酶解法

摘要： [目的]考察蛋白酶酶解水蛭地龙混合药渣的工艺条件,评价其酶解产物的抗凝活性。[方法]分别采用碱性蛋白酶、酸性蛋白酶和中性蛋白酶对混合药渣进行酶解实验。采用凝血酶滴定法和纤维蛋白原平板溶圈法评价酶解产物的体外抗凝活性,以确定最佳酶种类。溶液pH、酶底比、酶解时间、酶解温度为考察因素,单因素实验优化酶解工艺。[结果]与药渣对照组和蛋白酶对照组对比发现,水蛭地龙混合药渣酶解液显示出较强抗凝活性。其中,碱性蛋白酶酶解产物的抗凝效果最好。其最佳工艺条件为酶底比0.95%、pH 11.4、酶解温度45°C,酶解时间4 h。[结论]经碱性蛋白酶酶解后,水蛭地龙药渣酶解液的抗凝活性最强。实验为废弃药渣的再利用提供实验依据和开发方向。

摘要： 目的:建立虾青素软胶囊中虾青素含量的测定方法。方法:采用YMC Carotenoid色谱柱(250 mm×4.6 mm,5μm);流动相为乙腈-叔丁基甲基醚^(-1)%磷酸溶液,进行梯度洗脱;紫外检测器检测,检测波长为474 nm;流速为1.0 mL·min^(-1);进样量为20μL。结果:虾青素为0.01~0.03 mg·mL^(-1)时线性关系良好,相关系数大于0.999,虾青素的回收率为99.2%~99.4%,RSD为1.5%。结论:该方法具有良好的专属性、精密度、线性和准确度,适用于虾青素软胶囊中虾青素的质量控制。

摘要： 采用超声辅助酶法提取柚子皮中的果胶,在超声波为90 W的条件下,研究提取时间、提取温度、pH值、料液比和酶量对柚子皮果胶提取率的影响,并选取4因素3水平的Box-Behnken试验设计,以柚子皮果胶的提取率为响应值,利用响应面法对提取工艺参数进行优化。结果表明,柚子皮果胶提取率的最佳工艺条件:料液比1:26.30,pH值4.65,加酶量1.87%,提取温度40°C和提取时间47.49 min,提取率达到24.81%。研究结果为柚子皮的综合利用及天然果胶的开发提供借鉴。

摘要： 为从鲟鱼皮中分离提取出二肽基肽酶-IV(dipeptidyl peptidase IV,DPP-IV)抑制活性肽,以鲟鱼皮胶原蛋白为主要材料,利用蛋白酶进行酶解,以DPP-IV抑制率为主要考察指标,在单因素试验的基础上,进一步利用响应面法优化了鲟鱼鱼皮中DPP-IV抑制肽的制备工艺条件,确定最佳酶解条件为:酶解温度50°C、料液比1∶100(g/mL)、pH 6.12、加酶量10170.35 U/g、酶解时间12.12 h。在此基础上,通过超滤、凝胶层析及反相高效液相色谱的方法对酶解产物进行分离纯化;采用液相色谱-串联质谱法对多肽进行鉴定,结果显示纯化后具有DPP-IV抑制活性肽氨基酸组成为:甘氨酸-脯氨酸-丝氨酸-甘氨酸-亮氨酸-天冬氨酸-甘氨酸-丙氨酸-赖氨酸(GPSGLDGAK),IC_(50)值可达(61.27±1.16)μmol/L。本研究结果可为利用鲟鱼皮生产新型的生物活性成分提供参考。

摘要： 为了探究黑水虻Hermetia illucens幼虫蛋白及酶解产物的抗氧化活性,以鲜活黑水虻幼虫冻虫为原料,采用碱提酸沉法提取黑水虻蛋白,通过碱性蛋白酶、菠萝蛋白酶、风味蛋白酶、木瓜蛋白酶对其蛋白质溶液进行酶解,分别从2,2′-联氮-双-3-乙基苯并噻唑啉-6-磺酸(ABTS)自由基、羟自由基、1,1-二苯基-2-三硝基苯肼(DPPH)自由基3个方面对黑水虻蛋白及其酶解液的抗氧化能力进行测定。结果表明:黑水虻幼虫蛋白及4种酶解后的蛋白肽具有较好的抗氧化活性,其中黑水虻幼虫蛋白对ABTS自由基、羟自由基、DPPH自由基的半抑制浓度(IC_(50))分别为2.91、0.232、0.764 mg/mL,而酶解过后的蛋白肽具有更强的抗氧化活性,对ABTS自由基、羟自由基、DPPH自由基的最低半抑制浓度(IC_(50))分别为0.295、0.082、0.354 mg/mL。本研究初步证明了酶解制备抗氧化肽的可行性,为昆虫蛋白资源的利用和无抗饲料的研制提供了新的研究思路。

摘要： 本试验以新鲜牦牛血为原料,探究了不同酶解条件对制备氯化血红素的影响,分析最佳酶解工艺参数,结果表明碱性蛋白酶酶解效果更好。最佳工艺:酶解温度45°C、酶解液pH 9、添加3g碱性蛋白酶,酶解时间2h。

摘要： 以干制扇贝柱为原料,通过热水辅助酶解法提取干制贝柱多糖,利用单因素试验和正交试验得到最佳工艺条件。在料液比为1∶40,90°C热水浸提4 h,上清液经浓缩、醇沉,用木瓜蛋白酶酶解,酶解时间3 h,温度57.8°C,pH值7.1,加酶量2.0%,酶解液离心取上清液,醇沉得到扇贝多糖纯度为48.62%±0.79%。

摘要： 牡丹的栽培历史悠久,种植面积广阔。对于牡丹的应用充分体现在各行各业,像观赏、食用、药用和化妆品行业等。但是不同的有效成分,所应用的提取方法也不尽相同。本文对牡丹花的提取工艺进行了综述。

摘要： 采用酶解法提取新疆伊吾县野山杏多肽,探究其对衰老模型小鼠的抗氧化作用。通过单因素实验,考察酶底物比、料液比、提取时间、pH值和酶解温度对野山杏多肽水解度的影响,结合正交试验,优化野山杏多肽提取工艺;以提取物为原料,D-半乳糖制备小鼠衰老模型,分为空白对照组,野山杏多肽低、中、高剂量组(50、75、100 mg/kg),衰老模型组以及Vc阳性对照组,连续灌胃饲养30 d,测定血清、肝组织和脑组织匀浆中GSH-Px、SOD活力和MDA含量。酶解法提取野山杏多肽的最佳工艺:酶底物比为4%,酶解时间120 min,pH值为8,酶解温度为65°C,料液比为1:25,多肽水解度为35.73%,多肽得率为7.22%。与模型组相比,多肽中、高剂量组均可显著提高小鼠血清、肝组织及脑组织中的T-SOD、GSH-Px活性(p<0.05),降低MDA的含量(p<0.05);其中高剂量组血清中T-SOD含量达到177.24 U/mL,MDA含量达到9.05 nmol/mL,GSH-Px达到261.59 U/mL,与空白对照组结果相近。研究结果表明,新疆伊吾县野山杏多肽对衰老模型小鼠具有良好的体内抗氧化作用。

摘要： 为了优化红甜菜多糖的提取工艺条件,以多糖提取率为指标,通过单因素试验及正交试验确定最优水平组合,并考察不同蛋白酶的除蛋白效果。试验结果表明,红甜菜多糖提取的最优工艺条件为:料液比(g/mL)为1∶40,提取温度为80°C,提取时间为1.5 h,提取次数为3次;多糖提取率最高为38.92%;最佳除蛋白方法为胰蛋白酶解法,蛋白质洗脱率为42.32%,多糖损失率为0.63%。此方法操作简单,可重复性好,准确性高,适合红甜菜多糖的提取,并为红甜菜多糖的进一步研究提供了基础。

摘要： 藤茶，植物学名显齿蛇葡萄野生藤本植物，在湖南、湖北等省已有一定规模的人工栽培。藤茶为药食两用植物，最初作为一剂草药应用于民间。因其外观和冲饮的口感特征，而有“白猴”、“甘露茶”、“茅岩霉茶”、“野藤茶”、“龙须茶”等俗称。全株药用，味甘、淡、性凉，具有清热解毒、祛风湿、强筋骨等功效。目前已对藤茶的化学成分进行了比较系统的研究，为藤茶的开发利用提供了理论基础。到目前为止已经分离出数十种化合物。目前对藤茶的化学成分研究主要集中在黄酮类化合物，黄酮类化合物为藤茶的主要成分，也是藤茶的主要活性成分，主要包括二氢杨梅素(dihydromyricctin)和杨梅素。本文通过酶解法来提取藤茶中的二氢杨梅素,并通过紫外-可见分光光度法测其含量.对酶解法的各影响因素进行单因素试验,并通过正交试验对提取工艺进行了优化.结果表明酶解法提取的最佳工艺条件为:酶解温度为50°C,酶解时间为3个小时,酶用量为6mg,pH为4.5.此条件下二氢杨梅素的提取率为33.37％.该工艺稳定可行,为藤茶中二氢杨梅素的提取开辟了新途径.

摘要： 以菠萝叶为原料,采用酶解法提取可溶性膳食纤维(SDF).通过单因素试验分别考察了料液比、酶解溶液pH、纤维素酶用量、酶解温度、酶解时间5个因素对菠萝叶SDF得率的影响,并在此基础上,利用正交试验优化菠萝叶SDF的提取工艺.结果表明,菠萝叶SDF酶解法提取的优化工艺为料液比1∶30 (g/mL)、酶解溶液pH 4.6、纤维索酶用量30 U/g、酶解温度40°C、酶解时间2.5 h,在此条件下,菠萝叶可溶性膳食纤维的得率可达8.03％.

摘要： 原生质体融合是现代细胞工程中常用的技术,经过融合,不同原生质体的遗传物质会整合到一起,从而得到所需的具有特定遗传特性的细胞.获得原生质体是进行融合的关键步骤.本试验研究了酶解法制备酵母原生质体过程中酵母细胞破壁的最优条件.结果显示,用STC重悬OD600=2的酵母菌数量在30min可取得较好去膜效果的最佳条件为反应温度为37°C,酶量为40μg/mL.

摘要： 采用超声波法、酶解法、微波法和煎煮法4种方法对聚叶沙参水溶性多糖进行提取,并采用蒽酮-硫酸法测定其含量.结果表明:提取率由高到低的顺序依次为煎煮法＞酶解法＞微波法＞超声波法,提取率分别为3.3％,2.5％,1.6％,1.0％,煎煮法的提取率最高.采用煎煮法提取聚叶沙参根、茎和叶中多糖的含量,含量分别为3.32％,3.48％,3.47％,表明多糖在根、茎、叶中提取率差别不大,多糖分布比较均匀.

摘要： 以预处理的麦草秸秆为底物,考察了氯化铁促进酶解麦草秸秆的优化工艺条件以及对体系酶动力学、酶活和酶构象的影响,并用扫描电镜对底物进行分析.结果表明,固定底物质量分数为1.25％时,最佳酶解工艺条件为:时间50h,温度50°C,酶质量浓度3g/L,Fe3+质量浓度0.3g/L,纤维素转化率为51.45％,比不合Fe3+的对照组提高了27.21％.Fe3+的加入,提高了酶解反应的最大反应速率和酶活,其最大反应速率提高了33.87％,相对酶活的提高率最高为36.14％.扫描电镜结果表明预处理后麦草秸秆变得蓬松,含Fe3+的体系酶解后的底物孔洞较多.

摘要： 以预处理的麦草秸秆为底物,考察了氯化铁促进酶解麦草秸秆的优化工艺条件以及对体系酶动力学、酶活和酶构象的影响,并用扫描电镜对底物进行分析.结果表明,固定底物质量分数为1.25％时,最佳酶解工艺条件为:时间50h,温度50°C,酶质量浓度3g/L,Fe3+质量浓度0.3g/L,纤维素转化率为51.45％,比不合Fe3+的对照组提高了27.21％.Fe3+的加入,提高了酶解反应的最大反应速率和酶活,其最大反应速率提高了33.87％,相对酶活的提高率最高为36.14％.扫描电镜结果表明预处理后麦草秸秆变得蓬松,含Fe3+的体系酶解后的底物孔洞较多.

摘要： 以预处理的麦草秸秆为底物,考察了氯化铁促进酶解麦草秸秆的优化工艺条件以及对体系酶动力学、酶活和酶构象的影响,并用扫描电镜对底物进行分析.结果表明,固定底物质量分数为1.25％时,最佳酶解工艺条件为:时间50h,温度50°C,酶质量浓度3g/L,Fe3+质量浓度0.3g/L,纤维素转化率为51.45％,比不合Fe3+的对照组提高了27.21％.Fe3+的加入,提高了酶解反应的最大反应速率和酶活,其最大反应速率提高了33.87％,相对酶活的提高率最高为36.14％.扫描电镜结果表明预处理后麦草秸秆变得蓬松,含Fe3+的体系酶解后的底物孔洞较多.

摘要： 以预处理的麦草秸秆为底物,考察了氯化铁促进酶解麦草秸秆的优化工艺条件以及对体系酶动力学、酶活和酶构象的影响,并用扫描电镜对底物进行分析.结果表明,固定底物质量分数为1.25％时,最佳酶解工艺条件为:时间50h,温度50°C,酶质量浓度3g/L,Fe3+质量浓度0.3g/L,纤维素转化率为51.45％,比不合Fe3+的对照组提高了27.21％.Fe3+的加入,提高了酶解反应的最大反应速率和酶活,其最大反应速率提高了33.87％,相对酶活的提高率最高为36.14％.扫描电镜结果表明预处理后麦草秸秆变得蓬松,含Fe3+的体系酶解后的底物孔洞较多.

摘要： 本文以玉米淀粉为原料,采用挤压-普鲁兰酶酶解联用技术制备抗性淀粉,研究了物料含水率、螺杆转速、机筒温度和喂料速度对抗性淀粉含量的影响.通过SPSS线性回归分析确定了最优工艺条件:物料含水率20％、螺杆转速300rpm、机筒温度145°C、喂料速度37.5kg/h,在此条件下抗性淀粉含量达24.72±0.87％.,挤压前后样品中直链淀粉含量、抗性淀粉含量、扫描电镜图和X射线衍射图对比结果表明,直链淀粉含量和抗性淀粉含量增加,淀粉颗粒形成大小不匀的多孔疏松结构,淀粉晶体类型由A型转变为B+V型.

摘要： 本文以玉米淀粉为原料,采用挤压-普鲁兰酶酶解联用技术制备抗性淀粉,研究了物料含水率、螺杆转速、机筒温度和喂料速度对抗性淀粉含量的影响.通过SPSS线性回归分析确定了最优工艺条件:物料含水率20％、螺杆转速300rpm、机筒温度145°C、喂料速度37.5kg/h,在此条件下抗性淀粉含量达24.72±0.87％.,挤压前后样品中直链淀粉含量、抗性淀粉含量、扫描电镜图和X射线衍射图对比结果表明,直链淀粉含量和抗性淀粉含量增加,淀粉颗粒形成大小不匀的多孔疏松结构,淀粉晶体类型由A型转变为B+V型.

摘要： 一种蛋白酶酶解制备蛋白肽的方法，涉及生物化学领域，包括以下步骤：先将底物蛋白调节pH至6.5～7.5，然后加入风味蛋白酶、维生素B1、川穹，搅拌进行酶解反应得蛋白肽；本发明的一种蛋白酶酶解制备蛋白肽的方法中，选用风味蛋白酶，并加入维生素B1和川穹，能够激活风味蛋白酶的酶活性，增强对蛋白质的酶解作用。

摘要： 一种蛋白酶酶解制备蛋白肽的方法，涉及生物化学领域，包括以下步骤：先将底物蛋白调节pH至6.5～7.5，然后加入风味蛋白酶、维生素B1、川穹，搅拌进行酶解反应得蛋白肽；本发明的一种蛋白酶酶解制备蛋白肽的方法中，选用风味蛋白酶，并加入维生素B1和川穹，能够激活风味蛋白酶的酶活性，增强对蛋白质的酶解作用。

摘要： 本发明涉及一种用酶解法制备乙醇脱氢酶的方法，其特征在于，包括以下步骤：1)混合液：将CBP液和α-淀粉酶液按体积比为5∶1-2混合均匀，得混合溶液；取啤酒酵母和上述混合液置反应罐中，搅拌均匀；2)在搅拌下调pH值至6.5-7.5，在37-42°C条件下搅拌反应23h-25h，得酶解啤酒酵母液；3)上述酶解啤酒酵母液经离心、超滤浓缩，得浓缩液；4)上述浓缩液经干燥得乙醇脱氢酶酶粉。本发明的原料获取简单，制备设备简单、过程操作简单且时间不长。

摘要： 本发明涉及一种用酶解法制备乙醇脱氢酶的工艺，其特征在于，包括以下步骤：1)缓冲溶液：将CBP液和α-淀粉酶液按体积比为5∶1-2混合均匀，得缓冲溶液；取啤酒酵母和所述缓冲溶液置反应罐中，搅拌均匀；2)在搅拌下调pH值至7-8，在42-50°C条件下搅拌反应22h-28h，得酶解啤酒酵母液；3)上述酶解啤酒酵母液经离心、超滤浓缩，得浓缩液；4)上述浓缩液经干燥得乙醛脱氢酶酶粉。本发明的原料获取简单，制备设备简单、过程操作简单且时间不长。

摘要： 本发明公开了一种碱性蛋白酶酶解法制备壳寡糖氨基酸液态肥的方法，该方法包括将虾蟹壳原料，经粉碎机粉碎获得虾蟹壳粉；向所述虾蟹壳粉中加入稀盐酸进行脱钙处理，脱钙处理完成后进行过滤处理获得沉淀物以及乙酸钙液体；向所述沉淀物中加入水，搅拌混合均匀得到反应基料；调节所述反应基料的PH为5‑7，加热至50‑60°C时加入碱性蛋白酶，保持该温度进行反应；反应完成后升温蒸煮3.5‑4.3小时后进行固液分离。本申请提供的碱性蛋白酶酶解法制备壳寡糖氨基酸液态肥的方法，采用碱性蛋白酶对虾蟹壳进行分解，避免了传统工艺的酸解分解法对蛋白质生物效价的破坏，避免了浓酸浓碱液的使用，在缩短生产周期、降低生产成本的同时，减少了污染物产生。

摘要： 本发明公开了一种基于α‑淀粉酶和普鲁兰酶的酶解法食品添加剂加工流程，所述的加工流程是：(1)淀粉原料用乙酸‑乙酸钠缓冲液配成质量浓度为15～40％的淀粉乳，并调节pH值至4.0～6.5；加入淀粉酶，用量为每克干淀粉加入淀粉酶30～600u，在30～55°C温度下反应4～30小时，中和到pH至6.0～6.5，洗涤，干燥，粉碎后得酶解淀粉；所述淀粉酶为α‑淀粉酶和普鲁兰酶；(2)将步骤(1)得到的酶解淀粉用水调成质量浓度为70～82％，置于密闭容器，在80～140°C下反应5分钟～12小时，冷却至室温，干燥，粉碎后得湿热处理淀粉；(3)将步骤(2)得到的湿热处理淀粉用氯化铁溶液配成质量百分比为5～25％的淀粉乳，氯化铁的浓度为0.1～2.5mol/L，调节pH值至5.0～9.0，在30～55°C温度下搅拌反应3～40小时；(4)中和到pH至5.8～6.8，洗涤，干燥，粉碎后得食品。

摘要： 本发明涉及一种用酶解法制备乙醛脱氢酶的工艺，其特征在于，包括以下步骤：1)缓冲溶液：将CBP液和α-淀粉酶液按体积比为5∶1-2混合均匀，得缓冲溶液；取啤酒酵母和所述缓冲溶液置反应罐中，搅拌均匀；2)在搅拌下调pH值至7-8，在42-50°C条件下搅拌反应22h-28h，得酶解啤酒酵母液；3)上述酶解啤酒酵母液经离心、超滤浓缩，得浓缩液；4)上述浓缩液经干燥得乙醛脱氢酶酶粉。本发明的原料获取简单，制备设备简单、过程操作简单且时间不长。

摘要： 本发明涉及一种用酶解法制备乙醇脱氢酶的方法，其特征在于，包括以下步骤：1)混合液：将CBP液和α-淀粉酶液按体积比为5∶1-2混合均匀，得混合溶液；取啤酒酵母和上述混合液置反应罐中，搅拌均匀；2)在搅拌下调pH值至6.5-7.5，在37-42°C条件下搅拌反应23h-25h，得酶解啤酒酵母液；3)上述酶解啤酒酵母液经离心、超滤浓缩，得浓缩液；4)上述浓缩液经干燥得乙醇脱氢酶酶粉。本发明的原料获取简单，制备设备简单、过程操作简单且时间不长。

摘要： 本发明公开了基于超声辅助酶解法提取小麦麸皮中烷基间苯二酚的方法，属于天然产物或原料加工领域。本发明用酶对小麦麸皮粉进行处理，促进ARs的释放，也促进酚酸类化合物等成分的溶出，再经后续的醇沉、浓缩纯化处理从而被除去，以减轻物料中的杂质对烷基间苯二酚的干扰。本发明使用超声辅助乙醇提取，提取液澄清、粘度低、产品杂质少，后续处理方便。

摘要： 本实用新型公开了一种碱性蛋白酶酶解法制备壳寡糖氨基酸液态肥的系统，该系统包括脱钙罐，所述脱钙罐用于实现对虾蟹壳的脱钙处理获得脱钙混合物；所述脱钙罐包括第一搅拌机构、第一进料口、第二进料口以及第一排料口；所述第一进料口连接有粉碎机构，所述粉碎机构用于实现虾蟹壳的粉碎并将粉碎获得的虾蟹壳粉加入所述脱钙罐内，所述第二进料口用于稀盐酸的加入；固液分离机构通过第一提升泵与所述第一排料口相连。本申请提供的系统，结构简单合理，安装使用方便，采用碱性蛋白酶对虾蟹壳进行分解，避免了传统工艺的酸解分解法对蛋白质生物效价的破坏，避免了浓酸浓碱液的使用，在缩短生产周期、降低生产成本的同时，减少了污染物产生。