转染

摘要： 背景:研究表明,过氧化物酶体增殖物激活受体γ共激活因子1β(peroxisome proliferator-activated receptor gamma coactivator 1beta,PGC-1β)通过PI3K/AKT/mTOR信号通路影响乳腺癌细胞的增殖、迁移及凋亡。而PGC-1β能否通过PI3K/AKT/mTOR信号通路影响乳腺癌干细胞的干性及其影响机制还不清楚。目的:探究PGC-1β对乳腺癌干细胞干性的影响及调控机制。方法:将PGC-1β空载体、过表达载体(Lv-PGC-1β)、干扰载体(Sh-PGC-1β)分别转染乳腺肿瘤MCF-7细胞,荧光显微镜观察转染效果;qRTPCR及Western blot验证慢病毒转染后PGC-1βmRNA和蛋白的相对表达。在干性培养基中分别培养未转染组、PGC-1β空载体组、PGC-1β过表达组及PGC-1β干扰组的MCF-7细胞使其成为乳腺癌干细胞,显微镜下观察并记录干细胞球体的形成过程,Western blot验证干性标志物(ABCG2、ALDH1、OCT4)、上皮-间充质转化标记物(E-Cadherin、N-Cadherin、Vimentin、Slug和ZEB1)及PI3K/AKT/mTOR通路核心蛋白的相对表达。结果与结论:①MCF-7贴壁细胞经干性培养基培养形成了折光性好、中间密度高的致密球干细胞;②乳腺癌干细胞干性蛋白的表达明显高于其贴壁细胞(P<0.01);③与未转染组、空载体组相比,PGC-1β过表达组乳腺癌干细胞的形成时间缩短,细胞球体数目增多、球体直径增大(P<0.01),而PGC-1β干扰组细胞球体数目减少、球体直径减小(P<0.01);④PGC-1β过表达组干性相关蛋白的表达高于未转染组、空载体组(P<0.01),上皮-间充质转化相关蛋白E-Cadherin表达低于未转染组、空载体组(P<0.01),而N-Cadherin、Vimentin、Slug和ZEB1的表达高于未转染组、空载体组(P<0.01);PI3K/AKT/mTOR相关蛋白及其磷酸化相关蛋白表达高于未转染组、空载体组(P<0.01),PGC-1β干扰组结果则与PGC-1β过表达组相反;⑤结果提示,PGC-1β能够通过激活PI3K/AKT/mTOR信号通路影响乳腺癌干细胞上皮-间充质转化,从而促进乳腺癌干细胞的形成及干性相关标志物的表达。

摘要： 背景:Ⅲ型纤连蛋白结构域包含蛋白5是一种调节糖脂代谢的蛋白分子,可以调控细胞凋亡,且参与抑制动脉粥样硬化的进程。目的:通过构建Ⅲ型纤连蛋白结构域包含蛋白5过表达慢病毒载体,转染人脐静脉内皮细胞,验证Ⅲ型纤连蛋白结构域包含蛋白5调控内皮细胞凋亡的作用。方法:构建Ⅲ型纤连蛋白结构域包含蛋白5过表达慢病毒载体。取处于对数生长期的人脐静脉内皮细胞,分3组培养:空白组不进行慢病毒转染,对照组转染不含Ⅲ型纤连蛋白结构域包含蛋白5基因的空载体慢病毒,实验组转染Ⅲ型纤连蛋白结构域包含蛋白5过表达慢病毒,转染7 d后,采用RT-PCR和Western blot检测Ⅲ型纤连蛋白结构域包含蛋白5的mRNA与蛋白表达。转染7 d后,向3组细胞内加入氧化型低密度脂蛋白溶液,采用CCK-8法测定细胞活力,Hoechst 33342/PI双染及流式细胞技术检测细胞凋亡程度。结果与结论:①实验组Ⅲ型纤连蛋白结构域包含蛋白5的mRNA与蛋白表达均高于空白组、对照组(P0.05);③加入氧化型低密度脂蛋白24 h后,流式细胞术检测显示实验组细胞凋亡率低于空白组、对照组(P<0.05),Hoechst 33342/PI双染显示实验组凋亡细胞数量少于空白组、对照组;④结果表明,过表达Ⅲ型纤连蛋白结构域包含蛋白5可以抑制人脐静脉内皮细胞的凋亡。

摘要： 背景:细胞永生化是细胞获得持续增殖能力的一种特性,大T抗原基因可使细胞永生化效率提升,并广泛应用于实验中,越来越受到研究者的关注.目的:建立人骨髓间充质干细胞永生化细胞株,为人骨髓间充质干细胞的临床应用奠定基础.方法:使用含有猴空泡病毒40大T抗原基因的重组质粒载体转染人骨髓间充质干细胞,连续传代培养,通过形态学、细胞增殖能力、细胞表面标记、多向分化潜能等方法进行鉴定.结果 与结论:①该方法构建的永生化细胞株为贴壁生长的梭形细胞,具有人骨髓间充质干细胞特异性表面标志;②转染后第50代人骨髓间充质干细胞仍然可表达猴空泡病毒40大T抗原基因;③永生化细胞株的增殖能力优于未转染人骨髓间充质干细胞;④永生化细胞株具有向成骨、成脂肪、成软骨细胞分化的潜能;⑤由此可见,转染猴空泡病毒40大T抗原基因不影响人骨髓间充质干细胞的生物学特性和分化能力,该方法可以用于建立人骨髓间充质干细胞永生化细胞株.

摘要： 背景:细胞永生化是细胞获得持续增殖能力的一种特性,大T抗原基因可使细胞永生化效率提升,并广泛应用于实验中,越来越受到研究者的关注。目的:建立人骨髓间充质干细胞永生化细胞株,为人骨髓间充质干细胞的临床应用奠定基础。方法:使用含有猴空泡病毒40大T抗原基因的重组质粒载体转染人骨髓间充质干细胞,连续传代培养,通过形态学、细胞增殖能力、细胞表面标记、多向分化潜能等方法进行鉴定。结果与结论:①该方法构建的永生化细胞株为贴壁生长的梭形细胞,具有人骨髓间充质干细胞特异性表面标志;②转染后第50代人骨髓间充质干细胞仍然可表达猴空泡病毒40大T抗原基因;③永生化细胞株的增殖能力优于未转染人骨髓间充质干细胞;④永生化细胞株具有向成骨、成脂肪、成软骨细胞分化的潜能;⑤由此可见,转染猴空泡病毒40大T抗原基因不影响人骨髓间充质干细胞的生物学特性和分化能力,该方法可以用于建立人骨髓间充质干细胞永生化细胞株。

摘要： 目的建立适用于U251细胞异柠檬酸脱氢酶1基因(IDH1)过表达的最佳转染方案,并通过筛选获得稳定转染的IDH1过表达人胶质瘤U251细胞系。方法利用jetPRIME试剂将IDH1 Human MutantORFClone和pCMV6-EntryTaggedCloningVector转染至U251细胞内。通过增殖实验获得筛选所用抗生素G418浓度,用该浓度筛选稳定的IDH1过表达和空白质粒转染成功的U251细胞。采用RT-PCR和Westernblot实验验证转染实验和IDH1基因和蛋白的表达情况。结果IDH1转染U251细胞株成功表达IDH1基因及IDH1蛋白,筛选及培养所需G418浓度为300 mg/L。IDH1转染组细胞表达IDH1基因及蛋白均高于空白质粒组(VCT组),差异有统计学意义(P<0.05),转染实验成功。结论成功建立适用于U251细胞IDH1过表达的最佳转染方案,可通过筛选获得稳定转染的IDH1过表达和空白质粒对照的人胶质瘤U251细胞系。

摘要： 为探索功能化糖原作为基因载体的可行性和有效性,利用二乙烯三胺修饰糖原合成了氨基化的糖原衍生物(NH_(2)-Gly),利用红外光谱对其结构进行了表征;采用凝胶电泳阻滞实验考察了NH_(2)-Gly对pEGFP的负载能力和保护能力;通过MTT和溶血实验考察了NH_(2)-Gly的生物相容性;利用激光共聚焦显微镜和流式细胞术分析了NH_(2)-Gly/pEGFP在NIH 3T3细胞内的转染效果。结果表明,制备的NH_(2)-Gly为均匀分散的纳米粒子,粒径约为80 nm,带有显著的正电荷。与相对分子质量为25000的聚乙烯亚胺(PEI 25k)相比,NH_(2)-Gly具有良好的生物相容性。NH_(2)-Gly可有效络合pEGFP并保护其免受核酸酶的降解,且大幅提高了pEGFP在NIH 3T3细胞中的转染效率,几乎与PEI 25k相当。因此,糖原有望作为安全高效的基因载体。

摘要： 目的:研究泛素结合酶E2C(ubiquitin-conjugating enzyme E2C,UBE2C)在宫颈癌细胞中的表达情况,并明确UBE2C对宫颈癌HeLa细胞增殖、迁移及侵袭能力的影响。方法:首先查阅GEPIA数据库,了解UBE2C在宫颈癌中的表达;其次通过qRT-PCR和Western blotting法明确UBE2C在宫颈癌HeLa细胞及正常宫颈上皮细胞End1/E6E7中表达差异,然后分别构建si-UBE2C及si-NC转染宫颈癌HeLa细胞,检测转染后细胞中UBE2C mRNA和蛋白表达;最后采用CCK-8实验、细胞划痕实验及Transwell实验检测转染后细胞的增殖、迁移和侵袭能力的变化,并鉴定UBE2C下游靶基因PTEN、P-p53的表达情况。结果:UBE2C在宫颈癌中高表达,能够促进宫颈癌细胞的增殖、迁移及侵袭能力,并下调抑癌基因PTEN、P-p53的表达。结论:UBE2C能够加重宫颈癌细胞恶性表型;UBE2C可能作为宫颈癌诊断及治疗的判定指标之一。

摘要： 埃及伊蚊Aedes aegypti是登革病毒的主要传播媒介,埃及伊蚊感染登革Ⅱ型病毒(dengue virus typeⅡ,DENV2)后产生先天免疫反应的相关研究,有助于进一步理解埃及伊蚊感染DENV2的过程和机制。本研究通过埃及伊蚊和Aag2细胞感染DENV2进行转录组分析,与未染毒的蚊虫和细胞进行对比,筛选出12个表达变化较大的基因,之后分别构建含有这12个基因的PSL1180polyUBdsRED质粒载体,并使用细胞转染技术在Aag2细胞中建立目标基因的瞬时转染过表达模型,观察了目标基因过表达后细胞上清中DENV2的复制水平。结果显示,12个基因中羟基类固醇脱氢酶样蛋白、蜕皮激素20单加氧酶、3β-羟基类固醇脱氢酶3个基因过表达后细胞上清中病毒拷贝数出现了具有统计学意义的降低,表明这3个基因的表达可能影响DENV2在Aag2细胞中的复制。这3个基因的相关蛋白都涉及到20-羟基脱皮酮的合成,这提示20-羟基脱皮酮可能在蚊虫感染DENV2时介导了重要的免疫调节途径,为进一步研究蚊虫与虫媒病毒的互作机制提供了新的思路。

摘要： 目的探究TAX1结合蛋白1(TAX1BP1)对苯肾上腺素(PE)诱导的原代新生大鼠心肌细胞(NRCM)凋亡的影响。方法将培养的NRCM分为正常组、模型组(PE 50μmol/L)、阴性组、转染组(转染TAX1BP1过表达腺病毒)、对照组、刺激组(转染TAX1BP1过表达腺病毒后,用PE 50μmol/L)。采用α肌动蛋白免疫荧光染色观察NRCM面积,TUNEL染色检测NRCM凋亡程度,免疫印迹法检测TAX1BP1及促凋亡因子Bax和抗凋亡因子Bcl-2蛋白表达。结果模型组NRCM中TAX1BP1表达较正常组明显升高(0.97±0.16 vs 0.69±0.06,P<0.05)。与阴性组相比,转染组NRCM中的TAX1BP1表达上调(0.98±0.08 vs 0.65±0.07,P<0.05);与转染组相比,刺激组NRCM中的TAX1BP1表达上调(1.24±0.06 vs 0.98±0.08,P<0.05)。与阴性组比较,对照组NRCM面积增大、NRCM凋亡数量增加、Bax蛋白表达增加,Bcl-2蛋白表达减少(P<0.05);与对照组比较,刺激组NRCM面积增大、NRCM凋亡数量增加,Bax蛋白表达上调,Bcl-2蛋白表达下调(P<0.05)。结论TAX1BP1可促进PE诱导的心肌细胞肥大,通过增加Bax表达以及抑制Bcl-2来加重PE诱导的心肌细胞凋亡。

摘要： 目的制备含重组质粒涂层,提高介入医疗器材生物相容性和耐腐蚀性,降低再狭窄率。方法将人脐静脉内皮细胞分别接种到涂布基质胶+黏连蛋白和基质胶+黏连蛋白+人血管内皮细胞生长因子(VEGF)重组质粒的镍钛合金丝上,37°C培养48 h后用正置荧光显微镜观测。结果基质胶+黏连蛋白包被的镍钛合金丝表面细胞无绿色荧光,含人VEGF重组质粒包被的镍钛合金丝表面细胞有绿色荧光,表明人VEGF重组质粒转染成功。结论人VEGF重组质粒转染成功,此种涂层具有可行性,可用于介入医疗器材表面改性。

摘要： 将微小病毒内部核糖体进入位点(IRES)基因克隆到质粒pVAXI载体多克隆位点,构建出核酸疫苗双表达载体pVI.将绿色荧光蛋白(EGFP)基因和新霉素磷酸转移酶(neor)基因作为报告基因,连接到pVI载体IRES基因的前后两处多克隆位点,构建出表达载体pEIN.通过脂质体介导的方法将该载体转染COS-7细胞,筛选到同时表达绿色荧光蛋白和新霉素磷酸转移酶的表达株,表明成功地构建了核酸疫苗双表达载体,为构建多价核酸疫苗及带有分子佐剂的核酸疫苗打下了基础.

摘要： 目的:用增强型绿色荧光蛋白(EGFP)基因转染体外培养2-5代的近交系五指山猪胎儿成纤维细胞(PEF),研究几个因素对转染阳性率的影响.方法:体外分离培养猪胎儿成纤维细胞,经Fugene-6介导pEGFP-N3质粒转染PEF,G418筛选7～15d,对细胞进行纯化.结果:通过对转染条件的优化,可达到较佳的效果,随机整合有EGFP的细胞能为转基因动物提供良好的核供体.

摘要： 为了选择适宜的启动子调控外源基因的表达,以改善马立克氏病毒为载体的重组病毒的免疫保护力,克隆了马立克氏病病毒(MDV)CVI988株病毒囊膜糖蛋白B基因启动子(gB启动子),通过测序分析发现克隆的gB启动子与Genbank上发表的MDVGA株序列的同源性为99.5﹪.分别以lacZ、Luc为报告基因,构建pSK-gB-LacZ和pgB-Luc真核表达载体.将pSK-gB-LacZ转染CHO,转染细胞经固定、染色后,出现兰色,说明在CHO中,所克隆的gB启动子可以有效地调控lacZ基因的转录.在CEF细胞中,利用虫荧光素酶系统将gB启动子与SV40及hCMV启动子进行活性比较比较,结果发现hCMV启动子的活性为gB启动子的31倍,SV40启动子为gB启动子的27倍.本研究为下一步gB启动子的应用奠定了基础.

摘要： 本文采用含有全长丙型肝炎病毒HCV基因的p90/HCVFL-longpU质粒,转化Sure细胞，提取质粒,以线性化DNA为模板,用T7RNA体外转录系统作体外转录；采用lipofectin包裹HCVRNA转染生长良好的HepG2细胞,分别用正链及负链引物作RT-PCR,确定转染细胞中有无HCV的复制中间体及病毒核酸。结果显示:体外可获得高浓度全长HCV-RNA,但转染未获成功。

摘要： 目的：利用α-平滑肌肌动蛋白(α-SMA)基因重组反义和正义逆转录病毒载体，探讨α-SMA逆转录病毒对瘢痕与皮肤成纤维细胞的影响。方法：用含α-平滑肌肌动蛋白(α-SMA)cDNA，重组反义和正义逆转录病毒载体，并感染培养的瘢痕和皮肤成纤维细胞，进行α-SMA在蛋白水平表达等的研究，观察瘢痕与皮肤成纤维细胞形态学与功能的变化。结果：反义α-SMA逆转录病毒抑制了瘢痕成纤维细胞的增殖，细胞形态变小;α-SMA在瘢痕与皮肤成纤维细胞表达降低，并随着作用时间延长，效果更明显;正向α-SMA逆转录病毒则具有相反的作用，促进α-SMA的表达。结论：α-SMA重组病毒对瘢痕与皮肤成纤维细胞的形态、生长、细胞功能均有影响。

摘要： 目的：利用α-平滑肌肌动蛋白(α-SMA)基因重组反义和正义逆转录病毒载体，探讨α-SMA逆转录病毒对瘢痕与皮肤成纤维细胞的影响。方法：用含α-平滑肌肌动蛋白(α-SMA)cDNA，重组反义和正义逆转录病毒载体，并感染培养的瘢痕和皮肤成纤维细胞，进行α-SMA在蛋白水平表达等的研究，观察瘢痕与皮肤成纤维细胞形态学与功能的变化。结果：反义α-SMA逆转录病毒抑制了瘢痕成纤维细胞的增殖，细胞形态变小;α-SMA在瘢痕与皮肤成纤维细胞表达降低，并随着作用时间延长，效果更明显;正向α-SMA逆转录病毒则具有相反的作用，促进α-SMA的表达。结论：α-SMA重组病毒对瘢痕与皮肤成纤维细胞的形态、生长、细胞功能均有影响。

摘要： 目的：利用α-平滑肌肌动蛋白(α-SMA)基因重组反义和正义逆转录病毒载体，探讨α-SMA逆转录病毒对瘢痕与皮肤成纤维细胞的影响。方法：用含α-平滑肌肌动蛋白(α-SMA)cDNA，重组反义和正义逆转录病毒载体，并感染培养的瘢痕和皮肤成纤维细胞，进行α-SMA在蛋白水平表达等的研究，观察瘢痕与皮肤成纤维细胞形态学与功能的变化。结果：反义α-SMA逆转录病毒抑制了瘢痕成纤维细胞的增殖，细胞形态变小;α-SMA在瘢痕与皮肤成纤维细胞表达降低，并随着作用时间延长，效果更明显;正向α-SMA逆转录病毒则具有相反的作用，促进α-SMA的表达。结论：α-SMA重组病毒对瘢痕与皮肤成纤维细胞的形态、生长、细胞功能均有影响。

摘要： 目的：利用α-平滑肌肌动蛋白(α-SMA)基因重组反义和正义逆转录病毒载体，探讨α-SMA逆转录病毒对瘢痕与皮肤成纤维细胞的影响。方法：用含α-平滑肌肌动蛋白(α-SMA)cDNA，重组反义和正义逆转录病毒载体，并感染培养的瘢痕和皮肤成纤维细胞，进行α-SMA在蛋白水平表达等的研究，观察瘢痕与皮肤成纤维细胞形态学与功能的变化。结果：反义α-SMA逆转录病毒抑制了瘢痕成纤维细胞的增殖，细胞形态变小;α-SMA在瘢痕与皮肤成纤维细胞表达降低，并随着作用时间延长，效果更明显;正向α-SMA逆转录病毒则具有相反的作用，促进α-SMA的表达。结论：α-SMA重组病毒对瘢痕与皮肤成纤维细胞的形态、生长、细胞功能均有影响。

摘要： 目的探讨骨髓问充质干细胞(MSCs)移植对急性肾小管坏死裸鼠的作用.为MSCs移植治疗急性肾小管坏死提供实验依据.方法31只5周龄裸鼠,实验动物分组:随机分为正常对照组(11只)、急性肾小管坏死(ATN)模型组(10只)、ATN+MsCs移植组(10只),50％甘油诱发ATN裸鼠动物模型,采用经肾动脉注射途径向肾脏内移植绿色荧光蛋白(GFP)标记的MSCs,实验期间观察饮食、活动等变化．检测血肌酐(Scr)、尿素氮(BUN),肾组织HE染色观察病理组织学变化,采用荧光显微镜等方法观察绿色荧光蛋白(GFP)标记的阳性细胞在裸鼠肾脏的分布及数量.结果HE染色ATN模型组裸鼠肾脏肾小管上皮细胞变性、坏死甚至脱落,部分坏死肾小管可见坏死脱落细胞填塞,病变于肾皮质或皮髓交界处明显,而肾小球未见明显异常.但MSCs移植组的修复程度明显好于模型组.MSCs胞移植组后第14天的受体鼠肾小管中有GFP阳性细胞明显增多.在部分肾小球中也增多.结论肾动脉注射途径移植的MSCs能在肾脏分化为肾小管上皮细胞,促进损伤的肾小管上皮细胞的修复.

摘要： 目的探讨骨髓问充质干细胞(MSCs)移植对急性肾小管坏死裸鼠的作用.为MSCs移植治疗急性肾小管坏死提供实验依据.方法31只5周龄裸鼠,实验动物分组:随机分为正常对照组(11只)、急性肾小管坏死(ATN)模型组(10只)、ATN+MsCs移植组(10只),50％甘油诱发ATN裸鼠动物模型,采用经肾动脉注射途径向肾脏内移植绿色荧光蛋白(GFP)标记的MSCs,实验期间观察饮食、活动等变化．检测血肌酐(Scr)、尿素氮(BUN),肾组织HE染色观察病理组织学变化,采用荧光显微镜等方法观察绿色荧光蛋白(GFP)标记的阳性细胞在裸鼠肾脏的分布及数量.结果HE染色ATN模型组裸鼠肾脏肾小管上皮细胞变性、坏死甚至脱落,部分坏死肾小管可见坏死脱落细胞填塞,病变于肾皮质或皮髓交界处明显,而肾小球未见明显异常.但MSCs移植组的修复程度明显好于模型组.MSCs胞移植组后第14天的受体鼠肾小管中有GFP阳性细胞明显增多.在部分肾小球中也增多.结论肾动脉注射途径移植的MSCs能在肾脏分化为肾小管上皮细胞,促进损伤的肾小管上皮细胞的修复.

摘要： 本申请属于细胞转染技术领域，具体涉及用于细胞转染的受体转染微泡、配体转染微泡以及两段制导式细胞转染方法。用于细胞转染的受体转染微泡是用微泡将经过人工受体修饰的脂质体包覆形成,配体转染微泡是用经人工配体修饰的脂质体将核酸包载形成，两段制导式细胞转染方法包括受体‑细胞结构形成步骤和多肽结合转染步骤。本申请通过模拟病毒通过膜融合的途径而非内吞的途径进行细胞转染，具有高效的转染效率以及低的致癌风险。

摘要： 本申请属于细胞转染技术领域，具体涉及用于细胞转染的受体转染微泡、配体转染微泡以及两段制导式细胞转染方法。用于细胞转染的受体转染微泡是用微泡将经过人工受体修饰的脂质体包覆形成,配体转染微泡是用经人工配体修饰的脂质体将核酸包载形成，两段制导式细胞转染方法包括受体‑细胞结构形成步骤和多肽结合转染步骤。本申请通过模拟病毒通过膜融合的途径而非内吞的途径进行细胞转染，具有高效的转染效率以及低的致癌风险。

摘要： 本发明涉及织物转染技术领域，特别涉及一种转染剂及其制备方法，转染织物及其转染方法。其中，所述转染剂，包括如下按质量百分比计的组分：10～20％水分散性热熔胶，2～5％复合高温乳化剂，1～5％助溶剂，1～5％转染组分和70～80％水；其中，所述转染组分包括质量比为(1.5～2.5)：(0.5～1.5)：(0.5～1.5)的二甲酸二甲酯、碳酸二甲酯和己二醇。所述转染方法为在施加微波的条件下使用前述转染剂，将植物色素转印至织物表面。由本发明所提供的转染方法所制备得到的转染织物，其表面植物转印图案清晰度高、图案保真度和还原度较高，且具有较高的耐洗性和耐磨性。

摘要： 本发明提供了一种提高基因载体转染效率和/或转染精度的转染辅助试剂及其应用，所述转染辅助试剂包括聚乙二醇和/或其衍生物。本发明创造性地利用聚乙二醇作为辅助试剂进行基因转染，发现：(1)聚乙二醇或其衍生物可显著提高基因载体对体外细胞的转染效率，其中包括一些基因载体无法转染的细胞；(2)聚乙二醇或其衍生物可显著提高基因载体对活体组织的转染效率，并促进基因载体在活体组织中局域表达，从而在目标组织中实现高效、精准转基因表达；(3)聚乙二醇或其衍生物可长期促进基因载体高效、精准转染活体组织，并不会在活体组织中引发显著的副作用，例如细胞凋亡、严重的免疫反应、动物行为功能显著改变。

摘要： 本发明属于生物工程的技术领域，具体涉及一种直接转染柞蚕蛹获得重组杆状病毒的转染试剂及转染方法。所述的转染试剂为一种两亲性聚合物，其为以疏水性化合物对聚乙烯亚胺进行疏水修饰的聚乙烯亚胺衍生。本发明所提供的直接转染柞蚕蛹获得重组杆状病毒的转染试剂，通过疏水性化合物对聚乙烯亚胺进行疏水修饰的得到，原料成本低廉，制备方法简单。本发明所提供的直接转染柞蚕蛹获得重组杆状病毒的转染方法，省去了在细胞内进行病毒包装、筛选的步骤，简化了原有的实验流程，提高了工作效率，节约了经济成本，为昆虫杆状病毒表达载体在柞蚕体内进行蛋白表达的研究奠定了基础，也为杆状病毒在昆虫中的应用指明了一条新的方向。

摘要： 本申请涉及基因转染的技术领域，具体公开了一种提高瞬时转染效率的转染试剂及转染方法。转染试剂包括PEI转染试剂和DMSO；其转染方法包括以下步骤：S1、准备转染质粒、细胞培养液（用1~5%(v/v)的DMSO处理5~10 h）；将转染试剂和培养基混合得到PEI混合液，其中转染试剂中添加有0.5%~1%(v/v)的DMSO，将转染质粒和培养基混合得到质粒DNA混合液；S2、将所述PEI混合液加入至质粒DNA混合液，室温孵育，得到DNA‑PEI复合物混合液；S3、将DNA‑PEI复合物混合液加入至所述细胞培养液中，并培养数天。本申请的转染试剂和转染方法用于细胞转染，其具有转染效率高的优点。

摘要： 本发明公开了一种转染组合物，尤其是一种用于猪皮转染的抗冻转染组合物。本发明还公开了采用该转染组合物转染猪皮的方法。在该转染组合物中包含了氮酮和抗冻剂，将转染和抗冻合二为一，缩短了猪皮转染时间，同时维持冻存后的产品活力和基因导入量不受影响，对于基因转染猪皮的生产具有十分重要的意义。

摘要： 本发明提供了一种可以提高难转染干细胞转染效率的方法。我们之前的研究中发现一类骨髓间充质干细胞（BMSCs）之所以转染效率低主要是由于被摄入物质难以从它的囊泡中逃逸出来。我们提供了一种解决在BMSCs中囊泡逃逸难的问题的方法，进而提高BMSCs转染效率，可以被广泛应用于干细胞工程、蛋白质治疗和基因治疗等领域。

摘要： 本发明涉及生物医药技术领域，尤其涉及一种mRNA转染材料、mRNA转染系统及应用。该mRNA转染材料由普鲁兰多糖骨架接枝阳离子聚合物制得，所述普鲁兰多糖骨架包含亲水性和生物相容性良好的普鲁兰多糖、保持胶体稳定性的疏水性胆碱和响应胞内糖响应胞内谷胱甘肽响应性断裂的二硫键，阳离子聚合物片段能够实现胞内选择性释放mRNA的功能。实验表明，本发明提供的mRNA转染材料稳定性明显提高，能够抵抗聚阴离子的竞争，抑制mRNA在细胞外的降解，在还原环境中，胶体稳定性又明显降低，有利于mRNA在还原性的细胞内迅速释放。

摘要： 本发明提供了一种HEK293细胞瞬时表达转染用试剂和瞬时表达系统转染方法，涉及基因工程技术领域，所述试剂包括穿膜肽DLR8与脂质体混合物，试剂中穿膜肽DLR8：脂质体的质量比为4～8.8:1。所述HEK293细胞瞬时表达转染用试剂和瞬时表达系统转染方法中，选择穿膜肽DLR8与脂质体混合物作为HEK293细胞瞬时表达的转染试剂，高糖DMEM培养基作为转染孵育Buffer，并在细胞转染处理后48h进行细胞悬浮，添加小分子添加剂丁酸钠，提高了HEK293细胞外源蛋白的表达水平，使得目的基因可高效表达。