视网膜神经节细胞

摘要： 背景:视网膜神经节细胞的损害是不可逆性视力丧失的重要原因,干细胞在此类疾病的治疗研究中显示出巨大的潜力,但关于干细胞与眼部组织关系、发挥视神经保护机制的综合性描述较少。目的:从干细胞来源及其对视网膜神经节细胞功能维持的作用出发,阐述干细胞在视网膜神经节细胞保护和再生研究中的作用与进展。方法:以“干细胞、视网膜前体细胞、视网膜祖细胞、转分化”与“视网膜神经节细胞、视网膜退行、视网膜变性”为中文关键词在万方和中国知网数据库中进行检索,以“stem cell,retinal precursor cell,retinal progenitor cell,trans differentiation”与“retinal ganglion cell,RGC,retinal degeneration”为英文关键词,分别在PubMed数据库中搜索,最终按入组标准纳入文献102篇进行综述分析。结果与结论:(1)哺乳动物眼内存在着视网膜干细胞和视网膜祖细胞,但其数量稀少、分化潜能受到限制,导致眼内视网膜神经节细胞的再生能力低下。(2)体外培养显示眼内组织中有多种细胞能直接分化为视网膜神经节细胞、另外部分细胞具有重编程为视网膜干细胞的潜能,寻找促进这些细胞增殖、分化及重编程的条件可极大地促进视网膜神经节细胞的眼内再生。(3)由于目前技术的限制,眼外干细胞的视网膜神经节细胞再生需经体外培养、诱导分化及手术再植入眼内等多个过程,步骤繁琐,但由于眼外干细胞的来源广泛、细胞数量众多,仍是视网膜神经节细胞再生研究的重点。(4)干细胞可提高受损视网膜神经节细胞的存活率并维持细胞的功能,通过表达神经营养因子、降低炎症反应、改善缺血、促进其他细胞重编程为视网膜干细胞等机制是干细胞发挥视神经保护作用的基础。(5)在干细胞为基础的视网膜神经节细胞再生研究中,存在着肿瘤形成的风险、移植细胞缺乏附着且整合到宿主视网膜中较为困难、免疫排斥和移植细胞死亡等不足,以及部分细胞在使用过程中存在着伦理问题的限制,需要寻找合适的解决方案。

摘要： 目的观察清肝利水方(QGLS)在慢性高眼压大鼠视网膜神经节细胞(RGC)凋亡中的抑制效果,并探讨其作用机制与瞬时受体电位阳离子通道6(TRPC6)/Ca^(2+)信号通路的关系。方法制备大鼠QGLS含药血清,进行细胞毒性试验,确定合适的干预浓度。用CoCl_(2)和无糖DMEM建立RGC-5细胞缺氧缺糖-复氧复糖损伤模型,CCK-8检测正常对照组(CG)、模型组(MG)和低、中、高浓度清肝利水方含药血清组(LQGLS、MQGLS、HQGLS)的细胞增殖力,细胞凋亡试验检测细胞凋亡水平,Western Blot检测各组TRPC6、B细胞淋巴瘤-2(Bcl-2)、Bcl-2相关X(Bax)和半胱氨酸蛋白酶-3(Caspase-3)蛋白表达,Fluo-3 AM荧光探针检测细胞内钙离子浓度。结果(1)实验条件筛选:筛选出QGLS含药血清干预浓度为5%,CoCl_(2)造模浓度与时间为600μM处理24 h。(2)细胞存活率:LQGLS、MQGLS可显著提高缺氧缺糖-复氧复糖损伤的细胞存活率,与MG比较有统计学意义(t_(LQGLS)=25.401,t_(MQGLS)=11.805,均P=0.000)。(3)TRPC6表达:MQGLS、HQGLS较MG显著降低,差异均有统计学意义(t_(MQGLS)=7.365,t_(HQGLS)=9.075,均P=0.000)。(4)凋亡因子:①Caspase-3表达,3个QGLS剂量组较MG均显著下降,差异均有统计学意义(t_(LQGLS)=4.816,P=0.001;t_(MQGLS)=35.131,P=0.000;t_(HQGLS)=28.227,P=0.000);②Bax表达,3个QGLS剂量组较MG均显著下降,差异均有统计学意义(t_(LQGLS)=14.912,t_(MQGLS)=10.194,t_(HQGLS)=12.838,均P=0.000);③Bcl-2表达,3个QGLS剂量组较MG均显著升高,差异均有统计学意义(t_(LQGLS)=8.871,t_(MQGLS)=12.729,t_(HQGLS)=9.298,均P=0.000)。(5)细胞内Ca^(2+)荧光强度:MG及3个QGLS剂量组较CG均显著升高,差异具有统计学意义(t_(MG)=13.960,P=0.000;t_(LQGLS)=5.889,P=0.001;t_(MQGLS)=7.877,P=0.000;t_(HQGLS)=17.815,P=0.000)。LQGLS、MQGLS较MG细胞内Ca^(2+)浓度显著下降,差异具有统计学意义(t_(LQGLS)=7.881,t_(MQGLS)=6.204,均P=0.000),HQGLS较MG差异无统计学意义(P>0.05)。结论QGLS可降低RGC-5中Caspase-3、Bax表达,提高Bcl-2表达,抑制RGC凋亡,保护视神经,其作用机制可能与降低TRPC6表达以减少Ca^(2+)内流相关。

摘要： 青光眼是由于病理性眼压升高引起视神经结构和功能损害而导致的不可逆性致盲眼病,具有多因性、强异质性的特点,长期以来降低并控制眼压以减轻视神经损害是青光眼主要的治疗策略。然而,临床实践中发现,尽管部分青光眼患者眼压得到控制,但视神经损害仍持续进展,因此非眼压依赖性的继发视神经损害仍为青光眼发生和发展病理机制中亟需解决的瓶颈问题和研究热点。随着分子生物学研究技术的不断进步,医学基础研究领域已取得突破性进展,青光眼患者缓解局部免疫炎症反应可促进部分视觉恢复。但是由于目前尚无标志性临床应用成果,因此重视基础和临床研究相结合,促进成果转化为目前当务之急。研究者及眼科医师应从青光眼-免疫炎症理论出发理解眼部免疫稳态的重要性,关注眼脑之间生理病理过程的相互关联及全视路的病程进展,充分理解和有效利用新的生物学研究技术为青光眼致病机制研究带来的机遇与启示,进而为全临床青光眼诊疗方案的制定提供指导作用。

摘要： 目的探讨程序性坏死特异性抑制剂necrostatin-1(Nec-1)对急性高眼压大鼠模型中视网膜神经节细胞(RGCs)程序性坏死的抑制作用。方法采用随机数表法将24只雄性SD大鼠随机分为正常对照组、模型对照组、Nec-1处理组和阴性对照组,每组6只。其中,正常对照组大鼠不做任何处理;其余3个组大鼠左眼采用前房灌注质量分数0.9%氯化钠溶液的方法将眼压升至110 mmHg(1 mmHg=0.133 kPa),持续60 min,制备急性高眼压缺血-再灌注模型;Nec-1处理组和阴性对照组大鼠分别于造模后给予玻璃体腔内注射4 mmol/L Nec-1和二甲基亚砜各2μl。造模后7 d,摘取各组大鼠实验眼制备视网膜石蜡切片,采用苏木精-伊红染色法观察视网膜结构;采用免疫组织化学染色法检测胸腺细胞抗原1(Thy-1)和胶质纤维酸性蛋白(GFAP)的表达。结果造模后7 d,与正常对照组大鼠比较,模型对照组和阴性对照组大鼠视网膜神经纤维层均变薄,RGCs层细胞排列疏松,内核层细胞减少、排列紊乱,外核层细胞正常或变大;与模型对照组和阴性对照组比较,Nec-1处理组大鼠神经纤维层厚度及RGCs数量均明显增多。免疫组织化学染色显示,模型对照组、阴性对照组和Nec-1处理组大鼠Thy-1染色阳性RGCs数量均较正常对照组减少,Nec-1处理组大鼠Thy-1染色阳性RGCs数量均较模型对照组和阴性对照组增多。正常对照组、模型对照组、阴性对照组和Nec-1处理组GFAP平均积分吸光度(A)值分别为47.209±15.311、116.220±18.194、116.382±19.020和92.818±10.236,总体比较差异有统计学意义(F=24.675,P<0.001),其中与正常对照组比较,模型对照组、阴性对照组和Nec-1处理组GFAP平均积分A值均明显升高;Nec-1处理组GFAP平均积分A值较模型对照组和阴性对照组明显降低,差异均有统计学意义(均P<0.05)。结论Nec-1对急性高眼压大鼠RGCs的程序性坏死有抑制作用,可促进RGCs存活。

摘要： 原发性开角型青光眼(POAG)是一种常见的致盲性眼病,其发病机制复杂,与OPTN基因发生突变有关。其中与POAG相关的OPTN突变有H26D、E50K、M98K、E103D、691_692insAG、T202R、A336G、A377T、H486R、R545Q等。OPTN基因编码的Optineurin蛋白是重要的自噬受体,参与细胞自噬。研究发现OPTN基因某些突变可通过使视网膜神经节细胞(RGCs)自噬异常引起POAG。本文从OPTN突变与POAG、OPTN与其编码蛋白Optineurin、RGCs自噬与POAG、OPTN突变致RGCs自噬异常的相关基础研究等方面进行综述。

摘要： 目的:探讨E2F1对高糖诱导的视网膜神经节细胞(retinal ganglion cells,RGCs)存活和凋亡的影响及其作用机制。方法:以RGC-5细胞为研究对象,构建高糖损伤模型,将RGC-5细胞转染后分为空白对照组、高糖组、高糖+si-E2F1组、高糖+si-con组、高糖+si-E2F1+PBS组、高糖+si-E2F1+SD19组。分别采用实时荧光定量PCR(real-time RT-PCR)与蛋白质印迹法检测细胞中E2F1 mRNA表达;四甲基偶氮唑蓝(methyl thiazolyl tetrazolium,MTT)检测细胞存活率,TUNEL法和流式细胞术(flowcytometry,FCM)检测细胞凋亡。蛋白质印迹法检测细胞中E2F1、磷酸化的转录激活子3(p-signal transducer and activator of transcription 3, p-STAT3)、 STAT3、磷酸化的Janus蛋白酪氨酸激酶2(p-Januskinase2,p-JAK2)、JAK2、活化的含半胱氨酸的天冬氨酸蛋白水解酶3(cleavedcaspase-3)和活化的多聚二磷酸腺苷核糖聚合酶(cleaved poly-ADP-ribose polymerase,cleaved PARP)蛋白表达。结果:与空白对照组相比,高糖组RGC-5细胞中E2F1表达水平升高,细胞存活率明显下降,p-STAT3、p-JAK2、cleavedcaspase-3、cleavedPARP、E2F1表达及细胞凋亡率显著升高;沉默E2F1表达后,细胞存活率明显升高,而cleaved caspase-3蛋白和cleaved PARP蛋白表达及细胞凋亡率降低。SD19可部分逆转沉默E2F1对RGC-5细胞的保护作用。结论:抑制E2F1表达能够减轻高糖诱导的RGCs凋亡,其机制可能与抑制JAK2/STAT3信号通路有关。

摘要： 目的观察青光安Ⅱ号方及其有效组分对DBA/2J小鼠视网膜细胞中Ras、MEK与ERK蛋白表达的影响,探讨其对视神经保护的作用机制。方法将8只雌性C57BL/6J小鼠作为正常对照组(A组),采用随机数字表法将48只雌性DBA/2J小鼠分为6组:模型组(B组)、阳性对照组(C组)、青光安Ⅱ号方汤剂组(D组)、青光安Ⅱ号方有效组分低剂量组(E组)、青光安Ⅱ号方有效组分中剂量组(F组)、青光安Ⅱ号方有效组分高剂量组(G组),每组8只。A、B组给予12.91 mL/(kg·d)蒸馏水;C组给予0.31 g/(kg·d)益脉康分散片;D组给予9.67 g/(kg·d)青光安Ⅱ号方汤剂;E、F、G组分别给予0.85、1.70、3.40 g/(kg·d)青光安Ⅱ号方有效组分。每4周进行眼压测量以及裂隙灯检查;灌胃4周后取视网膜组织行Western blot检测各组小鼠视网膜Ras、MEK与ERK蛋白的表达水平。结果C57BL/6J小鼠不同时相点的眼压不随年龄增长而变化(P>0.05);DBA/2J小鼠眼压在第18~38周高于C57BL/6J小鼠(P<0.05)。裂隙灯检查C57BL/6J小鼠眼前段均未见明显异常;DBA/2J小鼠随周龄增长逐渐出现角膜钙化、虹膜基质萎缩、瞳孔后粘连等眼前节病变。与A组比较,B组Ras、MEK、ERK蛋白表达水平均降低(P<0.05);与B组比较,C、D、E、F、G组Ras蛋白表达水平均升高(P<0.05),G组MEK、ERK蛋白表达水平均升高(P<0.05);与C组比较,G组Ras蛋白表达水平升高(P<0.05);与D组比较,G组MEK蛋白表达水平升高(P<0.05);与E、F组比较,G组Ras蛋白表达水平升高(P<0.05)。结论青光安Ⅱ号方及其有效组分低、中、高剂量对DBA/2J小鼠视网膜Ras、MEK、ERK蛋白可起到不同程度的上调作用,以青光安Ⅱ号方有效组分高剂量组效果最佳。

摘要： 目的研究藏红花素对视网膜缺血再灌注损伤(RIRI)小鼠视网膜神经节细胞(RGC)的保护作用及其机制。方法将144只C57BL/6小鼠随机分为3组假手术组、模型组、藏红花素治疗组。模型组和藏红花素治疗组小鼠建立RIRI模型,藏红花素治疗组小鼠造模前30 min腹腔注射50 mg·kg^(-1)藏红花素。RIRI后14 d,视网膜铺片染色比较各组小鼠RGC密度差异。RIRI后24 h,HE染色比较各组小鼠视网膜内层厚度差异。于RIRI后不同时间点(0 h、3 h、6 h、9 h、12 h、15 h)取各组小鼠视网膜组织,通过多重基因定量分析系统检测NLRP3、ASC、Caspase-1、白细胞介素-1β(IL^(-1)β)mRNA的表达变化。RIRI后6 h和12 h取各组小鼠视网膜组织,Western blot检测NLRP3、ASC、Caspase-1、IL^(-1)β蛋白的表达,ELISA检测IL^(-1)β蛋白的含量,并对比分析。结果小鼠RIRI后14 d,视网膜铺片染色结果显示,藏红花素治疗组较模型组小鼠RGC密度增加约18.5%(P0.05)。ELISA检测结果进一步证实,RIRI后6 h和12 h,藏红花素治疗组小鼠视网膜组织中IL^(-1)β蛋白含量较模型组均显著降低(均为P<0.05)。结论藏红花素通过抑制Caspase-1和IL^(-1)β表达保护RIRI小鼠RGC。

摘要： 目的探讨人脐带间充质干细胞(hUC-MSC)对糖尿病视网膜病变(DR)模型大鼠视网膜神经节细胞(RGCs)凋亡的影响及对p38丝裂原活化蛋白激酶(p38MAPK)通路的调节作用。方法取SPF级8周龄SD雄性大鼠45只,采用链脲佐菌素(STZ)腹腔注射联合高糖高脂饮食建立DR大鼠模型,期间每周测量大鼠空腹血糖(FBG)和体质量,采用眼底血管造影观察视网膜血管走行和渗漏情况。将40只建模成功大鼠按照随机数字表法随机分为模型组和hUC-MSC注射组,每组20只;另选取20只正常大鼠腹腔注射等量柠檬酸缓冲液并常规饲养,作为对照组。hUC-MSC注射组玻璃体内注射hUC-MSC,对照组和模型组玻璃体内注射等量磷酸盐缓冲液(PBS)。采用荧光金(FG)逆行示踪标记RGCs观察存活RGCs数目;采用苏木精-伊红染色观察视网膜病理学变化;采用TUNEL法观察RGCs凋亡情况;采用Western blot法检测视网膜组织中B细胞淋巴瘤/白血病-2(Bcl-2)、Bcl-2相关X蛋白(Bax)、p38MAPK和磷酸化p38MAPK(p-p38MAPK)蛋白表达量。结果未造模大鼠FBG维持在正常水平,体质量随时间逐步增长,视网膜血管走行正常,无荧光素渗漏;造模大鼠FBG维持在较高水平,体质量增长缓慢,且于造模2周开始随着病程延长,体质量逐渐下降,视网膜远端血管发生扭曲,可见毛细血管荧光素渗漏,渗漏面积较大。对照组、模型组和hUC-MSC注射组RGCs密度分别为(2136.10±215.17)、(849.40±167.82)和(1549.20±183.26)个/mm^(2),总体比较差异有统计学意义(F=115.218,P<0.01);模型组和hUC-MSC注射组RGCs密度明显低于对照组,hUC-MSC注射组RGCs密度明显高于模型组,差异均有统计学意义(均P<0.05)。对照组视网膜结构清晰,层次分明,RGCs形态完整,数目较多;模型组RGCs数量明显减少,出现核固缩,RGC层变薄萎缩;hUC-MSC注射组视网膜结构较完整,RGCs数较模型组多。对照组、模型组和hUC-MSC注射组RGCs凋亡率分别为(2.16±1.11)%、(43.47±2.26)%和(20.75±2.18)%,总体比较差异有统计学意义(F=445.159,P<0.01);模型组和hUC-MSC注射组RGCs凋亡率明显高于对照组,hUC-MSC注射组RGCs凋亡率低于模型组,差异均有统计学意义(均P<0.05)。对照组、模型组和hUC-MSC注射组视网膜组织Bax、Bcl-2和p-p38MAPK蛋白相对表达量总体比较差异均有统计学意义(F=30.982、12.526、73.158,均P<0.01);模型组和hUC-MSC注射组Bax和p-p38MAPK蛋白相对表达量明显高于对照组,Bcl-2蛋白相对表达量明显低于对照组,差异均有统计学意义(均P<0.05);hUC-MSC注射组Bax、p-p38MAPK蛋白相对表达量明显低于模型组,Bcl-2蛋白相对表达量明显高于模型组,差异均有统计学意义(均P<0.05)。各组p38MAPK蛋白相对表达量总体比较,差异无统计学意义(F=1.182,P=0.322)。结论hUC-MSC玻璃体内注射可抑制DR模型大鼠RGCs凋亡,保护视网膜结构,其可能是通过抑制p38MAPK信号通路发挥抗细胞凋亡作用。

摘要： 目的探讨TANK结合激酶1(TBK1)对糖尿病大鼠视网膜神经节细胞(RGC)凋亡的作用机制。方法按60 mg·kg^(-1)腹腔一次性注射链脲佐菌素制备糖尿病模型。模型制备完成后,随机分成三组糖尿病(DM)组、TBK1过表达(TBK1-OE)组(大鼠玻璃体内单次注射TBK1过表达慢病毒载体5μL,病毒滴度为1.0×10^(9)IU·mL^(-1))、TBK1空载体(TBK1-NC)组(玻璃体内注射等剂量病毒包装的阴性对照液),另取正常大鼠作为对照(CON)组,每组15只。12周后,免疫荧光染色检测大鼠视网膜TBK1蛋白表达定位,Hoechst 33342染色检测大鼠视网膜RGC凋亡,ELISA检测大鼠视网膜肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、白细胞介素-6(IL-6)、白细胞介素-1β(IL-1β)含量,Western blot检测大鼠视网膜TBK1、受体相互作用蛋白激酶1(RIPK1)、Caspase-3蛋白相对表达量。结果TBK1在大鼠RGC中特异表达。与CON组相比,DM组、TBK1-NC组大鼠RGC凋亡率,TNF-α、IL-6、IL-1β含量,RIPK1、Caspase-3蛋白相对表达量均明显增加,TBK1蛋白相对表达量均明显降低(均为P0.05)。结论过表达TBK1对糖尿病大鼠RGC凋亡具有抑制作用,其机制与阻断RIPK1信号通路激活有关。

摘要： 目的：研究银杏内脂B微乳油剂对视网膜神经节细胞的保护作用,探讨其可能的作用机制,从而为其治疗青光眼等视网膜相关疾病提供理论依据. 方法：选取出生后46天的SD大鼠30只;随机抽取10只为A组(正常对照组);余下20只建立青光眼大鼠模型,按照SD大鼠体重1次腹腔注射60mg/kgN-甲基-N-亚硝脲建立青光眼大鼠模型,并分为两组即B组(模型对照组)和C组(银杏内酯B治疗组),每组10只;A组不做任何处理,C组SD大鼠在实验前7d每日腹腔注射银杏内酯B微乳油剂40mg/kg;B组SD大鼠给等量生理盐水灌胃;实验1周、2周后分别行闪光视觉诱发电位及视网膜形态学分析测量中心视网膜外层厚度. 结果：实验1周后,正常对照组、模型对照组、银杏内酯B治疗组的LP1和AP1分别为[(91±3)ms,(18±4)μV]、[(110±4)ms,(13±4)μV]、[(95±3)ms,(17±3)μV],银杏内酯B治疗组与正常对照组、模型对照组存在显著性差异,差异有统计学意义(P＜0.05).实验后2周，形态学检查结果表明正常对照组大鼠的中心视网膜外层厚度为97.4±1.6U m，模型对照组外视网膜厚度为16.8±2.1μm，而银杏内酯B治疗组外视网膜厚度为24.2±2.3μm，模型对照组与银杏内酯B治疗组均明显高于正常对照组，差异有统计学意义(P＜0.05)；而银杏内酯B治疗组显著高于模型对照组，差异有统计学意义(P＜0.05)。 结论：银杏内脂B微乳油剂对N-甲基-N-亚硝脲所致青光眼大鼠的视网膜神经细胞具有一定的保护作用，其可能的机制在于银杏内脂B通过调节青光眼大鼠的动作电位，同时修复损伤的视网膜，从而发挥视网膜保护作用。本研究对银杏内脂B微乳油剂视网膜神经节细胞的保护作用，并揭示了其作用机制，对银杏内脂B微乳油剂在青光眼等视网膜相关疾病的治疗提供了重要的理论基础。

摘要： 通过建立可复制的、稳定的持续性高眼压动物模型,观察益精杞菊地黄颗粒对慢性高眼压大鼠视网膜神经节细胞凋亡的影响,并对其作用机理进行初步的探讨,为该中药的临床应用提供科学依据.

摘要： 视网膜病变是目前小动物临床上常见的眼底病变,导致动物不可逆的视力丧失.目前人医主要对干细胞或相邻细胞的分化转化进行研究,以期能恢复视网膜神经节细胞活性,从而达到治疗该种疾病的目的.本文就间充质干细胞和视网膜神经节细胞的培养方法、特点以及临床应用进行了综述,认为一部分存在于视网膜神经节细胞层的祖细胞在犬出生后就成为视网膜神经节细胞。这研究有望为视网膜神经节细胞变性找到新的治疗方法.

摘要： 目的：探讨益精补阳还五汤及不同组分对高眼压大鼠视网膜神经节细胞(RGCs)的保护作用及可能的分子机制.rn 方法：SD大鼠随机分为假手术组、模型对照组、全方组、益气组、活血组、补肾组.假手术组、模型对照组给予生理盐水灌服,全方组灌服益精补阳还五汤全方组分,益气组、活血组和补肾组分别灌服相应的功能组分,用药4周后比较各组大鼠RGCs的数量,分析各组视网膜小胶质细胞的活化和脑源性神经营养因子(BDNF)表达的差异.rn 结果：假手术组大鼠RGCs数量明显高于其他五组;全方组明显高于各功能组分组;益气组与活血组比较无显著性差异，均明显高于补肾组;补肾组高于模型对照组，并存在显著性差异。视网膜小胶质细胞活化和BDNF表达定量分析结果显示，六组小胶质细胞活化程度由高到低依次为模型对照组、补肾组、益气组、活血组、全方组、假手术组，除活血组与益气组之间无显著性差异外，其它各组间均存在显著性差异;全方组的BDNF表达量最高，其次为假手术组、益气组、活血组、补肾组，而模型对照组BDNF表达最低;除益气组与活血组间无显著性差异外，其余各组间均存在显著性差异。rn 结论：益精补阳还五汤全方及各功能组分均可有效保护高眼压大鼠视网膜神经节细胞，其中全方组保护作用最强，补肾组保护作用最弱。这种保护作用可能与其抑制小胶质细胞激活和促进BDNF表达有关。

摘要： 目的：观察胶质细胞系源性神经营养因子(GDNF)家族成员artemin在正常大鼠视网膜神经节细胞(RGCs)中的分布与表达及其功能。方法：体外培养出生1～3 d SD乳鼠的视网膜神经上皮细胞，免疫荧光染色检测RGCs中artemin的定位及表达，实时定量聚合酶链反应(real-time PcR)对RGCs中artemin进行定量检测。并用40 mmol/L葡萄糖处理细胞12 h后，再进行上述检测，观察高糖对于RGcs中artemin表达的影响。结果：免疫荧光的结果证实了培养的RGCs显示Thyl．1抗体阳性的红色荧光，且多重荧光标记显示RGCs同时存在显示绿色荧光的artemin抗体和红色荧光的Thyl．1抗体，表明artemin在RGCs中有分布。正常对照组中Thyl．1抗体阳性的细胞为(442±9)个/高倍视野，而40 mmol/L高糖培养组中为(263±7)个/高倍视野，差异有统计学意义(P<0.05)。Real-time PCR对大鼠RGCs中artemin的mRNA水平进行定量分析，40 mmol/L葡萄糖处理视网膜神经细胞12 h后，artemin在视网膜神经细胞及RGCs的表达明显下降(P<0.05)。结论:研究发现在原代培养的大鼠视网膜神经细胞及RGCs中均有artemin的表达，并且在高糖作用下表达下降，为进一步研究artemin对受损RGCs的保护作用提供了思路。

摘要： 目的: 探讨补肾活血中药血清对体外高糖状态下纯化培养的视网膜神经节细胞活力的影响。rn 方法: 采用两步纯化法培养新生乳鼠视网膜神经节细胞(retinal ganglion cells，RGCs)。将纯化的RGCs分别置于稳定高糖(50mmol/L)、糖波动及正常条件下进行培养，并以补肾活血中药复方含药血清进行干预。实验分为正常对照组、正常中药干预组，稳定高糖组、稳定高糖中药干预组，糖波动组、糖波动中药干预组，在实验干预24h、48h及72h三个时间段分别测定细胞外液乳酸脱氢酶(lactate dehydrogenase，LDH)漏出量，以推测RGCs活力，对所得数据以SPSS13.0进行统计学分析。rn 结果: 稳定高糖组的LDH量在各时间段均比正常对照组降低(P<0.05)：而糖波动组的LDH量却在72h较正常对照组增加(P<0.05)，并且糖波动组的LDH量在各时间段均较稳定高糖组增加(P<0.05);稳定高糖中药干预组的LDH量在72h较稳定高糖组减少(P<0.05);糖波动中药干预组的LDH量在48h和72h均较糖波动组减少(P<0.05)。rn 结论: 糖波动能明显降低RGCs细胞膜的稳定性，增加细胞膜通透性，降低细胞活力;补肾活血中药血清能降低本实验中稳定高糖及糖波动条件下RGCs的细胞膜通透性，提高细胞膜稳定性，增强其细胞活力，这可能是补肾活血中药复方防治糖尿病视网膜病变(diabetic retinopathy，DRP)的药物干预途径之一。

摘要： 目的: 探讨补阳还五汤加减对高眼压大鼠模型视网膜神经节细胞的保护作用。rn 方法: 高眼压大鼠随机分为治疗组和对照组。治疗组给予补阳还五汤加减浓缩剂灌胃，对照组灌服等剂量生理盐水。投药后4周处死动物，行视网膜神经节细胞的TUNEL染色、节细胞计数、节细胞凋亡率的检测。rn 结果: 两组视网膜均存在明显的TUNEL阳性细胞。与对照组相比治疗组神经节细胞数目明显增多而凋亡率明显降低。rn 结论: 补阳还五汤加减可通过抑制青光眼大鼠视网膜神经节细胞调亡而发挥视神经保护作用。

摘要： 近年研究显示,活血化瘀中药在降低血液粘滞度、改善视盘微循环和青光眼视神经轴浆流状况等方面有明显优势.灯盏细辛除以上作用之外,还具有细胞保护作用,但其作用机理及靶点并不明确.为探究其机制,采用全细胞膜片钳技术,观察灯盏细辛提取物DSX对大鼠视网膜神经节细胞电压门控通道外向钾电流的影响.

摘要： 视神经作为中枢神经的代表，它的再生和保护机制近年来得到深入而广泛的研究，视神经损伤后对视网膜神经节细胞的保护主要是停止或防止其发生凋亡，主要途径有：谷氨酸抑制剂、一氧化氮抑制剂、神经营养因子、基因治疗、针灸、中药等。但是迄今还没有一种药物或手术方法对视神经损伤的修复有明确的疗效。视神经保护仍处于研究探索阶段，任重而道远。

摘要： 利用多电极胞外记录系统对小鸡视网膜多个神经节细胞的放电活动进行同步采集与记录，通过互相关算法与Lempel-Ziv距离算法分别计算每个神经元在不同刺激下的响应相关性。互相关算法评估放电时间上的一致性，Lempel-Ziv 距离评估放电模式的相似度。研究结果表明，单个神经元在不同刺激下的响应之间没有明显的时间相关性，但存在不同程度的模式相关性，并且在放电模式上体现出刺激信息的特点，说明放电模式编码的机制可能存在于单个神经元的放电活动中。

摘要： 本发明提供了可任选地在无饲养层的条件下、以及进一步任选地在无异物的条件下，由多能干细胞生产视网膜神经节(RG)祖细胞和成熟RG细胞的方法。此外，本发明提供了RG祖细胞和成熟RG细胞的组合物、以及它们的使用方法，包括它们的治疗用途。示例性的方法可以生产RG祖细胞和成熟RG细胞的基本纯的群体和培养物。

摘要： 本发明公开了一种诱导人iPSc源性的3D视网膜定向分化为视网膜神经节细胞的方法。它是将人iPSc源性的3D视网膜的神经纤维层消化为单细胞，以该单细胞作为种子细胞接入诱导分化培养基中进行培养，种子细胞分化成视网膜神经节细胞，所述的诱导分化培养基为含有神经营养因子和维持浓度的视网膜分化营养液组成的培养基。本发明从干细胞诱导分化的角度提供了获得一种功能性RGCs新的研究途径，为人iPSc‑RGCs的定向分化提供了一种新的研究思路，为探讨人iPSc‑RGCs的调控机制提供了新的研究线索，为神经组织工程的研究提供了一种新的种子细胞，并为干细胞移植治疗视觉损伤奠定了理论和实验基础。

摘要： 提供了通过使干细胞分化为视网膜神经节细胞来制备视网膜神经节细胞的方法，通过该方法分化的视网膜神经节细胞，使用通过该方法分化的视网膜神经节细胞来筛选视网膜神经节细胞的死亡抑制剂或增殖促进剂的方法，包含通过该方法分化的视网膜神经节细胞的用于筛选视网膜神经节细胞的死亡抑制剂或增殖促进剂的试剂盒，包含视网膜神经节细胞的用于治疗青光眼或视神经病变的药物组合物，包括向疑似患有青光眼或视神经病变的个体施用视网膜神经节细胞的步骤来治疗青光眼或视神经病变的方法，以及制备成熟视网膜神经节细胞系的方法。

摘要： 本发明涉及细胞领域，特别涉及视网膜神经节细胞(Retinal ganglion cells,RGCs)的制备方法。本发明改进了RGCs分离纯化的相关方法，经多次实验证实，平均单个视网膜组织获得的RGCs数量明显高于原有的“两步免疫盘化法”，分离出的RGCs纯度也明显高于“两步免疫盘化法”。使用特异性标记抗体β‑tubulin III、BRN3A进行不同批次RGCs免疫荧光染色。结果表明，两种抗体标记的RGCs纯度无统计学差异，进一步验证了“改进型两步免疫盘化法”可以获得纯度、产量相对稳定的原代RGCs。本研究为大规模深入探究RGCs坏死、凋亡引起的视力下降的机制奠定了细胞学基础。

摘要： 本发明提供了一种分离的核酸分子，所述分离的核酸分子包含SEQ ID NO:1的核酸序列或与SEQ ID NO:1的所述序列具有至少80％同一性的至少400bp的核酸序列，或者由前述序列组成，其中所述分离的核酸分子在与编码基因的核酸序列可操作地连接时特异性地导致所述基因在方向选择性视网膜神经节细胞中的表达。

摘要： 本发明公开了一种诱导人iPSc源性的3D视网膜定向分化为视网膜神经节细胞的方法。它是将人iPSc源性的3D视网膜的神经纤维层消化为单细胞，以该单细胞作为种子细胞接入诱导分化培养基中进行培养，种子细胞分化成视网膜神经节细胞，所述的诱导分化培养基为含有神经营养因子和维持浓度的视网膜分化营养液组成的培养基。本发明从干细胞诱导分化的角度提供了获得一种功能性RGCs新的研究途径，为人iPSc-RGCs的定向分化提供了一种新的研究思路，为探讨人iPSc-RGCs的调控机制提供了新的研究线索，为神经组织工程的研究提供了一种新的种子细胞，并为干细胞移植治疗视觉损伤奠定了理论和实验基础。

摘要： 本发明总体上涉及通过使用胶质细胞系衍生神经营养因子(GDNF)来治疗视网膜神经节细胞损伤或变性的方法。本发明具体涉及治疗与青光眼相关的视神经损伤或变性的方法。

摘要： 本发明涉及宁夏枸杞提取物，其表现出对受损视网膜神经节细胞的神经保护作用。可预防和保护受治疗的主体在慢性和创伤性神经损伤或患青光眼后视网膜神经节细胞的变性。还涉及包括有效量的药物和可药用载体的组合物。

摘要： 本发明涉及干细胞领域，提供一种干细胞体外诱导培育视网膜神经节细胞的方法，用于解决视网膜神经的修复问题。本发明提供的一种干细胞体外诱导培育视网膜神经节细胞的方法，包括：S11.取自体干细胞制成单细胞悬液；S12.将单细胞悬液计数后用分化培养基将其稀释成10‑5~10‑3cells/mL的干细胞悬液，接种到培养皿中，获取拟胚体；S13.将拟胚体增殖后转移到诱导分化培养基中，在37°C、5%CO2、饱和湿度下进行干预分化培养。自体干细胞分化形成的视网膜神经节细胞可用于视觉神经损伤后恢复视网膜神经节细胞的数目和功能，不仅有助于减缓视神经损伤病人病情的恶化，促进患者视觉功能的恢复，也必将促进损伤视神经结构和功能的重建。

摘要： 提供了通过使干细胞分化为视网膜神经节细胞来制备视网膜神经节细胞的方法，通过该方法分化的视网膜神经节细胞，使用通过该方法分化的视网膜神经节细胞来筛选视网膜神经节细胞的死亡抑制剂或增殖促进剂的方法，包含通过该方法分化的视网膜神经节细胞的用于筛选视网膜神经节细胞的死亡抑制剂或增殖促进剂的试剂盒，包含视网膜神经节细胞的用于治疗青光眼或视神经病变的药物组合物，包括向疑似患有青光眼或视神经病变的个体施用视网膜神经节细胞的步骤来治疗青光眼或视神经病变的方法，以及制备成熟视网膜神经节细胞系的方法。