细胞外信号调节激酶

摘要： 背景:在研究骨髓间充质干细胞增殖的基础上揭示其分化机制是防治骨质疏松症研究的热门课题之一.目的:探讨龟鹿二仙胶含药血清诱导骨髓间充质干细胞成骨分化以防治骨质疏松症的分子机制与激活细胞外信号调节激酶1/2/E26转录因子1信号通路因子之间的相关性.方法:购买商品化第3代SD大鼠骨髓间充质干细胞,根据加入不同成分培养基分为胎牛血清组、空白血清组、龟鹿二仙胶含药血清组、经典诱导组以及通路抑制剂组、龟鹿二仙胶含药血清+通路抑制剂组,根据分组条件进行成骨诱导分化,每3 d换液1次,干预7 d时采用碱性磷酸酶活性检测试剂盒测定前4组骨髓间充质干细胞的成骨分化水平;干预14 d时采用茜素红染色观察前4组骨髓间充质干细胞的成骨矿化水平,实时荧光定量PCR检测前4组骨髓间充质干细胞中碱性磷酸酶、Runt家族相关转录因子2、过氧化物酶体增殖物激活受体γ和E26转录因子1的基因表达水平,Western blot法检测6组骨髓间充质干细胞中Ⅰ型胶原、碱性磷酸酶、Runt家族相关转录因子2、过氧化物酶体增殖物激活受体γ、E26转录因子1、细胞外信号调节激酶1/2和磷酸化细胞外信号调节激酶1/2蛋白表达.结果 与结论:①与空白血清组比较,龟鹿二仙胶含药血清组碱性磷酸酶、Runt家族相关转录因子2、E26转录因子1 mRNA的表达水平均明显升高,成脂分化特异性指标过氧化物酶体增殖物激活受体γmRNA的表达水平则受到抑制;②与胎牛血清组和空白血清组比较,Ⅰ型胶原、碱性磷酸酶、Runt家族相关转录因子2、E26转录因子1、磷酸化细胞外信号调节激酶1/2等成骨分化相关蛋白表达水平明显升高,过氧化物酶体增殖物激活受体γ蛋白表达水平同样受到抑制,使用MAPK信号通路抑制剂PD98059可下调上述成骨分化相关蛋白表达水平,上调过氧化物酶体增殖物激活受体γ蛋白表达水平;③与胎牛血清组和空白血清组比较,龟鹿二仙胶含药血清组骨髓间充质干细胞的碱性磷酸酶活性(P<0.05)和钙化能力(P<0.05)明显提高;④结果表明,龟鹿二仙胶含药血清可能通过调节细胞外信号调节激酶1/2/E26转录因子1信号通路因子介导骨髓间充质干细胞成骨分化,这可能是其防治骨质疏松症的重要机制之一.

摘要： 背景:在研究骨髓间充质干细胞增殖的基础上揭示其分化机制是防治骨质疏松症研究的热门课题之一。目的:探讨龟鹿二仙胶含药血清诱导骨髓间充质干细胞成骨分化以防治骨质疏松症的分子机制与激活细胞外信号调节激酶1/2/E26转录因子1信号通路因子之间的相关性。方法:购买商品化第3代SD大鼠骨髓间充质干细胞,根据加入不同成分培养基分为胎牛血清组、空白血清组、龟鹿二仙胶含药血清组、经典诱导组以及通路抑制剂组、龟鹿二仙胶含药血清+通路抑制剂组,根据分组条件进行成骨诱导分化,每3 d换液1次,干预7 d时采用碱性磷酸酶活性检测试剂盒测定前4组骨髓间充质干细胞的成骨分化水平;干预14 d时采用茜素红染色观察前4组骨髓间充质干细胞的成骨矿化水平,实时荧光定量PCR检测前4组骨髓间充质干细胞中碱性磷酸酶、Runt家族相关转录因子2、过氧化物酶体增殖物激活受体γ和E26转录因子1的基因表达水平,Western blot法检测6组骨髓间充质干细胞中Ⅰ型胶原、碱性磷酸酶、Runt家族相关转录因子2、过氧化物酶体增殖物激活受体γ、E26转录因子1、细胞外信号调节激酶1/2和磷酸化细胞外信号调节激酶1/2蛋白表达。结果与结论:①与空白血清组比较,龟鹿二仙胶含药血清组碱性磷酸酶、Runt家族相关转录因子2、E26转录因子1 mRNA的表达水平均明显升高,成脂分化特异性指标过氧化物酶体增殖物激活受体γmRNA的表达水平则受到抑制;②与胎牛血清组和空白血清组比较,Ⅰ型胶原、碱性磷酸酶、Runt家族相关转录因子2、E26转录因子1、磷酸化细胞外信号调节激酶1/2等成骨分化相关蛋白表达水平明显升高,过氧化物酶体增殖物激活受体γ蛋白表达水平同样受到抑制,使用MAPK信号通路抑制剂PD98059可下调上述成骨分化相关蛋白表达水平,上调过氧化物酶体增殖物激活受体γ蛋白表达水平;③与胎牛血清组和空白血清组比较,龟鹿二仙胶含药血清组骨髓间充质干细胞的碱性磷酸酶活性(P<0.05)和钙化能力(P<0.05)明显提高;④结果表明,龟鹿二仙胶含药血清可能通过调节细胞外信号调节激酶1/2/E26转录因子1信号通路因子介导骨髓间充质干细胞成骨分化,这可能是其防治骨质疏松症的重要机制之一。

摘要： 目的探讨血管紧张素Ⅱ(AngⅡ)对加速纤维肉瘤蛋白(Raf)/丝裂原活化的细胞外信号调节激酶(MEK)/细胞外信号调节激酶(ERK)信号通路的调控作用,及对血小板源生长因子(PDGF)诱导的气道上皮细胞转分化(EMT)的影响。方法取人气道上皮细胞株16-HBE,分为对照组、PDGF不同浓度刺激组(5、25、50、100、200 ng/L),用免疫荧光法检测各组细胞EMT标志物波形蛋白(vimentin)阳性表达,选出合适的PDGF诱导浓度。将16-HBE细胞分为正常对照组、PDGF诱导组(100 ng/L)、AngⅡ不同浓度组(10^(-7)、10^(-6)、10^(-5) mol/L),用倒置显微镜检测细胞形态;蛋白免疫印迹法(Western blot)检测细胞EMT相关蛋白E-粘钙素(E-cadherin)、α-平滑肌肌动蛋白(α-SMA)、vimentin,气道纤维化相关蛋白-纤维连接蛋白(FN)、胶原蛋白Ⅳ(ColⅣ),Raf/MEK/ERK通路相关蛋白Raf、MEK及磷酸化水平(p-MEK)、ERK及磷酸化水平(p-ERK)、转化生长因子β1(TGF-β1)等蛋白相对表达水平。将16-HBE细胞分为正常对照组、PDGF诱导组、AngⅡ组(10^(-6) mol/L)、Raf/MEK/ERK通路抑制剂(sorafenib)组(10μmoL/L)、AngⅡ+sorafenib(10^(-6) mol/L+10μmol/L)组,检测细胞形态及Raf/MEK/ERK通路相关蛋白表达。结果PDGF不同浓度处理下,细胞vimentin阳性表达随浓度升高逐渐升高,并在100~200 ng/L时上升至稳定水平,选取100 ng/L为诱导浓度。AngⅡ不同浓度处理后,与正常对照组比较,PDGF诱导组细胞紧密连接减少,细胞呈长梭形等改变,E-cadherin表达降低(P0.05)。AngⅡ与sorafenib联合应用后,与正常对照组比较,PDGF诱导组细胞紧密连接减少,长梭形改变较多,Raf、p-MEK/MEK、p-ERK/ERK、TGF-β1蛋白表达升高(P<0.05)。与PDGF诱导组相比,AngⅡ组细胞紧密连接减少,长梭形改变较多,Raf、p-MEK/MEK、p-ERK/ERK、TGF-β1蛋白表达进一步升高(P<0.05),sorafenib组Raf、p-MEK/MEK、p-ERK/ERK、TGF-β1蛋白表达降低(P<0.05)。AngⅡ+sorafenib组上述指标变化与AngⅡ组相反,且差异有统计学意义(P<0.05)。结论AngⅡ可通过激活Raf/MEK/ERK通路表达,促进PDGF诱导的气道上皮细胞EMT进程。

摘要： 目的探讨miR-381-3p对MC3T3-E1细胞成骨分化的影响和作用机制。方法慢病毒转染细胞后实验分为NC mimic miR-381-3p组、mimic miR-381-3p组、NC inhibitor miR-381-3p组和inhibitor miR-381-3p组;运用实时荧光定量PCR(qRT-PCR)法检测不同组miR-381-3p的表达水平以验证转染效率;诱导MC3T3-E1细胞成骨分化后,检测各组细胞中碱性磷酸酶(ALP)活性水平;茜素红染色法检测各组细胞的成骨矿化能力;qRT-PCR测定各组细胞中ALP、Runx2、PPARγ和ETS1 mRNA表达水平;蛋白免疫印迹法测定各组细胞中collagenⅠ、ALP、Runx2、PPARγ、ETS1、P-ERK1/2水平;并用MAPK/ERK通路抑制剂(PD98059)干预各组细胞后进行目的蛋白检测。结果与NC mimic miR-381-3p组、mimic miR-381-3p组及NC inhibitor miR-381-3p组比较,inhibitor miR-381-3p组中细胞中ALP、Runx2、ETS1 mRNA的水平均明显升高,并且collagenⅠ、ALP、Runx2、ETS1、P-ERK1/2蛋白的表达水平也明显升高,但是PPARγmRNA和蛋白表达水平是下调的;与其他3组对比,inhibitor miR-381-3p组中细胞的ALP活性和钙化能力检测显示均显著高表达。MAPK通路抑制后蛋白实验结果也佐证了miR-381-3p参与调控MC3T3-E1细胞的成骨分化过程。结论miR-381-3p通过下调ERK1/2/ETS1信号通路表达水平进而抑制了MC3T3-E1细胞的成骨分化能力。

摘要： 目的:探讨A激酶锚定蛋白9(AKAP9)对肺腺癌细胞A549的作用及其可能的分子机制。方法:通过实时定量聚合酶链反应(RT-qPCR)和蛋白质印迹(Western blot)法检测shRNA的沉默效果;通过MTT和克隆形成实验检测AKAP9对肺腺癌细胞A549增殖的影响;Transwell实验检测AKAP9对肺腺癌细胞A549迁移的影响;流式细胞术检测细胞周期;Western blot检测周期相关蛋白P27、细胞周期素D1(Cyclin D1)、细胞周期素依赖性激酶4(CDK4)的表达和细胞外信号调节激酶(ERK)通路中表皮生长因子受体(EGFR)、ERK的磷酸化水平。结果:RT-qPCR和Western blot结果显示,shRNA可以有效地沉默肺腺癌细胞A549中AKAP9的表达(P<0.01)。MTT和克隆形成结果示,与对照组相比,沉默AKAP9显著抑制癌细胞A549的增殖和克隆形成能力(P<0.01)。Transwell实验示,与对照组相比,沉默AKAP9显著抑制癌细胞A549的迁移能力(P<0.01)。流式细胞术结果示,与对照组相比,沉默AKAP9可以诱导肺腺癌细胞G1-S期阻滞(P<0.01)。Western blot结果示,与对照组相比,沉默AKAP9增加细胞周期负性调控因子P27,减少正性调控蛋白Cyclin D1、CDK4的表达,并降低EGFR、ERK的磷酸化水平(P<0.01)。结论:沉默AKAP9可以通过抑制ERK通路活性减弱肺腺癌细胞A549增殖和迁移的能力。

摘要： 目的探讨金线莲苷(KS)对二乙基亚硝胺(DEN)诱导小鼠肝损伤的保护作用以及PELP1/ERK通路参与作用的分子机制。方法24只雄性C57BL/6小鼠,随机分为Control组、DEN组和KS组,每组8只。石蜡切片和HE染色检查肝脏组织病理学变化;可见分光光度法检测各组小鼠血清中ALT、AST和ALP的含量;qPCR、Western blot分别检测肝脏组织PELP1、ERK mRNA及蛋白表达水平;EL1SA测定肝脏组织TNF-α、IL-1β和IL-6的浓度。结果与对照组比较,DEN组小鼠肝脏表面粗糙、颜色变深、质地变硬,肝脏组织正常结构被破坏,血清ALT、AST和ALP含量明显升高(P<0.05),肝脏组织PELP1、ERK mRNA及蛋白表达水平显著升高(P<0.05),TNF-α、IL-1β和IL-6浓度均显著升高(P<0.05);与DEN组比较,KS组小鼠肝脏形态及细胞损伤性变化明显减轻,血清ALT、AST和ALP含量明显降低(P<0.05),肝脏组织PELP1、ERK mRNA及蛋白表达水平显著降低(P<0.05),TNF-α、IL-1β和IL-6浓度均显著降低(P<0.05)。结论金线莲苷对DEN诱导的小鼠肝损伤有显著保护作用,其机制与下调PELP1表达,阻断ERK通路活化,进而抑制炎症反应有关。

摘要： 目的讨论κ-阿片肽受体(kappa-opioid receptor,κ-OR)激活后通过细胞外信号调节激酶通路对内皮素-1(vascular endothelin-1,ET-1)诱导的心肌细胞肥大的抑制作用。方法体外原代培养大鼠乳鼠心肌细胞,ET-110 nmol·L^(-1)诱导心肌细胞肥大,观察κ-OR激动剂(U50488H)1μmol·L^(-1)对心肌细胞的作用,并探讨细胞外信号调节激酶1/2特异性抑制剂(U0126)1μmol·L^(-1)、蛋白激酶C(PKC)抑制剂Ro-31-8220(50 nmol·L^(-1))、百日咳毒素(pertussis toxin,PTX)5 mg·L^(-1)、κ-OR拮抗剂nor-binaltorphimine(NOR-BNI,1μmol·L^(-1))存在时,κ-OR的激活对心肌细胞肥大的影响及相关机制。心肌细胞的体积应用消化分离法及计算机图像分析系统测定;心肌细胞的心钠素(atrial natriuretic peptide,ANP)的mRNA相对表达利用RT-PCR法测定;心肌细胞ERK1/2的相对表达水平应用Western blot法测定;心肌细胞的形态变化利用相差显微镜观察。结果ET-1可以使心肌细胞体积增大,ANPmRNA表达增多,ERK1/2表达增多;与ET-1(10 nmol·L^(-1))组相比,U50488H(1μmol·L–1)可明显使ET-1诱导的心肌细胞体积变小,ANPmRNA表达减少,ERK1/2表达减少,U0126(1μmol·L^(-1))、Ro-31-8220(50 nmol·L^(-1))与其抑制程度相似,三者差异无显著性;当用U0126(1μmol·L^(-1))、Ro-31-8220(50 nmol·L^(-1))预处理时U50488H(1μmol·L^(-1))的抑制现象部分消失,但当用PTX(5 mg·L^(-1))、NOR-BNI(1μmol·L^(-1))(κ-OR受体拮抗剂)预处理时U50488H(1μmol·L^(-1))的抑制现象基本消失。结论κ-OR激动剂U50488H能抑制内皮素-1诱导的大鼠心肌细胞肥大,其作用机制主要与其能抑制胞外信号调节激酶通路的上游元件PKC的激活有关。

摘要： 目的探讨趋化因子CXCL1对人宫颈癌细胞活性的影响及分子机制.方法将体外培养人宫颈癌细胞株C33A细胞分为对照组(常规培养基)、CXCL1组(25、50、100 ng/mL)、pd98060组(100μmol/L pd98060)、CXCL1+pd98060组(100 ng/mL CXCL1+100μmol/L pd98060).应用MTT法检测细胞增殖能力,应用划痕实验和Transwell侵袭实验检测细胞迁移和侵袭能力;应用Western blot检测磷酸化细胞外信号调节激酶(p-ERK)、细胞外信号调节激酶(ERK)、E26转录因子蛋白1(ETS-1)、基质金属蛋白酶2(MMP-2)表达.结果CXCL1组宫颈癌细胞增殖水平、增殖率、侵袭率明显高于对照组(P<0.01);趋化因子CXCL1呈浓度依赖性地促进宫颈癌细胞的增殖、迁移和侵袭;CXCL1+pd98059组宫颈癌细胞增殖水平、增殖率、侵袭率明显低于CXCL1组(100 ng/mL)(P<0.01);pd98060组宫颈癌细胞增殖水平、增殖率、侵袭率明显低于CXCL1+pd98059组,差异具有统计学意义(P<0.01).随着趋化因子CXCL1作用时间的延长,p-ERK蛋白表达水平明显增加(P<0.01).CXCL1组p-ERK表达水平明显高于对照组,CXCL1+pd98059组p-E RK表达水平明显低于CXCL1组,pd98060组p-ERK表达水平明显低于CXCL1+pd98059组(P<0.01).随着趋化因子CXCL1作用时间的延长,ETS-1、MMP-2蛋白表达水平明显增加(P<0.05).CXCL1组ETS-1、MMP-2表达水平明显高于对照组,CXCL1+pd98059组ETS-1、MMP-2表达水平明显低于CXCL1组,pd98060组ETS-1、MMP-2表达水平明显低于CXCL1+pd98059组(P<0.01).结论趋化因子CXCL1可通过ERK信号通路提升ETS-1、MMP-2蛋白表达水平,促进人宫颈癌细胞的增殖、迁移和侵袭.

摘要： 目的:研究血管紧张素Ⅱ对肝癌HepG2细胞增殖的影响及其机制。方法:采用CCK-8法测定不同浓度血管紧张素Ⅱ作用24、48 h对HepG2细胞增殖的影响。通过蛋白质免疫印迹法测定血管紧张素Ⅱ处理后HepG2细胞内细胞外信号调节激酶(ERK)1/2和血管紧张素Ⅱ-1型受体(AT1R)蛋白表达水平。结果:作用24 h,10^(-6)、10^(-5) mol/L血管紧张素Ⅱ处理的HepG2细胞吸光度值均高于对照组(P0.05),而在处理5、10 min后磷酸化ERK1/2蛋白表达量高于0、20、30 min(P<0.05)。结论:血管紧张素Ⅱ可能通过上调AT1R的蛋白表达,促进ERK1/2磷酸化,以促进肝癌HepG2细胞异常增殖。

摘要： 目的探讨LIM结构域2(LIMD2)对食管癌细胞增殖、凋亡的影响,及其对细胞外信号调节激酶(ERK)/丝裂原活化蛋白激酶(MAPK)通路的调控作用。方法取10例食管癌患者癌组织及癌旁组织标本,采用qRT-PCR检测LIMD2 mRNA表达,采用免疫荧光染色检测LIMD2蛋白表达,采用Western blot法检测ERK1/2、p-ERK1/2、p38MAPK、p-p38MAPK蛋白表达。取人食管癌细胞(KYSE30、EC9706)和人正常食管上皮细胞(HEEC),采用qRT-PCR及免疫荧光染色检测细胞中LIMD2 mRNA及蛋白表达,筛选出LIMD2 mRNA及蛋白表达最高的EC9706细胞进行后续试验。取EC9706细胞,分为对照组(常规培养)、Si-LIMD2组(转染LIMD2干扰序列的腺病毒载体)、Si-NC组(转染不含LIMD2干扰序列的空腺病毒载体)、PD98059组(ERK/MAPK通路阻断剂)、ISO组(ERK/MAPK通路激活剂)、Si-LIMD2+ISO组(在Si-LIMD2组基础上加入ISO溶液);采用qRT-PCR及免疫荧光染色检测细胞中LIMD2 mRNA及蛋白表达;采用CCK-8法检测细胞增殖活性;采用流式细胞术检测细胞周期及凋亡率;采用Western blot法检测细胞ERK1/2、p-ERK1/2、p38MAPK、p-p38MAPK、细胞周期相关蛋白cyclin D1和CDK2、caspase-3、整合素β1、黏着斑激酶(FAK)、整合素连接激酶(ILK)表达。结果LIMD2 mRNA及蛋白在食管癌组织及KYSE30细胞、EC9706细胞中的表达均较高,且在EC9706细胞中的表达高于KYSE30细胞,差异均有统计学意义(P<0.05);p-ERK1/2、p-p38MAPK蛋白在食管癌组织中表达较高(P<0.05)。与对照组相比,Si-LIMD2组和PD98059组FAK、ILK、整合素β1蛋白及p-ERK1/2、p-p38MAPK蛋白表达较低,增殖活性较低,G0/G1期比例较高,S期及G2/M期比例较低,凋亡率较高,cyclin D1、CDK2蛋白表达较低,caspase-3蛋白表达较高,差异均有统计学意义(P<0.05),ISO组FAK、ILK、整合素β1蛋白及p-ERK1/2、p-p38MAPK蛋白表达较高,增殖活性较高,G0/G1期比例较低,S期及G2/M期比例较高,凋亡率较低,cyclin D1、CDK2蛋白表达较高,caspase-3蛋白表达较低,差异均有统计学意义(P<0.05);与Si-LIMD2组相比,Si-LIMD2+ISO组FAK、ILK、整合素β1蛋白及p-ERK1/2、p-p38MAPK蛋白表达较高,增殖活性较高,G0/G1期比例较低,S期及G2/M期比例较高,凋亡率较低,cyclin D1、CDK2蛋白表达较高,caspase-3蛋白表达较低,差异均有统计学意义(P<0.05)。结论沉默LIMD2基因表达可能通过抑制ERK/MAPK磷酸化途径激活而抑制食管癌细胞增殖、促进其凋亡。

摘要： 目的：观察具有化痰祛瘀、软坚散结功效的肝豆灵片对Wilson病TX模型小鼠学习记忆功能及ERK信号调节通路的影响. 方法：将100只小鼠分为正常对照组、Wilson病模型组、二巯丁二酸胶囊组、肝豆灵片组以及肝豆灵片+二巯丁二酸胶囊组,每组20只,选用具有化痰祛瘀、软坚散结功效的肝豆灵片以及临床常规排铜药物二巯丁二酸胶囊进行干预,运用免疫印迹法和Morris水迷宫实验观察化痰祛瘀、软坚散结中药肝豆灵片对Wilson病模型TX小鼠学习记忆功能及细胞外信号调节激酶(extracellular-signal-responsive kinase,ERK)信号通路的影响. 结果：与模型对照组比较,具有化痰祛瘀、软坚散结功效的肝豆灵片能促进Wilson病TX模型小鼠ERK1/2的磷酸化水平(P＜0.001),缩短Wilson病TX模型小鼠找到水下平台的潜伏期(P＜0.05),并且延长在其水下平台的停留时间(P＜0.05),而肝豆灵片+二巯丁二酸胶囊组效果显著优于单用肝豆灵片组和单用二巯丁二酸胶囊(P＜0.01、0.001). 结论：肝豆灵片可能通过促进Wilson病TX模型小鼠ERK1/2信号通路的磷酸化水平从而其改善空间记忆功能.

摘要： 目的：观察具有化痰祛瘀、软坚散结功效的肝豆灵片对Wilson病TX模型小鼠学习记忆功能及ERK信号调节通路的影响. 方法：将100只小鼠分为正常对照组、Wilson病模型组、二巯丁二酸胶囊组、肝豆灵片组以及肝豆灵片+二巯丁二酸胶囊组,每组20只,选用具有化痰祛瘀、软坚散结功效的肝豆灵片以及临床常规排铜药物二巯丁二酸胶囊进行干预,运用免疫印迹法和Morris水迷宫实验观察化痰祛瘀、软坚散结中药肝豆灵片对Wilson病模型TX小鼠学习记忆功能及细胞外信号调节激酶(extracellular-signal-responsive kinase,ERK)信号通路的影响. 结果：与模型对照组比较,具有化痰祛瘀、软坚散结功效的肝豆灵片能促进Wilson病TX模型小鼠ERK1/2的磷酸化水平(P＜0.001),缩短Wilson病TX模型小鼠找到水下平台的潜伏期(P＜0.05),并且延长在其水下平台的停留时间(P＜0.05),而肝豆灵片+二巯丁二酸胶囊组效果显著优于单用肝豆灵片组和单用二巯丁二酸胶囊(P＜0.01、0.001). 结论：肝豆灵片可能通过促进Wilson病TX模型小鼠ERK1/2信号通路的磷酸化水平从而其改善空间记忆功能.

摘要： 目的:观察支气管哮喘模型鼠在平喘Ⅰ号干预下不同时期细胞外信号调节激酶(extracellular regulated protein kinases,ERK)及c-fos的表达变化,探讨其防治支气管哮喘气道重塑的作用及其作用机制.方法:复制小鼠哮喘模型,随机分为正常对照组、模型对照组、地塞米松组、平喘Ⅰ号低、中、高剂量组6组,各组包括2周、4周、6周组.采用呼吸道合胞病毒(RSV)致敏和激发复制哮喘模型.实时定量-聚合酶链反应(Real time PCR)测定肺组织中c-fosmRNA含量,免疫印迹法(Western blotting)测定肺组织中ERK1表达水平.结果:模型对照组Wat和Wam值,ERK1含量和c-fosmRNA水平较正常对照组明显增高(P＜0.01);各干预组显著降低,平喘Ⅰ号高剂量4周及6周组优于地塞米松组(P＜0.05).结论:ERK信号转导途径在支气管哮喘气道重塑中起重要作用.平喘Ⅰ号可能通过调控ERK信号通路相关因子,缓解气道重塑,改善呼吸道症状.

摘要： 目的：研究低氧诱导因子-1α(HIF-1α)及细胞外信号调节激酶1/2(ERK1/2)在戊四氮(PTZ)诱导发育期大鼠癫痫持续状态(SE)后海马内的表达变化;通过ERK信号通路特异性阻断剂PD98059干预,探讨该通路是否参与了癫痫大鼠海马内HIF-1α的表达.方法：21日龄SD大鼠(208只),按随机数字表法分为SE组(96只)、NS组(96只)和PD98059组(16只),SE组腹腔注射PTZ溶液制作SE模型,NS组注射等剂量生理盐水,造模后0.5h、1h、1.5h、6h、12h、24h采用RT-PCR、Western-Blotting分别检测SE组与NS组大鼠海马内HIF-1α、ERK1/2mRNA和蛋白的表达;PD98059组大鼠腹腔注射PD98059,10min后腹腔注射PTZ溶液制作SE模型,造模成功后1h采用RT-PCR检测大鼠海马内HIF-1α、ERK1/2mRNA的表达,而于造模成功后1.5h采用Western-Blotting检测其相应蛋白的表达,并与SE组比较.结果：1、与NS组比较，SE组大鼠海马内HIF-1α、ERK1/2mRNA的表达明显升高，其中ERK1/2mRNA的表达高峰在SE后1h(1.112±0.126)，HIF-1αmRNA的表达高峰在SE后1.5h(0.589±0.090),差异有统计学意义(P＜0.05)。2、与NS组比较,SE组大鼠海马内HIF-1α、p-ERK1/2蛋白的表达亦明显升高，其中p-ERK1/2蛋白的表达高峰在SE后1.5h(1.127±0.155)，而HIF-1α蛋白的表达高峰在SE后6h(0.230±0.052)，差异有统计学意义(P＜0.05)。3、与SE组相比，PD98059组大鼠海马内ERK1/2mRNA及其磷酸化蛋白的表达降低(P＜0.05)，而HIF-1αmRNA和蛋白的表达亦降低(P＜0.0 5)，两指标间具有正相关性。结论：戊四氮诱导发育期大鼠SE后ERK信号通路被激活，它参与了SE后海马内HIF-1α的表达调控。

摘要： 细胞外信号调节激酶(Extracellular Regulated Kinase，ERK)是信号转导的重要分子，也是MAPK家族中的重要成员。ERK信号通路是多数生长因子，细胞因子调控细胞增殖的重要途径．同时参与细胞分化，调控细胞周期。本文总结了ERK信号转导通路的特点及其在细胞凋亡中的作用，并结合屠宰后肌肉变化的信号级联反应特点，阐述了ERK信号转导通路与动物肌肉生长发育以及宰后肌肉变化的关系。

摘要： 目的：研究原发性2型糖尿病大鼠骨骼肌中葡萄糖运载体4(GLUT4)、蛋白激酶B(PKB／Akt)、细胞外信号调节激酶1／2(ERKl／2)和腺苷酸活化蛋白激酶(AMPK)等蛋白表达和活性在急性运动前后的变化，探讨2型糖尿病大鼠骨骼肌中葡萄糖转运降低的可能原因以及运动促进2型糖尿病大鼠骨骼肌细胞摄取葡萄糖的可能机制。方法：采用10只OLETF大鼠作为2型糖尿病组，10只LETO大鼠作为正常对照组。并将两组大鼠进一步随机分为两组，即运动组和对照组，每组5只。结论:2型糖尿病大鼠比目鱼肌和趾长伸肌中GLUT4蛋白表达受到抑制，这可能是2型糖尿病大鼠骨骼肌细胞摄取葡萄糖减少的主要原因之一。PKB/Aht和ERKl/2很可能参与了运动促进正常大鼠和2型糖尿病大鼠骨骼肌摄取葡萄糖的信号传导机制。AMPKα的表达和激活在2型糖尿病大鼠比目鱼肌和趾长伸肌中无缺陷，AMPK对运动的反应在不同肌纤维类型中存在差异，AMPK可能参与了快肌(趾长伸肌)中运动所引发的信号传导机制。

摘要： 细胞外信号调节激酶(ERK)是将信号从表面受体传导至细胞核的关键，参与细胞增殖与分化，细胞形态维持，细胞凋亡和细胞恶变等多种生物学反应，其异常或过度表达在细胞恶性转化及演进中起重要作用。本实验目的在于研究欣胃颗粒对胃癌前病变大鼠ERK1的影响，以进一步揭示欣胃颗粒对胃癌前病变的防治作用和具体机制。

摘要： MAPK信号通路在细胞的分化、增殖及凋亡等过程中起着十分关键的作用.MAPK家族的信号通路主要包括细胞外信号调节蛋白激酶(ERK),应激活化蛋白激酶(JNK)、p38丝裂原活化蛋白激酶(p38MAPK)等.从目前的研究来看,ERK、JNK、p38MAPK三条信号通路与ED的发生发展紧密联系.本文根据相关文献对MAPK信号通路与勃起功能障碍的相关性作一综述.

摘要： MAPK信号通路在细胞的分化、增殖及凋亡等过程中起着十分关键的作用.MAPK家族的信号通路主要包括细胞外信号调节蛋白激酶(ERK),应激活化蛋白激酶(JNK)、p38丝裂原活化蛋白激酶(p38MAPK)等.从目前的研究来看,ERK、JNK、p38MAPK三条信号通路与ED的发生发展紧密联系.本文根据相关文献对MAPK信号通路与勃起功能障碍的相关性作一综述.

摘要： MAPK信号通路在细胞的分化、增殖及凋亡等过程中起着十分关键的作用.MAPK家族的信号通路主要包括细胞外信号调节蛋白激酶(ERK),应激活化蛋白激酶(JNK)、p38丝裂原活化蛋白激酶(p38MAPK)等.从目前的研究来看,ERK、JNK、p38MAPK三条信号通路与ED的发生发展紧密联系.本文根据相关文献对MAPK信号通路与勃起功能障碍的相关性作一综述.

摘要： 本发明公开了式1.0的ERK抑制剂及其药学上可接受的盐和溶剂化物。Q是可以具有桥环或者稠合环的哌啶或者哌嗪环。哌啶环在环内可以具有双键。所有其它取代基如本文中所定义。还公开了利用式1.0化合物治疗癌症的方法。

摘要： 本发明公开了细胞凋亡信号调节激酶抑制剂及其应用。如通式I所示化合物、其互变异构体或其药学上可接受的盐：本发明提供了一类结构新颖的化合物，药效学实验证明：本发明的化合物对ASK1受体有较好的抑制能力，能体外有效抑制纤维化的形成，且对正常细胞毒性较低。因此，本发明的化合物可以用于治疗多种纤维化及相关性疾病。

摘要： 本发明涉及一种如通式(I)所示的化合物；该化合物具有细胞凋亡信号调节激酶(“ASK1”)抑制活性，因此可用于对肾病、糖尿病性肾病和肾脏纤维化等疾病的治疗。

摘要： 本发明涉及一种如通式(I)所示的化合物；该化合物具有细胞凋亡信号调节激酶(“ASK1”)抑制活性，因此可用于对肾病、糖尿病性肾病和肾脏纤维化等疾病的治疗。

摘要： 本发明涉及式(I)化合物：其中变量如上文所定义。所述化合物具有细胞凋亡信号调节激酶(“ASK1”)抑制活性，并且因此适用于治疗ASK1介导的病况，包括自身免疫病症；炎性疾病；心血管疾病；糖尿病；糖尿病性肾病；心‑肾疾病，包括肾脏疾病；纤维化疾病；呼吸道疾病；COPD；特发性肺纤维化；急性肺损伤；急性肝脏疾病和慢性肝脏疾病；以及神经变性疾病。

摘要： 本发明公开了式1.0的ERK抑制剂及其药学上可接受的盐和溶剂化物。Q是可以具有桥环或者稠合环的哌啶或者哌嗪环。哌啶环在环内可以具有双键。所有其它取代基如本文中所定义。还公开了利用式1.0化合物治疗癌症的方法。

摘要： 本发明公开了细胞凋亡信号调节激酶抑制剂及其应用。如通式I所示化合物、其互变异构体或其药学上可接受的盐：

摘要： 本发明公开一种式(I)的化合物或其药学上可接受的盐类、酯类、立体异构体、互变异构体、溶剂化物、水合物或它们的组合：

摘要： 本发明涉及一种具有式I结构的稠环化合物或者其药学上可接受的盐或者其立体异构体或者其溶剂化物或者其前药分子。本发明提供的该类新的稠环类化合物能够有效的与ASK1结合并作为ASK1抑制剂，从而可以阻滞ASK1控制的下游通路，缓解或治愈ASK1介导的相关疾病。

摘要： 本发明涉及一种如通式(I)所示的化合物；该化合物具有细胞凋亡信号调节激酶(“ASK1”)抑制活性，因此可用于对肾病、糖尿病性肾病和肾脏纤维化等疾病的治疗。