上皮-间充质转化

摘要： 背景:研究表明,过氧化物酶体增殖物激活受体γ共激活因子1β(peroxisome proliferator-activated receptor gamma coactivator 1beta,PGC-1β)通过PI3K/AKT/mTOR信号通路影响乳腺癌细胞的增殖、迁移及凋亡。而PGC-1β能否通过PI3K/AKT/mTOR信号通路影响乳腺癌干细胞的干性及其影响机制还不清楚。目的:探究PGC-1β对乳腺癌干细胞干性的影响及调控机制。方法:将PGC-1β空载体、过表达载体(Lv-PGC-1β)、干扰载体(Sh-PGC-1β)分别转染乳腺肿瘤MCF-7细胞,荧光显微镜观察转染效果;qRTPCR及Western blot验证慢病毒转染后PGC-1βmRNA和蛋白的相对表达。在干性培养基中分别培养未转染组、PGC-1β空载体组、PGC-1β过表达组及PGC-1β干扰组的MCF-7细胞使其成为乳腺癌干细胞,显微镜下观察并记录干细胞球体的形成过程,Western blot验证干性标志物(ABCG2、ALDH1、OCT4)、上皮-间充质转化标记物(E-Cadherin、N-Cadherin、Vimentin、Slug和ZEB1)及PI3K/AKT/mTOR通路核心蛋白的相对表达。结果与结论:①MCF-7贴壁细胞经干性培养基培养形成了折光性好、中间密度高的致密球干细胞;②乳腺癌干细胞干性蛋白的表达明显高于其贴壁细胞(P<0.01);③与未转染组、空载体组相比,PGC-1β过表达组乳腺癌干细胞的形成时间缩短,细胞球体数目增多、球体直径增大(P<0.01),而PGC-1β干扰组细胞球体数目减少、球体直径减小(P<0.01);④PGC-1β过表达组干性相关蛋白的表达高于未转染组、空载体组(P<0.01),上皮-间充质转化相关蛋白E-Cadherin表达低于未转染组、空载体组(P<0.01),而N-Cadherin、Vimentin、Slug和ZEB1的表达高于未转染组、空载体组(P<0.01);PI3K/AKT/mTOR相关蛋白及其磷酸化相关蛋白表达高于未转染组、空载体组(P<0.01),PGC-1β干扰组结果则与PGC-1β过表达组相反;⑤结果提示,PGC-1β能够通过激活PI3K/AKT/mTOR信号通路影响乳腺癌干细胞上皮-间充质转化,从而促进乳腺癌干细胞的形成及干性相关标志物的表达。

摘要： 背景:先天性心脏畸形常表现为动脉瓣膜发育异常,其中以主动脉瓣二叶式畸形最常见,但目前对于胚胎主、肺动脉瓣膜的具体发育过程有待阐明。目的:探讨小鼠胚胎心脏流出道的分隔与主、肺动脉瓣膜原基形成及其重塑过程。方法:2月龄SPF级健康ICR小鼠雌鼠16只、雄鼠10只,于每日晚18:00以雌雄2∶1的比例进行合笼,次日6:00发现阴栓者记为妊娠0.5 d。选取胚龄9.5-15 d的小鼠胚胎石蜡包埋连续切片,免疫组织化学染色观察胚龄9.5-15 d的小鼠胚胎心脏Isl1、Nkx2.5、肌球蛋白重链、Ap2α、Sox9、α-平滑肌肌动蛋白、Snail、Jag1、Notch2、Alk3和p-Smad1/5/8的蛋白表达;心脏的三维重建观察流出道心内膜垫和插入垫的变化以及瓣膜的形态。结果与结论:(1)胚龄9.5-10.5 d小鼠胚胎,流出道内皮细胞经过上皮-间充质转化形成心胶质内的间充质细胞,参与形成流出道心内膜垫;胚龄11-11.5 d,咽前Isl1阳性细胞延伸入流出道壁形成插入垫,此过程未发生上皮-间充质转化;Notch2信号参与流出道心内膜垫形成过程但未参与插入垫的形成;(2)胚龄12.5 d,流出道心内膜垫远端融合形成主动脉的左、右冠瓣和肺动脉的左、右半月瓣原基,插入垫形成主动脉的无冠瓣和肺动脉的前半月瓣原基,Notch2信号表达于所有瓣膜原基;胚龄13-15 d,动脉瓣膜原基完成重塑形成细长的瓣膜,Notch2信号在瓣膜的表达逐渐变弱;(3)研究结果提示,流出道插入垫内的间充质细胞来自第二生心区Isl1阳性细胞;Notch2信号可能未参与插入垫的形成,但可能参与流出道心内膜垫的形成以及主、肺动脉瓣膜原基的重塑。

摘要： 目的观察小鼠下颌第一磨牙牙根发育过程中,上皮间充质转化(EMT)相关蛋白在上皮根鞘(HERS)中表达情况,深入探讨HERS的生物学性质。方法取新生第5、7、10、15天的ICR小鼠下颌骨标本,利用Masson染色显示其组织学形态,免疫荧光双染、免疫组织化学及阳性表达定量分析观察EMT相关标志物(CK14、波形蛋白、E-cadherin、N-cadherin、Snail)在下颌第一磨牙HERS中的表达情况,并进行统计学分析。结果在牙根发育过程中HERS持续表达上皮细胞标志物CK14,不表达间充质细胞骨架蛋白波形蛋白,在第7天至第15天间,HERS同时表达上皮(CK14、E-cadherin)、间充质特性(N-cadherin)及Snail。HERS各标志物阳性定量分析结果显示,E-cadherin在PN7持续高表达,N-cadherin在PN7表达最高,Snail在PN7、PN10表达升高。结论在牙根发育过程中HERS发生EMT,且处于EMT中间态,这种EMT中间态可能在HERS调控牙根发育中具有重要作用。

摘要： 结肠癌是消化道常见的恶性肿瘤,在全球其发病率高居第三。大部分结肠癌患者的死亡由肿瘤的复发、转移和耐药性所导致,而这些过程都有结肠癌干细胞(CCSCs)的介入。上皮间充质转化(EMT)在胚胎发育、肿瘤发生及其浸润转移等过程中都起着重要的调节作用。近来研究发现,EMT与CCSCs之间存在重要的相互联系,CCSCs的“干性”获得与维持与EMT密切相关,同时CCSCs在不同的微环境又具有EMT特性,从而在肿瘤的产生、进展和转移过程中发挥着十分重要的作用。本文总结国内外关于CCSCs和肿瘤细胞EMT关系的研究进展,阐明CCSCs与EMT的相互关系及其调控机制,以期为其靶向治疗找到新途径。

摘要： 目的 探讨不同浓度2型转化生长因子-β(TGF-β2)对视网膜色素上皮细胞(RPE)生物学特性及纤维化指标结缔组织生长因子(CTGF)的调控。方法 RPE细胞分别用0,1,5,10,15 ng/ml TGF-β2处理,并用CCK-8检测细胞增殖活性确定合适的TGF-β2浓度范围。根据CCK-8结果确定后续实验分为0,1,5,10 ng/ml TGF-β2组,倒置显微镜观察RPE细胞的形态变化,细胞划痕试验检测细胞的迁移能力,Western blot检测纤连蛋白(Fibronectin)、α-平滑肌肌动蛋白(α-SMΑ)、钙黏附蛋白E(E-cadherin)、闭锁小带蛋白(ZO-1)、CTGF的表达,PCR检测Fibronectin、α-SMA在mRNA水平的变化。结果 CCK-8结果显示,随着TGF-β2浓度的增加,细胞增殖显著增加(P0.05),而Fibronectin的表达差异具有统计学意义(P<0.05)。PCR结果显示随着TGF-β2浓度增加Fibronectin、α-SMA的mRNA表达均提高,其中5 ng/ml、10 ng/ml TGF-β2组与0 ng/ml组间,5 ng/ml和10 ng/ml组间差异具有统计学意义(均P<0.05)。纤维化指标CTGF蛋白的表达随着TGF-β2浓度增加逐渐升高,且两两之间比较差异具有统计学意义(均P<0.05)。结论 TGF-β2可以诱导RPE细胞发生上皮间充质转化(EMT)过程,通过CTGF调节组织的纤维化过程。

摘要： 目的探讨槲皮素对前列腺癌(PCa)细胞迁移、侵袭及上皮-间充质转化(EMT)的影响,并分析其可能机制。方法人前列腺癌细胞(PC-3)随机分为空白对照组及槲皮素低、中、高浓度组,转染GTP酶激活蛋白-Src同源结构域3-结合蛋白1(G3BP1)siRNA及其阴性对照、pcDNA3.1-G3BP1及其阴性对照至PC-3细胞,并用槲皮素处理。分别采用细胞划痕试验和Transwell小室法检测细胞迁移、侵袭能力,实时荧光定量PCR(qRT-PCR)法检测G3BP1 mRNA表达,Western blot法检测G3BP1蛋白、EMT相关蛋白及Wnt/β-连环蛋白(β-catenin)通路蛋白表达。结果槲皮素抑制PC-3细胞迁移、侵袭,上调E-钙黏蛋白(E-cadherin)表达,下调N-钙黏蛋白(N-cadherin)、波形蛋白(Vimentin)、转录因子Snail表达;槲皮素下调PC-3细胞G3BP1 mRNA和蛋白表达,下调Wnt家族成员3A(Wnt-3α)、β-catenin、磷酸化糖原合成酶激酶3β(Glycogen synthase kinase-3β,p-GSK-3β)表达,上调GSK-3β表达;沉默G3BP1增强槲皮素对PC-3细胞及Wnt/β-catenin通路的作用,过表达G3BP1逆转槲皮素对PC-3细胞及Wnt/β-catenin通路的作用。差异均有统计学意义(P<0.05)。结论槲皮素可通过抑制EMT抑制PCa细胞的迁移、侵袭能力,其作用机制可能与其靶向G3BP1抑制Wnt/β-catenin信号通路相关。

摘要： 宫颈癌是女性生殖系统常见的恶性肿瘤之一,部分患者因复发、转移而预后较差,严重影响女性的身心健康。上皮-间充质转化(EMT)通过改变细胞间黏附力、细胞顶端基底极性及细胞游走性,在与宫颈癌进展相关的侵袭及转移过程中发挥重要作用。部分长链非编码RNA(lncRNA)在宫颈癌组织中异常表达且与促进肿瘤进展有关的EMT过程密切相关,为研究宫颈癌的侵袭、转移机制提供了新方向。深入研究lncRNA在宫颈癌EMT过程中的具体作用机制可为宫颈癌的治疗提供新思路。

摘要： Sox基因家族是广泛存在于人体组织内的一类编码基因,其编码的Sox蛋白作为重要的转录调控因子,不仅参与调节人体生长发育的整个进程,还参与介导了包括口腔鳞状细胞癌在内的多系统肿瘤的发生发展。本文从Sox基因的上下游相互作用因子、相关信号通路及临床诊治潜能等方面综述了其在口腔鳞状细胞癌中的作用,以期为研究者提供新的研究方向和思路。

摘要： 导致恶性肿瘤治疗失败的一个重要因素是肿瘤的转移,原发性肿瘤转移是一系列复杂的细胞生物学过程,其中上皮间充质转化是肿瘤侵袭-转移过程中最重要的步骤。头颈部恶性肿瘤尤以淋巴道途径转移多见。肿瘤治疗多以手术切除为主,但转移后的肿瘤治疗效果往往不佳,因此,有效治疗肿瘤,很大程度上取决于阻断和逆转肿瘤转移的过程。近年来,探讨低毒性、效果理想的天然产物在肿瘤治疗中的作用,成为国内外学者关注的热点。本文就天然成分在头颈部及其它恶性肿瘤的上皮间充质转化的干预作用进行综述。

摘要： 目的探讨RP11-316M1.12对膀胱癌细胞侵袭、迁移、上皮间充质转化等恶性生物学行为的影响及相关机制。方法lncRNAs from cancer arrays(lnCAR)数据库分析RP11-316M1.12在膀胱癌和癌旁组织中的表达水平。荧光实时定量聚合酶链反应(fluorescence quantitative polymerase chain reaction,qPCR)检测RP11-316M1.12在膀胱癌细胞株UMUC-3、MGH-U3、J82、T24和正常膀胱上皮细胞SV-HUC-1中的表达水平。将MGH-U3细胞分为2组:空载组(转染sh-pSICOR空载质粒)和干扰组(转染sh-pSICOR-RP11-316M1.12质粒)。Transwell实验和细胞划痕实验分别检测干扰RP11-316M1.12对膀胱癌MGH-U3细胞侵袭和迁移的影响。采用lncRNA预测软件lncRNA2Function和双荧光素酶报告基因实验检测RP11-316M1.12与miR-138-5p的靶向调控关系。qPCR检测空载组和干扰组细胞中miR-138-5p的表达,Western blot检测上皮间充质转化蛋白的表达。结果与癌旁组织相比,RP11-316M1.12在膀胱癌组织中高表达(P<0.01)。与SV-HUC-1细胞相比,RP11-316M1.12在膀胱癌细胞UMUC-3、MGH-U3、J82、T24中高表达(P<0.05),且在MGH-U3细胞中表达最高(P<0.01)。与空载组比较,干扰组MGH-U3细胞的侵袭能力下降(P<0.05),MGH-U3细胞迁移能力下降(P<0.01)。双荧光素酶报告基因实验证实RP11-316M1.12靶向结合miR-138-5p(P<0.01)。与空载组相比,干扰组MGH-U3细胞中miR-138-5p表达升高(P<0.01)。与空载组相比,干扰组MGH-U3细胞中间质表型蛋白Zeb2和β-catenin表达降低,上皮表型蛋白Claudin-1和ZO-1表达升高。结论RP11-316M1.12在膀胱癌中呈现高表达,低表达RP11-316M1.12通过靶向上调miR-138-5p抑制膀胱癌细胞MGH-U3的侵袭、迁移和上皮间充质转化进程。

摘要： 目的:癌相关成纤维细胞(CAFs)是肿瘤微环境中一类重要的组成成分,而上皮间充质转化(EMT)被认为是在肿瘤转移及侵袭中扮演重要角色,本研究目的是证明CAFs与EMT之间的关系,并进一步表明二者对舌癌患者淋巴转移及预后生存情况的影响.rn 方法:利用免疫组织化学染色方法,对50例舌癌患者病理切片进行染色,α-SMA单染用来证明CAFs、Vimentin和N-cadherin双染用来证明EMT,利用半定量分析染色结果.rn 结果:α-SMA和Vimentin的高表达与淋巴结转移明显相关(P=0.016和P＜0.001),且二者高表达明显影响患者预后生存时间(P=0.024和P--0.048),且二者之间表达存在明显统计学意义(P=0.021)Ncadherin在11例患者中高表达,与患者淋巴结转移及预后末见明显相关性.rn 结论:CAFs与EMT之间存在一定联系,且二者与舌癌患者淋巴结转移及预后明显相关,证明CAFs与EMT的高表达可预测舌癌患者淋巴转移及预后,并为术后进一步治疗提供指导.

摘要： 黄芪-莪术配伍是临床治疗结肠癌的常用中药药对,而其抗肿瘤作用效果及机制需要进一步阐明.本实验以结肠癌细胞系为材料,研究黄芪-莪术共提取液的抗肿瘤尤其是抗肿瘤转移作用,发现黄芪-莪术配伍后的共提取液能降低肿瘤转移作用,并且与EMT(上皮间充质转化)、趋化因子受体CXCR4信号途径和β-catenin(β-连环蛋白)的下调有关.通过CXCR4过表达、β-catenin的激动剂和GSK 3β的抑制剂为手段研究黄芪-莪术共提取液如何影响EMT、CXCR4信号途径和β-catenin,结果表明黄芪-莪术共提取液可能通过激动GSK 3β引起β-catenin磷酸化增加及后续的β-catenin降解,而β-catenin的降解降低了CXCR4及EMT信号途径中关键分子表达的减少,从而导致结肠癌细胞转移能力的降低.这些结果显示了中药传统药对黄芪-莪术配伍抗肿瘤转移的可能作用机制,为中药药对抗肿瘤作用机制研究提供了依据.

摘要： 目的:研究中药复方益肺解毒汤对人肺腺癌A549细胞侵袭转移的影响,并初步探讨该方对细胞上皮间充质转化(EMT)的影响及其作用机制. 方法:常规培养肺癌A549细胞,CoCl2化学模拟肺癌A549细胞缺氧微环境,设空白组,以150μmol·L-1 CoCl2,1501μmol·L-1 CoCl2+15mg·mL-1益肺解毒汤,15mg·mL-1益肺解毒汤处理细胞,镜下观察细胞形态学改变,Transwell实验观察细胞侵袭能力;细胞划痕实验测细胞迁移能力;免疫印迹法(Western blot)方法测定A549细胞EMT过程中上皮细胞、间质细胞标志物E-钙黏蛋白(E-cadherin)、波形蛋白(Vimentin)的表达,转录因子Snail的蛋白表达,以及信号分子β-链蛋白(β3-catenin)、磷酸化糖原合成酶激酶-3 (P-gsk-3β)的表达. 结果:缺氧可诱导A549细胞发生形态改变,益肺解毒汤可抑制缺氧诱导的形态改变.与空白组相比,CoCl2组的细胞侵袭和迁移能力增强(P＜0.05);与CoCl2组相比,CoCl2+益肺解毒汤组的细胞侵袭能力明显减弱(P＜0.01),迁移能力亦减弱(P＜0.05).与空白组相比,CoCl2组细胞EMT相关蛋白:E-cadherin表达下调,Vimentin、Snail表达上调(P＜0.05),说明缺氧使细胞发生了EMT;与CoCl2组相比,CoCl2+益肺解毒汤组可上调E-cadherin、下调Vimentin、Snail (P＜0.0S),还能影响信号分子:上调P-gsk-3β蛋白的表达(P＜0.05),下调β3-catenin蛋白的表达(P＜0.05). 结论:益肺解毒汤能抑制缺氧诱导的A549细胞的形态变化、侵袭及迁移能力,还能抑制缺氧诱导的EMT的发生,其机制可能与Wnt/β-catenin通路有关.

摘要： Wdpcp是果蝇Fritz在哺乳动物中的同源基因,Fritz可影响果蝇翅毛的正确排列,隶属平面细胞极性(PCP)效应基因.之前的研究显示Wdpcp基因缺失突变小鼠虽然其平面细胞极性缺陷较轻微却有严重的纤毛缺陷.本文证明Wdpcp对于正常冠状血管发育必不可少，尤其对于冠状动脉。应用Sm22LacZ等位基因作为平滑肌细胞的报告基因，结果发现Wdpcp突变体表现出平滑肌细胞数量明显减少的冠状动脉发育不全，而冠状静脉发育几乎不受影响。

摘要： 目的:研究阿奇霉素对OVA诱导的哮喘小鼠支气管上皮-间充质转化的保护作用及机制. 方法:将BALB/c小鼠随机分为非模型组(Control)、哮喘模型组(OVA)、哮喘模型+地塞米松组(OVA+DEX)以及哮喘模型+阿奇霉素组(OVA+AZM)(n=6),以OVA诱导BALB/c小鼠建立哮喘气道重塑模型.通过肺组织HE染色、PAS染色及Masson染色,确定阿奇霉素对OVA诱导哮喘小鼠气道重塑的保护作用;采用免疫荧光、免疫组化及荧光定量PCR测定上皮-间充质转化(Epithelial-to-mesenchymal transition,EMT)相关标志物(E-cad、N-cad、α-SMA、snail)蛋白质和mRNA的表达,确定阿奇霉素对OVA诱导哮喘小鼠支气管上皮-间质转化的干扰作用;进一步通过荧光定量PCR、Western blotting方法检测小鼠肺组织TGF-β1、RACK1的mRNA和蛋白表达,初步探究阿奇霉素治疗OVA诱导的小鼠支气管上皮-间充质转化的分子机制. 结果:HE染色、PAS染色及Masson染色结果显示,经阿奇霉素治疗后,小鼠肺组织炎性细胞浸润以及平滑肌层厚度明显减少,支气管上皮杯状细胞增生、基底膜胶原沉积现象显著减轻(P＜0.05);免疫荧光、免疫组化及荧光定量PCR结果表明,经过阿奇霉素治疗,OVA诱导的哮喘小鼠肺组织上皮细胞标志物(E-cad)表达上升(P＜0.05),间充质细胞标志物(N-cad、α-SMA和snail)表达下降(P＜0.05);进一步通过荧光定量PCR和Western blotting检测发现,哮喘模型组TGF-β1mRNA及蛋白表达均明显上升(P＜0.05),而经阿奇霉素预处理的小鼠,肺组织TGF-β1mRNA及蛋白表达显著下降(P＜0.05),RACK1表达水平的变化趋势与TGF-β1完全相同(P＜0.05). 结论:阿奇霉素具有减缓OVA诱导的哮喘小鼠气道重塑的发生发展的作用,其分子机制可能与下调TGF-β1及RACK1,从而抑制EMT有关.

摘要： 目的:研究阿奇霉素对OVA诱导的哮喘小鼠支气管上皮-间充质转化的保护作用及机制. 方法:将BALB/c小鼠随机分为非模型组(Control)、哮喘模型组(OVA)、哮喘模型+地塞米松组(OVA+DEX)以及哮喘模型+阿奇霉素组(OVA+AZM)(n=6),以OVA诱导BALB/c小鼠建立哮喘气道重塑模型.通过肺组织HE染色、PAS染色及Masson染色,确定阿奇霉素对OVA诱导哮喘小鼠气道重塑的保护作用;采用免疫荧光、免疫组化及荧光定量PCR测定上皮-间充质转化(Epithelial-to-mesenchymal transition,EMT)相关标志物(E-cad、N-cad、α-SMA、snail)蛋白质和mRNA的表达,确定阿奇霉素对OVA诱导哮喘小鼠支气管上皮-间质转化的干扰作用;进一步通过荧光定量PCR、Western blotting方法检测小鼠肺组织TGF-β1、RACK1的mRNA和蛋白表达,初步探究阿奇霉素治疗OVA诱导的小鼠支气管上皮-间充质转化的分子机制. 结果:HE染色、PAS染色及Masson染色结果显示,经阿奇霉素治疗后,小鼠肺组织炎性细胞浸润以及平滑肌层厚度明显减少,支气管上皮杯状细胞增生、基底膜胶原沉积现象显著减轻(P＜0.05);免疫荧光、免疫组化及荧光定量PCR结果表明,经过阿奇霉素治疗,OVA诱导的哮喘小鼠肺组织上皮细胞标志物(E-cad)表达上升(P＜0.05),间充质细胞标志物(N-cad、α-SMA和snail)表达下降(P＜0.05);进一步通过荧光定量PCR和Western blotting检测发现,哮喘模型组TGF-β1mRNA及蛋白表达均明显上升(P＜0.05),而经阿奇霉素预处理的小鼠,肺组织TGF-β1mRNA及蛋白表达显著下降(P＜0.05),RACK1表达水平的变化趋势与TGF-β1完全相同(P＜0.05). 结论:阿奇霉素具有减缓OVA诱导的哮喘小鼠气道重塑的发生发展的作用,其分子机制可能与下调TGF-β1及RACK1,从而抑制EMT有关.

摘要： 目的:研究阿奇霉素对OVA诱导的哮喘小鼠支气管上皮-间充质转化的保护作用及机制. 方法:将BALB/c小鼠随机分为非模型组(Control)、哮喘模型组(OVA)、哮喘模型+地塞米松组(OVA+DEX)以及哮喘模型+阿奇霉素组(OVA+AZM)(n=6),以OVA诱导BALB/c小鼠建立哮喘气道重塑模型.通过肺组织HE染色、PAS染色及Masson染色,确定阿奇霉素对OVA诱导哮喘小鼠气道重塑的保护作用;采用免疫荧光、免疫组化及荧光定量PCR测定上皮-间充质转化(Epithelial-to-mesenchymal transition,EMT)相关标志物(E-cad、N-cad、α-SMA、snail)蛋白质和mRNA的表达,确定阿奇霉素对OVA诱导哮喘小鼠支气管上皮-间质转化的干扰作用;进一步通过荧光定量PCR、Western blotting方法检测小鼠肺组织TGF-β1、RACK1的mRNA和蛋白表达,初步探究阿奇霉素治疗OVA诱导的小鼠支气管上皮-间充质转化的分子机制. 结果:HE染色、PAS染色及Masson染色结果显示,经阿奇霉素治疗后,小鼠肺组织炎性细胞浸润以及平滑肌层厚度明显减少,支气管上皮杯状细胞增生、基底膜胶原沉积现象显著减轻(P＜0.05);免疫荧光、免疫组化及荧光定量PCR结果表明,经过阿奇霉素治疗,OVA诱导的哮喘小鼠肺组织上皮细胞标志物(E-cad)表达上升(P＜0.05),间充质细胞标志物(N-cad、α-SMA和snail)表达下降(P＜0.05);进一步通过荧光定量PCR和Western blotting检测发现,哮喘模型组TGF-β1mRNA及蛋白表达均明显上升(P＜0.05),而经阿奇霉素预处理的小鼠,肺组织TGF-β1mRNA及蛋白表达显著下降(P＜0.05),RACK1表达水平的变化趋势与TGF-β1完全相同(P＜0.05). 结论:阿奇霉素具有减缓OVA诱导的哮喘小鼠气道重塑的发生发展的作用,其分子机制可能与下调TGF-β1及RACK1,从而抑制EMT有关.

摘要： 目的:研究阿奇霉素对OVA诱导的哮喘小鼠支气管上皮-间充质转化的保护作用及机制. 方法:将BALB/c小鼠随机分为非模型组(Control)、哮喘模型组(OVA)、哮喘模型+地塞米松组(OVA+DEX)以及哮喘模型+阿奇霉素组(OVA+AZM)(n=6),以OVA诱导BALB/c小鼠建立哮喘气道重塑模型.通过肺组织HE染色、PAS染色及Masson染色,确定阿奇霉素对OVA诱导哮喘小鼠气道重塑的保护作用;采用免疫荧光、免疫组化及荧光定量PCR测定上皮-间充质转化(Epithelial-to-mesenchymal transition,EMT)相关标志物(E-cad、N-cad、α-SMA、snail)蛋白质和mRNA的表达,确定阿奇霉素对OVA诱导哮喘小鼠支气管上皮-间质转化的干扰作用;进一步通过荧光定量PCR、Western blotting方法检测小鼠肺组织TGF-β1、RACK1的mRNA和蛋白表达,初步探究阿奇霉素治疗OVA诱导的小鼠支气管上皮-间充质转化的分子机制. 结果:HE染色、PAS染色及Masson染色结果显示,经阿奇霉素治疗后,小鼠肺组织炎性细胞浸润以及平滑肌层厚度明显减少,支气管上皮杯状细胞增生、基底膜胶原沉积现象显著减轻(P＜0.05);免疫荧光、免疫组化及荧光定量PCR结果表明,经过阿奇霉素治疗,OVA诱导的哮喘小鼠肺组织上皮细胞标志物(E-cad)表达上升(P＜0.05),间充质细胞标志物(N-cad、α-SMA和snail)表达下降(P＜0.05);进一步通过荧光定量PCR和Western blotting检测发现,哮喘模型组TGF-β1mRNA及蛋白表达均明显上升(P＜0.05),而经阿奇霉素预处理的小鼠,肺组织TGF-β1mRNA及蛋白表达显著下降(P＜0.05),RACK1表达水平的变化趋势与TGF-β1完全相同(P＜0.05). 结论:阿奇霉素具有减缓OVA诱导的哮喘小鼠气道重塑的发生发展的作用,其分子机制可能与下调TGF-β1及RACK1,从而抑制EMT有关.

摘要： 目的:研究阿奇霉素对OVA诱导的哮喘小鼠支气管上皮-间充质转化的保护作用及机制. 方法:将BALB/c小鼠随机分为非模型组(Control)、哮喘模型组(OVA)、哮喘模型+地塞米松组(OVA+DEX)以及哮喘模型+阿奇霉素组(OVA+AZM)(n=6),以OVA诱导BALB/c小鼠建立哮喘气道重塑模型.通过肺组织HE染色、PAS染色及Masson染色,确定阿奇霉素对OVA诱导哮喘小鼠气道重塑的保护作用;采用免疫荧光、免疫组化及荧光定量PCR测定上皮-间充质转化(Epithelial-to-mesenchymal transition,EMT)相关标志物(E-cad、N-cad、α-SMA、snail)蛋白质和mRNA的表达,确定阿奇霉素对OVA诱导哮喘小鼠支气管上皮-间质转化的干扰作用;进一步通过荧光定量PCR、Western blotting方法检测小鼠肺组织TGF-β1、RACK1的mRNA和蛋白表达,初步探究阿奇霉素治疗OVA诱导的小鼠支气管上皮-间充质转化的分子机制. 结果:HE染色、PAS染色及Masson染色结果显示,经阿奇霉素治疗后,小鼠肺组织炎性细胞浸润以及平滑肌层厚度明显减少,支气管上皮杯状细胞增生、基底膜胶原沉积现象显著减轻(P＜0.05);免疫荧光、免疫组化及荧光定量PCR结果表明,经过阿奇霉素治疗,OVA诱导的哮喘小鼠肺组织上皮细胞标志物(E-cad)表达上升(P＜0.05),间充质细胞标志物(N-cad、α-SMA和snail)表达下降(P＜0.05);进一步通过荧光定量PCR和Western blotting检测发现,哮喘模型组TGF-β1mRNA及蛋白表达均明显上升(P＜0.05),而经阿奇霉素预处理的小鼠,肺组织TGF-β1mRNA及蛋白表达显著下降(P＜0.05),RACK1表达水平的变化趋势与TGF-β1完全相同(P＜0.05). 结论:阿奇霉素具有减缓OVA诱导的哮喘小鼠气道重塑的发生发展的作用,其分子机制可能与下调TGF-β1及RACK1,从而抑制EMT有关.

摘要： 探讨补体片段C3a在阿霉素肾病小鼠中是否能够诱导足细胞发生上皮-间充质转分化及其作用机制.阿霉素肾病小鼠肾脏局部补体C3被激活，补体片段C3a可促进足细胞上皮间充质转分化，整合素连接激酶信号通路在C3a促进足细胞上皮间充质转分化过程中起作用。

摘要： 本发明提出了试剂在制备试剂盒中的用途。所述试剂用于过表达MIB1基因，所述试剂盒用于下列的至少之一：诱导细胞发生上皮‑间充质转化；获得间充质状态的细胞；获得对铁死亡通路高度敏感的细胞。发明人发现，细胞过表达MIB1基因后，细胞可高效发生上皮‑间充质转化，进而有效获得间充质状态的细胞，且该间充质状态的细胞对铁死亡通路高度敏感，适用于高通量筛选在间充质状态细胞中能有效诱导铁死亡的小分子化合物及其它调控分子。

摘要： 本发明涉及诊断上皮向间充质转化(EMT)(例如间皮向间充质转化(MMT))，尤其腹膜的EMT（其经常在腹膜透析时发生）的领域。本发明提供基于标记的方法和试剂盒，所述标记包括至少一种细胞外基质蛋白，例如胶原蛋白13、胶原蛋白6和/或角蛋白34；至少一种参与细胞外基质的建立和/或重建的蛋白，例如基质金属蛋白酶1；至少一种参与细胞‑细胞和/或细胞‑基质接触的蛋白，例如钙粘着蛋白13或血小板反应蛋白1；至少一种生长因子，例如VEGF；以及任选的至少一种BMP拮抗剂，例如Gremlin 1。

摘要： 本发明公开了一种用于研究肿瘤细胞上皮-间充质转化的细胞力学模拟系统，该用于研究肿瘤细胞上皮-间充质转化的细胞力学模拟系统包括恒流泵、储液瓶、体外细胞力学模拟装置，所述恒流泵、储液瓶和体外细胞力学模拟装置通过导管串联成封闭圆环。与现有的相比，本发明保护的用于研究肿瘤细胞上皮-间充质转化的细胞力学模拟系统可以放置多张载玻片，对种植于其上的肿瘤细胞进行剪切应力加载，所加载的流场均匀稳定，且通过流量的调节可以实现不同大小的剪切应力加载。该系统可用于观察种植于载玻片上的肿瘤细胞受流体剪切应力作用后发生上皮-间充质转化的动态情况，且通过串联的载玻片观察上游细胞在经过剪切应力作用后的局部迁移和粘附至下游载玻片的能力。

摘要： 本发明提出了试剂在制备试剂盒中的用途。所述试剂用于过表达MIB1基因，所述试剂盒用于下列的至少之一：诱导细胞发生上皮‑间充质转化；获得间充质状态的细胞；获得对铁死亡通路高度敏感的细胞。发明人发现，细胞过表达MIB1基因后，细胞可高效发生上皮‑间充质转化，进而有效获得间充质状态的细胞，且该间充质状态的细胞对铁死亡通路高度敏感，适用于高通量筛选在间充质状态细胞中能有效诱导铁死亡的小分子化合物及其它调控分子。

摘要： 本发明涉及诊断上皮向间充质转化(EMT)(例如间皮向间充质转化(MMT))，尤其腹膜的EMT（其经常在腹膜透析时发生）的领域。本发明提供基于标记的方法和试剂盒，所述标记包括至少一种细胞外基质蛋白，例如胶原蛋白13、胶原蛋白6和/或角蛋白34；至少一种参与细胞外基质的建立和/或重建的蛋白，例如基质金属蛋白酶1；至少一种参与细胞‑细胞和/或细胞‑基质接触的蛋白，例如钙粘着蛋白13或血小板反应蛋白1；至少一种生长因子，例如VEGF；以及任选的至少一种BMP拮抗剂，例如Gremlin 1。

摘要： 本发明基于实验手段探究了芹菜素的生物学性质，创新性的发现芹菜素对肝癌细胞上皮细胞‑间充质转化作用(EMT)具有确切的抑制效果，可逆转EMT的发展进程，以分子标记实验发现芹菜素干预的肝癌细胞中上皮标志分子表达水平均发生上调，同时间充质标志分子表达量下调，且变化程度与芹菜素呈剂量依赖关系。基于上述有益的发现，可以利用其治疗以EMT为效应的多种疾病，在本发明中进一步发现，利用芹菜素对EMT效应的缓解效果可作为肝癌的治疗通路，实验证实由于肝癌细胞EMT效应得到有效逆转，因此肝癌细胞的迁移现象得到显著抑制、肝癌细胞增殖受限，从而有力证实了芹菜素的癌症治疗作用。

摘要： 本发明公开了一种用于研究肿瘤细胞上皮-间充质转化的细胞力学模拟系统，该用于研究肿瘤细胞上皮-间充质转化的细胞力学模拟系统包括恒流泵、储液瓶、体外细胞力学模拟装置，所述恒流泵、储液瓶和体外细胞力学模拟装置通过导管串联成封闭圆环。与现有技术相比，本发明保护的用于研究肿瘤细胞上皮-间充质转化的细胞力学模拟系统可以放置多张载玻片，对种植于其上的肿瘤细胞进行剪切应力加载，所加载的流场均匀稳定，且通过流量的调节可以实现不同大小的剪切应力加载。该系统可用于观察种植于载玻片上的肿瘤细胞受流体剪切应力作用后发生上皮-间充质转化的动态情况，且通过串联的载玻片观察上游细胞在经过剪切应力作用后的局部迁移和粘附至下游载玻片的能力。

摘要： 本发明涉及评估间充质干细胞(MSC)群体的伤口愈合效力的方法。此外，本发明涉及选择用于在cGMP条件下产生干细胞群体的MSC的方法，选择用于产生用于后续药物施用的干细胞群体的MSC群体的方法。此外，本发明涉及选择用于生成主细胞库的MSC群体的方法，以及鉴定适合作为用于产生用于药物用途的MSC群体的起始材料的组织的方法。所述方法包括测定培养基中由MSC分泌至培养基中的选自血管生成素1(Ang‑1)、转化生长因子β(TGF‑β)、血管内皮生长因子(VEGF)和肝细胞生长因子(HGF)的至少两种蛋白质的水平。

摘要： 本发明涉及一种用于直接分化胚胎干细胞来源间充质干细胞的培养基、用其制备间充质干细胞的方法、由此制备的间充质干细胞以及包括其的细胞治疗剂，根据一方面的培养基组合物和方法，不仅可以在短时间内以高产率制备间充质干细胞，而且由于没有胚状体形状的步骤，因此制备工艺简单，并且可以获得具有均质性的细胞，从而具有可以在比现有方法更短的时间内提供细胞治疗剂的效果。

摘要： 本发明的目的在于，提供包含治疗效果好的MSC的细胞制剂。提供一种活化的MSC的制造方法，包括使用具有由纤维构成的三维结构的细胞培养载体在含有哺乳动物胎儿附属物来源的活化剂的培养基中培养MSC的工序。此外，还提供选自由p16