多重聚合酶链式反应

摘要： 目的:基于多重聚合酶链式反应(PCR)技术,建立并评价一种可同时快速特异鉴别熊胆粉生物来源的方法,为鉴别人工模拟混合掺假样品提供依据。方法:利用猪、牛和熊线粒体细胞色素b基因,SDS-蛋白酶K裂解法(SDS-PK)提取胆类DNA,Primer Premier 5.0软件设计可扩增不同大小DNA片段且无交叉反应的物种特异性引物,特异性扩增后,将扩增条带克隆后测序,与GenBank数据库已登记序列比对。建立并优化多重PCR,评价其特异性和灵敏度,并采用该方法鉴别27份模拟混合掺假样品。结果:建立的猪、牛和熊胆粉DNA提取方法可于2 h之内完成操作,DNA纯度分别为2.04、1.69和1.70,浓度分别为158.63、189.34和148.55 mg·L^(-1)。设计可扩增出猪、牛和熊的物种特异性引物。测序结果与GenBank数据库已登记序列同源性达99%以上。PCR体系各物种引物特异性强,无非特异扩增。应用于三重PCR体系中的引物互不干扰,检测灵敏度高,3种靶标样品任意一种DNA浓度降至1 mg·L^(-1)时均可成功检测。27份人工模拟熊胆粉不同物种及不同比例掺假样品的检测结果与预设混合情况相符,盲法随机抽样重复检测5次,结果稳定。结论:成功建立可通过一次实验同时鉴别猪、牛和熊胆粉的方法,具有简便、灵敏及高效的特点,可应用于熊胆粉及其常见动物源性掺伪的鉴别。

摘要： 目的研究2014至2018年中河北省肺炎链球菌血清型分布与动态变迁,分析疫苗覆盖率。方法应用多重聚合酶链式反应对菌株进行血清分型;计算PCV7、PCV10、PCV13、PPV23疫苗的覆盖率,使用卡方检验和Bonferroni检验,进行差异比较。结果可分型菌株中较多的血清型包括:19F(176株33.40%)、6(87株16.51%)、19A(57株10.82%)、14(30株5.69%)、23F(20株3.80%)。19F型和19A型在非侵袭性菌株中占比高于侵袭性(P2岁儿童也推荐使用PPV23。

摘要： 目的:基于多重PCR技术,建立一种快速检测蜡样芽胞杆菌nhe、cytK和entFM 3种毒素基因的方法,并评价其效能。方法:煮沸法提取蜡样芽胞杆菌DNA,以蜡样芽胞杆菌nhe、cytK和entFM特异性毒素基因作为靶基因,采用NCBI primer-BLAST 5.0软件设计特异性引物,优化反应体系。建立三重PCR检测体系,并检测其特异性、灵敏度和稳定性。结果:煮沸法提取蜡样芽胞杆菌DNA,浓度为227 mg·L^(-1),纯度为1.50~1.60。采用多重PCR体系同时检测蜡样芽胞杆菌3种毒素致病基因,于退火温度56°C时,蜡样芽胞杆菌基因引物nhe499的扩增片段为499 bp,基因引物cytK191的扩增片段为191 bp,基因引物entFM363的扩增片段为363 bp。PCR体系扩增蜡样芽胞杆菌3种毒素基因后条带清晰明亮,且无非特异性条带,与金黄色葡萄球菌、大肠埃希菌和铜绿假单胞菌均无扩增,表明蜡样芽胞杆菌基因引物nhe499、cytK191和entFM363特异性强;3种引物在同一反应体系中互不干扰。灵敏度检测,多重PCR体系最低检测限可同时达到10^(-1)mg·L^(-1);稳定性检测,多重PCR体系自制备起每6个月检测稳定性一致。结论:建立的多重PCR检测体系对于蜡样芽胞杆菌nhe499、cytK191和entFM363 3种毒素基因灵敏度高、特异性强,检测结果准确稳定,检测体系具有良好稳定性,适用于快速检出蜡样芽胞杆菌的3种不同致病毒素基因。

摘要： 目的 探讨产前可疑Beckwith-Wiedemann综合征(Beckwith-Wiedemann syndrome,BWS)胎儿的遗传学检测,以提高该综合征的产前遗传学诊断率. 方法 1例既往孕1 8周超声发现胎儿脐膨出、胎盘增厚引产孕妇,此次妊娠孕1 3周超声再次发现胎儿脐膨出、胎盘增厚.行绒毛活检取样术后,应用单核苷酸多态性微阵列(single nucleotide polymorphism array,SNP array)芯片对全基因组拷贝数变异分析,之后应用甲基化特异性多重连接探针扩增(methylation-specific multiplex ligation-dependent probe amplification,MS-MLPA)技术检测染色体llp15区域H19和KcNQ1基因的甲基化状态和拷贝数变化.同时采集胎儿父母外周血行染色体高分辨G显带核型分析和SNP array检测. 结果 胎儿绒毛SNP array提示11p15.5区域有176 kb杂合缺失;MSMLPA提示印记控制区域2甲基化缺失,KCNQ1 (L02903)基因拷贝数减少50％.胎儿父母的SNP array检测和染色体G显带核型分析均未发现异常.诊断该例胎儿为BWS. 结论 孕早期超声发现胎儿脐膨出、胎盘异常增厚等宫内异常表现时,应选择相应的遗传学检测,建议产前诊断选择MS-MLPA和SNP array,避免漏诊BWS.

摘要： 目的 了解合肥地区儿科就诊病人呼吸道感染病原体分布特征以及流行特点.方法 收集2018年9—12月安徽省立医院儿科就诊疑似呼吸道感染病人的呼吸道标本共257例,包括250份咽拭子和7份肺泡灌洗液.利用13种呼吸道病原体多重聚合酶链式反应(PCR)检测试剂盒对所有标本进行检测.结合临床诊疗资料,对多重PCR检测结果进行统计学分析.结果 257份标本总阳性率为66.1％(170/257),其中病毒阳性率为60.7％(156/257),以呼吸道合胞病毒(RSV)、鼻病毒(HRV)和腺病毒(ADV)为主,阳性率分别为31.5％(81/257)、17.5％(45/257)、5.1％(13/257);非典型病原体阳性率为8.2％,以肺炎支原体(MP)为主,阳性率为7.8％(20/257).23例标本检出2种及以上病原体,以呼吸道合胞病毒和鼻病毒同时感染较为常见.男性呼吸道感染病原体阳性率为67.81％(99/146),女性呼吸道感染病原体阳性率为63.96％(71/111),呼吸道病原体感染性别间阳性率差异无统计学意义(χ2=0.416,P=0.519).呼吸道合胞病毒感染多发生在1～2岁组儿童(χ2=16.562,P=0.001),各年龄组间阳性率依次为37.8％(34/90)、40.9％(36/88)、13.7％(7/51)、14.3％(4/28),其阳性率随着年龄的增长而降低.肺炎支原体感染多发生在6～15岁组儿童(χ2=34.346,P<0.001),各年龄组间阳性率依次为0.0％(0/90)、3.4％(3/88)、13.7％(7/51)、35.7％(10/28),其阳性率随年龄的增长而上升.结论 呼吸道合胞病毒、腺病毒、鼻病毒、肺炎支原体在儿童呼吸道感染病原体中较为常见,病原体感染在性别间不存在差异,呼吸道合胞病毒和肺炎支原体感染在年龄组间存在差异.

摘要： 目的 探讨黄曲霉素产毒真菌DNA的提取方法,并建立其多重聚合酶链式反应(PCR)检测体系.方法 优选最佳DNA提取试剂盒和样品处理方式;根据杂色曲霉1(Ver-1)、杂色曲霉B(VerB)、ITS序列分别设计多重PCR引物,优化PCR体系,评价引物的特异性和灵敏性,以黄曲霉素产毒真菌验证体系的适用性.结果 液氮研磨后,以Ezup柱式真菌基因组DNA抽提试剂盒提取效果最佳;所设计的多重PCR引物特异性良好,灵敏度达到1 ng/μL,该体系在7 d内的重复性和稳定性均良好.结论 所建立的多重PCR检测体系可用于黄曲霉素产毒真菌的测定,可快速检出该类真菌.

摘要： 目的 探讨多重聚合酶链式反应(PCR)在急诊创伤后脓毒症患者病原体检测中的应用价值.方法 选取确诊的80例急诊创伤后脓毒症患者设为脓毒血症组,并选取同期80例健康体检人群的血液标本作为对照组.两组均行血培养和多重PCR检测.比较两种方法的敏感度、特异度及检测速度.观察患者的病原体分布.结果 两种检测方法对于对照组均未检出阳性;对于脓毒血症组,血培养检测阳性62例,阳性率为77.50％,多重PCR检测阳性72例,阳性率为90.00％,多重PCR检测阳性率高于血培养(P<0.05).血培养检测时间为29.63±1.32h,多重PCR检测时间为(5.98±0.48)h,多重PCR的检测时间少于对照组(P<0.05).多重PCR检测的灵敏度为98.39％,特异度为27.78％,阳性预测值为0.824,阴性预测值为0.833.在血培养检出的62例阳性病例中检出金黄色葡萄球菌26株(41.94％)、铜绿假单胞菌14株(22.58％)、表皮葡萄球菌10株(16.13％)、鲍曼不动杆菌12株(19.35％).结论 多重PCR在急诊创伤后脓毒症患者病原体检测中具有较高的灵敏度,检测时间较血培养短,可在短时间内对病原体进行快速检测,对临床用药方案给予指导.

摘要： 目的 应用人基因表达谱芯片和荧光定量PCR技术筛选、识别职业性汞暴露人群血浆差异基因和相关信号通路.方法 于2018年9月至2019年10月,选择江苏省某水银温度计工厂291名参加职业健康检查的工人作为调查对象,对符合纳入标准的126名工人进行成组匹配后,将其中60人分为高浓度汞暴露组(高暴露组)和低浓度汞暴露组(低暴露组),每组30人.用基因表达谱芯片(芯片初步筛选阶段)对高暴露组和低暴露组(各10例)血浆总RNA样本进行检测,筛选变化倍数＞2倍的差异表达基因(DEGs),使用DAVID和Metascape在线工具对DEGs进行基因功能聚类、通路和蛋白互作网络分析;而后对关键DEGs(荧光定量PCR验证阶段)在高暴露组和低暴露组(各20例)中进行荧光定量PCR测定,验证其表达量变化.结果 高暴露组和低暴露组共有269个DEGs(上调203个,下调66个);生物信息学分析结果显示,DEGs主要涉及前脑发育、胶质细胞命运决定等细胞生物学过程和PID NF-κB、PTEN等信号通路.荧光定量PCR验证结果显示,与低暴露组相比,NFE2L1、SOX8、SOX6和RNF2基因在高暴露组表达明显下调(下调倍数分别为2.10、11.52、2.19和4.38),差异均有统计学意义(P＜0.05).结论 职业性高浓度汞暴露人群中,血浆NFE2L1、SOX8、SOX6和RNF2基因表达发生明显改变,PTEN信号通路和神经胶质细胞命运决定生物学过程可能与汞暴露致机体损伤密切相关.

摘要： 本文通过介绍实时荧光定量聚合酶链式反应、原位聚合酶链式反应、多重聚合酶链式反应三种PCR技术,以及它们在医学领域的应用及前景,证明PCR技术在未来基础医学理论研究和医学临床实践中,将起到不可估量的作用.随着PCR技术在医学领域的广泛应用,必将极大促进医学事业的发展.

摘要： 宠物浅表皮肤真菌病主要由犬小孢子菌、石膏样小孢子菌、须毛癣菌感染引起。本研究旨在建立一种快速检测这三种真菌病原的多重PCR方法。根据真菌ITS区域的序列差异设计了4条引物,优化了多重PCR反应条件,同时对其特异性、灵敏性、重复性进行分析。结果显示,建立的多重PCR方法对犬小孢子菌、石膏样小孢子菌、须毛癣菌基因组DNA均可扩增出特异性预期片段,条带大小分别为286bp、596bp、188bp;最低检测限(灵敏性)分别为12.6pg/μl、8.8pg/μl和13.6pg/μl;被检测的6份人工模拟样品扩增结果准确。应用该多重PCR方法检测27份人临床皮屑样品和43份宠物犬、猫毛发样品,结果显示其阳性检出率分别为74.07％(20/27)和83.72％(36/43)；采用常规真菌分离培养法从阳性样品中获得10株致病性真菌,分离率为17.86%(10/56)；两种检测方法的种属鉴定结果表明多重PCR法优于常规方法。本试验建立的多重PCR检测方法简便、特异、灵敏,可同时对宠物浅表真菌病原作出快速诊断与鉴别。

摘要： 宠物浅表皮肤真菌病主要由犬小孢子菌、石膏样小孢子菌、须毛癣菌感染引起。本研究旨在建立一种快速检测这三种真菌病原的多重PCR方法。根据真菌ITS区域的序列差异设计了4条引物,优化了多重PCR反应条件,同时对其特异性、灵敏性、重复性进行分析。结果显示,建立的多重PCR方法对犬小孢子菌、石膏样小孢子菌、须毛癣菌基因组DNA均可扩增出特异性预期片段,条带大小分别为286bp、596bp、188bp;最低检测限(灵敏性)分别为12.6pg/μl、8.8pg/μl和13.6pg/μl;被检测的6份人工模拟样品扩增结果准确。应用该多重PCR方法检测27份人临床皮屑样品和43份宠物犬、猫毛发样品,结果显示其阳性检出率分别为74.07％(20/27)和83.72％(36/43)；采用常规真菌分离培养法从阳性样品中获得10株致病性真菌,分离率为17.86%(10/56)；两种检测方法的种属鉴定结果表明多重PCR法优于常规方法。本试验建立的多重PCR检测方法简便、特异、灵敏,可同时对宠物浅表真菌病原作出快速诊断与鉴别。

摘要： 宠物浅表皮肤真菌病主要由犬小孢子菌、石膏样小孢子菌、须毛癣菌感染引起。本研究旨在建立一种快速检测这三种真菌病原的多重PCR方法。根据真菌ITS区域的序列差异设计了4条引物,优化了多重PCR反应条件,同时对其特异性、灵敏性、重复性进行分析。结果显示,建立的多重PCR方法对犬小孢子菌、石膏样小孢子菌、须毛癣菌基因组DNA均可扩增出特异性预期片段,条带大小分别为286bp、596bp、188bp;最低检测限(灵敏性)分别为12.6pg/μl、8.8pg/μl和13.6pg/μl;被检测的6份人工模拟样品扩增结果准确。应用该多重PCR方法检测27份人临床皮屑样品和43份宠物犬、猫毛发样品,结果显示其阳性检出率分别为74.07％(20/27)和83.72％(36/43)；采用常规真菌分离培养法从阳性样品中获得10株致病性真菌,分离率为17.86%(10/56)；两种检测方法的种属鉴定结果表明多重PCR法优于常规方法。本试验建立的多重PCR检测方法简便、特异、灵敏,可同时对宠物浅表真菌病原作出快速诊断与鉴别。

摘要： 宠物浅表皮肤真菌病主要由犬小孢子菌、石膏样小孢子菌、须毛癣菌感染引起。本研究旨在建立一种快速检测这三种真菌病原的多重PCR方法。根据真菌ITS区域的序列差异设计了4条引物,优化了多重PCR反应条件,同时对其特异性、灵敏性、重复性进行分析。结果显示,建立的多重PCR方法对犬小孢子菌、石膏样小孢子菌、须毛癣菌基因组DNA均可扩增出特异性预期片段,条带大小分别为286bp、596bp、188bp;最低检测限(灵敏性)分别为12.6pg/μl、8.8pg/μl和13.6pg/μl;被检测的6份人工模拟样品扩增结果准确。应用该多重PCR方法检测27份人临床皮屑样品和43份宠物犬、猫毛发样品,结果显示其阳性检出率分别为74.07％(20/27)和83.72％(36/43)；采用常规真菌分离培养法从阳性样品中获得10株致病性真菌,分离率为17.86%(10/56)；两种检测方法的种属鉴定结果表明多重PCR法优于常规方法。本试验建立的多重PCR检测方法简便、特异、灵敏,可同时对宠物浅表真菌病原作出快速诊断与鉴别。

摘要： 宠物浅表皮肤真菌病主要由犬小孢子菌、石膏样小孢子菌、须毛癣菌感染引起。本研究旨在建立一种快速检测这三种真菌病原的多重PCR方法。根据真菌ITS区域的序列差异设计了4条引物,优化了多重PCR反应条件,同时对其特异性、灵敏性、重复性进行分析。结果显示,建立的多重PCR方法对犬小孢子菌、石膏样小孢子菌、须毛癣菌基因组DNA均可扩增出特异性预期片段,条带大小分别为286bp、596bp、188bp;最低检测限(灵敏性)分别为12.6pg/μl、8.8pg/μl和13.6pg/μl;被检测的6份人工模拟样品扩增结果准确。应用该多重PCR方法检测27份人临床皮屑样品和43份宠物犬、猫毛发样品,结果显示其阳性检出率分别为74.07％(20/27)和83.72％(36/43)；采用常规真菌分离培养法从阳性样品中获得10株致病性真菌,分离率为17.86%(10/56)；两种检测方法的种属鉴定结果表明多重PCR法优于常规方法。本试验建立的多重PCR检测方法简便、特异、灵敏,可同时对宠物浅表真菌病原作出快速诊断与鉴别。

摘要： 宠物浅表皮肤真菌病主要由犬小孢子菌、石膏样小孢子菌、须毛癣菌感染引起。本研究旨在建立一种快速检测这三种真菌病原的多重PCR方法。根据真菌ITS区域的序列差异设计了4条引物,优化了多重PCR反应条件,同时对其特异性、灵敏性、重复性进行分析。结果显示,建立的多重PCR方法对犬小孢子菌、石膏样小孢子菌、须毛癣菌基因组DNA均可扩增出特异性预期片段,条带大小分别为286bp、596bp、188bp;最低检测限(灵敏性)分别为12.6pg/μl、8.8pg/μl和13.6pg/μl;被检测的6份人工模拟样品扩增结果准确。应用该多重PCR方法检测27份人临床皮屑样品和43份宠物犬、猫毛发样品,结果显示其阳性检出率分别为74.07％(20/27)和83.72％(36/43)；采用常规真菌分离培养法从阳性样品中获得10株致病性真菌,分离率为17.86%(10/56)；两种检测方法的种属鉴定结果表明多重PCR法优于常规方法。本试验建立的多重PCR检测方法简便、特异、灵敏,可同时对宠物浅表真菌病原作出快速诊断与鉴别。

摘要： 目的:蓝氏贾第鞭毛虫作为一种重要的人兽共患寄生虫病贾第虫病的病原,其对SPF实验动物质量造成的潜在威胁不容忽视.本研究的目的是建立蓝氏贾第鞭毛虫快速诊断方法,并对17个生产厂家516批2562只SPF实验动物检查结果进行分析. 方法:用直接镜检法、快速姬姆萨染色法和多重PCR方法,对蓝氏贾第鞭毛虫进行检测. 结果:在SPF实验动物中检出数量众多的蓝氏贾第鞭毛虫滋养体和包囊,鉴定出蓝氏贾第鞭毛虫18SrDNA、β-giardin、TPI和GDH基因.直接镜检法、快速姬姆萨染色法和多重PCR方法均能检出蓝氏贾第鞭毛虫.17个生产厂家516批2562只SPF实验动物蓝氏贾第鞭毛虫阳性检出率22.9％(586/2562). 结论:直接镜检法、快速姬姆萨染色法和多重PCR方法具有高度的敏感性和特异性,可用于蓝氏贾第鞭毛虫的快速诊断.17个生产厂家516批SPF实验动物蓝氏贾第鞭毛虫检查结果未能全部符合规定.

摘要： 目的:蓝氏贾第鞭毛虫作为一种重要的人兽共患寄生虫病贾第虫病的病原,其对SPF实验动物质量造成的潜在威胁不容忽视.本研究的目的是建立蓝氏贾第鞭毛虫快速诊断方法,并对17个生产厂家516批2562只SPF实验动物检查结果进行分析. 方法:用直接镜检法、快速姬姆萨染色法和多重PCR方法,对蓝氏贾第鞭毛虫进行检测. 结果:在SPF实验动物中检出数量众多的蓝氏贾第鞭毛虫滋养体和包囊,鉴定出蓝氏贾第鞭毛虫18SrDNA、β-giardin、TPI和GDH基因.直接镜检法、快速姬姆萨染色法和多重PCR方法均能检出蓝氏贾第鞭毛虫.17个生产厂家516批2562只SPF实验动物蓝氏贾第鞭毛虫阳性检出率22.9％(586/2562). 结论:直接镜检法、快速姬姆萨染色法和多重PCR方法具有高度的敏感性和特异性,可用于蓝氏贾第鞭毛虫的快速诊断.17个生产厂家516批SPF实验动物蓝氏贾第鞭毛虫检查结果未能全部符合规定.

摘要： 目的:蓝氏贾第鞭毛虫作为一种重要的人兽共患寄生虫病贾第虫病的病原,其对SPF实验动物质量造成的潜在威胁不容忽视.本研究的目的是建立蓝氏贾第鞭毛虫快速诊断方法,并对17个生产厂家516批2562只SPF实验动物检查结果进行分析. 方法:用直接镜检法、快速姬姆萨染色法和多重PCR方法,对蓝氏贾第鞭毛虫进行检测. 结果:在SPF实验动物中检出数量众多的蓝氏贾第鞭毛虫滋养体和包囊,鉴定出蓝氏贾第鞭毛虫18SrDNA、β-giardin、TPI和GDH基因.直接镜检法、快速姬姆萨染色法和多重PCR方法均能检出蓝氏贾第鞭毛虫.17个生产厂家516批2562只SPF实验动物蓝氏贾第鞭毛虫阳性检出率22.9％(586/2562). 结论:直接镜检法、快速姬姆萨染色法和多重PCR方法具有高度的敏感性和特异性,可用于蓝氏贾第鞭毛虫的快速诊断.17个生产厂家516批SPF实验动物蓝氏贾第鞭毛虫检查结果未能全部符合规定.

摘要： 本发明的一实施例涉及一种反复配置有图案加热器的聚合酶链式反应热块及包括其的聚合酶链式反应装置，由此，在反复配置有加热器的热块中，可防止从个别加热器中发生的放射形热分布及由此引起的相邻加热器之间不均匀的热重叠，来相当地改善聚合酶链式反应收率，且由于不需要额外的温度调节单元，因而可相当地贡献于装置的小型化及集成化，进而，可利用反复配置有加热单元的热块及板形状的聚合酶链式反应部，来同时且迅速扩增多个核酸样品，并测定连续的光学信号或电化学信号，来实时确认核酸扩增过程。

摘要： 本发明公开了一种扩增和检测多核苷酸的方法，该方法可以在相对短的时间内提供对来自临床样本的多种靶标的灵敏的、特异性的检测。

摘要： 本发明涉及一种便携式实时PCR装置及利用便携式实时PCR装置的PCR测量方法，根据本发明的实施例的便携式实时PCR装置包括：底座部，形成有设置空间；多个下部加热部，设置于所述底座部的所述设置空间中；下部光学测量部，设置于所述底座部，并布置在与所述下部加热部不同的位置，提供测量光或接收所述测量光；腔室组件，包括分别安置于所述下部加热部及所述下部光学测量部的多个腔室部，所述腔室部配备为能够从任意一个所述下部加热部移动到另一个所述下部加热部或所述下部光学测量部，其中，所述腔室部包括：腔室部主体，用于收容腔室单元，在所述腔室单元形成有在内部收容检体单元的检体单元收容空间，其中，所述腔室单元包括：腔室单元主体，形成有所述检体单元收容空间；及盖单元，从上方遮挡所述腔室单元主体的所述收容空间，其中，所述检体单元的作为宽度对比高度的比例的纵横比形成为大于0且小于1。

摘要： 本发明提供一种能够高效地进行聚合酶链式反应(PCR)的PCR装置以及PCR方法。上述PCR装置是如下的装置：向容器(30)填充比重比反应液(60)小且不与反应液(60)混和的液体(50)，控制部以容器(30)的上方部分的液体(50)成为第一温度，下方部分的液体(50)成为比第一温度低的第二温度的方式驱动控制第一加热部(151)和第二加热部(152)，以在液体(50)中成为球状的反应液(60)通过基于电场的库伦力在液体(50)的上方部分与下方部分之间反复进行上下移动的方式驱动控制电场产生部，在下侧电极(10)与上侧电极(20)之间产生电场。

摘要： 本发明涉及一种用于聚合酶链式反应的检测机构及聚合酶链式反应装置，其中检测机构包括至少一个激发模块组，每个激发模块组包括两个激发模块，激发模块组能够提供两种波长的激发光；激发光纤，与激发模块组连接，激发光纤能够将激发光传输到至少一个反应试管，每个反应试管均接收两种波长的激发光；接收光纤，能够收集并传输反应试管的荧光信号；至少一个接收模块组，与接收光纤连接，每个接收模块组包括两个接收模块，以分别接收来自同一个反应试管的两种波长的荧光信号，并将荧光信号转换为电信号输出；检测机构分时地对所述反应试管进行检测，并复用所述接收模块组获得输出结果。

摘要： 本发明的一实施例涉及一种反复配置有图案加热器的聚合酶链式反应热块及包括其的聚合酶链式反应装置，由此，在反复配置有加热器的热块中，可防止从个别加热器中发生的放射形热分布及由此引起的相邻加热器之间不均匀的热重叠，来相当地改善聚合酶链式反应收率，且由于不需要额外的温度调节单元，因而可相当地贡献于装置的小型化及集成化，进而，可利用反复配置有加热单元的热块及板形状的聚合酶链式反应部，来同时且迅速扩增多个核酸样品，并测定连续的光学信号或电化学信号，来实时确认核酸扩增过程。

摘要： 本申请实施例提供了一种数字聚合酶链式反应芯片聚合酶链式反应芯片及其制备方法和数字聚合酶链式反应装置，以解决现有聚合酶链式反应芯片加工工艺复杂、操作复杂、容易产生气泡、以及使用起来工艺成本高的技术问题。该数字聚合酶链式反应芯片包括：第一功能层，所述第一功能层的表面构造为对聚合酶链式反应溶液具有排斥性；以及多个第二功能区域，分别设置在所述第一功能层的表面，构造为对所述聚合酶链式反应溶液具有亲和性。

摘要： 本发明涉及一种多重聚合酶链式反应方法及其应用，具体地所述多重聚合酶链式反应方法包括如下步骤：1)提供一聚合酶链式反应体系，所述反应体系包含待扩增的模板、用于扩增的引物对、dNTP底物、聚合酶、用于进行聚合酶链式反应所需的试剂和PCR增强剂；2)对步骤1)的聚合酶链式反应体系进行聚合酶链式反应；和3)任选地，对步骤2)所得反应混合物进行电泳和/或测序检测，其中，所述的用于扩增的引物对包括3‑30个引物对。本发明还公开了所述方法的应用。使用本发明方法可在极低的引物对浓度下实现对极低浓度模板(尤其是复杂模板)的高灵敏度高特异性扩增。

摘要： 本发明提供了一种多重聚合酶链式反应方法。该方法包括步骤：(A)提供一聚合酶链式反应体系，所述反应体系含有待扩增的模板、用于扩增的引物对、聚合酶、氧化石墨烯和用于进行聚合酶链式反应所需的试剂；(B)进行聚合酶链式反应，从而获得含扩增产物的反应混合物，其中扩增产物包括分别对应于所述引物对的各扩增产物；和(C)对上一步骤中的反应混合物进行电泳和/或测序检测。本发明方法可在含低拷贝量复杂模板的、极易产生非特异性扩增的多重PCR反应体系中，非常高效而准确地扩增出全部特异性扩增产物。本发明方法可广泛用于各种不同的检测领域。

摘要： 本发明公开了一种基于多重聚合酶链式反应的EGFR突变检测方法及试剂盒，其中检测方法包括通过多重PCR对EGFR基因进行NGS文库构建、测序文库的纯化、测序和结果分析步骤，试剂盒内包括特异性引物对（引物混合液）、EGFR特异性扩增引物、10×Buffer、dNTP、Taq酶、多重PCR混合液、TE Buffer、纯化磁珠。本发明所述的检测方法和试剂盒操作简单，只需1次扩增及1次纯化过程，本发明基于多重PCR与二代测序技术的联合，可以对低浓度样本进行特异性识别，检测灵敏度高且检测特异性高。