摘要：目的:探讨黄樟素氧化物及其甲基衍生物(2-甲氧基-胡椒基乙醇)、乙基衍生物(2-乙氧基-胡椒基乙醇)对血管内皮细胞和A549细胞生长以及细胞周期分布和P3蛋白表达的影响,为深入了解黄樟素氧化物及其衍生物的药理作用和其作用机理提供实验依据.方法:用倒置相差显微镜技术观察细胞形态学变化;MTT法测定细胞生长率;流式细胞术检测细胞周期变化;免疫细胞化学法结合激光扫描共聚焦显微镜技术检测P53蛋白表达的变化.结果:对血管内皮细胞进行实验发现:5~25mg/L黄樟素氧化物在24h促进细胞贴壁和生长;在12h,细胞周期分布未发生明显变化.50~100mg/L该药物作用12h,G<,0>~G<,1>期细胞由61.5﹪下降到47.2﹪,S期由16.6﹪下降到1.0﹪,而G<,2>-M期则由21.9﹪上升到51.8﹪;作用24h,促使细胞凋亡,细胞存活率下降(P<0.01).黄樟素氧化物的甲基和乙基衍生物10~40mg/L作用于血管内皮细胞24h,促进细胞凋亡,细胞存活率降低(P<0.01);G<,0>~G<,1>期和G<,2>~M期细胞百分率下降,S期细胞百分率显著上升.对A549细胞进行实验发现:20~80mg/L黄樟素氧化物作用24h,促使细胞凋亡,细胞存活率下降(P<0.05,P<0.01);G<,2>~M期细胞数由7.30﹪增加到12.28﹪;P53蛋白相对表达量由31.34﹪上调到51.74(P<0.01,n=3).在48h,S期细胞由30.59﹪下降到0,而G<,2>-M期则由4.98﹪上升到25.27﹪.50~300mg/L的甲基衍生物作用于A549细胞48h,细胞存活率下降(P<0.05,n=6),细胞发生凋亡;G<,0>~G<,1>期和G<,2>~M期细胞百分数上升,S期细胞百分数明显下降.90~180mg/L的乙基衍生物在48h之内,不能引起A549细胞凋亡,但细胞生长率下降;G<,0>~G<,1>期细胞数增多,S期细胞数显著减少.结论:黄樟素氧化物及其甲基、乙基衍生物在一定浓度范围内可能通过改变细胞周期的分布而有效促进血管内皮细胞、A549细胞凋亡或抑制A549细胞生长.在A549细胞中,细胞周期阻滞可能与P53蛋白表达上调有关.实验结果表明,黄樟素氧化物在低浓度下能促进血管内皮细胞贴壁、生长,抑制其凋亡.
