玉米大斑病菌

摘要： 【目的】分析玉米大斑病菌寄主选择性毒素(host selective toxin,HST)生物合成基因簇Cluster 397.3的结构,以及该基因簇组成基因在玉米大斑病菌侵染过程中的表达情况,为玉米大斑病菌HST的结构和功能研究奠定基础。【方法】以玉米大斑病菌23号生理小种et28a和01-23菌株,1号生理小种ny001和01-11菌株,玉米感病自交系B37为材料,利用antiSMASH技术预测玉米大斑病菌次生代谢产物合成基因簇,通过Synteny共线性分析获得玉米大斑病菌HST生物合成基因簇Cluster 397.3,并对其基因组成和结构进行分析,再利用RNA-Seq技术分析该基因簇的组成基因在玉米大斑病菌侵染玉米叶片3,5,7,10 d的表达情况。【结果】玉米大斑病菌次生代谢产物合成基因簇Cluster 397.3与交链链格孢(Alternaria alternata)ACT-毒素合成基因簇有保守的共线性,含有1个聚酮合酶(PKS)、1个氨基甲酰磷酸合成酶(CPS)、1个短链脱氢酶/还原酶(SDR)、1个锌结合氧化还原酶(ZOR)、1个保守假定蛋白(CHP)、2个细胞色素P450(P450)及2个耐药转运蛋白(DRT)等9个基因。其中PKS与ACT-毒素合成酶基因ACTTS3同源,编码的聚酮合酶包括PksD、PS-DH、Methyltransf_12、PKS_KR、PKS_NbtC superfamily和NADB_Rossmann superfamily 6个典型结构域。RNA-Seq分析结果表明,将玉米大斑病菌接种玉米叶片3,5,7,10 d后,Cluster 397.3组成基因均能表达,且以3 d时表达量整体较高;除CHP基因外,01-11菌株中基因表达量均显著高于01-23菌株。【结论】Cluster 397.3基因表达差异与玉米大斑病菌生理小种的分化和致病特异性有关,该基因簇可能参与了玉米大斑病菌寄主选择性毒素的生物合成。

摘要： 犬尿氨酸途径(Kynurenine pathway,KP)是色氨酸分解代谢的主要途径,其途径关键酶基因参与多种重要的生物过程。为明确玉米大斑病菌犬尿氨酸途径及其途径关键酶基因在病菌生长发育和致病过程中的功能,本研究利用生物信息学方法,对玉米大斑病菌犬尿氨酸途径中的关键酶基因进行鉴定;利用玉米大斑病菌的表达谱数据,对犬尿氨酸途径关键酶基因在病菌生长发育和侵染过程中的表达水平进行分析。结果发现,玉米大斑病菌中含有犬尿氨酸途径关键酶犬尿氨酸单加氧酶(KMO)、犬尿氨酸酶(KYN)、犬尿氨酸氨基转移酶(KAT)和吲哚-2,3-双加氧酶(IDO)的编码基因,犬尿氨酸途径关键酶基因在病菌生长发育和侵染的不同时期呈现高表达水平,表明玉米大斑病菌中存在犬尿氨酸途径,犬尿氨酸途径关键酶基因可能在病菌生长发育和侵染过程中具有重要功能。研究结果为阐明玉米大斑病菌犬尿氨酸途径在生长发育和致病过程中的功能奠定了基础。

摘要： 【目的】小柱孢酮脱水酶(scytalone dehydratase,SCD)是黑色素合成过程中的关键酶。本文旨在鉴定玉米大斑病菌(Setosphaeria turcica)小柱孢酮脱水酶基因(StSCD)家族,并分析玉米大斑病菌附着胞发育过程中StSCD基因家族表达量差异及SCD抑制剂对黑色素合成的影响,为进一步研究StSCD基因家族在黑色素合成和附着胞发育中的作用打下基础。【方法】利用玉米大斑病菌野生型菌株01-23的全基因组数据,获得StSCD基因家族的全序列,并与玉米小斑病菌(Cochlibolus heterostrophus)、稻瘟病菌(Pyricularia oryzae)、瓜类炭疽病菌(Colletotrichum lagenaria)等真菌的SCD进行序列比对;收集玉米大斑病菌附着胞不同发育时期的材料进行实时荧光定量PCR(qRT-PCR)分析,获得不同时期、不同StSCD的表达量,从而确定与病菌侵染和附着胞黑色素化密切相关的脱水酶基因;使用SCD抑制剂环丙酰菌胺处理玉米大斑病菌,测定菌落生长速度、黑色素合成量、附着胞膨压等,确定StSCD在附着胞发育过程中的作用。【结果】玉米大斑病菌全基因组中共鉴定到4个StSCD,其编码蛋白具有SCD保守结构域及保守的催化及底物结合氨基酸残基。StSCD3与灰葡萄孢(Botrytis cinerea)中功能冗余的SCD2蛋白具有较高同源性,StSCD4与多主棒孢(Corynespora cassiicola)中参与黑色素合成的SCD蛋白具有较高同源性。通过分析玉米大斑病菌生长发育过程中不同时期StSCD的表达量发现,在附着胞时期4个StSCD表达量均上调,其中StSCD3、StSCD4表达量上调尤为显著,附着胞再生菌丝时期StSCD3、StSCD4的表达量均显著下降,并且在附着胞诱导整个时期StSCD4的表达量较高。环丙酰菌胺处理玉米大斑病菌后,黑色素合成受阻,附着胞膨压显著降低。【结论】玉米大斑病菌含有4个StSCD,推测StSCD4参与DHN(1,8-间苯二酚)黑色素的合成,并进而影响附着胞膨压积累。

摘要： 【目的】对玉米大斑病菌Hsp70(Setosphaeria turcica Hsp70,StHsp70)基因家族进行结构鉴定和功能分析,为进一步阐明StHsp70在玉米大斑病菌生长发育和致病过程中的作用奠定基础。【方法】利用玉米大斑病菌基因组数据库获得StHsp70基因家族成员,利用生物信息学方法进行理化性质、亚细胞定位、系统进化、保守基序和结构域分析,构建三级结构模型,并预测启动子等顺式作用元件。【结果】StHsp70基因家族包括11个成员,分别为StHsp70-1~StHsp70-11,多数定位于细胞质,其次为内质网、线粒体和细胞核。系统进化分析结果表明,StHsp70家族成员可分为7类,其中Class A~F分别与酿酒酵母(Saccharomyces cerevisiae)热激蛋白SSA、SSB、SSC、KAR2、SSE、SSZ高度同源,而Class G在酵母中未发现其同源蛋白。结构预测分析发现,StHsp70家族成员都含有保守基序Motif 5,而Motif 6只存在于Class A~D中,Class G仅含有2~4种基序,与其他StHsp70家族成员存在显著差异。N端的NBD结构域类型在玉米大斑病菌和酵母不同Hsp70类型间存在显著差异,可能与亚细胞定位有关。不同类型StHsp70的C末端结构和延伸性变化较大,特别是Class G的StHsp70与其他类型具有显著区别,可能与底物的多样性有关。【结论】玉米大斑病菌Hsp70家族11个成员可以分为7类,其中Class G的4个成员在理化性质和结构特征上都与其他成员具有显著的区别,表明StHsp70属于多功能分子伴侣家族。

摘要： 玉米大斑病在美洲、欧洲、亚洲和大洋洲等冷凉玉米种植区都可发生,流行年份常常造成大面积减产,有时还会加重玉米根腐、茎腐等病的发生和危害程度。研究玉米大斑病菌高效原生质体的制备是防治工作的关键。玉米大斑病菌在无性生长过程中迅速产生黑色素,使原生质体难以分离。测试不同浓度的细胞壁降解酶纤维素酶和蜗牛酶的酶组合,判断不同温度、菌龄、培养基对原生质体分离效果的影响。结果表明,菌株的培养形态和菌丝的生长状态显著影响原生质体的分离效率,20 mg/mL纤维素酶+20 mg/mL蜗牛酶混合酶液在26°C下能够有效分离玉米大斑病菌的原生质体。

摘要： 玉米大斑病菌(Setosphaeria turcica)的遗传变异源于病菌的有性生殖,为进一步探究玉米大斑病菌交配型基因在有性生殖中的作用,本研究对带有不同交配型(mating type,MAT)基因StMAT1-1和StMAT1-2的玉米大斑病菌菌株进行有性态诱导,采用qRT-PCR分析不同交配型菌株在有性态诱导0、15、30和60 d时StMAT1-1和StMAT1-2基因的表达规律,同时通过酵母(Saccharomyces cerevisiae)自激活试验检测不同交配型基因的转录激活活性.结果表明,有性态诱导前,有性态诱导15、30和60 d时StMAT1-1和StMAT1-2基因均有表达,且随着诱导时间延长,交配型基因在不同诱导组合中的表达量也随着时间的增加而显著变化,说明在玉米大斑病菌有性生殖过程中交配型基因起着重要的作用;酵母自激活实验发现,StMAT1-1和StMAT1-2基因编码产物均为转录因子,且具有较高的转录激活活性.研究结果为进一步探究交配型基因在调控玉米大斑病菌有性生殖过程中发挥的关键作用提供参考.

摘要： [目的]获得玉米大斑病菌(Setosphaeria turcica)SC35类剪接因子的基因,并分析该基因家族之间的相互作用及在病菌不同生长发育时期与侵染过程中的表达规律,为明确剪接因子SC35家族与真菌生长发育的关系打下基础.[方法]以拟南芥(Arabidopsis thaliana)SC35编码的氨基酸序列为探针序列,在玉米大斑病菌全基因组数据库进行同源比对,获得玉米大斑病菌中潜在的SC35蛋白;利用生物信息学方法对其保守结构域、系统进化关系进行分析;分别收集接种在感病玉米叶片表面不同时间及玉米大斑病菌菌丝、分生孢子、芽管、附着胞及侵入丝等不同发育时期的材料,利用实时荧光定量PCR(qRT-PCR)技术分析在对玉米叶片侵染不同时间及不同发育时期可变剪接因子的转录水平;利用酵母双杂交技术明确玉米大斑病菌可变剪接因子之间的相互作用.[结果]在玉米大斑病菌中获得了8个潜在的SC35类蛋白基因,其编码的氨基酸具有典型的SR蛋白(Ser-Arg rich protein)结构域,而StSC1 C端具有2个RRM基序.8个基因位于染色体组的不同物理位置,不具有连锁关系.系统进化分析表明8个剪接因子分布于不同进化支,同源性较低.在病菌侵染寄主叶片过程中,StSC1、StSC2、StSC3、StSC4、StSC5、StSC6、StSC8在侵染18 h时表现为表达上调趋势,StSC7呈下调趋势,StSC4在6—18 h表现出较高表达活性;不同生长时期中,StSC1在病菌附着胞及侵染丝形成时期表达水平极显著上调(P<0.001),是分生孢子时期的24.44、8.25倍,其余7个可变剪接因子在病菌的生长过程中表达水平均呈下调趋势.酵母双杂交结果表明StSC4与StSC6、StSC3与StSC8、StSC3与StSC4、StSC8与StSC4有体外互作关系.[结论]在玉米大斑病菌侵染过程中及不同发育时期可变剪接因子的表达模式不同,StSC4在病菌整个侵染过程均活跃表达;StSC1、StSC4和StSC6对病菌附着胞和侵入丝的形成发挥比较重要的调控作用;StSC4与StSC6、StSC3与StSC8、StSC3与StSC4、StSC8与StSC4通过互作,调控剪接复合体的形成.

摘要： 利用生物信息学技术预测并分析玉米大斑病菌ABC转运蛋白StMlt1的结构和功能.结果显示,StMlt1蛋白含有1543个氨基酸残基,为稳定的疏水性碱性蛋白;二级结构元件中α-螺旋含量最高,达到54.7％;亚细胞定位推测位于液泡膜;保守结构域包括跨膜螺旋区域及AAA-ATP酶区域,具有ATP酶活性与物质跨膜运动的耦合功能.系统发育分析结果表明,StMlt1与Pyrenophora teres和Pyrenophora tritici-repentis亲缘关系最近.以上研究结果为阐明StMlt1蛋白在玉米大斑病菌生长和致病过程中的作用奠定了基础.

摘要： 明确东北地区玉米大斑病菌交配型组成情况及遗传结构,为进一步深入研究玉米大斑病的发生、流行及防控技术提供理论依据.利用交配型鉴定特异引物对2017年采自辽宁、吉林、黑龙江、内蒙古4个省(自治区)34个市县的57株玉米大斑病菌进行交配型测定,并采用相关序列扩增多态性(SRAP)分子标记技术对供试菌株进行遗传多样性分析.测定结果表明:东北地区玉米大斑病菌主要包括2种交配型,即仅含StMAT1-2基因的a交配型和仅含StMAT1-1基因的A交配型,且a交配型的比例(78.95％)明显高于A交配型(21.05％),表现出明显的不平衡现象.遗传多样性分析结果表明:从100对SRAP通用引物中筛选出多态性较好且稳定的8对引物组合,共扩增出64条条带,不同引物组合对供试菌株扩增条带数量不同,引物组合Me5/Em9和Me8/Em1扩增的条带数量最多,Me3/Em3扩增的条带数量最少,其中多态性条带44条,平均每个引物组合扩增出5.5个多态性条带,多态性位点比率为68.75％.UPGMA聚类分析显示,供试菌株遗传相似系数介于0.76～1.00,在阈值为0.82时,所有菌株被分为4个类群,表现出丰富的遗传多样性.SRAP划分结果表明:类群I中菌株均为A交配型,a交配型菌株均聚集于类群II中,说明玉米大斑病菌遗传类群和交配型之间存在密切关系,但二者均与菌株地理来源无明显相关性.

摘要： 为明确玉米大斑病菌StRTG2基因功能以及其在病菌不同发育时期的表达模式.利用酵母ScRTG2基因编码的氨基酸序列进行BlastP,在玉米大斑病菌中得到了其同源基因序列,将其命名为StRTG2;分别以玉米大斑病菌野生型01-23的全基因组DNA及cDNA为模板,对该基因进行克隆;利用生物信息学技术对该基因编码的蛋白StRtg2进行理化性质分析、结构域预测、亚细胞定位预测;利用MEGA 7.0对Rtg2进行进化关系分析;扩增目的片段的ORF序列,构建该基因原核表达载体,通过转化大肠杆菌BL21后,使用IPTG进行诱导表达;最后利用RNA-Seq数据库分析StRTG2基因在玉米大斑病菌关键生长发育时期(菌丝、分生孢子、芽管、附着胞和侵入钉)的表达模式.主要研究结果如下:克隆了该基因发现其长度为1695 bp,不含有内含子;该基因编码的蛋白由564个氨基酸组成,理论等电点值(pI)是6.96,具有典型的Ppx-Gppa保守结构域,亚细胞定位预测结果显示,该蛋白在细胞各部位均有分布,分布于细胞质中的可能性最大;对该蛋白进行进化关系分析表明,玉米大斑病菌StRtg2蛋白与番茄匍柄霉菌中同源蛋白的同源性最高,其次是酿酒酵母;原核表达该基因,SDS-PAGE胶显示该蛋白的大小约为62 ku,与预期大小相符;表达模式分析发现,该基因在病菌发育的5个时期均有表达,其中芽管和侵入钉时期表达量显著降低.为进一步解析StRTG2基因的功能研究奠定基础.

摘要： 玉米大斑病菌是引起玉米产生大斑病的病原真菌,该病害对玉米产量及品质造成严重的影响.玉米大斑病菌从孢子的萌发、附着胞形成及成熟到侵入寄主体内是一个复杂的过程,可通过有丝分裂原激活蛋白激酶(Mitogen-activated protein kinase,MAPK)信号转导途径、环化腺苷酸(cAMP)信号转导途径和Ca2+信号转导途径等不同的信号途径来调控.研究表明,Ca2+途径对桃褐腐病菌(Monilinia fructicola)、水稻胡麻斑菌(Cochliobolus miyabeanus)附着胞的形成及致病性有重要的调控作用.有研究发现位于Ca2+途径中的蛋白激酶C(protein kinaseC,PKC)在真菌中具有重要的功能,如Oeser通过基因敲除的方法研究了玉米小斑病菌(Cochliobolus heterostrophus)的PKC基因,但是经努力并未得到该基因的敲除突变体,所以推测,PKC基因在玉米小斑病菌的代谢过程中起关键作用,被敲除时很可能引起致死突变.本实验室已经克隆了玉米大斑病菌PKC基因的全长,并证实该基因以单拷贝形式存在.

摘要： 玉米大斑病菌(Setosphaeria turcica)是引起玉米大斑病的一种丝状病原真菌,主要通过附着胞的高膨压产生侵入钉侵染寄主.黑色素(melanin)作为有效的选择透过性屏障,沉积在成熟附着胞的细胞壁和细胞膜之间,形成一层致密的电子层,从而使附着胞积累大量的物质产生高膨压.反之,黑色素缺失菌株的附着胞失去了产生高膨压的能力,导致病菌致病力降低甚至丧失.本实验室前期研究表明，玉米大斑病菌能够产生DHN黑色素，利用其他真菌PKS基因的保守序列设计简并引物，克隆到了一个聚酮体合成酶基因，命名为StPKS。经对StPKS的编码序列进行BLAST比对，发现与其他物种的PKS基因具有很高的相似性，其中与水稻胡麻斑病菌的聚酮体合成酶相似性达91%。

摘要： 玉米大斑病菌是引起玉米大斑病的病原真菌，该病害对玉米产量及品质造成严重的影响。玉米大斑病菌从孢子的萌发、附着胞形成及成熟到侵入寄主体内是一个复杂的过程，可通过不同的信号转导途径来调控。研究表明，Ca2+信号转导途径对桃褐腐病菌（Monilinia fructicola）、水稻胡麻斑菌（Cochliobolusmiyabeanus）附着胞的形成及致病性有重要的调控作用。PKC是Ca2+途径中是一族磷脂依赖的丝／苏氨酸激酶，由二酰甘油(DAG)、Ca2+等第二信使激活。研究发现，PKC基因在真菌中具有重要的功能，如Oeser通过基因敲除的方法研究了玉米小斑病菌的PKC基因，他尝试了各种方法都没有得到该基因的敲除突变体，推测PKC基因在玉米小斑病菌的代谢过程中起着关键的作用，被敲除很可能引起致死突变。Dickman等在紫花苜蓿炭疽病病原菌中得到的PKC基因敲除突变体不能形成附着胞、不侵入完整的寄主内部。但是，这种突变体可通过人工伤口侵入寄主，形成典型的炭疽病病斑。本实验室已经克隆了玉米大斑病菌PKC基因的全长，本研究将构建反义表达载体来研究该基因的功能。

摘要： 本研究采用两套常规Ht单基因鉴别品种(OH43Htl、OH43Ht2、OH43Ht3、OH43HtN和黄早四Htl、黄早四Ht2、黄早四Ht3、黄早四HtN和OH43)，对2007至2009年间分别采自云南省13个地区的81份玉米大斑病菌菌株进行了生理小种鉴定和利用分子标记对它们进行了交配型分析。结果表明，云南省玉米大斑病菌生理小种和交配型组成复杂。81个菌株可分为0、l、2、3、12、23、2N、3N、12N、23N和123N等11个小种类型，其中能克服鉴别品种上所有显性抗病基因的123N小种占22.2%，为优势小种；12N号和23N号小种均为16.0%，0号小种为12.3%，l、2、23等3小种均为6.2%，12号和2N号小种均为4.9%，3N号小种为3.7%，3号小种为2.5%。依据分子标记81个菌株可分成A、a和Aa三种交配型及中性菌株，分别占49.4%，12.3%，29.6%和8.6%。即使在同一地块分离到的菌株，也存在不同的交配型，表明这些交配型的存在，可能与大斑病菌生理小种复杂有关。国内少有研究涉及到云南玉米大斑病菌生理小种研究，只是采集很少样本作为代表，未曾大范围地、系统地研究这一病菌的致病分化。因此，本项目结果丰富了云南省这一立体气候条件下的玉米大斑病菌研究基础，为抗病育种和品种布局提供了实验依据。

摘要： 玉米大斑病是由玉米大斑病菌(Setosphaeria turcica)引起的玉米叶部重要病害，在流行年份常造成严重的经济损失。许多植物病原真菌的生长发育都受到细胞外信号转导途径的调控，尤其是MAPK (Mitogen-activated protein kinase)途径对植物病原真菌的生长发育和致病性的调节作用受到人们越来越多的关注。本实验室已克隆到了I个玉米大斑病菌MAPK基因STKl，获得了该基因的敲除突变体，并初步明确了STKl对病菌分生袍子发育、渗透胁迫调节等有重要的调控作用(未发表)。在此基础上，本研究拟构建玉米大斑病菌STK1正义诱导表达载体，为进一步研究STKI在超表达情况下基因的功能奠定基础。

摘要： 玉米大斑病是威胁玉米生产的一种重要叶部真菌病害,常给玉米生产造成巨大经济损失.引起玉米大斑病的病菌,是玉蜀黍凸脐蠕孢(Setosphaeria turcica).研究表明,病原真菌的生长、发育以及致病性主要受胞外的信号转导途径调控,其中cAMP信号转导途径在病菌的生长发育和致病过程中发挥了重要作用,蛋白激酶A (PKA)是该途径中cAMP的主要效应分子,它又称为cAMP依赖性蛋白激酶,是由两个催化亚基(PKA-C)和两个调节亚基(PKA-R)组成的异源四聚体蛋白.大量的研究证实,许多真菌菌丝的生长、毒力、致病性、黑色素的形成等都与PKA有密切的关系.本研究在已获得PKA催化亚基基因PKA-C部分编码序列的基础上，以不同碳源培养条件下的玉米大斑病菌01-23为材料，采用半定量RT-PCR方法分析玉米大斑病菌在不同培养条件下的PKA-C基因的表达调控规律。结果表明，以葡萄糖作为碳源的培养条件下，菌落的扩展速度比同期的蔗糖培养条件下缓慢，但是颜色呈黑褐色，且能产生大量分生抱子。蔗糖培养条件下菌丝生长很快，但菌落呈灰白色，几乎不产生分生饱子。半定量RT-PCR分析发现不同的碳源能够对PKA-C基因的表达水平产生明显的影响。

摘要： 玉米大斑病(Northern corn leaf blight,NCLB)是一种严重的叶枯型病害,主要为害玉米叶片、叶鞘和苞叶.玉米大斑病菌无性态为玉米大斑凸脐蠕孢菌(Exserohilum turcicum),有性态为大斑刚毛座腔菌(Setosphaeria turcica).真菌的有性生殖是由交配型基因(MAT)控制的,研究其交配型基因对玉米大斑病害的预防与控制具有重要的意义.本研究以未知交配型的玉米大斑病菌为材料，利用改良的微波炉法提取了病菌的基因组DNA，根据已公开发表的子囊菌交配型基因MATT-1和MATT-2的保守结构域设计引物，分别克隆到大小为781bp的MATI-1片段和905bp的MATT-2片段。本研究还对采自吉林省不同地区的34个玉米大斑病菌进行分离，并利用扩增玉米大斑病菌交配型基因的分子生物学方法检测。结果发现，34个玉米大斑病菌中，有14个只含有MATT-1基因，5个只含有MATI-2基因，15个同时含有MATT-1和MATI-2基因。因此推测，吉林省玉米大斑病菌的交配型趋向于两性化，使得病菌之间的有性杂交机会及选择性扩大，从而使其变异途径和方式更加复杂。

摘要： 玉米大斑病菌为异宗配合真菌,有性杂交可增强病菌的致病性或形成新的致病小种.两性菌株的出现使得病菌之间的有性杂交机率及选择性扩大,使其变异程度更加复杂.本试验以玉米大斑病菌两性菌株0312为研究材料,通过与标准菌株9916(交配型为A)和9962(交配型为a)对峙培养,发现该菌株与两个标准菌株对峙培养后均可产生子囊壳和子囊,菌株0312自交也可产生子囊壳,但不产生子囊.

摘要： 玉米大斑病是由大斑刚毛球腔菌(Setosphaeria turcica)引起的玉米叶部病害，其分布较广，危害严重，是一种世界性的病害，在流行年份常造成重大经济损失。

摘要： 本文介绍2008年，对采集自云南、贵州34个市、县的大斑病标样进行分离和纯化，获得32份大斑突脐孢分离物。在温室条件下通过在Ht单基因(Htl,Ht2,Ht3和HtN)鉴别寄主喷雾接种鉴定进行了生理小种鉴别。

摘要： 本发明涉及一株具有诱导玉米抗玉米大斑病作用的芽孢杆菌及应用，所述具有诱导玉米抗玉米大斑病作用的芽孢杆菌为巨大芽孢杆菌Bacillus megaterium，所述巨大芽孢杆菌的保藏编号是CGMCC No.17573，保藏时间为2019年4月16日；本发明的巨大芽孢杆菌可以通过种子处理免疫激发诱导玉米在种子萌发和玉米生长期间产生对玉米大斑病的抗性，激活玉米的防御反应，激发免疫防控玉米大斑病，且时效长，不污染环境和土壤，是一项绿色、轻简化的玉米大斑病绿色防治新方法，具有很广阔的应用和推广前景。

摘要： 本发明涉及一种玉米大斑病菌分子检测引物及其检测方法，属于农作物病害检测和生物技术领域。该特异性引物包括上游引物ESF：5’‑GCCGGCTGCCAATTGTTTTA‑3’，下游引物ESR：5’‑CCCATGTCTTTTGCGCACTT‑3’；采用上述引物经PCR扩增和琼脂糖凝胶电泳可在玉米大斑病菌纯DNA、带菌的玉米叶片或叶鞘中特异性地扩增出片段长度为356bp的特异性扩增产物。本发明检测引物特异性强、灵敏度高，检测方法实用性好，操作简便快捷；本发明能实现玉米大斑病的早期检测，还能有效区分玉米上的灰斑病、圆斑病和小斑病，对玉米大斑病的早期预警和防控，防治病害的扩散蔓延具有重要意义。

摘要： 本发明提供一种玉米大斑病菌产孢培养基及其应用，所述的玉米大斑病菌产孢培养基每升中含有以下原料组分：甘露醇20~25 g、蛋白胨3~5 g、新鲜玉米叶40~60 g、高粱粒30~50 g、琼脂粉14~16 g。玉米大斑病菌在该产孢培养基25°C黑暗培养10~15 d，用灭菌毛笔沾无菌水刷去玉米大斑病菌表层气生菌丝，25°C光暗交替培养72 h，即产生大量形态一致、成熟度一致的分生孢子。利用该培养基培养产生的玉米大斑病菌分生孢子进行玉米品种抗病性鉴定，可评价玉米品种资源对大斑病的抗性水平，这将对玉米大斑病的防控起到积极作用。

摘要： 本发明涉及植物病理学，具体地涉及玉米大斑病菌弱毒菌(STAM‑226)及其应用，具体涉及玉米大斑病菌弱毒菌及其在玉米大斑病防治中的应用。本发明通过ATMT转化、筛选、鉴定、盆栽实验和田间实验,获得对玉米大斑病具有显著控制作用的玉米大斑病菌弱毒菌株，即大斑刚毛座腔菌(Setosphaeria turcica),保藏编号为：CGMCC NO.20269。试验结果表明，先接种玉米大斑病菌弱毒菌株,1‑3天后接种玉米大斑病菌强毒菌株STAM‑YC，各个生育期都表现出显著的弱毒交叉保护作用。其中玉米大斑病菌弱毒菌株接种2d后接种STAM‑YC对玉米大斑病的防控效果最显著，平均达到89.6％。玉米大斑病菌弱毒菌株防治玉米大斑病对人畜、昆虫和作物安全,环境友好。

摘要： 本发明提供了一种玉米大斑病菌LAMP检测引物及其快速检测方法和应用，专用于玉米大斑病菌的特异性检测，属于农作物病害检测和生物技术领域，设计了一种玉米大斑病菌LAMP检测引物，包括外引物F3和B3，以及内引物FIP和BIP，见序列表。基于该引物建立的玉米大斑病菌检测方法，经过LAMP恒温扩增后显色反应或琼脂糖凝胶电泳检测，可观察到绿色荧光或出现LAMP特征性的梯形条带。所发明的LAMP检测引物及其检测方法能在生产实践中实现感染玉米大斑病菌植株的快速、灵敏、准确检测，同时可用于田间病害的早期诊断和病菌的监测、鉴定，为玉米大斑病的早期预警和防控提供可靠的技术和理论依据。

摘要： 本发明涉及一种区分玉米大斑病菌交配型的分子检测方法及其应用，采用两对特异引物是St01‑1F/St01‑1R和St02‑1F/St02‑1R，通过改良的CTAB 法提取待检测样本的基因组DNA，PCR扩增结果用1.0%的琼脂糖凝胶电泳进行分析，使用凝胶成像系统记录电泳结果，利用DL2000的DNA Marker判断DNA 片段的大小。本发明提供了一种更加便捷、快速的检测玉米大斑病菌交配型的分子检测方法，其检测结果更加可靠、特异和稳定，适用于大批量的玉米大斑病菌交配型的快速检测。

摘要： 本发明提供一种玉米大斑病菌产孢培养基及其应用，所述的玉米大斑病菌产孢培养基每升中含有以下原料组分：甘露醇20~25 g、蛋白胨3~5 g、新鲜玉米叶40~60 g、高粱粒30~50 g、琼脂粉14~16 g。玉米大斑病菌在该产孢培养基25°C黑暗培养10~15 d，用灭菌毛笔沾无菌水刷去玉米大斑病菌表层气生菌丝，25°C光暗交替培养72 h，即产生大量形态一致、成熟度一致的分生孢子。利用该培养基培养产生的玉米大斑病菌分生孢子进行玉米品种抗病性鉴定，可评价玉米品种资源对大斑病的抗性水平，这将对玉米大斑病的防控起到积极作用。

摘要： 本发明涉及一种玉米大斑病菌分子检测引物及其检测方法，属于农作物病害检测和生物技术领域。该特异性引物包括上游引物ESF：5’-GCCGGCTGCCAATTGTTTTA-3’，下游引物ESR：5’-CCCATGTCTTTTGCGCACTT-3’；采用上述引物经PCR扩增和琼脂糖凝胶电泳可在玉米大斑病菌纯DNA、带菌的玉米叶片或叶鞘中特异性地扩增出片段长度为356bp的特异性扩增产物。本发明检测引物特异性强、灵敏度高，检测方法实用性好，操作简便快捷；本发明能实现玉米大斑病的早期检测，还能有效区分玉米上的灰斑病、圆斑病和小斑病，对玉米大斑病的早期预警和防控，防治病害的扩散蔓延具有重要意义。

摘要： 玉米大斑病菌的STK1基因在酵母体内对钠盐具有非常强的抵抗能力，由于钠盐是植物主要的盐胁迫因子，因此本发明研究了STK1基因在模式植物拟南芥中的抗盐能力。通过转化获得含STK1基因的转基因株系。抗盐性分析发现，转基因株系种子萌发率高于野生型，根长于野生型，成苗受影响的程度小于野生型，表明STK1基因提高了植物的抗盐能力。在盐处理后，渗透调节物质游离脯氨酸、可溶性糖、ABA含量在转基因株系中的含量及抗盐相关基因DR29A、DREB2A的表达量均比野生型高，从生化和分子水平上表明STK1基因提高了植物的抗盐能力。STK1基因在拟南芥中的抗盐功能为转基因植物新品种的培育奠定了理论和生产实践基础。

摘要： 本发明涉及具有提高的病原体抗性或耐受性，特别是针对引起玉米大斑病的病原体(即玉米大斑病菌)的提高的抗性或耐受性的玉米植物。这样的玉米植物可表征为具有包含一种或多种抗性基因的特定QTL等位基因或者特定分子标记。本发明还涉及用于生成这样的玉米植物的方法，以及用于鉴定这样的玉米植物的方法。