反义寡核苷酸脂质体的制备和体外细胞摄取研究

摘要

目的:制备促进细胞摄取和具保护作用的反义寡核苷酸(ASON)脂质体.方法:以3β[N-(N',N'-二甲氨基乙基)氨甲酰基-胆固醇(DC-Chol)为类脂制备阳离子脂质体,与ASON混合得到载药脂质体,测定载药率;琼脂糖凝胶电泳分析载药脂质体的结构特点;流式细胞仪检测不同条件下细胞摄取荧光标记ASON的情况;变性聚丙烯酰胺电泳考察DC-Chol脂质体对ASON的保护作用.结果:载药率与DC-Chol脂质体和药物的+/-电荷比有关,当+/-电荷比大于2时,载药率达90﹪以上;ASON同时存在于DC-Chol脂质体的周围和包裹于其内部;经DC-Chol脂质体介导后,阳性细胞染色率和胞内平均荧光强度均明显增加,增加幅度取决于+/-电荷比和培养介质中的血清浓度;DC-Chol脂质体具有保护ASON的作用.结论:DC-Chol脂质体具有显著促进细胞对ASON的摄取和保护ASON的作用,有望成为反义类药物的高效传递系统.