Caspase-1

摘要： Sirtuin 2(SIRT2)inhibition or Sirt2 knocko ut in animal models protects against the development of neurodegenerative diseases and cerebral ischemia.However,the role of SIRT2 in traumatic brain injury(TBI)remains unclear.In this study,we found that knockout of Sirt2 in a mouse model of TBI reduced brain edema,attenuated dis ruption of the blood-brain barrie r,decreased expression of the nucleotide-binding oligomerization domain-like receptor protein 3(NLRP3)inflammasome,reduced the activity of the effector caspase-1,reduced neuroinflammation and neuronal pyroptosis,and improved neurological function.Knoc kout of Sirt2 in a mechanical stretch injury cell model in vitro also decreased expression of the NLRP3 inflammasome and pyroptosis.Our findings suggest that knockout of Sirt2 is neuro protective against TBI;therefore.Sirt2 could be a novel to rget for TBI treatment.

摘要： Aim:Gastric cancer(GC)is one of the most common malignant tumors.Chrysophanol has been reported to possess antitumor effects on a variety of cancers;however,its role in GC remains unclear.This study aimed to investigate the effects of chrysophanol on the proliferation,pyroptosis,migration,and invasion of GC cells.Methods:Human GC cell lines MKN 28 and AGS cells were treated with different concentrations of chrysophanol,then cell proliferation,migration,invasion and pyroptosis were determined by CCK-8,colony-forming assay,wound healing assay,Transwell assay,and flow cytometry.Cell migration and invasion were reassessed in these transfected cells following the transfection of nod-like receptor protein-3(NLRP3)siRNA in MKN 28 and AGS cells.To examine the downstream signaling pathway of the NLRP3 signaling pathway,NLRP3,caspase-1,gasdermin-D,interleukin(IL)-1β,and IL-18 were detected by quantitative real-time-polymerase chain reaction or western blotting.Results:Chrysophanol inhibited the proliferation of GC cells,caused pyroptosis,inhibited cell migration and invasion,and increased the expression of NLRP3 inflammasomes in GC cells.Knockdown of NLRP3 inhibited the effects of chrysophanol on proliferation,pyroptosis,migration,and invasion of GC cells.Chrysophanol plays an anticancer role by enhancing NLRP3.Conclusions:Chrysophanol exerts anti-neoplastic effects in vitro in GC cells by modulating NLRP3,thus highlighting its therapeutic potential in GC.

摘要： 目的探讨氧化修饰高密度脂蛋白(ox-HDL)调控caspase-1对po4小鼠动脉粥样硬化斑块炎症介质及细胞焦亡的影响。方法高脂饲料(胆固醇1.25%、脂肪基础饲料83.25%、0.125%氯化胆盐)饲养至12周,建立po4动脉粥样硬化小鼠模型,检测血清高密度脂蛋白(HDL)、低密度脂蛋白(LDL)、总胆固醇(TC)水平确定小鼠血脂水平,大体油红O染色确定纤维粥样斑块的形成,油红染色见斑块中央大片的红色脂滴池存在、且有纤维组织覆盖,说明动脉硬化小鼠模型构建成功。12周龄po4动脉粥样硬化小鼠随机编号分为对照组(n=8)和实验组(n=8),对照组小鼠经尾静脉注射生理盐水,剂量为14 ml/kg体重;实验组小鼠经尾静脉注射等体积0.9%氯化钠配置的ox-HDL,浓度100μg/ml。两组均2次/周注射,共注射6周。6周后,获取小鼠主动脉并依次采用大体油红O染色检测纤维粥样斑块的形成、TUNEL法检测细胞焦亡情况、免疫组化检测主动脉根部核苷酸结合寡聚化结构域样受体家族热蛋白结构域3炎性小体(NLRP3)、caspase-1表达水平、免疫沉淀技术检测ox-HDL与caspase-1的共表达作用。结果实验组主动脉斑块面积、TUNEL阳性细胞及NLRP3、caspase-1表达水平均大于对照组(P0.05)。结论Ox-HDL可通过介导caspase-1促进斑块进展及诱导NLRP3炎性小体活化,加剧斑块炎性反应和细胞焦亡。

摘要： 黑色素瘤缺乏因子2(AIM2)炎症体在抵抗微生物感染的免疫保护中起重要作用,但过度炎症会导致多种疾病,包括自身炎症性疾病、糖尿病、心血管疾病和神经退行性疾病等。因此,精确调控AIM2炎症体活性对充分发挥免疫保护作用的同时限制组织损伤,并阻止自身免疫至关重要。近年针对AIM2炎症体调控机制的研究发现了一些对AIM2炎症体具有调控作用的物质,揭示了炎症体介导性疾病的治疗靶点。本文就AIM2炎症体的组成、激活和调控机制研究进展进行综述。

摘要： 背景大量实验证明丹酚酸B(salvianolic acid B,Sal B)对非酒精性脂肪性肝病(non-alcoholic fatty liver disease,NAFLD)有治疗作用,细胞焦亡在NAFLD发病及其向非酒精性脂肪性肝炎(nonalcoholic steatohepatitis,NASH)进展的过程中起了重要作用,通过研究Sal B对NASH细胞焦亡主要相关蛋白的调节,发觉Sal B在NAFLD中多途径、多靶点的治疗作用及优势.目的建立NASH体外细胞模型,并用Sal B及焦亡抑制剂(VX-765)干预,探讨Sal B对细胞焦亡的影响及对焦亡通路GSDMD/NLRP3/Caspase-1的调节机制.方法取对数生长期HepG2细胞,MTT法检测筛选棕榈酸(palmitic acid,PA)最佳的药物干预浓度及干预时间;将细胞随机分为对照组、模型组(PA),治疗组(Sal B+PA)及抑制剂组(VX-765+PA).取各组细胞分别经油红O染色在光学显微镜观察细胞内脂质蓄积情况,收集细胞上清液酶标仪下测定光密度(optical density,OD)值;免疫荧光H2DCFH探针测定细胞内活性氧含量;酶联免疫吸附试验(enzyme-linked immunosorbent assays,ELISA)检测各组细胞上清液白细胞介素-18(interleukin 18,IL-18)、白细胞介素1β(interleukin 1β,IL-1β)表达量;Western Blot检测炎性小体核苷酸寡聚化结构域样受体蛋白3(nucleotide-binding oligomerization domain-like receptor protein 3,NLRP3)及焦亡相关蛋白半胱氨酸蛋白酶-1(Caspase-1)、消皮素(gasdermin D,GSDMD)、GSDMD的N端结构域(GSDMD-N)的表达,并检测各种蛋白的相对表达量变化.结果模型组细胞内脂质小体及活性氧(reactive oxygen species,ROS)蓄积明显,IL-1β、IL-18等促炎因子分泌增多(P值<0.05),炎症小体NLRP3、焦亡相关蛋白Caspase-1、GSDMD、GSDMD-N表达均升高(P值均<0.05).使用Sal B干预治疗或VX-765抑制剂处理后可逆转PA造成的脂质及ROS蓄积,IL-1β及IL-18炎症因子的分泌,同时可下调NLRP3、Caspase-1、GSDMD、GSDMD-N等焦亡相关蛋白表达(P值均<0.05).结论PA可诱导肝脏细胞焦亡发生,丹酚酸B通过对焦亡通路NLRP3/Caspase-1/GSDMD的抑制作用减轻炎症反应,缓解NASH进展.

摘要： 目的从食管黏膜屏障修复的角度,探讨祛瘀护膜剂对反流性食管炎(RE)模型大鼠核苷酸结合寡聚化结构域样受体蛋白3(NLRP3)/天冬氨酸特异性半胱氨酸蛋白酶-1(Caspase-1)信号通路的影响,揭示祛瘀护膜剂治疗RE的作用机制。方法将大鼠随机分空白组,模型组,西药组,祛瘀护膜剂低、中、高剂量组,每组10只。除空白组外,其余5组均使用“4.2 mm幽门夹+2/3胃底结扎术”方法建立RE大鼠模型,空白组及模型组予淀粉+蒸馏水,祛瘀护膜剂低、中、高剂量组分别予祛瘀护膜剂0.54、1.62、4.86 g·kg^(-1),西药组予铝镁加混悬液,灌胃给药14 d。第15天采血后处死大鼠并取出食管组织。ELISA法检测大鼠血清Caspase-1、白细胞介素-1β(IL-1β)、白细胞介素-18(IL-18)水平,Western blot法检测食管组织中NLRP3、Caspase-1蛋白表达情况,HE染色光镜下观察食管组织病理变化。结果与空白组比较,模型组血清Caspase-1、IL-1β、IL-18水平及食管组织中NLRP3、Caspase-1蛋白表达量显著升高(P<0.001)。与模型组比较,西药组及祛瘀护膜剂中、高剂量组血清Caspase-1、IL-1β、IL-18水平及食管组织中NLRP3、Caspase-1蛋白表达量显著下降(P<0.001)。与西药组比较,祛瘀护膜剂高剂量组食管组织中NLRP3、Caspase-1蛋白表达量明显下降(P<0.01),血清Caspase-1水平显著下降(P<0.001)。结论祛瘀护膜剂通过抑制NLRP3信号通路的过度激活,下调Caspase-1的表达,降低IL-1β、IL-18水平,拮抗食管炎症反应,从而改善食管上皮损伤进而修复食管黏膜,促进大鼠RE的愈合。

摘要： 辐射是肿瘤和癌治疗的重要手段,近年来研究表明,受体家族3炎症小体的表达上调所诱导的炎症反应在辐射损伤中起关键作用.本实验通过Co60γ辐射小鼠建立肝脏损伤模型,观察小鼠肝脏形态学变化,检测肝功能相关指标和肝脏中NLRP3,Caspase-1和IL^(-1)β的表达水平的变化,探讨辐射对肝脏造成损伤的可能机理.结果表明,辐射对小鼠的肝脏细胞形态、细胞核及细胞器呈现明显的病理损伤;辐射组小鼠血清ALT和AST明显高于对照组;辐射组肝组织NLRP3免疫荧光阳性表达显著升高;NLRP3,IL^(-1)β,Caspase-1蛋白表达量极显著高于对照组.说明Co60γ辐射后能引起肝脏的结构和功能损伤,可能与NLRP3介导的炎性通路相关.

摘要： 目的探究含NLR家族Pyrin域蛋白3(NLRP3)炎症小体对糖尿病大鼠牙槽骨缺损愈合的作用及其机制。方法将30只大鼠随机分为对照组、模型组、炎症小体抑制组,每组10只。除对照组外,采用高糖饲养+腹腔注射链脲佐菌素复制糖尿病模型,模型复制成功后用球钻毁损大鼠部分牙槽骨骨质,复制牙槽骨缺损模型。模型复制成功后,炎症小体抑制组大鼠立即尾静脉注射20 mg/kg NLRP3抑制剂,1次/d,连续给药28 d。给药结束后,检测各组大鼠空腹血糖。采用酶联免疫吸附试验测定各组大鼠血清护骨因子(OPG)和碱性磷酸酶(ALP)含量。分别采用苏木精-伊红(HE)和抗酒石酸酸性磷酸酶(TARP)染色观察牙槽骨缺损愈合情况及破骨细胞数,进行骨再生Lane-Sandhu评分。采用实时荧光定量聚合酶链反应(qRT-PCR)和Western blotting检测NLRP3、Caspase-1和白细胞介素1β(IL-1β)mRNA和蛋白的表达。结果模型组OPG、ALP低于对照组和炎症小体抑制组(P<0.05)。HE染色结果显示,模型组大鼠牙槽骨缺损严重,可见大量炎症浸润细胞,炎症小体抑制组牙槽骨缺损程度低,炎症浸润细胞较少。模型组Lane-Sandhu评分低于对照组和炎症小体抑制组(P<0.05)。TARP染色结果显示,模型组破骨细胞数高于对照组和炎症小体抑制组(P<0.05)。模型组大鼠上颌骨组织NLRP3、Caspase-1、IL-1βmRNA和蛋白相对表达量高于对照组和炎症小体抑制组(P<0.05)。结论抑制NLRP3炎症小体可改善骨代谢,促进糖尿病大鼠牙槽骨缺损愈合,其作用可能与抑制NLRP3/IL-1β通路有关。

摘要： 目的:研究胃癌细胞中NLRP3炎性小体的表达及其对增殖、侵袭和迁移的影响。并初步探讨NLRP3介导caspase-1依赖的焦亡信号通路在胃癌发展中的作用。方法:qRT-PCR和Western blotting法分别检测人胃黏膜上皮细胞(GES-1)和人胃癌细胞(MKN45及MGC803)中NLRP3、caspase-1表达;随后下调NLRP3,检测胃癌细胞NLRP3、caspase-1 mRNA和蛋白的表达;Western blotting检测GSDMD、白细胞介素(IL)-18、IL-1β蛋白表达;ELISA法检测细胞培养液上清液中IL-1β、IL-18含量;乳酸脱氢酶(LDH)实验、流式细胞术检测细胞焦亡;CCK-8法及细胞周期试剂盒检测细胞增殖情况;Transwell和划痕实验检测胃癌细胞侵袭和迁移能力。结果:NLRP3、caspase-1在胃癌细胞中较GES-1表达增高(P<0.01)。下调NLRP3后,胃癌细胞LDH释放率及焦亡率显著降低(P<0.01);GSDMD、IL-1β、IL-18表达降低(P<0.01);细胞增殖阻滞在G1期(P<0.01);细胞增殖以及侵袭迁移能力显著减弱。结论:NLRP3在胃癌中高表达,其表达影响胃癌细胞的增殖、侵袭和迁移以及其介导的caspase-1依赖焦亡信号通路关键蛋白的表达。

摘要： 目的分析细胞焦亡在血管紧张素Ⅱ诱导的腹主动脉瘤(AAA)发生和发展中的作用。方法2019年9月至2021年9月,将50只C57BL/6雄性野生型小鼠按照抽签法随机分为对照组(n=24)和血管紧张素Ⅱ组(n=26),所有小鼠在肩胛骨中部皮下植入渗透微型泵注入0.9%氯化钠溶液(对照组)或血管紧张素Ⅱ(血管紧张素Ⅱ组),以1 mg·kg^(-1)·min^(-1)的剂量持续灌注28 d。肉眼、腹主动脉超声检查、HE染色、马松三色染色及VVG染色、免疫荧光染色观察两组腹主动脉大体形态、动脉直径、管腔及动脉壁、弹力纤维破坏、胶原纤维沉积情况及细胞焦亡相关蛋白(NLRP3、GSDMD、Caspase-1和IL-18)表达情况。小鼠主动脉血管平滑肌细胞(MOVAS)分别加入DMEM(对照组)或血管紧张素Ⅱ(1μmol/L)(血管紧张素Ⅱ组)培养,采用Western blotting法检测MOVAS中细胞焦亡相关蛋白表达水平。结果灌注28 d后,对照组小鼠均无动脉瘤形成,血管紧张素Ⅱ组小鼠发生动脉瘤。腹主动脉超声检查显示,血管紧张素Ⅱ组小鼠腹主动脉较对照组明显扩张。HE染色显示,血管紧张素Ⅱ组小鼠的腹主动脉管腔较对照组扩大,动脉壁变薄。马松三色染色和VVG染色显示,血管紧张素Ⅱ组小鼠弹力纤维降解,与AAA形成相关的胶原沉积明显增多。免疫荧光染色显示,血管紧张素Ⅱ组小鼠腹主动脉组织NLRP3、GSDMD、Caspase-1、IL-18蛋白表达增加。Western blotting法检测结果显示,对照组和血管紧张素Ⅱ组MOVAS中IL-18蛋白表达水平比较,差异无统计学意义(P>0.05);血管紧张素Ⅱ组MOVAS中NLRP3、GSDMD、Caspase-1蛋白表达水平高于对照组(P<0.05)。结论血管紧张素Ⅱ诱导的AAA形成与细胞焦亡相关,其主要是通过减少血管中膜层平滑肌细胞数量和促进炎症微环境导致血管壁弹性层被破坏,细胞焦亡在AAA的发生和发展过程中发挥重要作用。

摘要： 抑制WSSV增殖的半胱天冬氨酸酶基因Cq‑caspase及其蛋白抗病毒活性应用。提供红螯螯虾caspase的基因序列、氨基酸序列、重组蛋白的制备方法和红螯螯虾caspase重组蛋白在制备抗WSSV类新药和动物抗病饲料添加剂中应用。依据Cq‑caspase基因序列特征成功构建重组表达载体，在大肠杆菌原核表达系统中诱导表达并纯化获得Cq‑caspase重组蛋白。基于得到的rCq‑caspase，探究其抗WSSV活性。结果表明，rCq‑caspase能够抑制WSSV在红螯螯虾Hpt细胞中的增殖。因此重组基因工程产品rCq‑caspase在制备抗WSSV类新药开发应用中显示出非常诱人的应用前景。

摘要： 本发明的识别Caspase蛋白的自组装多肽探针、制备方法及应用，制备得到的小分子多肽化合物Nap‑GFFPYDEVD‑AFC和Nap‑GFFPYIETD‑AFC，用小分子多肽Nap‑GFFPY连接Caspase‑3和Caspase‑8蛋白的识别序列DEVD和IETD及荧光基团AFC，该小分子多肽化合物在碱性磷酸酶催化自组装形成纳米水凝胶，该纳米水凝胶可以内吞的方式进入细胞内，配合Caspase‑3和Caspase‑8蛋白的识别序列DEVD和IETD可以用来指示细胞内Caspase‑3和Caspase‑8蛋白活性。因此本发明所建立的纳米水凝胶传输体系不仅解决了Ac‑DEVD‑AFC、Ac‑IETD‑AFC溶解性低和进入细胞效率低的问题，还可以利用AFC指示凋亡细胞中Caspase‑3、Caspase‑8蛋白的表达情况。

摘要： 本发明涉及酶抑制剂技术领域，具体而言，涉及caspase抑制剂及其应用。caspase抑制剂为下述结构式所示化合物或其同分异构体，其中，R1和R2分别独立地选自氢和未取代烷基，R3为卤素，R4为苄氧羰基或者乙酰基。本发明实施例提供一种新的caspase抑制剂，其能够广谱抑制各种caspase，且抑制效果优异，扩大了caspase抑制剂的种类。

摘要： 本申请涉及一种caspase抑制剂的结晶，更具体而言涉及(S)‑3‑((S)‑2‑(5‑(2‑氯苯基)异噁唑‑3‑甲酰胺基)丙酰胺基)‑4‑氧代‑5‑(2,3,5,6‑四氟苯氧基)戊酸的结晶，其制备方法、其结晶组合物、药物组合物及其用途。本申请式Ⅰ‑A化合物的结晶稳定性高、吸湿性小，在物理性质、安全性及代谢稳定性方面具备优势，有较高的成药价值。

摘要： 本发明提供一类作为caspase抑制剂的化合物，具体涉及新的具有caspase抑制活性的化合物或其药学上可接受的盐、其制备方法及包含其的药物组合物。本发明还涉及所述化合物或其药学上可接受的盐和包含其的药物组合物在治疗caspase相关病症方面的用途。

摘要： 本发明公开了Caspase‑1及ASC/Caspase‑8作为靶点的应用，将特定的必选靶点Caspase‑1和可选靶点ASC或Caspase‑8共同删除或拮抗，能够完全阻断由经典炎性体NLRP3、AIM2、NLRP1b和NLRC4所引起的焦亡或凋亡，进而有效阻止有这些经典炎性体所引起的细胞死亡。

摘要： 本发明公开了一种增强剂3C1在制备FXR蛋白和Caspase 8蛋白相互作用的增强剂中的应用，该增强剂可促进FXR蛋白与Caspase 8蛋白之间的相互作用，进而抑制Caspase8向凋亡复合体的募集，阻断凋亡复合物形成，抑制Caspase 8的剪切活化，阻断凋亡进程，抑制细胞凋亡。因此，该增强剂可用于制备治疗具有凋亡表型的肝脏疾病的药物，具有良好的市场应用前景。

摘要： 本发明涉及caspase抑制剂在制备干细胞冻干粉及抗衰老抗炎药物中的用途。本发明提供了一种特异性的脂肪间充质干细胞冻干粉，所述冻干粉采用含有caspase‑7单抗的冻干保护剂冻干制备获得，所述冻干粉具有促进成纤维迁移以及抑制炎性的技术效果，所述冻干粉可以用于在美容或者药物领域。

摘要： 本发明提出了一种Caspase8报告基因细胞系及其构建方法和应用，涉及生物技术领域。通过该方法构建得到的报告基因细胞系能够应用于肿瘤细胞、细胞凋亡、细胞模型、Caspase相关基因以及药物筛选等方面的研究。

摘要： 本发明公开了一种番泻叶甙B在制备Caspase‑11通路抑制剂中的应用，该番泻叶甙B能够有效提高脓毒症和细菌性败血症小鼠的生存率，为临床治疗败血症了新的治疗方法和药物。