MG-63细胞

摘要： 目的探讨槲皮素对骨肉瘤MG-63细胞生长周期及磷脂酰肌醇-3-激酶(PI3K)-蛋白激酶B(Akt)-哺乳动物雷帕霉素靶蛋白(mTOR)通路相关蛋白表达的影响。方法取人骨肉瘤MG-63细胞分为对照组和实验组,分别给予0.1%二甲基亚砜、200μg/mL槲皮素处理24 h、48 h、72 h。使用流式细胞仪检测各组细胞的生长周期,运用免疫蛋白印迹法检测各组细胞中Akt、磷酸化Akt(p-Akt)、mTOR、磷酸化mTOR(p-mTOR)蛋白表达水平。结果干预后48 h,与对照组比较,实验组的G_(1)期细胞比例增加,而S期细胞比例减少,且p-Akt、p-mTOR蛋白相对表达水平降低(均P<0.05)。结论槲皮素可能通过阻断PI3K-Akt-mTOR通路阻滞骨肉瘤MG-63细胞生长,从而发挥抗骨肉瘤效应。

摘要： 目的:通过分子对接技术及细胞实验探究补肾健脾活血方对过表达Wnt信号通路抑制性蛋白Dickkopf相关蛋白1(DKK-1)及硬化蛋白(Sost)的MG63细胞中Wnt信号通路相关蛋白表达的影响,以探究补肾健脾活血方防治骨质疏松症(OP)的作用机制。方法:从TCMSP、BATMAN、Uniport数据库中筛选转化补肾健脾活血方的有效成分,GeneCards数据库中检索OP相关靶点,构建“成分-靶点-疾病”网络,使用CytoNCA插件对网络进行拓扑分析,筛选核心药物成分,使用Autodock Tools对有效成分与DKK-1及Sost进行分子对接计算;使用含药血清培养通过过表达质粒转染上述两种抑制性蛋白转染的MG63细胞,微量酶标法测定血清干预后细胞内碱性磷酸酶(ALP)活性,流式细胞仪检测细胞钙离子浓度,Western blotting法检测Wnt3a、β-catenin的表达。结果:补肾健脾活血方主要活性成分中排名前5的活性成分与DKK-1均具有较好的结合活性,有2种成分与Sost具有较好的结合活性;ALP水平方面,除空载对照组外,经含药血清干预的细胞ALP水平较空白血清干预细胞升高(P<0.01);含药血清干预的各组细胞钙离子浓度均较经空白血清干预细胞降低(P<0.05);除过表达DKK-1+Sost组外,含药血清干预的细胞中Wnt3a及β-catenin蛋白水平较空白血清干预的细胞升高,差异有统计学意义(P<0.01)。结论:补肾健脾活血方可能通过提高Wnt3a蛋白的表达量,抑制DKK-1及Sost对Wnt信号通路的抑制作用,影响成骨细胞中Wnt信号通路的表达,从而提高成骨细胞的活性及分化能力,以防治OP。

摘要： 目的探讨番茄红素(LP)对人骨肉瘤MG63细胞增殖及荷瘤裸鼠肿瘤抑制作用和其潜在机制。方法选取对数生长期的人骨肉瘤MG63细胞,根据实验目的分为5组:对照组、LP 5、10和20μg/mL组和顺铂(DDP,40μg/mL)组;LP或DDP处理细胞48 h后,MTT检测细胞抑制率、流式细胞术检测细胞周期和细胞凋亡的改变。背部皮下注射MG63细胞建立荷瘤裸鼠模型,设为模型组、LP 10、20、40 mg·kg^(-1)·d^(-1)组和DDP(2 mg/kg)组,每组10只;接种后使用LP或DDP处理14 d后处死裸鼠,称量瘤体质量并计算抑瘤率,Western blot检测肿瘤组织中小GTPase RhoA/Rho相关卷曲螺旋形成的蛋白激酶(ROCK)信号通路相关蛋白的表达水平。结果在体外试验中,与对照组比较,LP 5、10、20μg/mL组和DDP组细胞增殖抑制率明显升高、细胞周期G_(0)/G_(1)期明显延长,细胞凋亡率明显升高,差异有统计学意义(P<0.05)。在体内试验中,LP 20、40 mg·kg^(-1)·d^(-1)组瘤质量较模型组明显减轻、抑瘤率明显升高,肿瘤组织RhoA和ROCK蛋白表达水平下调,差异有统计学意义(P<0.05)。结论LP阻碍了MG63的生长,可能与抑制RhoA/ROCK信号通路有关。

摘要： 背景:在材料表面复合RGD多肽可诱导成骨细胞整合素基因的表达,促进成骨细胞黏附在生物材料的表面并分化成熟,促进新骨形成。目的:分析RGD多肽修饰国产多孔钽后对MG63细胞整合素/黏着斑激酶信号通路的影响。方法:制备RGD多肽修饰的多孔钽材料。将MG63细胞分别接种于多孔钽、RGD多肽修饰的多孔钽材料表面,以单纯培养的MG63细胞为空白组,培养1,3,5,7 d时,采用CCK-8法检测细胞增殖;培养1,3,5 d时,倒置显微镜下观察细胞生长状态;培养3,5 d时,扫描电镜观察细胞黏附;培养5 d时,采用Western-blot与RT-PCR法检测Ⅰ型胶原、整合素β1与黏着斑激酶表达。结果与结论:①RGD修饰组培养3,5,7 d的细胞增殖快于多孔钽组、空白组(P0.05);②倒置显微镜显示,培养1 d时,多孔钽组、RGD修饰组细胞贴附在材料边缘,细胞数量随着培养时间的延长逐渐增加,其中RGD修饰组细胞数量及密集程度优于多孔钽组;③扫描电镜显示,培养3 d时,多孔钽组、RGD修饰组材料表面均可见细胞黏附生长,细胞在材料孔壁及孔隙内黏附生长,伸出伪足嵌入孔洞内;5 d时,细胞分泌大量细胞外基质,细胞通过基质相互连接并逐渐覆盖材料表面,其中RGD修饰组细胞生长状态、基质分泌及细胞覆盖面积优于多孔钽组;④Western-blot检测显示,RGD修饰组Ⅰ型胶原、整合素β1蛋白表达高于多孔钽组、空白组(P<0.05),多孔钽组Ⅰ型胶原、整合素β1、黏着斑激酶蛋白表达高于空白组(P<0.05);⑤RT-PCR检测显示,RGD修饰组Ⅰ型胶原、整合素β1与黏着斑激酶mRNA表达高于多孔钽组、空白组(P<0.05),并且多孔钽组高于空白组(P<0.05);⑥结果表明,RGD多肽修饰多孔钽后可上调细胞膜上Ⅰ型胶原、整合素β1表达激活整合素/黏着斑激酶信号通路,促进细胞黏附、生长。

摘要： 背景:在材料表面复合RGD多肽可诱导成骨细胞整合素基因的表达,促进成骨细胞黏附在生物材料的表面并分化成熟,促进新骨形成.目的:分析RGD多肽修饰国产多孔钽后对MG63细胞整合素/黏着斑激酶信号通路的影响.方法:制备RGD多肽修饰的多孔钽材料.将MG63细胞分别接种于多孔钽、RGD多肽修饰的多孔钽材料表面,以单纯培养的MG63细胞为空白组,培养1,3,5,7 d时,采用CCK-8法检测细胞增殖;培养1,3,5 d时,倒置显微镜下观察细胞生长状态;培养3,5 d时,扫描电镜观察细胞黏附;培养5 d时,采用Western-blot与RT-PCR法检测Ⅰ型胶原、整合素β1与黏着斑激酶表达.结果 与结论:①RGD修饰组培养3,5,7 d的细胞增殖快于多孔钽组、空白组(P0.05);②倒置显微镜显示,培养1 d时,多孔钽组、RGD修饰组细胞贴附在材料边缘,细胞数量随着培养时间的延长逐渐增加,其中RGD修饰组细胞数量及密集程度优于多孔钽组;③扫描电镜显示,培养3 d时,多孔钽组、RGD修饰组材料表面均可见细胞黏附生长,细胞在材料孔壁及孔隙内黏附生长,伸出伪足嵌入孔洞内;5 d时,细胞分泌大量细胞外基质,细胞通过基质相互连接并逐渐覆盖材料表面,其中RGD修饰组细胞生长状态、基质分泌及细胞覆盖面积优于多孔钽组;④Western-blot检测显示,RGD修饰组Ⅰ型胶原、整合素β1蛋白表达高于多孔钽组、空白组(P<0.05),多孔钽组Ⅰ型胶原、整合素β1、黏着斑激酶蛋白表达高于空白组(P<0.05);⑤RT-PCR检测显示,RGD修饰组Ⅰ型胶原、整合素β1与黏着斑激酶mRNA表达高于多孔钽组、空白组(P<0.05),并且多孔钽组高于空白组(P<0.05);⑥结果表明,RGD多肽修饰多孔钽后可上调细胞膜上Ⅰ型胶原、整合素β1表达激活整合素/黏着斑激酶信号通路,促进细胞黏附、生长.

摘要： 目的:研究不同浓度白花丹素对骨肉瘤细胞MG-63凋亡迁移、基质金属蛋白酶(MMP)及Bcl-2、Bax、Ezrin蛋白表达的影响.方法:取对数生长期的骨肉瘤MG-63细胞,传代培养成细胞株后以随机法分成对照组、低剂量组、中剂量组、高剂量组.其中对照组加入到0.1％浓度的DMSO完全培养基中培养,低剂量组、中剂量组、高剂量组分别加入到浓度为5、10、20 μmol/L的白花丹素的有关培养基中培养.培养24 h后,采用Transwell法检测MG-63细胞迁移率、Hoechst33342染色法检测MG-63细胞凋亡率、Western blot法检测四组MG-63细胞的MMP-2、MMP-9、Bcl-2、Bax、Ezrin蛋白表达水平.结果:培养24 h后,低剂量组、中剂量组、高剂量组的骨肉瘤细胞MG-63凋亡率及Bax蛋白表达水平均较对照组升高(P＜0.05),且随白花丹素浓度的增加而升高(P＜0.05);骨肉瘤细胞MG-63的细胞迁移率、MMP-2、MMP-9、Bcl-2及Ezrin蛋白表达水平较对照组降低(P＜0.05),且随白花丹素浓度的增加而降低(P＜0.05).结论:白花丹素对骨肉瘤细胞MG-63凋亡的促进作用以及迁移的抑制作用明显,其作用机制可能与抑制骨肉瘤细胞MG-63中的MMP-2、MMP-9、Bcl-2、Ezrin蛋白表达及促进Bax蛋白表达有关,且浓度越高,抑制或促进作用越明显.

摘要： 目的 观察新型矿化胶原膜对MG63成骨样细胞体外细胞相容性的影响.方法 采用体外仿生矿化技术构建新型矿化胶原双层膜,致密层为Ⅰ型胶原,疏松层为纳米羟基磷灰石-胶原.进行HE染色和扫描电镜(SEM)观察MG63细胞在新型矿化胶原膜表面的生长和黏附情况;以新型矿化膜浸提液培养MG63细胞,另设空白对照组,检测MG63细胞的细胞周期和凋亡率.采用SPSS 17.0软件对数据进行统计学分析.结果 HE染色可见大量细胞附着在矿化胶原膜表面;SEM下观察细胞在胶原膜上生长良好,通过突起与粗糙表面紧密接触;细胞周期检测显示,对照组细胞的G0/G1期、S期、G2/M期比率分别为(74.05±0.45)％、(17.03±1.34)％、(8.93±1.02)％,矿化胶原膜组为(75.11±0.97)％、(16.32±0.89)％、(8.13±0.46)％,差异无统计学意义(P>0.05);对照组细胞的凋亡率为(4.25±1.26)％,矿化胶原膜组为(4.27±0.36)％,差异也无统计学意义(P>0.05).结论 矿化胶原膜对MG63细胞生长无抑制作用,具有良好的生物学性能.

摘要： 目的:探讨下调miR-19b表达对骨肉瘤MG63细胞侵袭、迁移能力的影响,并探讨可能机制.方法:采用脂质体转染法转染人骨肉瘤MG63细胞,实验分为空白组、miR-19b inhibitor NC组、miR-19b inhibitor组,采用细胞计数试剂盒-8(CCK-8)法检测细胞增殖情况,通过Transwell小室法检测各组细胞侵袭、迁移情况,通过免疫印迹(WB)法检测侵袭、迁移以及Wnt/β-连环蛋白(β-Catenin)通路相关蛋白表达情况.结果:与空白组、miR-19b inhibitor NC组相比,miR-19b inhibitor组miR-19b相对表达量、转染后48 h、72 h吸光度(A)值、侵袭与迁移细胞数、基质金属蛋白酶-2(MMP-2)、基质金属蛋白酶-9(MMP-9)、Wnt、细胞核β-Catenin表达水平显著降低(P＜0.05),细胞质β-Catenin表达水平显著升高(P＜0.05).结论:下调miR-19b表达可能通过抑制Wnt/β-Catenin信号通路激活,从而抑制骨肉瘤MG63细胞侵袭、迁移.

摘要： 目的:晚期糖化终产物(AGEs)与糖尿病骨质疏松症有关.研究发现AGEs能够影响成骨细胞的骨形成和破骨细胞的骨吸收,参与骨质疏松症的形成.本实验将研究AGEs对MG63细胞表达炎症因子IL-6的影响及其中的信号机制,对糖尿病骨质疏松症形成的机制阐明新观点.rn 方法:①购买AGEs,不同浓度的AGEs(0～400μg/ml)作用于MG63细胞24h后,通过MTT法检测AGEs对细胞生长的影响.②不同浓度的AGEs(0～200μg/ml)作用于MG63细胞24h,应用ELISA法检测AGEs对MG63细胞分泌炎症因子IL-6的影响;ELISA观察AGEs抑制剂AG、内质网应激抑制剂TUDCA、氧化应激抑制剂NAC及NADPH氧化酶抑制剂DPI对AGEs剌激MG63细胞分泌IL-6的影响.③不同浓度的AGEs(0～200μg/ml)作用于MG63细胞24h后,Western-blot检测AGEs对p_IRE/IRE、p-JNK/JNK、GRP78/β-actin表达的影响;Western-blot观察AGEs抑制剂AG、内质网应激抑制剂TUDCA、氧化应激抑制剂NAC、NADPH氧化酶抑制剂DPI对p-IRE/IRE、p-JNK/JNK、GRP78/β-actin表达水平的变化情况.rn 结果:①不同浓度AGEs作用于MG63细胞24h后,MTT结果 显示AGEs(0～200μg/ml)对细胞的生存率无明显变化;但是400μg/mlAGEs作用于MG63细胞24h后能够抑制细胞的生长(P＜0.05).②不同浓度AGEs作用于MG63细胞24h后,ELISA结果 显示AGEs(50～200μg/ml)可促进MG63细胞上调炎症因子IL-6表达(p＜0.01); AGEs抑制剂、内质网应激抑制剂、氧化应激抑制剂及NADPH氧化酶抑制剂能明显抑制AGEs上调炎症因子IL-6表达(p＜0.01).③不同浓度AGEs作用于MG63细胞24h后,Western blot结果 显示AGEs(50～200μg/ml)可上调p-IRE/IRE、p-JNK/JNK、GRP78/β-actin表达(P＜0.05);用AGEs抑制剂、内质网应激抑制剂、氧化应激抑制剂及NADKI氧化酶抑制剂预作用于MG63细胞1小时后再用AGEs(200μg/ml)刺激24h,Western blot结果显示p-IRE/IRE、p-JNK/JNK、GRP78/β-actin表达明显被阻断(P＜0.01).rn 结论:AGEs可促进MG63细胞分泌炎症因子IL-6,其机制与激活内质网应激相关.NAC及DPI能够逆转AGEs引起的p-IRE/IRE,p-JNK/JNK、GRP78/β-actin及IL-6上调,表明内质网应激的激活和NADK1氧化酶及氧化应激的活化相关.

摘要： 目的:晚期糖化终产物(AGEs)与糖尿病骨质疏松症有关.研究发现AGEs能够影响成骨细胞的骨形成和破骨细胞的骨吸收,参与骨质疏松症的形成.本实验将研究AGEs对MG63细胞表达炎症因子IL-6的影响及其中的信号机制,对糖尿病骨质疏松症形成的机制阐明新观点.rn 方法:①购买AGEs,不同浓度的AGEs(0～400μg/ml)作用于MG63细胞24h后,通过MTT法检测AGEs对细胞生长的影响.②不同浓度的AGEs(0～200μg/ml)作用于MG63细胞24h,应用ELISA法检测AGEs对MG63细胞分泌炎症因子IL-6的影响;ELISA观察AGEs抑制剂AG、内质网应激抑制剂TUDCA、氧化应激抑制剂NAC及NADPH氧化酶抑制剂DPI对AGEs剌激MG63细胞分泌IL-6的影响.③不同浓度的AGEs(0～200μg/ml)作用于MG63细胞24h后,Western-blot检测AGEs对p_IRE/IRE、p-JNK/JNK、GRP78/β-actin表达的影响;Western-blot观察AGEs抑制剂AG、内质网应激抑制剂TUDCA、氧化应激抑制剂NAC、NADPH氧化酶抑制剂DPI对p-IRE/IRE、p-JNK/JNK、GRP78/β-actin表达水平的变化情况.rn 结果:①不同浓度AGEs作用于MG63细胞24h后,MTT结果 显示AGEs(0～200μg/ml)对细胞的生存率无明显变化;但是400μg/mlAGEs作用于MG63细胞24h后能够抑制细胞的生长(P＜0.05).②不同浓度AGEs作用于MG63细胞24h后,ELISA结果 显示AGEs(50～200μg/ml)可促进MG63细胞上调炎症因子IL-6表达(p＜0.01); AGEs抑制剂、内质网应激抑制剂、氧化应激抑制剂及NADPH氧化酶抑制剂能明显抑制AGEs上调炎症因子IL-6表达(p＜0.01).③不同浓度AGEs作用于MG63细胞24h后,Western blot结果 显示AGEs(50～200μg/ml)可上调p-IRE/IRE、p-JNK/JNK、GRP78/β-actin表达(P＜0.05);用AGEs抑制剂、内质网应激抑制剂、氧化应激抑制剂及NADKI氧化酶抑制剂预作用于MG63细胞1小时后再用AGEs(200μg/ml)刺激24h,Western blot结果显示p-IRE/IRE、p-JNK/JNK、GRP78/β-actin表达明显被阻断(P＜0.01).rn 结论:AGEs可促进MG63细胞分泌炎症因子IL-6,其机制与激活内质网应激相关.NAC及DPI能够逆转AGEs引起的p-IRE/IRE,p-JNK/JNK、GRP78/β-actin及IL-6上调,表明内质网应激的激活和NADK1氧化酶及氧化应激的活化相关.

摘要： 目的:晚期糖化终产物(AGEs)与糖尿病骨质疏松症有关.研究发现AGEs能够影响成骨细胞的骨形成和破骨细胞的骨吸收,参与骨质疏松症的形成.本实验将研究AGEs对MG63细胞表达炎症因子IL-6的影响及其中的信号机制,对糖尿病骨质疏松症形成的机制阐明新观点.rn 方法:①购买AGEs,不同浓度的AGEs(0～400μg/ml)作用于MG63细胞24h后,通过MTT法检测AGEs对细胞生长的影响.②不同浓度的AGEs(0～200μg/ml)作用于MG63细胞24h,应用ELISA法检测AGEs对MG63细胞分泌炎症因子IL-6的影响;ELISA观察AGEs抑制剂AG、内质网应激抑制剂TUDCA、氧化应激抑制剂NAC及NADPH氧化酶抑制剂DPI对AGEs剌激MG63细胞分泌IL-6的影响.③不同浓度的AGEs(0～200μg/ml)作用于MG63细胞24h后,Western-blot检测AGEs对p_IRE/IRE、p-JNK/JNK、GRP78/β-actin表达的影响;Western-blot观察AGEs抑制剂AG、内质网应激抑制剂TUDCA、氧化应激抑制剂NAC、NADPH氧化酶抑制剂DPI对p-IRE/IRE、p-JNK/JNK、GRP78/β-actin表达水平的变化情况.rn 结果:①不同浓度AGEs作用于MG63细胞24h后,MTT结果 显示AGEs(0～200μg/ml)对细胞的生存率无明显变化;但是400μg/mlAGEs作用于MG63细胞24h后能够抑制细胞的生长(P＜0.05).②不同浓度AGEs作用于MG63细胞24h后,ELISA结果 显示AGEs(50～200μg/ml)可促进MG63细胞上调炎症因子IL-6表达(p＜0.01); AGEs抑制剂、内质网应激抑制剂、氧化应激抑制剂及NADPH氧化酶抑制剂能明显抑制AGEs上调炎症因子IL-6表达(p＜0.01).③不同浓度AGEs作用于MG63细胞24h后,Western blot结果 显示AGEs(50～200μg/ml)可上调p-IRE/IRE、p-JNK/JNK、GRP78/β-actin表达(P＜0.05);用AGEs抑制剂、内质网应激抑制剂、氧化应激抑制剂及NADKI氧化酶抑制剂预作用于MG63细胞1小时后再用AGEs(200μg/ml)刺激24h,Western blot结果显示p-IRE/IRE、p-JNK/JNK、GRP78/β-actin表达明显被阻断(P＜0.01).rn 结论:AGEs可促进MG63细胞分泌炎症因子IL-6,其机制与激活内质网应激相关.NAC及DPI能够逆转AGEs引起的p-IRE/IRE,p-JNK/JNK、GRP78/β-actin及IL-6上调,表明内质网应激的激活和NADK1氧化酶及氧化应激的活化相关.

摘要： 目的:晚期糖化终产物(AGEs)与糖尿病骨质疏松症有关.研究发现AGEs能够影响成骨细胞的骨形成和破骨细胞的骨吸收,参与骨质疏松症的形成.本实验将研究AGEs对MG63细胞表达炎症因子IL-6的影响及其中的信号机制,对糖尿病骨质疏松症形成的机制阐明新观点.rn 方法:①购买AGEs,不同浓度的AGEs(0～400μg/ml)作用于MG63细胞24h后,通过MTT法检测AGEs对细胞生长的影响.②不同浓度的AGEs(0～200μg/ml)作用于MG63细胞24h,应用ELISA法检测AGEs对MG63细胞分泌炎症因子IL-6的影响;ELISA观察AGEs抑制剂AG、内质网应激抑制剂TUDCA、氧化应激抑制剂NAC及NADPH氧化酶抑制剂DPI对AGEs剌激MG63细胞分泌IL-6的影响.③不同浓度的AGEs(0～200μg/ml)作用于MG63细胞24h后,Western-blot检测AGEs对p_IRE/IRE、p-JNK/JNK、GRP78/β-actin表达的影响;Western-blot观察AGEs抑制剂AG、内质网应激抑制剂TUDCA、氧化应激抑制剂NAC、NADPH氧化酶抑制剂DPI对p-IRE/IRE、p-JNK/JNK、GRP78/β-actin表达水平的变化情况.rn 结果:①不同浓度AGEs作用于MG63细胞24h后,MTT结果 显示AGEs(0～200μg/ml)对细胞的生存率无明显变化;但是400μg/mlAGEs作用于MG63细胞24h后能够抑制细胞的生长(P＜0.05).②不同浓度AGEs作用于MG63细胞24h后,ELISA结果 显示AGEs(50～200μg/ml)可促进MG63细胞上调炎症因子IL-6表达(p＜0.01); AGEs抑制剂、内质网应激抑制剂、氧化应激抑制剂及NADPH氧化酶抑制剂能明显抑制AGEs上调炎症因子IL-6表达(p＜0.01).③不同浓度AGEs作用于MG63细胞24h后,Western blot结果 显示AGEs(50～200μg/ml)可上调p-IRE/IRE、p-JNK/JNK、GRP78/β-actin表达(P＜0.05);用AGEs抑制剂、内质网应激抑制剂、氧化应激抑制剂及NADKI氧化酶抑制剂预作用于MG63细胞1小时后再用AGEs(200μg/ml)刺激24h,Western blot结果显示p-IRE/IRE、p-JNK/JNK、GRP78/β-actin表达明显被阻断(P＜0.01).rn 结论:AGEs可促进MG63细胞分泌炎症因子IL-6,其机制与激活内质网应激相关.NAC及DPI能够逆转AGEs引起的p-IRE/IRE,p-JNK/JNK、GRP78/β-actin及IL-6上调,表明内质网应激的激活和NADK1氧化酶及氧化应激的活化相关.

摘要： 目的:晚期糖化终产物(AGEs)与糖尿病骨质疏松症有关.研究发现AGEs能够影响成骨细胞的骨形成和破骨细胞的骨吸收,参与骨质疏松症的形成.本实验将研究AGEs对MG63细胞表达炎症因子IL-6的影响及其中的信号机制,对糖尿病骨质疏松症形成的机制阐明新观点.rn 方法:①购买AGEs,不同浓度的AGEs(0～400μg/ml)作用于MG63细胞24h后,通过MTT法检测AGEs对细胞生长的影响.②不同浓度的AGEs(0～200μg/ml)作用于MG63细胞24h,应用ELISA法检测AGEs对MG63细胞分泌炎症因子IL-6的影响;ELISA观察AGEs抑制剂AG、内质网应激抑制剂TUDCA、氧化应激抑制剂NAC及NADPH氧化酶抑制剂DPI对AGEs剌激MG63细胞分泌IL-6的影响.③不同浓度的AGEs(0～200μg/ml)作用于MG63细胞24h后,Western-blot检测AGEs对p_IRE/IRE、p-JNK/JNK、GRP78/β-actin表达的影响;Western-blot观察AGEs抑制剂AG、内质网应激抑制剂TUDCA、氧化应激抑制剂NAC、NADPH氧化酶抑制剂DPI对p-IRE/IRE、p-JNK/JNK、GRP78/β-actin表达水平的变化情况.rn 结果:①不同浓度AGEs作用于MG63细胞24h后,MTT结果 显示AGEs(0～200μg/ml)对细胞的生存率无明显变化;但是400μg/mlAGEs作用于MG63细胞24h后能够抑制细胞的生长(P＜0.05).②不同浓度AGEs作用于MG63细胞24h后,ELISA结果 显示AGEs(50～200μg/ml)可促进MG63细胞上调炎症因子IL-6表达(p＜0.01); AGEs抑制剂、内质网应激抑制剂、氧化应激抑制剂及NADPH氧化酶抑制剂能明显抑制AGEs上调炎症因子IL-6表达(p＜0.01).③不同浓度AGEs作用于MG63细胞24h后,Western blot结果 显示AGEs(50～200μg/ml)可上调p-IRE/IRE、p-JNK/JNK、GRP78/β-actin表达(P＜0.05);用AGEs抑制剂、内质网应激抑制剂、氧化应激抑制剂及NADKI氧化酶抑制剂预作用于MG63细胞1小时后再用AGEs(200μg/ml)刺激24h,Western blot结果显示p-IRE/IRE、p-JNK/JNK、GRP78/β-actin表达明显被阻断(P＜0.01).rn 结论:AGEs可促进MG63细胞分泌炎症因子IL-6,其机制与激活内质网应激相关.NAC及DPI能够逆转AGEs引起的p-IRE/IRE,p-JNK/JNK、GRP78/β-actin及IL-6上调,表明内质网应激的激活和NADK1氧化酶及氧化应激的活化相关.

摘要： 优化载胰岛素样生长因子-1 (IGF-1)、转化生长因子β1(TGF-β1)明胶缓释微球的载药浓度,研究IGF-1与TGF-β1明胶缓释微球复合涂层多孔钛对MG63细胞黏附、增殖及分化的影响.用粉末注射成形(MIM)技术制备孔隙度为60％的多孔钛;用改良冷凝聚合交联法制备明胶缓释微球并涂覆于多孔钛表面;体外细胞实验评价IGF-1、TGF-β1明胶缓释微球涂层多孔钛的细胞毒性及对MG63细胞功能的影响.结果显示，IGF-1和TGF-β1对MG63细胞作用具有时相性，IGF-1在细胞增殖方面优于TGF-β1,TGF-β1、在细胞分化方面优于IGF-1，两种因子联用有协同作用,TGF-1和TGF-β1，明胶缓释微球涂层多孔钛对MG63细胞的影响有浓度效应、时相性，两者联用具有协同作用。

摘要： 优化载胰岛素样生长因子-1 (IGF-1)、转化生长因子β1(TGF-β1)明胶缓释微球的载药浓度,研究IGF-1与TGF-β1明胶缓释微球复合涂层多孔钛对MG63细胞黏附、增殖及分化的影响.用粉末注射成形(MIM)技术制备孔隙度为60％的多孔钛;用改良冷凝聚合交联法制备明胶缓释微球并涂覆于多孔钛表面;体外细胞实验评价IGF-1、TGF-β1明胶缓释微球涂层多孔钛的细胞毒性及对MG63细胞功能的影响.结果显示，IGF-1和TGF-β1对MG63细胞作用具有时相性，IGF-1在细胞增殖方面优于TGF-β1,TGF-β1、在细胞分化方面优于IGF-1，两种因子联用有协同作用,TGF-1和TGF-β1，明胶缓释微球涂层多孔钛对MG63细胞的影响有浓度效应、时相性，两者联用具有协同作用。

摘要： 优化载胰岛素样生长因子-1 (IGF-1)、转化生长因子β1(TGF-β1)明胶缓释微球的载药浓度,研究IGF-1与TGF-β1明胶缓释微球复合涂层多孔钛对MG63细胞黏附、增殖及分化的影响.用粉末注射成形(MIM)技术制备孔隙度为60％的多孔钛;用改良冷凝聚合交联法制备明胶缓释微球并涂覆于多孔钛表面;体外细胞实验评价IGF-1、TGF-β1明胶缓释微球涂层多孔钛的细胞毒性及对MG63细胞功能的影响.结果显示，IGF-1和TGF-β1对MG63细胞作用具有时相性，IGF-1在细胞增殖方面优于TGF-β1,TGF-β1、在细胞分化方面优于IGF-1，两种因子联用有协同作用,TGF-1和TGF-β1，明胶缓释微球涂层多孔钛对MG63细胞的影响有浓度效应、时相性，两者联用具有协同作用。

摘要： 优化载胰岛素样生长因子-1 (IGF-1)、转化生长因子β1(TGF-β1)明胶缓释微球的载药浓度,研究IGF-1与TGF-β1明胶缓释微球复合涂层多孔钛对MG63细胞黏附、增殖及分化的影响.用粉末注射成形(MIM)技术制备孔隙度为60％的多孔钛;用改良冷凝聚合交联法制备明胶缓释微球并涂覆于多孔钛表面;体外细胞实验评价IGF-1、TGF-β1明胶缓释微球涂层多孔钛的细胞毒性及对MG63细胞功能的影响.结果显示，IGF-1和TGF-β1对MG63细胞作用具有时相性，IGF-1在细胞增殖方面优于TGF-β1,TGF-β1、在细胞分化方面优于IGF-1，两种因子联用有协同作用,TGF-1和TGF-β1，明胶缓释微球涂层多孔钛对MG63细胞的影响有浓度效应、时相性，两者联用具有协同作用。

摘要： 优化载胰岛素样生长因子-1 (IGF-1)、转化生长因子β1(TGF-β1)明胶缓释微球的载药浓度,研究IGF-1与TGF-β1明胶缓释微球复合涂层多孔钛对MG63细胞黏附、增殖及分化的影响.用粉末注射成形(MIM)技术制备孔隙度为60％的多孔钛;用改良冷凝聚合交联法制备明胶缓释微球并涂覆于多孔钛表面;体外细胞实验评价IGF-1、TGF-β1明胶缓释微球涂层多孔钛的细胞毒性及对MG63细胞功能的影响.结果显示，IGF-1和TGF-β1对MG63细胞作用具有时相性，IGF-1在细胞增殖方面优于TGF-β1,TGF-β1、在细胞分化方面优于IGF-1，两种因子联用有协同作用,TGF-1和TGF-β1，明胶缓释微球涂层多孔钛对MG63细胞的影响有浓度效应、时相性，两者联用具有协同作用。

摘要： 一种改进的七点六三米焦炉炉盖、炉圈制作方法，其特征在于包括以下步骤：a在炉圈底圈圆周上按十字型对称增设长宽为100×75mm的钢板，b炉盖的上部尺寸不变仍为625mm，在上部磁性碳钢盖板下焊接高度为80mm的锚固件，取消底部圆平面的隔热板，将底部尺寸直径减少，使底部成为直径为410mm的圆孔，增加了其与炉圈的间隙；炉盖四周挂齿改为4颗，以炉盖圆周上以十字型分对称分布。本发明的改进的七点六三米焦炉炉盖、炉圈制作方法具有炉盖、炉圈制作方便，使炉圈不易松动，炉盖方便揭开、盖闭动作，在生产中揭炉盖、清石墨余煤等操作时，消除了炉圈受振动，防止冒烟、窜火的优点。

摘要： 一种改进的七点六三米焦炉炉盖、炉圈制作方法，其特征在于包括以下步骤：a在炉圈底圈圆周上按十字型对称增设长宽为100×75mm的钢板，b炉盖的上部尺寸不变仍为625mm，在上部磁性碳钢盖板下焊接高度为80mm的锚固件，取消底部圆平面的隔热板，将底部尺寸直径减少，使底部成为直径为410mm的圆孔，增加了其与炉圈的间隙；炉盖四周挂齿改为4颗，以炉盖圆周上以十字型分对称分布。本发明的改进的七点六三米焦炉炉盖、炉圈制作方法具有炉盖、炉圈制作方便，使炉圈不易松动，炉盖方便揭开、盖闭动作，在生产中揭炉盖、清石墨余煤等操作时，消除了炉圈受振动，防止冒烟、窜火的优点。

摘要： 一种七点六三米焦炉上升管内壁浇注料热修补方法，其特征在于包括以下步骤：a、准备喷补机及喷补料，连接电源和供风、供水管线，b、通知协调中控室，从炉孔中推出焦使焦炉成空炉，c、搜寻上升管内衬浇注块损坏部位，d、先送风，后送料，再送水，开始喷补，e、均匀喷补，喷枪头自下而上逐渐移动分层喷补，f、先停料，后停水，再停风，结束喷补。本发明的七点六三米焦炉上升管内壁浇注料热修补方法具有在线修补方便、快捷、经济，不影响生产，上升管的维修时间短，效果好，修补料使用寿命长和修复步骤合理，安全可靠的优点。

摘要： 本发明的目的在于，提供能够使T细胞或NK细胞高效地增殖并且维持该细胞的状态(例如未分化性)的T细胞或NK细胞的制造方法、T细胞或NK细胞的培养用培养基、T细胞或NK细胞的培养方法、维持未分化T细胞的未分化状态的方法和T细胞或NK细胞的增殖促进剂。本发明涉及T细胞或NK细胞的制造方法等，其包括如下步骤：在含有式(X‑1)或式(X‑2)所示的双苄基异喹啉生物碱或者其中的1个醚键断裂后的化合物或其药学上可接受的盐的培养基中培养T细胞或NK细胞。

摘要： 提供能保存细胞的组合物。本发明的组合物包含微小气泡。

摘要： 本发明涉及一种红细胞除去装置(100)，具备：血液容器(10)，其容纳血液；以及红细胞除去器(11)，其从血液容器(10)接受血液，并从血液至少部分地除去红细胞。

摘要： 提供一种细胞的培养方法，在细胞培养器内向细胞导入因子，并在与上述细胞培养器相同的细胞培养器内培养导入了上述因子的细胞。另外，提供一种单核细胞的回收方法，其包括：对血液进行处理，制作至少部分地除去了红细胞而得到的处理血液；对处理血液进行稀释；使稀释后的处理血液中所含的单核细胞沉降；除去稀释后的处理血液的上清液；以及回收单核细胞。

摘要： 本申请提供了一种制备NKT细胞刺激性树突细胞的方法，该方法包括：将单个核细胞置于培养容器内并通过保持该培养容器静置而使得所述单个核细胞中的一些沉降于所述容器的底表面上的步骤；将除已沉降于所述培养容器的底表面上的细胞以外的悬浮细胞去除的步骤；通过向所述培养容器内添加预定的因子而使已沉降于所述底表面上的细胞中的单核细胞分化为未成熟树突细胞的步骤；通过向所述培养容器内添加预定的因子而使所述未成熟树突细胞成熟；和通过向所述培养容器内添加α‑半乳糖神经酰胺而将成熟树突细胞诱导为NKT细胞刺激性树突细胞的步骤。

摘要： 含有细胞细胞外基质的制造方法包括：在具有前端开口部的移液管的内部准备含有(i)细胞外基质前体以及(ii)细胞或者细胞团的细胞外基质溶液；排出上述细胞外基质溶液，在上述移液管的前端开口部形成上述细胞外基质溶液的液滴；使上述移液管的前端开口部接近细胞培养容器的培养面，按照使上述移液管的前端开口部不与上述培养面接触的方式将上述液滴载置于上述培养面上；使上述移液管的前端开口部从上述培养面远离，将上述液滴与上述移液管的前端开口部分离；以及使上述细胞外基质溶液凝胶化，形成含有细胞细胞外基质。

摘要： 本发明提供具备适宜的亲水性和强度，细胞接种后的固定性较高，可高效进行细胞增殖的细胞培养用支架材料。本发明的细胞培养用支架材料为含有合成树脂的细胞培养用支架材料，其中，所述合成树脂的氮含量为0.1质量％以上10质量％以下。