细胞摄取

摘要： 对乙酰氨基酚(APAP)过量仍然是急性肝功能衰竭的常见原因,在患者中通常伴随着血清胆汁酸(BA)水平的升高。然而,BA的病理生理作用仍不清楚。来自德国多特蒙德工业大学的Ghallab等研究了BA在APAP诱导的肝毒性中的作用。研究者进行了活体显像,研究了BA在小鼠体内的转运,定量了APAP过量的小鼠和患者血清中内源性BA的浓度,并用MS和MALDI-MSI分析了肝组织和胆汁的BA浓度。通过紧密连接蛋白的免疫染色和荧光标记物的活体成像,评估血胆汁屏障的完整性和氧化应激的作用,确定BA的细胞毒性浓度,并进行干预以阻止BA从血液中摄取到肝细胞。在细胞死亡开始之前,APAP过量会在中心小叶周围区域引起大量的氧化应激,这与血胆汁屏障的破坏是一致的。结果,BA从胆小管渗漏到肝窦血液中,随后BA通过基底膜被肝细胞摄取,分泌到胆小管并重复循环。

摘要： 建立一种快速专一测定白桦脂酸(BA)含量的LC-MS方法,采用选择离子检测方式,测定Caco-2细胞中BA的含量,用于研究BA在Caco-2细胞中的摄取与转运情况。采用色谱柱Agilent SB-C18(2.1 mm×50 mm,1.8μm),流动相0.1%甲酸-甲醇(22∶78),流量0.3 mL/min。采用电喷雾离子源(ESI),负离子模式下定量分析BA和齐墩果酸(内标)碎片离子质荷比(m/z)455.4。BA在8.4~840 ng/mL范围内线性关系良好(r>0.996),定量限为8.4 ng/mL;日内、日间精密度RSD均小于10%,基质效应为107.9%~114.5%,提取回收率为97.2%~103.0%;样品室温、长期和冻融稳定性良好,RSD小于10%。该法快速、灵敏、简单、专属性强,可用于定量分析BA在Caco-2细胞的摄取与转运。

摘要： 使用纳米粒子进行疾病的诊断和治疗是当前研究的一个热点.由于受到黏液层的阻碍,纳米粒子对于黏膜上皮细胞的进入效果不佳,从而限制了其对黏膜相关疾病的诊断和治疗.本文设计合成了一种具有黏惰性的酸敏感纳米粒子(MSNs-pCBMA-DMMA),可有效穿透黏液层进入黏膜上皮细胞.首先采用溶胶-凝胶法合成了表面氨基化的介孔二氧化硅纳米粒子(MSNs-NH_(2)),然后通过原子转移自由基聚合法(ATRP)使两性离子羧基甜菜碱甲基丙烯酸酯(CBMA)在MSNs-NH_(2)表面上聚合形成聚羧基甜菜碱甲基丙烯酸酯(pCBMA),获得惰性化的粒子(MSNs-pCBMA),最后将酸响应性分子2,3-二甲基马来酸酐(DMMA)修饰于MSNs-pCBMA表面,制备了MSNs-pCBMA-DMMA.场发射透射电子显微镜(TEM)、傅里叶变换红外光谱(FTIR)、氢核磁共振波谱(^(1)H NMR)和纳米粒度Zeta电位测定仪等分析结果表明,本文合成了MSNs-pCBMA-DMMA,且粒子表面电位随pH值降低显著增加,在pH=7.4~5.7范围内具有酸敏感能力.Transwell®小室实验表明,pCBMA的接枝提高了粒子在模拟黏液中的渗透速率,而DMMA的修饰则进一步增强了粒子的扩散能力,4 h内MSNs-pCBMA-DMMA的模拟黏液渗透率达到16.3%,为MSNs-pCBMA的1.9倍,MSNs-NH_(2)的3倍,而以MSNs-NH_(2)的表观渗透系数(P_(app))为标准计算得到的MSNs-pCBMA-DMMA的相对表观渗透系数达到了2.96.细胞毒性试验验证MSNs-pCBMADMMA粒子的生物安全性良好.细胞摄取试验表明,相比于其它粒子MSNs-pCBMA-DMMA能够更快的被黏膜上皮细胞摄取.本文所构建的纳米粒子能够快速渗透黏液且易于被黏膜上皮细胞摄取,为其应用于黏膜相关疾病的活体诊断和治疗提供了基础.

摘要： 通过制备不同链长聚乙二醇(PEG)修饰的纳米脂质载体(NLCs)考察PEG链长对其口服吸收的影响。使用聚乙二醇(100)单硬脂酸酯(S100)、聚乙二醇(55)单硬脂酸酯(S55)、聚乙二醇(40)单硬脂酸酯(S40)3种不同链长的PEG通过薄膜分散法制备NLCs,以香豆素6(coumarin 6)作为荧光探针,对修饰不同链长PEG的NLCs进行理化性质表征。考察了不同链长PEG修饰的NLCs在模拟缓冲液中的稳定性以及体外释药行为。同时对NLCs的细胞毒性、细胞摄取动力学以及摄取机制进行了考察。结果表明,随着PEG链段长度的增加,其水化层厚度不断增大。与其他NLCs相比,S100修饰的NLCs(pNLC-EG100)具有更好的细胞摄取效率,证明S100的链段长度是用于口服NLCs给药的最佳长度。

摘要： 通过化学合成得到一种由盐酸多巴胺和叶酸共聚集的聚多巴胺(PDA)-叶酸(FA)(PF)纳米颗粒.实验表明PF纳米颗粒具有优良的物理和化学属性,在生理条件下具有良好的分散性和稳定性.同时,通过磷酸氯喹和酞菁锌光敏剂的药物负载实验证明PF纳米颗粒能够稳定负载抗病毒或抗肿瘤药物,对磷酸氯喹的负载量为2.6％,酞菁锌光敏剂的负载量为4.9％.得益于叶酸分子的肿瘤靶向作用,实验证明PF纳米颗粒对小鼠乳腺癌细胞4T1具有良好的亲和力.4T1肿瘤细胞能够高效摄取PF纳米颗粒,约2 h即可达摄取平台期.本研究合成的PF纳米颗粒具有作为抗病毒、抗肿瘤药物载体的应用前景,为临床上药物载体的选用提供新思路.

摘要： 合成叶酸偶联物并将其应用于叶酸靶向脂质体制备,考察其在体外肝癌HepG2细胞中的靶向性。通过酰胺反应将叶酸、胆固醇琥珀酸单酯与两种不同相对分子质量的聚氧乙烯二胺材料连接,合成两种两亲性的叶酸-聚乙二醇-胆固醇琥珀酸单酯(Folate-PEG_(2000)-CHEMS和Folate-PEG_(4000)-CHEMS),并利用核磁共振氢谱(^(1)H NMR)和超高分辨率复杂体分离鉴定质谱系统对其进行了结构表征。选取钙黄绿素为模型药物,采用薄膜分散法分别利用Folate-PEG_(2000)-CHEMS和Folate-PEG_(4000)-CHEMS制备了钙黄绿素脂质体FA-PEG_(2000)-L与FA-PEG_(4000)-L。利用激光粒度仪检测FA-PEG_(2000)-L与FA-PEG_(4000)-L的粒径、Zeta电位;利用流式细胞仪和激光共聚焦扫描显微镜,考察了脂质体FA-PEG_(2000)-L与FA-PEG_(4000)-L在HepG2细胞体外摄取实验中的药物递送效果。结果显示,钙黄绿素脂质体的平均粒径为(205.8±10.2)nm,经电位测试脂质体的Zeta电位为-(1.19±0.31)mV。FA-PEG_(4000)-L靶向脂质体的荧光强度分别约为普通脂质体、FA-PEG_(2000)-L的3.6和3.1倍(P<0.01),FA-PEG_(4000)-L在HepG2细胞中的递送效率明显高于FA-PEG_(2000)-L与非靶向组,说明Folate-PEG_(4000)-CHEMS可应用于脂质体制备,并可促进体外HepG2细胞对脂质体的摄取。

摘要： 目的 评价黄芩苷PEG-PCL纳米胶束的细胞内分布及抗心肌细胞凋亡作用.方法 采用薄膜水化法制备黄芩苷PEG-PCL纳米胶束,以香豆素-6作为荧光探针,评价PEG-PCL纳米胶束在细胞内的摄取及细胞内分布;采用10 μmol·L-1异丙肾上腺素诱导H9c2心肌细胞凋亡进行造模,将等剂量黄芩苷和黄芩苷PEG-PCL纳米胶束在造模前预处理lh,测定细胞凋亡相关的caspase 3活性、ROS水平,Bcl-2和Bax蛋白的表达水平.结果 黄芩苷PEG-PCL纳米胶束具有粒径小,释药缓慢等优良特点;荧光试验表明,PEG-PCL纳米胶束能促进药物的细胞摄取,还能将药物聚集在线粒体部位,细胞凋亡试验结果表明,黄芩苷PEG-PCL能显著降低凋亡相关的caspase 3活性、ROS水平,降低促凋亡Bax的表达,明显提高抗凋亡Bcl-2的表达,这些结果均与等剂量的黄芩苷存在显著性差异.结论 黄芩苷PEG-PCL纳米胶束能促进黄芩苷被心肌细胞摄取,有助于将药物聚集在线粒体部位,从而很大程度上提高药物抗心肌细胞凋亡作用.

摘要： 本实验旨在应用高效液相色谱(HPLC)法定量检测人成骨样细胞—MG63细胞对载辛伐他汀纳米胶束(SVNs)的摄取情况.首先,建立检测SVNs中SV含量的HPLC法,确定色谱条件,并对该方法的专属性与准确性进行评价.其次,将SVNs与辛伐他汀(SV)干预细胞,在加药后的不同时间终止实验,反复冻融破碎细胞,提取胞内药物并用HPLC法对其进行检测.结果显示,当流动相比例为30∶70 (V/V)时,定量检测SVNs中SV含量的标准曲线拟合方程为y=33782x-1424.5 (R2=0.9999),线性范围为0.2～3.2 μg/mL.该方法专属性与准确性均较高,并成功检测出了被MG63细胞摄取到胞内的药物含量.同时,在加药早期,SVNs与SV相比,SVNs被MG63细胞摄取的速度较慢,但胞内药物含量显著高于SV,SVNs与SV被MG63细胞摄取存在显著差异.

摘要： 目的 以聚(N-异丙基丙烯酰胺)(PNIPAm)凝胶为纳米栽体,荷载抗肿瘤成分槲皮素,以增加药物对MCF-7细胞的毒性和细胞摄取.方法 采用正交设计优化PNIPAm合成工艺,红外光谱进行结构确证;单因素试验优化栽槲皮素纳米凝胶(Que-PNIPAm)处方及工艺,分别对粒径、表面形态、载药量进行表征并考察体外释放行为;CCK-8法考察纳米凝胶对MCF-7细胞的毒性;荧光倒置显微镜和流式细胞仪对纳米凝胶的MCF-7细胞摄取作用进行定性观察和定量测定;抑制剂法考察其细胞摄取机制.结果 Que-PNIPAm的粒径为(166.1±2.87)m,栽药量为3.18％;电镜下纳米粒子呈类球形、粒径分布均匀;栽药纳米凝胶时MCF-7细胞的抑制作用显著高于原药,且42°C下显示出更高的细胞摄取效率和抑制肿瘤细胞增殖活性;秋水仙素与2-去氧葡萄糖对细胞摄取有抑制作用.结论 制备的栽药纳米凝胶粒径小,具有温敏特性,能够显著增强药物被细胞摄取能力及肿瘤细胞毒性,MCF-7细胞对PNIPAm的摄取机制为微管蛋白途径.

摘要： 为提高阳离子脂质体介导的细胞摄取反义寡核苷酸(antisenseoligodeoxynucleotides,ODN)的效率,我们在以3β[N-(N',N'-二甲基氨基乙基)氨基甲酸酯]-胆固醇(DC-Chol)和大豆卵磷为类脂的阳离子脂质体(简称DC-Chol脂质体)基础上,考察了不同表面活性剂和吸收促进剂修饰脂质体(Pluronic、Tween-80、Azone等).本文选用不同的Pluronic ,考察它们对阳离子脂质体介导的细胞摄取ODN 的作用.

摘要： 目的:制备促进细胞摄取和具保护作用的反义寡核苷酸(ASON)脂质体.方法:以3β[N-(N',N'-二甲氨基乙基)氨甲酰基-胆固醇(DC-Chol)为类脂制备阳离子脂质体,与ASON混合得到载药脂质体,测定载药率;琼脂糖凝胶电泳分析载药脂质体的结构特点;流式细胞仪检测不同条件下细胞摄取荧光标记ASON的情况;变性聚丙烯酰胺电泳考察DC-Chol脂质体对ASON的保护作用.结果:载药率与DC-Chol脂质体和药物的+/-电荷比有关,当+/-电荷比大于2时,载药率达90﹪以上;ASON同时存在于DC-Chol脂质体的周围和包裹于其内部;经DC-Chol脂质体介导后,阳性细胞染色率和胞内平均荧光强度均明显增加,增加幅度取决于+/-电荷比和培养介质中的血清浓度;DC-Chol脂质体具有保护ASON的作用.结论:DC-Chol脂质体具有显著促进细胞对ASON的摄取和保护ASON的作用,有望成为反义类药物的高效传递系统.

摘要： 光动力抗菌疗是在光动力抗癌疗法(PDT)基础上,发展起来的一种利用光敏药物和合适波长的光联合作用,诱导微生物病原体发生氧化灭活的治疗手段.最近,课题组合成了一系列含有不同轴向取代基团的硅酞菁,本文研究了取代基团对其光物理、光化学性质,细胞摄取以及体外光动力抗菌活性的影响.研究结果表明,阳离子型硅酞菁2和4具有较高的光动力白色念珠菌活性,这可归因于其具有较高的单线态氧量子产率,在水中不聚集和较高的细胞摄取等.在相同条件下,硅酞菁2和4的抗菌活性高于比阳性对照光敏剂亚甲基蓝(MB).这些研究结果表明,硅酞菁2和4有望开发成一种新型的抗菌光敏剂.

摘要： 目的: 采用主动靶向多肽A54修饰聚乙二醇化壳寡糖-硬脂酸聚合物(PEG-CSO-SA)胶团，提高肿瘤组织的靶向性和细胞摄取的特异性，增强药物的抗肿瘤疗效。方法: 以A54化学修饰PEG-CSO-SA聚合物，考察聚合物胶团在肿瘤细胞上的摄取特异性、肿瘤组织的分布、以及阿霉素载药胶团的体内外抗肿瘤疗效。结果: A54修饰聚合物胶团在BEL-7402细胞中的摄取明显多于HepG-2细胞，其载药胶团对BEL-7402细胞的毒性也显著强于其他细胞；PEG化聚合物胶团在荷BEL-7402肿瘤裸鼠模型动物体内肿瘤组织的分布要高于聚合物胶团本身的分布，A54修饰后进一步增强；模型动物的抗肿瘤疗效显示A54修饰载药胶团与市售制剂相比，可在降低一倍药物剂量的前提下，实现相同的疗效，并可提高模型动物的药物耐受性。结论: 利用多肽A54修饰，可提高CSO-SA聚合物胶团给药系统的特异性肿瘤治疗，并降低药物的毒性。

摘要： 目的:研究银杏内酯在Caco-2细胞中的摄取、转运及有效部位中成分间的相互作用。方法:考察时间、浓度、温度、P-糖蛋白抑制剂及有效部位中其他成分对银杏内酯A、B、C及白果内酯细胞摄取的影响。并研究了浓度与有效部位中其他成分对银杏内酯A、B、C细胞转运的影响。结果:银杏内酯以被动扩散的方式被细胞摄取和转运。药物的摄取与时间呈正相关，与温度呈负相关。P-gp抑制剂可以增加白果内酯的细胞摄取，对银杏内酯A、B、C的细胞摄取无影响。有效部位中其他成分对四种测定成分的细胞摄取过程有明显相互作用，但作用各不相同，其中对银杏内酯B和银杏内酯C的细胞摄取有明显的促进作用。银杏内酯A、B、C的转运速率与细胞摄取量的趋势基本一致，即为银杏内酯A＞银杏内酯B＞银杏内酯C。银杏内酯有效部位提取物中的其他成分可以促进银杏内酯B和C的细胞转运，但对银杏内酯A的细胞转运则有抑制作用。结论:银杏内酯是以被动扩散方式被小肠上皮细胞摄取和转运，有效部位提取物中的其他成分可以促进银杏内酯B和银杏内酯C的口服吸收。

摘要： 目的:合成基于两亲聚膦腈的聚合物胶束,研究其物化性能,考察聚合物胶束对阿霉素的负载性能及载药胶束的细胞摄取.方法 通过两步取代反应合成了含有色氨酸乙酯(EtTrp)和不同分子量的聚乙二醇(PEG)的两亲聚膦腈;以紫外、红外和核磁谱仪,结合元素分析和凝胶渗透色谱法(GPC)表征所得聚合物的物化性能;荧光法测定共聚物在水溶液中的临界胶束浓度(CMC);透射电镜(TEM)观察聚合物胶束的形态和大小;乳化法制备载有阿霉素的聚合物胶束;荧光显微镜研究肿瘤细胞对载药胶束的摄取.结果 本研究报道的方法成功合成了具有不同PEG链长的两亲聚膦腈;该类共聚物在水溶液中可以通过自组装形成球形胶束,胶束粒径大小可以通过制备方法或共聚物结构加以调控;该类聚合物胶束对阿霉素具有极高的负载性能,且载药胶束可以被肿瘤细胞摄取.结论 亲水链为PEG的两亲聚膦腈作为增溶强疏水性药物的载体进行靶向给药,表现出良好的应用前景,值得深入研究.

摘要： 本发明公开了一种运载抗原肽的多肽及其纳米颗粒、制备方法及其应用，属于生物科学和药物载体领域。所述多肽是由α螺旋多肽、连接序列和抗原肽以共价键的形式串连而成，所述α螺旋多肽的氨基酸序列为FAEKFKEAVKDYFAKFWD，所述连接序列的氨基酸序列为GSG，所述抗原肽的氨基酸序列为KVPRNQDWL。利用该多肽以及该多肽制备得到的纳米颗粒能有效提高树突细胞对肿瘤抗原肽的摄取效率，促进DC摄取抗原肽后的肿瘤防治功效。

摘要： 式(I)的磺酰胺，其中A、R

摘要： 本发明公开了一种运载抗原肽的多肽及其纳米颗粒、制备方法及其应用，属于生物科学和药物载体领域。所述多肽是由α螺旋多肽、连接序列和抗原肽以共价键的形式串连而成，所述α螺旋多肽的氨基酸序列为FAEKFKEAVKDYFAKFWD，所述连接序列的氨基酸序列为GSG，所述抗原肽的氨基酸序列为KVPRNQDWL。利用该多肽以及该多肽制备得到的纳米颗粒能有效提高树突细胞对肿瘤抗原肽的摄取效率，促进DC摄取抗原肽后的肿瘤防治功效。

摘要： 本发明的实施方式的摄取营养量推定系统具有：传感器，设置于卫生间空间，对与所述卫生间空间的使用者的排泄相关的排泄气味进行感测；推定单元，使用推定模型的输出来推定作为所述使用者所摄取的营养的量的推定摄取营养量，所述推定模型根据基于所述传感器的输出值的输入来输出表示推定为所述使用者所摄取的营养的量的信息；以及输出单元，输出基于所述推定摄取营养量的信息。

摘要： 本发明涉及表征，特别是定量，由从组织再循环到血液循环系统中的血液巨噬细胞从组织中摄取到细胞内的分子标志物的方法，其中进行下列步骤：向全血施加试剂，所述试剂抑制全血的凝集和/或凝结；从全血中选择和/或富集和/或分离出血液巨噬细胞或包含血液巨噬细胞的白细胞群体；进行所选择出的血液巨噬细胞或包含血液巨噬细胞的白细胞群体的穿孔和/或裂解，任选地，在事先进行渗透化之后；在事先对血液巨噬细胞或包含血液巨噬细胞的白细胞群体进行穿孔和/或裂解之后，定性和定量地测定非-血液巨噬细胞自身的标志物，即源自组织的分子标志物。本发明还涉及用于实施所述方法的设备。

摘要： 一种图像摄取装置，包括：一个图像摄取单元，把光学系统投射的图像转换为图像数据并输出该图像数据；一个存储单元，保存从图像摄取单元输出的图像数据；一个检测单元，从存储单元保存的图像数据中检测从外部装置发出的光束的发射位置；和一个焦距控制单元，根据检测的光束的发光位置设置一个焦距检测区域，并使一个焦距调整机构调整光学系统的焦距，从而使焦距检测区域中的高频成分最大化。

摘要： 本发明提供了一种胆汁酸或其药学上可接受的盐，所述胆汁酸或其药学上可接受的盐用于治疗人体或动物体的方法中，所述方法包括向所述人体或动物体施用治疗性化合物，其中：a.所述胆汁酸是鹅脱氧胆酸或脱氧胆酸，并且b.任选地，所述胆汁盐与EDTA联合使用，c.在所述方法中，所述胆汁酸或其盐和EDTA用于实现或增强所述治疗性化合物的细胞内摄取。

摘要： 本申请提供的一种用于细胞胞外囊泡摄取的细胞培养皿和培养系统，涉及细胞培养技术领域，包括：具有内腔的培养皿本体；至少一个隔板，所述隔板安装在所述内腔中，将所述内腔分割成至少两个细胞培养腔；所述隔板上设置有至少一个滤孔，所述滤孔的最低位置与所述内腔的腔底之间留有隔断高度；所述滤孔上覆盖有滤膜。在上述技术方案中，利用该细胞培养皿可以省去细胞胞外囊泡提取、细胞胞外囊泡与靶细胞混合处理的繁琐实验操作，能够简易地检测细胞胞外囊泡的摄取过程。

摘要： 本发明要解决的技术问题在于：提供一种肾细胞癌治疗用组合物，并提供一种增加药物向肾细胞癌细胞摄取的组合物或方法。本发明的构成如下：一种含有D‑阿洛糖的肾细胞癌治疗用组合物、或一种增加含有D‑阿洛糖的药物向肾细胞癌细胞摄取的组合物或方法。该组合物是用于对人或人以外的动物中需要肾细胞癌治疗的患者以有效量给药的医药组合物。

摘要： 本发明公开了一种低毒、高细胞摄取率的细胞示踪剂、其制备方法及应用，该细胞示踪剂为PAA和PEG包覆的超小超顺磁氧化铁纳米颗粒，该细胞示踪剂通过热分解法合成超小超顺磁氧化铁纳米颗粒后，再依次包覆PAA和PEG得到。本发明的低毒、高细胞摄取率的细胞示踪剂，使用PAA和PEG包覆超小超顺磁氧化铁纳米颗粒得到，其可作为细胞示踪剂应用在核磁共振成像中；本发明的细胞示踪剂能够实现无转染试剂使用下对于人脂肪间充质干细胞的高效标记，并且对于人脂肪间充质干细胞和诱导多能干细胞没有明显的毒性，可用于实现对于移植入大鼠脑内的人脐带间充质干细胞的示踪。