Ⅰ型胶原

摘要： 背景:胶原因具有良好的生物相容性和降解性能,常用于促进伤口愈合,但由于其不具备抗菌性能,不能预防伤口感染。目的:通过冷冻干燥法制备壳聚糖胶原海绵,使其兼具良好的抗菌及止血效果。方法:壳聚糖溶液与碳酸氢钠溶液在37°C下成凝胶态,利用冷冻干燥法制备壳聚糖/碳酸氢钠/Ⅰ型胶原海绵作为实验组,以壳聚糖海绵及壳聚糖/碳酸氢钠海绵为对照组,扫描电镜观测海绵的微观形貌,测定其pH值、孔隙率、吸水倍数、降解率及对金黄色葡萄球菌和大肠杆菌的抗菌率;利用CCK-8法和Live/Dead染色检测海绵浸提液的细胞毒性;使用大鼠截尾出血模型检测海绵的止血效果;建立大鼠皮肤创伤模型,通过苏木精-伊红染色及Masson染色观察海绵植入7 d后的组织愈合情况。结果与结论:(1)相较于其他两种海绵,壳聚糖/碳酸氢钠/Ⅰ型胶原海绵的绵孔隙更大,外壁更粗糙,吸水性更强、孔隙率及吸水倍数更大;而且壳聚糖/碳酸氢钠/Ⅰ型胶原海绵孔隙率均大于另外两种海绵(P壳聚糖/碳酸氢钠海绵(P壳聚糖/碳酸氢钠/Ⅰ型胶原蛋白海绵(P壳聚糖/碳酸氢钠海绵>壳聚糖/碳酸氢钠/Ⅰ型胶原蛋白海绵(P<0.01);(4)壳聚糖/碳酸氢钠/Ⅰ型胶原蛋白海绵无细胞毒性且可促小鼠成纤维细胞(L929)增殖,促细胞增殖效果优于空白组(P<0.05)、壳聚糖组(P<0.0001)与壳聚糖/碳酸氢钠组(P<0.05);(5)壳聚糖/碳酸氢钠/Ⅰ型胶原蛋白海绵止血效果良好,优于其他三组;(6)壳聚糖/碳酸氢钠/Ⅰ型胶原蛋白海绵植入大鼠背部创口1周,周围皮肤无明显炎症反应,新生毛细血管及胶原含量明显高于其他两种海绵,皮肤组织恢复最佳;(7)上述数据证实,壳聚糖/碳酸氢钠/Ⅰ型胶原蛋白海绵生物相容性良好,具有良好的抗菌止血及促进组织愈合效果。

摘要： 背景:肌腱断裂是骨科常见的棘手问题,而肌腱细胞中胶原分泌影响到肌腱断裂的修复过程,结缔组织生长因子影响组织器官的纤维化过程,对细胞胶原的分泌有重要的作用,但其对肌腱细胞胶原分泌的作用却鲜有报道.目的:通过不同质量浓度的结缔组织生长因子刺激体外培养的原代鸡肌腱细胞,观察细胞中Ⅰ、Ⅲ型胶原的表达情况.方法:选取8周来亨鸡6只,麻醉处死后取屈趾深肌腱行肌腱细胞原代培养,行Ⅰ、Ⅲ型胶原免疫荧光鉴定;取4代的原代肌腱细胞,通过不同质量浓度(0,5,10,20,50,100,200,500 μg/L)的结缔组织生长因子刺激4d,分别行实时荧光定量PCR及酶联免疫吸附测定法检测不同组别肌腱细胞中Ⅰ、Ⅲ型胶原mRNA及蛋白的表达情况.结果 与结论:①Ⅰ、Ⅲ型胶原免疫荧光鉴定原代培养的细胞为肌腱细胞;②实时荧光定量PCR检测提示结缔组织生长因子刺激后肌腱细胞中Ⅰ、Ⅲ型胶原mRNA的表达量均增加;③酶联免疫吸附测定法检测提示结缔组织生长因子刺激后肌腱细胞中Ⅰ、Ⅲ型胶原蛋白的表达量均增加(P＜0.01),且两者均随结缔组织生长因子质量浓度的升高而逐渐增高,20 μ g/L及50μg/L的结缔组织生长因子可能是体外刺激肌腱细胞分别生成Ⅰ、Ⅲ型胶原的最佳作用浓度;④在一定范围内,结缔组织生长因子能够促进鸡原代肌腱细胞中Ⅰ、Ⅲ型胶原的分泌.

摘要： 背景:聚左旋乳酸皮下填充剂是美国FDA批准可作为修复皮下软组织胶原流失的医美产品,由于其形态为不规则颗粒,容易产生过度炎症反应.目的:观察辐照条件对聚左旋乳酸微球分子质量和粒径形貌的影响,以及聚左旋乳酸微球皮下填充剂植入兔皮下的异物反应程度和刺激胶原再生情况.方法:采用乳液-溶剂挥发法制备聚左旋乳酸微球,参考Sculptra?的配方配制成可注射皮下填充剂,分别经25,50 kGy辐照灭菌,分析辐照灭菌对微球分子质量和粒径形貌的影响.采用MTT法检测不同质量浓度(50,100,250,500 mg/L,以微球的浓度计)可注射皮下填充剂对小鼠成纤维细胞增殖的影响.将25 kGy辐照灭菌的可注射皮下填充剂(实验组)、生理盐水(对照组)分别注射至兔背部皮下,于设定的时间点进行注射部位背部组织苏木精-伊红、马松三色染色及CD68、Ⅰ型胶原和Ⅲ型胶原免疫荧光染色.结果与结论:①随着辐照剂量的增加,微球的黏度、黏均分子质量和数均分子质量降低明显,但辐照灭菌并未导致微球的粒径和形貌发生明显改变.②MTT检测结果显示,当填充剂的质量浓度低于250 mg/L时细胞存活率均>90%,即使材料质量浓度高达500 mg/L时细胞存活率也仍高于80%,并且长时间的孵育(72 h)也并未产生显著的细胞毒性.③动物实验苏木精-伊红染色与CD68免疫荧光染色显示,填充剂植入后的第0.5-4个月只引起轻微炎性反应,植入后第6个月时炎性反应程度达到最高,且部分微球表面出现孔洞结构或不规则形状;植入后第9个月微球完全降解.④动物实验马松三色染色与Ⅰ型胶原、Ⅲ型胶原免疫荧光染色显示,植入后第4个月,微球周围主要为Ⅰ型胶原,外围主要以Ⅲ型胶原为主;植入后第6个月,微球附近的I型胶原增多,外围的Ⅲ型胶原增多;植入后第9个月,纤维包囊内部主要以Ⅰ型胶原为主,外围则Ⅰ型胶原与Ⅲ型胶原的比例接近均等.⑤结果表明,可注射聚左旋乳酸微球填充剂具有刺激胶原再生的效果,还可降低炎性反应程度.

摘要： 背景:随着3D打印技术在组织工程的快速发展,通过3D打印制备出多种支架材料被广泛用于下颌骨缺损修复,3D打印技术为下颌骨缺损修复带来了新的可能.目的:采用低温3D打印技术构建三维仿生骨支架材料,精确控制支架材料内部结构,并对其进行力学性能分析.方法:在同等体积下,通过改变打印支架线束与线束的交错角度,采用低温3D打印技术分别打印不同角度(30°,45°,90°)的丝素蛋白/Ⅰ型胶原/羟基磷灰石支架与聚己内酯/羟基磷灰石支架(共6组支架).单轴压缩力学实验以0.5％/s的压缩速率加载6组支架,压缩至30％的应变,观察应力随着应变的变化关系;应力松弛实验以0.5％/s的压缩速率分别加载至3种打印角度丝素蛋白/Ⅰ型胶原/羟基磷灰石支架10％,20％,30％的应变,松弛保持时间3 h,观察应力随时间的变化关系;蠕变实验分别以2.5,3.75,5 kPa的恒定压力压缩打印角度为90°的丝素蛋白/Ⅰ型胶原/羟基磷灰石支架,蠕变保持时间3 h,观察应变随时间的变化关系.结果 与结论:①单轴压缩力学实验:对于丝素蛋白/Ⅰ型胶原/羟基磷灰石支架和聚己内酯/羟基磷灰石支架,相同压缩应变下打印角度为90°支架的杨氏模量高于打印角度为30°,45°的支架.②应力松弛实验:当保持压缩速率、压缩应变及压缩角度恒定时,丝素蛋白/Ⅰ型胶原/羟基磷灰石支架的应力随松弛时间的延伸先快速降低,然后缓慢降低,随着松弛时间的延长,支架在开始时间段(1600 s以内)应力下降很快,在后期时间段(3700 s)应力降低速度减小,最后趋于平缓;当保持压缩速率、压缩应变恒定时,相对于打印角度为30°,45°的支架,打印角度为90°丝素蛋白/Ⅰ型胶原/羟基磷灰石支架的应力初值及趋于平稳时的应力值较高;当压缩速率及压缩角度恒定时,随着压缩应变值增加,丝素蛋白/Ⅰ型胶原/羟基磷灰石支架的应力值增加.③蠕变实验:随着蠕变时间的延长,90°的丝素蛋白/Ⅰ型胶原/羟基磷灰石支架的应变增加,在初始阶段(500 s内)应变增涨较快,随后应变缓慢增加最终趋于平缓,2.5 kPa下支架的应变变化范围为35％到55％,3.75 kPa下支架的应变变化范围从43％到57％,5 kPa下支架的应变变化范围从45％到57％.

摘要： 背景:随着3D打印技术在组织工程的快速发展,通过3D打印制备出多种支架材料被广泛用于下颌骨缺损修复,3D打印技术为下颌骨缺损修复带来了新的可能。目的:采用低温3D打印技术构建三维仿生骨支架材料,精确控制支架材料内部结构,并对其进行力学性能分析。方法:在同等体积下,通过改变打印支架线束与线束的交错角度,采用低温3D打印技术分别打印不同角度(30°,45°,90°)的丝素蛋白/Ⅰ型胶原/羟基磷灰石支架与聚己内酯/羟基磷灰石支架(共6组支架)。单轴压缩力学实验以0.5%/s的压缩速率加载6组支架,压缩至30%的应变,观察应力随着应变的变化关系;应力松弛实验以0.5%/s的压缩速率分别加载至3种打印角度丝素蛋白/Ⅰ型胶原/羟基磷灰石支架10%,20%,30%的应变,松弛保持时间3 h,观察应力随时间的变化关系;蠕变实验分别以2.5,3.75,5 kPa的恒定压力压缩打印角度为90°的丝素蛋白/Ⅰ型胶原/羟基磷灰石支架,蠕变保持时间3 h,观察应变随时间的变化关系。结果与结论:①单轴压缩力学实验:对于丝素蛋白/Ⅰ型胶原/羟基磷灰石支架和聚己内酯/羟基磷灰石支架,相同压缩应变下打印角度为90°支架的杨氏模量高于打印角度为30°,45°的支架。②应力松弛实验:当保持压缩速率、压缩应变及压缩角度恒定时,丝素蛋白/Ⅰ型胶原/羟基磷灰石支架的应力随松弛时间的延伸先快速降低,然后缓慢降低,随着松弛时间的延长,支架在开始时间段(1600 s以内)应力下降很快,在后期时间段(3700 s)应力降低速度减小,最后趋于平缓;当保持压缩速率、压缩应变恒定时,相对于打印角度为30°,45°的支架,打印角度为90°丝素蛋白/Ⅰ型胶原/羟基磷灰石支架的应力初值及趋于平稳时的应力值较高;当压缩速率及压缩角度恒定时,随着压缩应变值增加,丝素蛋白/Ⅰ型胶原/羟基磷灰石支架的应力值增加。③蠕变实验:随着蠕变时间的延长,90°的丝素蛋白/Ⅰ型胶原/羟基磷灰石支架的应变增加,在初始阶段(500 s内)应变增涨较快,随后应变缓慢增加最终趋于平缓,2.5 kPa下支架的应变变化范围为35%到55%,3.75 kPa下支架的应变变化范围从43%到57%,5 kPa下支架的应变变化范围从45%到57%。

摘要： 目的探讨三氯乙烯致小鼠肺纤维化的作用机制.方法选取45只健康雄性小鼠,将其随机分为正常对照组、三氯乙烯低剂量(1500 mg/m^(3))组、高剂量(5500 mg/m^(3))组.正常对照组5只,不做任何处理;低剂量组、高剂量组各20只,每次吸入三氯乙烯2 h,2个月、3个月时各处死10只.肺部取材HE染色后在显微镜下观察小鼠肺部病理形态;经Masson染色、网状纤维染色、弹力纤维染色后镜下观察肺部纤维化的程度.使用免疫组织化学法测定肺组织中α-平滑肌肌动蛋白(α-SMA)、结缔组织生长因子(CTGF)及Ⅰ型胶原(COL-I)蛋白的表达.结果经特殊染色后,与空白对照组比较,剂量组小鼠肺泡壁弹力纤维有断裂,间质纤维增生;另外,2个月或3个月时,高剂量组小鼠肺组织中α-SMA、CTGF及COL-I蛋白表达与低剂量组比较显著升高(P<0.05);在高剂量组中,3个月小鼠肺组织中α-SMA、CTGF及COL-I蛋白表达比2个月小鼠表达显著升高(P<0.05).结论三氯乙烯可致小鼠肺纤维化,其机制与α-SMA、CTGF及COL-I蛋白表达相关.

摘要： 目的探讨金钗石斛多糖(DNP)对肝纤维化(HF)大鼠肝组织转化生长因子(TGF)-β1、α-平滑肌肌动蛋白(α-SMA)、Ⅰ、Ⅲ型胶原表达的影响。方法SD大鼠随机分为正常组,模型组,秋水仙碱组(0.2 mg/kg),扶正化瘀组(0.415 g/kg),DNP低、中、高剂量组(5、10、20 g/kg),采用50%四氯化碳腹腔注射和30%乙醇灌胃诱导大鼠HF模型,造模8 w后,给予相应药物(10 ml/kg)进行灌胃,每日1次,给药4 w,正常组、模型组灌胃生理盐水。苏木素-伊红(HE)染色和Masson染色观察HF程度;免疫组化法检测肝组织TGF-β1、α-SMA、Ⅰ、Ⅲ型胶原蛋白表达;荧光定量聚合酶链反应(PCR)检测肝组织Ⅰ、Ⅲ型胶原mRNA表达。结果与正常组比较,模型组明显纤维化(P<0.01),TGF-β1、α-SMA、Ⅰ、Ⅲ型胶原蛋白表达明显升高(P<0.01),Ⅰ、Ⅲ型胶原mRNA表达亦明显升高(P<0.01);与模型组比较,DNP各组肝纤维化程度均有所减轻(P<0.01),DNP降低TGF-β1、α-SMA、Ⅰ、Ⅲ型胶原蛋白表达(P<0.01),DNP降低Ⅰ、Ⅲ型胶原mRNA表达(P<0.01)。结论DNP有抗纤维化作用,其机制可能与下调TGF-β1、α-SMA、Ⅰ、Ⅲ胶原蛋白表达,降低Ⅰ、Ⅲ胶原mRNA表达有关。

摘要： 目的观察参地颗粒对系膜增生性肾小球肾炎(mesangial proliferative glomerulonephritis,MsPGN)模型大鼠细胞外基质(Extracellular Matrix,ECM)Ⅰ型胶原(collagen type-Ⅰ,ColⅠ)、Ⅲ型胶原(collagen type-Ⅲ,ColⅢ)以及Megsin的影响,探究参地颗粒肾脏保护作用机制。方法SD大鼠70只,正常组取10只,剩余大鼠通过尾静脉注射Thy-1抗体方式建立MsPGN大鼠模型,建立成功45只,随机分为模型组、对照组和实验组,每组15只。实验组和对照组大鼠分别应用参地颗粒水溶液0.8 g·(200 g·d)^(-1)和缬沙坦混悬液2.06 mg·(200 g·d)^(-1)灌胃;模型组和正常组大鼠均予3 mL温开水灌胃。每组均灌胃12 w。留取血清和肾脏组织标本,检测血尿素氮(blood urea nitrogen,BUN)、血肌酐(serum creatinine,Scr)、24 h尿蛋白(24-hours urine protein,24 hUPro)、血清及肾脏组织中ColⅠ、ColⅢ和Megsin水平,观察肾组织病理变化。结果与正常组比较,模型组、对照组和实验组24 hUPro均升高(P<0.05);与模型组比较,治疗6 w后实验组、对照组24 hUPro下降(P<0.05),12 w后降低更明显(P<0.05),且与对照组相比,实验组下降更显著(P<0.05)。大鼠血清和肾组织ColⅠ、ColⅢ、Megsin比较,模型组、对照组和实验组均比正常组升高(P<0.05),其中实验组相较模型组、对照组降低最显著(P<0.05),而对照组又比模型组明显下降(P<0.05)。肾脏病理损害方面,实验组和对照组较模型组轻,而实验组又较对照组减轻。结论MsPGN大鼠细胞外基质中Ⅰ型胶原,Ⅲ型胶原ColⅠ、ColⅢ及megsin水平明显升高;参地颗粒可减少大鼠系膜区和血清ColⅠ、ColⅢ,下调Megsin水平,抑制MsPGN大鼠肾脏系膜细胞增生,减轻肾脏病理损害,消减尿蛋白。

摘要： 目的 观察高糖环境培养的肾小球系膜细胞系SV40中长链非编码RNA 58992(lncRNA 58992)的表达变化,以及过表达lncRNA 58992的肾小球系膜细胞系SV40中纤维化细胞因子α-平滑肌肌动蛋白(α-SMA)、纤维连接蛋白(FN)和Ⅰ型胶原(ColⅠ)的表达变化。方法 将肾小球系膜细胞系SV40分为3组,分别为NG+58992组、HG组、NG组。NG+58992组经lipofectamine 8000转染质粒pcDNA 3.1-lncRNA 58992 24 h,再经低糖(5 mmol/L)环境培养24 h。HG组低糖环境培养24 h后再经高糖(25 mmol/L)环境培养24 h。NG组以低糖环境培养48 h。采用qRT-PCR检测肾小球系膜细胞系SV40中lncRNA 58992、纤维连接蛋白(FN)、Ⅰ型胶原(ColⅠ) mRNAs;采用Western blotting检测肾小球系膜细胞系SV40中FN和α-平滑肌肌动蛋白(α-SMA);细胞免疫荧光法检测ColⅠ、α-SMA和FN蛋白。结果 HG组、NG组中lncRNA 58992的相对表达量分别为1.45±0.22、1.00±0.03,两组比较,P<0.05。NG+58992组、HG组、NG组FN mRNA相对表达量分别为8.78±1.86、13.17±1.95、1.00±0.01,ColⅠmRNA相对表达量分别为2.40±0.41、4.16±0.83、1.00±0.06;NG+58992组、HG组、NG组FN、Col I mRNA相比,P均<0.05。NG+58992组、HG组、NG组FN蛋白相对表达量分别为0.75±0.24、0.91±0.17、0.27±0.13,α-SMA蛋白相对表达量分别为0.28±0.03、0.59±0.06、0.14±0.03,与NG组相比,NG+58992组、HG组中FN、α-SMA蛋白相对表达量高(P均<0.05)。细胞免疫荧光实验结果表明,NG组中ColⅠ、α-SMA和FN蛋白均有少量的红色荧光(该蛋白在细胞中存在本底表达),而HG组和NG+58992组中ColⅠ、α-SMA和FN的红色荧光均增强。结论 高糖环境培养的肾小球系膜细胞系SV40中lncRNA 58992表达上调;过表达lncRNA 58992可使肾小球系膜细胞系SV40中α-SMA、FN和ColⅠ的表达上调、促进SV40的纤维化发生。

摘要： 目的观察转化生长因子β1(TGF-β1)基因缺失后中波紫外(UVB)辐射对皮肤组织的影响。方法制备TGF-β1基因缺失小鼠,使用UVB辐射制备皮肤损伤模型。实验分组为野生型设为对照组(Con组),野生型给予UVB照射设为Con+UVB组,TGF-β1-/-给予UVB照射设为TGF-β1-组。根据是否给予野生型小鼠TGF-β1注射,分为TGF-β1注射组TGF-β1(+)和TGF-β1不注射组TGF-β1(-)。分别观察小鼠皮肤损伤部位Smad3、基质金属蛋白酶-1(MMP-1)、基质金属蛋白酶-3(MMP-3)、Ⅰ型胶原及Ⅲ型胶原的mRNA表达情况,观察小鼠血清中类胰岛素生长因子-1(IGF-1)、血管内皮生长因子(VEGF)以及角质细胞生长因子(KGF)的含量。同时给UVB辐射皮肤损伤的野生型小鼠注射TGF-β1,观察MMP-1、MMP-3、Ⅰ型胶原及Ⅲ型胶原的mRNA表达情况,及血清中IGF-1、VEGF、KGF的含量。结果Con+UVB组Smad3表达和Ⅰ型胶原及Ⅲ型胶原含量低于Con组,血清中IGF-1、VEGF以及KGF含量低于Con组,而MMP-1和MMP-3的表达高于Con组,差异有统计学意义(P<0.05);TGF-β1-组Smad3表达和Ⅰ型胶原及Ⅲ型胶原含量低于Con+UVB组,血清中IGF-1、VEGF以及KGF含量低于Con+UVB组,而MMP-1和MMP-3的表达高于Con+UVB组,差异有统计学意义(P<0.05);TGF-β1(+)组Ⅰ型胶原及Ⅲ型胶原含量高于TGF-β1(-)组,血清中IGF-1、VEGF以及KGF含量高于TGF-β1(-)组,而MMP-1和MMP-3的表达低于TGF-β1(-)组,差异有统计学意义(P<0.05)。结论TGF-β1基因缺失会加剧UVB辐射对皮肤的损伤,给予TGF-β1补充可减少UVB辐射对皮肤的损伤。

摘要： 本研究以Ⅰ型胶原和壳聚糖为原料，采用定向结晶技术制备具有仿生取向微孔结构的软骨支架，复合KGN诱导的脂肪干细胞向软骨细胞分化，构建组织工程化软骨。探索取向I型胶原与壳聚糖微孔支架的可行性；验证KGN诱导下脂肪肝细胞能否分化为软骨细胞：评估这一支架作为组织工程软骨再生修复的可行性，为临床应用提供理论依据。

摘要： 本研究以Ⅰ型胶原和壳聚糖为原料，采用定向结晶技术制备具有仿生取向微孔结构的软骨支架，复合KGN诱导的脂肪干细胞向软骨细胞分化，构建组织工程化软骨。探索取向I型胶原与壳聚糖微孔支架的可行性；验证KGN诱导下脂肪肝细胞能否分化为软骨细胞：评估这一支架作为组织工程软骨再生修复的可行性，为临床应用提供理论依据。

摘要： 本研究以Ⅰ型胶原和壳聚糖为原料，采用定向结晶技术制备具有仿生取向微孔结构的软骨支架，复合KGN诱导的脂肪干细胞向软骨细胞分化，构建组织工程化软骨。探索取向I型胶原与壳聚糖微孔支架的可行性；验证KGN诱导下脂肪肝细胞能否分化为软骨细胞：评估这一支架作为组织工程软骨再生修复的可行性，为临床应用提供理论依据。

摘要： 本研究以Ⅰ型胶原和壳聚糖为原料，采用定向结晶技术制备具有仿生取向微孔结构的软骨支架，复合KGN诱导的脂肪干细胞向软骨细胞分化，构建组织工程化软骨。探索取向I型胶原与壳聚糖微孔支架的可行性；验证KGN诱导下脂肪肝细胞能否分化为软骨细胞：评估这一支架作为组织工程软骨再生修复的可行性，为临床应用提供理论依据。

摘要： 本研究以Ⅰ型胶原和壳聚糖为原料，采用定向结晶技术制备具有仿生取向微孔结构的软骨支架，复合KGN诱导的脂肪干细胞向软骨细胞分化，构建组织工程化软骨。探索取向I型胶原与壳聚糖微孔支架的可行性；验证KGN诱导下脂肪肝细胞能否分化为软骨细胞：评估这一支架作为组织工程软骨再生修复的可行性，为临床应用提供理论依据。

摘要： 目的：采用5/6肾切除方法建立慢性肾衰竭动物模型,观察抗纤灵对5/6肾切除大鼠肾组织α-SMA和Ⅰ型胶原的影响. 方法：将SD大鼠随机分为假手术组和造模组,造模组以5/6肾切除方法建立慢性肾衰竭动物模型,1周后按血肌酐水平将造模大鼠分为模型组、福辛普利组和抗纤灵组.福辛普利组给予3.3mg/kg·d灌胃,抗纤灵组给予23g/kg·d灌胃,模型组和假手术组给予等量生理盐水灌胃,8周后采用实时荧光定量PCR(RT-PCR)和蛋白免疫印迹法(Western Blotting)测定各组大鼠肾组织α-SMA和Ⅰ型胶原基因和蛋白的表达. 结果：模型组大鼠表达α-SMA mRNA和Ⅰ型胶原mRNA水平较假手术组明显升高(P＜0.001),抗纤灵组与模型组比较均明显下降(P＜0.01或P＜0.05);模型组大鼠表达α-SMA和Ⅰ型胶原蛋白水平较假手术组明显升高(P＜0.001),抗纤灵组与模型组比较均显著下降(P＜0.001). 结论：抗纤灵可降低α-SMA的表达,减少肌成纤维细胞的活化与形成,继而使细胞外基质Ⅰ型胶原生成减少,从而延缓慢性肾衰竭大鼠肾纤维化进程,保护残肾功能.

摘要： 目的：采用5/6肾切除方法建立慢性肾衰竭动物模型,观察抗纤灵对5/6肾切除大鼠肾组织α-SMA和Ⅰ型胶原的影响. 方法：将SD大鼠随机分为假手术组和造模组,造模组以5/6肾切除方法建立慢性肾衰竭动物模型,1周后按血肌酐水平将造模大鼠分为模型组、福辛普利组和抗纤灵组.福辛普利组给予3.3mg/kg·d灌胃,抗纤灵组给予23g/kg·d灌胃,模型组和假手术组给予等量生理盐水灌胃,8周后采用实时荧光定量PCR(RT-PCR)和蛋白免疫印迹法(Western Blotting)测定各组大鼠肾组织α-SMA和Ⅰ型胶原基因和蛋白的表达. 结果：模型组大鼠表达α-SMA mRNA和Ⅰ型胶原mRNA水平较假手术组明显升高(P＜0.001),抗纤灵组与模型组比较均明显下降(P＜0.01或P＜0.05);模型组大鼠表达α-SMA和Ⅰ型胶原蛋白水平较假手术组明显升高(P＜0.001),抗纤灵组与模型组比较均显著下降(P＜0.001). 结论：抗纤灵可降低α-SMA的表达,减少肌成纤维细胞的活化与形成,继而使细胞外基质Ⅰ型胶原生成减少,从而延缓慢性肾衰竭大鼠肾纤维化进程,保护残肾功能.

摘要： 目的：采用5/6肾切除方法建立慢性肾衰竭动物模型,观察抗纤灵对5/6肾切除大鼠肾组织α-SMA和Ⅰ型胶原的影响. 方法：将SD大鼠随机分为假手术组和造模组,造模组以5/6肾切除方法建立慢性肾衰竭动物模型,1周后按血肌酐水平将造模大鼠分为模型组、福辛普利组和抗纤灵组.福辛普利组给予3.3mg/kg·d灌胃,抗纤灵组给予23g/kg·d灌胃,模型组和假手术组给予等量生理盐水灌胃,8周后采用实时荧光定量PCR(RT-PCR)和蛋白免疫印迹法(Western Blotting)测定各组大鼠肾组织α-SMA和Ⅰ型胶原基因和蛋白的表达. 结果：模型组大鼠表达α-SMA mRNA和Ⅰ型胶原mRNA水平较假手术组明显升高(P＜0.001),抗纤灵组与模型组比较均明显下降(P＜0.01或P＜0.05);模型组大鼠表达α-SMA和Ⅰ型胶原蛋白水平较假手术组明显升高(P＜0.001),抗纤灵组与模型组比较均显著下降(P＜0.001). 结论：抗纤灵可降低α-SMA的表达,减少肌成纤维细胞的活化与形成,继而使细胞外基质Ⅰ型胶原生成减少,从而延缓慢性肾衰竭大鼠肾纤维化进程,保护残肾功能.

摘要： 目的：采用5/6肾切除方法建立慢性肾衰竭动物模型,观察抗纤灵对5/6肾切除大鼠肾组织α-SMA和Ⅰ型胶原的影响. 方法：将SD大鼠随机分为假手术组和造模组,造模组以5/6肾切除方法建立慢性肾衰竭动物模型,1周后按血肌酐水平将造模大鼠分为模型组、福辛普利组和抗纤灵组.福辛普利组给予3.3mg/kg·d灌胃,抗纤灵组给予23g/kg·d灌胃,模型组和假手术组给予等量生理盐水灌胃,8周后采用实时荧光定量PCR(RT-PCR)和蛋白免疫印迹法(Western Blotting)测定各组大鼠肾组织α-SMA和Ⅰ型胶原基因和蛋白的表达. 结果：模型组大鼠表达α-SMA mRNA和Ⅰ型胶原mRNA水平较假手术组明显升高(P＜0.001),抗纤灵组与模型组比较均明显下降(P＜0.01或P＜0.05);模型组大鼠表达α-SMA和Ⅰ型胶原蛋白水平较假手术组明显升高(P＜0.001),抗纤灵组与模型组比较均显著下降(P＜0.001). 结论：抗纤灵可降低α-SMA的表达,减少肌成纤维细胞的活化与形成,继而使细胞外基质Ⅰ型胶原生成减少,从而延缓慢性肾衰竭大鼠肾纤维化进程,保护残肾功能.

摘要： 目的：采用5/6肾切除方法建立慢性肾衰竭动物模型,观察抗纤灵对5/6肾切除大鼠肾组织α-SMA和Ⅰ型胶原的影响. 方法：将SD大鼠随机分为假手术组和造模组,造模组以5/6肾切除方法建立慢性肾衰竭动物模型,1周后按血肌酐水平将造模大鼠分为模型组、福辛普利组和抗纤灵组.福辛普利组给予3.3mg/kg·d灌胃,抗纤灵组给予23g/kg·d灌胃,模型组和假手术组给予等量生理盐水灌胃,8周后采用实时荧光定量PCR(RT-PCR)和蛋白免疫印迹法(Western Blotting)测定各组大鼠肾组织α-SMA和Ⅰ型胶原基因和蛋白的表达. 结果：模型组大鼠表达α-SMA mRNA和Ⅰ型胶原mRNA水平较假手术组明显升高(P＜0.001),抗纤灵组与模型组比较均明显下降(P＜0.01或P＜0.05);模型组大鼠表达α-SMA和Ⅰ型胶原蛋白水平较假手术组明显升高(P＜0.001),抗纤灵组与模型组比较均显著下降(P＜0.001). 结论：抗纤灵可降低α-SMA的表达,减少肌成纤维细胞的活化与形成,继而使细胞外基质Ⅰ型胶原生成减少,从而延缓慢性肾衰竭大鼠肾纤维化进程,保护残肾功能.

摘要： 本发明创造提供了一种融合蛋白酶及其制备方法、其在提取I型胶原蛋白中的应用以及该I型胶原蛋白的用途，所述融合蛋白酶包括蛋白酶7片段mmp7C和/或蛋白酶9片段mmp9C；所述蛋白酶7片段mmp7C的氨基酸序列如SEQ ID NO.1所示；所述蛋白酶9片段mmp9C的氨基酸序列如SEQ ID NO.2所示。本发明的融合蛋白酶在提取动物皮和肌腱组织的I型胶原蛋白的过程中，I型胶原蛋白空间结构不会被破坏，且能够去除终产品中的杂蛋白，提高了I型胶原蛋白的提取率。

摘要： 本发明公开了一种液化动物软骨的设备，包括：外腔体，其上端可拆卸密封设有上盖、下端可开启/关闭密封设有下封盖，所述上盖开有投料口和第一进汽口；第一液化腔，其同轴且可上下滑动地设置在所述外腔体内；第二液化腔，其顶面固接在所述外腔体的外侧壁上，以使所述外腔体下端伸入第二液化腔内。本发明还公开了一种液化动物软骨的设备联产硫酸软骨素、Ⅱ型胶原寡肽、Ⅱ型胶原多肽的方法。本发明的液化动物软骨的设备，能对动物软骨进行第一次液化和第二次液得到液化物，从而简化动物软骨的加工流程、提高生产效率。

摘要： 本发明属于医学生物材料领域，具体公开了一种改性I型胶原蛋白及改性方法和利用该改性I型胶原蛋白制备的胶原凝胶，该改性方法包括：在2～10°C的温度下(1)将弱酸与I型胶原蛋白混合均匀，制得酸性胶原溶液；(2)利用磷酸盐缓冲液对酸性胶原溶液进行透析，直到获得中性胶原溶液；(3)去除中性胶原溶液中的气泡；(4)在液封条件下，利用旋转流变仪对脱除了气泡的中性胶原溶液进行剪切，剪切完成后静置，即可制得改性I型胶原蛋白。本发明通过利用机械剪切的方式对胶原蛋白进行改性，该方法简便高效，可以在不需要引入其他物质的基础上，减少胶原分子的三螺旋结构，增多无规卷曲结构，使得组装得到的胶原纤维直径、孔隙和粘弹性可控。

摘要： 本发明属于生物医用材料领域，具体涉及一种医用级Ⅲ型胶原蛋白的制备方法，包含如下步骤：动物胎盘组织预处理、脱细胞、脱脂、除杂、酶切、盐析纯化、脱盐浓缩；所述的盐析方法为：在碱性条件下对含有Ⅲ型胶原蛋白的动物源胶原蛋白混合物进行盐析，一步盐析即可得到高纯度的Ⅲ型胶原蛋白，纯度达到95％以上；制备得到的动物胎盘Ⅲ型胶原蛋白具有良好的三螺旋结构以及特征性的纤维网状结构；内毒素含量低于0.5Eu/mL，达到医用标准；可应用于活性护肤品、皮肤修复敷料、植入剂、人工皮肤、医疗器械、保健食品等领域。

摘要： 提供以新的作用机制为指标的成纤维细胞I型胶原产生促进剂的筛选方法。通过以神经激活作为指标，能够进行成纤维细胞I型胶原产生促进剂的筛选。

摘要： 本发明创造提供了一种融合蛋白酶及其制备方法、其在提取I型胶原蛋白中的应用以及该I型胶原蛋白的用途，所述融合蛋白酶包括蛋白酶7片段mmp7C和/或蛋白酶9片段mmp9C；所述蛋白酶7片段mmp7C的氨基酸序列如SEQ ID NO.1所示；所述蛋白酶9片段mmp9C的氨基酸序列如SEQ ID NO.2所示。本发明的融合蛋白酶在提取动物皮和肌腱组织的I型胶原蛋白的过程中，I型胶原蛋白空间结构不会被破坏，且能够去除终产品中的杂蛋白，提高了I型胶原蛋白的提取率。

摘要： 本发明涉及一种将选自I型胶原酶、II型胶原酶、中性蛋白酶和梭菌蛋白酶构成的组的至少一种酶从物质的混合物中纯化出来的方法，作为方法步骤，所述方法包括至少一个疏水作用色谱过程，其特征在于，疏水作用色谱过程中的固定相包括从聚丙二醇和丁基琼脂糖构成的组中选出的材料。本发明还涉及以这种方法纯化的酶用于制药、化妆品和/或生化目的的用途。

摘要： 本发明公开了IV型胶原、层粘连蛋白和III型前胶原氨基端肽三联检测定试剂盒的制备方法，包括以下步骤：S1：样品垫的制备；S2：结合垫的制备；S3：NC膜的制备；S4：装配。本发明利用荧光免疫层析技术，采用双抗体夹心法原理进行检测，在层析过程中，样本中的CIV/LN/PIIINP抗原与结合垫上的荧光微球标记的CIV/LN/PIIINP单克隆抗体反应形成复合物，在层析作用下沿着硝酸纤维素膜向前移行至检测区域，被硝酸纤维素膜上包被的另一株CIV/LN/PIIINP单克隆单克隆抗体捕获并形成复合物沉积在T区，在激发光源的作用下，荧光物质发射特定波长的荧光信号，荧光免疫分析仪俘获荧光信号，通过信号转化及设定的定标曲线自动转化为定量数值。

摘要： 本发明公开了一种液化动物软骨的设备，包括：外腔体，其上端可拆卸密封设有上盖、下端可开启/关闭密封设有下封盖，所述上盖开有投料口和第一进汽口；第一液化腔，其同轴且可上下滑动地设置在所述外腔体内；第二液化腔，其顶面固接在所述外腔体的外侧壁上，以使所述外腔体下端伸入第二液化腔内。本发明还公开了一种液化动物软骨的设备联产硫酸软骨素、Ⅱ型胶原寡肽、Ⅱ型胶原多肽的方法。本发明的液化动物软骨的设备，能对动物软骨进行第一次液化和第二次液得到液化物，从而简化动物软骨的加工流程、提高生产效率。

摘要： 本申请涉及重组III型胶原蛋白技术领域，尤其涉及重组人源III型胶原蛋白注射剂及其在在皮肤胶原再生中的应用。通过构建Col IIIɑ‑1和P4HA融合表达的毕赤酵母X33，制备了能够胞外表达III胶原蛋白ɑ链，对该基因工程菌进行发酵培养，能够大量收获胞外表达的III胶原蛋白ɑ链，极大地利于该蛋白的下游纯化和提取。本申请公开的重组人源III型胶原蛋白注射剂，以独立包装的Col III‑ɑ1‑DOPA和葡萄糖亚铁摩尔比例为5:1的条件下形成具有三螺旋和铁离子配位交联结构的水凝胶，能够增强胶原的粘合性，还能够在体内具有优良的生物相容性，非常适合应用在于中创伤部位的胶原再生和组织填充。