蛋白检测

摘要： 为了实现酶标仪的全波段和快速检测,设计出一种基于反射式成像光路的全波段蛋白检测仪,采用反射式光学检测的方式进行成像,将一维成像光程扩展为二维,提高维度减少空间,同时提高了视场范围。分别进行了Human Pentraxin 3/TSG-14(PTX3)酶联免疫吸附实验以及二喹啉甲酸法(BCA)蛋白浓度检测实验,检测波长分别为450 nm和562 nm,并完成了对生物显色实验溶液的图像采集,利用图像处理比色算法进行分析处理,完成了蛋白浓度的测定。PTX3实验和BCA实验均基于四参数拟合模型绘制拟合曲线,拟合优度分别为0.9996和0.9997,与商用酶标仪绘制的标准曲线基本一致。PTX3实验使用42份未知样本,BCA实验使用40份未知样本,基于图像处理比色算法的质量浓度测量结果与商用酶标仪检测的质量浓度误差在5%以内,验证了全波段蛋白检测仪的可行性。

摘要： 蛋白质组学不断发展,需要我们更新技术,以便更大规模、高效地研究蛋白质,蛋白质芯片的诞生,很好地解决了这一问题。蛋白质芯片由载体、以及载体上的固定蛋白组成,是对蛋白质进行高通量检测的新技术。由于蛋白质芯片操作简单,可同时检测多种蛋白质,且检测灵敏度高,具有较高的特异性,在科学研究领域应用十分广泛。本文从蛋白质芯片的介绍、应用、前景与展望三个方面对蛋白质芯片展开综述。

摘要： 目的:建立医用多酶清洗剂的定量检测方法。方法:实验研究。应用二喹啉甲酸(BCA)法建立医用多酶清洗剂的定量检测方法,并测定其重现性、准确性、回收率。结果:建立了BCA法测定医用多酶清洗剂的标准曲线、方程及样品的数据处理方法。BCA标准曲线的线性关系良好,且多次实验稳定性佳,R2均>0.95;标准蛋白回收试验,回收率<100±15%,标准偏差(RSD)<3%;BCA法测定医用多酶清洗剂原液及1∶50、1∶100比例稀释的医用多酶清洗剂样品,RSD均<5%;将医用多酶清洗剂原液稀释成6个浓度梯度,BCA法测得在1∶50~1∶200稀释范围内,随着稀释比例增加,酶蛋白浓度呈线性下降趋势。结论:BCA法可用于医用多酶清洗剂的定量检测,且具有良好的灵敏度、回收率、稳定性和精确性。

摘要： 目的:建立医用多酶清洗剂的定量检测方法.方法:实验研究.应用二喹啉甲酸(BCA)法建立医用多酶清洗剂的定量检测方法,并测定其重现性、准确性、回收率.结果:建立了BCA法测定医用多酶清洗剂的标准曲线、方程及样品的数据处理方法.BCA标准曲线的线性关系良好,且多次实验稳定性佳,R2均＞0.95;标准蛋白回收试验,回收率＜100±15％,标准偏差(RSD)＜3％;BCA法测定医用多酶清洗剂原液及1∶50、1∶100比例稀释的医用多酶清洗剂样品,RSD均＜5％;将医用多酶清洗剂原液稀释成6个浓度梯度,BCA法测得在1∶50～1∶200稀释范围内,随着稀释比例增加,酶蛋白浓度呈线性下降趋势.结论:BCA法可用于医用多酶清洗剂的定量检测,且具有良好的灵敏度、回收率、稳定性和精确性.

摘要： 目前,新型冠状肺炎(COVID-19)仍是世界各国面临的主要公共卫生问题.早发现、早隔离、早治疗是目前控制COVID-19传播的主要手段.因此,开发快速、灵敏、准确、简便、经济的新型冠状病毒(SARS-CoV-2)检测方法对于疫情的控制至关重要.本文综述了目前已有的部分快速检测手段(主要是针对核酸和蛋白检测)用于实现对SARS-CoV-2检测的最新进展.同时,本文针对已有的检测方法所面临的问题进行了总结,并对SARS-CoV-2检测方法的未来发展趋势进行了展望,以期为研究人员在新检测方法的开发方面提供借鉴作用.

摘要： 目的:研究尿液视黄醇结合蛋白检测在肾功能早期损伤中的临床诊断,分析其意义.方法:选择2018年5月-2019年8月于我院体检发现的肾功能早期损伤体检者55例 (实验组) 与体检健康人员55例 (对照组)为研究对象.实验组检测采用尿视黄醇结合蛋白,对照组进行常规尿检,比较两组患者的尿微量白蛋白、α1-MG和尿视黄醇结合蛋白水平.结果:实验组尿微量白蛋白 (50.39±10.23)、α1-MG (15.37±5.49)、尿液视黄醇结合蛋白 (1.62±0.48)显著高于对照组尿微量白蛋白(6.67±1.49)、α1-MG (6.57±2.33)、尿液视黄醇结合蛋白 (0.18±0.07),数据对比有差异统计学意义 (P<0.05).结论:尿液视黄醇结合蛋白作为早期肾功能损害的诊断指标具有较高的准确性.因此,值得进一步临床应用.

摘要： 目的 以2,2'-联吡啶(L=2,2'-bipy)为配体合成Tb(Ⅲ)配合物,并利用其强荧光发射原理作为荧光探针进一步降低血清白蛋白的检测限,同时确定合成配合物的最佳方法.方法 使用普通溶剂法制备二元、三元铽配合物,在380nm波长紫外光谱下探测配合物荧光光谱,用KBr压片法进行配合物结构的红外光谱分析,再分别使用普通溶剂法和回流溶剂法合成二元配合物和三元配合物,并对四种产物进行荧光分析、比较实现实验条件的优化.结果 红外光谱显示合成了Tb-4-IBA二元配合物和Tb-L-4-IBA三元配合物,合成的Tb-L二元配合物具有最大发光值,因而采用普通溶剂法合成Tb-L二元配合物,最适制备pH为7.4,二元配合物的最低检测浓度可达10-5 M数量级.结论 得到了尚未见文献报道的含氮芳香杂环类二元和三元稀土配合物,对其组成结构和光谱性能进行了研究,并利用荧光特性对物质结构、合成条件等进行了探讨,最后与人血清白蛋白结合,研究其作为生物荧光探针的应用优势.

摘要： 目的:概述新型冠状病毒(SARS-CoV-2,severe acute respiratory syndrome coronavirus 2)病原特征及检测方法的研究现状与发展趋势.方法:总结了SARS-CoV-2的病原特征,分析了病毒分离鉴定、核酸检测和蛋白检测等方法的当前进展.结果:SARS-CoV-2是β属冠状病毒的新成员,具有较强的传染性和隐蔽性;病毒分离鉴定是感染综合诊断的重要依据,但在临床诊断的直接应用中受限;核酸检测特异性强、灵敏性高,但目前假阴性结果频发;蛋白检测可用于疑似病例、无症状病例检测等方面,但质控不足.结论:未来SARS-CoV-2检测技术的研发不仅要注重病毒检测技术的创新,更应重视核酸或蛋白标准样品的研制及全病程监测技术体系的完善,为病毒检测结果的溯源、检测试剂的质量控制、患者的病程监测和抗SARS-CoV-2药物的研发提供保障.

摘要： 目前蛋白和蛋白组分析的三大挑战：多重蛋白检测(高含量/高通量)，低丰度蛋白检测(高灵敏)，快速检测。而定量抗体芯片(Quanti body)技术的出现为多疾病标志物联检提供重要平台。

摘要： 目的:基底细胞癌是最常见的皮肤肿瘤类型,本研究旨在研究趋化因子受体(CXCR4)在鼻面部基底细胞癌中的临床意义.rn 方法:本研究选取自2006年1月～2009年12月的80例原发基底细胞癌组织及30例对照组织行CXCR4免疫组化染色.另外应用实时定量PCR方法及Western蛋白印迹法对7组新鲜肿瘤及对照组织进行CXCR4蛋白检测分析.rn 结果:CXCR4在70％的鼻面部基底细胞癌组织中呈阳性染色,CXCR4过表达与肿瘤大小及病理类型显著相关(P＜0.01).在肿瘤组织中,CXCR4的mRNA及蛋白水平显著高于癌旁正常组织(P＜0.05).rn 结论:CXCR4表达与鼻面部基底细胞癌进展及侵袭相关,可能成为评估其侵袭性及指导临床的肿瘤标志物.

摘要： 本文通过对1例散发性Creutzfeldt-Jakob病的报道，探讨了该病的发病机制，分析了脑电图和脑脊液14-3-3蛋白检测2项检查对于临床诊断的重要性。

摘要： 目的:核苷酸切除修复交叉互补组1(ERCC1)参与非小细胞肺癌铂类化疗药物的耐药发生，ERCC1的表达与肺癌的化疗疗效及预后密切相关。观察ERCC1蛋白表达水平的检测在晚期非小细胞肺癌个体化治疗中的作用及其意义。方法:以190例既往未接受过化疗、无法手术切除的晚期(IIIB—IV期)非小细胞肺癌(NSCLC)患者为研究对象，190例患者均经病理组织学诊断证实，采用免疫组化方法检测ERCC1蛋白在患者肺癌组织的表达。结论:个体化治疗组的中位生存时间较标准治疗组有所延长(13.59月vs 10.10月)，两组差异在统计学上有显著意义(P值==0.036)，但ERCC1蛋白表达水平的检测在晚期非小细胞肺癌个体化治疗中并未体现出有效率、生存期及疾病进展时间方面的优势，实验室依据能否指导临床合理选择化疗方案有待于更深入的临床研究加以解决。

摘要： 中药注射剂是一种重要的剂型，但近年来中药注射剂的不良反应日趋增加，其中大分子杂蛋白可能是引发起中药注射荆过敏反应的主要原因.为控制中药注射剂的质量，需对中药注射剂中杂蛋白的含量进行检测.本文总结了多种分析方法在蛋白检测方面的应用及各自的特点，以期为中药注射剂中杂蛋白的检测提供思路.

摘要： 缺血修饰白蛋白(IMA)是人血清白蛋白流经缺血组织而产生,于20世纪90 年代初被发现,于急性冠脉综合征患者发病早期即可出现IMA 升高,并存在动态变化.IMA 作为一项新的早期缺血诊断生化标志物,于2003年被美国食品药品管理局批准,用于急性冠状动脉综合征的早期排除诊断.脑梗死患者出现脑组织缺血级联反应，引发自由基产生，生成的IMA不断积聚;而脑出血后脑组织缺血反应相对较弱，血红蛋白分解产物的作用在急性期表现不明显。对于脑出血后IMA的形成机制及影响，现在仍未定论。

摘要： 缺血修饰白蛋白(IMA)是人血清白蛋白流经缺血组织而产生,于20世纪90 年代初被发现,于急性冠脉综合征患者发病早期即可出现IMA 升高,并存在动态变化.IMA 作为一项新的早期缺血诊断生化标志物,于2003年被美国食品药品管理局批准,用于急性冠状动脉综合征的早期排除诊断.脑梗死患者出现脑组织缺血级联反应，引发自由基产生，生成的IMA不断积聚;而脑出血后脑组织缺血反应相对较弱，血红蛋白分解产物的作用在急性期表现不明显。对于脑出血后IMA的形成机制及影响，现在仍未定论。

摘要： 缺血修饰白蛋白(IMA)是人血清白蛋白流经缺血组织而产生,于20世纪90 年代初被发现,于急性冠脉综合征患者发病早期即可出现IMA 升高,并存在动态变化.IMA 作为一项新的早期缺血诊断生化标志物,于2003年被美国食品药品管理局批准,用于急性冠状动脉综合征的早期排除诊断.脑梗死患者出现脑组织缺血级联反应，引发自由基产生，生成的IMA不断积聚;而脑出血后脑组织缺血反应相对较弱，血红蛋白分解产物的作用在急性期表现不明显。对于脑出血后IMA的形成机制及影响，现在仍未定论。

摘要： 检测胃癌患者外周血中上皮细胞转化序列2(ECT2)mRNA及蛋白的表达水平,初步分析胃癌患者外周血中ECT2mRNA及蛋白的表达水平与临床病理参数的相关性,探索外周血中ECT2mRNA及蛋白的表达与胃癌的关系及意义.结果表明ECT2 mRNA及蛋白在胃癌患者外周血中高表达，且与肿瘤直径、TNM分期、淋巴结转移及浸润深度均相关;ECT2 mRNA及蛋白的表达可能与胃癌发生、发展关系密切;外周血中检测ECT2 mRNA及蛋白简便、快捷。有助于胃癌的诊断、病情的评估及预后的判断。

摘要： 检测胃癌患者外周血中上皮细胞转化序列2(ECT2)mRNA及蛋白的表达水平,初步分析胃癌患者外周血中ECT2mRNA及蛋白的表达水平与临床病理参数的相关性,探索外周血中ECT2mRNA及蛋白的表达与胃癌的关系及意义.结果表明ECT2 mRNA及蛋白在胃癌患者外周血中高表达，且与肿瘤直径、TNM分期、淋巴结转移及浸润深度均相关;ECT2 mRNA及蛋白的表达可能与胃癌发生、发展关系密切;外周血中检测ECT2 mRNA及蛋白简便、快捷。有助于胃癌的诊断、病情的评估及预后的判断。

摘要： 一种蛋白质检测用融合蛋白，其为使包含G蛋白的C1结构域、G蛋白的C2结构域及G蛋白的C3结构域中的至少一个蛋白质结构域与将大肠杆菌碱性磷酸酶(BAP)的第153位的氨基酸残基Asp置换成Gly且将第330位的氨基酸残基Asp置换成Asn的双重突变体D153G/D330N、将大肠杆菌碱性磷酸酶(BAP)的第153位的氨基酸残基Asp置换成His且将第330位的氨基酸残基Asp置换成Asn的双重突变体D153H/D330N、或将大肠杆菌碱性磷酸酶(BAP)的第328位的氨基酸残基Lys置换成Arg且将第330位的氨基酸残基Asp置换成Asn的双重突变体K328R/D330N融合而得的。

摘要： 蛋白质—蛋白质相互作用(protein-protein interaction，PPI)对于所有生物学过程都至关重要，因此，蛋白质相互作用研究一直是细胞生物学与分子生物学领域的一大研究热点。免疫共沉淀(co-immunoprecipitation，CoIP)是以抗体和抗原之间的特异性作用为基础的用于研究蛋白质相互作用的经典方法，是发现和验证PPI最常用、最有效的方法。传统的基于树脂的CoIP步骤复杂、费时费力，难以实现PPI的通量化检测。本发明的核心是：利用重组蛋白的表位标签，在固定了抗标签抗体的玻璃醛基片上进行CoIP，再通过荧光标记的抗体进行相互作用的检测。该方法大大简化了传统CoIP的操作步骤，同时检测样品的通量化大大提高，是一个简便、快速、高通量研究PPI的新型技术平台。

摘要： 本发明涉及含有抑制纤维粘连蛋白与免疫抑制性受体LILRB4的结合的物质作为有效成分的免疫检查点抑制剂、免疫检查点相关疾病的治疗剂、含有活化免疫抑制性受体LILRB4的物质作为有效成分的免疫抑制剂、抗纤维粘连蛋白抗体或其衍生物、纤维粘连蛋白类似物、用于检测纤维粘连蛋白或其部分蛋白质的试剂盒和使用所述试剂盒检测生物样品中的纤维粘连蛋白或其部分蛋白质的方法。

摘要： 本发明公开了一种蛋白－蛋白相互作用的高通量可视化芯片检测方法以及一种蛋白－蛋白相互作用检测试剂盒。该方法为：制备一Flag抗体芯片，然后将含有Flag－诱饵融合蛋白和Myc－猎物融合蛋白的细胞裂解液加入到芯片表面进行免疫共沉淀反应，再经胶体金结合银增强显色技术检测诱饵蛋白和猎物蛋白是否具有相互作用。该试剂盒包括一具有多个分区的醛基玻片，FLAG和c－Myc标签载体和其对应的单抗，链亲和素胶体金，银增强溶液A和B以及基于上述方法的使用说明书。本发明建立的蛋白－蛋白相互作用高通量可视化芯片检测技术将成为蛋白质组学研究中高效有力的工具。

摘要： 本发明公开了一种触珠蛋白、血红蛋白、转铁蛋白共线检测试纸条及其制备方法和检测卡、试剂盒。该试纸条的检测线上包被有混和抗体；混和抗体包括第一抗人触珠蛋白单克隆抗体、第一抗人血红蛋白单克隆抗体和第一抗人转铁蛋白单克隆抗体；质控线上包被有质控抗体；金标垫上包被有胶体金标记的抗体；胶体金标记的抗体包括胶体金标记的第二抗人触珠蛋白单克隆抗体、胶体金标记的第二抗人血红蛋白单克隆抗体和胶体金标记的第二抗人转铁蛋白单克隆抗体；混和抗体与胶体金标记的抗体分别结合对应检测蛋白的不同抗原表位；胶体金标记的抗体还能够与质控抗体结合。本发明具有极高的敏感性，可检测4ng/mL的触珠蛋白，且兼顾特异性。

摘要： 一种蛋白质检测用融合蛋白，其为使包含G蛋白的C1结构域、G蛋白的C2结构域及G蛋白的C3结构域中的至少一个蛋白质结构域与将大肠杆菌碱性磷酸酶(BAP)的第153位的氨基酸残基Asp置换成Gly且将第330位的氨基酸残基Asp置换成Asn的双重突变体D153G/D330N、将大肠杆菌碱性磷酸酶(BAP)的第153位的氨基酸残基Asp置换成His且将第330位的氨基酸残基Asp置换成Asn的双重突变体D153H/D330N、或将大肠杆菌碱性磷酸酶(BAP)的第328位的氨基酸残基Lys置换成Arg且将第330位的氨基酸残基Asp置换成Asn的双重突变体K328R/D330N融合而得的。

摘要： 本发明公开了一种α-乳白蛋白、β-乳球蛋白和β-酪蛋白三联检测卡及其检测方法，属于乳产品检测技术领域。本发明三联检测卡外壳内有测试条，由支承背板上依次粘贴样品垫、数段胶体金膜、硝酸纤维素膜和吸水膜所组成，硝酸纤维素膜上有3条检测带，分别含α-乳白蛋白蛋白质偶联物、β-乳球蛋白蛋白质偶联物、β-酪蛋白蛋白质偶联物，另有1条含抗兔抗体或抗鼠抗体的质控带。本发明优点是能同时检测出牛奶中α-乳白蛋白、β-乳球蛋白和β-酪蛋白是否达标。检测卡易于制备且节省检测费用，使用方便快速，结果准确。

摘要： 检测神经胰蛋白酶体内活性的方法，其中样品中集聚蛋白22kDa片段所测得的含量用于计算神经胰蛋白酶的活性；该方法在诊断和监测神经胰蛋白酶相关失调的用途和集聚蛋白22kDa片段作为神经胰蛋白酶相关失调的生物标志物的用途。

摘要： 蛋白质-蛋白质相互作用(protein－protein interaction，PPI)对于所有生物学过程都至关重要，因此，蛋白质相互作用研究一直是细胞生物学与分子生物学领域的一大研究热点。免疫共沉淀(co－immunoprecipitation，CoIP)是以抗体和抗原之间的特异性作用为基础的用于研究蛋白质相互作用的经典方法，是发现和验证PPI最常用、最有效的方法。传统的基于树脂的CoIP步骤复杂、费时费力，难以实现PPI的通量化检测。本发明的核心是：利用重组蛋白的表位标签，在固定了抗标签抗体的玻璃醛基片上进行CoIP，再通过荧光标记的抗体进行相互作用的检测。该方法大大简化了传统CoIP的操作步骤，同时检测样品的通量化大大提高，是一个简便、快速、高通量研究PPI的新型技术平台。

摘要： 一种同时检测心型脂肪酸结合蛋白和肌钙蛋白I的快速定量检测装置及检测方法，其特征在于装置由相互独立的心型脂肪酸结合蛋白(FABP)和肌钙蛋白I(CTNI)检测试纸、双联卡壳和内置了相应标准曲线和结果判定的免疫层析结果判读记录仪组成。免疫层析结果判读记录仪是一种光学检测系统，用于对检测结果的定量判定，对FABP和CTNI检测范围分别为5-200ng/mL和1-100ng/mL。检测在15-20分钟内完成。具有联合检测、操作简便、反应快速、结果准确、适合现场检测等优点，适合临床对更为准确、简便检测的需要。