牙周膜干细胞

摘要： 背景:人牙周膜干细胞具有较强的成骨分化能力,人牙周膜干细胞来源外泌体作为牙周膜干细胞分泌的主要成分,对成骨细胞MC3T3-E1增殖和成骨分化的影响尚不明确。目的:探讨人牙周膜干细胞来源外泌体对MC3T3-E1细胞增殖和分化的影响。方法:采用酶消化法分离及培养人牙周膜干细胞,超速离心法提取人牙周膜干细胞来源外泌体,通过透射电镜、粒径分析及Western blot方法对人牙周膜干细胞来源外泌体进行鉴定;CCK8法检测不同质量浓度人牙周膜干细胞来源外泌体对MC3T3-E1细胞增殖的影响,茜素红染色观察100 mg/L人牙周膜干细胞来源外泌体对MC3T3-E1细胞成骨矿化的影响,Western blot检测100 mg/L人牙周膜干细胞来源外泌体干预前后MC3T3-E1细胞内MEK和ERK的磷酸化水平。结果与结论:①透射电镜观察可见外泌体为脂质双分子层形成的囊泡结构,粒径检测显示外泌体直径分布在50-120 nm,集中在79.86 nm,Western blot检测结果显示提取的外泌体中含有CD81,CD63,TSG101的表达;②与对照组相比,人牙周膜干细胞来源外泌体对MC3T3-E1细胞的增殖具有促进作用,且作用呈剂量依赖性;③与对照组相比,人牙周膜干细胞来源外泌体组MC3T3-E1细胞能够形成更多的钙结节;与对照组相比,人牙周膜干细胞来源外泌体组MC3T3-E1细胞内p-MEK及p-ERK蛋白表达量升高;④结果表明,人牙周膜干细胞来源外泌体可以显著促进MC3T3-E1增殖和成骨分化,推测可能与其激活MEK/ERK信号通路有关。

摘要： 背景:牙周膜干细胞作为牙源性间充质干细胞一员,是近年来牙周骨组织工程的研究热点。由于干细胞数量不足以及微环境的影响,牙周组织再生能力往往无法满足治疗的需要。近年来,片状培养细胞片和三维培养细胞球体作为单细胞悬浮注射的替代品,能够有效改善数量不足和微环境等问题,成为组织工程的研究趋势。但是目前运用三维培养技术形成牙周膜干细胞球体的研究较少。目的:探究三维培养技术对人牙周膜干细胞形态、活性及成骨分化的影响。方法:采用改良酶消化法培养人牙周膜干细胞并进行细胞鉴定。通过细胞骨架和细胞核荧光标记检测细胞球体的形态;通过Live/Dead染色试剂盒检测细胞球体的活性;通过碱性磷酸酶活性、成骨相关基因表达水平分析三维培养技术对人牙周膜干细胞成骨分化的影响。结果与结论:①人牙周膜干细胞球体形态及活性呈时间依赖性变化。随时间增长,细胞球直径变小,球体核心死亡细胞增加;②与二维培养比较,成骨诱导3 d时三维培养人牙周膜干细胞的碱性磷酸酶活性及成骨诱导3,4,7 d时成骨相关基因的表达增加,β-catenin的表达增加,提示三维培养技术可促进人牙周膜干细胞成骨分化,可能与Wnt/β-catenin通路有关。

摘要： 目的探讨力生长因子(mechano⁃growth factor,MGF)对牙周膜干细胞增殖、分化的影响及其作用的分子机制。方法采用免疫磁珠法分选人牙周膜干细胞(periodontal ligament stem cells,PDLSCs),流式细胞仪检测表面标志物,并观察分选细胞的克隆形成能力及多向分化能力;CCK8法检测不同浓度MGF功能肽段(MGF⁃Ct24E肽)作用下PDLSCs的增殖活性;Western blot检测MGF⁃Ct24E肽作用下PDLSCs中的增殖细胞核抗原(pro⁃liferating cell nuclear antigen,PCNA)、碱性螺旋环螺旋转录因子Scleraxis、Ⅰ型胶原ɑ1(collagen type I alpha 1,COL1A1)、成骨细胞特异性转录因子Osterix、Yes相关蛋白(Yes⁃associated protein,YAP)、磷酸化YAP(phosphory⁃lation yes⁃associated protein,P⁃YAP)蛋白表达量;免疫荧光观察YAP的表达情况;siRNA干扰YAP表达后,观察PDLSCs中MGF⁃Ct24E作用下PCNA、Scleraxis和COL1A1的表达。结果免疫磁珠分选的PDLSCs高表达干细胞表面标志物CD29、CD90、CD105,低表达造血细胞表面标志物CD34、CD45;细胞具有较强的克隆形成能力,成骨诱导茜素红染色后可见红色钙结节,成脂诱导油红O染色后可见红色脂滴;50 ng/mL和100 ng/mL MGF⁃Ct24E肽作用24 h后,PDLSCs的增殖活性增强(P<0.05);细胞中PCNA、Scleraxis和COL1A1蛋白表达上调,而Osterix蛋白表达量下调(P<0.05);50 ng/mL MGF⁃Ct24E肽作用24 h后,YAP蛋白357位点磷酸化水平增强(P<0.05),免疫荧光染色观察发现,YAP蛋白在胞核聚集;MGF⁃Ct24E肽作用下,siRNA抑制YAP表达后,细胞中PCNA、Scler⁃axis蛋白表达量下调(P<0.05)。结论MGF通过激活YAP促进PDLSCs增殖及成纤维分化。

摘要： 目的探讨沉默组蛋白去乙酰化酶9(histone deacetylase 9,HDAC9)对牙周膜干细胞(periodontal liga⁃ment stem cells,PDLSCs)增殖与成骨分化的影响。方法体外分离培养及鉴定PDLSCs,构建HDAC9的siRNA转染至PDLSCs中,实验分为阴性对照组(siNC组)和实验组(siHDAC9组),qRT⁃PCR检测干扰效果,流式细胞术检测细胞周期,CCK⁃8检测细胞增殖活性,Western blot检测增殖细胞核抗原(proliferating cell nuclear anti⁃gen,PCNA)的蛋白表达;qRT⁃PCR检测Runt相关转录因子2(runt⁃related transcription factor 2,RUNX2)、碱性磷酸酶(alkaline phosphatase,ALP)的mRNA表达,Western blot检测RUNX2的蛋白表达,茜素红染色检测矿化结节形成。结果相较于siNC组,siHDAC9组HDAC9 mRNA表达降低(P<0.01)。siHDAC9组PDLSCs增殖指数大于siNC组(P<0.01),增殖活性强于siNC组(P<0.05),PCNA的蛋白表达高于siNC组(P<0.01)。siHDAC9组RUNX2、ALP的mRNA表达高于siNC组(P<0.05),RUNX2蛋白表达高于siNC组(P<0.01),矿化结节数多于siNC组。结论沉默HDAC9可促进PDLSCs的增殖与成骨分化。

摘要： 背景:正畸牙移动和正畸诱导牙根吸收是正畸治疗中的重要部分,雌激素可以通过影响牙周组织骨改建调节正畸牙移动速率并可能抑制正畸诱导的牙根吸收.目的:综述分析雌激素对正畸牙移动和正畸诱导牙根吸收的影响机制.方法:文章第一作者检索PubMed、中国知网、万方数据库收录的相关文献;英文检索词为"estrogen,orthodontic tooth movement,orthodontically induced root resorption,osteoclast,osteoblast,bone marrow mesenchymal stem cells";中文检索词为"雌激素、正畸牙移动、正畸诱导牙根吸收、成骨细胞、破骨细胞、骨髓间充质干细胞、牙周膜干细胞";最终纳入53篇文献进行归纳总结.结果 与结论:①正畸牙移动是正畸治疗的重要组成部分,是在机械力作用下通过骨改建实现的,而牙槽骨改建是正畸牙移动的基础.②雌激素是骨组织改建的重要调节剂;雌激素通过多种途径和多种细胞因子抑制破骨细胞分化、延长破骨细胞寿命,促进成骨细胞增殖、分化及功能,从而抑制骨吸收促进骨生成,骨改建减少,正畸牙移动受到抑制.③雌激素可能主要通过对破牙骨质细胞的抑制作用,减少正畸诱导的牙根吸收,其中破骨细胞及破牙细胞的分化在牙齿移动及牙根吸收过程中有重要意义.④最近研究发现酪氨酸激酶是雌激素抑制人类破骨细胞分化、存活和功能的重要信号递质.⑤虽然对雌激素在骨改建及牙根吸收方面有了初步研究,但是哪种机制占主导作用未阐明,且多处于基础或动物研究阶段,尚需关于该方面机制研究及临床研究.

摘要： 目的探讨沉默组蛋白去乙酰化酶9(histone deacetylase 9,HDAC9)对牙周膜干细胞(periodontal liga⁃ment stem cells,PDLSCs)增殖与成骨分化的影响。方法体外分离培养及鉴定PDLSCs,构建HDAC9的siRNA转染至PDLSCs中,实验分为阴性对照组(siNC组)和实验组(siHDAC9组),qRT⁃PCR检测干扰效果,流式细胞术检测细胞周期,CCK⁃8检测细胞增殖活性,Western blot检测增殖细胞核抗原(proliferating cell nuclear anti⁃gen,PCNA)的蛋白表达;qRT⁃PCR检测Runt相关转录因子2(runt⁃related transcription factor 2,RUNX2)、碱性磷酸酶(alkaline phosphatase,ALP)的mRNA表达,Western blot检测RUNX2的蛋白表达,茜素红染色检测矿化结节形成。结果相较于siNC组,siHDAC9组HDAC9 mRNA表达降低(P<0.01)。siHDAC9组PDLSCs增殖指数大于siNC组(P<0.01),增殖活性强于siNC组(P<0.05),PCNA的蛋白表达高于siNC组(P<0.01)。siHDAC9组RUNX2、ALP的mRNA表达高于siNC组(P<0.05),RUNX2蛋白表达高于siNC组(P<0.01),矿化结节数多于siNC组。结论沉默HDAC9可促进PDLSCs的增殖与成骨分化。

摘要： 组织工程研究中的干细胞:培养与移植栏目设置1研究与报告1.1 骨髓干细胞1.2 造血干细胞1.3 脂肪干细胞1.4 脐带脐血干细胞1.5 肿瘤干细胞1.6 胚胎干细胞1.7 牙髓及牙周膜干细胞1.8 诱导性多能性干细胞2 技术与方法2.1 干细胞培养与分化2.2 干细胞移植2.3 干细胞外泌体2.4 干细胞因子及调控因子2.5 干细胞转基因表达2.6 干细胞与中药2.7 干细胞相关大数据分析.

摘要： 背景:干细胞治疗具有巨大的临床应用潜力.在干细胞植入患者前,需要对干细胞来源进行传染病和遗传疾病的筛查,但是一些与生活方式相关的重要因素往往容易被忽略,尤其是吸烟.吸烟是许多疾病发生的危险因素,且随着电子烟使用的增加,尼古丁暴露越来越严重和普遍.目的:着重描述和分析体外尼古丁暴露对各类干细胞的影响.方法:检索PubMed和中国知网数据库1806-2021年间收录的相关文章,英文检索词为"nicotine,tobacco smoking,stem cells therapy,embryonic stem cells,mesenchymal stem cells,induced pluripotent stem cells,periodontal ligament-derived stem cells",中文检索词为"尼古丁,吸烟,干细胞治疗,胚胎干细胞,间充质干细胞,诱导性多能干细胞,牙周膜干细胞",按纳入和排除标准共选择文献59篇进行归纳总结.结果 与结论:尼古丁激活胚胎干细胞、间充质干细胞、诱导多能性干细胞和牙周膜干细胞上的神经元烟碱型乙酰胆碱受体,通过多种机制对它们的增殖、分化、迁移和凋亡过程产生影响.目前尼古丁对干细胞影响的研究虽然面临严峻的挑战,但由于"健康干细胞"是干细胞治疗的必备前提,所以有必要研究尼古丁对干细胞的影响.

摘要： 目的:探究人类同源基因2(EZH2)对脂多糖(Lipopolysaccharides,LPS)刺激下的牙周膜干细胞(periodontal ligament stem cells,PDLSCs)成骨分化能力的影响。方法:体外分离PDLSCs,使用Western Blot技术筛选出LPS体外刺激PDLSCs最佳浓度与时间模拟炎症环境,使用RNA沉默技术敲减EZH2基因,利用脂质体将siEZH2转染至PDLSCs细胞后使用Western blot检测EZH2的转染效率。使用脂质体转染技术敲低PDLSCs的EZH2基因后使用Western Blot检测EZH2的表达,Western Blot检测EZH2敲低对炎症状态下PDLSCs中成骨蛋白Runx2、碱性磷酸酶(Alkalinephosphatase,ALP)、骨钙素(osteocalcin,OCN)表达影响,使用茜素红染色检测PDLSCs成骨变化。结果:EZH2敲低后炎症状态下PDLSCs中骨形成标志物ALP、Runx2和OCN表达增强,茜素红染色矿化结节形成增加。结论:抑制EZH2可以促进LPS刺激所模拟炎症状态下PDLSCs成骨分化能力。

摘要： 目的:研究骨髓间充质干细胞(BMMSCs)外泌体调控信号转导与转录激活因子3(STAT3)通路促进牙周膜干细胞(PDLSCs)成骨分化的作用及机制。方法:原代培养BMMSCs和PDLSCs,取第3代BMMSCs细胞分离外泌体,取第3代PDLSCs细胞进行成骨诱导并分组,外泌体组加入15μg/mL重悬于磷酸盐缓冲液(PBS)的外泌体,PBS组加入等体积PBS,拮抗剂组加入15μg/mL外泌体和50μmol/L以二甲基亚砜(DMSO)为溶剂的STAT3拮抗剂AG490,外泌体+DMSO组加入15μg/mL外泌体和等体积DMSO,DMSO组加入等体积PBS及DMSO。诱导7 d后,Western blot检测碱性磷酸酶(ALP)、骨钙素(OCN)、Ⅰ型胶原(Col-Ⅰ)、磷酸化酪氨酸激酶2(p-JAK2)、磷酸化STAT3(p-STAT3)的表达;诱导21 d后进行茜素红染色,检测光密度(OD)值。结果:PDLSCs中ALP、OCN、Col-Ⅰ、p-JAK2及p-STAT3的表达和茜素红染色OD值,外泌体组高于PBS组,拮抗剂组低于外泌体+DMSO组(P<0.05)。结论:BMMSCs外泌体通过激活JAK2/STAT3通路促进PDLSCs成骨分化。

摘要： 牙周膜干细胞(hPDLSCs）具有良好的增殖能力及多向分化潜能,同时其分离操作简便,因此hPDLSCs被认为是牙周组织工程再生中重要的种子细胞来源.支架材料是组织工程学中核心内容和关键因素,不仅起着结构支撑的作用,而且可以调控细胞增殖和多向分化等行为.由于静电纺丝技术构建的纳米纤维材料,具有孔隙率高、比表面积大等特点,在结构和功能上可以最大程度模拟天然细胞外基质,因而在组织再生工程中得到广泛应用.

摘要： 近年来有研究发现低剂量硫化氢有促进成骨作用.本文探讨硫化氢对在骨修复再生中起重要作用的巨噬细胞的影响,进而研究这一影响对人牙周膜干细胞干性及成骨功能的影响及机制.内源性硫化氢是由骨髓间叶干细胞产生，硫化氢抑制LPS诱导的巨噬细胞向M1途径转化，促进骨髓间叶干细胞的再生。而牙周炎一是种慢性感染性炎症，以附着丧失和牙槽骨的破坏为特征。在牙周炎发生发展的过程中，单核/巨噬细胞参与的免疫反应扮演了重要角色，吞噬作用是防止细菌进入牙周组织的一道防线，在起到防御作用的同时，吞噬细胞过度的免疫反应也可能会破坏牙周组织，最终导致附着丧失和牙槽骨吸收。而硫化氢可以抑制LPS诱导的巨噬细胞向M1途径转化，促进骨髓间叶干细胞的再生，从而在牙周炎的治疗的应用。

摘要： 探讨TAZ基因在人类牙周膜干细胞(hPDLSCs)增殖、干性维持及成骨分化中的作用.TAZ基因对人类牙周膜干细胞的增殖、干性维持有正向调控作用，并且在其成骨分化过程中发挥正向调节作用。

摘要： 研究芦丁促进人类牙周膜干细胞(hPDLSCs)膜片的形成及增强牙周膜干细胞膜片生物学功能的作用.采用有限稀释法进行细胞克隆纯化培养获得牙周膜干细胞,体外诱导形成牙周膜干细胞膜片.

摘要： 体外研究TLR4激活后对于牙周膜干细胞(periodontal ligament stem cells,PDLSCs)生物学特性的影响及可能的机制.应用10μg/ml浓度的LPS体外刺激PDLSCs,CCK-8法检测其增殖能力;划痕试验检测其迁移能力;体外成骨、成脂诱导,茜素红和油红O染色及定量检测其成骨、成脂分化能力;同时检测分化过程中成骨(ALP、Runx2、Ocn、col I)、成脂(PPAR-γ,Leptin,LPL)相关的基因在mRNA,蛋白水平的变化;western blot检测PDLSCs在经LPS刺激后不同时间点NF-κB信号通路的相关蛋白表达水平变化.在成骨分化过程中加入TLR4单克隆抗体或NF-κB通路阻断剂PDTC.研究表明，LPS通过TLR4刺激PDLSCs并导致其NF-κB信号通路激活，并使其成骨能力减弱，成脂能力增强，同时伴随趋化迁移能力减弱。其成骨能力的改变与NF-κB信号通路相关。以上实验说明细菌及其产物也可直接作用于PDLSCs，引起其功能发生变化，该变化可能参与了牙周炎的发生。

摘要： 乳牙生理性根吸收是正常生理现象.但临床上,因基因突变而导致的颅骨锁骨发育不全(CCD)患者,口腔表现为乳牙根不吸收.目前多项研究均表明牙周膜干细胞(PDLSCs)可能参与乳牙生理性根吸收的调控,故本文目的在于比较正常乳牙、恒牙及CCD来源的PDLSCs的生物学特性.将正常乳牙按照根吸收程度的不同分为三组:未吸收组、中度吸收组及重度吸收组,加入恒牙组和CCD组作为对照,分离培养并鉴定各组PDLSCs.通过WST-1增殖实验、克隆形成实验和成骨成脂诱导实验来比较各组PDLSCs的增殖和分化特性的差异.研究表明，正常乳牙、恒牙及CCD来源的PDLSCs的生物学特性不同。未吸收组及CCD组PDLSCs增殖能力较强，CCD组PDLSCs克隆形成能力高于其他四组。中、重度吸收组PDLSCs成骨能力明显高于未吸收组和恒牙组，但其成脂能力却低于未吸收组和恒牙组;CCD组PDLSCs的成脂能力高于其成骨能力。

摘要： 牙周病在全世界的发病率高达10％～15％，在我国30岁以上人群中达80％～90％，是35岁以上人群牙齿缺失的主要原因，严重威胁着人类全身健康。牙周病的主要病理特点是牙周附着降低、牙槽骨吸收和牙周袋形成。传统采用洁治、刮治、根面平整等基础治疗，虽能消除病因，但却难以修复已丧失的牙周组织，疗效甚微。引导组织再生术(GTR)对部分病例有一定的牙周再生治疗效果，但多因病损周围缺乏大量活性细胞的主动诱导，牙周再生量有限，疗效多不满意。有效治疗牙周病成为各国学者致力研究的重大而迫切的课题，而牙周再生则是完成这一课题的主要目标。现代干细胞、组织工程及再生医学的飞速发展，为牙周再生打开了新的突破口，干细胞成为牙周组织工程化再生研究的热点和焦点。rn 牙周膜干细胞(PDLSCs)是牙周组织工程的首选种子细胞，它来源于牙周膜，具有异质特性，能直接分化形成牙周的3种组织：牙槽骨、牙周膜和牙骨质。但牙周组织量少，干细胞含量极其稀少，细胞来源受到很大限制。骨髓基质干细胞(BMSCs)具有多向分化潜能，在牙周局部微环境中，可分化形成完整的牙周组织，被认为是牙周再生极有前途的种子细胞。但BMSCs需要在全麻下骨髓穿刺获取，会增加患者痛苦，临床应用仍不理想。新的研究发现脂肪干细胞(ASCs)具有成骨、成软骨、成腱等间充质干细胞的特点，将ASCs植入牙周缺损部位，该细胞能增殖、分化再生牙周缺损，成为牙周再生又一重要的细胞来源。ASCs可通过吸脂术取自患者的脂肪组织，具有来源丰富，操作简单，痛苦小，干细胞含量多，增殖周期短，不存在免疫排斥反应等优点，有望成为牙周再生理想的种子细胞。而胚胎干细胞(ESCs)因具有无限增殖和多胚层细胞分化潜能，在一定条件下也可分化为PDLSCs样细胞，已有诱导形成牙周组织的报道，是牙周再生的又一细胞来源。这4种细胞均可成为牙周再生种子细胞来源，但许多方面仍有待深入研究。作为牙周组织工程的其他要素，即生长因子微环境中信号分子调控作用和生物支架材料的塑形作用也不容忽视。本文结合我所在采用PDLSCs重建牙周缺损方面所做的研究，综述了牙周再生研究领域中相关干细胞、信号分子和生物材料的新进展，分析了牙周组织工程化再生过程中面临的挑战，提出了综合牙周病学、干细胞生物学、生物材料学、计算机信息处理以及基因工程学等多学科的先进技术，采用干细胞基因修饰技术和快速成型技术构建个性化的与牙周缺损相适应的现代牙周组织工程新思路。

摘要： 本发明提供了一种HS90A作为鉴别牙髓干细胞和牙周膜干细胞的标志物的应用、鉴别二者的试剂盒及方法，涉及生物技术领域，本发明的发明人通过实验发现，HS90A基因和/或HS90A蛋白在牙髓干细胞和牙周膜干细胞中的表达存在差异，其在牙髓干细胞中显著高表达，在牙周膜干细胞中显著低表达，因此可以作为两种干细胞的特殊标志物用于细胞的区分，具有较高的灵敏度和特异性。

摘要： 本发明提供了一种HS90A作为鉴别牙髓干细胞和牙周膜干细胞的标志物的应用、鉴别二者的试剂盒及方法，涉及生物技术领域，本发明的发明人通过实验发现，HS90A基因和/或HS90A蛋白在牙髓干细胞和牙周膜干细胞中的表达存在差异，其在牙髓干细胞中显著高表达，在牙周膜干细胞中显著低表达，因此可以作为两种干细胞的特殊标志物用于细胞的区分，具有较高的灵敏度和特异性。

摘要： 本发明涉及干细胞培养技术领域，尤其涉及一种细胞培养液及其应用和诱导牙周膜干细胞向神经样细胞分化的方法。本发明提供的培养液中包括基础培养液、FBS、B27、EGF、bFGF和NGF。本发明提供的培养液能够提高牙周膜干细胞向神经样细胞分化的比例并缩短分化的时间。实验表明，以本发明提供的培养液诱导牙周膜干细胞，12小时后即可见部分细胞贴壁并有短小突起伸出，3天后可见大部分细胞贴壁生长，形态不规则，突起不断增粗和伸长，1周后分化成形态不一的、分散成片的多突起星状细胞和神经元样细胞，突起互相交织成网状。

摘要： 本发明涉及干细胞培养技术领域，尤其涉及一种细胞培养液及其应用和诱导牙周膜干细胞向心肌样细胞分化的方法。本发明提供的培养液中包括基础培养液、FBS、5‑aza和Ang‑II。本发明提供的培养液能够提高牙周膜干细胞向心肌样细胞分化的分化率并缩短分化的时间。对各组细胞的分化率进行计算，结果显示实验组细胞的分化率显著高于对照组，(p<0.01)。

摘要： 本发明公开了一种基于单细胞测序筛选牙周膜特异性干细胞新亚群的方法及其应用，筛选到的新亚群特异性表达FBLN2及膜蛋白CADM3，同时公开了牙周膜特异性干细胞新亚群用于制备牙周病治疗的药物的应用。本发明通过单细胞测序、获得牙周膜特异性干细胞亚群，并通过标记基因进行体外流式分选及细胞亚群性能的验证；本发明筛选的细胞亚群利于寻找牙周稳态失衡的干预靶点，为新药物的开发创造可能；以牙周膜特异性干细胞为种子细胞形成类器官，为医疗器械新材料的研究和验证提供科学依据；进一步探索牙周膜干细胞自体/异体移植可行性，为治疗牙周病提供重塑新思路。

摘要： 本发明主要涉及一种细胞表面标记特异性富集的人牙周膜干细胞微胶囊及其制备方法，所述微胶囊包括微球内核及外壳。发明还涉及其制备方法、生物学效力检测方法。本发明也涉及将通过本发明制备的细胞微胶囊用于再生医学的用途。

摘要： 一种基于细胞外基质的调控牙周膜干细胞成骨分化的方法，包括以下步骤：1）骨髓细胞BMCs和牙周膜细胞PDLCs的分离与鉴定；2）制备脱细胞骨髓来源的细胞外基质B‑dECM和脱细胞牙周膜来源的细胞外基质P‑dECM；3）对步骤2）获得的脱细胞骨髓来源的细胞外基质B‑dECM和脱细胞牙周膜来源的细胞外基质P‑dECM，用Ⅳ型胶原α2链COL4A2对组织培养板TCP和脱细胞牙周膜来源的细胞外基质P‑dECM进行包被；4）分别采用小干扰RNA和慢病毒转染对Ⅳ型胶原α2链COL4A2下调和上调；具有精准调控ECM中COL4A2的特点。

摘要： 本发明提供了一种特异的人牙周膜干细胞亚群及其富集方法。本方法包含牙组织样品的采集运输，牙周膜干细胞的分离，及表达CD18干细胞的富集。本发明还提供了一种富集的牙周膜干细胞亚群生物学特性的检测方法。包括与干性相关的集落形成能力检测，增殖能力检测，体外成骨分化能力检测，体内成骨分化能力检测。

摘要： 本发明提供一种应用基因芯片分析牙周膜干细胞向成骨细胞分化的方法，制备牙周膜干细胞得单细胞悬液，从单细胞悬液中分选对数生长期的牙周膜细胞，并采用STRO-1-PE标记，经FACS流式细胞仪分选收集STRO-1阳性细胞即为所需的牙周膜干细胞，接着克隆培养收集到的牙周膜干细胞，待其生长至80％的汇集度时，其中的胰酶也被消化后，即得种子液，将种子液接种在6孔板或者是24孔板中，24小时后改用诱导液培养。本发明通过利用基因芯片分析牙周炎治疗情况，对于检测PDLSC向成骨细胞分化过程中miRNA表达谱的变化，具有深远的意义。

摘要： 本发明提供一种补肾益气活血组合物及其在人牙周膜干细胞增殖分化中的应用，属于医药和分子生物学技术领域。本发明研究发现补肾益气活血方能有效提升体外培养的人牙周膜干细胞增殖和成骨分化的能力，且效果较当归和补骨脂单味药更佳。这一结果从细胞生物学和牙周组织工程的角度为中医药相关组方药应用于慢性牙周炎的临床治疗提供了实验支撑，对补肾益气活血方剂用于临床上治疗慢性牙周炎具有指导意义，具有良好的实际应用之价值。