细胞转移

摘要： 目的 探讨长链非编码RNA(lncRNA)α/β水解酶域11反义RNA1(ABHD11-AS1)对结直肠癌细胞生长和转移的影响,并基于miR-133a/真核起始因子4A1(EIF4A1)轴分析其可能的调控机制。方法 (1)取人结直肠癌细胞HT-29、SW480、DLD-1、HCT116、LOVO、SW620,以及正常结直肠黏膜细胞FHC,检测细胞中lncRNA ABHD11-AS1的表达情况。(2)分别通过miRcode、TargetScan数据库预测ABHD11-AS1与miR-133a、miR-133a与EIF4A1的靶向关系,并进行双荧光素酶报告基因实验以验证。(3)将HT-29细胞分为NC组(转染Negative Control)、siABHD11-AS1组(转染lncRNA ABHD11-AS1 siRNA)、miR-133a inhibitor组(转染miR-133a inhibitor)、siABHD11-AS1+miR-133a inhibitor组(转染lncRNA ABHD11-AS1 siRNA和miR-133a inhibitor)和siABHD11-AS1+miR-133a inhibitor+siEIF4a1组(转染lncRNA ABHD11-AS1 siRNA、miR-133a inhibitor、EIF4A1 siRNA)。检测转染后除miR-133a inhibitor组以外的其他组细胞增殖、迁移和侵袭能力,NC组、siABHD11-AS1组、miR-133a inhibitor组、siABHD11-AS1+miR-133a inhibitor组细胞的EIF4A1蛋白表达量。结果 (1)ABHD11-AS1均高表达于各种结直肠癌细胞,在HT-29细胞中的表达最高。(2)miR-133a为ABHD11-AS1靶基因,EIF4A1为miR-133a靶基因。(3)siABHD11-AS1组HT-29细胞的增殖、迁移和侵袭能力均低于NC组(均P<0.05),siABHD11-AS1+miR-133a inhibitor组HT-29细胞的增殖、迁移和侵袭能力均高于siABHD11-AS1组(均P<0.05),siABHD11-AS1+miR-133a inhibitor+siEIF4A1组HT-29细胞的增殖、迁移和侵袭能力均低于siABHD11-AS1+miR-133a inhibitor组(均P<0.05)。(4)miR-133a inhibitor组HT-29细胞中EIF4A1蛋白表达量高于NC组(P<0.05);siABHD11-AS1组HT-29细胞中EIF4A1蛋白表达量低于NC组,而siABHD11-AS1+miR-133a inhibitor组HT-29细胞中EIF4A1蛋白表达量高于siABHD11-AS1组(均P<0.05)。结论 ABHD11-AS1在结直肠癌细胞中呈高表达,抑制其表达后结直肠癌细胞的生长和转移能力均下降,其可能通过调控miR-133a/EIF4A1信号轴发挥作用。

摘要： 目的 探讨长链非编码RNA (LncRNA) HOX转录反义RNA (HOTAIR)/miR-124参与乳腺癌细胞转移的调控机制.方法 收集87例乳腺癌切除术患者肿瘤组织及癌旁组织,检测乳腺癌细胞和癌旁组织的HOTAIR及miR-124的表达水平,并观察其在乳腺癌转移、侵袭中的调控作用.结果 乳腺癌组织中HOTAIR表达高于癌旁组织(P＜0.05).HOTAIR组穿膜细胞数明显高于感染组(P＜0.05).HOTAIR组E-cadherin蛋白表达下降,而Vimentin蛋白和Slug表达升高(均P＜0.05).miR-124在乳腺癌细胞系的表达水平明显低于人正常乳腺上皮细胞(P＜0.05).转染miR-124模拟物在MDA-MB-231和T-47D中的表达水平明显提高,且与转染miR-NC比较,转染miR-124模拟物能明显抑制乳腺癌细胞的增殖、侵袭及迁移能力(均P＜0.05);转染miR-124模拟物和pMIRSP1的3'UTR的荧光强度较低,转染miR-124模拟物后SP1 mRNA和SP1蛋白质表达水平较低(均P＜0.05).结论 HOTAIR在乳腺癌组织中过表达,可诱导乳腺癌细胞发生EMT,从而促进肿瘤细胞侵袭及转移;miR-124在乳腺癌组织中过表达,可通过调控转录因子SP1抑制乳腺癌细胞的增殖、侵袭和转移.

摘要： 目的:探讨B7-H3沉默对人乳腺癌MDA-MB-231细胞上皮间质转化及生物学行为的影响.方法:通过脂质体LipofectamineTM2000转染B7-H3 siRNA干涉载体pSilencer4.1-CMV neo/B7-H3到乳腺癌MDA-MB-231细胞,经G418筛选后获得B7-H3沉默细胞株MDA-MB-231-ShB7-H3,利用qRT-PCR及Western blot分别检测对照组(WT)、无关干涉组(ShNC)和B7-H3干涉组(ShB7-H3)细胞中B7-H3、EMT标志分子mRNA及蛋白表达水平;利用Transwell实验检测各组细胞迁移和侵袭能力;利用MTT细胞增殖实验评价各组细胞增殖情况.结果:通过qRT-PCR和Western blot证实B7-H3沉默表达的MDA-MB-231细胞株构建成功;与对照组细胞相比,B7-H3沉默表达抑制MDA-MB-231细胞EMT进程,上皮细胞标志分子E-cadherin和ZO-1表达上调,而间质细胞标志分子vimentin和αSMA表达下调;Transwell实验及MTT细胞增殖实验结果表明B7-H3沉默抑制MDA-MB-231细胞迁移、侵袭及增殖能力.结论:我们的研究结果强调了B7-H3在人乳腺癌细胞株MDA-MB-231中的重要作用,并提示B7-H3与乳腺癌细胞E MT、转移密切相关,并为以B7-H3为靶点的乳腺癌转移治疗提供初步的实验及理论基础.

摘要： 目的:观察阻断Notch1信号通路对肺腺癌细胞侵袭、血管生成和上皮-间质转化(EMT)及其对顺铂敏感性的影响,阐明Notch1信号通路在肺腺癌侵袭和转移及顺铂耐药中的作用及相关机制.方法:以γ-分泌酶抑制剂(DAPT)作为Notch1信号通路阻断剂作用A549细胞,分为0μmol·L-1 DAPT组(对照组)、10μmol·L-1 DAPT组和20μmol·L-1 DAPT组.采用Transwell小室实验检测各组A549细胞中侵袭细胞数,酶联免疫吸附测定(ELISA)法检测各组细胞培养上清液中基质金属蛋白酶9(MMP-9)和血管内皮生长因子(VEGF)水平,Western blotting法检测各组A549细胞中Notch1、Hes1、波形蛋白(Vimentin)、N钙黏附蛋白(N-cadherin)和E钙黏附蛋白(E-cadherin)蛋白表达水平,CCK-8法检测顺铂(0.625～5.000 mg·L-1)作用各组A549细胞的生长抑制率,Western blotting法检测0和1.250 mg·L-1顺铂单独作用A549细胞后Notch1和Hes1蛋白表达水平以及其单独和联合10μmol·L-1 DAPT作用A549细胞后P-糖蛋白(P-gp)和多药耐药相关蛋白1(MRP1)蛋白表达水平.结果:与对照组比较,10和20μmol·L-1 DAPT组A549细胞中侵袭细胞数明显减少(P<0.05或P<0.01),细胞培养上清液中MMP-9和VEGF水平明显降低(P<0.05或P<0.01),A549细胞中Notch1、Hes1、Vimentin和N-cadherin蛋白表达水平明显降低(P<0.05或P<0.01),E-cadherin蛋白表达水平明显升高(P<0.05).与对照组比较,10和20μmol·L-1 DAPT组A549细胞的生长抑制率明显升高(P<0.05或P<0.01).与0 mg·L-1顺铂组比较,1.250 mg·L-1顺铂组A549细胞中Notch1、Hes1、P-gp和MRP1蛋白表达水平明显升高(P<0.05或P<0.01);与1.250 mg·L-1顺铂组比较,1.250 mg·L-1顺铂联合10μmol·L-1 DAPT组A549细胞中P-gp和MRP1蛋白表达水平明显降低(P<0.01).结论:阻断Notch1信号通路可抑制肺腺癌细胞的侵袭并降低其对顺铂的耐药作用.

摘要： 目的:探讨miR-223-3p通过调控NLRP3抑制口腔鳞癌细胞增殖、迁移和侵袭的作用.方法:体外培养NOK细胞和TcaG8113细胞,检测细胞中miR-223-3p、NLRP3和Caspase-1 mRNA表达;将阴性对照(NC)和miR-223-3p特异性mimics转染到TcaG8113细胞中,48 h后检测细胞增殖率、细胞凋亡率、迁移能力和侵袭能力的变化,同时检测转染后TcaG8113细胞中miR-223-3p、NLRP3、Caspase-1、IL-18和IL-1β表达.结果:与NOK细胞相比,TcaG8113细胞中miR-223-3p mRNA表达降低,NLRP3和Caspase-1 mRNA表达增加(P<0.05);转染miR-223-3p mimics后,与NC对照组比较,miR-223-3p mimics组细胞凋亡率和miR-223-3p增加,增殖率、迁移细胞数、侵袭细胞数、NLRP3、Caspase-1、IL-18和IL-1β降低(P<0.05).结论:miR-223-3p在OSCC细胞中低表达,对OSCC细胞增殖、迁移和侵袭起促进作用,可能通过靶向NLRP3来发挥作用,有可能成为OSCC新治疗的靶点.

摘要： 目的 探讨溶酶体相关4次跨膜蛋白B(LAPTM4B)在胰腺癌组织中的表达水平,并分析LAPTM4B表达水平对癌细胞侵袭及转移的影响.方法 选取2015年1月至2019年1月本院收治的96例胰腺癌患者,采用免疫组化染色法检测LAPTM4B在胰腺癌组织及癌旁正常组织中的表达情况,分期与病理特征的关系.Kaplan-Meier生存分析LAPTM4B表达对胰腺癌患者预后生存的影响,使用tarone法进行检验,Logistic回归分析影响患者预后的相关因素.结果 观察组LAPTM4B阳性表达率为76.04％,显著高于对照组54.17％,差异具有统计学意义(P<0.05).LAPTM4B表达与TNM分期、淋巴结转移、分化程度有关,TNM分期为Ⅲ～Ⅵ期、有淋巴结转移、分化程度为中-低分化的胰腺癌患者LAPTM4B阳性表达率更高(P<0.05).96例胰腺癌患者1年生存率为20.83％(20/96),LAPTM4B阳性表达的胰腺癌患者死亡率更高(P<0.05).LAPTM4B表达阴性及表达阳性半数生存时间分别为(8.30±0.73)个月、(6.82±0.51)个月.生存分析显示LAPTM4B表达阳性的患者生存期明显短于LAPTM4B表达阴性的患者,Keplan-meier生存曲线比较差异具有统计学意义(P<0.05).TNM分期为Ⅲ～Ⅵ期、有淋巴结转移、分化程度为中-低分化、LAPTM4B表达阳性为影响胰腺癌患者预后生存的独立危险因素(P<0.05).结论 LAPTM4B在胰腺癌的侵袭及转移中发挥重要作用,与胰腺癌患者预后密切相关,可作为评估胰腺癌患者预后的重要检测标志物.

摘要： 目的 观察经扶正抗癌方预处理的M2型巨噬细胞来源的外泌体对95D细胞侵袭和迁移的影响,探讨其经外泌体途径抑制95D细胞转移的分子机制.方法 利用佛波酯诱导人外周血单核细胞THP-1为巨噬细胞(MΦ组),利用重组人白细胞介素(IL)-4、重组人IL-13诱导THP-1细胞极化为M2型巨噬细胞(MΦ+IL-4+IL-13组),Western blot检测巨噬细胞标志物CD206、诱导型一氧化氮合酶(iNOS)和转化生长因子-β(TGF-β)表达;差速离心法提取外泌体,透射电镜观察外泌体形态,Western blot检测外泌体标志物溶酶体相关膜蛋白-3(CD63)和肿瘤易感基因101(TSG101)蛋白表达;设置M2型巨噬细胞外泌体组(M2-exo组)和经扶正抗癌方(1.5 mg/mL)预处理24 h的M2型巨噬细胞外泌体组(FZKA-M2-exo组),Transwell实验和划痕实验分别检测95D细胞侵袭和迁移能力,RT-qPCR和Western blot分别检测E盒结合锌指蛋白(ZEB1)、E-钙黏素(E-cadherin)、N-钙黏素(N-cadherin)、波形蛋白(Vimentin)mRNA和蛋白表达.结果 与MΦ组比较,MΦ+IL-4+IL-13组CD206和TGF-β表达均显著升高(P<0.05,P<0.01),iNOS表达显著降低(P<0.01).提取外泌体后,透射电镜观察可见膜性微囊泡结构物,且外泌体标志物CD63和TSG101蛋白表达均升高.与M2-exo组比较,FZKA-M2-exo组穿过Transwell小室细胞数量显著减少,光密度显著降低(P<0.01),划痕24 h后,划痕宽度明显增加(P<0.01),ZEB1、N-cadherin和Vimentin mRNA和蛋白表达显著降低(P<0.01),E-cadherin mRNA和蛋白表达显著升高(P<0.01).结论 扶正抗癌方可通过M2型巨噬细胞来源的外泌体途径抑制细胞上皮-间质转化进程,进而抑制95D细胞转移.

摘要： 目的：探讨二甲双胍在低氧诱导胆囊癌GBC-SD细胞转移中的作用及其机制。 方法：分别采用划痕试验及Transwell侵袭小室检测细胞转移能力，应用Western blot技术及免疫荧光检测细胞HIF-1α及VEGF表达量，应用2-甲氧基雌二醇（2-Meo E2）特异性抑制HIF-1α表达。 结果：对照组（常氧）及低氧（1%O2）组48h划痕修复率分别为（0.465±0.048）、（0.673±0.040）；对照组（常氧）及低氧（1%浓度O2）组划24h穿膜细胞数分别为（147.4±11.7）、（234.4±17.7）；与对照组相比，低氧组胆囊癌GBC-SD细胞转移能力增加，HIF-1α及VEGF表达量增加(P<0.05)；对照组、二甲双胍组、低氧组、二甲双胍联合低氧组48h划痕修复率分别为（0.406±0.071）、（0.164±0.094）、（0.695±0.040）、（0.224±0.074）；对照组、二甲双胍组、低氧组、二甲双胍联合低氧组24h穿膜细胞数分别为（148.4±6.9）、（90.0±8.4）、（185.8±10.2）、（113.4±8.6）；与低氧组比较，应用二甲双胍后，抑制低氧诱导胆囊癌细胞转移，同时HIF-1α及VEGF表达量下降(P<0.05)；对照组、2-Meo E2组、低氧组、2-Meo E2联合低氧组48h划痕修复率分别为（0.434±0.044）、（0.259±0.090）、（0.633±0.022）、（0.462±0.045）；对照组、2-Meo E2组、低氧组、2-Meo E2联合低氧组24h穿膜细胞数分别为（144.2±12.6）、（80.2±7.7）、（203.8±7.0）、（124.0±5.2）；与低氧组比较，应用HIF-1α特异性阻断剂2Meo E2后，抑制低氧诱导胆囊癌细胞转移，VEGF表达量下降(P<0.05)。 结论：低氧处理可增加HIF-1α及VEGF表达促进GBC-SD细胞转移，二甲双胍可通过抑制HIF-1α/VEGF途径抑制低氧诱导胆囊癌GBC-SD细胞转移。

摘要： 目的：探讨丹参酮ⅡA对大肠癌细胞转移能力的影响及可能的作用机制. 方法：利用CCK-8检测不同浓度丹参酮ⅡA对人结肠癌LoVo细胞增殖的影响;采用transwell、划痕实验研究丹参酮ⅡA对人结肠癌LoVo细胞侵袭转移能力的影响;利用Western Blot研究丹参酮ⅡA对EP2介导的β-arrestin/β-catenin信号传递轴的影响. 结果：丹参酮ⅡA能够以剂量和时间依赖性方式抑制人结肠癌LoVo细胞的增殖;EP2能够促进LoVo细胞的侵袭转移能力(P＜0.01),上调β-arretin的表达,进一步促进β-catenin的核转移(P＜0.01);与空白对照组比较,丹参酮ⅡA能够明显抑制LoVo细胞的侵袭转移能力且呈剂量依赖性(P＜0.01);同时,丹参酮ⅡA能够直接下调EP2受体的表达,抑制β-arretin的激活,进一步抑制β-catenin的核转移(P＜0.01). 结论：丹参酮ⅡA能够抑制EP2/β-arrestin信号通路的激活,从而阻断β-catenin信号通路,发挥抗大肠癌侵袭转移的作用.

摘要： 研究阿片受体激动药物吗啡对于小鼠膀胱癌T24细胞内皮-间质转化(endothlialmesenchymaltransition,EMT)和侵袭转移能力的影响,探讨吗啡与肿瘤细胞转移复发之间的联系.分别以0umol/L、0.1umol/L、1umol/L和10umol/L吗啡处理处于对数生长期的T24细胞24h,然后提取细胞总蛋白,通过Western blot检测E-钙黏素、N-钙黏素、波形蛋白、Snail和Slug的蛋白表达量;以同样的方法处理T24细胞,然后提取细胞总RNA并进行逆转录,再通过QPCR检测E-钙黏素、N-钙黏素、波形蛋白、Snail和Slug的基因表达量;分别以0umol/L、0.1umol/L、1umol/L和10umol/L吗啡处理处于对数生长期的T24细胞,并在吗啡处理第0h、12h、24h和48h通过CCK-8试剂检测细胞增殖活力;取对数生长期T24细胞,待细胞铺满底孔后对细胞进行划痕处理,然后分别以0umol/L、0.1umol/L、1umol/L和10umol/L吗啡处理细胞,并在吗啡处理第0h、12h和24h用荧光显微镜记录各组的划痕愈合情况.

摘要： 研究阿片受体激动药物吗啡对于小鼠膀胱癌T24细胞内皮-间质转化(endothlial-mesenchymal transition,EMT)和侵袭转移能力的影响,探讨吗啡与肿瘤细胞转移复发之间的联系.分别以0umol/L、0.1umol/L、1umol/L和10umol/L吗啡处理处于对数生长期的T24细胞24h,然后提取细胞总蛋白,通过Western blot检测E-钙黏素、N-钙黏素、波形蛋白、Snail和Slug的蛋白表达量;以同样的方法处理T24细胞,然后提取细胞总RNA并进行逆转录,再通过QPCR检测E-钙黏素、N-钙黏素、波形蛋白、Snail和Slug的基因表达量;分别以0umol/L、0.1umol/L、1umol/L和10umol/L吗啡处理处于对数生长期的T24细胞,并在吗啡处理第0h、12h、24h和48h通过CCK-8试剂检测细胞增殖活力;取对数生长期T24细胞,待细胞铺满底孔后对细胞进行划痕处理,然后分别以0umol/L、0.1umol/L、1umol/L和10umol/L吗啡处理细胞,并在吗啡处理第0h、12h和24h用荧光显微镜记录各组的划痕愈合情况.

摘要： 目的:研究白花蛇舌草(HDW)对大肠癌转移的影响及对VEGF-C介导肿瘤淋巴管新生的调控作用. 方法:人大肠癌细胞株HCT116、HCT-8经HDW干预,采用MTT法检测细胞活力,Transwell实验观察细胞迁移,Western Blot检测VEGF-C蛋白表达:外源性VEGF-C刺激人淋巴管内皮细胞(HLEC)后,用HDW进行干预,MTT法检测细胞活力,Transwell实验观察细胞迁移,Tube formation检测淋巴管腔形成,Western Blot检测VEGFR-3、PI3K、P-PI3K、AKT、P-AKT蛋白表达. 结果:HDW能显著抑制HCT116、HCT-8的细胞活力、迁移能力,显著下调VEGF-C的蛋白表达;外源性VEGF-C刺激可增加HLEC的活力和集落形成能力,增强细胞的迁移能力,HDW可显著抑制HLEC的细胞活力、存活能力及迁移能力;VEGF-C可上调HLEC的VEGFR-3、P-PI3K、P-AKT的表达,HDW可下调其表达,且VEGF-C和HDW对PI3K、AKT的蛋白表达均无明显影响. 结论:HDW具有抑制大肠癌细胞转移和淋巴管新生的作用,通过抑制VEGF-C介导的PI3K/AKT通路活化是其抑制大肠癌淋巴管新生的重要作用机制.

摘要： 目的：探究丙泊酚对人胶质瘤U251细胞增殖、凋亡、侵袭和转移能力的作用和机制. 方法：将细胞随机分为U251组、Propofol(1mM)组、Propofol(2mM)组和Propofol(5mM)组.除U251组外,其余组用相应浓度的丙泊酚处理,CCK8检测细胞增殖,流式检测细胞凋亡,Transwell检测细胞侵袭能力,划痕实验检测细胞迁移能力,Western b1ot检测Ki67、Caspase-3、血管内皮生长因子(Vascular endothelial growth factor,VEGF)、磷脂酰肌醇-3-羟激酶(Phosphoinositide3-kinase,PI3K)、Akt、p-PI3K和p-Akt的表达. 结果：与U251组比较,Propofol(1,2,5mM)组细胞增殖速度明显降低,细胞凋亡率显著升高;同时,Propofol(1,2,5mM)组侵袭细胞数与U251组比较明显减少,Propofol(2,5mM)组划痕闭合率明显低于U251组;此外,丙泊酚还能显著抑制细胞增殖和迁移相关蛋白Ki67和VEGF表达,诱导细胞凋亡相关蛋白Caspase-3表达;丙泊酚能明显降低p-PI3K/PI3K和p-Akt/Akt的比值. 结论：丙泊酚能降低胶质瘤U251细胞的增殖、侵袭和转移能力,抑制U251细胞凋亡,作用机制可能与抑制PI3科Akt信号通路激活有关.

摘要： 目的：探究丙泊酚对人胶质瘤U251细胞增殖、凋亡、侵袭和转移能力的作用和机制. 方法：将细胞随机分为U251组、Propofol(1mM)组、Propofol(2mM)组和Propofol(5mM)组.除U251组外,其余组用相应浓度的丙泊酚处理,CCK8检测细胞增殖,流式检测细胞凋亡,Transwell检测细胞侵袭能力,划痕实验检测细胞迁移能力,Western b1ot检测Ki67、Caspase-3、血管内皮生长因子(Vascular endothelial growth factor,VEGF)、磷脂酰肌醇-3-羟激酶(Phosphoinositide3-kinase,PI3K)、Akt、p-PI3K和p-Akt的表达. 结果：与U251组比较,Propofol(1,2,5mM)组细胞增殖速度明显降低,细胞凋亡率显著升高;同时,Propofol(1,2,5mM)组侵袭细胞数与U251组比较明显减少,Propofol(2,5mM)组划痕闭合率明显低于U251组;此外,丙泊酚还能显著抑制细胞增殖和迁移相关蛋白Ki67和VEGF表达,诱导细胞凋亡相关蛋白Caspase-3表达;丙泊酚能明显降低p-PI3K/PI3K和p-Akt/Akt的比值. 结论：丙泊酚能降低胶质瘤U251细胞的增殖、侵袭和转移能力,抑制U251细胞凋亡,作用机制可能与抑制PI3科Akt信号通路激活有关.

摘要： 目的：探究丙泊酚对人胶质瘤U251细胞增殖、凋亡、侵袭和转移能力的作用和机制. 方法：将细胞随机分为U251组、Propofol(1mM)组、Propofol(2mM)组和Propofol(5mM)组.除U251组外,其余组用相应浓度的丙泊酚处理,CCK8检测细胞增殖,流式检测细胞凋亡,Transwell检测细胞侵袭能力,划痕实验检测细胞迁移能力,Western b1ot检测Ki67、Caspase-3、血管内皮生长因子(Vascular endothelial growth factor,VEGF)、磷脂酰肌醇-3-羟激酶(Phosphoinositide3-kinase,PI3K)、Akt、p-PI3K和p-Akt的表达. 结果：与U251组比较,Propofol(1,2,5mM)组细胞增殖速度明显降低,细胞凋亡率显著升高;同时,Propofol(1,2,5mM)组侵袭细胞数与U251组比较明显减少,Propofol(2,5mM)组划痕闭合率明显低于U251组;此外,丙泊酚还能显著抑制细胞增殖和迁移相关蛋白Ki67和VEGF表达,诱导细胞凋亡相关蛋白Caspase-3表达;丙泊酚能明显降低p-PI3K/PI3K和p-Akt/Akt的比值. 结论：丙泊酚能降低胶质瘤U251细胞的增殖、侵袭和转移能力,抑制U251细胞凋亡,作用机制可能与抑制PI3科Akt信号通路激活有关.

摘要： 目的：探究丙泊酚对人胶质瘤U251细胞增殖、凋亡、侵袭和转移能力的作用和机制. 方法：将细胞随机分为U251组、Propofol(1mM)组、Propofol(2mM)组和Propofol(5mM)组.除U251组外,其余组用相应浓度的丙泊酚处理,CCK8检测细胞增殖,流式检测细胞凋亡,Transwell检测细胞侵袭能力,划痕实验检测细胞迁移能力,Western b1ot检测Ki67、Caspase-3、血管内皮生长因子(Vascular endothelial growth factor,VEGF)、磷脂酰肌醇-3-羟激酶(Phosphoinositide3-kinase,PI3K)、Akt、p-PI3K和p-Akt的表达. 结果：与U251组比较,Propofol(1,2,5mM)组细胞增殖速度明显降低,细胞凋亡率显著升高;同时,Propofol(1,2,5mM)组侵袭细胞数与U251组比较明显减少,Propofol(2,5mM)组划痕闭合率明显低于U251组;此外,丙泊酚还能显著抑制细胞增殖和迁移相关蛋白Ki67和VEGF表达,诱导细胞凋亡相关蛋白Caspase-3表达;丙泊酚能明显降低p-PI3K/PI3K和p-Akt/Akt的比值. 结论：丙泊酚能降低胶质瘤U251细胞的增殖、侵袭和转移能力,抑制U251细胞凋亡,作用机制可能与抑制PI3科Akt信号通路激活有关.

摘要： 目的：探究丙泊酚对人胶质瘤U251细胞增殖、凋亡、侵袭和转移能力的作用和机制. 方法：将细胞随机分为U251组、Propofol(1mM)组、Propofol(2mM)组和Propofol(5mM)组.除U251组外,其余组用相应浓度的丙泊酚处理,CCK8检测细胞增殖,流式检测细胞凋亡,Transwell检测细胞侵袭能力,划痕实验检测细胞迁移能力,Western b1ot检测Ki67、Caspase-3、血管内皮生长因子(Vascular endothelial growth factor,VEGF)、磷脂酰肌醇-3-羟激酶(Phosphoinositide3-kinase,PI3K)、Akt、p-PI3K和p-Akt的表达. 结果：与U251组比较,Propofol(1,2,5mM)组细胞增殖速度明显降低,细胞凋亡率显著升高;同时,Propofol(1,2,5mM)组侵袭细胞数与U251组比较明显减少,Propofol(2,5mM)组划痕闭合率明显低于U251组;此外,丙泊酚还能显著抑制细胞增殖和迁移相关蛋白Ki67和VEGF表达,诱导细胞凋亡相关蛋白Caspase-3表达;丙泊酚能明显降低p-PI3K/PI3K和p-Akt/Akt的比值. 结论：丙泊酚能降低胶质瘤U251细胞的增殖、侵袭和转移能力,抑制U251细胞凋亡,作用机制可能与抑制PI3科Akt信号通路激活有关.

摘要： 本发明提供了一种诱导成体肝干细胞转化为高转移肝癌细胞的方法及以此方法筛选出的稳定肝癌细胞，方法包括如下步骤：S1：对大鼠成体肝干细胞进行扩增、培养并保存；S2：采用基因转染技术将含有Notch1基因的慢病毒载体转入大鼠成体肝干细胞，获得稳定过表达Notch1的大鼠成体肝干细胞；S3：利用稳定过表达Notch1的大鼠成体肝干细胞，采用选择性条件培养法进行培养，使其在体外进一步分化，筛选出致瘤能力强及稳定的肝癌细胞；S4：采用筛选出的肝癌细胞，通过同种属的原位肝脏移植瘤模型，可在肝脏形成肝癌，并伴自发形成双肺转移瘤，从而获得高转移肝癌细胞。采用本发明的方法筛选出的稳定肝癌细胞成瘤时间短、致瘤性好、具有肺转移能力。

摘要： 一种细胞片层转移器件、细胞片层运输装置和采用细胞片层运输装置转移细胞片层的方法，该细胞片层转移器件包括：底板和设置在所述底板边缘的提起部，其中，所述底板配置为承载所述细胞片层；所述底板具有液体通道，所述液体通道配置为沿着所述底板的厚度方向贯穿所述底板。该细胞片层转移器件可以保证在运输细胞片层的过程中细胞片层不受损伤，同时也能快速、精准地将细胞片层转移并贴附于待修复的器官或者组织的表面。

摘要： 本发明提供了既提高连续核转移的效率又提高随后产生转基因细胞和/或动物的效率的方法。这种新方法通过采用至少第二轮核转移，使供体细胞能够更有效地矫正其重新编程(reprogramming)，产生更多数量的有用的转基因胚胎。由于产生的胚胎增强了重新编程，本发明可以产生更健康的转基因动物。

摘要： 本发明公开了一种白细胞介素2(IL‑2)调节肿瘤巨噬细胞生成的外泌体分泌成分抑制肝细胞癌的生长和转移方法，探索来自TAM的外泌体与IL‑2处理后对肝癌发展的影响。TAM从肝癌组织中收集和培养。用IL‑2(ExoIL2‑TAM)或未用(ExoTAM)处理的TAM的外泌体，并用于治疗肝癌。在体和离体检测肝癌细胞增殖、凋亡和转移。在体内和体外，与ExoTAM相比，ExoIL2‑TAM治疗观察到细胞增殖和转移的减少以及细胞凋亡的增加。IL‑2可以调节来自TAM的外泌体成分以改善肝细胞癌的发展一种方法。本发明为IL‑2抑制肝细胞癌的机制提供了新的视角和方法，并暗示TAMs释放的外泌体成分的潜在临床价值。

摘要： 提供了包含基因修饰的造血干细胞和祖细胞(HSPC)和/或基因修饰的间充质细胞的组合物，其中所述细胞含有包含转基因的载体，以及产生所述基因修饰的HSPC和基因修饰的间充质细胞的方法，以及治疗或预防癌症(例如转移)和神经变性病况、自身免疫病症和炎性病症的方法。

摘要： 本发明涉及用于从未成熟卵母细胞生成成熟卵母细胞并提高卵母细胞质量以提高辅助生殖技术(ART)成功率的方法和装置。所述方法包括：使用隧道纳米管形成细胞和卵母细胞，其中，所述隧道纳米管形成细胞将自体基因组材料、生物分子和细胞组分转移至所述卵母细胞。本发明的装置包括微流体装置，以提高在隧道纳米管形成细胞和卵母细胞之间转移生物分子和细胞组分的效率。

摘要： 本发明涉及一种细胞无菌转移容器及细胞无菌转移方法，属于生物医药装备技术领域。用于细胞在制备到培养的全程中处于A级环境下，细胞无菌转移容器设为一密封容器，密封容器的两端设有通气开口，开口处设有用于过滤微生物的滤膜；开口处还设有使密封容器密闭的封堵物。通过本发明实现细胞从制备到培养过程中的无菌转移。通过采用一种作为转运培养皿、培养瓶或者细胞工厂的转运容器，再加上容器上设置的滤膜结构既能过滤微生物又有利于容器内部与外部的气流相互交换，实现将A级背景环境中制备好的细胞，转移到A级以下背景环境的培养箱内培养细胞，再转移回A级背景环境中；保证细胞转移的整个过程都处于A级环境中。

摘要： 本发明涉及医疗器具技术领域，涉及一种细胞转移装置，包括吸头、三轴机械臂、主机、吸嘴头和正负压发生装置；吸头为两端开口的中空结构，吸头的下端开口上设置有环状凸起，凸起上焊接有滤膜；主机设置于三轴机械臂上，吸嘴头的一端连接主机，另一端连接吸头的上端开口，吸嘴头的内部设置有通孔；正负压发生装置设置于主机内，正负压发生装置通过通孔与吸头的侧壁所围成的内腔相连通，正负压发生装置用于通过吸头将细胞从混合液中分离并吸附于滤膜上或将细胞从滤膜上吹离滤膜；并进一步提出一种采用细胞转移装置的细胞转移和预处理方法。本发明可实现细胞预处理和细胞转移的同时进行，简化操作流程，免于离心分离处理，有效提高染色制片效率。

摘要： 本发明公开了一种单细胞捕获转移系统及单细胞捕获转移方法。所述单细胞捕获转移方法，包括：将单细胞捕获芯片捕获的单细胞转移入单细胞转移芯片的相应单细胞池内；将单细胞转移芯片上的、与盛装有选定单细胞的选定单细胞池配合的微阀关闭，使包含所述选定单细胞池的液流层的局部区域与液流层的其余区域隔离，形成一单细胞分隔单元；将单细胞分隔单元从单细胞转移芯片中分割出，并至少将与选定单细胞池的载流入口、出口均封堵，使所述单细胞池与外界隔离。本发明还公开了一种单细胞捕获转移系统。利用本发明可以高效快速的完成单细胞的捕获和转移，并无需进行二次转移，可以有效避免单细胞转移过程中的污染和难以寻找确认的问题。

摘要： 本实用新型公开了一种可切割的单细胞转移芯片及单细胞捕获转移系统。单细胞转移芯片包括液流层，其包括一条以上载流通道，每一载流通道均通过载流通道入口及载流通道出口与芯片外部连通，至少一条载流通道上还设置有单细胞池，单细胞池用以捕获流经所述载流通道的载流内的单细胞；微阀，至少用于使包含任意一个单细胞池的液流层的局部区域与所述液流层的其余区域连通或隔离；以及切割标记，设置于所述包含任意一个单细胞池的液流层的局部区域周围，并至少用于标识出所述单细胞分隔单元。本实用新型提供的单细胞捕获转移系统可以高效快速的完成单细胞的捕获和转移，并无需进行二次转移，可以有效避免单细胞转移过程中的污染和难以寻找确认的问题。