穿膜肽

摘要： 背景细胞穿膜肽(cell-penetrating peptides,CPPs)是一类具有细胞膜穿透能力的多肽,可以作为药物载体携带大分子物质进入细胞,其因低毒性和多组织普适性广泛运用于医学成像和治疗的研究中。目的构建穿膜肽钴原卟啉药物复合体(R6-CoPP),研究其生物相容性和减轻晶状体上皮细胞氧化应激损伤的作用。方法采用Fmoc固相合成法,根据设计的序列合成寡聚精氨酸穿膜肽(R6),以脱水缩合法将其与钴原卟啉(cobalt protoporphyrin,CoPP)连接,使用异硫氰酸荧光素(fluorescein isothiocvanate,FITC)进行标记。应用高效液相色谱仪和质谱仪测定其纯度和相对分子质量,利用扫描透射电镜(STEM)能谱面/线扫和激光纳米粒度电位测量仪观测其表征形貌、元素分布、粒子直径和表面电位;细胞流式仪和共聚焦显微镜观察R6-CoPP对体外培养的人晶状体上皮细胞系的穿膜效果;CCK-8法检测R6-CoPP对人晶状体上皮细胞系细胞活性的影响。利用H_(2)O_(2)构建晶状体上皮细胞氧化损伤模型,比较R6-CoPP与CoPP预处理对细胞凋亡的影响。结果经高效液相色谱法鉴定R6-CoPP纯度为94.56%,质谱鉴定相对分子质量为2109.75,与预计相符,粒径为227.8 nm,表面电位为+13.9 mV,STEM能谱面扫显示R6-CoPP内有钴元素分布。R6-CoPP对细胞毒性较小,生物相容性好。细胞流式结果显示穿膜肽药物孵育细胞2 h后荧光阳性细胞比例可达80%以上。共聚焦显微镜荧光显示孵育15 min后R6-CoPP已经穿越细胞膜进入细胞质,细胞荧光强度随孵育时间的增加而下降。与氧化损伤模型组相比,CoPP和R6-CoPP预处理后的细胞存活率明显提高(P<0.05)。结论穿膜肽药物复合体R6-CoPP生物相容性较好,具有较强的细胞膜穿透能力,体外实验显示其可减轻氧化损伤所致的晶状体上皮细胞凋亡。

摘要： 为研究苦荞金属硫蛋白(FtMT)的生物学功能,制备具有穿膜活性的重组FtMT。采用基因重组技术,分别将FtMT和融合穿膜肽的Tat-FtMT、11R-FtMT编码基因定向克隆至碱性磷酸盐启动子(phoA)分泌型原核表达载体,转化大肠杆菌BL21(DE3)。通过低磷酸盐诱导重组蛋白可溶表达后,经镍柱亲和层析分离纯化,利用SDS-PAGE、Western blot和紫外光谱扫描分析、鉴定。采用电感耦合等离子原子发射光谱仪(ICP-OES)和比色法分析重组FtMT蛋白金属结合特性和羟自由基清除活性。采用免疫荧光法检测穿膜肽介导的FtMT蛋白的穿膜活性,通过MTT细胞增殖试验分析穿膜肽-FtMT融合蛋白对胰岛细胞Ins-1和心肌细胞H9c2在高糖、高脂及缺氧毒性条件下氧化损伤的保护作用。结果表明,获得纯度较高的可溶性FtMT、Tat-FtMT和11R-FtMT重组蛋白,3种重组蛋白具有几乎一致的金属-巯基簇特征吸收峰,具有较强的金属离子结合能力和羟自由基清除活性。穿膜活性试验证实Tat-FtMT和11R-FtMT蛋白较FtMT具有显著的跨膜转运功能(P<0.05),外源穿膜肽-FtMT融合蛋白可通过跨膜进入胞内,显著降低Ins-1和H9c2由高糖、高脂以及缺氧毒性导致的氧化损伤(P<0.05)。试验成功实现了重组穿膜肽-FtMT融合蛋白的表达,在细胞水平分析其抗氧化损伤作用,为FtMT的食药资源开发、应用奠定基础。

摘要： 将核糖体失活蛋白类鼻疽伯克霍尔德菌致死因子1(BLF1)与细胞穿膜肽(CPP)HBP融合表达并与商陆皂苷甲(EsA)联合使用,提高BLF1重组蛋白抑制肿瘤细胞生长的活性.通过原核表达及NI-NTA亲和层析纯化BLF1、BLF1-HBP融合蛋白,以HepG2、MCF-7、A549和HeLa细胞为检测模型,MTT法检测BLF1重组蛋白对肿瘤细胞的毒性,激光共聚焦显微镜观察重组蛋白进入细胞效率,流式细胞术分析抗肿瘤效应.结果显示,穿膜肽HBP可有效提高BLF1对HepG2、MCF-7、A549和HeLa四种肿瘤细胞的生长抑制作用,其中对HeLa细胞的药效增强效果最显著,可达47.5倍;皂苷EsA的使用进一步显著提高了BLF1-HBP对上述4种肿瘤细胞生长抑制活性,且对MCF-7细胞的IC50值从6840 nmol/L降至0.57 nmol/L.激光共聚焦观察揭示EsA可有效促进BLF1重组蛋白进入肿瘤细胞效率,流式结果分析表明EsA可大大强化BLF1-HBP诱导肿瘤细胞凋亡的能力.将BLF1与穿膜肽HBP融合表达并在EsA存在下,可显著提升BLF1对肿瘤细胞的毒性,强化其诱导肿瘤细胞凋亡的能力.

摘要： 将重组质粒转化到大肠杆菌BL21(DE3)中,在不同的诱导时机、诱导温度、IPTG的浓度和Mg2+浓度条件下培养大肠杆菌,通过SDS-PAGE和发光强度检测分析TAT-LUC的酶活性强度及表达量;将高活性的TAT-LUC与LUC对比检测ATP,通过发光强度分析 TAT-LUC的敏感性和可靠性.表明:在含Mg2+浓度为50 mmol/L的LB培养基中将大肠杆菌培养至 OD600为0.6时,加入终浓度为0.5 mmol/L的IPTG,22 °C诱导16 h可获得大量高活性的 TAT-LUC;相比LUC,TAT-LUC可以检测到小于10 nmol/L的ATP,发光强度与ATP含量呈强相关性(R2= 0.99);并且不用裂解细胞,TAT-LUC可直接检测至少40个细胞内ATP;穿膜肽标记的荧光素酶蛋白成功用于检测活细胞内的 ATP含量.%The recombinant plasmid is transformed into Escherichia coli BL 21(DE3),and Escherichia coli is cultivated under the conditions of different induction time,induction temperature,concentration of IPTG and Mg2+concentration. Through SDS-PAGE and luminescence intensity detection,the enzyme activity intensity and expression of TAT-LUC are analyzed.The high active TAT-LUC is compared with LUC to detect ATP,and through the luminous intensity,the sensitivity and reliability of TAT-LUC are analyzed.The results show that when the Escherichia coli in an LB medium with the concentration of Mg2+which is 50 mmol/L is cultivated from OD600 to 0.6,IPTG with a final concentration of 0.5 mmol/L is added and a large amount of the highly active TAT-LUC can be obtained after the 16 h induction at 22°C.In comparison with LUC,TAT-LUC can detect ATP of less than 10 nmol/L,and the intensity of luminescence is strongly correlated with the content of ATP(R2= 0.99).Without cracking cells,TAT-LUC can directly detect at least 40 intracellular ATPs.The luciferase protein labeled by membrane peptide has been successfully used to detect the content of ATP in living cells.

摘要： 目的 为了术来开发和研制一类具有经皮肤或经粘膜途径给药的新型外周脂肪细胞激动剂及进行相关临床应用制剂等研究工作需要,本研究新设计并合成了一条氨基酸全序列为YGRKKRRQRRRYPSKPDNPGEDAPAEDMARYYSALRHYINLITRQRY-NH2的TAT-hNPY,并对TAT-hNPY的纯度和质核比及分子量进行了测定分析与鉴定,为其在临床应用提供实验依据.方法 TAT-hNPY合成采用化学固相合成法,纯度测定采用高效液相色谱法(HPLC),分子量测定采用电喷雾离子化质谱法(ESI-IT-MS).结果 采用HPLC检测化学固相法合成的TAT-hNPY的纯度为95.85％;采用ESI-IT-MS法检测分析出3个带有不同质荷比的目标峰,它们分别为:[M+6H]6H+质荷比为969.2 m/z,其实测分子量为5 809.2道尔顿;[M+ 7H] 7H+质荷比为:831.4 m/z,其实测分子量为5 812.8道尔顿;[M +9H] 9H+质荷比为:646.8 m/z,其实测分子量为5812.2道尔顿,该目标多肽的理论分子量为5 814.6道尔顿.结论 采用化学固相合成法合成TAT-hNPY的实测分子量与理论分子量误差均在允许误差0.1％内,丽者结果相符,证明本实验成功实现了目标多肽的合成,这将为临床相关学科进一步探索hNPY与外周脂肪细胞之间的相关关系、特别是对深入探索研究经皮肤或粘膜给药途径传递hNPY对人体外周组织脂肪组织中脂肪前体细胞和脂肪干细胞的相互作用及其影响等奠定了一定基础.

摘要： 基于细胞穿膜肽Tat(49-57)N端二肽修饰设计了4条阳离子型抗菌肽Tat(YG)、Tat(YY)、Tat(FG)和Tat(FF),并通过Fmoc多肽固相合成法进行合成,反相高效液相色谱分离纯化,经1H NMR、ESI-MS和元素分析对其结构进行表征,采用噻唑蓝(MTT)法测定其抑菌活性,利用多种光谱法研究其与小牛胸腺DNA(ct-DNA)的相互作用.MTT实验结果表明,Tat(YY)、Tat(FF)、Tat(FF)和Tat(YY)、Tat(FF)分别对大肠杆菌、鼠伤寒沙门菌、枯草杆菌、金黄色葡萄球菌的抑制效率最高的,且抗菌肽的溶血性都很小,但对真菌的增长没有明显抑制作用.与DNA的结合实验结果表明:Tat(49-57)及其衍生肽与DNA相互作用的主要模式是沟槽模式,衍生肽与DNA的相互作用能力增强,具有进一步改善设计成为优异抗菌药物的价值.%Four novel cationic antibacterial peptide analogs were modified at the N-terminus of the cell-penetrating peptide transacting activator of transcription TAT(49-57) by attaching dipeptides.Peptides were synthesized through standard Fmoc solid-phase peptide synthesis procedures,purified by reversed-phase high performance liquid chromatography (RP-HPLC),and characterized by 1H NMR,ESI-MS and elemental analysis.Tat(YY),Tat(FF),Tat(FF) and Tat(YY),Tat(FF) demonstrated better antibacterial activities against E.coli,S.typhimurium,B.subtilis and S.aureus with low hemolysis,respectively,but had no inhibitory effect on fungus growth.The Tat(49-57) analogs inhibited the bacteria more effectively than Tat(49-57).The interactions between peptides and calf thymus DNA (ct-DNA) were investigated with multi-spectroscopic techniques.The results showed that both peptides could interact with DNA via the groove binding mode.Compared to TAT(49-57),antibacterial peptide analogs combined with DNA much closer via binding constants,which has the value to become an excellent antibacterial agent with further improved and designed.

摘要： 通过白树毒素(Gelonin)与多种穿膜肽(Cell-Penetrating Peptide,CPP)融合,获得一种抗肿瘤活性最高的Gelonin-HBP重组蛋白并研究其抑制肿瘤细胞增长的分子机制.以大肠杆菌BL21(DE3)重组表达及NI-NTA亲和纯化4种CPP(R9、TAT、HBD和HBP)与Gelonin融合的重组蛋白,通过超螺旋切割和体外翻译抑制实验检测其生物活性;激光共聚焦显微镜观察Gelonin重组蛋白穿膜效率、以MTT法检测其对肿瘤细胞的作用、并用流式细胞术及Western blot法观察其细胞凋亡的分子机制.结果显示,获得了保留Gelonin原有生物活性的4种Gelonin重组蛋白,连接CPP的Gelonin均能促进Gelonin的穿膜及抑杀肿瘤细胞效应,其中Gelonin-HBP活性最强,对于HeLa、B16、MCF-7和HepG2四种肿瘤细胞比单独的Gelonin活性分别提升16.4倍、9.6倍、14.0倍和24.6倍;免疫印迹分析表明Gelonin-HBP诱导了肿瘤细胞Caspas 3、Caspas 8及Caspas 9的活性、Bax表达量显著增加,而Bcl-2的表达量显著降低.CPP促进了Gelonin对肿瘤细胞的抑杀和促凋亡作用,其中来源于人肝素结合表皮生长因子样生长因子的HBP连接Gelonin的抗肿瘤作用最强,其诱导肿瘤细胞凋亡的机制与线粒体和死亡受体介导的凋亡信号通路有关.

摘要： 目的 探究穿膜肽修饰的纳米颗粒介导的光动力学疗法(PDT)对胰腺癌SW1990细胞的杀伤作用.方法 将胰腺癌SW1990细胞分成4组,不光照不含光敏剂的细胞作为空白对照组,与细胞共孵育的游离Ce6组,NP/Ce6组及TAT-NP/Ce6组.首先分别制备出纳米颗粒TAT-NP/Ce6和NP/Ce6.利用流式细胞仪(FACS)检测各组被SW 1990细胞摄取的情况;荧光显微镜观察各组光照下在细胞内产生活性氧的情况;最后用MTT或活死染色法检测光照下各组对细胞的杀伤效果.结果 FACS结果显示各组分别被细胞摄取4h后,TAT-NP/Ce6组胞内荧光显著高于NP/Ce6组(P＜0.001),同时NP/Ce6组明显强于free Ce6组(P ＜0.001).荧光显微镜显示光照下纳米颗粒TAT-NP/Ce6组在细胞内产生活性氧明显强于其他各组(P ＜0.001).MTT法显示在每一Ce6浓度下光照时,TAT-NP/Ce6组对细胞的杀伤效果明显强于NP/Ce6 (P＜0.01),Ce6浓度为0.5μg/ml时,活死细胞染色法同样证明了对细胞的这种杀伤效果.结论 TAT肽修饰的纳米颗粒能有效增加胰腺癌细胞对其摄取,其介导的PDT杀伤胰腺癌细胞效果明显增强.%Objective To investigate the cytotoxic effects of cell penetrating peptide modified nanoparticle-mediated photodynamic therapy (PDT) on pancreatic cancer cells SW1990.Methods The pancreatic cancer cell line SW1990 were divided into four groups.SW1990 cells without photosensitizer and light-exposing as blank control group,free Ce6 group,NP/Ce6 group or TAT-NP/Ce6 group which incubation with cells,respectively.Cellular uptake of each group was examined by flow cytometry.Moreover,the generation of ROS in cells after laser irradiation was observed by fluorescence microscope.Methyl thiazolyl tetrazolium (MTT) or Live/Dead cellular staining were used for the detection of cytotoxic effect caused by nanoparticles or free Ce6 under laser irradiation.Results From the results of FACS,the cellular uptake of TAT-NP/Ce6 group significantly higher than NP/Ce6 group after incubation for 4 h (P ＜ 0.001),while the NP/Ce6 group was significantly stronger than the free Ce6 group (P ＜ 0.001).Fluorescence microscopy showed that the TAT-NP/Ce6 group was significantly stronger in the cells than in the other groups(P ＜ 0.001).MTT assay showed that the killing effect of TAT-NP/Ce6 group on cells was stronger than that of NP/Ce6 (P ＜ 0.01).At the Ce6 concentration of 0.5 μg/ml,the results of Live/Dead cellular staining showed similar cytotoxic effects with that of MTT.Conclusion TAT peptide-modified nanoparticles can effectively increase the uptake of pancreatic cancer cells,and the cytotoxic effect of PDT-induced pancreatic cancer cells.

摘要： 纳米材料在肿瘤领域的应用已经历了30多年的发展,极大促进了临床肿瘤的诊断和治疗效果.然而,传统纳米材料的肿瘤靶向依赖于EPR效应,造成了肿瘤靶向效率不足;为促进药物载体对肿瘤的递送效率,设计用穿膜肽修饰磁靶向银铁复合纳米载体,借助外部磁场的导向作用和穿膜肽对于药物载体的组织通过性,以协同实现肿瘤药物的高效递送;通过原位分步捕获的方法制备出银铁复合纳米粒,然后用穿膜肽对纳米粒进行进一步的后修饰;体内外实验考察药物载体对于肿瘤的递送效率;经穿膜肽修饰和磁场辅助的双功能纳米粒可有效地靶向小鼠肿瘤,肿瘤富集量可达给药量的6.7％,靶向效率显著高于报道的大多数药物载体.

摘要： 细胞穿膜肽(cell penetrating peptides)是一系列具有高效介导人胞能力的短肽.自从1988年第一条穿膜肽TAT的发现以来,研究者们或通过蛋白结构分析衍生,或通过构效关系研究合成不断地发现新的细胞穿膜肽,到现在已经有20多年的时间.将穿膜肽作为配体应用于增强各种载药系统胞内传递的研究也层出不穷;穿膜肽自身能够高效入胞,同时也能携带比自身分子量大得多的蛋白质以及纳米载体等高效入胞,具有良好的应用前景.

摘要： 碱性成纤维细胞生长因子(Basic fibroblast growth factor,bFGF)是成纤维细胞生长因子家族中的23个成员之一,具有较好创伤愈合和神经保护作用.本研究用基因工程的方法将穿膜肽TAT基因与重组人成纤维细胞因子(rhbFGF)基因进行融合,构建pET3c-TAT-rhbFGF重组质粒,将其转入大肠杆菌BL21(DE3)pLsS菌株.IPTG诱导表达后,融合蛋白经SDS-PAGE及Western blot鉴定为高效可溶性表达.经过离子交换和亲和层析两步纯化后,获得了纯度高于95％的融合蛋白,NIH 3T3细胞增殖实验表明,TAT-rhbFGF融合蛋白具有较好的生物学活性。

摘要： 目的:探讨微泡联合穿膜肽促基因转染效率和安全性,并探讨HGF基因治疗急性心肌梗塞的可行性,期望为缺血性心脏病提供一种新的基因治疗策略.rn 方法:人脐静脉内皮细胞(HUVEC)和40只心肌梗死模型SD大鼠作为实验对象,随机分为5组,即①空白对照组(C),②超声+空白微泡组(US+MB),③超声+载穿膜肽微泡组(US+MBTAT),④超声+载基因微泡组(US+ MBHGF),⑤超声+载基因及穿膜肽微泡组(US+MBHGF+TAT).荧光显微镜及流式细胞仪检测HGF基因在细胞内的表达及转染效率.MTT法检测该方法对HUVEC生长活性的影响.激光共聚焦显微镜观察HGF基因在大鼠心肌内的表达情况.偏振光显微镜观察Ⅰ型、Ⅲ型胶原在大鼠梗死心肌周边区的分布情况.免疫组织化学法(IHC)检测梗死心肌周边区CD34的表达,并在显微镜下计数心肌内新生微血管密度(MVD).RT-PCR及Western Blot检测HGF的mRNA及蛋白的表达.rn 结果:体外实验,US+MBHGF+TAT组的绿色荧光强度及转染率均高于其它各组,并对细胞活性无明显影响.体内实验,US+MBHGF+TAT组的绿色荧光强度高于其它各组,Ⅰ型、Ⅲ型胶原明显少于其它各组,HGF mRNA及HGF蛋白的表达均高于各组,IHC结果显示新生的微血管被染成棕黄色,US+MBHGF+TAT组的MVD最高,与其它各组比较差异均有统计学意义(P＜0.05).rn 结论:超声微泡联合穿膜肽可能为缺血性心脏病的基因治疗提供一种安全、有效的的基因转移途径.

摘要： 穿膜肽的发现在分子传输方面开启了一个崭新的领域.穿膜肽中的碱性氨基酸残基在其跨膜及代谢过程中起着重要的作用.因此研究含碱性氨基酸残基的穿膜肽的解离机理具有重要的科学实践意义.本文在电喷雾电离串联质谱(ESI MS/MS)的条件下研究了穿膜肽Transportan10的气相碰撞诱导解离(CID)过程,确定了其不同质子化母体离子的断裂位点,并设计其衍生物链来探究碱性氨基酸残基赖氨酸对其解离的影响.此外,还采用动力学模拟等理论计算方法对实验结果进行了验证.

摘要： 利用穿膜肽Tat PTD的穿膜作用和内皮抑素(Endostatin)的抑制新生血管生成的作用,将二者通过基因工程的手段融合在一起,以期获得能够穿透眼球屏障的内皮抑素,达到通过简单的局部滴眼给药预防视网膜或脉络膜血管增生的目标。指出，采用大肠杆菌表达复性纯化的Tat PTD-Es具有较好的抑制内皮细胞增殖及CAM新生血管生成的作用,入胞能力也较Es有较大的提高,经局部滴眼给药后能够穿透眼球屏障,并能够抑制CNV新生血管的生成,达到了预期目的,Tat PTD-Endostatin在治疗眼底新生血管疾病时给药方式方便,疗效显著,是有开发前途的新型融合蛋白。

摘要： 目的:制备穿膜肽与P-选择素抗体修饰的载基因超声造影剂，并在体外评价其靶向结合能力及转染缺氧损伤型人脐静脉内皮细胞(HUVEC)的可行性。方法:采用机械振荡法制备载基因及穿膜肽超声造影剂，用碳二亚胺法制备P-选择素靶向超声造影剂，通过免疫荧光法检测其与抗体的连接情况。制备人脐静脉内皮细胞(HUVEC)缺氧模型，光镜及流式细胞仪检测该靶向超声造影剂与缺氧HUVEC的结合情况。结论:成功制备了穿膜肤与P-选择素抗体修饰的载基因超声造影剂，其具有较强的靶向结合缺氧损伤型HUVEC的能力，并能促进绿色荧光蛋白的转染。

摘要： 文章旨在制备穿膜肽与P-选择索抗体修饰的载基因超声造影剂,并在体外评价其靶向结合能力及转染缺氧损伤型人脐静脉内皮细胞(HUVEC)的可行性.采用机械振荡法制备载基因及穿膜肽超声造影剂,激光共聚焦显微镜观察质粒DNA和穿膜肽的分布,并用碳二亚胺法制备P-选择素靶向超声造影剂,通过免疫荧光法检测其与抗体的连接情况.制备人脐静脉内皮细胞(HUVEC)缺氧模型,光镜及流式细胞仪检测该靶向超声造影剂与缺氧HUVEC的结合情况.缺氧HUVEC分为靶向和非靶向组进行转染实验,荧光显微镜观察绿色荧光蛋白的表达情况,流式细胞仪检测转染率.实验成功制备了穿膜肽与P-选择素抗体修饰的载基因超声造影剂，其具有较强的靶向结合缺氧损伤型HUVEC的能力，并能促进绿色荧光蛋白的转染。

摘要： 目的：研究自制的脂质超声造影剂载基因及穿膜肽的能力，评价其物理性质及显影效果。rn 方法：采用机械振荡法制备载基因及穿膜肽的脂质超声造影剂，检测微泡形态、分布、浓度、粒径、表面电位及载基因和穿膜肽的能力，并观察其对正常兔心脏的显影效果。rn 结果：自制载基因及穿膜肽脂质超声微泡造影剂的平均粒径为(2.17±0.76)μm，浓度为(3.07±0.41)×109/ml，表面电位为(1.95±0.46)mv。该造影剂中基因的包封率为32％，穿膜肽的包封率为35％。体内造影显示该造影剂能够有效增强心肌显影。rn 结论：自制载基因及穿膜肽脂质超声造影剂符合理想超声造影剂的要求，载基因及穿膜肽的效率高，可作为携带基因等生物活性物质的载体材料，为超声靶向微泡破裂基因释放技术的发展开辟新思路。

摘要： 随着对生命现象及疾病本质的深入研究,人类已经认识到绝大多数疾病只有在分子水平诊断治疗,才能达到真正意义上的"治愈",但是其中面临的一个主要问题是许多有"诱人的前景"的生物活性大分子由于细胞膜天然屏蔽的限制作用无法进入细胞内发挥它们作用,此外像DNA等大分子通过胞吞作用进入细胞,在内涵体内运输,最终在溶酶体内被溶酶体酶降解.目前使用的显微注射法或电穿孔法这样的方法用于传递无生物膜穿透性的分子,在本质上是有细胞创伤性的,可能损伤甚至破坏细胞膜。而非侵袭性的方法包括使用对Ph敏感的脂质体,则要求低酸环境下在内涵体的膜失去稳定性从而释放内嵌的药物进入胞质,对于人体生理环境中药物作用的研究具有一定局限性.传递这些分子的最新方法是把它们结合细胞膜穿透肽上,携带分子传递到细胞内.本文就以穿膜肽为载体的分子治疗和分子影像研究进展作一综述,以提高对穿膜肽在分子水平成像及治疗价值的深入认识.

摘要： 本发明涉及一种穿膜肽改性葡聚糖及葡聚糖‑穿膜肽高分子脂质体及其制备方法，通过化学合成方法，使葡聚糖与穿膜肽反应，形成葡聚糖‑穿膜肽双亲性高分子，后经过乳化溶剂蒸发法自组装形成葡聚糖‑穿膜肽高分子脂质体。所制得的穿膜肽改性葡聚糖，为葡聚糖的修饰提供了一种新的方法。所制得的葡聚糖‑穿膜肽高分子脂质体，具有良好的可修饰性，分散性和稳定性较好，粒径均匀，生物相容性好，有效粒径在90‑150nm。

摘要： 本发明涉及皮肤抗老化和美容护肤保健及日用化妆品等领域，是一种可透皮吸收的穿膜肽‑乙酰基六胜肽纳米乳及其制备方法。先设计并人工合成穿膜肽‑乙酰基六胜肽再制备其纳米乳。发明采用纳米乳和穿膜肽修饰技术协同效应以提高乙酰基六胜肽经皮渗透能力和透皮吸收效果，从而减少该肽降解，维持肽分子结构稳定和生物活性，提高以该肽作为美容目的药物或功效成分的溶解性和有效性。穿膜肽修饰乙酰基六胜肽纳米乳，降低易致皮肤刺激和过敏的S/C可提高应用安全性和舒适性性，且产品制备均在常温进行，无需加热及提供能量，无需特殊设备即可大量生产，既利于产业化，又利于环境保护和节省能源。

摘要： 本发明涉及一种TCS‑穿膜肽‑肿瘤蛋白酶底物肽融合蛋白及其制备方法。本发明还提供了一种TCS‑穿膜肽‑肿瘤蛋白酶底物肽融合蛋白‑乳铁蛋白连接物及其制备方法。本发明还涉及所述连接物在制备治疗肿瘤的药物中的用途。本发明所述TCS‑穿膜肽‑肿瘤蛋白酶底物肽融合蛋白能够提高天花粉蛋白对肿瘤细胞的细胞毒性，用于恶性肿瘤治疗。本发明所述连接物能够实现跨越血脑屏障，并在脑部肿瘤内蓄积，通过肿瘤细胞高表达基质金属蛋白酶响应性选择性地杀伤基质金属蛋白酶‑2高表达的肿瘤细胞，从而抑制肿瘤的生长，延长生存期。

摘要： 本发明属于抗菌肽领域，公开一种基于细胞穿膜肽Tat(49‑57)的抗菌肽及其合成方法。该抗菌肽为Tat(YG)、Tat(YY)、Tat(FG)或Tat(FF)，肽链序列依次如SEQ ID No.2‑5所示。以Wang树脂为载体，Fmoc为氨基酸侧链保护基，哌啶的DMF溶液为脱保护试剂，HBTU、HOBT、DIEA为氨基酸缩合剂，采用固相合成法合成。这四种衍生抗菌肽对大肠杆菌、鼠伤寒沙门菌、枯草杆菌、金黄色葡萄球菌具有较好的抑制效率，部分菌的抑制率甚至显著高于细胞穿膜肽Tat(49‑57)；并且，这四种衍生抗菌肽的溶血性都很小，在发挥抑菌活性时的浓度均未达到最低溶血浓度。

摘要： 本发明属于抗菌肽领域，公开一种基于细胞穿膜肽Tat(49‑57)的抗菌肽在抑制细菌方面的应用。该抗菌肽为Tat(YG)、Tat(YY)、Tat(FG)或Tat(FF)，肽链序列依次如SEQ ID No.2‑5所示。这四种衍生抗菌肽对大肠杆菌、鼠伤寒沙门菌、枯草杆菌、金黄色葡萄球菌具有较好的抑制效率，部分菌的抑制率甚至显著高于细胞穿膜肽Tat(49‑57)；并且，这四种衍生抗菌肽的溶血性都很小，在发挥抑菌活性时的浓度均未达到最低溶血浓度。

摘要： 本发明公开了一种RGD肽与穿膜肽R8共修饰麦角甾醇联合顺铂主动载药脂质体，由麦角甾醇联合顺铂主动载药脂质体、RGD环肽及穿膜肽R8在水浴中孵育后制备而得；所述麦角甾醇联合顺铂主动载药脂质体，由麦角甾醇脂质体、顺铂溶液为原料制成；所述麦角甾醇脂质体由麦角甾醇8‑15wt％和脂质体85‑92％制成，所述脂质体由卵磷脂与胆固醇组成。本发明采用麦角甾醇部分代替顺铂发挥功效，在保证抗肺癌效果的同时，显著降低药物的毒副作用，对人体的伤害小，同时具有RGD肽与穿膜肽R8作为靶头，靶向性好，药物发挥效果好。

摘要： 本发明公开了一种RGD肽与穿膜肽R8共修饰麦角甾醇联合顺铂主动载药脂质体的制备方法，主要过程为：麦角甾醇脂质体制备及氯化铵梯度形成、载药、共修饰。本发明工艺简单易行，药物的包封率高，采用麦角甾醇部分代替顺铂发挥功效，所得麦角甾醇联合顺铂主动载药脂质体在保证抗肺癌效果的同时，能显著降低药物的毒副作用，对人体的伤害小，同时具有RGD肽与穿膜肽R8作为靶头，靶向性好，药物发挥效果好。

摘要： 本发明涉及一种穿膜肽改性葡聚糖及葡聚糖‑穿膜肽高分子脂质体及其制备方法，通过化学合成方法，使葡聚糖与穿膜肽反应，形成葡聚糖‑穿膜肽双亲性高分子，后经过乳化溶剂蒸发法自组装形成葡聚糖‑穿膜肽高分子脂质体。所制得的穿膜肽改性葡聚糖，为葡聚糖的修饰提供了一种新的方法。所制得的葡聚糖‑穿膜肽高分子脂质体，具有良好的可修饰性，分散性和稳定性较好，粒径均匀，生物相容性好，有效粒径在90‑150nm。

摘要： 本发明涉及一种TCS‑穿膜肽‑肿瘤蛋白酶底物肽融合蛋白及其制备方法。本发明还提供了一种TCS‑穿膜肽‑肿瘤蛋白酶底物肽融合蛋白‑乳铁蛋白连接物及其制备方法。本发明还涉及所述连接物在制备治疗肿瘤的药物中的用途。本发明所述TCS‑穿膜肽‑肿瘤蛋白酶底物肽融合蛋白能够提高天花粉蛋白对肿瘤细胞的细胞毒性，用于恶性肿瘤治疗。本发明所述连接物能够实现跨越血脑屏障，并在脑部肿瘤内蓄积，通过肿瘤细胞高表达基质金属蛋白酶响应性选择性地杀伤基质金属蛋白酶‑2高表达的肿瘤细胞，从而抑制肿瘤的生长，延长生存期。

摘要： 本发明涉及皮肤抗老化和美容护肤保健及日用化妆品等领域，是一种可透皮吸收的穿膜肽‑乙酰基六胜肽纳米乳及其制备方法。先设计并人工合成穿膜肽‑乙酰基六胜肽再制备其纳米乳。发明采用纳米乳和穿膜肽修饰技术协同效应以提高乙酰基六胜肽经皮渗透能力和透皮吸收效果，从而减少该肽降解，维持肽分子结构稳定和生物活性，提高以该肽作为美容目的药物或功效成分的溶解性和有效性。穿膜肽修饰乙酰基六胜肽纳米乳，降低易致皮肤刺激和过敏的S/C可提高应用安全性和舒适性性，且产品制备均在常温进行，无需加热及提供能量，无需特殊设备即可大量生产，既利于产业化，又利于环境保护和节省能源。