荧光原位杂交技术

摘要： 目的:探究荧光原位杂交(FISH)技术在高龄产妇产前检查中的应用价值。方法:在商丘市第一人民医院2018年2月至2019年12月收诊的产前检查高龄产妇中选出180例为研究对象,在B超引导下经腹抽取羊水,然后对羊水间期细胞进行FISH检查,并对羊水细胞进行常规培养和染色体核型分析。结果:180例羊水样本经染色体核型分析检测成功率为98.33 %;成功检测样本中,正常的有160例,异常的有17例,检测时间为14 ~ 20 d。不同产前诊断指征组的胎儿染色体异常检出率差异无统计学意义(P>0.05),其中以夫妇一方为染色体异位携带者或染色体异常患者组的胎儿染色体异常检出率最高。180例羊水样本经FISH检测,检测成功率为99.44 %,检测时间为24 ~ 48 h。以核型染色体分析为金标准,FISH检测的准确度为98.31 %,灵敏度为88.24 %,特异度为99.38 %。结论:荧光原位杂交技术在高龄产妇的产前检查中应用价值高,诊断准确度高,检测耗时短,但是并不能完全替代染色体核型分析,对于FISH检测异常者需进行染色体核型分析确诊。

摘要： 目的:探究荧光原位杂交技术(Fluorescence in situ hybridization,FISH)在染色体异常来源成分检测中的应用价值。方法:选取2017年6月至2019年12月于我院进行产前检查的孕妇561例作为研究对象,所有孕妇均行FISH与染色体核型分析检查,分析临床检查结果,另分析染色体核型分析及FISH检查在异常染色体中的检出情况。结果:561例孕妇均行染色体核型分析及FISH检查,母血清生化筛查高风险共232例(41.35%),超声检查胎儿异常32例(5.70%),孕妇年龄≥35岁共248例(44.21%);母血清生化筛查高风险与孕妇年龄≥35岁是行羊水穿刺的主要原因。561例孕妇经染色体核型分析共检出异常染色体132例,异常率为23.53%(132/561);FISH共检出异常染色体121例,异常率为21.57%(121/561)。结论:FISH在染色体异常来源成分检测中具有较高的临床应用价值,可为临床诊断提供可靠依据,值得推广。

摘要： 目的探究脱落细胞学检查(EC)、荧光原位杂交技术(FISH)以及尿膀胱肿瘤抗原(BTA)在膀胱癌鉴别中的应用价值。方法选择接受治疗的80例疑似膀胱癌患者为研究对象,分别对入组患者实施EC、FISH以及BTA检测,并以病理检查结果为金标准,计算三类指标单独检测及联合检测的一致性、灵敏度和特异度,评估对比诊断价值优劣,同时绘制受试者工作曲线(ROC),比较单一或联合检测的诊断价值。结果EC诊断一致性、灵敏度、特异度分别为41.25%、33.33%和78.57%,FISH诊断一致性、灵敏度、特异度分别为41.25%、34.85%和71.43%,BTA诊断一致性、灵敏度、特异度分别为57.50%、56.06%和64.29%,三种方式联合诊断一致性、灵敏度、特异度分别为80.00%、94.12%和83.33%;组间比较显示联合诊断的一致性、灵敏度、特异度均明显优于任一单独检测,差异具有统计学意义(P<0.05)。结论EC、FISH以及BTA在膀胱癌的鉴别诊断中均具有一定的临床价值,但联合诊断价值最高,能够明显提高诊断的一致性、准确度和特异度,为膀胱癌的诊疗提供更多信息支持。

摘要： 多发性骨髓瘤是血液疾病中较为常见的恶性肿瘤,随着时间的发展,我们愈发发现遗传学技术对此疾病的影响。荧光原位杂交(FISH)是一种基因检测技术,目前已应用在了多发性骨髓瘤的检测中,并且体现出其自身的优势,但它本身也有一些不足之处。本文就FISH技术在多发性骨髓瘤中的优势与不足进行综述。

摘要： 目的:探讨尿脱落细胞块联合FISH检测在尿路上皮癌筛查中的价值.方法:有效收集尿液,制作尿脱落细胞块,使用细胞块作FISH检测,正确判读结果.比较尿脱落细胞FISH与尿脱落细胞块FISH的阳性率.结果:38例患者中肌层浸润,尿脱落细胞FISH为阳性率75.00％,尿脱落细胞块FISH阳性率77.78％;非肌层浸润,尿脱落细胞FISH为阳性率63.64％,尿脱落细胞块FISH阳性率63.64％.高级别尿脱落细胞FISH为阳性率84.21％,尿脱落细胞块FISH阳性率78.26％;低级别尿脱落细胞FISH阳性率37.50％,尿脱落细胞块FISH阳性率37.50％.肿瘤发生的部位,上尿路尿脱落细胞FISH为阳性率73.91％,尿脱落细胞块FISH阳性率73.91％;下尿路尿脱落细胞FISH阳性率50.00％,尿脱落细胞块FISH阳性率66.67％.P>0.05,差异无统计学意义.结论:尿脱落细胞块FISH作为一种补充,扩大了膀胱癌FISH检测的应用范围.

摘要： 为了研究纯培养微生物荧光原位杂交技术(FISH)检测的影响因素,该实验以大肠杆菌(Escherichia coli)及植物乳杆菌(Lacto-bacillus planetarium)为研究对象,研究不同种属、不同生长期菌株、菌体预处理方式及杂交条件对基于探针EUB338的FISH检测结果的影响.结果表明,菌体种类及菌体生长阶段均较明显影响FISH计数的准确性;确定超声分散菌体时间60 s(100 W、每30 s间歇)、溶菌酶处理60 min可较大幅度提高FISH对菌体的检出率;杂交时间和洗脱液中NaCl浓度对FISH检测结果影响小,杂交温度、杂交液中甲酰胺浓度对大肠杆菌影响小而对植物乳杆菌有一定影响.

摘要： 目的:对比免疫组织化学法(IHC)与荧光原位杂交技术(FISH)检测861例乳腺癌人类表皮生长因子受体2(HER-2)蛋白表达和基因状态的一致性.方法:参照《乳腺癌HER-2检测指南(2019版)》判读标准对乳腺癌石蜡组织采用IHC法及FISH法分别检测HER-2蛋白表达和HER-2基因状态,进行比较分析.结果:861例乳腺癌患者中,IHC HER-2(0/1+)和FISH(-)的一致率为97.1％(134/138);IHC HER-2(2+)和FISH(+)的一致率为28.7％(188/655);IHC HER-2(3+)和FISH(+)的一致率为98.5％(67/68).两种检测方法的检测结果存在一致性,差异具有统计学意义(Kappa=0.137,P<0.0001).结论:两种方法相结合,以便精准评价HER-2检测结果指导靶向治疗.

摘要： 目的:分析荧光原位杂交技术(FISH)在病理科的应用效果.方法:按回顾分析法选取2019年8月～2020年8月收集病理科室65例疑为上尿路上皮癌患者,另选取同期体检50名上尿路结石患者,所有患者均实施FISH和尿脱落细胞检查,以病理检查为标准,分析2种检测方法的准确性.结果:65例疑为上尿路上皮癌患者中60例经病理确诊为上尿路上皮癌患者,FISH检测上尿路上皮癌总敏感性为83.33％,显著高于尿脱落细胞学检查的33.33％(P<0.05).结论:FISH检测应用于病理科上尿路上皮癌诊断中可获得显著价值,具有较佳的敏感性及特异性,因此值得临床应用及推广.

摘要： 目的:分析荧光原位杂交技术(FISH)与免疫组织化学法(IHC)在乳腺癌人表皮生长因子受体-2(HER-2)基因扩增检测中的应用价值。方法:选取惠州市第一人民医院2018年1月至2020年12月收治的首发乳腺癌患者103例作为研究对象,收集患者组织穿刺标本以及手术切除组织标本,分别应用IHC以及FISH对患者HER-2进行检测,对两种方法的检测结果进行统计和分析。结果:103例乳腺癌组织标本检测结果显示:HER-2蛋白(-)或(+)者9例,(++)者42例,(+++)者52例;基因扩增情况为:阳性(扩增)72例,阴性(未扩增)31例。两种方法的检查结果一致性较高(Kappa=0.779,P<0.05)。结论:IHC以及FISH均可作为对乳腺癌患者HER-2基因状态评估的检测方法,且两种检测结果具有较高的一致性,临床可根据患者实际情况选择合适的方法对其进行基因检测。

摘要： 目的比较不同产前羊水检测技术的性染色体检测结果,评估不同检测方法对检测结果的影响,指导临床工作中正确认识各项检测结果的临床意义。方法对羊水细胞行染色体核型分析提示为性染色体嵌合体的标本,进行分子生物学检测,比较不同检测方法提示的性染色体的结果。结果核型分析提示为性染色体嵌合体的22例孕妇的23例标本中,多重连接探针扩增技术(MLPA)检测了20例,染色体微阵列检测(CMA)检测了9例,荧光原位杂交技术(FISH)检测了4例,11例标本核型结果与分子生物学检测结果一致,12例标本核型结果与分子生物学检测结果不一致。结论经典的羊水细胞染色体核型分析技术作为传统认为的“金标准”在性染色体嵌合体的检测中,其检测结果并不准确,可能原有部分细胞的丢失或者优势生长,甚至异常细胞的分裂和异常细胞类型的获得,需要选择不同的技术组合,综合分析得出结论,以提供更准确的临床信息,指导产前诊断和临床咨询。

摘要： 目的：研究引起稽留流产或死胎的遗传因素,了解常见几种染色体数目异常引起流产的比例,探讨荧光原位杂交(fluorescence in situ hybridization,FISH)技术在快速诊断自然流产胚胎染色体数目异常的应用价值.从而为产前诊断和遗传咨询提供医学指导.rn 方法：利用荧光原位杂交技术,采用13、16、18、21、22常染色体计数探针及X、Y性染色体计数探针,针对847例流产物绒毛组织进行检测.rn 结果：827例标本检测成功,失败20例.发现染色体数目异常325例(39.3％).染色体数目异常中最常见的是16-三莞体有84例(25.8％),X单体64例(19.7％),三倍体56例(17.2％),22三体48例(14.8％),21三体21例(6.5％),13三体18例(5.5％),四倍体16例(4.9％),21单体3例(0.9％),XXY综合征2例(0.6％),16-18三体,16-22三体,18-22三体各1例(0.3％),嵌合体(16三体,XO/XY)各1例(0.3％),21四体1例(0.3％).rn 结论:由此可见，染色体数目异常是导致自然流产死胎重要因素之一，而采用荧光原位杂交技术可以快速检测出流产物绒毛组织染色体非整倍体的异常，为遗传咨询和产前诊断提供重要的指导。

摘要： 文章介绍了荧光原位杂交技术的定义，阐明其具有敏感、特异的优点，探讨了FISH检测基因异常的原理，及其结果判读基本步骤。

摘要： 目的：应用多重连接探针扩增技术(multiplex ligation-dependent probe amplification,ML-PA)和荧光原位杂交技术(fluorescence in situ hybridization,FISH)检测流产胚胎中各种染色体异常,帮助这些流产患者分析流产原因.rn 方法:收集早孕期流产胚胎的绒毛组织样本,提取基因组DNA,应用MLPA-P070探针进行分析.用FISH检测胚胎是否为多倍体.G显带核型分析对结果进行验证.rn 结果：MLPA分析85例流产胚胎,发现26例为三体,1例+21、+22的双三体,4例性染色体单体,7例部分单体或部分三体;45例未发现异常.FISH检出5例三倍体胚胎.综合MLPA和FISH结果共检出42例染色体异常胚胎.rn 结论:应用MLPA和FISH可以高效的筛查出染色体异常的流产胚胎,并且避免细胞培养失败的问题,为流产患者夫妇的再次妊娠提供了有价值的信息。

摘要： 目的：探讨荧光原位杂交(fluorescence in situ hybridization,FISH)技术在儿童白血病微小残留病(minimal residual disease,MRD)检测的临床应用价值.rn 方法：收集本院血液科2010至2011年收治的急性白血病患儿22例.应用流式细胞术对初诊患儿白血病分型并按标准治疗方案化疗,应用FISH及FCM技术对诱导缓解治疗后患儿标本进行检测,动态观察诱导缓解治疗后MRD值在各类白血病患儿中变化,根据MRD变化特征来评价白血病治疗效果,并进一步将FISH技术检测结果：与FCM术以及临床随访结果：相比较,所有结果：经SPSS13.0软件统计分析.rn 结果:22例患儿经诱导缓解治疗后，FCM检测MCR均小于10-4，提示患儿经治疗后达到缓解。比较诱导缓解治疗后FCM检测结果预测情况与观察周期内临床实际情况，FCM提示22例全部缓解，而实际情况则是18例缓解，4例发生复发。rn 结论：FISH技术可应用于儿童AML-M2,AML-M3及ALL的MRD检测，且其结果与FCM方法效果一致，但是FISH技术用于检测急性白血病患儿MRD，要进行多时间点的动态观察，还需进一步增加探针种类提高FISH检测MRD阳性率和敏感性.

摘要： 本文从基因定向监测的角度出发，介绍了人类染色体端粒酶(hTERC)基因的概念，指出hTERC基因的异常扩增可能是宫颈癌形成的早期事件，同时该基因可作为检测宫颈癌及其癌前病变的标志物。探讨了荧光原位杂交技术检测宫颈脱落细胞中hTERC基因的应用，阐述了基因检测在宫颈癌三阶梯筛查中的意义。

摘要： 文章介绍了FISH检测实验室的概况，阐述了FISH的检测原理、检测试剂/设备，并就其检测流程进行了论述，从固定时间、脱钙、预处理等方面探讨了FISH检测注意事项。

摘要： 文章介绍了FISH检测实验室的概况，阐述了FISH的检测原理、检测试剂/设备，并就其检测流程进行了论述，从固定时间、脱钙、预处理等方面探讨了FISH检测注意事项。

摘要： 文章介绍了FISH检测实验室的概况，阐述了FISH的检测原理、检测试剂/设备，并就其检测流程进行了论述，从固定时间、脱钙、预处理等方面探讨了FISH检测注意事项。

摘要： 文章介绍了FISH检测实验室的概况，阐述了FISH的检测原理、检测试剂/设备，并就其检测流程进行了论述，从固定时间、脱钙、预处理等方面探讨了FISH检测注意事项。

摘要： 为了筛选着丝粒探针,在酸黄瓜染色体荧光原位杂交中标记染色体着丝粒区域,以便对酸黄瓜染色体进行核型分析.在酸黄瓜遗传连锁图上选择尽可能接近着丝粒区的SSR标记,以酸黄瓜基因组BAC文库为试材,采用池化PCR筛库法和FISH技术,筛选和鉴定了酸黄瓜染色体着丝粒BAC单克隆.结果表明:筛选到的BAC单克隆457-F11、457-H11在酸黄瓜所有染色体近着丝粒区域都有明显的杂交信号,但是不同染色体上的杂交信号强度不同,这两个BAC克隆可能含有酸黄瓜着丝粒特有卫星重复序列.45SrDNA和BAC克隆457-H11杂交信号的相对位置与其在遗传图谱上遗传位点的相对位置具有一致性.这些结果说明BAC克隆457-F11、457-H11可用作酸黄瓜染色体的着丝粒FISH探针.

摘要： 本发明公开了一种DNA探针‑菌落原位杂交技术筛选麻痹性贝毒产生菌株的方法，包括：预处理、杂交、筛选，通过特定的正向引物与反向引物，经经聚合酶链式反应扩增合成了以地高辛标记的单链DNA探针，将待测试菌株的DNA与DNA探针进行杂交作用，通过显色测试杂交匹配结果筛选出产毒菌株。有益效果为：本发明方法可在8‑10小时内完成90个样品筛选，方法快速高效，特异性强，而且准确性高；本发明方法操作步骤简单，工作量小，周期较短，所用试剂与材料均为生化试验常用试剂，对人体无害，对环境友好，分析成本低廉，具有较高的市场前景与经济价值。

摘要： 本发明涉及一种促进荧光原位杂交的组合物及杂交液，荧光原位杂交探针工作液、荧光原位杂交方法，属于分子病理诊断技术领域。本发明中的促进荧光原位杂交的组合物，添加了异硫氰酸胍，异硫氰酸胍能够促进探针中的DNA与样本中的DNA进行结合，提高杂交效率；因此探针工作液能够实现快速杂交、短时杂交。由该组合物制成杂交液，并调整了传统组分氯化钠、柠檬酸钠、甲酰胺、硫酸葡聚糖的浓度；得到的杂交液在3h内即可完成杂交，并且杂交后仍然具有信号亮度强并且特异性好的特点。

摘要： 本发明涉及生物传感器技术领域，特别涉及一种荧光原位杂交芯片及荧光原位杂交方法。包括：支撑衬底和功能结构层；功能结构层设置在支撑衬底上；功能结构层具有腔体结构；腔体结构包括分离区和捕获区；分离区中设置有确定性侧向位移阵列；捕获区与分离区通过连接通道连通；捕获区中设置有捕获阵列；功能结构层中还设置有反应试剂进样通道，反应试剂进样通道与捕获区连通。通过确定性侧向位移阵列将外周血中稀少的肿瘤细胞进行富集分离，并通过捕获阵列实现了对肿瘤细胞的捕获固定。肿瘤细胞可以在捕获区中进行荧光原位杂交，从而实现了直接在荧光原位杂交芯片上进行一体化的肿瘤细胞富集及荧光原位杂交检测，简化了检测过程，省时省力。

摘要： 本发明公开了一种动力相关蛋白1(dynamin‑related protein 1，drp1)基因用于荧光原位杂交的引物及其cRNA原位杂交的探针的制备方法，按照如下步骤：(1)根据drp1基因的Gene bank序列，我们设计了3对drp1的特异引物，并且分别对此引物扩增出drp1基因对应的序列，作为drp1蛋白特异的探针序列；(2)构建drp1的cRNA原位杂交的探针质粒；将探针质粒转化细菌后，细菌培养后进行测序；(3)制备drp1的cRNA原位杂交探针；(4)检测drp1的cRNA探针的原位杂交。

摘要： 本发明涉及一种荧光原位杂交技术检测半滑舌鳎的性染色体组成的方法。其特征在于，用于原位杂交的探针为含有半滑舌鳎雌性特异DNA片段的fosmid或BAC克隆，在雌性半滑舌鳎的一个细胞或一个染色体分裂相中有一个荧光信号，而在超雌半滑舌鳎的一个细胞或一个染色体分裂相中有两个荧光信号。本发明对半滑舌鳎的细胞或染色体分裂相进行荧光原位杂交分析，通过观察杂交信号分辨半滑舌鳎的性染色体组成，是一种有效的鉴定半滑舌鳎雌性个体和尤其是超雌个体的技术，为利用染色体操作技术进行半滑舌鳎全雌育种的研究提供技术手段。

摘要： 本发明公开了一种荧光原位杂交技术检测沉积物中微生物种群的方法，包括沉积物样品的预处理、样品的涂布与脱水、杂交与洗净、用荧光显微镜观察，根据不同的探针所引起的荧光反应鉴别沉积物中所包含的微生物群落。本发明通过对荧光原位杂交技术的分析条件进行优化，削弱了样品的自发荧光，消除了非特异性杂交，确定了合适的杂交时间与洗脱液浓度，使得FISH技术很好的应用于沉积物样品中微生物种群的检测。

摘要： 本发明公开了用于荧光原位杂交技术检测基因数量变化的计数分析装置，包括外壳，外壳上分别设有按键B、按键R、按键G、按键R/G和按键R/B，按键B、按键R、按键G、按键R/G和按键R/B的一侧均设有显示屏，外壳的内部设有第一种类型输入—输出模块和第二种类型输入—输出模块，所述按键B、按键R和按键G分别对应一条第一种类型输入—输出模块，按键R/G和按键R/B分别对应一条第二种类型输入—输出模块，外壳的侧壁设有按键off。本发明通过设计一种针对镜下观察的荧光信号同步进行手动计数的装置，适用于FISH检测荧光信号结果辨别分析时使用。

摘要： 本发明属于肿瘤分子诊断领域，具体涉及一种骨髓涂片荧光原位杂交技术在多发性骨髓瘤中的应用，具体包括：将骨髓液制备成骨髓涂片进行瑞氏染色，选择骨髓瘤细胞多且分散良好区域作为FISH杂交区域；采用新鲜固定液覆盖FISH杂交区域使之褪色并固定细胞，将骨髓涂片置于56°C的2×SSC溶液中洗涤10min，快速放入去离子水中浸洗一遍，随后放入到梯度乙醇脱水、风干；在FISH杂交区域上加入FISH探针进行杂交，用DAPI复染剂染色、镜检荧光杂交信号。本发明所述骨髓涂片FISH检测方法特别适用于在流式免疫分型中单克隆异常浆细胞比例低于20％、在骨髓涂片瑞氏染色形态学中骨髓瘤细胞占比高于20％的情况。

摘要： 本发明涉及一种荧光原位杂交技术检测半滑舌鳎的性染色体组成的方法。其特征在于，用于原位杂交的探针为含有半滑舌鳎雌性特异DNA片段的fosmid或BAC克隆，在雌性半滑舌鳎的一个细胞或一个染色体分裂相中有一个荧光信号，而在超雌半滑舌鳎的一个细胞或一个染色体分裂相中有两个荧光信号。本发明对半滑舌鳎的细胞或染色体分裂相进行荧光原位杂交分析，通过观察杂交信号分辨半滑舌鳎的性染色体组成，是一种有效的鉴定半滑舌鳎雌性个体和尤其是超雌个体的技术，为利用染色体操作技术进行半滑舌鳎全雌育种的研究提供技术手段。

摘要： 本发明公开了一种荧光原位杂交技术检测沉积物中微生物种群的方法，包括沉积物样品的预处理、样品的涂布与脱水、杂交与洗净、用荧光显微镜观察，根据不同的探针所引起的荧光反应鉴别沉积物中所包含的微生物群落。本发明通过对荧光原位杂交技术的分析条件进行优化，削弱了样品的自发荧光，消除了非特异性杂交，确定了合适的杂交时间与洗脱液浓度，使得FISH技术很好的应用于沉积物样品中微生物种群的检测。