毒素基因

摘要： 旨在探究甘肃省牛和羊产气荚膜梭菌的流行情况及对常用抗菌药物的耐药性。对采集自甘肃省不同地区的229份牛、羊源肛拭子进行了产气荚膜梭菌的分离鉴定,并对分离到的产气荚膜梭菌菌株进行毒素基因检测、最小抑菌浓度(MIC)测定及四环素耐药菌株的同源性分析。结果表明,在229份样品中分离到53株A型产气荚膜梭菌,分离率达23.1%,其中36株(68%)含cpb2毒素基因;分离菌株对万古霉素、阿莫西林、美罗培南、氯霉素和头孢他啶敏感,对四环素存在13株耐药菌和8株中介菌,且四环素耐药菌株间具有较高的同源性。结果表明,产气荚膜梭菌更易存在于牛的胃肠道环境;牛源产气荚膜梭菌对四环素的耐药性强于羊源产气荚膜梭菌,且四环素耐药菌株在甘肃省不同地区牛和羊之间具有一定程度的传播。

摘要： 目的:基于多重PCR技术,建立一种快速检测蜡样芽胞杆菌nhe、cytK和entFM 3种毒素基因的方法,并评价其效能。方法:煮沸法提取蜡样芽胞杆菌DNA,以蜡样芽胞杆菌nhe、cytK和entFM特异性毒素基因作为靶基因,采用NCBI primer-BLAST 5.0软件设计特异性引物,优化反应体系。建立三重PCR检测体系,并检测其特异性、灵敏度和稳定性。结果:煮沸法提取蜡样芽胞杆菌DNA,浓度为227 mg·L^(-1),纯度为1.50~1.60。采用多重PCR体系同时检测蜡样芽胞杆菌3种毒素致病基因,于退火温度56°C时,蜡样芽胞杆菌基因引物nhe499的扩增片段为499 bp,基因引物cytK191的扩增片段为191 bp,基因引物entFM363的扩增片段为363 bp。PCR体系扩增蜡样芽胞杆菌3种毒素基因后条带清晰明亮,且无非特异性条带,与金黄色葡萄球菌、大肠埃希菌和铜绿假单胞菌均无扩增,表明蜡样芽胞杆菌基因引物nhe499、cytK191和entFM363特异性强;3种引物在同一反应体系中互不干扰。灵敏度检测,多重PCR体系最低检测限可同时达到10^(-1)mg·L^(-1);稳定性检测,多重PCR体系自制备起每6个月检测稳定性一致。结论:建立的多重PCR检测体系对于蜡样芽胞杆菌nhe499、cytK191和entFM363 3种毒素基因灵敏度高、特异性强,检测结果准确稳定,检测体系具有良好稳定性,适用于快速检出蜡样芽胞杆菌的3种不同致病毒素基因。

摘要： [目的]本文基于自筛的金黄色葡萄球菌特异性靶基因ASL18_04625(sa19)以及2种重要的毒素基因(A型和U型肠毒素,sea344和seu222),建立一种同时检测金黄色葡萄球菌及其肠毒素的多重实时荧光PCR检测方法。[方法]通过优化引物浓度等因素,确定最适多重实时荧光PCR反应体系,并将此检测体系组装成试剂盒,对人工污染样品和实际样品进行检测。[结果]选用1.5×Syto9 Green作为荧光染料,优化后的反应体系为0.015 U·μL^(-1)Taq酶,0.10 mmol·L^(-1)dNTP,终浓度分别为0.05、0.10和0.20μmol·L^(-1)的3对引物。sa19的基因组灵敏度为40.7 pg·μL^(-1),sea344、seu222的基因组灵敏度均为4.07 pg·μL^(-1);sa19的菌液浓度灵敏度为1.19×10^(3)CFU·mL^(-1),sea344、seu222的菌液浓度灵敏度均为1.19×10^(4)CFU·mL^(-1)。构建的试剂盒组内和组间重复率均为100%。在经历60次反复冻融、72 h泡沫箱储藏、-20°C储藏90 d、4°C储藏45 d后,试剂盒检测结果仍没有显著变化,同时具有良好的特异性与抗干扰能力。[结论]本研究针对食源性金黄色葡萄球菌建立的多重实时荧光PCR法,具有快速、特异性强、灵敏度高的优点,并组建成适用于实际检测应用的商品化试剂盒,在食品安全检测方面具有广阔的应用前景。

摘要： 为探究羊奶粉在加工过程中金黄色葡萄球菌污染的关键环节及菌株的分子特征和耐药性,对某羊奶粉加工厂不同生产环节进行样本收集,通过采用选择培养和聚合酶链式反应扩增nuc基因对金黄色葡萄球菌进行分离鉴定,然后对分离的菌株进行毒素基因(21种)、耐药性(16种常用抗生素)及葡萄球菌A蛋白(staphylococcal protein A,SPA)、多位点序列分型(multilocus sequence typing,MLST)和脉冲场凝胶电泳(pulsed field gel electrophpresis,PFGE)分型研究.结果 表明,收集的112份样本中有6份样本被污染(5.4％,6/112),其中包括加工设备(2份)、加工人员(2份)、罐奶(1份)和车间落地粉(1份).所有的分离株至少携带1种毒素基因,其中以pvl基因的携带率最高(100.0％,6/6),其次为sea、sec、see、seh、sek和seq(50.0％,3/6),seg、sej和ser (33.3％,2/6),sed、sei、sem和seo(16.7％,1/6).所有分离株至少耐受4种抗生素,其中对氨苄西林、头孢哌酮、甲氧苄啶/磺胺甲恶唑和青霉素的耐药性最为普遍(100.0％,6/6),其次为红霉素和阿莫西林/克拉维酸(83.3％,5/6)、四环素(50.0％,3/6)和庆大霉素(16.7％,1/6).此外,所有菌株对苯唑西林、头孢西丁、万古霉素、利奈唑胺等抗生素敏感.所有分离株共有4种SPA分型和3种ST分型,其中以ST1-t127 (50.0％,3/6)为主,其次为ST5-t002、ST5-t548和ST188-t189(16.7％,1/6).对于PFGE分型,可分为3个大簇(Ⅰ、Ⅱ和Ⅲ簇)和4个基因型(A、B、C和D),其中加工设备和落地粉存在相同的PFGE分型.研究结果表明在羊奶粉加工过程中存在金黄色葡萄球菌污染现象,罐奶、加工设备、加工人员和落地粉是受污染的关键环节,且在不同的加工环节中存在一定的交叉污染.虽然污染率较低,有必要对奶厂不同加工环节的污染情况进行长期调查,确认关键污染环节,可以有效控制金黄色葡萄球菌在奶粉制品中的扩散.

摘要： 目的 分析住院腹泻患者艰难梭菌感染情况及分子流行病学特征,为艰难梭菌监测提供依据.方法 收集宁夏医科大学总医院2019年1月1日—2020年12月1日530份腹泻粪便标本,进行厌氧培养、基质辅助激光解吸电离飞行时间质谱仪(MALDI-TOF MS)鉴定,采用普通PCR方法检测毒素基因,进行多位点序列分型分析.结果 530份腹泻粪便中共检出艰难梭菌38株,产毒型艰难梭菌36株(6.8％,36/530):tcdA(-)tcdB(+)菌株5株(13.9％,5/36),tcdA(+)tcdB(+)菌株29株(80.5％,29/36),tcdA(+)tcdB(-)菌株2株(5.5％,2/36).所有菌株均未检出二元毒素基因.36例艰难梭菌感染患者,男24例,女12例,平均年龄(51.1±13.5)岁,≥60岁9例(25.0％);艰难梭菌感染阳性率以ICU、肾脏内科、血液内科较高,分别为33.3％(1/3)、18.8％(3/16)、14.3％(2/14).所有艰难梭菌经多位点序列分型,共有18种ST型,其中主要的型别ST2、ST42、ST54都各占10.5％(4/38),其次是ST3、ST8、ST35和ST102都各占7.9％(3/38).结论 该院艰难梭菌毒素基因以tcdA(+)tcdB(+)为主,ST型较为分散.

摘要： 蜡样芽孢杆菌(Bacillus cereus)是一种普遍存在的食源性病原菌,可造成腹泻和呕吐两种类型的食物中毒和其他类型的疾病。根据蜡样芽孢杆菌引起食物中毒的症状,其毒素可分为致腹泻型肠毒素和致呕吐型肠毒素,其中溶血性肠毒素BL、非溶血性肠毒素和细胞毒素K是引起腹泻型食物中毒的3种主要毒素,cereulide为致呕吐型肠毒素。当前,蜡样芽孢杆菌污染导致的食物中毒事件时有发生,并严重危害人类健康。因此,了解蜡样芽孢杆菌及其毒素在细胞水平上的作用将有助于预防芽孢杆菌感染;与此同时,快速、准确地检测蜡样芽孢杆菌对有效控制食品污染和感染后治疗至关重要。本文综述了蜡样芽孢杆菌主要毒素的基本情况及检测方法的研究进展,旨在为研究人员开展相关工作提供一定的借鉴和参考。

摘要： 为实现对羊源产气荚膜梭菌(C.perfringens)的快速鉴定和毒素型分析,本研究基于基质激光解吸电离飞行时间质谱(MALDI-TOF MS)对分离自河北省部分地区的8株绵羊源产气荚膜梭菌进行快速鉴定,并通过多重PCR方法对分离株cpa、cpb、etx、iap毒素基因进行检测。结果表明,MALDI-TOF MS能够在30 min内实现对8株产气荚膜梭菌的种水平上的鉴定,所需鉴定时间少于VITEK2 compact传统生化方法(约6 h)。所有产气荚膜梭菌分离株均为A型。本研究对于羊源产气荚膜梭菌的快速鉴定、毒素分型和毒素基因分析具有一定意义,为河北省羊产气荚膜梭菌病防治提供了一定的科学依据。

摘要： 旨在对牛源金黄色葡萄球菌(Staphylococcus aureus,S.aureus)的生物被膜、耐药性、毒素基因和agr基因型进行研究,并分析agr基因型与毒素基因之间的相关性.分别用微量滴定板法、药敏纸片法和PCR对S.au-reus的生物被膜、耐药性和毒素基因进行检测,用多重PCR对S.aureus进行agr分型.结果表明,336株牛源S.aureus均能形成生物被膜,其中,形成中等(++)和强(+++)生物被膜的S.aureus分别占52.1％ 和47.9％.药敏试验结果显示,S.aureus对青霉素耐药最为严重,耐药率达91.7％,其次是红霉素、卡那霉素、克林霉素和庆大霉素,耐药率分别为89.6％、72.9％、66.7％ 和60.4％,而所有S.aureus对呋喃妥因和利奈唑胺均表现为敏感.PCR检测结果显示,黏附素基因fnbA检出率最高,达99.7％,其次是icaD、icaA、clfA和cna,检出率分别为98.2％、89.6％、86.0％ 和56.0％,bap基因检出率最低,为14.6％.肠毒素基因sea的检出率为26.5％,其次是seb(8.3％)和sec(6.8％),毒素基因tst的检出率占8.3％.分型结果显示,agrⅠ型S.aureus是主要的流行菌株,占77.1％,agrⅡ、agrⅢ和agrⅣ型S.aureus流行率分别为14.0％、4.8％ 和2.1％.统计分析结果表明,agrⅠ型S.aureus更具有携带多种毒素基因的潜力,而agrⅣ型S.aureus无毒素基因携带潜力.综上表明,牛乳腺炎性S.aureus对常见的抗菌药物耐药严重,毒素基因分布多样,agrⅠ型是奶牛乳腺炎性S.aureus主要的基因型,且具有携带多种毒素基因的能力,其潜在威胁应引起重视.

摘要： 目的 了解航天中心医院难辨梭菌临床分离株的耐药性及毒素基因携带情况.方法 收集不明原因腹泻患者的粪便样本335例,采用TaqMan-MGB探针实时荧光定量聚合酶链反应(PCR)进行菌属鉴定及毒素基因检测.对tpi基因阳性样本进行厌氧培养、分离及药物敏感性试验.回顾性分析分离出A+B+菌株和A-B+菌株患者的临床资料.结果 335例粪便样本中,56例(16.7％)检出难辨梭菌tpi基因,其中10株(17.9％)A-B+菌株、46株(82.1％)A+B+菌株.检出菌株对阿莫西林、甲硝唑、克林霉素、万古霉素、莫西沙星、氨苄西林-舒巴坦及美罗培南的耐药率分别为7.1％、10.7％、75.0％、0、57.1％、5.4％、8.9％.有29株(51.8％)菌对克林霉素、莫西沙星双重耐药.分离出2种菌的患者病史、临床用药史、常规实验室检测指标差异均无统计学意义(P>0.05).结论 航天中心医院难辨梭菌临床分离株以多重耐药模式多见,A+B+菌株和A-B+菌株感染患者临床特征无差异.

摘要： 霍乱弧菌是引起急性脱水性腹泻的人类肠道病原菌.对霍乱弧菌毒素基因表达调控的研究发现,当霍乱弧菌在体外环境生活时,其两类毒素基因(TCP和CT)是不被表达的,只有当霍乱弧菌进入到人体肠道,这些毒素基因才会被大量的表达.通过对小肠提取物的分离纯化分析发现,肠道中的初级胆汁酸分子是诱导霍乱弧菌毒素产生的主要信号因子.发现胆汁酸分子通过增强霍乱弧菌另一个毒素基因调控蛋白TcpP形成更多的具有功能的二聚体结构,从而诱导产生大量的毒素因子,然而对于胆汁酸分子究竟是如何影响TcpP的功能这一分子机理尚不清楚.DsbA是存在于革兰氏阴性细菌周质空间中的主要的二硫键供体蛋白,通过氧化还原反应,它把自身的二硫键转到需要被折叠的底物蛋白中.发现:霍乱弧菌中TcpP蛋白的二聚体形成需要DsbA蛋白的协助.通过基因敲除的方法把dsbA基因敲除以后,毒素基因的表达不再受胆汁酸分子的诱导,而且TcpP不再能形成二聚体.体外ITC实验结果发现,不同种类的胆汁酸分子,如属于初级胆汁酸分子的胆酸钠、牛磺胆酸钠,以及属于次级胆汁酸分子的脱氧胆酸钠,均可以与霍乱弧菌DsbA蛋白很好的结合,而且具有相似的结合常数.然而初级胆汁酸分子与次级胆汁酸分子在体内对毒素基因的表达具有不同的诱导作用,而且疏水性越高的胆汁酸分子对毒素基因表达的诱导作用越弱.通过对不同种类胆汁酸分子在细菌细胞内的分布情况分析发现,疏水性越强的胆汁酸分子主要集中在细胞质中,而疏水性弱的胆汁酸分子主要存在与周质空间中.因此推测胆汁酸分子通过与霍乱弧菌DsbA的相互作用,增强DsbA的蛋白功能,促进TcpP形成更多的二聚体,从而诱导毒力基因的表达.这说明Dsb蛋白尤其是DsbA蛋白在菌株的毒素和毒力因子的形成中扮演非常关键的角色,本研究进一步揭示了胆汁酸分子与DsbA蛋白相互作用的分子机制,为今后筛选能抑制DsbA蛋白功能的小分子抑制剂奠定了试验证据.

摘要： 根据已发表的蒲螨毒素基因序列设计引物,从我国特有种类肤小蠹蒲螨的基因组DNA中克隆出了12条序列。在GenBank中进行BLASTn分析,与P. tritici毒素基因tox34核苷酸相似性为84.21﹪~88.81﹪,与tox21A为84.21﹪~88.81﹪,与P. tritici毒素基因tox34氨基酸相似性为71.79﹪~85.26﹪,与tox21A为71.43﹪~78.97﹪。12条序列之间的距离矩阵为0.002~0.157,相似性为84.3﹪~99.8﹪。

摘要： 真菌主要通过体壁侵染包括刺吸式口器、鞘翅目和直翅目在内的大多数昆虫，可与植物根共生，病虫能产生大量孢子，在害虫防治中具有重要作用。绿礓菌是重要的杀虫真菌，己用于防治蝗虫等多种重要害虫。但是，杀虫慢、成本高严重制约其制剂的广泛应用。本文对以绿礓菌为代表的杀虫真菌菌株改良过程进行了阐述，改良技术包括毒素基因改良、原生质体-PEG法、电穿孔法、基因枪转化法等。对改良后的杀虫真菌的杀虫效果进行了介绍，最后对真菌改良的不足以及应用前景进行了分析。

摘要： 目的：应用多重聚合酶链反应(PCR)检测方法了解外环境霍乱弧菌8种毒素相关基因的携带情况及基因分型情况。方法：针对霍乱弧菌CTX基因元件的霍乱肠毒素基因(ctxA)，辅助霍乱肠毒素基因(ace)，小带联结毒素基因(zot)，TCP基因元件的毒素共调菌毛亚单位基因(tcpA)及调控基因(tcpI)，以及溶血素基因(HlyA)，外膜蛋白基因(ompU)，ToxR调控蛋白基因(toxR)设计引物，应用多重PCR方法检测2008-2009年分离的90株01/0139群霍乱弧菌(外环境水体69株，水产品16株，病例5株)进行毒素相关基因检测，并根据检测结果进行毒素相关基因分型。结果：所有被检菌株均含有hlyA和toxR基因。病例菌株以产毒株为主，5株病例菌株中有3株8种毒素基因全部阳性，2株非产毒小川型菌株基因型为hlyA+toxR+ompU0+zot+tcpA+tcpI+型和hlyA+toxR+tcpA+型。外环境菌株均为非产毒株，外环境水体菌株毒素相关基因型别中稻叶型菌株34.15％(14/41)为hlyA+toxR+ompU+ace+zot+tcpI+型，小川型(66.67％，12/18)和0139群(70％，7/10)以hlyA+toxR+型为主。外环境水产品霍乱弧菌毒素相关基因分型，稻叶型菌株75.00％(3/4)为tlyA+toxR+ ompU+tcpI+型，小川型菌株可见各种基因型别分布，无优势基因型别。结论：外环境霍乱弧菌毒素相关基因型别多样，了解外环境霍乱弧菌的毒素相关基因分布状况对于理解霍乱弧菌的毒力作用机制和探索霍乱弧菌基因特征以及进行人群健康危险评估具有非常重要的意义。

摘要： 本试验根据ETEC的热敏感毒素基因(LT)、沙门氏菌外膜蛋白基因(OMPC)和产气荚膜梭菌的α毒素基因设计了产肠毒素大肠杆菌(Enterototxigenic，Escherichia Coli，ETEC)、沙门氏菌(Salmonellosis)和产气荚膜梭菌(Clostridium perfringens)等奶牛腹泻主要病原菌的三对特异性引物，同时对这三种细菌进行检测。用标准菌株进行特异性和敏感性检测结果表明，该方法特异性达到100％，敏感性很高，能检测到103～104CFU/ml的细菌。

摘要： 从四川省某猪场分离到1株细菌,经培养特性、形态观察、生化试验、PCR检测及动物回归实验等鉴定为猪胸膜肺炎放线杆菌.用PCR检测毒素基因APXⅣA在人工感染猪体内的分布,发现肺和扁桃体APXⅣA基因检出率最高,其次为肝脏、心血,气管分泌物、肠系膜淋巴结,肾脏、脾脏未检出APXⅣA基因。

摘要： 芋螺毒素是芋螺(Conus)在长期进化过程中形成的一套非常精密的神经药物学武器，用于捕食和防御，它们多数由12～46个氨基酸残基所组成，大多数含两对或三对二硫键。它们主要作用于细胞膜上各种离子通道以及神经递质和激肽的受体，阻断或增强神经兴奋信号的传递，具有很强神经毒性。本实验室近年来开展中国南海芋螺毒素的研究，近期从海南岛三亚附近海域采集到十几种芋螺样本，对数量较多种类的进行了毒素的分离纯化和结构表征的研究，对数量少的种类利用RACE技术进行了毒素基因的克隆，取得了阶段性研究结果。

摘要： 从江苏、江西、安徽等7个省疑似黄、白痢直肠棉拭及病死猪的十二指肠和肠系膜淋巴结中分离鉴定出339株病原性大肠杆菌.经O血清型鉴定,除77株未能定型、41株自凝外,测定出221个分离株的O血清型,这些分离株覆盖了64个血清型,以O、O、O、O、O和O为主,共99株,占定型菌型的44.80﹪.这些血清型与已报道的常见血清型间存在一定差异.运用黏附素单抗对以上菌株进行F4、F5、F6、F18、F41五种黏附素检测,共97个分离株表达黏附素(28.61﹪),而表达两种和3种黏附素的菌株分别有22株和8株,它们分别占表达黏附素菌株的22.68﹪和8.25﹪,其中单独表达F4、F6、F5+F41黏附素菌株分别有18、30、15株,分别占表达黏附素菌株的18.56﹪、30.93﹪和15.46﹪;同时运用多重PCR对其中145个分离株进行毒素基因(STa、STb、LT、SLT-2e)的检测,拥有STa和STb毒素基因的菌株分别占检测菌株的51.72﹪和37.24﹪.F6、F4、F5+F41和STa、STb为该地区致初生仔猪腹泻大肠杆菌常见的毒力因子.

摘要： 产肠毒素大肠杆菌(Enterototxigenic,EscherichiaColi,ETEC)是造成人和动物腹泻的主要病原之一,也是造成新生乳用犊牛腹泻的主要原因,一种ETEC可能产生一种或者多种肠毒素.根据产肠毒素大肠杆菌产生的两种主要毒素(ST和LT)的基因序列,设计两对聚合酶链式反应(PCR)引物,建立多重PCR方法.该方法仅用4.5小时即可检测出导致犊牛腹泻的产肠毒素大肠杆菌菌株,具有敏感毒高、特异性强和检测速度快等特点.本试验的目的是用所建立的多重PCR方法来确定ETEC在导致犊牛腹泻中的作用.采用该方法对乳用犊牛的203个腹泻试样进行了检测,结果,用传统的分离培养方法得到的203株典型大肠杆菌中有135株为ETEC;其中LT阳性为105个,ST阳性为126个,LT+ST阳性的为96个,阳性率为66.5﹪.而采用直接从粪便中提取PCR模板的方法进行PCR,检测到146个犊牛粪便为ETEC阳性,其中LT阳性为112个,ST阳性为137个,LT+ST阳性为103个,阳性率为71.9﹪,明显高于传统的检测方法。

摘要： 产肠毒素大肠杆菌(Enterototxigenic,EscherichiaColi,ETEC)是造成人和动物腹泻的主要病原之一,也是造成新生乳用犊牛腹泻的主要原因,一种ETEC可能产生一种或者多种肠毒素.根据产肠毒素大肠杆菌产生的两种主要毒素(ST和LT)的基因序列,设计两对聚合酶链式反应(PCR)引物,建立多重PCR方法.该方法仅用4.5小时即可检测出导致犊牛腹泻的产肠毒素大肠杆菌菌株,具有敏感毒高、特异性强和检测速度快等特点.本试验的目的是用所建立的多重PCR方法来确定ETEC在导致犊牛腹泻中的作用.采用该方法对乳用犊牛的203个腹泻试样进行了检测,结果,用传统的分离培养方法得到的203株典型大肠杆菌中有135株为ETEC;其中LT阳性为105个,ST阳性为126个,LT+ST阳性的为96个,阳性率为66.5﹪.而采用直接从粪便中提取PCR模板的方法进行PCR,检测到146个犊牛粪便为ETEC阳性,其中LT阳性为112个,ST阳性为137个,LT+ST阳性为103个,阳性率为71.9﹪,明显高于传统的检测方法。

摘要： 本发明提供鉴定具有合成腾毒素前体即二氢腾毒素活性的酶，进一步鉴定具有以二氢腾毒素为底物合成腾毒素活性的酶。本发明提供编码如下蛋白质的腾毒素合成相关基因，所述蛋白质由SEQ ID NO:16所示的氨基酸序列组成且具有二氢腾毒素的非核糖体肽合成活性；以及提供编码如下蛋白质的腾毒素合成相关基因，所述蛋白质由SEQ ID NO:18所示的氨基酸序列组成且具有将二氢腾毒素转化为腾毒素的活性。

摘要： 本发明公开了抗胶霉毒素自我保护基因GliK在协助宿主细胞抵抗胶霉毒素中的应用。抗胶霉毒素自我保护基因GliK，其核苷酸序列如SEQ ID NO.1所示。因此本发明从深海真菌FS140的cDNA文库中获得了抗胶霉毒素自我保护基因GliK序列，并成功导入到酿酒酵母S.cerevisiae BJ5464中进行了抗毒功能验证，从而为后期提高酿酒酵母抗胶霉毒素的能力，提升胶霉毒素的异源表达水平并获得新型胶霉毒素奠定分子生物学基础。

摘要： 本发明涉及微生物领域，公开了一种呕吐毒素降解酶及其基因和制备方法及应用以及降解呕吐毒素的方法。具体地，本发明提供了一种呕吐毒素降解酶，该呕吐毒素降解酶具有如下(a)和/或(b)所示的氨基酸序列：(a)SEQ ID NO：2所示的氨基酸序列；(b)SEQ ID NO：2所示的氨基酸序列中第430‑450位氨基酸残基中的一个或几个经过取代、缺失或添加后仍具有呕吐毒素降解酶活性的氨基酸序列。本发明提供的呕吐毒素降解酶可以高效且快速地降解呕吐毒素，具有良好的工业应用前景。

摘要： 本发明涉及微生物领域，公开了一种呕吐毒素降解酶及其基因和制备方法及应用以及降解呕吐毒素的方法。具体地，本发明提供了一种呕吐毒素降解酶，该呕吐毒素降解酶具有如下(a)和/或(b)所示的氨基酸序列：(a)SEQ ID NO：2所示的氨基酸序列；(b)SEQ ID NO：2所示的氨基酸序列中第155和430‑450位氨基酸残基中的一个或几个经过取代、缺失或添加后仍具有呕吐毒素降解酶活性的氨基酸序列。本发明提供的呕吐毒素降解酶可以高效且快速地降解呕吐毒素，具有良好的工业应用前景。

摘要： 本发明提供鉴定具有合成腾毒素前体即二氢腾毒素活性的酶，进一步鉴定具有以二氢腾毒素为底物合成腾毒素活性的酶。本发明提供编码如下蛋白质的腾毒素合成相关基因，所述蛋白质由SEQ ID NO:16所示的氨基酸序列组成且具有二氢腾毒素的非核糖体肽合成活性；以及提供编码如下蛋白质的腾毒素合成相关基因，所述蛋白质由SEQ ID NO:18所示的氨基酸序列组成且具有将二氢腾毒素转化为腾毒素的活性。

摘要： 本发明公开了抗胶霉毒素自我保护基因GliK在协助宿主细胞抵抗胶霉毒素中的应用。抗胶霉毒素自我保护基因GliK，其核苷酸序列如SEQ ID NO.1所示。因此本发明从深海真菌FS140的cDNA文库中获得了抗胶霉毒素自我保护基因GliK序列，并成功导入到酿酒酵母S.cerevisiae BJ5464中进行了抗毒功能验证，从而为后期提高酿酒酵母抗胶霉毒素的能力，提升胶霉毒素的异源表达水平并获得新型胶霉毒素奠定分子生物学基础。

摘要： 本发明涉及微生物领域，公开了一种呕吐毒素降解酶及其基因和制备方法及应用以及降解呕吐毒素的方法。具体地，本发明提供了一种呕吐毒素降解酶，该呕吐毒素降解酶具有如下(a)和/或(b)所示的氨基酸序列：(a)SEQ ID NO：2所示的氨基酸序列；(b)SEQ ID NO：2所示的氨基酸序列中第155和430‑450位氨基酸残基中的一个或几个经过取代、缺失或添加后仍具有呕吐毒素降解酶活性的氨基酸序列。本发明提供的呕吐毒素降解酶可以高效且快速地降解呕吐毒素，具有良好的工业应用前景。

摘要： 本发明涉及微生物领域，公开了一种呕吐毒素降解酶及其基因和制备方法及应用以及降解呕吐毒素的方法。具体地，本发明提供了一种呕吐毒素降解酶，该呕吐毒素降解酶具有如下(a)和/或(b)所示的氨基酸序列：(a)SEQ ID NO：2所示的氨基酸序列；(b)SEQ ID NO：2所示的氨基酸序列中第430‑450位氨基酸残基中的一个或几个经过取代、缺失或添加后仍具有呕吐毒素降解酶活性的氨基酸序列。本发明提供的呕吐毒素降解酶可以高效且快速地降解呕吐毒素，具有良好的工业应用前景。

摘要： 本发明通过了一种利用藻毒素产毒基因研究氯离子和硫酸根对微囊藻毒素生成影响的方法，该方法通过往培养液中加入不同浓度的氯离子和硫酸根，检测微囊藻毒素的含量和微囊藻毒素产毒基因mcyD的拷贝数，建立不同浓度的氯离子或硫酸根、微囊藻毒素含量以及藻毒素合成酶基因mcyD拷贝数之间的相关性，最终通过检测藻毒素合成酶基因mcyD拷贝数来研究藻毒素的含量。该方法特异性强、灵敏度较高，所需时间比较短、操作比较简单，所需仪器设备和试剂相对简单。

摘要： 本发明公开了一种产肠毒素性大肠杆菌耐热肠毒素基因SYBR Green I荧光定量PCR诊断试剂盒，涉及试剂盒技术领域。本发明包括40μL特异性引物、250μL荧光定量PCR反应混合液(Premix Ex Taq)、20μL ROX Reference Dye、20μL阴性对照、20μL阳性对照、500μL超纯水；根据GenBank中猪源产肠毒素性大肠杆菌(ETEC)耐热肠毒素(STⅡ)基因序列，设计1对特异性引物，进行试验，试验方法灵敏度可达1.0×101拷贝/μL，重复性好，将PCR产物测序结果与GenBank中的ST基因序列比对，相似度为98.2％～100％。本发明试剂盒具有检测速度快、检出率高的特点。