化、过滤成单个细胞悬液,进行细胞培养,纯化所培养细胞,并对其进行表面标志物的鉴定,将所培养的细胞诱导分化,并对其分化细胞进行鉴定.结果：体外分离培养的少突胶质前体细胞生长良好,经鉴定以及分化实验符合少突胶质前体细胞的特性.结论：采用本方法进行少突胶质前体细胞培养切实可行,并大大降低了培养周期及成本.

摘要： 本发明涉及一种通过直接重编程由其中引入有编码Oct4蛋白的核酸分子的人体细胞或用Oct4蛋白处理的人体细胞诱导少突胶质细胞前体细胞的方法。用低分子量物质处理Oct4过表达人体细胞诱导少突胶质细胞前体细胞的方法可以通过不经由神经干细胞而直接重编程在短时间内高效地建立少突胶质细胞前体细胞，因此少突胶质细胞前体细胞作为治疗难治性脱髓鞘疾病的细胞治疗剂是有用的。

摘要： 本发明涉及一种通过直接重编程由其中引入有编码Oct4蛋白的核酸分子的人体细胞或用Oct4蛋白处理的人体细胞诱导少突胶质细胞前体细胞的方法。用低分子量物质处理Oct4过表达人体细胞诱导少突胶质细胞前体细胞的方法可以通过不经由神经干细胞而直接重编程在短时间内高效地建立少突胶质细胞前体细胞，因此少突胶质细胞前体细胞作为治疗难治性脱髓鞘疾病的细胞治疗剂是有用的。

摘要： 本发明涉及适于培养干细胞衍生的少突胶质细胞前体细胞的合成表面，该合成表面包含由一种或多种丙烯酸酯单体形成的丙烯酸酯聚合物。在许多情况下，所述丙烯酸酯表面适于在化学限定的介质中培养干细胞衍生的少突胶质细胞前体细胞。本发明还涉及一种少突胶质细胞前体细胞的培养物。

摘要： 适于培养干细胞衍生的少突胶质细胞前体细胞的合成表面包含由一种或多种丙烯酸酯单体形成的丙烯酸酯聚合物。在许多情况下，所述丙烯酸酯表面适于在化学限定的介质中培养干细胞衍生的少突胶质细胞前体细胞。

摘要： 本发明涉及细胞生物学、神经生物学领域，特别是涉及一种诱导神经干／祖细胞分化为少突胶质前体细胞的诱导培养基及其诱导方法和用途。本发明的技术方案是：将人神经干／祖细胞经过预处理培养基预处理培养一定时间后，在诱导培养基的作用下，迅速分化为高纯度表达O4、A2B5、NG2、SOX10、PDGFR等少突胶质前体细胞标志物的少突胶质前体细胞，所述诱导培养基的关键成份为bFGF、PDGF-AA及NT-3。发明所述方法及所获得的少突胶质前体细胞可应用于制备治疗神经系统损伤疾病的药物，在实验研究和临床治疗上应用前景颇为广泛。

摘要： 本发明属于生物医学领域，涉及少突胶质前体细胞培养的方法，具体涉及一种从新生小鼠大脑获取和纯化少突胶质前体细胞的方法。本方法利用原代小鼠少突胶质前体细胞能够快速粘附于多聚赖氨酸包被底物的特性，通过将纯机械解离的细胞悬液短暂置于多聚赖氨酸包被的培养底面上，使少突胶质前体细胞快速贴壁、富集，并在添加无血清培养基中培养，形成大量克隆；培养6～8天后，利用小鼠少突胶质前体细胞与多聚赖氨酸包被底物粘附强度较低的特性，通过机械吹打方式进行选择性分离，获得进一步纯化的小鼠少突胶质前体细胞。获得的细胞能够维持连续增殖能力，持续保持前体状态和较高纯度，并具有分化为成熟少突胶质细胞的能力。

摘要： 本发明提供一种诱导少突胶质前体细胞向少突胶质细胞分化的方法，具体为向少突胶质前体细胞的培养基中加入厚朴酚或和厚朴酚中的至少一种。OPC体外培养的第7天，在含有T3(三碘甲状腺原氨酸)和CNTF的分化培养基中分别加入5、10μM的和厚朴酚和厚朴酚。结果表明，与对照组相比，和厚朴酚、厚朴酚均能增加成熟OL髓鞘蛋白(如MBP、PLP1、MAG)的表达，同时降低OPC标志物NG2的表达；分别用MBP和NG2免疫荧光染色标记OL和OPC，和厚朴酚与厚朴酚处理可显着增加OPC分化为OL的比例。

摘要： 本发明涉及细胞生物学、神经生物学领域，特别是涉及一种诱导神经干／祖细胞分化为少突胶质前体细胞的诱导培养基及其诱导方法和用途。本发明的技术方案是：将人神经干／祖细胞经过预处理培养基预处理培养一定时间后，在诱导培养基的作用下，迅速分化为高纯度表达O4、A2B5、NG2、SOX10、PDGFR等少突胶质前体细胞标志物的少突胶质前体细胞，所述诱导培养基的关键成份为bFGF、PDGF-AA及NT-3。发明所述方法及所获得的少突胶质前体细胞可应用于制备治疗神经系统损伤疾病的药物，在实验研究和临床治疗上应用前景颇为广泛。

摘要： 本申请提供了富集靶向少突胶质前体细胞(OPCs)的细胞群的方法，少突胶质前体细胞(OPCs)可以分化成少突胶质细胞。靶向OPCs可扩增，并且任选诱导其分化成少突胶质细胞。靶向OPCs及其后代有益于治疗中枢神经系统轴突脱髓鞘相关疾病。

摘要： 本发明提供了一种刺五加苷处理人间充质干细胞得到少突胶质前体细胞及其增殖的分化培养基，所述分化培养基包括液体基础培养基，其中，以所述液体基础培养基的体积为基准，所述分化培养基还含有1-500ug/mL的刺五加苷、1-20体积％的胎牛血清、5-300ng/mL人表皮生长因子(EGF)和5-300ng/mL碱性成纤维细胞生长因子(bFGF)；还提供了使用前述分化培养基的制备该刺五加苷处理试剂盒的方法；还提供了包括前述的方法获得的少突胶质前体细胞的用于治疗神经系统疾病的药物组合物。使用本发明的分化培养基的本发明的方法能够高效分化间充质干细胞，得到少突胶质前体细胞。本发明用于治疗创伤性脊髓损伤与多发性硬化症等疾病的药物组合物能在体内修复损伤的神经细胞，并消除神经系统病变。