成骨作用

摘要： 骨髓间充质干细胞(BMSCs)是治疗颅颌面骨疾病的研究热点,BMSCs在增殖、分化、迁徙方面的功能以及在组织环境中的存活能力决定了其骨质修复重建的质量和速度.脂联素(APN)是一种主要由脂肪组织分泌的脂肪因子,除了与脂代谢密切相关,近年来研究发现其还能通过多种途径调控BMSCs而影响成骨作用的进程,对骨—脂代谢平衡具有重要的调节作用.本文对APN的生物学特性、APN调控BMSCs增殖、成骨分化、迁徙和存活能力的作用以及相关信号通路的研究进展作一综述,为骨质疏松等骨相关疾病的预防和治疗提供新思路.

摘要： 目的:评价新型磷酸钙骨水泥(calcium phosphate cement,CPC)的生物相容性以及成骨效果,为其进一步的临床应用提供实验数据.方法:选择新西兰大白兔30只,以其双后腿外侧髁(60个)为实验对象,随机分为CPC组、CPC+ Bio-Oss组、Bio-Oss组和空白对照组4组,在兔双侧后腿外侧髁制造直径6 mm、深7 mm的骨缺损模型,按照组别分别植入CPC、Bio-Oss、CPC+ Bio-Oss混合物(CPC与Bio-Oss骨粉质量比为4∶1).实验动物分别在手术第4周、第12周、第24周处死,取骨缺损周围组织,HE染色进行组织学评价,并计算新骨生成率(bone ingrowth frac-tion,BIF);利用免疫组织化学染色,计算阳性区域平均光密度(mean optical density,MOD),检测术后第4周各组样本BMP-2和COL-Ⅰ的表达情况,评价各组样本在不同时间点的骨愈合情况.结果:HE染色发现,在相同时间点,与空白对照组相比,CPC组、CPC+ Bio-Oss组、Bio-Oss组的BIF值明显较高(P＜0.01),其中,CPC组BIF低于Bio-Oss组和CPC+ Bio-Oss组(P＜0.01),CPC+ Bio-Oss组与Bio-Oss组相比差异无统计学意义(P＞0.05).免疫组织化学染色结果显示,与空白对照组相比,CPC组BMP-2和COL-Ⅰ的MOD值较高,但低于Bio-Oss组和CPC+Bio-Oss组(P＜0.01),CPC+ Bio-Oss组BMP-2和COL-Ⅰ的MOD与Bio-Oss组相比差异无统计学意义(P＞0.05).结论:新型磷酸钙骨水泥具有良好的生物相容性,可以促进早期成骨,成骨效果稳定,长期有效.

摘要： 血小板被激活后可释放与创伤愈合和骨再生相关的多种生长因子,随着自体血小板浓缩物制备技术的发展,口腔种植中骨缺损的修复也取得了重大进展.浓缩生长因子(concentrated growth factor,CGF)是通过差速离心得到的最新一代血小板浓缩物,几乎含有离心血液内全部的生长因子,不需要添加抗凝剂,摒弃了一代血小板浓缩物造成的交叉感染和免疫排斥风险,与二代血小板浓缩物——富血小板纤维蛋白(platelet-rich fibrin,PRF)相比,具有更加致密的网格结构,其缓慢释放生长因子的过程更接近组织愈合的自然过程.CGF取材方便,制备简单、高效,并具有一定的抗炎作用,已经在口腔种植领域应用十分广泛;但是,可能影响其促进骨组织愈合的具体因素尚未完全清楚,单独还是联合其他生物材料应用于骨组织缺损处,尚未达成共识.本文就CGF在口腔种植领域中对骨组织愈合的促进作用及其相关的临床应用进行简单的最新综述,望为CGF在口腔种植中促进成骨的进一步应用提供一定的理论依据,使其可以在临床中进行更好的应用,发挥其最大价值.

摘要： 目的 探讨IL-18对人骨髓间充质干细胞(hBMSC)的成骨分化作用.方法 取生长良好的第3代hBMSC每孔2×104个接种于6孔培养板,并随机分成两组.于细胞汇合率为80％～90％时,对照组采用经典成骨诱导液培养,观察组采用经典成骨诱导液+质量浓度为100 ng/mL的重组人IL-18培养液培养.成骨分化诱导1、3、7 d后检测骨特异性转录因子-2(Runx2)、骨形态发生蛋白-2(BMP2)、骨桥蛋白(OPN)mRNA及蛋白表达.两组hBMSC诱导分化7 d后进行碱性磷酸酶(ALP)染色、茜素红染色.结果 两组成骨诱导1、3、7 d,Runx2、BMP2、OPN mRNA及蛋白表达比较差异有统计学意义(P均<0.05).观察组随诱导时间延长,Runx2、BMP2、OPN mRNA及蛋白表达增加,不同时点Runx2、BMP2、OPN mRNA及蛋白表达差异有统计学意义(P均<0.05).观察组成骨诱导7 d后ALP染色较对照组明显深染,茜素红染色矿化结节染色区域明显多于对照组.结论 IL-18体外能促进hBMSC向成骨细胞分化.

摘要： 随着肥胖患者发生率的逐年增加,肥胖症所引起的骨骼代谢失衡综合征也开始呈现逐年不断上升的变化趋势,其中骨质疏松的严重发生与肥胖症的关系越来越密切,这其中的骨骼中介代谢因素-骨骼炎症反应因子代表TNF-α因子是重要的桥梁,可以直接导致骨硬化蛋白Sost的含量升高,而Sost也有可通过抑制骨形成经典Wnt传递通路,不利于骨的生成同时增加破骨作用,从而影响成骨的分化,导致骨代谢失衡,而运动、饮食作为防控肥胖的有效手段,是否也可以在减肥减脂的同时防治肥胖小鼠骨质疏松.

摘要： 目的 探讨Smurf1小分子抑制剂A01对失重性骨丢失的预防作用.方法 采用体外实验,以BMP-2刺激成骨细胞1h,加入A01继续培养24 h,RT-PCR检测成骨基因表达水平.体内实验利用尾吊小鼠模拟失重性骨丢失,将24只C57BL/6J雄性小鼠随机分为假手术组(Sham)、尾吊组(HLU-Control)、尾吊给予A0150 mg/kg组(HLU-A01-50)和100 mg/kg组(HLU-A01-100),治疗5周后通过影像学(micro-CT)、生物力学、组织学染色及基因表达水平检测,评估灌胃A01对小鼠骨丢失的预防及药物作用机制.结果 体外结果显示,2和10 μmol/L A01均可提高成骨基因碱性磷酸酶(ALP)、Ⅰ型胶原蛋白(Col-1α)和骨钙素(OCN)的表达水平.体内实验结果显示,A01防止HLU小鼠骨量的丢失,改善骨强度,增加骨矿化沉积率,防止骨小梁数量减少,提高骨组织成骨基因的表达水平.结论 Smurf1小分子抑制剂A01通过促进骨形成,有效预防失重性骨丢失.

摘要： 目的:研究二甲双胍(metformin,MF)对成牙骨质细胞(cementoblasts,CB)增殖、分化、矿化能力的影响,为临床牙骨质缺损、牙根修复提供新的用药思路.方法:对成牙骨质细胞系OCCM-30分别给予不同浓度的MF培养,MTS法检测CB的增殖;实时荧光定量PCR法(quantitative real-time polymerase chain reaction,qPCR)及蛋白免疫印迹法检测骨涎蛋白(bone sialoprotein,BSP)和Runt相关转录因子2(runt-related transcription factor 2,Runx2)在基因及蛋白层面的表达;碱性磷酸酶(alkaline phosphatase,ALP)活性测定及茜素红染色法检测MF对CB矿化的影响.结果:不同浓度的MF作用于OCCM-30细胞24、48、72小时后,200μmol/L和400μmol/L MF组对细胞的增殖能力具有促进作用(P＜0.05),高浓度1600μmol/L MF组在作用细胞72小时后对细胞增殖产生抑制作用(P＜0.05).与对照组相比,用200μmol/L MF处理OCCM-30细胞12、24、48小时后,Runx2和BSP mRNA及蛋白的表达量明显增高(P＜0.05).200μmol/L MF作用OCCM-30细胞3天时ALP活性高于对照组(P＜0.05),作用7天时则无统计学差异(P＞0.05).200μmol/L MF作用OCCM-30细胞21天后,矿化结节形成百分率明显高于对照组(P＜0.01).结论:一定浓度范围内的MF能促进CB的增殖、分化及矿化,提高CB的成骨能力.

摘要： 目的掌握学术界关于中药活性成分对于骨髓间充质干细胞的成骨作用的研究成果,分析中药活性成分对骨折愈合的协同治疗作用。方法采用meta分析方法,从国内外医学期刊数据库中筛选相关文献,运用Stata 15.1软件的meta分析模块对提取的文献数据进行分析。结果通过系统性分析,获得与研究主题相关的23篇中文文献。经过meta检验结果证实各研究中,与对照组相比采用添加了部分中药活性成分[淫羊藿成分(MD=10.837,95%CI:9.353~12.321,P0.05)。结论从现有研究报道的数据来看,多数中药活性成分在骨髓间充质干细胞的成骨方面具有良好的辅助效用,有助于减少愈合时间,提升康复效果。

摘要： 目的 探讨胡椒碱对成骨细胞成骨分化的影响以及机制.方法 分离、培养胎鼠颅骨成骨细胞,分别给予不同浓度的胡椒碱处理,采用MTT法检测胡椒碱对成骨细胞毒性的影响;采用碱性磷酸酶(ALP)染色和ALP活性检测试剂盒检测ALP活性;采用茜素红S染色评估成骨细胞成骨及矿化水平;采用实时荧光定量聚合酶链反应(RT-qPCR)检测ALP、I型胶原蛋白α1(COL1A1)、成骨相关转录因子蛋白(OSX)、骨桥蛋白(OPN)、runt相关转录因子2(Runx2)的mRNA表达水平;采用Western blot检测Wnt 1和β-catenin蛋白水平;采用免疫荧光检测β-catenin分布与表达;采用Wnt/β-catenin信号途径特异性拮抗剂IWR-1验证胡椒碱对成骨细胞成骨分化的信号通路.结果 在0～60μmol·L-1浓度范围内,胡椒碱对成骨细胞活力无明显影响(P>0.05).在0～40μmol·L-1浓度范围内,胡椒碱呈剂量依赖性促进成骨细胞ALP活性(P<0.01或P<0.001)和矿化结节形成(P<0.05或P<0.01),促进ALP、COL1A1、OSX、OPN和Runx2的mRNA表达水平(P<0.05或P<0.01或P<0.001),促进Wnt 1和β-catenin蛋白的表达水平(P<0.05或P<0.01或P<0.001).用IWR-1预处理后,由胡椒碱诱导的成骨细胞的基质矿化受到明显抑制(P<0.01).结论 胡椒碱可通过增强Wnt/β-catenin信号促进成骨细胞的成骨分化.

摘要： 目的:研究兔胫骨干骺端骨膜外截骨延长区骨膜成骨作用的影响.方法:取健康成年中国家兔48只随机分为2组:对照组:左胫骨干骺端骨膜下截骨.实验组:左胫骨干骺端骨膜外截骨.术后第7日开始延长外固定架,分别于术后7天、17天、27天、37天拍摄X光片观察延长区成骨情况;同时段分别在两组实验动物活体取延长区再生骨组织,制作HE染色切片,光镜下观察组织学变化;术后17天、27天常规电镜取材、制片后透射电镜下观察延长区细胞内变化.比较两组间的差异.结果:X线片观察两组术后第7天延长后可见一清晰的牵张间隙,随着时间的延长,牵张间隙逐渐出现新生骨组织,骨密度影像也由低向高增加,但两组在影像学上无显著差异.HE染色示各时相段实验组较对照组均有更为明显的成骨现象,两组差异性随时间推移逐渐减小.透射电镜示术后17天、27天实验组较对照组在超显微细胞器水平上有更多的粗面内质网扩张,高尔基复合体及线粒体增生.两组差异性随时间推移逐渐减小.结论:兔胫骨干骺端骨膜外截骨有利于骨膜早期活跃性成骨作用.

摘要： 近年来有研究发现低剂量硫化氢有促进成骨作用.本文探讨硫化氢对在骨修复再生中起重要作用的巨噬细胞的影响,进而研究这一影响对人牙周膜干细胞干性及成骨功能的影响及机制.内源性硫化氢是由骨髓间叶干细胞产生，硫化氢抑制LPS诱导的巨噬细胞向M1途径转化，促进骨髓间叶干细胞的再生。而牙周炎一是种慢性感染性炎症，以附着丧失和牙槽骨的破坏为特征。在牙周炎发生发展的过程中，单核/巨噬细胞参与的免疫反应扮演了重要角色，吞噬作用是防止细菌进入牙周组织的一道防线，在起到防御作用的同时，吞噬细胞过度的免疫反应也可能会破坏牙周组织，最终导致附着丧失和牙槽骨吸收。而硫化氢可以抑制LPS诱导的巨噬细胞向M1途径转化，促进骨髓间叶干细胞的再生，从而在牙周炎的治疗的应用。

摘要： 近年来,作为一种新兴的制备组织工程支架的技术,3D打印技术被广泛应用于硬组织修复领域.基于材料堆积法,综合计算机辅助设计、数控以及新材料技术于一体的3D打印技术,可以精确调控支架的内外结构,具有巨大的应用前景.本研究以介孔硅酸镁和聚丁二酸丁二醇酯为原料,运用3D打印技术构建镁基多孔复合支架,分析与评价该复合多孔支架的体外生物活性以及体内促进成骨作用,考察其生物相容性,探讨其成为组织工程骨支架的潜力.

摘要： 目的:为了观察"长骨液"对骨延长区成骨作用的影响. 方法:实验家兔54只造成左胫骨中段骨延长模型.并随机分为对照组和实验组.试验组于术后第二天开始喂含中药长骨液的颗粒饲料.对照组则喂普通饲料.定期取材,按常规做成光镜切片,光镜下观察.同时用抗骨形成蛋白(BMP)单抗作免疫组化染色. 结果:实验组新骨形成及成熟较对照组提前. 结论:长骨液能够明显地促进骨延长区BMP的合成与分泌,加速新骨的形成与成熟.

摘要： 为了解决植入物植入后面临的两大问题:骨结合不足和细菌感染,在纯钛表面采用微弧氧化方法制备出微米级多孔二氧化钛涂层,并用水热反应在此涂层上引入纳米结构,通过热处理降低了涂层中Zn2+的释放速率,从而使涂层兼具了促进成骨和抗菌的能力.成骨过程不仅仅涉及骨骼系统,免疫系统也会对成骨过程产生影响.仅仅考虑骨相关细胞与材料的作用可能会导致体外实验与临床应用的差异.

摘要： 为了解决植入物植入后面临的两大问题:骨结合不足和细菌感染,在纯钛表面采用微弧氧化方法制备出微米级多孔二氧化钛涂层,并用水热反应在此涂层上引入纳米结构,通过热处理降低了涂层中Zn2+的释放速率,从而使涂层兼具了促进成骨和抗菌的能力.成骨过程不仅仅涉及骨骼系统,免疫系统也会对成骨过程产生影响.仅仅考虑骨相关细胞与材料的作用可能会导致体外实验与临床应用的差异.

摘要： 为了解决植入物植入后面临的两大问题:骨结合不足和细菌感染,在纯钛表面采用微弧氧化方法制备出微米级多孔二氧化钛涂层,并用水热反应在此涂层上引入纳米结构,通过热处理降低了涂层中Zn2+的释放速率,从而使涂层兼具了促进成骨和抗菌的能力.成骨过程不仅仅涉及骨骼系统,免疫系统也会对成骨过程产生影响.仅仅考虑骨相关细胞与材料的作用可能会导致体外实验与临床应用的差异.

摘要： 为了解决植入物植入后面临的两大问题:骨结合不足和细菌感染,在纯钛表面采用微弧氧化方法制备出微米级多孔二氧化钛涂层,并用水热反应在此涂层上引入纳米结构,通过热处理降低了涂层中Zn2+的释放速率,从而使涂层兼具了促进成骨和抗菌的能力.成骨过程不仅仅涉及骨骼系统,免疫系统也会对成骨过程产生影响.仅仅考虑骨相关细胞与材料的作用可能会导致体外实验与临床应用的差异.

摘要： 为了解决植入物植入后面临的两大问题:骨结合不足和细菌感染,在纯钛表面采用微弧氧化方法制备出微米级多孔二氧化钛涂层,并用水热反应在此涂层上引入纳米结构,通过热处理降低了涂层中Zn2+的释放速率,从而使涂层兼具了促进成骨和抗菌的能力.成骨过程不仅仅涉及骨骼系统,免疫系统也会对成骨过程产生影响.仅仅考虑骨相关细胞与材料的作用可能会导致体外实验与临床应用的差异.

摘要： 为了解决植入物植入后面临的两大问题:骨结合不足和细菌感染,在纯钛表面采用微弧氧化方法制备出微米级多孔二氧化钛涂层,并用水热反应在此涂层上引入纳米结构,通过热处理降低了涂层中Zn2+的释放速率,从而使涂层兼具了促进成骨和抗菌的能力.成骨过程不仅仅涉及骨骼系统,免疫系统也会对成骨过程产生影响.仅仅考虑骨相关细胞与材料的作用可能会导致体外实验与临床应用的差异.

摘要： 本发明提供了一种长链非编码RNA在干细胞成脂分化和成骨分化中的作用，属于干细胞技术领域。本发明通过实验证明，在骨髓间充质干细胞成脂分化的过程中，LINC02075的表达量显著升高，抑制LINC02075能够显著的抑制成脂分化相关基因PPARγ、C/EBPα和AP2的mRNA和蛋白表达来抑制骨髓间充质干细胞的成脂分化。同时，本发明证明抑制LINC02075能够显著的促进成骨分化相关基因RUNX2、ALP和OCN的mRNA和蛋白表达来促进骨髓间充质干细胞的成骨分化。

摘要： 本发明公开了一种成骨诱导剂及在脂肪间充质干细胞成骨诱导分化中的应用。RUNX2是成骨分化过程中关键的调控因子，能够调控众多基因的转录，RUNX2缺失会导致成骨细胞的分化完全被抑制。本发明发现，川白芷素可显著提高脂肪间充质干细胞成骨分化调控因子RUNX2的表达水平，为有效的RUNX2表达激活剂；将川白芷素作用于脂肪间充质干细胞，茜素红染色结果发现川白芷素可以显著提高细胞钙矿化结节程度，表明川白芷素对ADSCs成骨分化具有显著的诱导作用。

摘要： 一种基于弓形虫外分泌蛋白的成骨诱导分化培养基、制备方法及成骨诱导分化方法，其成骨诱导分化培养基含有弓形虫外分泌蛋白。成骨诱导分化培养基还含有地塞米松、L‑抗坏血酸、β‑甘油磷酸钠和完全培养基。含量如下：弓形虫外分泌蛋白：0.5mg/mL～15mg/mL；地塞米松：80nM～120nM；L‑抗坏血酸：30mM～80mM；β‑甘油磷酸钠：3mM～15mM。本发明的弓形虫外分泌蛋白作为成骨诱导培养基添加成分可大幅提高间充质干细胞成骨分化效果。

摘要： 本发明涉及细胞培养技术领域，特别涉及一种脂肪间充质干细胞成骨诱导组合物及其成骨诱导方法。本发明脂肪间充质干细胞成骨诱导组合物包括钙粘附蛋白‑11和富血小板血浆，该脂肪间充质干细胞成骨诱导组合物可显著提高脂肪间充质干细胞的成骨诱导分化能力，采用PRP代替动物血清，减少了其应用的风险和免疫原性，并且可应用于临床。

摘要： 本发明提供了一种长链非编码RNA在干细胞成脂分化和成骨分化中的作用，属于干细胞技术领域。本发明通过实验证明，在骨髓间充质干细胞成脂分化的过程中，LINC02075的表达量显著升高，抑制LINC02075能够显著的抑制成脂分化相关基因PPARγ、C/EBPα和AP2的mRNA和蛋白表达来抑制骨髓间充质干细胞的成脂分化。同时，本发明证明抑制LINC02075能够显著的促进成骨分化相关基因RUNX2、ALP和OCN的mRNA和蛋白表达来促进骨髓间充质干细胞的成骨分化。

摘要： 本发明公开一种调控细胞成骨分化的转录因子及成骨分化细胞，转录因子为Zfp260，细胞为Krt14阳性细胞或Krt14/Ctsk双阳性细胞，成骨分化细胞的方法包括以下步骤：S1、筛选Krt14阳性细胞或Krt14/Ctsk双阳性细胞作为骨分化细胞；S2、将步骤S1筛选的骨分化细胞植入支持载体的内部；S3、在所述支持载体的内部培养骨分化细胞，最终形成骨骼；综上所述，本发明提供了促进骨分化、再生的因子和方法。

摘要： 一种基于弓形虫外分泌蛋白的成骨诱导分化培养基、制备方法及成骨诱导分化方法，其成骨诱导分化培养基含有弓形虫外分泌蛋白。成骨诱导分化培养基还含有地塞米松、L‑抗坏血酸、β‑甘油磷酸钠和完全培养基。含量如下：弓形虫外分泌蛋白：0.5mg/mL～15mg/mL；地塞米松：80nM～120nM；L‑抗坏血酸：30mM～80mM；β‑甘油磷酸钠：3mM～15mM。本发明的弓形虫外分泌蛋白作为成骨诱导培养基添加成分可大幅提高间充质干细胞成骨分化效果。

摘要： 本发明公开了一种脂肪间充质干细胞成骨诱导组合物，由以下原料组成：基础培养基、β‑甘油磷酸二钠、磷酸铁锂、纳米硒化铋、泡桐素、成纤维细胞生长因子、重组胰岛素。本发明提供的组合物添加磷酸铁锂、纳米硒化铋以及泡桐素等成分，能有效提高细胞的成骨增殖分化效率。其中添加的磷酸铁锂、纳米硒化铋提高了脂肪间充质干细胞成骨分化信号活性，能有效促进细胞的成骨分化。泡桐素和成纤维细胞生长因子、重组胰岛素一起促进成骨细胞增殖，缩短细胞分化时间。本发明还提供一种脂肪间充质干细胞成骨诱导方法，采用本发明提供的组合物可以高效稳定的对脂肪间充质干细胞进行成骨诱导分化，保障了脂肪间充质干细胞在骨组织工程中的应用。

摘要： 本发明公开了一种成骨诱导剂及在脂肪间充质干细胞成骨诱导分化中的应用。RUNX2是成骨分化过程中关键的调控因子，能够调控众多基因的转录，RUNX2缺失会导致成骨细胞的分化完全被抑制。本发明发现，川白芷素可显著提高脂肪间充质干细胞成骨分化调控因子RUNX2的表达水平，为有效的RUNX2表达激活剂；将川白芷素作用于脂肪间充质干细胞，茜素红染色结果发现川白芷素可以显著提高细胞钙矿化结节程度，表明川白芷素对ADSCs成骨分化具有显著的诱导作用。

摘要： 本发明涉及细胞培养技术领域，特别涉及一种脂肪间充质干细胞成骨诱导组合物及其成骨诱导方法。本发明脂肪间充质干细胞成骨诱导组合物包括钙粘附蛋白-11和富血小板血浆，该脂肪间充质干细胞成骨诱导组合物可显著提高脂肪间充质干细胞的成骨诱导分化能力，采用PRP代替动物血清，减少了其应用的风险和免疫原性，并且可应用于临床。