MC3T3-E1细胞

摘要： 背景:人牙周膜干细胞具有较强的成骨分化能力,人牙周膜干细胞来源外泌体作为牙周膜干细胞分泌的主要成分,对成骨细胞MC3T3-E1增殖和成骨分化的影响尚不明确。目的:探讨人牙周膜干细胞来源外泌体对MC3T3-E1细胞增殖和分化的影响。方法:采用酶消化法分离及培养人牙周膜干细胞,超速离心法提取人牙周膜干细胞来源外泌体,通过透射电镜、粒径分析及Western blot方法对人牙周膜干细胞来源外泌体进行鉴定;CCK8法检测不同质量浓度人牙周膜干细胞来源外泌体对MC3T3-E1细胞增殖的影响,茜素红染色观察100 mg/L人牙周膜干细胞来源外泌体对MC3T3-E1细胞成骨矿化的影响,Western blot检测100 mg/L人牙周膜干细胞来源外泌体干预前后MC3T3-E1细胞内MEK和ERK的磷酸化水平。结果与结论:①透射电镜观察可见外泌体为脂质双分子层形成的囊泡结构,粒径检测显示外泌体直径分布在50-120 nm,集中在79.86 nm,Western blot检测结果显示提取的外泌体中含有CD81,CD63,TSG101的表达;②与对照组相比,人牙周膜干细胞来源外泌体对MC3T3-E1细胞的增殖具有促进作用,且作用呈剂量依赖性;③与对照组相比,人牙周膜干细胞来源外泌体组MC3T3-E1细胞能够形成更多的钙结节;与对照组相比,人牙周膜干细胞来源外泌体组MC3T3-E1细胞内p-MEK及p-ERK蛋白表达量升高;④结果表明,人牙周膜干细胞来源外泌体可以显著促进MC3T3-E1增殖和成骨分化,推测可能与其激活MEK/ERK信号通路有关。

摘要： 背景:柚皮苷作为一种中药单体,具有抗炎、促进成骨和抗癌等作用;RAW264.7巨噬细胞在骨破坏过程中发挥重要作用。有研究发现降低炎症水平可以促进MC-3T3-E1细胞的成骨分化,所以通过抑制炎症相关通路,可能对成骨细胞分化具有促进作用。目的:观察柚皮苷通过调控RAW264.7细胞功能是否会影响MC-3T3-E1细胞的成骨分化。方法:采用CCK-8法检测不同浓度柚皮苷对脂多糖诱导的RAW264.7细胞的毒性。将RAW264.7细胞分成7组:即对照组(DMEM培养基)、炎症模型组(1 mg/L脂多糖)和柚皮苷组(1 mg/L脂多糖+50,100,150,200,250μmol/L柚皮苷),通过RT-PCR检测炎症因子m RNA水平变化,筛选出抗炎浓度较好的3组(150,200,250μmol/L柚皮苷组)数据用于后续实验。将RAW264.7细胞分成4组:炎症模型组、150,200,250μmol/L柚皮苷组分别取各组的上清液制备炎症上清液。最后将上述制取的炎症上清液与成骨诱导培养基1∶1比例混合共同培养MC-3T3-E1细胞并分为5组:对照组、炎症模型组、150,200,250μmol/L柚皮苷组,培养7,14 d进行成骨相关基因的检测,并进行碱性磷酸酶染色、碱性磷酸酶活性实验。结果与结论:①1 mg/L的脂多糖对巨噬细胞无毒性作用,200μmol/L柚皮苷对脂多糖诱导的巨噬细胞有细胞毒性作用(P<0.05);②筛选药物抗炎浓度过程中,与对照组相比柚皮苷浓度为150,200,250μmol/L时抗炎效果较好(P<0.05),此3组浓度用于后续实验;③碱性磷酸酶染色结果显示,与对照组相比柚皮苷浓度200μmol/L时染色效果最好,且14 d比7 d染色效果更佳;④与对照组相比,200μmol/L柚皮苷组的成骨基因mRNA表达水平最接近对照组,成骨效果最差的为炎症模型(P<0.05);⑤碱性磷酸酶活性实验中,7 d时与对照组相比,柚皮苷浓度为200μmol/L时碱性磷酸酶活性最强(P<0.05);与炎症模型组相比,柚皮苷浓度为200μmol/L时最佳(P<0.05);14 d时,与对照组相比,200μmol/L组无显著差异;与炎症模型组相比,200μmol/L组活性最强;⑥以上结果证明,柚皮苷通过调节RAW264.7巨噬细胞功能可改善炎症状态下MC-3T3-E1细胞的成骨分化。

摘要： 背景:增材制造技术可以精确、个性化地定制具有复杂多孔结构的骨支架,达到恢复临界骨缺损区域松质骨结构和功能的效果.目的:通过材料学和细胞学表征,明确三周期极小曲面结构β-磷酸三钙生物陶瓷骨支架的机械性能及生物活性,揭示三周期极小曲面结构对成骨细胞的调控效果.方法:通过Matlab R2020a软件设计330,420,510μm 3种孔径的三周期极小曲面G曲面支架,Inspire 2018软件分析支架结构设计.以三周期极小曲面结构导出后的STL文件为蓝本,通过基于数字激光加工的增材制造技术制备3种β-磷酸三钙生物陶瓷支架,采用扫描电镜观测支架表面形貌,X射线衍射仪检测物相组成,万能材料试验机检测支架的力学强度.将MC3T3-E1细胞与3种支架共培养,检测细胞的增殖活性、黏附能力与碱性磷酸酶活性.结果 与结论:①Inspire 2018软件显示,三周期极小曲面呈现出光滑、连续、均一的贯通式多孔结构;②扫描电镜下可见,基于数字激光加工的增材制造技术成功实现了三周期极小曲面结构的精确成型;③X射线衍射结果证实,支架由纯β-磷酸三钙晶相组成;④3组支架的压缩强度和弹性模量均处于或接近松质骨力学强度范围,且支架的压缩强度与孔径大小呈反比;⑤CCK8实验显示,MC3T3-E1细胞在3种支架上生长良好,生物活性与孔径呈现剂量依赖关系,510μm孔径促进细胞增殖效果最佳;⑥活细胞成像仪和激光共聚焦显微镜下可见,MC3T3-E1细胞能够在3种支架上实现早期黏附,且黏附量随孔径增大而增加;⑦碱性磷酸酶活性分析表明,420μm孔径支架上细胞的碱性磷酸酶活性最高;⑧结果表明,三周期极小曲面结构β-磷酸三钙生物陶瓷支架表现出较好的机械性能与生物活性,其中420μm孔径有利于促进细胞分化,510μm孔径有利于细胞增殖,具有修复临界骨缺损的应用潜力.

摘要： 背景:Biodentine是一种具有生物相容性的新型硅酸钙口腔修复材料,它不仅可以增加牙髓细胞中生长因子的分泌,也可以诱导牙本质的矿化,但是其在骨修复方面的研究较少.目的:通过构建干扰骨形态发生蛋白2的小鼠成骨前体细胞株,研究Biodentine对于干扰骨形态发生蛋白2小鼠成骨前体细胞株的增殖及分化能力的影响.方法:将0.1,1,10,100 g/L的Biodentine浸提液作用于小鼠成骨前体细胞24 h,通过CCK-8与碱性磷酸酶活性实验筛选最佳的作用质量浓度10 g/L,用于以下实验.将Biodentine浸提液作用于小鼠成骨前体细胞1,3,5,7d,以未干预组为对照,通过CCK-8与碱性磷酸酶活性实验观察作用前后细胞的增殖及成骨分化.构建干扰骨形态发生蛋白2的小鼠成骨前体细胞株,通过CCK-8与碱性磷酸酶活性实验观察干扰前后细胞的增殖及成骨分化.构建干扰骨形态发生蛋白2的小鼠成骨前体细胞株,Biodentine组加入10 g/L的Biodentine浸提液,设置单纯干扰组为对照,作用24,48 h后,通过CCK-8与碱性磷酸酶活性实验观察细胞的增殖及成骨分化;作用24 h后,Real-time PCR、Western blot检测碱性磷酸酶mRNA与蛋白的表达.结果 与结论:①10 g/L的Biodentine浸提液在1,3,5,7d可促进小鼠成骨前体细胞的增殖与成骨分化;②干扰骨形态发生蛋白2可抑制小鼠成骨前体细胞的增殖与成骨分化;③Biodentine组作用24,48 h后的细胞增殖与成骨分化能力高于干扰组(P＜0.05),作用24 h后的碱性磷酸酶mRNA与蛋白表达高于干扰组(P＜0.05);④结果表明,10g/L的Biodentine可以通过骨形态发生蛋白2增强成骨细胞的增殖及成骨分化.

摘要： 背景:Biodentine是一种具有生物相容性的新型硅酸钙口腔修复材料,它不仅可以增加牙髓细胞中生长因子的分泌,也可以诱导牙本质的矿化,但是其在骨修复方面的研究较少。目的:通过构建干扰骨形态发生蛋白2的小鼠成骨前体细胞株,研究Biodentine对于干扰骨形态发生蛋白2小鼠成骨前体细胞株的增殖及分化能力的影响。方法:将0.1,1,10,100 g/L的Biodentine浸提液作用于小鼠成骨前体细胞24 h,通过CCK-8与碱性磷酸酶活性实验筛选最佳的作用质量浓度10 g/L,用于以下实验。将Biodentine浸提液作用于小鼠成骨前体细胞1,3,5,7 d,以未干预组为对照,通过CCK-8与碱性磷酸酶活性实验观察作用前后细胞的增殖及成骨分化。构建干扰骨形态发生蛋白2的小鼠成骨前体细胞株,通过CCK-8与碱性磷酸酶活性实验观察干扰前后细胞的增殖及成骨分化。构建干扰骨形态发生蛋白2的小鼠成骨前体细胞株,Biodentine组加入10 g/L的Biodentine浸提液,设置单纯干扰组为对照,作用24,48 h后,通过CCK-8与碱性磷酸酶活性实验观察细胞的增殖及成骨分化;作用24 h后,Real-time PCR、Western blot检测碱性磷酸酶mRNA与蛋白的表达。结果与结论:①10 g/L的Biodentine浸提液在1,3,5,7 d可促进小鼠成骨前体细胞的增殖与成骨分化;②干扰骨形态发生蛋白2可抑制小鼠成骨前体细胞的增殖与成骨分化;③Biodentine组作用24,48 h后的细胞增殖与成骨分化能力高于干扰组(P<0.05),作用24 h后的碱性磷酸酶mRNA与蛋白表达高于干扰组(P<0.05);④结果表明,10 g/L的Biodentine可以通过骨形态发生蛋白2增强成骨细胞的增殖及成骨分化。

摘要： 目的探讨miR-381-3p对MC3T3-E1细胞成骨分化的影响和作用机制。方法慢病毒转染细胞后实验分为NC mimic miR-381-3p组、mimic miR-381-3p组、NC inhibitor miR-381-3p组和inhibitor miR-381-3p组;运用实时荧光定量PCR(qRT-PCR)法检测不同组miR-381-3p的表达水平以验证转染效率;诱导MC3T3-E1细胞成骨分化后,检测各组细胞中碱性磷酸酶(ALP)活性水平;茜素红染色法检测各组细胞的成骨矿化能力;qRT-PCR测定各组细胞中ALP、Runx2、PPARγ和ETS1 mRNA表达水平;蛋白免疫印迹法测定各组细胞中collagenⅠ、ALP、Runx2、PPARγ、ETS1、P-ERK1/2水平;并用MAPK/ERK通路抑制剂(PD98059)干预各组细胞后进行目的蛋白检测。结果与NC mimic miR-381-3p组、mimic miR-381-3p组及NC inhibitor miR-381-3p组比较,inhibitor miR-381-3p组中细胞中ALP、Runx2、ETS1 mRNA的水平均明显升高,并且collagenⅠ、ALP、Runx2、ETS1、P-ERK1/2蛋白的表达水平也明显升高,但是PPARγmRNA和蛋白表达水平是下调的;与其他3组对比,inhibitor miR-381-3p组中细胞的ALP活性和钙化能力检测显示均显著高表达。MAPK通路抑制后蛋白实验结果也佐证了miR-381-3p参与调控MC3T3-E1细胞的成骨分化过程。结论miR-381-3p通过下调ERK1/2/ETS1信号通路表达水平进而抑制了MC3T3-E1细胞的成骨分化能力。

摘要： 目的 探讨用四种不同硅烷将c(RGDfK)[(cyclo(Arg-Gly-Asp-d-Phe-Lys)]环肽固定于钛表面的效率及生物相容性。方法 钛表面经碱热处理(OH组),分别用3-氨丙基三乙氧基硅烷(3-aminopropyltriethoxysilane,APTES)(OHAP组)、3-氯丙基三乙氧基硅烷(3-chloropropyltriethoxysilane,CPTES)(OHCP组)、3-巯基丙基三甲氧基硅烷(3-mercaptopropyltriethoxysilane,MPTS)(OHMPT组)、3-异丁烯酰氧丙基三甲氧基硅烷(γ-methacryloxypropyltrimethoxysilane,γ-MPS)(OHMPS组)四种硅烷固定c(RGDfK)环肽,构建钛-硅烷-c(RGDfK)环肽涂层,钛片表面未处理组为空白对照组(NT组)。利用扫描电镜、接触角计观察各组涂层表面形貌及润湿性变化,通过X射线光电子能谱分析钛表面元素组成,4,6-二氨基-2-苯基吲哚(4,6-diamino-2-phenylindole,DAPI)与鬼笔环肽荧光染色后使用激光共聚焦显微镜观察材料表面小鼠前成骨细胞MC3T3-E1黏附情况,细胞计数(cell counting kit-8,CCK-8)试验和碱性磷酸酶(alkaline phosphatase,ALP)活性测定评价材料表面MC3T3-E1细胞增殖及成骨分化情况。结果 扫描电镜观察可见碱热处理后钛表面形成海绵状三维立体网状结构,硅烷-c(RGDfK)环肽涂层附着其上,各组润湿性较未处理钛片均有较大提高,OHMPS组Si/Ti、酰胺-N/Ti元素比最高;OHAP组细胞黏附形态最佳;OHAP组、OHMPT组、OHMPS组细胞增殖及ALP活性均显著高于对照组(P <0.05);OHCP组细胞增殖活性及ALP活性与对照组无统计学差异。结论 MPTS、CPTES、γ-MPS三种硅烷均能够作为偶联剂将c(RGDfK)环肽结合于钛表面,促进MC3T3-E1细胞黏附、增殖和分化,其中γ-MPS偶联c(RGDfK)环肽的效果最好,而MPTS、CPTES、γ-MPS偶联c(RGDfK)环肽后具有相似的生物学性能。

摘要： 目的:研究毛秀才二氯甲烷部位(INW-Ⅰ)对MC3T3-E1细胞增殖和分化的影响及分子机制。方法:经乙醇提取及二氯甲烷萃取后获得毛秀才INW-Ⅰ,用不同浓度(100μg/mL、200μg/mL、300μg/mL、400μg/mL、500μg/mL、600μg/mL)的毛秀才INW-Ⅰ孵育MC3T3-E1细胞24 h,检测MC3T3-E1细胞增殖的情况,得出毛秀才INW-Ⅰ促进MC3T3-E1细胞增殖的最佳浓度。设置对照组、500μg/mL INW-Ⅰ组、细胞外信号调节激酶(ERK1/2)抑制剂U0126组、骨形态发生蛋白9(BMP-9)抑制剂Noggin组,孵育24 h后分别检测各组MC3T3-E1细胞的活性及其中ERK1/2和BMP-9 mRNA、p-ERK1/2和BMP-9蛋白的表达水平。结果:在浓度为100~500μg/mL的范围内,毛秀才INW-Ⅰ的浓度越高MC3T3-E1细胞的光密度(OD)值越大,组间相比差异有统计学意义(P<0.05)。500μg/mL的毛秀才INW-Ⅰ对MC3T3-E1细胞中ERK1/2、BMP-9 mRNA及p-ERK1/2、BMP-9蛋白的表达均有显著的促进作用。结论:毛秀才INW-Ⅰ可提高MC3T3-E1细胞的活性,促进其增殖。毛秀才INW-Ⅰ可能是通过上调MC3T3-E1细胞中p-ERK1/2和BMP-9的表达而促进细胞的增殖和分化。

摘要： 目的筛选小鼠前成骨细胞(MC3T3-E1)miR-381-3p实验组(MC3-E1-mi)和对照组(MC3-E1-NC-mi)的差异蛋白,分析其生物学功能及相关信号通路。方法慢病毒转染构建实验组与对照组细胞,荧光定时定量PCR验证转染结果;收集细胞样品提取蛋白并筛选差异蛋白;对差异蛋白数据进行GO注释及KEGG通路富集分析。结果共筛选出了4774种差异表达蛋白,其中288种差异显著,表达上调138种,表达下调150种。GO富集结果显示,差异蛋白参与的生物过程主要为基因复制与转录、蛋白质修饰;参与的分子功能主要为转移酶活性、转移含磷基团;差异蛋白的细胞组分多为细胞膜与细胞核。KEGG通路富集分析显示,差异蛋白涉及的主要通路为泛素介导的蛋白水解、线粒体自噬、胰高糖素信号通路、糖类代谢,与成骨密切相关的通路有AMPK、PI3K/Akt、mTOR及Notch信号通路。结论筛选出Arsb、CCN2、COL11A1、ADAM17、CCN3和fibrillin-1差异表达显著,AMPK、PI3K/Akt、mTOR及Notch信号通路可能是肌少-骨质疏松症的研究方向。

摘要： 目的:探讨N-乙酰半胱氨酸(NAC)对尼古丁诱导的小鼠前成骨细胞系MC3T3-E1细胞凋亡的影响,并阐明其作用机制。方法:体外培养MC3T3-E1细胞,采用不同浓度(0、1.0、2.5、5.0和7.5 mmol·L^(-1))尼古丁诱导MC3T3-E1细胞损伤,采用MTT法检测各组MC3T3-E1细胞增殖活性,并确定尼古丁半数抑制浓度(IC_(50))。根据IC_(50)值将MC3T3-E1细胞分为对照组、尼古丁组和尼古丁+不同浓度(2.5、5.0和7.5 mmol·L^(-1))NAC组,采用MTT法检测各组细胞增殖活性,以确定NAC最适作用浓度。将细胞分为对照组、尼古丁(4.25 mmol·L^(-1))组、NAC(5.0 mmol·L^(-1))组和尼古丁(4.25 mmol·L^(-1))+NAC(5.0 mmol·L^(-1))组,采用MitoSOX荧光染色法检测各组细胞中线粒体来源活性氧簇(mitoROS)水平,采用流式细胞术检测各组细胞凋亡率,Western blotting法检测各组细胞中凋亡相关蛋白B细胞淋巴瘤2(Bcl-2)和Bcl-2相关X蛋白(Bax)蛋白表达水平,并计算Bax/Bcl-2比值。结果:与0 mmol·L^(-1)尼古丁组比较,不同浓度尼古丁组细胞增殖活性明显降低(P<0.05),且呈浓度依赖性。尼古丁的IC_(50)值为(4.25±0.03)mmol·L^(-1)。与对照组比较,尼古丁组细胞增殖活性明显降低(P<0.05);与尼古丁组比较,尼古丁+不同浓度NAC组细胞增殖活性明显升高(P<0.05),尼古丁+5.0 mmol·L^(-1) NAC组细胞增殖活性升高最明显。与对照组比较,尼古丁组细胞中mitoROS水平明显升高(P<0.05),细胞凋亡率明显升高(P<0.05),细胞中Bax/Bcl-2比值明显升高(P<0.05);与尼古丁组比较,NAC组和尼古丁+NAC组细胞中mitoROS水平明显降低(P<0.05),细胞凋亡率明显降低(P<0.05),尼古丁+NAC组细胞中Bax/Bcl-2比值明显降低(P<0.05)。结论:NAC可缓解尼古丁诱导的MC3T3-E1细胞凋亡,其作用机制可能与线粒体氧化应激有关。

摘要： 目的:研究中药菟丝子对MC3T3-E1细胞促增殖作用及其可能的作用机制.方法:体外培养小鼠成骨细胞MC3T3-E1,通过MTT法检测菟丝子提取物对细胞增殖的影响,通过相关试剂盒检测碱性磷酸酶(ALP)活性和钙盐沉积水平,Westem blot检测胶原蛋白、BMP2和Smad2蛋白表达.结果:菟丝子提取物能够促进小鼠成骨细胞MC3T3-E1增殖,提高ALP活性和钙盐沉积,并上调Col-Ⅰ、BMP2和Smad2蛋白表达,P＜0.05,,差异有统计学意义.结论:菟丝子提取物能够促进成骨细胞增殖,其作用机制可能与调节BMP2/Smad4信号通路有关.

摘要： 目的:研究中药菟丝子对MC3T3-E1细胞促增殖作用及其可能的作用机制.方法:体外培养小鼠成骨细胞MC3T3-E1,通过MTT法检测菟丝子提取物对细胞增殖的影响,通过相关试剂盒检测碱性磷酸酶(ALP)活性和钙盐沉积水平,Westem blot检测胶原蛋白、BMP2和Smad2蛋白表达.结果:菟丝子提取物能够促进小鼠成骨细胞MC3T3-E1增殖,提高ALP活性和钙盐沉积,并上调Col-Ⅰ、BMP2和Smad2蛋白表达,P＜0.05,,差异有统计学意义.结论:菟丝子提取物能够促进成骨细胞增殖,其作用机制可能与调节BMP2/Smad4信号通路有关.

摘要： 目的:研究中药菟丝子对MC3T3-E1细胞促增殖作用及其可能的作用机制.方法:体外培养小鼠成骨细胞MC3T3-E1,通过MTT法检测菟丝子提取物对细胞增殖的影响,通过相关试剂盒检测碱性磷酸酶(ALP)活性和钙盐沉积水平,Westem blot检测胶原蛋白、BMP2和Smad2蛋白表达.结果:菟丝子提取物能够促进小鼠成骨细胞MC3T3-E1增殖,提高ALP活性和钙盐沉积,并上调Col-Ⅰ、BMP2和Smad2蛋白表达,P＜0.05,,差异有统计学意义.结论:菟丝子提取物能够促进成骨细胞增殖,其作用机制可能与调节BMP2/Smad4信号通路有关.

摘要： 目的:研究中药菟丝子对MC3T3-E1细胞促增殖作用及其可能的作用机制.方法:体外培养小鼠成骨细胞MC3T3-E1,通过MTT法检测菟丝子提取物对细胞增殖的影响,通过相关试剂盒检测碱性磷酸酶(ALP)活性和钙盐沉积水平,Westem blot检测胶原蛋白、BMP2和Smad2蛋白表达.结果:菟丝子提取物能够促进小鼠成骨细胞MC3T3-E1增殖,提高ALP活性和钙盐沉积,并上调Col-Ⅰ、BMP2和Smad2蛋白表达,P＜0.05,,差异有统计学意义.结论:菟丝子提取物能够促进成骨细胞增殖,其作用机制可能与调节BMP2/Smad4信号通路有关.

摘要： 目的:研究中药菟丝子对MC3T3-E1细胞促增殖作用及其可能的作用机制.方法:体外培养小鼠成骨细胞MC3T3-E1,通过MTT法检测菟丝子提取物对细胞增殖的影响,通过相关试剂盒检测碱性磷酸酶(ALP)活性和钙盐沉积水平,Westem blot检测胶原蛋白、BMP2和Smad2蛋白表达.结果:菟丝子提取物能够促进小鼠成骨细胞MC3T3-E1增殖,提高ALP活性和钙盐沉积,并上调Col-Ⅰ、BMP2和Smad2蛋白表达,P＜0.05,,差异有统计学意义.结论:菟丝子提取物能够促进成骨细胞增殖,其作用机制可能与调节BMP2/Smad4信号通路有关.

摘要： 本研究以珍珠贝外套膜为原料,采用热水提取法获得水溶性胶原蛋白,利用碱性蛋白酶、碱性蛋白酶+中性蛋白酶、碱性蛋白酶+中性蛋白酶+酸性蛋白酶酶解胶原蛋白,得到POMCP1、POMCP2、POMCP3三种胶原蛋白肽.通过测定三种胶原蛋白肽的DPPH自由基清除率和羟基自由基清除率得知,POMCP2的抗氧化活性最高,DPPH自由基清除率、羟基自由基清除率分别为65.09％和1 41.36％.以小鼠MC3T3-E1细胞为体外抗氧化模型,研究了珍珠贝外套膜胶原蛋白肽对MC3T3-E1细胞氧化损伤的保护作用.结果表明,珍珠贝外套膜胶原蛋白肽对MC3T3-E1细胞无毒性作用,且多肽预处理组的细胞活力高于AMA单独处理组.POMCP1,POMCP2和POMCP3三种多肽组分中,POMCP2预处理组的细胞活力最高.

摘要： 本研究以珍珠贝外套膜为原料,采用热水提取法获得水溶性胶原蛋白,利用碱性蛋白酶、碱性蛋白酶+中性蛋白酶、碱性蛋白酶+中性蛋白酶+酸性蛋白酶酶解胶原蛋白,得到POMCP1、POMCP2、POMCP3三种胶原蛋白肽.通过测定三种胶原蛋白肽的DPPH自由基清除率和羟基自由基清除率得知,POMCP2的抗氧化活性最高,DPPH自由基清除率、羟基自由基清除率分别为65.09％和1 41.36％.以小鼠MC3T3-E1细胞为体外抗氧化模型,研究了珍珠贝外套膜胶原蛋白肽对MC3T3-E1细胞氧化损伤的保护作用.结果表明,珍珠贝外套膜胶原蛋白肽对MC3T3-E1细胞无毒性作用,且多肽预处理组的细胞活力高于AMA单独处理组.POMCP1,POMCP2和POMCP3三种多肽组分中,POMCP2预处理组的细胞活力最高.

摘要： 本研究以珍珠贝外套膜为原料,采用热水提取法获得水溶性胶原蛋白,利用碱性蛋白酶、碱性蛋白酶+中性蛋白酶、碱性蛋白酶+中性蛋白酶+酸性蛋白酶酶解胶原蛋白,得到POMCP1、POMCP2、POMCP3三种胶原蛋白肽.通过测定三种胶原蛋白肽的DPPH自由基清除率和羟基自由基清除率得知,POMCP2的抗氧化活性最高,DPPH自由基清除率、羟基自由基清除率分别为65.09％和1 41.36％.以小鼠MC3T3-E1细胞为体外抗氧化模型,研究了珍珠贝外套膜胶原蛋白肽对MC3T3-E1细胞氧化损伤的保护作用.结果表明,珍珠贝外套膜胶原蛋白肽对MC3T3-E1细胞无毒性作用,且多肽预处理组的细胞活力高于AMA单独处理组.POMCP1,POMCP2和POMCP3三种多肽组分中,POMCP2预处理组的细胞活力最高.

摘要： 本研究以珍珠贝外套膜为原料,采用热水提取法获得水溶性胶原蛋白,利用碱性蛋白酶、碱性蛋白酶+中性蛋白酶、碱性蛋白酶+中性蛋白酶+酸性蛋白酶酶解胶原蛋白,得到POMCP1、POMCP2、POMCP3三种胶原蛋白肽.通过测定三种胶原蛋白肽的DPPH自由基清除率和羟基自由基清除率得知,POMCP2的抗氧化活性最高,DPPH自由基清除率、羟基自由基清除率分别为65.09％和1 41.36％.以小鼠MC3T3-E1细胞为体外抗氧化模型,研究了珍珠贝外套膜胶原蛋白肽对MC3T3-E1细胞氧化损伤的保护作用.结果表明,珍珠贝外套膜胶原蛋白肽对MC3T3-E1细胞无毒性作用,且多肽预处理组的细胞活力高于AMA单独处理组.POMCP1,POMCP2和POMCP3三种多肽组分中,POMCP2预处理组的细胞活力最高.

摘要： 本研究以珍珠贝外套膜为原料,采用热水提取法获得水溶性胶原蛋白,利用碱性蛋白酶、碱性蛋白酶+中性蛋白酶、碱性蛋白酶+中性蛋白酶+酸性蛋白酶酶解胶原蛋白,得到POMCP1、POMCP2、POMCP3三种胶原蛋白肽.通过测定三种胶原蛋白肽的DPPH自由基清除率和羟基自由基清除率得知,POMCP2的抗氧化活性最高,DPPH自由基清除率、羟基自由基清除率分别为65.09％和1 41.36％.以小鼠MC3T3-E1细胞为体外抗氧化模型,研究了珍珠贝外套膜胶原蛋白肽对MC3T3-E1细胞氧化损伤的保护作用.结果表明,珍珠贝外套膜胶原蛋白肽对MC3T3-E1细胞无毒性作用,且多肽预处理组的细胞活力高于AMA单独处理组.POMCP1,POMCP2和POMCP3三种多肽组分中,POMCP2预处理组的细胞活力最高.

摘要： 本发明提供一种三维细胞培养支架的制备方法，包括如下步骤：a.称取1~10g的聚合物溶于的有机溶剂中，配成聚合物溶液；b.称取0~500mg增塑剂加到上述聚合物溶液中，混合均匀；c.称取羟基磷灰石胶纳米颗粒；银纳米颗粒；氧化锌纳米颗粒；壳聚糖纳米颗粒，加入到步骤b处理的溶液中，混合均匀，获得纺丝原液；d.将纺丝原液注入到静电纺丝设备中，在静电纺丝设备的接收装置上获得纺丝；e.将纺丝烘干，制得三维细胞培养支架。本发明还提供一种基于所述三维细胞培养支架制备方法所获得的三维细胞培养装置。所述培养装置可为培养的细胞提供无毒的具有生物相容性的生长环境，同时可适用于多种不同的种类细胞的培养。

摘要： 本发明涉及一种三维碳毡润滑增强体改性MC尼龙复合材料及其制备方法，按照重量百分比计包括：80％～90％聚酰胺树脂和10％～20％三维碳毡润滑增强体；其中，所述的聚酰胺树脂为MCPA6，所述的三维碳毡润滑增强体是指在三维碳毡表面负载氮掺杂氧化石墨烯/石蜡。本发明利用刻蚀改性剂将氮掺杂氧化石墨烯和石蜡润滑剂构筑在碳毡纤维表面形成具有“池‑渠”结构的三维润滑网络，使石墨烯和石蜡润滑剂均匀分散在MC尼龙基体材料中，有效改善了石墨烯填料的分散性，同时提高了树脂与填料界面的相容性；所制备的三维碳毡润滑增强体改性MC尼龙复合材料的力学性能、摩擦学性能均得到了显著的提升。

摘要： 本发明提供了一种基于GA‑BP‑MC神经网络的人体三维尺寸信息预测方法及装置，其中，方法中包括：S10形成训练样本集，训练样本集中每一组训练数据包含多个输入参数和一个目标三维尺寸；S20构建一多输入、含多个隐含层的BP网络模型；S30利用GA算法(遗传算法)优化BP网络模型初始的权值和阈值，得到最优的个体的权值和阈值；S40基于最优的个体的权值和阈值及形成的训练样本集对BP网络模型进行训练，确定模型参数；S50将包含用户的特征信息、预设部位的二维尺寸及预设部位相对于身高的比例系数的测试数据输入训练好的GA‑BP网络模型中得到预设部位的三维预测尺寸；S60将三维预测尺寸输入MC模型中进行修正得到修正后的三维尺寸信息，完成对预设部位三维尺寸信息的精确预测。

摘要： 本发明公开了一种PCL/Col/MC梯度三层人工骨膜及其制备方法与应用。属于骨科植入材料领域，包括静电纺丝溶液的制备和骨膜材料的制备。本发明所有采用原料均是已批准在用的医用植入性材料，通过静电纺丝的方法制备了PCL、Col和MC成分逐层梯度变化的三层复合纤维膜，分别使用PCL、PCL/Col、PCL/Col/MC溶液进行3层连续纺丝，且两种溶液交替时同时纺丝二者10％的溶液量。具有与天然骨膜相似的拉伸强度，各层具有各自功能，所制备人工骨膜的外层成分为纯PCL纤维层，具有良好的软组织屏蔽功能，中间层为PCL/胶原纤维，为人工骨膜整体提供力学支持，内层为PCL/Col/MC复合纤维，具有良好的骨诱导活性和骨引导能力。

摘要： 本发明公开一种MC‑ARMS‑mMB三联技术在耐药结核菌诊断试剂盒的制备方法和应用，描述了MC‑ARMS‑mMB（微菌落‑扩增阻碍突变系统‑多重分子信标）三联技术，一种用于结核杆菌及其耐药菌快速培养的诊断试剂盒。同时阐明了该诊断试剂盒的制备方法；并就其临床应用做了科学的表述。尤为重要的是指明了该诊断试剂盒的临床应用价值和较好的开发前景。

摘要： 本发明提供一种LIPUS对三维支架材料上MC3T3‑E1细胞内RNA表达影响的研究方法，包括：将MC3T3‑E1细胞接种到三维支架材料上；将接种完毕的三维支架材料和超声探头浸入水中，保持超声探头和材料的距离为5cm，从材料底部加载LIPUS，加载过程中每2～3天更换一次MC3T3‑E1细胞的培养基；停止加载LIPUS后，收集材料上的MC3T3‑E1细胞，进行全转录组和miRNA的高通量测序，筛选差异表达的mRNA、lncRNA、miRNA，并结合GO和KEGG进行整合分析。本发明为后续研究LIPUS促进三维材料内成骨分化的分子生物学机制提供可靠数据和新的研究思路。

摘要： 本发明涉及含细胞外基质的组合物、三维组织体形成用临时支架材料及三维组织体形成剂以及从三维组织体中回收细胞的方法。所述含细胞外基质的组合物包含片段化的细胞外基质成分和水性介质。

摘要： 本公开涉及用于控制细胞行为的三维微环境结构、用于控制细胞行为的三维表面、以及用于制造阵列和三维微环境结构的方法。

摘要： 一种三维骨细胞主动接种方法、三维骨细胞主动接种支架及其制备方法。该制备方法包括：将聚有机硅氧烷与固化剂加入反应瓶中搅拌混匀，真空抽滤得混合物，加入导电填料、成孔剂后充分混合后超声处理，然后浇筑到模具中加热固化，得到复合导电薄层，在其表面浇筑一层混合物形成绝缘层，加热固化后激光切割，得到具有微结构的电极状薄膜，除去电极状薄膜中的成孔剂；将多个去除成孔剂后的电极状薄膜进行粘贴，形成三维骨细胞主动接种支架。该三维骨细胞主动接种方法包括：将该支架置于细胞悬浮液中进行细胞吸附，吸附牢固后转移至细胞培养液中培养一周。本发明具有较高的孔隙率、细胞接种效率高，制备方法简单，成本低廉，具有很大的市场潜力。

摘要： 本发明提供一种三维细胞培养支架的制备方法，该方法包括如下步骤：a.称取1~10g的聚合物溶于10~100ml的有机溶剂中，配成聚合物溶液；b.称取0~500mg增塑剂，加到上述聚合物溶液中，混合均匀；c.称取羟基磷灰石胶纳米颗粒、银纳米颗粒、氧化锌纳米颗粒、壳聚糖纳米颗粒各0~2g，加入到步骤b处理的溶液中，混合均匀，获得纺丝原液；d.将所述纺丝原液注入到静电纺丝设备中，在静电纺丝设备的接收装置上获得纺丝；e.将所获得的纺丝进行烘干处理，即制得三维细胞培养支架。本发明还提供一种基于所述三维细胞培养支架制备方法所获得的三维细胞培养装置。所述培养装置可为培养的细胞提供无毒的具有生物相容性的生长环境，同时可适用于多种不同的种类细胞的培养。