麻痹性贝类毒素

摘要： 麻痹性贝类毒素(paralytic shellfish toxins,PSTs)是由某些甲藻产生的一种高毒性神经毒素,在海洋环境中分布广、危害大,可对水产养殖和人类健康造成重大危害;PSTs毒素的毒性大小随种类和结构的不同有较大差异。迄今,国内外学者针对PSTs的来源分布、迁移转化、生物合成及其影响因素等开展了大量的调查研究,但目前对于藻细胞产毒的生物合成途径、遗传学特征及其环境调控机理等研究仍处于起步阶段。PSTs的生物合成过程不仅与藻细胞自身生长阶段有关,还会受到光照、温度、营养盐等多种环境因素的影响,环境条件的改变会引起藻细胞毒素组成和含量发生不同程度的变化。近年来,研究人员应用基因组学和蛋白质组学技术,发现了产生PSTs的典型甲藻——亚历山大藻(Alexandrium)细胞内与PSTs毒素生物合成相关的某些基因或蛋白质,对我们更清晰地了解亚历山大藻产生PSTs毒素的机制具有重要意义。本文综合以往的研究报道,对亚历山大藻中PSTs的生物合成与转化及其主要影响因素进行了总结,以期为产毒有害藻华的防治提供科学依据。

摘要： 目的 了解2018—2020年河北省市售贝类中麻痹性贝类毒素(paralytic shellfish poison,PSP)污染状况.方法 2018年8月—2020年5月间,对河北省市售的7种双壳贝类,共508份进行检测分析.样品经0.5％乙酸水提取,石墨化碳黑固相萃取柱净化,采用高效液相色谱-串联质谱法进行检测.结果 508份样品,PSP阳性样品24份,检出率为4.7％,15份样品超过世界卫生组织规定安全限量,超标率为3.0％.检出贝类为贻贝、毛蚶、杂色蛤、扇贝,PSP含量范围分别为217.0～13001.8μg石房蛤毒素当量(saxitoxin equivalent,STXeq/kg)、217.0～4893.2μg STXeq/kg、217.0～503.6μg STXeq/kg、217.0～11024.5μg STXeq/kg;超标贝类为贻贝、毛蚶、扇贝.贝类中检出的PSP类型有GTX1、GTX4、GTX2、GTX3、neoSTX、STX.结论 河北省市售贝类麻痹性贝类毒素暴露风险整体较低,秦皇岛地区贻贝等贝类产品在4、5月份较易受到PSP污染,应持续关注,加强早期监测预警.

摘要： 文章阐述了有害毒藻产生的麻痹性贝类毒素(Para-lytic Shellfish Toxins,PSTs)具有的物种特异性,从PSTs的蓄积、转化、代谢及净化对麻痹性贝类毒素的相关研究进行了综述,并指出将暂养净化、生物吸附法、微生物代谢等净化方式进行优化或组合,对水产品进行高效脱毒是未来的研究方向.

摘要： 目的 建立超高效液相色谱-串联质谱法(ultra performance liquid chromatography-tandem mass spectrometry,UPLC-MS/MS)同时测定双壳贝类中13种麻痹性贝类毒素(paralytic shellfish poisoning toxins,PSTs)的方法.方法 用乙酸水溶液提取贝类中的PSTs,经乙酸乙酯除杂,然后用石墨化碳黑固相萃取柱净化,采用UPLC BEH Amide色谱柱(100 mm×2.1 mm,1.7μm)分离,电喷雾正、负离子多反应监测模式同时检测,基质匹配曲线外标法定量.结果 13种PSTs的线性方程相关系数(r)均大于0.998,定量限为2～20μg/kg,贻贝基质、牡蛎基质、扇贝基质的平均回收率为92.2％～122％、106％～129％、107％～144％,相对标准偏差均小于11％.将该方法应用于100份贝类样品中PSTs的检测,共有30份样品、5种PSTs检出,总毒性当量(saxitoxin equivalent,STXeq)为10.0～159μg/kg.结论 本方法灵敏度高,具有良好的重现性,可以准确定性定量13种PSTs,适用于贝类中PSTs的日常监测.

摘要： 改性粘土法是一种高效、环保的有害藻华应急处置技术,可通过絮凝作用有效去除水体中藻华生物.但利用改性粘土絮凝产毒藻后,水体中胞内外藻毒素的变化情况目前尚不清楚.文章考察了I型改性粘土(MC I)絮凝典型产毒甲藻——太平洋亚历山大藻(Alexandrium pacificum)后,水体中残留藻细胞内和胞外麻痹性贝类毒素(paralytic shellfish toxins,PSTs)含量、组分的变化情况.实验结果表明,MC I对密度为6.11×103 cells/mL的A.pacificum3小时去除率达62％,水体中残留藻细胞单细胞毒素含量和PSTs组分与对照组无显著差异,但水体中总PSTs含量大大降低,其中由絮凝沉降导致的胞内PSTs被去除量占水体中PSTs总减少量的90％以上.另外,针对MC I对胞外PSTs吸附效果的研究发现,低于0.5 g/L的MC I对胞外PSTs无明显吸附效果,而在利用0.2 g/L MC I絮凝去除大部分亚历山大藻后,水体中胞外PSTs含量无明显变化.由此可以推测该用量下的MC I未造成大量藻细胞破裂向水体中释放毒素.该研究结果将为改性粘土治理有毒甲藻藻华的现场应用提供科学依据.

摘要： 为探究塔玛亚历山大藻(Alexandrium tamarense)产麻痹性贝类毒素(paralytic shellfish poisoning,PSP)的能力,通过设置不同空间效应、盐度和营养素浓度对塔玛亚历山大藻进行培养,分析不同培养条件下塔玛亚历山大藻产麻痹性贝类毒素的能力.结果表明:1)塔玛亚历山大藻中至少含有13种PSP组分,其中主要成分为GTX1、GTX4、GTX5和C1、C2,占总毒素的97.2％.当藻细胞数量低于4 x 103个时,13种组分均不能定量检出;当藻细胞数量在4×103～5.9×106个时,13种组分不能完全定量检出;当藻细胞数高于5.9×106个时,13种组分均能够检出.2)不同条件下塔玛亚历山大藻产PSP能力比较,盐度25、35培养组显著高于盐度15培养组,1 L培养组显著高于0.1 L培养组,寡营养培养组显著高于富营养组.研究结果表明,塔玛亚历山大藻具有丰富的毒素谱,且分别在盐度25、1 L培养液和1/4倍营养素浓度下具有最佳产毒能力.

摘要： 使用液相色谱串联质谱法(LC-MS/MS)对156个天津市售贝类产品中的13种麻痹性贝类毒素进行测定.根据测定结果,采用点评估方法对麻痹性贝类毒素进行急性膳食暴露风险评估.结果显示在成年人群中,天津市售贝类产品中13种麻痹性贝类毒素的急性风险指数％ARFD为0～0.313,均小于1,说明急性膳食暴露水平均为安全状态,可放心食用.

摘要： 目的 调查清楚海南岛近岸海域麻痹性贝类毒素(paralytic shellfish poisons,PSP)的污染状况.方法 2019年9月至2020年8月期间,在海南岛近岸海域设立6个采样点,涵盖海南东西南北不同区域,采集18种贝类共269份样本,采用高效液相色谱-串联质谱法(high performance liquid chromatography-tandem mass spectrometry,HPLC-MS/MS)对来自不同季节不同地域的样本中贝类中的PSP进行测定和分析.结果 海南岛海域的贝类组织中PSP的检出率为15.2％,测得PSP毒力值低于我国的警戒值(80μg STXeq/100 g).贝类中PSP的检出率随季节变化明显,以冬季最高,春夏季次之,秋季最低;贝类中PSP的污染状况有明显的地域差别,东方、琼海、儋州、文昌海域的PSP污染状况较严重;贝类中检出的6种PSP成分分别为漆沟藻毒素2(gonyautoxins 2,GTX 2)、漆沟藻毒素3(gonyautoxins 3,GTX 3)、漆沟藻毒素5(gonyautoxin 5,GTX 5)、石房蛤毒素(saxitoxin,STX)、脱氨甲酰基膝沟藻毒素(decarbamoylgonyautoxins-2,dcGTX 2)和脱氨甲酰基石房哈毒素(decarbamoylsaxitoxin,dcSTX).结论 海南岛近岸PSP的检出率不高,污染状况不是很严重,但还应长期监管,确保食用安全.

摘要： 麻痹性贝类毒素是目前世界范围内分布最广、危害最大的生物毒素之一,对麻痹性贝类毒素的检测监控是保障食品安全的重要措施.本文介绍了麻痹性贝类毒素传统检测方法,主要有小鼠生物检测法、高效液相色谱法、液相色谱-串联质谱法和酶联免疫法等;简述了近年来开发的新型、快速的生物传感器技术,如免疫生物传感器、毛细管电泳免疫传感器和核酸适配体生物传感器等;梳理了麻痹性贝类毒素各类检测方法的特点,总结了其优缺点及应用领域,并对未来麻痹性贝类毒素检测技术的发展趋势进行了展望,以期为麻痹性贝类毒素的检测监管提供参考.

摘要： 为建立麻痹性贝类毒素体外检测方法,通过对小鼠神经干细胞培养后应用乌本苷及藜芦碱以及不同浓度的石房蛤毒素标准液,根据石房蛤毒素标准液含量与OD值之间的剂量反应关系,来建立麻痹性贝类毒素体外检测方法.本研究于0.2-1.0ng范围内成功建立了麻痹性贝类毒素体外检测方法并建立了标准曲线,其回归方程为：y=1.252+0.495x(r=0.9980,P＜0.01).该研究为神经性贝类毒素的体外检测相关研究奠定了基础.

摘要： 麻痹性贝类毒素(PSP)是当前世界范围内分布最广、危害最大的一种海洋生物毒素.本研究以福建地区贻贝为原料,采用酶联免疫吸附法(ELISA)与传统的小白鼠生物测定法对20份贻贝样品中的麻痹性贝类毒素进行检测,结果表明:两种方法检测麻痹性贝类毒素的结果吻合程度较好,但ELISA法更适于检测PSP含量较小的贝类.通过比较研究,小白鼠生物法操作简单但无法准确定量,而ELISA法快速简便、灵敏度高且检测成本低,对于麻痹性贝类毒素的快速筛选检测具有重要的现实意义.这两种方法结合运用可以确保麻痹性贝类毒素检测的结果更加准确.

摘要： 从小鼠生物法、酶联免疫法、液相色谱法和液相色谱-质谱联用法等方面概述了麻痹性贝类毒素检测技术的研究进展,分析了各个检测技术的优点和不足,展望未来麻痹性贝类毒素检测技术的发展方向.

摘要： 文章主要对毒性强、致死率高的麻痹性贝类毒素(paralytic shellfish poisoning,PSP)进行概述,包括其种属来源、生物链传递、化学结构、分类及毒性、理化性质、提取技术和国内外检测技术等研究内容,并对PSP检测技术的研究前景进行展望:将小鼠生物检测法(MBA)与高效液相色谱-荧光法(HPLC-FDL)、酶免疫吸附测定法(ELISA)的有机结合将成为未来监测PSP的新型、有效检测分析技术.

摘要： 麻痹性贝类毒素(Paralytic Shellfish Poisoning,PSP)是目前已知贝类毒素中分布最广、毒性最强、对人类威胁最严重的毒素.麻痹性贝类毒素主要由海洋中的有毒甲藻和蓝藻产生,在全球近岸海域分布广泛,许多贝类对其有很强的蓄积能力.如果人们误食因摄入有毒藻类而富集PSP的贝类产品,会引起以神经症状为主的中毒反应,严重者因呼吸肌麻痹而死亡.必须加强对海产品贝类中的PSP含量的长期监测,研究PSP贝类毒素的毒理、检测技术和药物的研发等热点问题.本文就PSP来源、理化性质及毒性机理等国内外研究状况等做以综述，详细介绍了生物测定法和理化分析法等PSP检测技术并加以评价.

摘要： 通过实验室培养产麻痹性贝类毒素(paralytic shellfishpoisoning toxins,PSP)的链状亚历山大藻(Alexandriumcatenella),在了解其生长周期的基础上,对其所产毒素进行了检测。首先通过接种对数期藻细胞,使其快速生长达到最高细胞密度,再以0.05 mol/L的醋酸提取粗毒素,经高效液相色谱分析,本株藻主要含有GTX5、GTX4、C2、NEO和C1,浓度分别为：GTX5(0.8275μΜ)＞GTX4(0.3392μΜ)＞C2(0.2526μΜ)＞NEO(0.1266μΜ)＞C1(0.0455μΜ)。

摘要： 麻痹性贝类毒素(PSP)是世界上分布最广、食物中毒发生频率最高、危害程度最大的一类毒素。全世界每年都有该类毒素引起中毒事件的报道。为了解中国实验室检测PSP的整体水平，分析影响实验室间测试结果差异的主要因素，首次在中国组织开展了PSP检测的实验室间比对测试活动，旨在不断提高实验室检测PSP的能力。

摘要： 本文以香港巨牡蛎(Crassostrea hongkongensis为对象,进行PSTs蓄毒培养,从其内脏中分离纯化得到PSTs结合蛋白(PSPBP),并对该结合蛋白的分子量进行检测.首先从牡蛎内脏中获得PSTs结合蛋白的粗提液,然后用硫酸铵沉淀法初步纯化,确定硫酸铵饱和度为40％～70％,再逐步分离纯化:先用凝胶层柱(S-100,Ψ16×300nm)进行分离,上样量2mL,浓度2.2 mg/mL,流速为0.5 mL/min,收集PSTs结合蛋白阳性峰;再用阴离子交换层析(Q-FF,Ψ16×20mm)对阳性峰纯化,上样量5mL,浓度2.2 mg/mL,上样流速0.5 mL/min,洗脱流速1mL/min,缓冲液Tris-HCl(含1 mol/LNaCl),采用梯度洗脱收集PSTs结合蛋白阳性峰;最后用RP-HPLC (Ψ250×20mm,D.S-5 μm,12 nm)制备,上样量100 μL,流速1mL/min,流动相是20％乙腈水溶液.利用SDS-聚丙烯酰胺凝胶(SDS-PAGE)检测分离纯化得到的PSTs结合蛋白的分子量.结果显示分离纯化得到的PSTs结合蛋白的分子量为33.5kDa,本实验为贝类体内PSTs的净化和脱除机制的研究做出一定贡献.

摘要： 介绍了腹泻性贝类毒素(DSP)和麻痹性贝类毒素(PSP)的产生、毒理危害机制和生物学检测方法.研究组采用小鼠生物检测法测定贝类毒素结果准确可靠,顺利通过相关部门组织的能力验证考核,并利用该方法对浙江沿岸海域养殖区采集的样品进行检测分析.结果表明,浙江沿岸海域养殖场所采集的贝类,DSP和PSP贝类毒素指标均未超标,但有部分样品有检出.通过对浙江沿岸养殖区DSP和PSP贝类毒素的现状的分析,提出了养殖贝类质量安全上的监管意见，比如加强养殖区域水体的毒素监测，加强资金投入和宣传教育，严防有毒贝类进入我国市场。

摘要： 本研究对大亚湾大鹏澳的鱼类和贝类养殖区浮游植物群落结构、环境因子、甲藻孢囊形成及贝类体内麻痹性贝类毒素(PSP)的含量进行了周年调查，以了解典型养殖海域浮游植物群落特征，揭示该海域养殖水体中甲藻孢囊形成率的季节变化，同时分析了影响贝类积累PSP毒素的各种因素，为广东沿海水产养殖区进行赤潮防治和海产品安全提供科学依据。结果显示大亚湾的温度和盐度处于适合浮游植物生长的变化范围内，并且影响浮游植物的季节变动。可溶性无机氮和硅酸盐含量丰富，很少成为浮游植物生长限制性因子，而可溶性无机磷是浮游植物生长最受限制的营养元素。

摘要： 本发明公开了三维荧光光谱法在识别产麻痹性贝类毒素微藻中的应用。本发明通过提取产PSP藻类和不产PSP藻类在不同环境条件下生长的三维荧光光谱信息，运用Coif2小波函数提取实验藻类的特征峰，再用系统聚类法进行聚类分析，剔除异常谱，筛选标准谱，得到Coif2荧光特征标准谱库，依据该荧光特征标准谱库建立的判别函数对产PSP藻类和不产PSP藻类判别，判别正确率分别为77.3％和84.5％，正确率很高，基本实现了对产毒藻快速准确识别的目的。本发明首次提供了三维荧光光谱法在识别产麻痹性贝类毒素微藻中的应用的研究成果，其可应用于赤潮藻类识别传感器或便携式藻类荧光识别仪等方面。

摘要： 本发明公开了一种用于识别产麻痹性贝类毒素微藻的荧光特征标准谱库及其构建方法与应用。本发明通过提取产PSP藻类和不产PSP藻类在不同环境条件下生长的三维荧光光谱信息，运用Db7小波函数提取实验藻类的特征峰，再用系统聚类法进行聚类分析，剔除异常谱，筛选标准谱，得到Db7荧光特征标准谱库，依据该荧光特征标准谱库建立的判别函数对产PSP藻类和不产PSP藻类判别，判别正确率分别为84.6％和95.6％，正确率很高，基本实现了对产毒藻快速准确识别的目的。该荧光特征标准谱库可用于制备赤潮藻类识别传感器或便携式藻类荧光识别仪。

摘要： 本发明公开了一种羧甲基壳聚糖‑贝壳颗粒复合纤维的制备及吸附麻痹性贝类毒素的使用方法，复合纤维的制备方法是将去除贝肉的贝壳(扇贝壳、牡蛎壳、蛤壳等)经稀酸洗、水洗除去贝壳表面杂物，烘干、电炉灼烧，再高温煅烧，粉碎过筛得到贝壳颗粒，再取一定浓度的羧甲基壳聚糖溶液，添加贝壳颗粒，湿法纺丝制备复合纤维。本发明还公开了使用复合纤维吸附水产原料中的麻痹性贝类毒素，以及复合纤维再生的方法。该方法可以高效脱除水产原料中麻痹性贝类毒素，使污染的水产原料得到利用，减少对环境的污染。

摘要： 本发明提供一种双壳贝类中麻痹性贝类毒素的早期预警方法，是检测双壳贝类的消化腺中的麻痹性贝类毒素的含量来确定是否有麻痹性贝类毒素含量超标的危险性。本发明方法以消化腺作为监测样本，在毒素提取操作上，相比于常规检测方法中使用的整体软组织更加易于匀浆研磨，操作简便，省时省力。检测样本体积更小，毒素提取更加经济节约。消化腺毒素积累更加快速且积累量高，使得毒素更易被灵敏的检测到。同时，相比于监测水体毒藻水平和贝体生物生物标志物，以消化腺作为毒素监测样本，受其他因素干扰小且更能直接反应贝体毒素水平。

摘要： 本发明提供贝类中麻痹性贝类毒素的液相色谱‑串联质谱检测方法，包括如下步骤：1.1试样提取：贝类试样加入甲酸溶液，超声提取，离心，取上清液，定容，得到试样提取液；1.2 试样净化：所述试样提取液加入二氯甲烷，混匀，离心，取上清液加入已活化的C18固相萃取柱中，洗脱，收集流出液与洗脱液，合并后定容，静置，离心，取上清液过滤膜，得到试样检测液；1.3 试样检测：取所述试样检测液，进行液相色谱‑串联质谱检测，外标法定量。本发明属于食品安全检测技术领域，简化了操作，减少了有机溶剂消耗，试样的净化效果好，无需超滤步骤，同时还实现了PSTs中部分结构类似物的有效分离和检测，拓宽了对PSTs的检测种类。

摘要： 本发明公开了一种水体中麻痹性贝类毒素的检测方法，首先对水样进行初次固相萃取得到的待检测的洗脱液，然后采用固相萃取结合亲水相互作用色谱串联质谱仪检测系统对得到的待检测洗脱液进行检测，检测时，采用ZIC‑HILIC保护柱用作所述SPE柱，采用HILIC‑Z色谱柱用作所述分析柱，首先通过上样泵将待分析的洗脱液加载到SPE柱上，之后将SPE柱捕集的目标化合物以反冲洗模式洗脱到分析柱上，进行色谱分离，再对分析柱进行梯度洗脱使目标物得以分离，进入质谱仪检测。本发明通过固相萃取结合亲水相互作用色谱串联质谱技术实现了能够一次性同步检测出环境水体中13种麻痹性贝类毒素。

摘要： 本发明公开了一种检测产麻痹性贝类毒素微藻细胞密度的模型及其建立方法与应用。本发明通过提取产麻痹性贝毒的藻类或不产麻痹性贝毒的藻类在不同环境条件下的三维荧光光谱信息，通过Db7小波函数提取产毒藻密度的特征谱，并以此为基础，采用逐步回归分析的方法，建立产麻痹性贝毒藻定量模型。该荧光特征标准谱库可用于对产麻痹性贝类毒素微藻细胞密度定量分析。本发明以Db7小波函数第二尺度和第三尺度分量荧光特征谱，用逐步回归分析的方法，建立产麻痹性贝毒藻定量模型，当有毒甲藻为优势种与非产毒甲藻混合时，处于高、中和低浓度的有毒甲藻密度测试的准确率分别为98％、67％和90％，实现了对产毒藻细胞密度定量分析的目的。

摘要： 本发明公开了一种用于识别产麻痹性贝类毒素微藻的荧光特征标准谱库及其构建方法与应用。本发明通过提取产PSP藻类和不产PSP藻类在不同环境条件下生长的三维荧光光谱信息，运用Db7小波函数提取实验藻类的特征峰，再用系统聚类法进行聚类分析，剔除异常谱，筛选标准谱，得到Db7荧光特征标准谱库，依据该荧光特征标准谱库建立的判别函数对产PSP藻类和不产PSP藻类判别，判别正确率分别为84.6％和95.6％，正确率很高，基本实现了对产毒藻快速准确识别的目的。该荧光特征标准谱库可用于制备赤潮藻类识别传感器或便携式藻类荧光识别仪。

摘要： 本发明公开了三维荧光光谱法在识别产麻痹性贝类毒素微藻中的应用。本发明通过提取产PSP藻类和不产PSP藻类在不同环境条件下生长的三维荧光光谱信息，运用Coif2小波函数提取实验藻类的特征峰，再用系统聚类法进行聚类分析，剔除异常谱，筛选标准谱，得到Coif2荧光特征标准谱库，依据该荧光特征标准谱库建立的判别函数对产PSP藻类和不产PSP藻类判别，判别正确率分别为77.3％和84.5％，正确率很高，基本实现了对产毒藻快速准确识别的目的。本发明首次提供了三维荧光光谱法在识别产麻痹性贝类毒素微藻中的应用的研究成果，其可应用于赤潮藻类识别传感器或便携式藻类荧光识别仪等方面。

摘要： 本发明公开了一种麻痹性贝类毒素暂养脱除方法，包括下列步骤：（1）暂养贝类预处理；（2）养殖环境处理；（3）快速排泄阶段；（4）促代谢阶段；（5）育肥恢复阶段。本发明采用系统的毒素消除暂养方法，分步完成快速排泄、促代谢以及育肥恢复阶段。比较常规暂养方法，本发明的有益之处为通过快速排泄阶段，促进贝类的逆境适应同时将胃内容物中的有害藻直接排除，减少毒素在其他组织器官的蓄积，达到缩短暂养周期的目的。通过调节不同阶段的膳食和免疫增强，保障暂养阶段贝类的正常生长生理。