发酵条件优化

摘要： 胶原蛋白是结缔组织中一种重要蛋白质,具有抗皱、抗老化和补钙壮骨的功效,在食品工业中应用广泛。由于胶原蛋白的需求量大,因此利用重组微生物生产胶原蛋白成为近年来的研究热点。该文采用重组有类人胶原蛋白基因的毕赤酵母,通过优化培养基成分,使其在无机盐培养基中表达胶原蛋白。首先,类人胶原蛋白在每24 h补加体积分数1.5%甲醇诱导120 h后的产量可达18.87 mg/L,进而将无机盐培养基中盐浓度降至1/3,有效避免了类人胶原蛋白的水解,也减少了重组毕赤酵母菌株分泌的杂蛋白量。进一步添加1 g/L L-脯氨酸等辅助营养物使类人胶原蛋白的产量提高至40.26 mg/L,为初始类人胶原蛋白表达量的2倍。结果表明,添加氨基酸等氮源能显著提高重组毕赤酵母的类人胶原蛋白分泌量,为重组类人胶原蛋白的发酵生产提供了指导。

摘要： 【目的】芽孢杆菌Z21发酵液对黑曲霉、康氏木霉等真菌有拮抗性,探究Z21菌抑菌活性物质稳定性及抑菌活性分析,可为开发天然防腐剂提供参考。【方法】通过牛津杯法,以康氏木霉为指示菌,优化Z21菌产抑菌活性物质的发酵条件,探讨不同温度、紫外线、pH、作用时间、酶和金属离子对Z21菌抑菌活性物质稳定性的影响;测定硫酸铵沉淀法提取的粗提物MIC及对康氏木霉孢子萌发和菌丝生长的影响。【结果】当发酵条件为500 mL锥形瓶装液体培养基150 mL、接种量3%、发酵时间60 h、发酵温度30°C、转速140 r·min^(-1)时,150μL无菌发酵液对康氏木霉菌丝生长的抑制率为72%左右,粗提物的MIC为25 mg·mL^(-1)。在紫外光波长为260 nm和280 nm时,经25 mg·mL^(-1)的粗取物处理后的康氏木霉菌液紫外吸光值升高,说明菌丝的核酸和蛋白质有泄露。Z21菌发酵液耐热,耐酸、碱,对紫外线、许多酶和金属离子不敏感。扫描电镜观察显示:Z21菌处理后的康氏木霉菌丝比较纤细,不分化孢子梗。【结论】Z21菌发酵液对康氏木霉的生长和繁殖均受到抑制,抑菌活性物质稳定性良好。

摘要： 针对玉米秸秆降解困难、利用率低的问题,本文筛选构建了由枯草芽孢杆菌WF-8(Bacillus subtilis WF-8)、地衣芽孢杆菌WF-11(B.lincheniformis WF-11)、蜡状芽孢杆菌WS-1(B.cereus WS-1)和黑胡桃链霉菌WF-10(Streptomyces nogalater WF-10)组成的高效降解复合菌系HD并进行秸秆降解效果评价,为高效降解玉米秸秆复合菌剂的研制和开发提供理论依据。本研究通过单因素试验结合正交试验和响应面试验,对复合菌系HD产酶培养基及发酵条件进行优化,液态和固态发酵试验评价复合菌系HD对玉米秸秆的降解效果。结果表明,复合菌系HD最佳碳氮源为秸秆粉和(NH_(4))_(2)SO_(4),最适添加量分别为15 g/L和4 g/L;复合菌系HD最优发酵条件为:温度34°C、接种量5%、时间6 d和pH7.2。优化后的复合菌系纤维素酶活为164.21 U/mL,是优化前的1.90倍,高于单菌酶活。将构建的复合菌系HD分别接种到液体发酵培养基和固体发酵培养基后,玉米秸秆降解率均显著高于单菌及对照组,降解率分别达到了47%和63.6%。研究结果表明复合菌系HD在降解玉米秸秆方面具有较大潜力,为高效降解玉米秸秆复合菌剂的研制和开发奠定了基础。

摘要： 为有效防治烟草普通花叶病毒病(TMV),从土壤中分离筛选到1株抗TMV的细菌菌株Z5,经形态学、生理生化和分子生物学鉴定为贝莱斯芽胞杆菌(Bacillus velezensis),该菌培养液对TMV体外抑制率达到96.40%,田间小区试验对烟草普通花叶病毒病的防效为50.43%。通过单因素法优化Z5发酵体系,最适培养基为NB培养基,葡萄糖、酵母膏分别作为碳源和氮源,最优发酵条件为初始pH 7.0、装液量100 mL/250 mL、28°C发酵60~72 h,优化后Z5菌数增加44.38%且发酵液对TMV抑制效果稳定,抑制率达到98.71%。

摘要： 为获得对烟草黑胫病(tobacco black shank)具有较好拮抗作用的菌株,从食腐昆虫美洲大蠊Periplaneta americana肠道分离纯化得到1株对烟草黑胫病具有较强抑制作用的D5-8菌株,拟进一步明确该菌株的分类地位,优化其发酵条件并测定其对烟草黑胫病的防治效果。利用形态特征、生理生化特性观察及16S rRNA基因序列分析对D5-8菌株进行鉴定;以细菌发酵液OD600值及对病原菌的抑制率为指标,对其发酵培养基和发酵条件进行单因素试验及正交试验;通过室内盆栽试验,明确菌株D5-8对烟草黑胫病的防治效果。结果表明,经平板对峙试验发现菌株D5-8对烟草寄生疫霉的抑制率达66.80%;通过形态特征和生理生化特征初步确定菌株D5-8为芽胞杆菌属Bacillus,结合16S rRNA基因序列分析鉴定菌株D5-8为特基拉芽胞杆菌Bacillus tequilensis;其最适培养基:牛肉浸膏8 g,酵母浸粉5 g,麦芽糖10 g,蒸馏水1000 mL;最佳的发酵条件为温度28°C、初始pH 6、转速210 r/min、装液量30 mL、接种量2%、培养时间60 h、光照时间4 h;盆栽试验结果表明,发酵条件优化后D5-8发酵液(10^(8) cfu/mL)对烟草黑胫病的保护防效和治疗防效可达66.89%和53.72%,均高于原始发酵液的61.84%和51.83%。研究结果为特基拉芽胞杆菌D5-8生防菌剂的开发及其对烟草黑胫病的防治应用提供了理论依据。

摘要： 为提高枯草芽孢杆菌FHYB201030的表面活性素生产能力,本文以枯草芽孢杆菌FHYB201030为试验菌株,CPC-BTB(氯化十六烷基吡啶-溴百里酚蓝)值为考核指标,利用单因素实验、Plackett-Burman试验、最陡爬坡试验和响应面试验进行优化,筛选出产表面活性素的最优发酵条件。Plackett-Burman试验筛选出对表面活性素产量影响显著的因素为温度、乳糖、谷氨酸(Glu),采用最陡爬坡设计和Box-Behnken中心组合设计三因素三水平试验,计算得到表面活性素产量最高的培养基成分为乳糖25 g/L、酪蛋白10 g/L、牛肉膏3 g/L、蛋白胨10 g/L、NaCl 5 g/L、Mn;0.5 mmol/L、Glu 2.5 g/L;最佳培养条件为温度40°C、转速200 r/min、装液量30%(体积比)。在上述发酵条件下,枯草芽孢杆菌FHYB201030表面活性素的产量为0.48 mg/mL,较优化前的0.35 mg/mL提高34.56%。研究结果为提高表面活性素生产水平奠定良好的基础。

摘要： 为了进一步提高发酵法生产腺苷的效率,该研究以枯草芽孢杆菌(Bacillus subtilis)XGL为供试菌株,通过单因素试验及正交试验探究VB_(1)、VB_(3)、VB_(5)、VB7、VB_(12)几种关键B族维生素对菌体生长及菌体产苷能力的影响。结果表明,VB_(1)、VB_(3)、VB_(5)、VB7、VB_(12)的最佳添加量分别为6.0 mg/L、5.2 mg/L、6.0 mg/L、2.4 mg/L、5.6 mg/L。此时的菌体生物量(OD_(600 nm)值)、腺苷产量和糖苷转化率分别为74.84、53.66 g/L、33.10%,较原始培养基分别增长了8.00%、19.35%和12.59%,说明B族维生素的这种复合添加量能够较好的提高腺苷的发酵生产能力,为枯草芽孢杆菌发酵法生产核苷类物质的培养基改良提供了一定的依据。

摘要： 该实验旨在从酒曲中分离一株降解氨基甲酸乙酯的功能菌株并对其产酶条件进行优化。通过生理生化鉴定和16S rDNA序列分析确定该菌株为解淀粉芽孢杆菌。通过单因素实验结合正交实验对该菌株进行产酶条件探索,最适产酶条件为:蔗糖25 g/L,蛋白胨12.5 g/L,硫酸镁0.075 g/L,氯化钠5 g/L,pH 6.0,温度33°C,接种量3%,转速180 r/min,其最佳酶活性为4477 U/L,是优化前的5.45倍。该研究为生物法降解氨基甲酸乙酯提供了新的功能菌株,并在酿造类调味品和发酵饮品的生产中。

摘要： 以获得耐高温纤维素酶菌株为目的,以育苗基质中农业生物质废弃物为原料,通过在发酵高温期(≥50°C)取样进行菌种筛选,结合菌株形态特征、生理生化指标及16S rDNA进化树分析结果,菌株E鉴定为枯草芽胞杆菌(Bacillus subtilis)。使用优化后的培养基,通过单因子试验方法对产酶条件进行优化,确定菌株E的发酵最优条件为培养温度50°C、时间48 h、初始pH值6.0、装液量100 mL、接种量2%~5%(体积分数),在该条件下发酵液OD值及酶活性达到最高。研究结果为生产生物活性育苗基质及农业废弃物资源化利用等研究提供参考。

摘要： 采用响应面法优化海洋放线菌DUT11产衣霉素的发酵工艺。在单因素试验基础上,选择可溶性淀粉的含量、黄豆粉的含量和发酵时间为试验因素,进行三因素三水平Box-Behnken中心组合设计。实验得到最佳发酵工艺:4%可溶性淀粉,2.5%黄豆粉,0.25%酵母粉,0.25%的K_(2)HPO_(4)和0.3%CaCO_(3),发酵温度28°C,初始pH值为7,发酵6d。最终得到衣霉素的实际产量为53.15mg·L^(-1),预测值为52.98mg·L^(-1),理论值与实验值很接近。结果证明,该响应面优化工艺合理、可行。

摘要： 超氧化物歧化酶(SOD)是一种金属酶,根据活性位点结合的金属离子不同,SOD可分为CuZn-SOD、Fe-SOD和Mn-SOD以及最近发现的Ni-SOD和Fe/Zn-SOD.由于SOD可以使超氧阴离子自由基歧化生成过氧化氢和分子氧,从而在防止氧化胁迫方面扮演重要作用.本文研究 蜡样芽孢杆菌M22超氧化物歧化酶(SOD)基因在毕赤酵母中的表达及其发酵条件优化。

摘要： 对前期筛选得到的咪唑立宾产生菌Eupenicillum sp.E-UN41,通过单因素筛选结合正交试验进行发酵培养基优化,得到了最佳配方：可溶性淀粉3.O％,黄豆粉3.5％,K2HPO40.005％,MgSO40.05％,CaCO30.2％；同时对摇瓶条件下液体发酵的主要影响因子温度、转速、初始pH值等进行实验探讨,确定了最佳培养参数：初始pH值7.0,种子菌龄48 h,装液量50 ml/500 ml,接种量2％,摇床转速250 r/min,发酵温度28°C；最佳发酵时间为7 d,其发酵效价相比对照提高38％。

摘要： 谷胱甘肽是生物体内一种重要的活性三肽,具有重要的生理功能.作为功能性食品添加剂,在食品工业有广泛的应用前景.在单因素发酵试验的基础上,通过正交试验,研究了酸酒酵母发酵生产谷胱甘肽的培养基的组成以及发酵培养条件.发酵培养基组成研究结果表明,在蔗糖浓度2％、酵母膏浓度1％、(NH4)2SO4浓度0.6％、半胱氨酸浓度则为4mmol/L的培养基中,摇床培养36 h,GSH产量可达155mg/L.发酵培养条件优化结果表明,在最佳发酵培养基中,发酵时间30h,发酵温度30C、摇床转速250r/min、接种量3％、250mL三角瓶装液量15mL,谷胱甘肽产量可达248mg/L,比发酵条件优化前提高了60％.

摘要： 对芽孢杆菌S13产中性蛋白酶培养基和发酵条件进行研究。结果表明,最佳培养基配方为：玉米粉4％、豆饼粉4％、麸皮2％、Na2HPO4·12H2O0.4％、KH2PO40.03％,pH7.5;最佳发酵条件为：装液量60mL／300mL,接种量1.5％,37°C,210 r／min,培养36h。在最佳培养基和最佳发酵条件下,发酵液上清蛋白酶活力达3260.09 U／ml。

摘要： 对芽孢杆菌S13产中性蛋白酶培养基和发酵条件进行研究。结果表明,最佳培养基配方为：玉米粉4％、豆饼粉4％、麸皮2％、Na2HPO4·12H2O0.4％、KH2PO40.03％,pH7.5;最佳发酵条件为：装液量60mL／300mL,接种量1.5％,37°C,210 r／min,培养36h。在最佳培养基和最佳发酵条件下,发酵液上清蛋白酶活力达3260.09 U／ml。

摘要： 对芽孢杆菌S13产中性蛋白酶培养基和发酵条件进行研究。结果表明,最佳培养基配方为：玉米粉4％、豆饼粉4％、麸皮2％、Na2HPO4·12H2O0.4％、KH2PO40.03％,pH7.5;最佳发酵条件为：装液量60mL／300mL,接种量1.5％,37°C,210 r／min,培养36h。在最佳培养基和最佳发酵条件下,发酵液上清蛋白酶活力达3260.09 U／ml。

摘要： 从一株实验室自筛菌中提取麦芽寡糖基海藻糖合成酶(MTSase)和麦芽寡糖基海藻糖海藻水解酶(MTSase),这两种热稳定性酶作用于淀粉生产海藻糖.本文讨论了产酶的最优培养基和最佳培养条件,优化后经酶法生物合成海藻糖浓度达到33.96g/L,淀粉的转化率达到67.38﹪.

摘要： 从一株实验室自筛菌中提取麦芽寡糖基海藻糖合成酶(MTSase)和麦芽寡糖基海藻糖海藻水解酶(MTSase),这两种热稳定性酶作用于淀粉生产海藻糖.本文讨论了产酶的最优培养基和最佳培养条件,优化后经酶法生物合成海藻糖浓度达到33.96g/L,淀粉的转化率达到67.38﹪.

摘要： 从一株实验室自筛菌中提取麦芽寡糖基海藻糖合成酶(MTSase)和麦芽寡糖基海藻糖海藻水解酶(MTSase),这两种热稳定性酶作用于淀粉生产海藻糖.本文讨论了产酶的最优培养基和最佳培养条件,优化后经酶法生物合成海藻糖浓度达到33.96g/L,淀粉的转化率达到67.38﹪.

摘要： 从一株实验室自筛菌中提取麦芽寡糖基海藻糖合成酶(MTSase)和麦芽寡糖基海藻糖海藻水解酶(MTSase),这两种热稳定性酶作用于淀粉生产海藻糖.本文讨论了产酶的最优培养基和最佳培养条件,优化后经酶法生物合成海藻糖浓度达到33.96g/L,淀粉的转化率达到67.38﹪.

摘要： 本发明提供了一种玫烟色棒束孢SCAU-IFCF02菌株液体发酵环境条件优化工艺。本发明针对所述菌株的特点确定影响发酵效果的关键单因素，在单因素实验基础上，建立了产孢量与培养温度、培养液初始pH值以及摇床转速之间的特定二次回归数学模型。各因素对产孢量的作用大小依次为：培养液初始pH值＞摇床转速＞培养温度；经过分析总结出玫烟色棒束孢SCAU-IFCF02菌株液体发酵的最佳环境条件为：培养温度24°C、培养液初始pH值6、摇床转速170？rpm，在此条件下该菌株产孢量可达3.1568×108个孢子/mL。本发明采用二次通用旋转回归设计，基于本发明可以保证所述菌株液体发酵中，优化试验次数少、周期短、精度高、综合性好、系统性强、信息量大，并有效消除了各回归系数之间的相关性。

摘要： 本发明提供了一种防御假单胞菌FD6发酵培养基及培养条件优化方法，涉及细菌发酵技术领域，能够有效提高防御假单胞菌FD6无菌上清滤液对番茄灰霉病菌的抑制率；该培养基含有碳源、氮源和无机盐；其中碳源为甘油、氮源为精氨酸、无机盐含有K2HPO4和MgSO4·7H2O；甘油添加量为5‰、精氨酸添加量为1.98‰、无机盐添加量为4‰；发酵的培养条件为：初始pH值为6.97、装液量为100 mL/L、转速为200 r/min、温度为24.12°C、发酵时间为60 h。本发明提供的技术方案适用于防御假单胞菌FD6的发酵过程。

摘要： 本发明公开了高产果胶酶酶活菌株的诱变方法及其固态发酵条件的优化，采用甲基磺酸乙酯(EMS)化学诱变法来突变菌株，其特征在于：该诱变方法包括以下步骤：将一定量的孢子悬液与EMS混合振荡反应一段时间后，NaS2O3终止反应，取一定量处理液稀释涂布到平板中进行培养；该高产果胶酶酶活菌株的诱变方法及其固态发酵条件的优化，在致死率为85.8％的条件下成功筛选出一株酶活高达19000U/g的产酶菌株。并通过后续优化试验确定菌株最适的培养基组分以及生长条件：豆粕20g，初始含水量68％，葡萄糖含量3％，蛋白胨含量1％，CaCl20.04％，FeCl30.04％，接种量4％，培养温度38°C，培养5天后酶活高达2200U/g，大大提高了菌株产酶能力，达到理想目标。

摘要： 本发明是一种富硒大球盖菇的发酵方法与用途，目的在于探索大球盖菇最佳富硒条件，为饮食补硒提供新的有效途径。以大球盖菇菌丝体生物量、有机硒和总硒含量、菌丝体硒有机化程度和富硒率为考察指标，通过冷冻真空干燥、超微粉碎等技术进行前处理，采用单因素和正交试验方法，运用电感耦合等离子体质谱（Inductively coupled plasma mass spectrometry,ICP‑MS）法检测菌丝体有机硒和总硒含量。确定适宜的大球盖菇液体培养条件、最佳富硒条件。本研究利用液体培养的生产周期短、成本低、产量高等优点，在大球盖菇富硒培养时菌丝体硒有机化程度高，是可利用的新的补硒有效途径。

摘要： 本发明属于菌株发酵技术领域，公开了一种产胞外黑色素菌株发酵条件的优化方法，所述产胞外黑色素菌株发酵条件的优化方法的初始pH为6.5、温度为30°C、L‑酪氨酸的浓度为1g/L；还包括：首先用Plackett‑Buman法筛选出初始pH、温度、L‑酪氨酸的含量三个影响大的因素然后进行最陡爬坡实验逐步改变三者的浓度，逼近最佳响应面区域；最后通过Box‑Behnken，利用SAS软件进行回归分析，得到各因素的最佳培养条件等。本发明得到的发酵液的黑色素量预测值为2.475g/L，较基础培养基提高了63.5％。

摘要： 本发明提供一种双相发酵制备鼠李糖脂条件优化的方法，该方法步骤如下：1)初步驯化；2)二次驯化；3)三次驯化；4)将步骤3)中驯化得到的菌液稀释分离，挑出若干支单菌落，将菌落接种于发酵培养基中发酵，获得铜绿假单胞菌发酵液；5)碳源优化测定；6)温度优化测定；7)pH优化测定；8)接种量优化。本发明的有益效果是：双相发酵技术，降低了表面活性剂鼠李糖脂的生产工艺成本，优化发酵条件，发酵生产的鼠李糖脂发酵液，液体呈透明状态，培养底物残留低，彻底改变了原来鼠李糖脂发酵液乳化严重的状态，所产生的表面活性剂对煤油乳化效果较好，抗硬水能力强，发泡效果和泡沫稳定。

摘要： 本发明提供了一种玫烟色棒束孢SCAU-IFCF02菌株液体发酵环境条件优化工艺。本发明针对所述菌株的特点确定影响发酵效果的关键单因素，在单因素实验基础上，建立了产孢量与培养温度、培养液初始pH值以及摇床转速之间的特定二次回归数学模型。各因素对产孢量的作用大小依次为：培养液初始pH值＞摇床转速＞培养温度；经过分析总结出玫烟色棒束孢SCAU-IFCF02菌株液体发酵的最佳环境条件为：培养温度24°C、培养液初始pH值6、摇床转速170rpm，在此条件下该菌株产孢量可达3.1568×108个孢子/mL。本发明采用二次通用旋转回归设计，基于本发明可以保证所述菌株液体发酵中，优化试验次数少、周期短、精度高、综合性好、系统性强、信息量大，并有效消除了各回归系数之间的相关性。

摘要： 本发明提供了一种出芽短梗霉菌PA‑2发酵培养基及发酵条件优化方法，涉及菌株培养技术领域，能够有效增加对出芽短梗霉菌PA‑2进行发酵培养时的孢子数，提高生产效率；该培养基包括所述培养基包括：葡萄糖、大豆粉和无机盐；所述无机盐包括：NaCI、MgSO

摘要： 本发明涉及一株高产γ‑聚谷氨酸的耐盐芽孢杆菌及其发酵条件优化。本发明从有机培养的大豆中分离了一株新型高效生产γ‑多聚谷氨酸的耐盐芽孢杆菌F29。通过优化发酵条件，γ‑聚谷氨酸的产量可达到50.9g/L，发酵速率1.36g/L/h，底物转化率为2.23gγ‑聚谷氨酸/g谷氨酸，是已有研究的两倍以上。本发明利用耐盐芽孢杆菌生产多聚谷氨酸，在产量、产率尤其是转化率方面具有很强的优势，在工业应用中可以大大节约生产成本。

摘要： 本发明公开了一种基于遗传算法的黄伞菌发酵条件优化及动力学模型的构建方法，在实验室摇瓶条件下以单因素实验和正交设计实验确定影响黄伞菌多糖发酵条件的因素和其取值范围；对发酵培养基组分及发酵条件进行神经网络建模和遗传算法寻优，由于遗传的目标函数不需要明确的数学和导数表达式，故可利用它计算寻优，以求最佳的黄伞菌发酵培养基组分的配比及发酵条件的最佳组合；采用优化的培养基配方和发酵条件进行黄伞菌液体深层培养实验，在实验数据基础上绘制进程曲线，利用遗传算法对黄伞菌发酵动力学进行模拟，对比Monod方程和Logistic方程在描述黄伞菌生长动力学时的优劣，并利用该算法确定发酵动力学模型的参数。