蜂毒肽

摘要： 炎症是机体对外来刺激的一种自我防御反应,其起因包括外伤、感染以及影响体内稳态的污染物等,通常情况下是对人体有益的,但慢性炎症会导致风湿性关节炎、心血管疾病、炎性肠病、哮喘和中枢神经系统等相关疾病[1]。蜂毒肽(Mel)是蜂毒的主要成分,占其干重的40%~60%,由26个氨基酸残基组成(NH_(2)GIGAVLKVLTTGLPALISWIKRKRQQ-CONH_(2)),分子式为C_(131)H_(228)N_(38)O_(32),其中极性和非极性氨基酸残基分布不均匀,在折叠成α-螺旋构型时产生蜂毒肽的两亲结构[2]。研究发现,高剂量蜂毒肽会引起瘙痒、发炎和局部疼痛等症状,而小剂量时则具有广泛的抗炎作用[3]。本文主要介绍蜂毒肽在抗炎中的应用以及存在的不良反应和目前的解决办法,以期为后续的研究提供理论依据和科学基础。

摘要： 癌症仍然是威胁人类生命安全最可怕的疾病之一,预计2040年全球新发癌症将比2020年增加47%[1]。目前针对癌症的治疗手段,在一些早中期阶段的癌症中有所建树,对于伴有转移或复发阶段的癌症疗效欠佳[2]。在广泛的研究中,蜂毒[3]在多种恶性肿瘤中显示出抑癌作用,蜂毒肽是蜂毒的主要活性成分和抗肿瘤成分[4]。本文就蜂毒肽的抗肿瘤作用机制进行综述,并重点阐述蜂毒肽联合放、化疗及靶向治疗的优势和临床应用中面临的挑战和前景。

摘要： 通过圆二色光谱、紫外光谱、荧光光谱以及等温滴定量热等技术研究了蜂毒肽(Mel)与小牛胸腺DNA(CT⁃DNA)之间的相互作用以及构象变化。结果表明Mel可以与CT⁃DNA形成复合物。复合物的形成使得Mel的构象发生变化,由无规卷曲转变为α⁃helix,Mel中色氨酸残基处于更加疏水的环境。同时,CT⁃DNA的结构发生变化,解链温度(T_(m))从64.3°C增加到66.2°C。Mel与CT⁃DNA的结合常数(K_(a))约为10^(5) L·mol^(-1),复合物的形成是吸热的过程,主要依靠静电作用,其次是疏水作用。

摘要： 蜂毒含有多种化学成分,具有丰富的药理活性。临床常用于风湿类疾病、周围神经炎及神经痛等疾病的治疗,而蜂毒治疗病毒性疾病也有显著疗效。该文总结蜂毒治疗急性病毒性呼吸道感染、艾滋病、病毒性肝炎、带状疱疹感染等研究进展,为扩大蜂毒的临床应用提供参考。

摘要： 炎症是一种普遍现象,由先天性和获得性免疫系统触发,以维持体内稳态。这种现象通常会起到限制感染和修复损伤的作用,但是如果没有适当地分阶段进行,炎症可能会导致免疫功能异常。蜂毒是蜜蜂用来防护的毒素,数百年来,它已在东方用作抗炎药,用于治疗慢性炎性疾病。目前,越来越多的学者致力于蜂毒的主要成分蜂毒肽抗炎作用的研究,为其临床应用提供了一定的理论依据,为炎症性疾病的治疗提供了新的选择。

摘要： 目的探讨蜂毒肽对非小细胞肺癌转化生长因子β(TGF-β)/SMAD信号通路的调控作用及对TGF-β1诱导的上皮-间质转化(EMT)进程的影响。方法通过外源性TGF-β1刺激构建非小细胞肺癌A549细胞EMT模型,将细胞分为对照组、TGF-β1组(加入2μg/L TGF-β1)、蜂毒肽组(加入2.5 mg/L蜂毒肽)、蜂毒肽+TGF-β1组(加入2μg/L TGF-β1和2.5 mg/L蜂毒肽)。采用免疫印迹及逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)实验检测各组细胞EMT标志蛋白钙黏附蛋白E、N-钙黏蛋白、波形蛋白及mRNA表达情况;同时检测各组细胞中Smad2、p-Smad2蛋白表达情况,分析蜂毒肽对非小细胞肺癌TGF-β/SMAD信号通路的影响。采用免疫荧光实验检测对照组及蜂毒肽组细胞中TGF-βⅠ受体及TGF-βⅡ受体表达情况,同时采用Transwell实验检测两组细胞迁移、侵袭能力。结果①与对照组相比,TGF-β1组钙黏附蛋白E mRNA及蛋白表达水平明显降低,N-钙黏蛋白mRNA及蛋白与波形蛋白mRNA及蛋白表达水平明显升高(均P0.05),蜂毒肽组中TGF-βⅡ受体含量明显少于对照组。③Transwell实验结果显示,TGF-β1组细胞迁移、侵袭能力明显优于对照组,蜂毒肽+TGF-β1组细胞迁移、侵袭能力明显劣于TGF-β1组细胞(均P<0.05)。结论蜂毒肽可通过抑制TGF-β/SMAD信号通路抑制Smad2磷酸化,下调TGF-βⅡ受体分布,从而抑制肿瘤细胞的侵袭、迁移,抑制TGF-β1诱导的肺癌细胞EMT进程。

摘要： 目的 探究蜂毒肽通过线粒体凋亡途径促进皮肤鳞状细胞癌A431细胞株对5-氟尿嘧啶(5-FU)敏感性机制。方法 筛选蜂毒肽作用于A431细胞株的半数抑制浓度(IC50),并用于后续干预浓度。将A431细胞随机分为对照组(不干预)、蜂毒肽组(0.5μmol/L蜂毒肽)、5-FU组(0.25μmol/L 5-FU)和联合组(0.5μmol/L蜂毒肽+0.25μmol/L 5-FU)。检测各组A431细胞在24、48、72 h细胞活性、72 h细胞周期占比,以及细胞凋亡率及细胞线粒体凋亡蛋白(Smac)、活化半胱氨酸蛋白酶-3(cleaved Caspase-3)、细胞色素C(Cyt C)、促凋亡蛋白(Bax)的蛋白表达量。采用裸鼠荷瘤实验观察各组细胞的肿瘤生长抑制率。结果 与对照组相比,不同时间点下蜂毒肽组、5-FU组、联合组的细胞存活率降低(P<0.05);与蜂毒肽组和5-FU组相比,不同时间点下联合组的细胞存活率降低(P<0.05)。与对照组比较,蜂毒肽组、5-FU组、联合组的细胞凋亡率、G0/G1期细胞比例、Smac、cleaved Caspase-3、Cyt C、Bax蛋白表达增加(P<0.05);与蜂毒肽组和5-FU组相比,联合组的细胞凋亡率、G0/G1期细胞比例、Smac、cleaved Caspase-3、Cyt C、Bax蛋白表达增加(P<0.05)。与对照组比较,蜂毒肽组、5-FU组、联合组的S期与G2/M期细胞比例降低(P<0.05);与蜂毒肽组和5-FU组比较,联合组的S期与G2/M期细胞比例降低(P<0.05)。与蜂毒肽组和5-FU组比较,联合组肿瘤生长第30天的肿瘤生长抑制率升高(P<0.05)。结论 蜂毒肽可增强人皮肤鳞状细胞癌A431细胞对5-FU的敏感性,蜂毒肽和5-FU联合使用可将A431细胞周期有效阻滞在G0/G1期,促进细胞凋亡,抑制细胞增殖,其机制可能与激活线粒体凋亡途径有关。

摘要： 蜂毒肽是从蜂毒中分离纯化出的一种多肽物质,占蜂毒干重的50％以上,是蜂毒发挥药理活性的主要物质.准确定量蜂毒衍生产品中蜂毒肽的含量对保证产品功效具有重要的现实意义.本文基于超高效液相色谱-高分辨质谱结合同位素内标法开发了蜂毒衍生品中蜂毒肽的准确定量分析方法,并开展了系统的方法学验证.样本经胰蛋白酶酶切后,过固相萃取小柱净化,然后经C18色谱分离,在ESI正离子模式下采用平行反应检测(PRM)进行检测分析.蜂毒肽的母离子为m/z 756.46343([M+2H]2+,VLTTGLPALISWIK),定量离子为m/z 927.56409;同位素肽段母离子为m/z 761.47835([M+2H]2+VLTTGLPALISWIKb),定量离子为m/z 935.604.该方法对蜂毒肽的检出限(LOD)和定量限(LOQ)分别为1.0μg/kg和3.0μg/kg,线性范围是3.0～500.0μg/kg,在低、中、高3个浓度的添加回收率范围为89.45％～113.23％,日内与日间变异系数均<11.33％.结果表明,该方法的灵敏度、准确性与精密度显著优于未酶切直接检测蜂毒肽的定量方法,可作为蜂毒肽衍生品中蜂毒肽含量的测定方法.

摘要： 开发蜂毒中蜂毒肽的纯化工艺,以获得高纯度的蜂毒肽.采用离心、超滤等方式对粗蜂毒进行预处理,结合制备液相色谱技术,以聚苯乙烯微球为填料,对填料的型号、流动相、上样量进行考察.实验结果表明,以聚合物微球Ps20-300为填料,以含0.1％三氟乙酸的乙腈/水为流动相进行洗脱,当上样量为1.2％时,蜂毒肽的分离纯化效果较好.对优化的色谱条件进行放大制备,蜂毒肽纯度可达99.2％,纯化收率为58.9％.

摘要： 近年来,单分子追踪技术的出现和发展为研究细胞膜界面生物学过程提供了一条新的途径,然而细胞膜内生物分子运动的异质性特征使得从大量分子轨迹中区分和分离不同的分子运动模式变得非常困难,迫切需要发展简单易行的分析方法.本文以蜂毒肽和单组分平板支撑脂膜的相互作用体系为例,发展了一种利用单分子运动位移标准差的频数分布来区分和分离不同运动模式脂分子的数据分析方法,提供了比传统基于位移或回旋半径频数分布的分析方法更高的准确度和更多的定量信息.利用该方法成功分离得到了脂分子在平板膜内的快慢两种运动状态,并发现其分布情况部分相符于脂分子在上下叶的位置分布;在不同浓度蜂毒肽的表面吸附或跨膜成孔作用的影响下,这两部分脂分子的运动受到了不同的干扰.本文针对生物膜体系内分子运动的复杂异质性特征发展了一种实现分子运动模式分离的数据分析方法,并利用此方法获得了蜂毒肽破膜成孔的不同阶段对脂膜上下叶的不同影响.该方法的开发将对利用单分子追踪技术研究生物体系动力学过程有重要帮助.

摘要： 目的：观察蜂毒肽MP-1对内毒素(LPS)活化大鼠腹腔巨噬细胞(PMΦ)的影响并探讨其作用机制.rn 方法：应用生物传感器检测MP-1对类脂A(lipid A)和LPS的亲合力,动态比浊法鲎试验检测MP-1对LPS(2μg/L)的中和作用,实时荧光定量反转录聚合酶链反应(real-time RT-PCR)检测MP-1对LPS(100μg/L)刺激的PMΦ TLR4、TNF-α和IL-6 mRNA表达的影响,ELISA 法检测MP-1对LPS活化PMΦ的影响,MTT法检测MP-1对PMΦ活力的影响.rn 结果：MP-1具有一定的结合lipid A、LPS及中和LPS的作用,并对LPS刺激的PMΦ的TLR4 mRNA的表达有抑制作用,对TNF-α和IL-6的基因及蛋白表达有抑制作用(P＜0.05或P＜0.01),该作用具有一定的剂量效应关系.MP-1在体外实验浓度对细胞活力无影响(P＞0.05).rn 结论：MP-1可能通过结合LPS活性中心lipid A达到中和LPS作用,抑制内毒素受体TLR4的表达,从而抑制了LPS介导的细胞活化.

摘要： [研究目的]探索蜂毒肽抗HSV-1病毒作用的机理。[方法]体外实验测定蜂毒肽对HSV-1病毒的杀死作用，病毒吸附、合成和释放的抑制作用，考察蜂毒肽对p21 WAF1/CIP1和p53蛋白表达的调节作用。[结果]蜂毒肽没有直接杀死HSV-1病毒的作用，但是对HSV-1病毒的吸附、合成和释放均有明显的抑制作用，蜂毒肽调节可p21 WAF1/CIP1和p53蛋白表达，调节细胞周期，保护细胞DNA免受HSV-一1的损伤。

摘要： 蜂毒肽也称蜂毒溶血肽和蜂毒素,是蜂毒的主要成分之一,占蜂毒干重的50％,强碱性(pH=10),溶于水[1].蜂毒起药理作用和生物学活性的重要组分.蜂毒肽潜在的临床应用价值引起了极大关注[3].

摘要： 【目的】通过对蜂毒肽和神蜂精体外抗HSV-1病毒作用的研究，为蜂毒的开发和神蜂精的应用提供参考。【方法】通过VERO细胞培养法，采用观察细胞病变(CPE)和噻唑蓝(MTT)比色法检测细胞活性，观察蜂毒肽和神蜂精抗HSV-1病毒感染的作用。【结论】蜂毒肽和神蜂精都具有良好的抗HSV-1病毒作用，为蜂毒的开发和神蜂精的应用提供了依据。

摘要： 为实现外源抗菌多肽基因在鸡输卵管中的表达，抑制病原菌通过母鸡垂直传播给子代，本文克隆了鸡卵清蛋白(Ovalbumin,ov)5端的调控序列1.1kb，将之取代载体pVAX1的CMV启动子，并将蜂毒肽基因(melittin，MLT)插入其下游，构建了输卵管定位表达抗菌多肽重组载体poV1.1-MLT，将该重组质粒转染CHO细胞和导入鸡体内，皆成功检测到目的蛋白的表达，并显示出抗菌活性，实现了输卵管定位表达抗菌多肽基因。

摘要： 通过对各试验组受照射小鼠的SCGE试验发现,注射蜂毒肽的试验组骨髓细胞彗星细胞率明显高于未加入蜂毒肽的空白试验组,蜂毒肽使骨髓细胞彗星细胞率分别降低32.5﹪,57.6﹪,44.81﹪。没有注射蜂毒肽的空白对照组小鼠的骨髓细胞的彗尾长度明显高于其他实验组,注射蜂毒肽的小鼠骨髓细胞的彗尾长度比空白分别降低34.2﹪,40.3﹪,37.2﹪。证明了蜂毒肽可以有效的保护受照射小鼠的骨髓细胞DNA,减少DNA的辐射损伤。

摘要： 本文对蜂毒肽类似物的抗菌活性和溶血活性进行了研究.结果表明,几乎所有取代位置上的疏水性的增大使抗菌活性增加,影响较大和较小的位置正好处于多肽的螺旋轮投影图的相反的两侧,表明抗菌肽的疏水性和其方向性而非两亲性是抗菌活性的关键因素.相反,α-螺旋结构的一侧的疏水性对溶血是有利的,而另一侧是不利的,表明两亲性对溶血活性是重要的.更有趣的发现是,疏水性对抗菌活性有利的一侧与对溶血活性有利的一侧正好处于相反的方向.

摘要： 本文论述了测试蜂毒肽16以及类似物对人血红细胞的溶解能力和抑制金黄色葡萄球菌、绿脓杆菌的能力,分析了多肽结构与生物活性之间的关系,得到了去除溶血活性而抗菌活性几乎完全保留的多肽序列.

摘要： 蜂毒肽(melittin)是一种碱性蛋白质,具有多种复杂的药理学作用,其作为蜂毒的主要活性成分,约占蜂毒干重的50％以上.蜂毒肽分子结构较为独特,具有潜在膜活性,其寡聚体可在细胞膜上形成亲水性小孔,促使胞内离子外流,改变渗透压,进而导致细胞组织溶解,如可引起红细胞溶血,促使肥大细胞释放组胺,进而发挥抗炎、抗病毒等作用.近年来,蜂毒肽因其独特的药理作用,在抗肿瘤领域逐渐引起国内外学者的广泛关注,因此本研究初步从细胞水平,对蜂毒肽的抗肺癌作用和特点进行了探索.

摘要： 本发明提供了一种蜂毒肽制剂，具体地说是一种蜂毒肽腔内涂液，其含有提纯后的蜂毒肽和生物可相容聚合物。本发明还提供了新的蜂毒肽的提纯方法，该方法提纯的蜂毒肽纯度高，起效快，过敏发生率低且稳定易储存。本发明还提供了蜂毒肽的新的治疗子宫内膜症的用途和新的制药用途。

摘要： 本发明公开了一种蜂毒肽的应用，涉及生物科学和药物载体技术领域，蜂毒肽用于制备治疗过敏性皮肤疾病的药剂。本发明还公开了一种运载蜂毒肽的纳米颗粒的应用，运载蜂毒肽的纳米颗粒由运载蜂毒肽的多肽和磷脂、胆固醇脂组成，其用于制备治疗过敏性皮肤疾病的药剂，可以通过皮肤淋巴系统，蓄积在致敏过的皮肤引流淋巴结，并在其中发挥抑制抗原特异性T细胞增殖和降低过度免疫反应的功效，且毒副作用低。

摘要： 本发明公开了一种运载蜂毒肽的多肽、运载蜂毒肽的纳米颗粒及其应用，属于生物科学和药物载体领域。所述肽是由α螺旋多肽、连接序列和蜂毒肽以共价键的形式串连而成；所述纳米颗粒由运载蜂毒肽的多肽、磷脂、胆固醇脂三种有机结合的方式组成。用运载蜂毒肽的多肽制备得到的纳米颗粒能够有效降低蜂毒肽对于机体的毒副作用，特异性地在肿瘤等疾变区域发挥作用，可以应用于临床治疗。

摘要： 本发明公开了一种蜂毒肽‑蜂毒明肽组合物在制备抗抑郁药物中的应用，属于中药技术领域。本发明采用脂多糖刺激建立小鼠急性抑郁模型，通过行为学、免疫荧光、ELISA及Western blot等实验评价了蜂毒肽‑蜂毒明肽组合物对抑郁模型小鼠的影响。结果表明，相比于单用蜂毒肽或者蜂毒明肽，蜂毒肽‑蜂毒明肽组合物具有协同增效作用，能够显著改善脂多糖诱导的小鼠抑郁样行为及病理特征。结果提示，本发明的蜂毒肽‑蜂毒明肽组合物可以用于制备抗抑郁药物。

摘要： 本发明公开了一种基于蜂毒肽的脂肽及其制备方法和应用，属于生物医药领域。该脂肽是在蜂毒肽的N端偶联C10～18的脂肪酸，C端经过酰胺化修饰得到的。实验表明，相较其母体蜂毒肽，本发明的脂肽对革兰氏阳性菌和阴性菌均具有更好的抑制作用，且具有更低的溶血性。在体外稳定性试验中，脂肽在胃蛋白酶、胰蛋白酶以及血清中表现出更好的稳定性，是极具应用价值的脂肽，可用于制备新型抗细菌感染的药物等，具有十分广阔的应用前景。

摘要： 本发明涉及由蜂毒肽与抗癌剂结合而成的蜂毒肽‑抗癌剂偶联物以及通过连接蜂毒肽及抗癌剂来制备蜂毒肽‑抗癌剂偶联物的方法。本发明的偶联物作为靶向M2型肿瘤相关TAM的抗癌物质，具有选择性筛选M2型肿瘤相关TAM的优秀的效果，因此，今后将会适用为靶向M2型肿瘤相关巨噬细胞的药物传递用途。

摘要： 本发明公开了一种金‑蜂毒肽纳米杂化物及其应用，涉及该纳米杂化物制备方法，包括：将蜂毒肽溶于包含NH2‑PEG‑SH、乙醇、水的混合溶液中，然后加热搅拌依次加入HEPES和HAuCl4·XH2O反应至溶液由黄色泛白，得到Au‑肽前体；将HEPES、HAuCl4·XH2O、水混合加热搅拌至溶液变成紫红色，得到纳米金溶液；将所述Au‑肽前体与纳米金溶液混合加热搅拌，缓慢滴加聚丙烯胺盐酸盐反应5～10min后，得到所述金‑蜂毒肽纳米杂化物。本发明制得的金‑蜂毒肽纳米杂化物具有稳定性好、安全性高、良好的生物相容性等特点，在促进伤口愈合、抑制炎症、消除/减少皮肤褶皱等方面表现出优异的效果。

摘要： 本发明提供了一种构象锁定蜂毒肽Mastoparan衍生物或其药学上可接受的盐，具有以下所示的结构式或其结构类似物：X来源于蜂毒肽MP中的一个氨基酸，所述的蜂毒肽MP序列为INLKALAALAKKIL，三个X为所述的蜂毒肽MP中连续的序列。本发明还提供了一种具有PD‑L1靶向性和肿瘤微环境响应型的构象锁定蜂毒肽MP衍生物‑PEG偶联物的制备及其溶瘤免疫治疗应用方法，本发明的“多功能一体化”多肽‑PEG偶联物不仅能直接裂解结直肠癌细胞CT26，而且与免疫检查点PD‑L1的靶向肽协同，激活机体免疫系统发挥抗肿瘤免疫作用。

摘要： 本发明涉及蜂毒精制的领域，具体公开了一种复合蜂毒肽组合物及其制备方法及其应用，复合蜂毒肽组合物由以下质量分数的组分制得：蜂毒0.02～0.1%、蜂皇浆5～20%、蜂花粉3～10%、蜂蜜10～30%、甘草提取物5～20%、食用油20～75%。本申请的复合蜂毒肽组合物具有无毒无刺激，且抗菌、消炎、镇痛，同时具备牙齿美白和去除口臭功效的优点。

摘要： 本发明公开了一种蜂毒肽及其分离纯化方法，涉及生物技术领域。其包括：将待分离纯化的蜂毒粗提液进行第一次反相C18半制备柱分离，采用甲酸水溶液和乙腈作为流动相进行梯度洗脱，收集洗脱液，然后将洗脱液冻干后复溶，复溶液用于二次反相C18半制备柱分离，二次反相C18半制备柱分离是采用三氟乙酸水溶液和甲醇作为流动相进行等度洗脱。该方法无需特定的pH环境下结合超滤工艺除杂即可达到分离纯度高、目标物质损失少、有机溶剂用量少的技术效果，具有环境友好、装置简单、工艺操作简便和适合工业化生产的技术优势。