小神经胶质细胞

摘要： 癫痫是一种由于脑内神经元高度同步化异常放电引起短暂的大脑功能紊乱综合征[1]。目前全球有超7000万癫痫患者,合并精神障碍在癫痫患者中非常普遍,发生率高达50%以上,其中合并抑郁症最常见,抑郁症比癫痫本身对生活质量的影响更大。鉴于一些抗癫痫药物可能会加重抑郁症状,现有某些抗抑郁药物也可能增加癫痫发作,探索新的治疗方法对于癫痫共病抑郁患者具有重要意义。

摘要： 目的 探讨降钙素基因相关肽(CGRP)对脂多糖(LPS)联合三磷酸腺苷(ATP)诱导的BV2小胶质细胞NOD样受体热蛋白结构域相关蛋白3(NLRP3)炎症小体活化的抑制作用。方法 通过检测不同方法处理的各组细胞NLRP3蛋白含量,确定LPS联合ATP激活小胶质细胞最佳模型并筛选CGRP最佳作用浓度。实验分为对照组、模型组以及CGRP组,采用蛋白免疫印迹法检测细胞NLRP3、凋亡相关的斑点样蛋白(ASC)、半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶-1(caspase-1)的表达,酶联免疫吸附试验法检测细胞内炎性因子白细胞介素1β(IL-1β)的表达。结果BV2小胶质细胞NLRP3炎症小体激活最佳模型的制备方法为先加入100μg/L的LPS作用12 h,再加入5 mmol/L的ATP继续作用45 min;CGRP抑制NLRP3炎症小体激活的最佳浓度为10μg/L。模型组细胞NLRP3、ASC、caspase-1、IL-1β的蛋白表达较对照组明显升高,CGRP组细胞上述蛋白表达较模型组明显降低,差异均有显著性(F=7.261~151.232,P<0.05)。结论 CGRP可能通过抑制BV2小胶质细胞NLRP3炎症小体激活,发挥抗炎神经保护作用。

摘要： 中枢神经系统免疫性疾病包括多发性硬化、视神经脊髓炎谱系疾病、抗髓鞘少突胶质细胞糖蛋白抗体相关疾病和抗N-甲基-D-天冬氨酸受体脑炎等,发病机制复杂,多种中枢神经系统和外周来源细胞参与其中。单细胞组学通过一系列测序技术实现高分辨检测单个细胞水平表达谱,以解析细胞异质性及其功能表型。本文对单细胞测序技术在常见中枢神经系统免疫性疾病各类型细胞研究中的进展进行综述。

摘要： 目的探讨结合珠蛋白(Hp)和血红蛋白(Hb)影响氧葡萄糖剥夺-再恢复(OGDR)小鼠小胶质细胞BV2的细胞存活率、极化及炎症反应。方法采用BV2细胞构建OGDR细胞模型。OGDR同时加入Hb和(或)Hp进行干预,分为OGDR组(OGDR损伤)、5、10、15、20μmol/L Hb组(OGDR损伤+5、10、15μmol/L Hb)、HP组(OGDR损伤+4μmol/L HP)、Hb+HP组(OGDR损伤+15μmol/L Hb+4μmol/L Hp)和对照组(细胞常规培养)组。采用细胞计数试剂盒(CCK)8法检测细胞存活率变化,酶联免疫吸附试验(ELISA)检测细胞培养液中白细胞介素(IL)-6、IL-10和肿瘤坏死因子(TNF)-α的表达,采用实时荧光定量聚合酶链反应(RT-PCR)检测极化特异性标记几丁质酶样蛋白(CHIL)3、CD206、精氨酸酶(Arg)-1、一氧化氮合酶(iNOS)、CD163、CD11b和CD32的mRNA表达,Western印迹检测细胞内谷胱甘肽过氧化物酶(GPX)4蛋白表达。结果常规培养条件下,BV2细胞给予不同浓度的Hb、Hp及Hb+Hp进行干预,各组细胞存活率比较差异无统计学意义(P>0.05)。OGDR干预BV2细胞的同时加入不同浓度Hb和(或)4μmol/L Hp进行干预,与OGDR组相比,15、20μmol/L Hb组细胞存活率明显下降(P0.05)。对照组、OGDR组、15μmol/L Hb组和Hb+Hp组蛋白CHIL3、Arg-1、CD163和CD11b mRNA表达差异无统计学意义(均P>0.05);CD206、iNOS和CD32 mRNA表达差异有统计学意义(均P<0.05)。与对照组、OGDR组15μmol/L Hb组对比,Hb+Hp组GPX4蛋白表达量明显降低(P<0.05)。结论Hp和Hb加重了OGDR的BV2细胞的细胞损伤,并促进其向促炎方向激活。

摘要： 目的探讨黄芩素(BAI)对实验性自身免疫性脑脊髓炎(EAE)小鼠的防治作用及其对中枢神经系统小胶质细胞(MG)极化和炎性因子的影响。方法将50只雌性C57BL/6小鼠按照随机数字表法分为空白对照组,EAE模型组及BAI低、中、高剂量组,每组10只。空白对照组不做处理,其余各组建立EAE模型。BAI低、中、高剂量组每日分别给予BAI 75、150、300 mg/kg灌胃,空白对照组及EAE模型组给予等体积生理盐水灌胃,连续14 d。观察小鼠的神经功能缺损和脊髓组织炎性脱髓鞘情况。采用免疫荧光双重染色法检测小鼠脊髓组织离子钙接头蛋白1(Iba-1)阳性MG中M1型MG标志物诱导型一氧化氮合酶(iNOS)、M2型MG标志物精氨酸酶1(Arg1)的表达情况及分歧指数(RI)变化,实时荧光定量PCR法检测小鼠脊髓组织中iNOS、Arg1及炎性因子肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、白细胞介素-10(IL-10)mRNA的表达情况。结果空白对照组小鼠未见发病,其余各组均不同程度发病。与EAE模型组比较,BAI各剂量组小鼠发病潜伏期及达高峰期时间延长,神经功能障碍评分降低(均P<0.05),脊髓组织脱髓鞘程度减轻(均P<0.05),Iba-1阳性MG中iNOS表达降低,Arg1表达升高,RI值减小(均P<0.05),MG的形态倾向于M2型极化,脊髓组织中iNOS、TNF-αmRNA表达降低,Arg1、IL-10 mRNA表达升高(均P<0.05),且BAI剂量越大,变化越明显。结论BAI对EAE小鼠发病具有防治作用,且呈剂量依赖性,其机制可能与纠正M1/M2型MG失衡及调节炎性因子TNF-α、IL-10表达有关。

摘要： 脑卒中后认知障碍是脑卒中常见并发症之一,严重影响患者日常生活自理能力。近年来肠道微生物群-肠-脑轴研究发现,肠道微生物群及其代谢产物在神经系统疾病的发生、发展中发挥着重要作用,而肠道微生物群主要代谢产物短链脂肪酸是肠-脑沟通的关键递质,对脑卒中具有保护作用,但其具体作用机制尚不完全清楚。本文主要综述了短链脂肪酸对脑卒中的保护作用机制及其与脑卒中后认知障碍的关系,以期为脑卒中的发病机制和治疗研究等提供参考。

摘要： 目的:评价大麻素受体2(CB 2受体)通过抗氧化应激机制在谷氨酸对共培养小胶质细胞和神经元损伤中的保护作用。方法:采用随机数字表法将培养的N9小胶质细胞和HT22神经元分为四组(n=24):对照组(Con组)、谷氨酸组(Glu组)、CB 2受体激动剂AM1241+谷氨酸组(AM1241+Glu组)和AM1241+CB 2受体拮抗剂AM630+谷氨酸组(AM1241+AM630+Glu组)。Con组正常培养24 h;Glu组用含10 mmol/L谷氨酸的培养基孵育24 h;AM1241+Glu组用含2μmol/L AM1241和10 mmol/L谷氨酸的培养基孵育24 h;AM1241+AM630+Glu组含2μmol/L AM1241、6μmol/L AM630及10 mmol/L谷氨酸的培养基孵育24 h。采用MTT法测定细胞活力,采用化学比色法测定乳酸脱氢酶(LDH)、超氧化物歧化酶(SOD)活性及丙二醛(MDA)的含量。结果:与Con组比较,Glu组和AM1241+AM630+Glu组细胞活力和SOD活性降低,LDH活性和MDA含量升高(均P<0.05),AM1241+Glu组细胞活力和SOD活性降低,LDH含量升高(均P<0.05);与Glu组比较,AM1241+Glu组细胞活力和SOD活性升高,LDH活性和MDA含量降低(均P<0.05);与AM1241+Glu组比较,AM1241+AM630+Glu组细胞活力和SOD活性降低,LDH活性和MDA含量升高(均P<0.05)。结论:CB 2受体激活减轻谷氨酸诱发小胶质细胞和神经元损伤的机制与抗氧化作用有关。

摘要： 创伤性脑损伤(traumatic brain injury, TBI)一般是指外部机械性暴力或投射物导致的创伤性结构损伤和脑功能障碍[1]。TBI后首先引起脑实质受损、脑出血和轴突剪切,诱发炎症、氧化应激、代谢紊乱和中枢神经细胞死亡,最终造成神经损伤、局部血液供应障碍、血脑屏障损伤以及周围脑肿胀[2]。炎性反应在TBI的病理过程中起重要作用,抑制过度的炎性反应对于改善TBI后神经功能至关重要。小胶质细胞是炎症和免疫反应的常驻免疫细胞。

摘要： 目的 检测癫痫共病抑郁大鼠各脑区诱导型一氧化氮合酶(iNOS)和精氨酸酶1(Arg-1)表达及神经元凋亡情况。方法 将20只大鼠随机分为对照组、癫痫组、抑郁组、癫痫共病抑郁组(共病组),每组5只。采用氯化锂-匹罗卡品法建立癫痫共病抑郁大鼠模型,采用慢性不可预见中等应激刺激结合孤养法建立抑郁大鼠模型。采用免疫组织化学检测iNOS和Arg-1表达,TUNEL染色检测神经元凋亡情况。结果 与对照组和癫痫组比较,共病组大鼠体质量、蔗糖偏好率、水平运动和垂直运动明显减少(P<0.05)。与对照组、癫痫组、抑郁组比较,共病组大鼠额前皮质、海马、杏仁核iNOS表达和TUNEL阳性细胞数明显增多,Arg-1表达明显减少(P<0.05)。共病组海马iNOS表达(0.480±0.028 vs 0.447±0.024,0.394±0.005)和TUNEL阳性细胞数(61.6±2.0 vs 46.0±1.5,30.0±1.5)明显高于额前皮质和杏仁核(P<0.05)。结论 癫痫共病抑郁大鼠海马M1型小胶质细胞活化及凋亡神经元较额前皮质及杏仁核明显增多,可能在癫痫共病抑郁发病中发挥了更大的作用。

摘要： 目的探讨胰岛素样生长因子-1(IGF-1)与淫羊藿素(ICT)合用对脂多糖(LPS)诱导的BV2小胶质细胞炎症反应的影响。方法常规培养BV2小胶质细胞,将细胞分为对照组、LPS组、IGF-1+LPS组、ICT+LPS组和IGF-1+ICT+LPS组。其中LPS组细胞加入LPS(1 mg/L)作用6 h;后3组细胞先加入IGF-1(12.5μg/L)或(和)ICT(10μmol/L)预保护1 h,再加入LPS(1 mg/L)共同作用6 h。应用实时荧光定量PCR检测各组细胞环氧合酶-2(COX-2)和诱导型一氧化氮合酶(iNOS)mRNA的表达。结果与对照组比较,LPS组COX-2和iNOS mRNA表达明显上调(F=20.77、39.85,P<0.05);IGF-1和ICT预处理均可显著下调LPS诱导的BV2小胶质细胞COX-2和iNOS mRNA的表达,且IGF-1和ICT联合用药的下调作用比单独应用两种药物更显著(F=54.84~241.68,P<0.05)。结论IGF-1和ICT均能明显抑制LPS诱导的BV2小胶质细胞炎症反应,且二者联合应用较单独应用更有效。

摘要： 目的：研究细胞型朊蛋白对神经小神经胶质细胞不同激活方式的影响.方法：用IFN-γ、IL-4 和IL-10分别刺激BV2细胞,RT-PCR方法检测PrPC的mRNA表达量.SiRNA干扰将PrPC沉默,再用上述因子刺激细胞,用RT-PCR和Western-blot检测相关参数.结果：用IFN-γ、IL-4和IL-10分别刺激小神经胶质细胞后可导致PrPC的mRNA表达量下降;PrPC沉默后的小神经胶质细胞对IFN-γ刺激的反应应答减弱;PrPC沉默后可以显著地改变由IL-4诱导的神经胶质细胞的激活表型;但是对IL-10诱导的小神经胶质细胞激活没有影响.结论：PrPC既能影响小神经胶质细胞从静止状态到激活状态的转换,也在小神经胶质细胞的经典激活和替代激活途径中发挥调节作用.

摘要： 目的:研究不同激活过程的小神经胶质细胞PrPC表达的情况以及PrPC沉默对小神经胶质细胞三种激活方式的影响.方法:培养BV2小胶质细胞,首先用IFN-γ、IL-4和IL-10分别刺激BV2细胞,分别与6h、12h和24h后提取细胞内RNA并反转录合成cDNA,用RT-PCR方法检测PrPC的mRNA表达量,设定PBS处理组为阴性对照组.通过SiRNA干扰将BV2细胞的PrPC沉默,用RT-PCR 和Western-blot检测干扰效率.再用上述因子分别刺激正常的小神经胶质细胞和沉默后的小神经胶质细胞,提取细胞内RNA 并反转录合成cDNA,再用RT-PCR检测相关参数,设定PBS处理组为阴性对照组.结果:用IFN-γ、IL-4和IL-10分别刺激小神经胶质细胞6 h、12 h和24h后,小神经胶质细胞的PrPC的mRNA表达量下降;PrPC沉默后的小神经胶质细胞对IFN-γ刺激的反应应答减弱;PrPC沉默后可以显著地改变由IL-4诱导的神经胶质细胞的激活表型;但是对IL-10诱导的小神经胶质细胞激活没有影响.结论:小神经胶质细胞的不同激活方式总是伴随着PrPC的下调表明PrPC可能直接参与维持小神经胶质细胞的静止状态,PrPC表达下调可能是小神经胶质细胞从静止状态转向激活状态的一个必要条件.PrPC沉默对小神经胶质细胞不同激活方式的影响表明PrPC的作用不仅仅局限于参与小神经胶质细胞从静止状态到激活状态的转变,它的作用甚至远远超出参与调节小神经胶质细胞的激活过程.朊蛋白可能在维持以上两种相反作用的激活方式平衡过程中发挥重要的调节作用.PrPC在小神经胶质细胞从静止状态到激活状态的转换过程中起着调节作用,并且还可以维持被激活的小神经胶质细胞的炎症反应过程和抗炎的组织修复过程的平衡.

摘要： 本发明涉及细胞生物学领域，公开了一种神经元细胞和神经胶质细胞有序共培养装置及其制备方法和应用。该装置包括基底和聚二甲基硅氧烷印章，所述聚二甲基硅氧烷印章可移除地复合在所述基底上；所述聚二甲基硅氧烷印章包含至少一个微孔单元，所述微孔单元包含依次排列的、至少一个垂直于所述基底的第一通孔和至少一个垂直于所述基底的第二通孔，所述第一通孔和第二通孔分别与基底表面形成一端开口的凹槽；所述第一通孔和第二通孔的距离为500μm～2000μm。本发明通过垂直于基底的第一通孔和第二通孔接种神经元细胞和神经胶质细胞，两种细胞在各自区域接种时均匀性易于控制，可使用的细胞量增大，群体效应明显，利于观察研究。

摘要： 本发明提供了将人神经胶质细胞重编程为人神经元的方法和组合物。使用能够通过转化生长因子β(TGF‑β)、骨形态发生蛋白(BMP)、糖原合成酶激酶3(GSK‑3)和γ‑分泌酶/Notch通路改变信号传导的化合物的组合实现重编程。使用选自thiazovivin、LDN193189、SB431542、TTNPB、CHIR99021、DAPT、VPA、SAG、2,6,9‑三元取代嘌呤的组中的三种或四种化合物的组来演示重编程。使用LDN193189/CHIR99021/DAPT组、B431542/CHIR99021/DAPT组、LDN193189/DAPT/SB431542组、LDN193189/CHIR99021/SB431542组、SB431542/CHIR99021/DAPT的三种药物组合来演示重编程。还提供使用所述化合物的功能类似物以及含有药物组合的药物制剂的重编程。

摘要： 本发明涉及一种用于形成人类神经元细胞和神经胶质细胞的功能网络的方法，其中将这些细胞引入到具有成分聚乙二醇(PEG)和肝素的合成水凝胶体系并在其中培养，其中这些细胞预先已经与这些凝胶成分之一、即PEG或肝素混合并且与之一起引入到PEG‑肝素水凝胶体系中，使得在形成该三维水凝胶期间这些细胞已经处于该水凝胶体系中。

摘要： 本发明涉及细胞生物学领域，公开了一种神经元细胞和神经胶质细胞有序共培养装置及其制备方法和应用。该装置包括基底和聚二甲基硅氧烷印章，所述聚二甲基硅氧烷印章可移除地复合在所述基底上；所述聚二甲基硅氧烷印章包含至少一个微孔单元，所述微孔单元包含依次排列的、至少一个垂直于所述基底的第一通孔和至少一个垂直于所述基底的第二通孔，所述第一通孔和第二通孔分别与基底表面形成一端开口的凹槽；所述第一通孔和第二通孔的距离为500μm～2000μm。本发明通过垂直于基底的第一通孔和第二通孔接种神经元细胞和神经胶质细胞，两种细胞在各自区域接种时均匀性易于控制，可使用的细胞量增大，群体效应明显，利于观察研究。

摘要： 本发明涉及一个在人神经系统中高度表达的基因(NECL2)，包括互补脱氧核苷酸(cDNA)序列和编码蛋白质的氨基酸序列。该基因编码的蛋白质定位于细胞的细胞质膜上，在正常神经细胞元中高度表达，在正常神经胶质细胞与神经胶质细胞瘤中的表达具有明显差异。在维持神经系统的生理功能及某些神经系统疾病的发生过程中可能具有重要的作用。

摘要： 本发明涉及一个在人神经系统中高度表达的基因(NSPL1)，包括互补脱氧核苷酸(cDNA)序列和编码蛋白质的氨基酸序列。该基因编码的蛋白质定位于细胞的内质网膜上，在正常神经细胞元中高度表达，在正常神经胶质细胞与神经胶质细胞瘤中的表达具有明显差异。在维持神经系统的生理功能及某些神经系统疾病的发生过程中可能具有重要的作用。

摘要： 本公开的特征在于CX3CR1半合子及/或纯合子缺陷细胞和使用此类细胞用于治疗代谢病症或神经系统病症的方法。所公开的方法包括用于制备和修饰CX3CR1半合子及/或纯合子缺陷细胞诸如造血干祖细胞的方法。其他公开的方法包括治疗患有或易患代谢疾病或神经系统疾病的受试者的方法，包括向所述受试者给药包含半合子及/或纯合子缺陷CX3CR1细胞的组合物。所述CX3CR1半合子及/或纯合子缺陷细胞可以经修饰以具有编码治疗性多肽或多核苷酸的核酸分子。

摘要： 本发明提供了将人神经胶质细胞重编程为人神经元的方法和组合物。使用能够通过转化生长因子β(TGF‑β)、骨形态发生蛋白(BMP)、糖原合成酶激酶3(GSK‑3)和γ‑分泌酶/Notch通路改变信号传导的化合物的组合实现重编程。使用选自thiazovivin、LDN193189、SB431542、TTNPB、CHIR99021、DAPT、VPA、SAG、2,6,9‑三元取代嘌呤的组中的三种或四种化合物的组来演示重编程。使用LDN193189/CHIR99021/DAPT组、B431542/CHIR99021/DAPT组、LDN193189/DAPT/SB431542组、LDN193189/CHIR99021/SB431542组、SB431542/CHIR99021/DAPT的三种药物组合来演示重编程。还提供使用所述化合物的功能类似物以及含有药物组合的药物制剂的重编程。

摘要： 本发明描述了用于体外诊断、预后和/或治疗监测基于神经退行性疾病，神经性疾病和炎症疾病的方法，其中所述方法包括以下步骤：a)从获自个体的生物流体中分离出小神经胶质细胞微泡(MV)；b)收集包含于所述MV中的所述微RNA(miRNA)；c)确定预定组miRNA的表达谱；d)将所述表达谱与一个或多个参照表达谱进行比较，其中所述确定的表达谱与所述一个或多个参照表达谱的比较允许诊断、预后和/或治疗监测所述疾病。

摘要： 本发明描述了用于体外诊断、预后和/或治疗监测基于神经退行性疾病，神经性疾病和炎症疾病的方法，其中所述方法包括以下步骤：a)从获自个体的生物流体中分离出小神经胶质细胞微泡(MV)；b)收集包含于所述MV中的所述微RNA(miRNA)；c)确定预定组miRNA的表达谱；d)将所述表达谱与一个或多个参照表达谱进行比较，其中所述确定的表达谱与所述一个或多个参照表达谱的比较允许诊断、预后和/或治疗监测所述疾病。