慢性高眼压

摘要： 目的观察清肝利水方(QGLS)在慢性高眼压大鼠视网膜神经节细胞(RGC)凋亡中的抑制效果,并探讨其作用机制与瞬时受体电位阳离子通道6(TRPC6)/Ca^(2+)信号通路的关系。方法制备大鼠QGLS含药血清,进行细胞毒性试验,确定合适的干预浓度。用CoCl_(2)和无糖DMEM建立RGC-5细胞缺氧缺糖-复氧复糖损伤模型,CCK-8检测正常对照组(CG)、模型组(MG)和低、中、高浓度清肝利水方含药血清组(LQGLS、MQGLS、HQGLS)的细胞增殖力,细胞凋亡试验检测细胞凋亡水平,Western Blot检测各组TRPC6、B细胞淋巴瘤-2(Bcl-2)、Bcl-2相关X(Bax)和半胱氨酸蛋白酶-3(Caspase-3)蛋白表达,Fluo-3 AM荧光探针检测细胞内钙离子浓度。结果(1)实验条件筛选:筛选出QGLS含药血清干预浓度为5%,CoCl_(2)造模浓度与时间为600μM处理24 h。(2)细胞存活率:LQGLS、MQGLS可显著提高缺氧缺糖-复氧复糖损伤的细胞存活率,与MG比较有统计学意义(t_(LQGLS)=25.401,t_(MQGLS)=11.805,均P=0.000)。(3)TRPC6表达:MQGLS、HQGLS较MG显著降低,差异均有统计学意义(t_(MQGLS)=7.365,t_(HQGLS)=9.075,均P=0.000)。(4)凋亡因子:①Caspase-3表达,3个QGLS剂量组较MG均显著下降,差异均有统计学意义(t_(LQGLS)=4.816,P=0.001;t_(MQGLS)=35.131,P=0.000;t_(HQGLS)=28.227,P=0.000);②Bax表达,3个QGLS剂量组较MG均显著下降,差异均有统计学意义(t_(LQGLS)=14.912,t_(MQGLS)=10.194,t_(HQGLS)=12.838,均P=0.000);③Bcl-2表达,3个QGLS剂量组较MG均显著升高,差异均有统计学意义(t_(LQGLS)=8.871,t_(MQGLS)=12.729,t_(HQGLS)=9.298,均P=0.000)。(5)细胞内Ca^(2+)荧光强度:MG及3个QGLS剂量组较CG均显著升高,差异具有统计学意义(t_(MG)=13.960,P=0.000;t_(LQGLS)=5.889,P=0.001;t_(MQGLS)=7.877,P=0.000;t_(HQGLS)=17.815,P=0.000)。LQGLS、MQGLS较MG细胞内Ca^(2+)浓度显著下降,差异具有统计学意义(t_(LQGLS)=7.881,t_(MQGLS)=6.204,均P=0.000),HQGLS较MG差异无统计学意义(P>0.05)。结论QGLS可降低RGC-5中Caspase-3、Bax表达,提高Bcl-2表达,抑制RGC凋亡,保护视神经,其作用机制可能与降低TRPC6表达以减少Ca^(2+)内流相关。

摘要： 目的通过视觉电生理测试技术和激光共聚焦图像获取技术研究慢性高眼压作用下视网膜功能及筛板形态的变化规律,为青光眼致病机制研究提供基础。方法通过建立慢性高眼压动物模型,对正常大鼠和造模后2周、4周大鼠进行闪光视网膜电图(flash electroretinogram,F-ERG)、闪光视觉诱发电位(flash visual evoked potential,F-VEP)测试,并通过共聚焦显微镜对筛板组织切片进行观察,计算孔隙率。结果慢性高眼压造模2周后,F-VEP的P1潜时下降、N2潜时显著增长,鼠眼筛板孔隙率下降;造模4周后,F-ERG中Rod-ERG、Cone-ERG的b波幅值显著下降,Max-ERG的a波幅值和b波幅值均显著下降,Flick-ERG的峰值幅值显著下降,各反应波形的潜时没有明显变化。结论慢性高眼压作用2周后,视神经的轴突、髓鞘功能下降,筛板形态发生变化,筛板胶原束密度增加。高眼压作用4周后视网膜感光功能进一步衰减。

摘要： 目的 探讨解郁升阳通窍方(JSTF)对慢性高眼压兔视网膜的保护作用.方法 取SPF级新西兰大白兔,随机分为正常组(NG),模型组(MG),高、中、低浓度JSTF治疗组(HCG、MCG、LCG),共5组,每组6只.建立慢性高眼压模型.造模后中药治疗组予不同浓度JSTF灌服,模型组以中浓度JSTF治疗组等体积蒸馏水灌服.正常组不做处理,常规饲养.监测眼压,造模后1个月处死动物.观察视网膜组织形态变化并检测视网膜神经节细胞(RGCs)计数及视网膜组织Caspase-3蛋白的表达.结果 (1)眼压:造模后1个月,模型组及不同浓度JSTF治疗组眼压均较正常组升高(P＜0.05).(2)视网膜组织形态变化:与模型组相比,采用不同浓度JSTF治疗后1个月,内层视网膜结构紊乱减轻,RGCs及内核层神经细胞数量增多,视网膜变薄程度减轻.(3)RGCs计数:与正常组相比,模型组及不同浓度JSTF治疗组RGCs数量均减少(tMG=164.800,tLCG=101.400,tMCG=64.190,tHCG=47.100,均P=0.000),与模型组比较,不同浓度治疗组RGCs数量均增多(tICC=27.950,tMCG=53.790,tHCG=43.320,均P=0.000);与低浓度JSTF治疗组相比,中、高浓度JSTF治疗组RGCs数量均增多(tMCG=24.760,tHCG=22.410,均P=0.000).(4)视网膜Caspase-3蛋白表达:正常组Caspase-3蛋白仅有少量表达,中浓度JSTF治疗组及模型组Caspase-3蛋白荧光强度均较正常组增高(tMCG=79.470,tMG=19.820,均P=0.000),中浓度JSTF治疗组Caspase-3蛋白荧光强度较模型组降低(t=44.510,P=0.000).结论 JSTF对慢性高眼压兔视网膜具有保护作用,能够减轻内层视网膜结构紊乱及视网膜变薄程度,并减少RGCs丢失.

摘要： 目的 探讨在慢性高眼压作用下,中轻度运动训练对大鼠视网膜细胞自噬与凋亡水平的影响,寻找利于修复慢性高眼压造成视网膜损伤的适宜运动强度.方法 选取接受运动预训练的8周龄SD雄性大鼠32只,随机平均分为空白对照(control,CON)组、中度训练(moderate intensity training,MT)组、轻度训练(low intensity training,LT)组和静置慢性高眼压(chronic ocular hypertension,COH)组共4组,每组各8只.CON组不做任何处理,对MT、LT、COH组采用烙闭上巩膜静脉的方法建立慢性高眼压大鼠模型;对MT、LT组进行3周运动干预,每次分别以23 m/min(约最大摄氧量70％)和17 m/min(约最大摄氧量58％)的强度持续跑步60 min,每日训练1次,每周训练5 d,而COH组静置处理相同时间.之后取大鼠视网膜组织,用NeuN标记神经节细胞,TUNEL标记凋亡细胞,并检测细胞自噬相关蛋白LC3、Beclin1及细胞凋亡相关蛋白Bax、Bcl?xl的表达.结果 MT、LT组的视网膜细胞自噬与凋亡水平均低于COH组,表现在LC3、Beclin1、Bax蛋白表达下调,Bcl?xl蛋白表达上调,TUNEL阳性细胞数减少,神经节细胞(RGCs)数量明显保留,而MT组与LT组之间无明显差异.结论 3周的中轻度训练均可以下调慢性高眼压造成的视网膜神经节细胞的自噬与凋亡水平,但两种运动强度没有明显差异,说明中轻度训练均有利于修复慢性高眼压造成的视网膜损伤.

摘要： 目的 观察益精杞菊地黄颗粒对慢性高眼压大鼠视网膜RGCs凋亡相关因子Bcl-2、Bax、Caspase-3蛋白表达的影响.方法 选用健康雄性的SD大鼠60只,随机平均分为5组,空白组、模型组、低剂量中药组、中剂量中药组、高剂量中药组.除空白组,其余4组均采用烧灼巩膜上静脉法,建立慢性高眼压模型.干预1个月后,分别采用免疫组化染色法检测视网膜RGCs层Bcl-2、Bax、Caspase-3蛋白的表达,RT-PCR法检测Bcl-2 mRNA、BaxmRNA、Caspase-3 mRNA的相对表达量.结果 (1)免疫组化染色法检测,中药治疗组、模型组大鼠RGCs中Bcl-2、Bax、Caspase-3较正常组均有统计学差异(P＜0.01);与模型组相比,中剂量中药组的Bcl-2表达显著增多(P＜0.01),Bax、Caspase-3的表达显著减少(P＜0.01);Bcl-2、Bax、Caspase-3表达,高、低剂量组与模型组比较,无统计学意义(P＞0.05).(2)RT-PCR检测显示,中、低剂量中药组的Bcl-2 mRNA相对表达量较模型组增多(P＜0.01),高剂量中药组较模型组,无统计学意义(P＞0.05);中、低剂量中药组Bax mRNA相对表达量均较模型组减少(P＜0.05),而高剂量组较模型组无统计学意义(P＞0.05);中剂量中药组的Caspase-3 mRNA相对表达量较模型组减少(P＜0.01),而高、低剂量组与模型组比较无统计学意义(P＞0.05).结论 益精杞菊地黄颗粒剂对慢性高眼压大鼠RGCs凋亡有保护作用,其机理可能与Bcl-2蛋白的表达上调,Bax和Caspase-3蛋白的表达下调有关,中剂量中药组的作用比较明显.

摘要： 本发明提供了一种磁性纳米粒子及其制备高眼压动物模型的方法。该发明基于一种尺寸可调的磁性纳米粒子，该磁性纳米粒子具有多级组装结构，可通过乳液聚合法制备；制备高眼压动物模型时，通过前房注射导入眼内，可根据眼房水循环途径——小梁网/施累姆氏管的具体微观组织结构调节自身交联或解交联，形成稳定的房水阻隔层，全方位多层次封堵房水运行通道，限制房水回流体循环，增加房水外流阻力，持久维持高眼压。本发明所述的高眼压动物模型的制备方法，简单、方便，安全、长效。

摘要： 本发明属于生物医药领域，具体涉及诱导型一氧化氮合酶在制备治疗急性高眼压的早期血视网膜屏障损伤药物中的应用。本发明通过大鼠急性眼高压模型建立，荧光定位iNOS的表达，其主要表达在视网膜神经纤维层、节细胞层和内核层，与血管内皮细胞标志物CD31共表达，通过免疫印迹结果，可知急性高眼压后早期(3h、6h)时，iNOS表达上调，而后iNOS和ZO‑1表达下调，通过给予iNOS特异抑制剂的干预效果对比，iNOS和ZO‑1表达下调，EB渗漏增多，说明iNOS对于高眼压的早期血视网膜屏障损伤具有保护作用，可用于治疗急性高眼压的早期血视网膜屏障损伤药物，为急性高眼压早期治疗提供了新思路。

摘要： 本公开涉及一种药物递送系统，包含：眼内压降低剂、神经营养剂(如CNTF化合物)、C型利钠肽(CNP)化合物、Tie‑2激动剂、利钠肽受体‑B(NPR‑B)化合物，或凋亡信号传导片段抑制剂(FAS)或FAS‑配体(FASL)抑制剂，包括这些化合物的任意组合，以及缓释组分。还描述了治疗青光眼或相关病症的方法、药物、试剂盒、用途和制造方法。

摘要： 本发明提供了ITGA6阳性iPSC源小梁网类细胞在制备治疗高眼压疾病药物中的应用及筛选方法，属于细胞治疗技术领域，具体为ITGA6阳性iPSC‑TM细胞样品在制备治疗高眼压疾病药物中的应用；还提供了一种筛选ITGA6阳性iPSC‑TM细胞样品的方法，主要步骤：将人源iPSC‑TM细胞与FITC‑ITGA6抗体混合，加入带有Anti‑FITC的磁珠，制得磁珠细胞混合物；置于磁场中的LS分选株进行纯化，筛选ITGA6阳性iPSC‑TM细胞比率为5.8％以上的细胞样品。

摘要： 本实用新型涉及动物实验装置技术领域，公开了一种制备急性高眼压动物模型用眼压调节装置，包括眼压调节部分和用于固定动物的操作台部分，所述眼压调节部分包括气泵，与气泵连接的气体稳压器，与气体稳压器连接的生理盐水袋，与生理盐水袋连接的至少一个静脉注射软管，所述操作台部分包括操作台及设于操作台上的至少一个绑带。本实用新型采用气体稳压器来保证冲入生理盐水袋的气体处于恒压状态，保证了盐水挤入的稳定，提高了实验精度，同时还避免了漏气现象的发生。

摘要： 本发明涉及一种慢性高眼压动物模型的建立方法，所述建立方法包括：对动物模型眼进行散瞳，预定时间后再对所述动物模型眼的眼表进行局部麻醉；待动物模型眼的瞳孔散大后，以瞳孔为中心将磁铁环放置于动物模型眼的眼球上方；将二氧化硅磁性微球分散于生理盐水中得到二氧化硅磁性微球混悬液，备用；抽出动物模型眼的前房液，然后将二氧化硅磁性微球混悬液、透明质酸钠凝胶和空气依次注入到动物模型眼的前房内，待注入的二氧化硅磁性微球通过磁铁环的磁力均匀分散在前房角处后，即得慢性高眼压动物模型。本发明提供的慢性高眼压动物模型的建立方法，可以显著增加高眼压维持的时间，得到稳定有效的慢性高眼压动物模型。

摘要： 本发明公开了一种慢性高眼压合并长眼轴动物模型的建立方法，包括如下步骤：S10、对模型动物进行麻醉；S20、使用不可吸收缝合线沿角膜外周边设定距离间断缝合结膜及浅层巩膜一周；S30、收紧缝合线，打结固定；S40、打结后5分钟内测量模型动物的眼压，如眼压大于60mmHg(1mmHg＝0.133kPa)，则得到慢性高眼压合并长眼轴动物模型。能够升高模型动物的眼压，并使得眼轴增长，具有眼压维持时间长、眼部并发症少、手术简单、手术成功率高的优点。此外，本发明还公开了一种慢性高眼压合并长眼轴动物模型及其在研究青光眼合并近视疾病中的应用。

摘要： 本发明公开了聚桂醇在制备慢性高眼压动物模型中的应用，可通过在模型动物的巩膜上静脉中注射聚桂醇的方法构建慢性高眼压动物模型，尤其是慢性轻度眼压升高的动物模型。模型构建方法简单，高眼压维持时间长，无并发症。本发明的慢性高眼压动物模型可以用于模拟人的开角型青光眼的慢性眼压升高过程，适用于筛选青光眼治疗药物的动物实验研究及青光眼发病机制研究，具有临床前研究的应用价值。

摘要： 本发明涉及一种慢性高眼压动物模型的建立方法，所述建立方法包括：对动物模型眼进行散瞳，预定时间后再对所述动物模型眼的眼表进行局部麻醉；待动物模型眼的瞳孔散大后，以瞳孔为中心将磁铁环放置于动物模型眼的眼球上方；将二氧化硅磁性微球分散于生理盐水中得到二氧化硅磁性微球混悬液，备用；抽出动物模型眼的前房液，然后将二氧化硅磁性微球混悬液、透明质酸钠凝胶和空气依次注入到动物模型眼的前房内，待注入的二氧化硅磁性微球通过磁铁环的磁力均匀分散在前房角处后，即得慢性高眼压动物模型。本发明提供的慢性高眼压动物模型的建立方法，可以显著增加高眼压维持的时间，得到稳定有效的慢性高眼压动物模型。

摘要： 一种慢性高眼压动物模型的建立方法，通过手术放置材料堵塞其房水流出通道，造成眼压升高视神经损害的青光眼动物模型，使升高的眼压维持稳定，更加易于获得和操作，得到的模型眼压升高稳定、波动小，高眼压持续时间长，目标眼压可控等优点。通过这种方法制作出的慢性高眼压动物模型，其眼压可根据堵塞Schlemm的范围不同进行调控。并且可以根据不同动物种类Schlemm管径而选择不同规格尺寸的纤维导管，完成Schlemm管堵塞，从而产生多种动物类型的慢性高眼压模型。在慢性高眼压青光眼机制研究中更好地构建与临床相契合的造模动物及造模方法，为进行慢性青光眼视神经损伤机制提供基础。