适配体

摘要： 建立一种磁分离辅助荧光分析检测砂糖橘中的3种常见有机磷农药的方法。采用溶剂热法合成磁珠,并结合聚吡咯(polypyrrole,PPy)修饰,形成Fe_(3)O_(4)@PPy纳米粒子作为荧光猝灭剂。利用6-羧基荧光素标记适配体S4-29广谱性识别有机磷农药的特性,建立磁分离辅助荧光分析法检测砂糖橘中甲拌磷、氧化乐果、丙溴磷3种有机磷农药的检测方法。在Fe_(3)O_(4)纳米粒子和PPy质量比1∶1.5、Fe_(3)O_(4)@PPy纳米粒子质量浓度0.2 mg/mL、孵育时间120 min条件下,甲拌磷、氧化乐果、丙溴磷的检出限分别为4.17×10^(-4)、2.77×10^(-4)、4.67×10^(-4)μg/kg;回收率为79.94%~108.00%;相对标准偏差为3.05%~7.39%。该方法选择性强、准确度高,为食用农产品中禁用有机磷农药检测提供研究思路。

摘要： 生物体内汞离子过量会对神经系统和正常的代谢活动造成极大的伤害。因此有必要发展新的方法用于汞离子的高灵敏、高选择性检测。本研究采用钌配合物-适配体探针体系,利用钌配合物可选择性识别G-四链体DNA以及核酸适配体中T碱基与汞离子特异性结合的特性,建立了一种荧光检测汞离子的方法。当无汞离子时,核酸适配体形成G-四链体结构;有汞离子时,则形成双链结构。在优化条件下,利用适配体与汞离子的特异性结合,该探针可实现对汞离子的荧光检测。探针荧光强度与汞浓度的线性范围为2~150μmol/L,检测限为0.86μmol/L。该方法为钌配合物-适配体复合体系用于汞离子的定量检测提供了新途径。

摘要： 因不合理或违规使用兽药,导致兽药原型或代谢物在动物源性食品和水体中残留,继而危害人类健康、破坏生态环境。因此,兽药残留快速检测方法的建立显得尤为重要。受体、抗体、适配体等生物识别元件具有分子识别能力,根据其特性已发开了不同的检测方法,如免疫分析法、受体检测法及生物传感器法等方法,广泛用于生物医药的研究。由于分子识别元件是分析的主体,影响分析的选择性,因此不同识别元件与兽药相互作用的机制越来越受到人们的重视。随着计算机技术的发展,同源建模和分子对接广泛用于残留检测技术,主要用于药物与蛋白质之间、抗原与抗体之间、受体与配体之间等生物分子之间相互作用的研究。笔者重点介绍了单链抗体(ScFv)、受体和适配体3种识别元件与兽药小分子之间的互作机制,主要分析生物识别元件与兽药结合部位形成的氢键、疏水性及关键氨基酸或碱基,在分子水平上探究药物与识别元件的机理和规律,从而找出影响识别元件与药物结合的关键因素,并对3种识别元件进行了总结,以期为全面了解识别机制和体外进化,制备出亲和力更广的ScFv、受体、适配体提供理论支撑,为后续药物残留检测技术和药物开发奠定基础。

摘要： 适配体是一种与特定RNA或蛋白质等靶向结合的单链DNA或RNA。适配体具有高度特异性、低免疫原性、成本低等特点,已被广泛用于生物医学的各个领域。本文就适配体的筛选、特点以及其在口腔医学领域中疾病诊断、治疗和组织再生的研究进展作一综述,并对其在口腔医学中的应用前景进行展望。

摘要： 雌二醇(Estradiol,E_(2))是一种主要的环境雌激素,具有作用强、危害广等特征,可扰乱人体及动物体的正常内分泌功能,从而产生不利影响,因此E_(2)的快速、准确检测对于食品安全和公共卫生至关重要。传统的检测方法主要是基于大型仪器分析,这些方法具有高灵敏度、准确性的同时也存在操作繁琐、成本较高、仅限于在实验室内进行等缺陷。近年来,研究人员开发了多种生物传感器对E_(2)进行检测,前期的生物传感器出现灵敏度低、存在干扰信号等问题,还有很大的改进空间。而基于适配体和抗体的生物传感器具有特异性好、灵敏度高、操作简单、响应快速、易用于现场检测等优势,已广泛应用于食品中E_(2)的检测分析。本文在对适配体和抗体的特点简要介绍的基础上,综述了以适配体和抗体为识别信号的多种生物传感器在E_(2)检测中的最新研究进展,并对其未来研究方向做出了展望。

摘要： 目的:研发一种具有靶向肿瘤功能的中药纳米脂质体并考察其体外抗肿瘤效应。方法:采用薄膜分散法制备靶向EpCAM的适配体(SYL3C)功能化绞股蓝皂苷(Gyp)脂质体SYL3C-Gyp@Lipo。考察SYL3C-Gyp@Lipo的表征特性,采取流式细胞仪检测其靶向性,MTT法评价其对人肝癌细胞HepG2的细胞毒性。结果:成功制备一种能够靶向肝癌的绞股蓝皂苷脂质体SYL3C-Gyp@Lipo,其分散性良好,呈圆球形或椭圆球形,能够减缓药物的释放,在体外能特异性杀伤肝癌HepG2细胞。结论:SYL3C-Gyp@Lipo能靶向杀伤高表达EpCAM的肝癌细胞,达到肿瘤靶向治疗效果,为制备新型的中药纳米载药制剂提供了一种潜在策略。

摘要： 比色分析是一种检测目标物的方法,具有肉眼可见、操作方便、快捷、实时等优点,被广泛应用于医疗分析、环境监测、食品安全和质量分析等领域。纳米材料具有优良的光学性能和催化性能,目前通常被当作信号转化元件应用在比色传感器中。核酸适配体(Aptamer,Apt)具有特异性识别功能且易于修饰和编辑,在比色传感器的设计中主要作为识别元件,也可以作为信号转化元件和信号放大元件。基于纳米材料的比色适配体传感器同时具备了两种材料的优点,可以实现对大多数目标物的检测,是极具潜力的比色传感器研究方向。总结了基于纳米材料和Apt结合的比色传感器的构建方案和显色原理,并简要归纳了其在农药、癌症标志物、生物小分子、抗生素、重金属离子等目标物检测当中的研究进展。

摘要： 基于量子点与荧光猝灭基团之间构成的荧光共振能量转移体系,以量子点标记赭曲霉毒素A适配体与荧光猝灭基团标记的补体杂交构成荧光传感探针,当有赭曲霉毒素A存在时,由于其适配体与赭曲霉毒素A的高度亲和作用,使传感探针上结合的荧光猝灭剂减少,荧光增强,从而建立了一种检测赭曲霉毒素A的荧光分析方法。该方法简单、快速、特异性强,在适宜的条件下,该方法在0.2μmol·L^(-1)~1.6μmol·L^(-1)内有良好的线性关系,线性回归方程为:ΔF=92.2c+95.06,线性相关系数R=0.9955,方法的检出限为0.16μmol·L^(-1)。

摘要： 目的构建一种电化学适配体传感检测方法用于薏苡仁和白扁豆中赭曲霉毒素A(OTA)的高灵敏检测,为中药质量控制和用药安全提供新思路。方法采用一步电沉积法制备电化学还原氧化石墨烯(ErGO)和纳米金(NG)衬底的玻碳电极,通过π-π堆叠作用将标记有亚甲基蓝(MB)的单链OTA适配体吸附在电极表面,OTA与适配体结合并使其脱离电极表面,导致MB信号电流发生改变,根据峰电流变化实现对OTA的定量检测。结果在0.05~10 ng/mL的浓度范围内,峰电流值(I_(p))与OTA浓度的对数具有良好的线性关系,相关系数r=0.9938,检测限(3σ/S)为0.03 ng/mL,该方法用于中药饮片薏苡仁和白扁豆中OTA的加标回收测定,加标回收率为92.94%~105.17%,相对标准偏差(RSD)≤5.60%。结论该方法灵敏度高,选择性好,且经济便捷,操作简单,有望用于中药材中OTA污染的现场快速检测。

摘要： 双酚A(Bisphenol A,BPA)是由丙酮和苯酚缩合而成,曾被广泛用于奶瓶、食品包装材料等产品的生产。人体可通过空气吸入、皮肤接触和膳食摄入等多种途径暴露于BPA类化合物,而膳食摄入是最主要的暴露途径。实现对食品中BPA的快速检测,是保障人们避免暴露于BPA的重要途径之一。本文总结了基于适配体识别的电化学分析方法在双酚A检测中的应用研究,以期为实现BPA的快速、高效地检测提供方法和思路。

摘要： 上世纪90年代发现适配体,是一种短RNA,可折叠为三维结构,并可与不同的非核酸靶物质特异性地结合.在随机合成的单链寡核苷酸库中,通过与靶分子不断地重复孵育,分离,PCR或RT-PCR扩增,可得到一定量的适配体,即SELEX技术.许多科学家通过该方法陆续发现许多种适配体,它们可与离子、小分子代谢产物、蛋白质、糖环、脂质甚至整个细胞相结合.适配体具有高度选择结合物质的能力，有潜力成为纳米生物技术中的优质工具，可与抗体相比肩。适配体应用在检验方面，可以满足高敏感性，及时性，低成本，高特异性，可重复性，无副反应等各项要求。适配体在治疗方面应用广泛，既可用来抑制靶分子，也可作为受体激动剂。

摘要： 适配体是RNA或单链的DNA分子,它们可以选择性结合各种目标分子,如小分子,蛋白,核酸,细胞和微生物.它们结合目标分子具有较高的特异性和亲和性,因而可以替代被普遍使用的抗体.适配体与凝血酶体系被广泛研究,目前已筛选出了与凝血酶特异性结合的两条ssDNA适配体,这两种适配体被广泛作为模型研究.它们分别与凝血酶的I位点(纤维蛋白原结合位点)和II位点(肝素结合位点)相结合.利用这两个适配体可构建夹心式结构对凝血酶进行检测,这种特殊的性质为适配体检测凝血酶的方法提供了较之于直接免疫分析更高的特异性.

摘要： 核酸适配体是指对目标分子具有特异性相互作用的一段DNA或者RNA序列,它是利用指数富集的配体进化技术(systematicevolution of ligands by exponential enrichment,SELEX)从特定的寡核苷酸库中筛选的寡核苷酸片段.本研究使用硼亲和整体柱固载糖蛋白HRP(辣根过氧化物酶)，使用固载HRP后的整体柱从DNA库中筛选出对HRP有特异性识别能力的适配体。没有识别能力的适配体则被分离。将有识别能力的适配体进行扩增，并进行下一轮的筛选，重复筛选直到得到特异性较强的适配体。筛选得到的适配体用6羧基荧光素标记的引物扩增，并使用毛细管电泳检测适配体与HRP的解离常数。随着循环次数的增加，解离常数逐渐降低。证明HRP与适配体的结合能力逐渐增强。在第四次循环时，解离常数已经达到90nM，而使用普通的亲和色谱法达到此数量级的解离常数需要8次循环。此方法与从前的筛选方法相比有以下优点:筛选周期短;硼亲和整体柱对糖蛋白均有识别能力，可作为筛选糖蛋白适配体的普适性方法;使用DNA的量小，仅有几微升。此方法有望发展成一种微量筛选糖蛋白适配体的普适性方法。

摘要： 适配体是一种通过基于指数富集的配体系统进化方法筛选出来的单链RNA或 DNA寡核苷酸[1],由于它可以折叠成独特的高级结构,所以能够高特异性和高亲和力地与靶分子结合。适配体具有高稳定性、无毒、低成本、易合成和修饰、无免疫原性等特性[2],可匹敌经典的亲和配体,如抗体等。基于此,适配体的应用涉及到蛋白纯化、对映体分离、药物研制等领域[3]。

摘要： 促红细胞生成素(EPO)属于单链酸性糖蛋白，可促进骨髓红细胞的生成、提高机体血红蛋白的浓度、改善机体的携氧能力和增强耐力。重组人促红细胞生成素(rHuEPO-a)滥用重组蛋白除在短时间内大量增进运动效能外，也具有显著的副作用，建立rHuEPO-a的检测方法具有重要意义。本研究以荧光标记的具有高亲和力和高特异性的rHuEPO-a适配体为探针，以本实验室组装的CE-LIF装置为基础，建立了一种检测rHuEPO-a的分析方法。

摘要： 核酸适配体技术是近年来发展起来的一项新型检测技术,它具有与免疫蛋白检测技术相媲美的有点.本文采用在磁性纳米颗粒上生长碳臂共价键合作用固定蛋白,以增加蛋白的活性,用标记了不同荧光基团的核酸适适配体检测不同的目标蛋白.论文对蛋白固定方式进行了研究并优化了固定条件.在优化条件下,对同一样品中双组分蛋白同时进行了定量分析.目标蛋白(凝血酶与溶菌酶)浓度在1.20 ×10-9mol/L至7.50 ×10-8mol/L之间时,荧光峰强度与蛋白浓度成线性,其线性方程分别为I=62.09×109cthrombia+1.7213,相关系数r为0.9962;I=31.32 ×109clysoxyme+33.53,r=0.9908,凝血酶检测限为6.2 ×10-10mol/L,溶菌酶检测限为9.5×10-10mol/L.此方法可同时检测样品中的双蛋白组分,检测信号互不干扰,信号响应线性范围好.

摘要： 用硼氢化钠还原氯金酸制备了金纳米粒子(GN);用适配体(Apt)修饰NG可获得较稳定的Apt-GN探针.在pH 6.8 PBS缓冲液中及NaCl存在下,Apt-GN探针稳定而不聚集.当有氨基糖苷类抗生素-妥布霉素存在时,妥布霉素与Apt-GN探针中的Apt特异性结合并释放出纳米金.纳米金在NaCl作用下聚集,导致体系在368nm处的共振瑞利散射光强度增强.其共振散射峰峰强度的增大值△I与妥布霉素浓度在6.7-66.7ng/mL范围内呈现良好线性关系.该法用于分析测定妥布霉素滴眼液中的妥布霉素,结果令人满意.

摘要： 用核酸适体（Aptamer）修饰纳米银(AgNPs)，制备了汞离子的核酸适体纳米银探针（Apta-AgNPs）。在pH7.0Na2HPO4-NaH2PO4缓冲液及NaCl存在下，Apta-AgNPs纳米探针不聚集。当Hg2+存在时，它与Aptamer形成较稳定的双链T-Hg2+-T错配物，释出的纳米Ag聚集形成较大的微粒，导致464nm处共振散射峰增强。线性范围为2.8～1000nM，检出限为0.09nM。该法用于废水中汞的测定，结果满意。

摘要： 纳米粒子具有独特的电子、催化及光学特性，近年来关于纳米粒子的制备及其在材料科学领域中的应用受到研究者的极大关注。本研究以硼氢化钠为还原剂，柠檬酸三钠为稳定剂，制备了稳定的液相金把复合纳米，并用共振散射光谱和紫外吸收光谱对其进行了表征。这为纳米金把在痕量汞和铅得适配体共振散射光谱分析中的应用奠定了基础。

摘要： 巯基修饰的凝血酶适配体共价连接在纳米金颗粒表面构成纳米探针,利用凝血酶有两个适配体特异性结合位点,通过特异性的配体-蛋白-配体结合使原本均匀分散的纳米金颗粒形成随凝血酶浓度增加不断扩展的聚集体网络结构,通过检测纳米金聚集体的等离子体吸收实现了对低至30 nM的凝血酶的特异性检测。

摘要： 本发明提供用于快速检测双酚A的适配体、适配体纳米金材料、试剂盒及其应用。本发明基于长度为63‑mer的BPA适配体，对其冗余序列进行剪切，得到38‑mer和12‑mer的适配体。经试验证实，经过剪短，其亲和能力获得提高；同时将适配体通过静电作用吸附到纳米金表面，经条件优化，最终构建了具有良好特异性、稳定性以及高灵敏度的适配体纳米金比色法，所述检测方法操作简便、耗时短、无需大型昂贵设备，从而极大拓宽该方法在食品、环境和医学上的应用，因此本发明具有良好的实际应用之价值。

摘要： 本发明公开了一种西维因核酸适配体、核酸适配体衍生物及其应用，西维因核酸适配体序列为SEQ ID NO.1所示的DNA序列或在该DNA序列基础上偶联有荧光基团、淬灭基团、生物素、纳米材料等的核酸序列或在上述任一种西维因核酸适配体序列上删减、增加或置换碱基后获得的具有相同特异性识别功能的单链DNA分子；西维因核酸适配体衍生物为上述任一种西维因核酸适配体进行氨基化、巯基化或同位素化修饰得到的具有相同功能的核酸适配体的衍生物；上述西维因核酸适配体或其衍生物可用于制备西维因识别探针或检测/辅助检测西维因的产品，西维因核酸适配体或其衍生物容易合成和修改、易于保存，对目标物质西维因具有亲和力高、特异性强等诸多优点，应用广泛。

摘要： 本发明涉及核酸适配体技术领域，具体涉及核酸适配体衍生物和氨基化的核酸适配体衍生物以及它们的应用和药物偶合物。所述核酸适配体衍生物通过用抗代谢药物取代至少部分如式1所示的核酸适配体中相应的碱基或者碱基与脱氧核糖或核糖形成的偶合物得到，所有R同时为氢，Base为选自A、T、G和C的碱基；或者所有R同时为羟基，Base为选自A、U、G和C的碱基；所述抗代谢药物为核苷类似物；n为10‑100的整数。本发明用抗代谢药物修饰核酸适配体，可以增强核酸适配体的稳定性，还可以提高抗代谢药物对肿瘤细胞的选择性。

摘要： 本发明公开了一种甲氨蝶呤的核酸适配体、核酸适配体衍生物及其应用，其核苷酸序列包括序列1‑5中所示的DNA分子。核酸适配体可以是各种同源性较高的类似序列或由本发明序列得到的衍生物。本发明首次利用核酸适配体HMX38与甲氨蝶呤的特异性结合作用建立了检测甲氨蝶呤的方法。本发明的核酸适配体及其衍生物可用于制备甲氨蝶呤检测探针、制备药物载体或者用于药物设计与开发、药物分离与纯化等，具有能够与甲氨蝶呤高特异性和高亲和力结合、无免疫原性、能够化学合成、生物相容性好、分子量小、稳定、易于保存等优点。

摘要： 本专利涉及一种EV71单链DNA适配体及利用双适配体检测肠道病毒71型的化学发光检测试剂盒。所述适配体是序列如SEQ ID NO.1的适配体V11、序列如SEQ ID NO.2适配体V21，以及序列如SEQ ID NO.3适配体V7。本发明试剂盒，是以适配体V21为捕获探针，以适配体V11为信号探针。具体包括：捕获探针偶联的免疫磁珠、分析缓冲液、信号探针偶联的酶结合物、SA‑HRP溶液、发光底物液。本试剂盒对EV71的检测有高度的特异性；能从疑似手足口病患者的脑脊液、疱疹液、咽拭子和肛拭子等标本中定性检测EV71；利用本发明试剂盒检测操作简单快速，检测过程仅需45分钟左右。

摘要： 本发明涉及一种基于交联反应的核酸适配体的快速筛选新方法及其通过该方法筛选获得的人血清白蛋白的结构开关型核酸适配体。本方法中靶标与核酸适配体文库进行均相孵育，然后通过交联反应将靶标捕获在磁珠上，这样与靶标结合的核酸序列被捕获在磁珠上；将磁性分离出来的与靶标结合的核酸序列通过聚合酶链反应(PCR)进行扩增；将双链PCR产物进行单链制备得到次级文库，次级文库进入下一轮的筛选。将上述过程循环2‑3轮可以实现对文库的快速富集。该方法还可以与其它筛选技术联用，大幅提高筛选效率。按照本方法经3轮富集后的文库仅经过1轮基于文库固定的筛选方法就得到了具有高亲和力和选择性的HSA的SSA。

摘要： 本发明的新型冠状病毒S蛋白的核酸适配体与人源ACE2蛋白的核酸适配体的应用，提供结合新型冠状病毒(SARS‑CoV‑2)棘突蛋白的S1亚基(简称为S1蛋白)的核酸适配体APT‑S，和结合人源ACE2蛋白的核酸适配体APT‑A，以及这些核酸适配体的用途。具体地，本发明的核酸适配体及其衍生物具有能够快速化学合成、分子量小、稳定、易于保存和标记等优点，可以用于检测、诊断、成像以及治疗等方面应用。

摘要： 本发明提供了一种基于高性能计算平台的核酸适配体计算机辅助筛选方法，涉及分子生物学检测技术领域，根据匹配原则查询筛选平台集成的数据库系统中是否有与目标蛋白匹配的蛋白结构，如果有则作为受体模板，如果没有则进行同源构建，通过分子动力学模拟和分子对接筛选得到初选的核酸适配体，最为核酸适配体候选物，具有高效、快捷、准确率高的特点。该筛选方法可与“湿法”实验结合，减少“湿法”实验次数，节省实验成本，提高筛选成功率。通过计算机辅助模拟分析得到适配过程中蛋白质与核酸分子间化学反应机理等信息，并将数据在终端进行展示，并在揭示相应生物材料与核酸分子间可能的相互作用机理方面提供数据支撑，因此具有重要的研究意义和使用价值。

摘要： 本发明的新型冠状病毒S蛋白的核酸适配体与人源ACE2蛋白的核酸适配体的应用，提供结合新型冠状病毒(SARS‑CoV‑2)棘突蛋白的S1亚基(简称为S1蛋白)的核酸适配体APT‑S，和结合人源ACE2蛋白的核酸适配体APT‑A，以及这些核酸适配体的用途。具体地，本发明的核酸适配体及其衍生物具有能够快速化学合成、分子量小、稳定、易于保存和标记等优点，可以用于检测、诊断、成像以及治疗等方面应用。

摘要： 本发明涉及一种辛硫磷核酸适配体、核酸适配体衍生物及其在检测中的应用，更具体地说，它涉及辛硫磷核酸适配体序列为SEQ ID NO.1所示或在该DNA序列基础上偶联有生物素、荧光基团、猝灭材料等的核酸序列或在上述任一种辛硫磷核酸适配体序列上删减、增加或修饰碱基后获得的具有相同特异性识别功能的单链DNA分子；辛硫磷适配体衍生物为上述任一种辛硫磷核酸适配体进行修饰得到的具有相同功能的核酸适配体的衍生物；上述辛硫磷核酸适配体或其衍生物可用于制备辛硫磷识别探针或检测/辅助检测辛硫磷的产品，辛硫磷核酸适配体或其衍生物具有易于储存及修饰，可在体外大量合成及修饰，对目标物质辛硫磷具有亲和力强、特异性高等优势，具有广泛应用的潜力。