芋螺毒素

摘要： 目的 探讨4种来源于α-芋螺毒素的合成多肽对肌肉收缩抑制作用.方法 化学合成多肽,HPLC纯化,质谱鉴定.通过肌细胞收缩和骨骼肌收缩试验,检测4种多肽对肌肉收缩抑制作用.通过细胞毒性和家兔皮肤刺激性/腐蚀性试验,检测多肽安全性.结果 芋螺毒素Reg1d抑制肌细胞和骨骼肌收缩,不影响细胞存活,对家兔皮肤无刺激性.结论 Reg1d有望开发成为一种新原料,用于抗皱纹类化妆品.

摘要： 目的探讨4种来源于α-芋螺毒素的合成多肽对肌肉收缩抑制作用。方法化学合成多肽,HPLC纯化,质谱鉴定。通过肌细胞收缩和骨骼肌收缩试验,检测4种多肽对肌肉收缩抑制作用。通过细胞毒性和家兔皮肤刺激性/腐蚀性试验,检测多肽安全性。结果芋螺毒素Reg1d抑制肌细胞和骨骼肌收缩,不影响细胞存活,对家兔皮肤无刺激性。结论Reg1d有望开发成为一种新原料,用于抗皱纹类化妆品。

摘要： 目的 评价芋螺毒素Lt14a的稳定性.方法 化学合成Lt14a,HPLC纯化,质谱鉴定.通过酸、碱、氧化和光照破坏性试验以及高温、高湿稳定性试验,检测Lt14a在不同环境下的稳定性.结果 Lt14a在酸和光照破坏以及高温高湿条件下的稳定性较好;碱和氧化破坏对Lt14a的含量有一定影响.结论 化学合成的Lt14a的稳定性较好,可用于临床前研究.

摘要： 目的 建立芋螺毒素Lt14a原料药的质量控制方法.方法 采用高效液相色谱法检测芋螺毒素Lt14a的含量和有关物质.结果 研究了芋螺毒素Lt14a的多项质量指标,初步建立了质量控制方法,包括性状、溶解性、水分、pH值、比旋度、折光率、有关物质和含量测定.结论 所建立的芋螺毒素 Lt14a的质量控制方法重复性好,结果准确、可靠.

摘要： 芋螺毒素是由海洋肉食性芋螺所分泌的用于捕杀猎物的高活性生物多肽类毒素,据估计,全世界范围内约含100万种不同的芋螺毒素,按照保守的信号区可分为A、B2、C、D、O、M、T等27个超家族.不同家族的芋螺毒素能够特异性的靶向各种离子通道和受体,因而成为了具有潜在药用价值的先导化合物和研究神经药理学的分子探针.当前报道的靶向烟碱型乙酰胆碱受体的芋螺毒素来自10个超家族,分别为A、B3、C、D、J、L、S、O1、M和T.本文对这10个超家族中靶向烟碱型乙酰胆碱受体的芋螺毒素的序列、结构及功能进行综述.

摘要： 毒素lt3a是从信号芋螺毒管中分离鉴定到的一种天然多肽,天然来源的lt3a的第6位脯氨酸发生了羟基化修饰.为深入研究脯氨酸羟基化的生物学意义,以lt3a中第6位脯氨酸为研究目标,采用固相化学合成的方法分别合成了不含羟基化修饰的多肽lt3a和具有羟脯氨酸的多肽lt3a[P6O],并对其氧化折叠速率、 热稳定性和功能进行了研究,发现在GSSG/GSH溶液中,lt3a[P6O]的氧化折叠速率是lt3a的两倍,但两者的折叠终产率相当,进一步实验表明羟脯氨酸的存在不影响lt3a的热稳定性和对神经干复合动作电位的作用.说明羟脯氨酸促进了lt3a的氧化折叠速率,但对其生物学活性没有显著影响.该研究一方面为芋螺多肽翻译后修饰研究奠定了基础,另一方面对芋螺毒素的结构改造提供理论依据.

摘要： lt1c是从信号芋螺毒管中发现的一种A超家族毒素多肽,为深入研究其功能,采用pTRX表达系统将lt1c与硫氧还蛋白基因进行融合,转入大肠杆菌进行表达后,通过超声破碎、亲和层析、酶切和凝胶过滤层析等方法,最终得到目的蛋白.组织水平的青蛙坐骨神经-腓肠肌活性研究表明,重组表达的lt1c在6 μmol/L浓度下,30 min内完全抑制肌肉的收缩,且其作用可逆.进一步的功能研究发现,lt1c能够抑制热板疼痛模型小鼠的舔足反应,提示A超家族芋螺毒素lt1c可能具有一定的镇痛活性.该研究为筛选新的多肽镇痛药物奠定了基础.%Conotoxin lt1c was identified from the cDNA library of venom gland of Conus litteratus.To obtain enough lt1c and investigate the bioactivities, conotoxin lt1c was recombinant and expressed in Escherichia coli by fusion with TRX.Conotoxin lt1c was purified by affinity chromatography,enzyme di-gestion and gel filtration chromatography.The recombinant lt1c showed obvious inhibition activity on the neuromuscular transmission on the frog sciatic/cutaneus pectoris preparation at the concentration of 6 μmol/L in 30 min.lt1c appeared potent and longer-lasting analgesics in the hotplate pain model mice. Additionally,lt1c showed toxicity to mice by intraventricular injection.The successful expression of lt1c with potential analgesicactivity provided the possibility for further pharmaceutical research.

摘要： 为研究芋螺毒素ImI的杀虫活性,本研究采用化学方法合成芋螺毒素线性肽,经氧化折叠后质谱鉴定获得芋螺毒素ImI,采用MTT法和昆虫注射法研究其杀虫活性.结果表明采用化学合成法可以成功合成芋螺毒素线性肽,经氧化折叠后质谱鉴定形成2个二硫键;活性实验表明芋螺毒素ImI具有抑制昆虫细胞sf9生长的活性,半数有效量为0.13 nM;对黄粉虫具有杀虫活性,半数致死剂量为0.11 μg/mg.通过化学合成法可以有效合成芋螺毒素ImI,其具有良好的杀虫活性,可为研发新型多肽类生物杀虫剂奠定基础.

摘要： 目的 对从线纹芋螺中发现的T-超家族毒素S10a进行制备,并对其毒性和活性进行初步评价.方法 利用固相化学合成的方法进行S10a的制备,并利用RP-HPLC方法进行分离纯化,制备的样品采用MALDI-TOF-TOF的方法进行鉴定.利用斑马鱼、小鼠、细胞株对毒素的毒性进行评价,利用小鼠热板模型,分析了其镇痛活性.结果 利用固相化学合成进行毒素的制备,结果显示合成多肽的纯度高,分子量与预测结果相一致.S10a对斑马鱼、小鼠及4种细胞株表现出了不同水平的毒性.S10a在小鼠热板镇痛模型上表现出了良好的镇痛活性,与阳性对照药哌替啶相比,S10a的高剂量组(0.7mg/kg)的镇痛作用时间更长.%Objective To produce enough T-superfamily conotoxin S10a and investigate the bioactivities.Methods Conotoxin S10a was synthesized by solid-phase polypeptide synthesis according to the amino acid sequences.The synthesized S10a was purified by HPLC and identified by MALDI-TOF-TOF.The toxicity of S10a was measured using zebrafish,mice and cell lines.The hotplate pain model was used to investigate the analgesics activity of S10a.Results Conotoxin S10a was successfully synthesized with corrected molecular weight.S10a appeared potent and longer-lasting analgesics in the hotplate pain model mice when compared to pethidine.Additionally,S10a showed toxicity to zebrafish,mice in different degree.

摘要： 电压门控钠离子(Na+)通道(VGSCs)对兴奋细胞动作电位具有调节作用,许多生物毒素能与VGSCs相互作用.近年来研究发现,热带海洋肉食性软体动物芋螺中含有多种多肽类毒素(芋螺毒素或芋螺肽),其中一大类芋螺毒素能与Na+通道各种亚型特异结合,改变Na+通道的功能,对于研究Na+通道的结构和功能以及研发作用于Na+通道的相关药物或其先导化合物具有重要作用.就近年来发现的作用于Na+通道的芋螺毒素的研究进展进行综述,着重介绍了近年来发现的作用于Na+通道的芋螺毒素的结构、作用及其药物开发潜力。

摘要： 现代新药研究与开发的关键首先是寻找、确定和制备药物靶点，同时要有能够作用靶点的新化合物，以离子通道为药物靶点的芋螺毒素研究将成为开发新药的一种有效研究途径。由于芋螺毒素的高丰度、化学多样性、强专一性作用等突出特点成为创新药物发展的宝库，芋螺毒素可以选择性地作用于细胞表面的离子通道受体，是研究离子通道极好的化学探针，已被广泛地应用于研制特异性诊断试剂以及开发疗效特异的新药之中，并作为镇疼药物、抗癫痫药物已进入临床研究。

摘要： 芋螺毒素是来源于芋螺毒液的活性多肽，由于其分子质量小、结构多样、作用靶点广泛、功能专一、组织特异性强等优点，广泛地被用作细胞中各种具有重要生理功能靶点的探针，以及作为新药的先导化合物甚至直接作为新药开发。织锦芋螺是毒性最强的芋螺品种之一，其个头较大，毒管较长，且分泌的毒液量多，是获得新毒素的很好研究对象。目前为止，国外已获得织锦芋螺毒素序列约100个，本文利用各种色谱及质谱方法，如G-25凝胶层析、离子交换、RP-HPLC相结合的纯化方法分离纯化并鉴定得到了8种织锦芋螺毒素，并对它们的氨基酸系列进行了分析，以期获得具有新颖结构和特异作用靶位的毒素序列，在新药设计中将会有很大的应用价值，在治疗心血管疾病、镇痛等方面具有广阔应用前景，对研究神经生物学也具有重要意义。

摘要： 芋螺是生活在热带海洋的食肉软体动物,其毒液中含有大量具有神经药理活性的活性肽.本研究首次从我国南海的独特芋螺的毒液中分离出一种芋螺毒素Cr5a,并进行了结构鉴定.结果表明,Cr5a的氨基酸序列为:CCKFQFLNFCCNE.对Cr5a两种可能的二硫键配对方式异构体进行了合成,HPLC分析表明其二硫键配对方式为Cys1-Cys10,Cys2-Cys11.Cr5a具有T-超家族芋螺毒素所特有的Cys骨架(CC-CC),是T-超家族芋螺毒素中的新成员.

摘要： 芋螺毒素(Conotoxin,CTX)是由生活在热带海洋中的肉食性软体动物芋螺(Conus)分泌出来的,用于麻醉猎物、捕食和防御竞争对手的小肽类毒素.芋螺毒素化学结构新颖,具有特异结合动物各种离子通道的特殊功能,已成为药理学和神经科学的有力工具和新药开发的新来源.芋螺毒素亦是潜在的生物战剂,食虫芋螺毒素还是开发多肽杀虫剂的宝库,芋螺毒素是一种近乎无限的药物资源,已跃居动物神经肽研究的首位.芋螺在我国仅存在于南海,是海南特有的药用海洋生物资源.本文就海南产芋螺毒素的研究现状和开发前景进行了概述.

摘要： 芋螺毒素是芋螺(Conus)在长期进化过程中形成的一套非常精密的神经药物学武器，用于捕食和防御，它们多数由12～46个氨基酸残基所组成，大多数含两对或三对二硫键。它们主要作用于细胞膜上各种离子通道以及神经递质和激肽的受体，阻断或增强神经兴奋信号的传递，具有很强神经毒性。本实验室近年来开展中国南海芋螺毒素的研究，近期从海南岛三亚附近海域采集到十几种芋螺样本，对数量较多种类的进行了毒素的分离纯化和结构表征的研究，对数量少的种类利用RACE技术进行了毒素基因的克隆，取得了阶段性研究结果。

摘要： 生物毒素亦称天然毒素,是很有价值的药物或药物导向化合物，也是天然化学产物中的重要生物活性物质, 生物活性物质是指生物来源不可自复制的有毒化学物质,包括了各种动物、植物、微生物产生的对其他生物物种有毒害作用的化学物质。芋螺毒素、蝎毒、蛇毒都是从动物中提取的毒素。我们用对接的方法研究了芋螺毒素、蝎毒、蛇毒作用于不同的受体，比较了各自对接的特点，从而证明了芋螺毒素既作用于烟碱型乙酰胆碱受体又作用于电压门控钾离子通道，蝎毒只作用于电压门控钾离子通道或类似的受体，蛇毒则只作用于烟碱型乙酰胆碱受体或类似受体。

摘要： 生物毒素是一类具有重要意义的生物源化学物质，已知化学结构的天然毒素可达数千种。生物毒素表现出生源、化学结构、作用机制等多方面的多样性。生物毒素的研究已发展成为与多种学科交叉的新学科——毒素学，其发展对于生命化学、生源合成化学、化学生物学、化学生态学、医学、药物学、环境科学均有重要意义，对药物创新更具积极作用。近年来，我们利用我国的资源特点，开展了芋螺毒素的研究，对桶形芋螺、独特芋螺及菖蒲芋螺的毒素进行了研究，已成功分离出十余种新毒素，并发现了具有特殊结构构架和特异性离子通道活性的新类型芋螺毒素，可为新药研究提供有意义的线索。

摘要： 被称为"药物宝库"的芋螺毒素库,是一种近乎无限的药物资源,也是当今海洋药物研究和开发的热点,备受世界药学界的关注.芋螺毒素化学结构新颖,生物活性强,对电压门控或配体门控离子通道(包括少数G-蛋白相关受体)的作用靶位选择性极高,已成为药理学和神经科学的有力工具和新药开发的新来源.生活在热带海洋中的芋螺在我国仅存在于南海,是海南特有的药用海洋生物资源.本文系统地概述了芋螺的生物学特性、芋螺毒素的药理活性、芋螺毒素的分子生物学研究进展及芋螺资源现状,并对海南产芋螺资源的开发前景进行了论述.

摘要： BtⅢA是从中国南海的软体动物——桶形芋螺毒液中分离出来的一种毒素.氨基酸组成分析、质谱分析结果表明BtⅢA是分子量为1589.3的14肽,N-端序列分析测得其N-端的13个残基序列,为了鉴定其C-端序列结构,本文采用羧肽酶酶解与基质辅助激光解吸飞行时间质谱(MALDI-TOF-MS)分析结合的方法对BtⅢAC-端序列进行了分析.

摘要： 本发明属于生物化学与分子生物学和神经科学领域，涉及一种αO‑芋螺毒素肽GeXIVA新突变体、其药物组合物及用途。具体地，本发明涉及一种分离的多肽，其氨基酸序列为将母序列中的一个或多个氨基酸去掉，或者将母序列中的一个或多个氨基酸替换为相同数目的L型氨基酸或D型氨基酸，其中，所述母序列为SEQ ID NO:1、SEQ ID NO:62或SEQ ID NO:63；并且所述多肽具有阻断α9α10 nAChR的活性。本发明的多肽能够特异地阻断α9α10 nAChR，具有在制备镇痛药物、有关精神疾病与癌症治疗药物、以及神经科学工具药等方面的良好应用前景。

摘要： 本发明属于二聚体合成及应用技术领域，公开了一种α‑芋螺毒素Mr1.1的二聚体、合成方法及应用，α‑芋螺毒素Mr1.1二聚体的α‑芋螺毒素Mr1.1为多肽类化合物，其包含有两对二硫键，为I–III、II–IV连接方式，且C端酰胺化；氨基酸结构均用氨基酸的简写表示，两个半胱氨酸之间的连接表示其侧链之间形成的二硫键。本发明采取二聚化的方式合成Mr1.1二聚体，以提高对α9α10 nAChR的活性。α9α10 nAChR是与疼痛相关靶点，得到的α‑芋螺毒素Mr1.1的二聚体，能够作用于人源α9α10 nAChR；与野生型Mr1.1相比，活性提高了约46倍，有望开发出新的用于治疗疼痛的多肽类药物。

摘要： 本发明具体涉及一株能分泌抗α‑芋螺毒素单克隆抗体的杂交瘤细胞株5E4及其应用。该杂交瘤细胞株分类命名为抗α‑芋螺毒素单克隆抗体杂交瘤细胞株，已于2020年5月24日在中国普通微生物菌种保藏管理中心保藏，保藏编号为CGMCC No.22347。该杂交瘤细胞株5E4分泌的抗芋螺毒素αB‑VxXXIVA‑CTX单克隆抗体特异性强、亲和力大、效价高，可应用于芋螺毒素的检测技术领域。基于该杂交瘤细胞株5E4及其所分泌的单克隆抗体，本发明建立了一种免疫侧流层析检测卡，该检测卡可应用于芋螺毒素αB‑VxXXIVA‑CTX检测中，且具有灵敏度高、检测快速的优势。

摘要： 本发明公开了一种芋螺毒素和胶原蛋白融合蛋白及其制备方法和应用，涉及生物基因技术领域；所述融合蛋白的氨基酸序列如SEQ.ID.NO.5所示。本本发明的融合蛋白经过证实，在不影响芋螺毒素功效的前提下，胶原蛋白融合能够有效的降低芋螺毒素细胞毒性，提高原料生物安全性；同时在分子设计时添加了透皮肽，其除皱和保湿能力经过功效验证，证明了透皮肽的加入可以有效的增加融合蛋白透皮吸收能力，促进了芋螺毒素的透皮吸收。

摘要： 本发明属于生物和医药领域，涉及α‑芋螺毒素肽LvID和LvIB、其药物组合物及用途。具体地，本发明涉及一种分离的多肽，其氨基酸序列如SEQ ID NOs:4‑5和SEQ ID NOs:7‑12中任一序列所示。本发明的多肽能够特异性地阻断α7乙酰胆碱受体(nAChRs)，对α7 nAChRs具有高选择性强阻断活性，具有用于制备预防和/或治疗与α7 nAChRs相关疾病的药物的潜力。

摘要： 本发明公开了一种串联多拷贝酵母生物合成芋螺毒素的方法。本发明将进行过密码子偏爱性优化人工合成的芋螺毒素基因，通过编码蛋白酶切位点的碱基对连接，从而形成串联多拷贝基因，并将其克隆至带有sfGFP筛选信号的表达载体，转入酵母后获得表达芋螺毒素的酵母工程菌，制备芋螺毒素。本发明采用的多拷贝串联表达技术能较为有效的提高酵母表达芋螺毒素的产量，并且对芋螺毒素的生物活性无显著影响，安全性极高，所得到的表达产物可用于制备治疗神经性等疾病的潜在药物。

摘要： 本文提供了α‑芋螺毒素肽类似物，包括共价连接至聚乙二醇(PEG)的α‑芋螺毒素肽类似物和这些α‑芋螺毒素肽类似物的药物组合物。本文还提供了有助于通过抑制受试者中含有α9的烟碱乙酰胆碱受体(nAChR)(例如，nAChR的α9α10亚型)的治疗或预防的治疗或预防病况的方法。

摘要： 本发明提供一种芋螺毒素KIIIA突变体，氨基酸序列为SEQ IDNO:1：Xaa1CXaa2CXaa3Xaa4KWCXaa5DHXaa6RXaa7C*。本发明还提供了该芋螺毒素KIIIA突变体的制备方法及应用。本发明实现了靶向Nav1.7通道芋螺毒素两对二硫键类似物的合理设计，大幅度提高了芋螺毒素合成效率，降低了合成成本。

摘要： 本发明提供一种芋螺毒素KIIIA突变体，氨基酸序列为SEQIDNO:1：Xaa1CXaa2CSXaa3KWCXaa4DHXaa5RXaa6C*，“*”为C端酰胺化。本发明还提供了其制备方法和应用。本发明不仅保留了野生多肽的活性、构象与稳定性，而且相比野生多肽更容易被合成。

摘要： 本发明属于生物和医药领域，涉及α‑芋螺毒素肽LvIC及其突变体、其药物组合物及用途。具体地，本发明涉及一种分离的多肽，其氨基酸序列如SEQ ID NOs:1‑3、5和8‑30中任一序列所示。本发明的多肽能够特异性地阻断α6β4*乙酰胆碱受体(nAChRs)，对α6β4*nAChRs具有高选择性强阻断活性，具有用于制备预防和/或治疗与α6β4*nAChRs相关疾病的药物的潜力。