海马神经元

摘要： 背景:近年来原代神经元细胞模型在颅脑疾病中扮演着重要的角色,此类细胞模型特性更加贴近于疾病细胞,可用于模拟研究各类神经系统疾病。目的:建立一种便捷实用的可同时提取皮质及海马原代神经元的培养方法。方法:取新生24 h内的SD大鼠,麻醉后断脊法处死,采用体积分数为75%乙醇消毒,用镊子分离出颅骨及脑膜,解剖出完整大脑,剥离脑血管膜,游离出大脑皮质及海马组织,采用木瓜蛋白酶及适量DNA酶顺序消化方案,吹打、离心、过滤,然后接种于左旋多聚赖氨酸包被的6孔板和爬片内,以含体积分数10%胎牛血清的DMEM-F12培养基为种植液,6 h后换用含有B27的Neurobasal无血清专用培养基,持续培养7 d后,显微镜下观察细胞形态及生长状态。分别采用β-Tubulin免疫荧光法、Neun抗体免疫组化法鉴定皮质神经元与海马神经元,以及采用MAP2免疫荧光法鉴定其纯度。结果与结论:①接种24 h后细胞体积变清晰,呈不规则圆形、周围环绕光晕,少数细胞已有细小突起,均已贴壁生长;持续培养3 d后,胞体逐步增大,部分呈聚团性生长,突触延长,细胞间出现交联;持续培养7 d后,胞体成熟饱满,细胞质显著增多,光晕增强,形成更为密集的神经元网络;②经Neun抗体免疫组化法、β-Tubulin免疫荧光法鉴定为神经元,神经元标志物MAP2免疫荧光法鉴定皮质神经元和海马神经元纯度分别为(94.00±0.34)%和(91.00±0.26)%,可用于后期实验;③结果表明,采用同一批24 h内新生SD大鼠分离大脑皮质和海马组织,经木瓜蛋白酶与DNA酶顺序消化后,可提取到优质的海马神经元及皮质神经元。该方案得到的神经元纯度高,操作简化,可作为研究各类神经系统疾病细胞模型的基础。

摘要： 旨在研究外源性神经肽可卡因-苯丙胺调节转录因子(cocaine-and amphetamine-regulated transcript,CART)抵抗海马神经元氧化应激的效果及机制。本研究取初生24 h内大鼠海马进行神经元的原代培养,经纯度检测后,用200μmol·mL^(-1)过氧化氢诱导以构建氧化应激模型。在此基础上,分析CART对神经元活率、ATP含量、线粒体膜电位(mitochondrial membrane potential,MMP)和凋亡通路相关基因以及trkB基因表达的影响,并对trkB基因与凋亡相关蛋白和基因的表达进行相关性分析。结果显示,与对照组相比,H_(2)O_(2)组中的神经元活率及ATP含量极显著降低(P<0.01),MMP值显著降低(P<0.05);与H_(2)O_(2)组相比,添加不同浓度的CART使海马神经元活率、ATP含量和MMP值显著增加(P<0.05)。与对照组相比,H_(2)O_(2)组中bax、caspase-3的mRNA水平极显著增加(P<0.01),bcl-2(P<0.01)、trkB(P<0.05)的mRNA水平分别极显著和显著降低;与H_(2)O_(2)组相比,CART+H_(2)O_(2)组中bcl-2的mRNA水平极显著升高(P<0.01),而trkB的mRNA水平显著升高(P<0.05),同时bax的mRNA水平显著降低(P<0.05),而caspase-3的mRNA水平则极显著降低(P<0.01)。Western blot分析结果显示,与对照组相比,H_(2)O_(2)组中bax、caspase-3的蛋白质水平显著升高(p<0.05),bcl-2、trkB的蛋白质水平显著降低(P<0.05);与H_(2)O_(2)组相比,CART+H_(2)O_(2)组中bcl-2、trkB的蛋白质水平显著升高(P<0.05),而bax、caspase-3的蛋白质水平显著降低(P<0.05)。相关性分析结果显示,trkB基因与bax、caspase-3基因的表达呈显著负相关,而与bcl-2基因的表达呈显著正相关。结果提示,CART在增加氧化应激海马神经元中trkB基因表达水平的同时,可通过削弱凋亡信号通路抵抗海马神经元氧化应激。

摘要： 目的探讨沉默circ_HECTD1表达对无镁诱导的神经元细胞circ_HECTD1表达、细胞活力、凋亡率及炎性因子表达的影响及机制。方法从新生24 h的SD大鼠分离海马神经元进行原代培养,取培养10 d的海马神经元,将细胞分为对照组(无镁细胞外液处理3 h后恢复为正常细胞培养液培养)、无镁组(无镁细胞外液处理细胞3 h)、无镁+si-NC组(无镁细胞外液处理前30 min给予si-NC处理)和无镁+si-circ_HECTD1组(无镁细胞外液处理前30 min给予si-circ_HECTD1处理)。实时荧光定量逆转录聚合酶链反应(qRT-PCR)检测si-circ_HECTD1、白细胞介素-6(IL-6)和白细胞介素-1β(IL-1β)基因表达;四唑盐(MTT)及DNA断裂的原位末端标记法(TUNEL)分别检测细胞活力和凋亡率;蛋白免疫印迹法(Western Blot)检测B细胞淋巴瘤/白血病-2(Bcl-2)、Bcl-2相关X蛋白(Bax)、cleaved caspase 3和核转录因子-κB(NF-κB)/p65蛋白表达。结果与对照组比较,无镁组和无镁+si-NC组circ_HECTD1、Bax、cleaved caspase 3、IL-6、IL-1β和NF-κB/p65表达均明显升高,Bcl-2表达降低,细胞活力降低,细胞凋亡率升高,差异均有统计学意义(P<0.05),与无镁+si-NC组比较,无镁+si-circ_HECTD1组circ_HECTD1、Bax、cleaved caspase 3、IL-6、IL-1β和NF-κB/p65表达均明显降低,Bcl-2表达升高,细胞活力升高,细胞凋亡率降低,差异均有统计学意义(P<0.05)。结论抑制circ_HECTD1表达可降低癫痫海马神经元细胞凋亡及炎症反应,机制可能与抑制NF-κB信号通路有关。

摘要： 目的:观察星状神经节阻滞(SGB)对体外循环(CPB)下大鼠海马神经元凋亡的影响。方法:将40只SD大鼠随机分为4组,即假手术组(S组)、SGB组、CPB组、SGB+CPB组,于CPB后2 h处死大鼠,取大脑组织和海马组织。苏木精—伊红(HE)染色检查海马神经元损伤情况;TUNEL法检测海马组织细胞凋亡;免疫组化法检测Bax蛋白表达;western blotting检测细胞色素c(Cyt-c)和Caspase-3蛋白表达。结果:SGB组可缓解由CPB引起大鼠海马神经元损伤。与S组比较,CPB组和SGB+CPB组海马神经元凋亡指数及Cyt-c、Bax和Caspase-3蛋白表达量升高(均P<0.05);与CPB组比较,SGB+CPB组海马神经元凋亡指数及Cyt-c、Bax和Caspase-3蛋白表达量降低(均P<0.05)。结论:SGB可减轻由CPB引起的大鼠海马神经元凋亡,其机制可能与调节线粒体凋亡途径有关。

摘要： 目的建立一种稳定、高效的无血清胎鼠海马神经元原代培养方法,以此来获得纯度更高、活力更好的海马神经元。方法取孕(18±1)d SD大鼠胎鼠海马组织,经消化吹打制成细胞悬液,种植于Neurobasal或DMEM/F12培养基后分为:无血清培养组、胎牛血清培养组、胎牛血清+5-氟-2′脱氧尿苷培养组。3组细胞培养12 h后均全量换液为Neurobasal培养基,FUDR培养组神经元培养至d 3时加入FUDR抑制胶质细胞生长。观察3组海马神经元在不同培养时间点下的生长状态;检测神经元活力、细胞凋亡率以及鉴定海马神经元纯度。结果与胎牛血清培养组相比,无血清培养组培养出来的神经元活力更高,细胞凋亡率低,神经元纯度更高;然而加入FUDR使神经元活力降低,细胞凋亡率增加。结论无血清的培养方法培养出来的神经元活性好,纯度高,且不需要加入胶质细胞抑制剂,是一种可行性较强、较为优化的海马神经元原代培养方法。

摘要： 目的探讨七氟烷后处理对原代海马神经元氧糖剥夺/复氧(OGD/R)损伤、氧化应激及自噬的影响。方法取(18±0.5)d孕鼠子宫内胎鼠海马组织,收集海马神经元进行培养,7d后培养的海马神经元随机分为3组:正常对照组(CON组)、氧糖剥夺/复氧组(OGD/R组)、七氟烷后处理组(OGD/R+SEVO组)。CON组正常培养;OGD/R组:氧糖剥夺1.5 h,复氧复糖24 h,建立OGD/R损伤模型;OGD/R+SEVO组经氧糖剥夺后即刻予2.4%七氟烷后处理1 h,复氧复糖23 h。处理结束后,比色法检测各组乳酸脱氢酶(LDH)的活性,原位末端标记法(TUNEL)检测各组神经元凋亡变化,免疫荧光法检测各组神经元线粒体活性氧和微管相关蛋白1轻链3B(LC3B)的表达,Western blot检测丝氨酸/苏氨酸激酶(PINK1)、E3泛素连接酶(Parkin)的表达。结果与CON组比较,OGD/R组LDH释放增加(P<0.01),神经元凋亡增加,线粒体活性氧和自噬标志性蛋白LC3B表达增加(P<0.01),PINK1蛋白和Parkin蛋白表达上调(P<0.001,P<0.05);与OGD/R组比较,OGD/R+SEVO组LDH释放减少(P<0.05),神经元凋亡减少,线粒体活性氧和自噬标志性蛋白LC3B表达降低(P<0.05),PINK1蛋白和Parkin蛋白表达下调(P<0.01,P<0.05)。结论七氟烷后处理可以通过减少OGD/R诱导的细胞过度自噬、减轻氧化应激、减少凋亡等途径来保护原代海马神经元,且其降低自噬的机制可能与PINK1/Parkin通路有关。

摘要： 目的探究大豆异黄酮(soy isoflavones,SI)对β-淀粉样蛋白1-42(Aβ_(1-42))诱导海马神经炎症和神经元凋亡的影响及机制。方法将体外培养原代海马神经元分为对照组(Control)、Aβ_(1-42)处理组(Model)、SI低剂量组(SI-L,10 mg·L^(-1))、SI中剂量组(SI-M,20 mg·L^(-1))和SI高剂量组(SI-H,40 mg·L^(-1)),其中Model组给予30μmol·L^(-1) Aβ_(1-42)处理48 h;SI-L、SI-M和SI-H组给予SI预处理2 h后,Aβ_(1-42)处理48 h;Control组常规培养48 h。MTT法检测海马神经元存活率;TUNEL染色检测海马神经元凋亡率;Western blot检测COX-2、TNF-ɑ、NF-κB p65、p-NF-κB p65、Bcl-2和cleaved-caspase-3蛋白表达水平。结果与Control组相比,Model组海马神经元存活率明显降低(P<0.01),凋亡率明显增加(P<0.01),COX-2、TNF-ɑ、p-NF-κB p65、caspase-3蛋白表达明显升高(P<0.05或P<0.01),Bcl-2蛋白表达明显降低(P<0.01)。与Model组相比,SI各剂量组海马神经元存活率增加,凋亡率下降(P<0.05或P<0.01),COX-2、TNF-ɑ、p-NF-κB p65、caspase-3蛋白表达降低,Bcl-2蛋白表达升高(P<0.05或P<0.01)。结论SI能够通过抑制NF-κB p65信号通路活化,从而降低Aβ_(1-42)诱导的海马神经炎症和神经元凋亡。

摘要： 目的观察阻塞性睡眠呼吸暂停综合征(OSAS)大鼠海马细胞线粒体自噬相关蛋白的表达。方法将24只成年雄性SD大鼠随机分为对照组和实验组。实验组进行OSAS模型复制,复制成功后继续饲养,按饲养时长分为2周组、4周组和6周组;对照组无特殊处理。每组6只。Western blotting检测大鼠海马细胞线粒体自噬相关蛋白LC3(LC3Ⅱ/LC3Ⅰ)、p62、PINK1及Parkin蛋白相对表达量;用透射电子显微镜观察其线粒体的变化。结果实验组大鼠模型复制前后最低血氧饱和度和平均血氧饱和度的比较,差异有统计学意义(P<0.05),即OSAS模型复制成功。与对照组比较,2周组、4周组和6周组大鼠海马神经细胞LC3、LC3Ⅱ/LC3Ⅰ、PINK1及Parkin蛋白相对表达量均高于对照组,p62蛋白相对表达量低于对照组(P<0.05);进一步两两比较,4周组LC3、LC3Ⅱ/LC3ⅠPINK1及Parkin蛋白相对表达量均高于2周组,p62蛋白相对表达量低于2周组(P<0.05);6周组LC3、LC3Ⅱ/LC3Ⅰ、PINK1及Parkin蛋白相对表达量均高于4周组,p62蛋白相对表达量低于4周组(P<0.05)。透射电镜观察,与对照组比较,2周组、4周组和6周组大鼠海马区可见被双层或多层磷脂双分子层包裹的线粒体自噬体。结论OSAS可致大鼠海马神经细胞发生线粒体自噬,其自噬程度随饲养时间延长而加重。

摘要： 目的:探讨左归丸含药血清对大鼠海马神经元和胶质细胞氧糖剥夺损伤的保护作用及机制。方法:原代培养大鼠海马神经元和胶质细胞混合细胞,分为对照组、模型组、含药血清组和抑制剂组。对照组细胞不做特别处理。模型组细胞给予氧糖剥夺。含药血清组细胞除给予氧糖剥夺+左归丸含药血清。抑制剂组细胞给予氧糖剥夺+左归丸含药血清+雌激素受体(ER)非特异性拮抗剂ICI182780。采用CCK-8法检测各组细胞存活率。采用酶联免疫吸附(ELISA)法检测各组细胞氧化应激和炎症因子谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)、丙二醛(MDA)、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、白细胞介素-1β(IL-1β)表达水平。采用Western blot检测TNF-α、IL-1β、B细胞淋巴瘤-2(Bcl-2)、Bcl-2相关x蛋白(Bax)、半胱氨酸蛋白酶-3(Caspase-3)及磷脂酰肌醇激酶(PI3K)/蛋白激酶B(AKT)通路相关蛋白表达水平。结果:与对照组比较,模型组细胞存活率、GSH-Px水平下降,MDA、TNF-α、IL-1β水平升高,Bcl-2、磷酸化磷脂酰肌醇激酶(p-PI3K)、磷酸化蛋白激酶B(p-AKT)蛋白表达下降,Bax、Caspase-3蛋白表达增加(均P<0.05)。与模型组比较,含药血清组细胞存活率、GSH-Px水平增加,MDA、TNF-α、IL-1β水平下降,Bcl-2、p-PI3K、p-AKT蛋白表达显著上调,Bax、Caspase-3蛋白表达显著下调(均P<0.05)。结论:左归丸含药血清对大鼠海马神经元和胶质细胞氧糖剥夺损伤具有保护作用,其机制与调控氧化应激、炎性反应及PI3K/AKT通路有关。

摘要： 目的 探讨线粒体通透性转换孔(MPTP)在七氟烷暴露6 h后诱导SD大鼠海马神经元损伤中的作用及其机制。方法 将原代培养的SD大鼠胎鼠海马神经元细胞随机分为对照组(Con组)、环孢素A组(CsA组,0.1、0.5、1μmol/L)、3%七氟烷暴露6 h组(Sevo组)、环孢素A预处理+3%七氟烷6 h组(Sevo+CsA组,0.1、0.5、1μmol/L)。采用CCK-8试剂盒检测细胞活性,TUNEL染色检测神经元凋亡,JC-1试剂盒检测线粒体膜电位,Calcein AM染色检测MPTP开放程度,Western blot测定脑源性神经营养因子(BDNF)、突触后致密蛋白(PSD-95)、突触素(Snaptophysin)、突触蛋白1(Snapsin-1)、亲环素D(CypD)等蛋白的表达。结果 与Con组相比,Sevo组细胞活力降低(P<0.05),神经细胞凋亡率升高(P<0.01),突触蛋白表达降低(P<0.05),线粒体膜电位下降(P<0.01),MPTP开放程度增加(P<0.01),CypD蛋白表达增加(P<0.01);与Sevo组相比,0.1μmol/L CsA预处理可以降低细胞凋亡率(P<0.01),增加突触蛋白表达(P<0.05),阻止线粒体膜电位下降(P<0.05),减少MPTP开放(P<0.01),降低CypD蛋白表达(P<0.01)。结论 七氟烷暴露可导致SD大鼠海马神经元损伤,其机制与促进CypD介导的MPTP开放有关。MPTP开放的特异性抑制剂CsA可以减少七氟烷暴露导致的海马神经元的凋亡和突触损伤,维持线粒体膜电位,抑制MPTP开放和下调CypD蛋白表达。

摘要： 目的：探讨Genistein对β淀粉样蛋白(β-amyloid peptide,Aβ25-35)引起大鼠海马神经元损伤的保护作用及可能机制. 方法：选取一定浓度的Genistein预处理大鼠海马神经元后,加入Aβ25-35蛋白处理,MTT比色法测定细胞活性,ELISA法检测细胞中Caspase3、ROS以及硫代巴比妥酸比色法测定脂质过氧化产物MDA的水平,逆转录聚合酶链法(RT-PCR)和蛋白免疫印迹法(Western-blot)分别从mRNA水平和蛋白质水平测定乙酰胆碱受体(nAChR)亚单位α4、α7的表达. 结果：Genistein的浓度为0.3μg/ml时明显地拮抗Aβ25-35引起细胞活性的降低,抑制细胞中Caspase3的活性升高及脂质过氧化的损伤作用,并能对抗Aβ25-35引起的nAChRα7亚单位mRNA和蛋白质水平降低,但对α4亚单位mRNA和蛋白质水平无明显影响. 结论：Genistein具有拮抗Aβ25-35所致的海马神经元氧化损伤的作用,其作用机制可能与上调nAChRα7亚单位蛋白表达水平和抑制脂质过氧化有关.

摘要： 目的：观察加味益气聪明汤对血管性痴呆(VD)大鼠海马神经元突触结构的影响. 方法：将60只实验大鼠随机分为假手术组、模型组、尼莫地平组(简称“对照1组”)、复方苁蓉益智胶囊组(简称“对照2组”)、加味益气聪明汤组(简称“实验组”).采用永久性结扎双侧颈总动脉(2-VO)法制备VD模型;尼莫地平组予以6.25mg/kg/d,复方苁蓉益智较囊组予以0.375g/kg/d,加味益气聪明汤组予以14.58g/kg/d,均按所需剂量配制成2ml/d的浓度进行给药,模型组、假手术组予以2ml/d蒸溜水灌胃,以1次/天给药,持续30天;在电镜下观察各组海马区神经元突触超微结构的变化. 结果：假手术组大鼠海马区突触密集度高,结构清晰,突触的各组成成分可被清楚辨认,在突触后致密区可见较深的染色,密度高.模型组突触前膜内的线粒体嵴变得模糊、肿胀明显,突触结构模糊欠清,突触数目减少甚多,在突触后致密区可见较浅的染色,密度不高.与假手术组相比,模型组大鼠海马区突触数目减少明显,突触间隙增宽,突触后致密区染色变浅;与模型组相比,对照1组、对照2组和实验组大鼠海马区突触显著增多,突触间隙宽度变小,突触后致密区染色变深、突触活性区长度变长;假手术组与对照1组、对照2组、实验组之间两两比较,上述突触结构参数之间的变化较小. 结论：加味益气聪明汤能改善VD大鼠海马神经元突触的超微结构,从而改善其学习记忆功能,作用与尼莫地平、复方苁蓉益智胶囊相当.

摘要： 了解慢性应激抑郁模型大鼠海马神经元形态的变化,探讨重复经颅磁刺激(repetitive transcranial magnetic stimulation,rTMS)对海马神经元形态及脑源性神经营养因子(brain derived neurotrophic factor,BDNF)表达的影响.结果表明，慢性应激抑郁模型大鼠存在海马神经元损伤，rTMS干预可以通过上调海马BDNF的表达以促进海马神经元增殖，从而改善抑郁大鼠的抑郁症状。

摘要： 了解慢性应激抑郁模型大鼠体内HPA轴水平的变化,探讨重复经颅磁刺激(repetitive transcranial magnetic stimulation,rTMS)通过调控HPA轴水平对海马神经元凋亡的影响.结果表明，慢性应激导致抑郁模型大鼠体内HPA轴失衡，导致糖皮质激素水平亢进，海马受到高浓度糖皮质激素的攻击而损伤，进而导致海马神经元凋亡的发生，而rTMS干预可以通过调节大鼠体内HPA轴水平使其恢复至正常水平，阻止Bax的表达以减少海马神经元的凋亡，从而达到改善大鼠抑郁症状的目的。

摘要： 建立慢性间歇低氧(chronic intermittent hypoxia,CIH)小鼠模型,观察在CIH不同时间点,小鼠海马神经元兴奋性突触传递等电生理特性,以及谷氨酸受体N-甲基-D-天冬氨酸(N-methyl-D-aspartic,NMDA)受体亚基2B(NR2B)、脑源性神经营养因子(brain derived neurotrophic factor,BDNF)表达的改变,探讨海马神经元兴奋性突触传递异常在CIH诱导神经认知功能损伤中的作用.

摘要： 目的：探讨重复经颅磁刺激(repetitive transcranial magnetic stimulation,rTMS)对慢性应激抑郁模型大鼠抑郁样行为的改善作用及对海马神经元凋亡的影响. 方法：40只雄性SPF级SD大鼠经过筛选后随机分为2组,分别为对照组(n=8)和造模组(n=30),造模组应用孤养联合慢性不可预见性温和应激(chronic unpredictable mild stress,CUMS)方法建立大鼠抑郁模型,剔除造模不成功的大鼠,将造模组分为三组：模型组(n=8,不给予任何处理)、rTMS组(n=8,给予10Hz的rTMS干预)和伪刺激组(n=8,模拟rTMS环境而没有rTMS刺激发出).各组大鼠分别于造模前、造模后和干预后采用体质量测量、蔗糖水消耗实验和旷场试验检测大鼠行为学的改变,采用尼氏染色法检测大鼠海马神经元的大小、形态和数目的变化,采用免疫组织化学方法检测大鼠海马神经元凋亡蛋白Bax的表达变化. 结果：(1)行为学结果显示：应激可以使大鼠行为学评分显著降低(均P＜0.05),rTMS干预可以显著改善其行为学评分(均P＜0.05);与模型组相比,rTMS组大鼠体质量减分率(0.32±0.05)、蔗糖水消耗实验评分(7.03±1.02)、旷场实验的水平运动评分(8212.41±1416.15)以及垂直运动评分(8.75±1.58)均显著增高,差异具有统计学意义(均P＜0.05).(2)尼氏染色结果显示：应激21d导致大鼠海马CA3区神经元损伤,细胞形态差,尼氏小体数目减少;rTMS干预可以阻止海马神经元受损,使细胞形态饱满,尼氏小体数目增多.(3)免疫组织化学结果显示：应激导致大鼠海马CA3区Bax蛋白表达显著增高(P＜0.05),rTMS干预可以显著降低Bax蛋白表达(P＜0.05). 结论：rTMS干预可以改善慢性应激抑郁模型大鼠的抑郁行为及海马神经元细胞的凋亡情况,可能与海马神经元凋亡蛋白Bax的表达下调有关.

摘要： 目的：探讨洗心汤含药脑脊液对Aβ1-42诱导的大鼠海马神经元凋亡的保护作用. 方法：Wistar新生鼠提取海马神经元细胞并培养,分为正常对照组,Aβ模型组,低浓度治疗组、中浓度治疗组、高浓度治疗组.MTT法检测细胞存活率;透射电镜观察细胞凋亡形态;Annexin V/PI双染流式细胞术检测细胞凋亡率;Realtime-PCR和Western-Blot、免疫荧光技术检测细胞内Caspase-9、Bcl-2、Bax的蛋白基因表达. 结果：洗心汤含药脑脊液能提高细胞存活率,改善细胞凋亡形态,减少凋亡细胞数量.与空白组的对比,模型组Caspse-9及Bax的表达量升高,Bcl-2的表达量降低;与模型组对比,各治疗组的Caspse-9及Bax表达量降低,Bcl-2表达量明显升高(P＜0.05或P＜0.01). 结论：洗心汤含药脑脊液对Aβ1-42诱导所致细胞凋亡具有显著的保护作用,并呈一定的量效关系,其中以20％浓度的含药脑脊液作用最显著.

摘要： 取出生7d的新生SD大鼠海马神经细胞,体外原代培养7d.将其随机分为7组：C组(对照组)：正常孵育12h;P组(异丙酚组)：培养液中加入12ug/ml异丙酚孵育12h;DP组(右美托咪定+异丙酚组)分为5个亚组：DP1、DP2、DP3、DP4、DP5组,培养液中分别加入0.0025、0.025、0.25、2.5、25ug/ml右美托咪定预先孵育30min,再加入12ug/ml异丙酚继续孵育12h.每组随机设6个复孔.通过MTT法检测海马神经元存活率、HE染色光镜下观察海马神经元形态学变化.探讨不同浓度右美托咪定预孵育对异丙酚诱导的发育期大鼠离体海马神经元损伤的影响.

摘要： 功能性脑疾病严重危害人类健康,其干预与治疗已成为世界医学难题.超声脑刺激是一种新型、无创的神经调控技术,在功能性脑疾病干预方面具备巨大潜能.研究表明,超声刺激能有效地激活神经环路、调节蛋白表达、以及调控离子通道开放.树突棘是神经元树突分枝上的棘状突起的微小结构(头部直径约1μm,颈部直径约0.1μm,长度约0.1-2μm),是神经元间形成突触的主要部位.树突棘的结构和功能与神经突触的可塑性紧密相关,在学习记忆过程,突触可塑性的发生常相伴着树突棘的形成、脱落、扩张和萎缩等形态变化.

摘要： 目的：本课题试图通过测定大鼠海马GSK-3β、BDNF的表达,探讨开郁安神汤(医院自制药)治疗抑郁症的可能机制,为开郁安神汤临床应用提供实验依据及理论支持.rn 方法：采用慢性轻度不可预见性的应激抑郁模型(CUMS)加孤养.将实验大鼠分为四组：对照组、模型组、氟西汀组、开郁安神汤组,除对照组外,其余几组均孤养,并给予轻度不可预见的应激刺激共21天,造模完成后,分别给予相应实验药物灌胃,3周后测各指标变化,并利用放免疫组化法检测海马神经元GSK-3β、BDNF的表达.rn 结果：与对照组相比,模型组大鼠血海马神经元GSK-3β表达较对照组明显升高、而BDNF含量降低.21天相应实验药物灌胃治疗后,开郁安神汤组和氟西汀组与模型组比较大鼠海马神经元GSK-3β的表达均明显降低,而BDNF升高.rn 结论：开郁安神汤对抑郁模型大鼠有抗抑郁作用.其抗抑郁机制可能与下调海马神经元GSK-3β表达,提高BDNF含量有关.

摘要： 本发明涉及细胞生物学领域，公开了一种神经元细胞和神经胶质细胞有序共培养装置及其制备方法和应用。该装置包括基底和聚二甲基硅氧烷印章，所述聚二甲基硅氧烷印章可移除地复合在所述基底上；所述聚二甲基硅氧烷印章包含至少一个微孔单元，所述微孔单元包含依次排列的、至少一个垂直于所述基底的第一通孔和至少一个垂直于所述基底的第二通孔，所述第一通孔和第二通孔分别与基底表面形成一端开口的凹槽；所述第一通孔和第二通孔的距离为500μm～2000μm。本发明通过垂直于基底的第一通孔和第二通孔接种神经元细胞和神经胶质细胞，两种细胞在各自区域接种时均匀性易于控制，可使用的细胞量增大，群体效应明显，利于观察研究。

摘要： 本发明公开了一种促进海马神经干细胞向胆碱能神经元分化的方法，其包括，分离海马NSCs，接种后用NSCs培养液培养，加入病毒，一定时间后撤去更换新鲜的NSCs培养液继续培养；所述病毒为GAS5过表达慢病毒；所述加入病毒，其MOI值为5～100。本发明可以将GAS5表达量显著提升，可明显提高海马神经干细胞向胆碱能神经元分化的比例。

摘要： 本发明提供一种海马神经干细胞、神经元分离培养方法，该方法使用改良新生鼠神经细胞培育流程，使用改良培养基，对新生鼠海马组织进行原代培养，并可直接制作细胞爬片，24小时后提取细胞培养上清转移至另一培养体系可直接进行神经干细胞培养，原体系内贴壁细胞更换改良神经元培养基可进行神经元培养。本发明可在处死一次动物基础上同时完成稳定的神经干细胞和神经元培养，节约实验动物；能够培养密度及形态均较好的神经元，可用于神经元的相关体外实验体系构建；培养出的神经干细胞增殖性良好，传代稳定，分化潜能保持较好。

摘要： 本发明公开了多个实施方案，用于将由矢量‑矩阵乘法(VMM)阵列输出的神经元电流转换成基于神经元电流的时间脉冲，并将此类脉冲用作输入提供给人工神经网络内的另一VMM阵列。本发明公开了多个实施方案，用于在该VMM阵列需要模拟输入的情况下将该基于神经元电流的时间脉冲转换成模拟电流或电压值。

摘要： 本发明涉及细胞生物学领域，公开了一种神经元细胞和神经胶质细胞有序共培养装置及其制备方法和应用。该装置包括基底和聚二甲基硅氧烷印章，所述聚二甲基硅氧烷印章可移除地复合在所述基底上；所述聚二甲基硅氧烷印章包含至少一个微孔单元，所述微孔单元包含依次排列的、至少一个垂直于所述基底的第一通孔和至少一个垂直于所述基底的第二通孔，所述第一通孔和第二通孔分别与基底表面形成一端开口的凹槽；所述第一通孔和第二通孔的距离为500μm～2000μm。本发明通过垂直于基底的第一通孔和第二通孔接种神经元细胞和神经胶质细胞，两种细胞在各自区域接种时均匀性易于控制，可使用的细胞量增大，群体效应明显，利于观察研究。

摘要： 本发明公开了基于海马胆碱能神经元调控构建动物脑损伤模型的方法，包括：设定电磁辐射条件，对试验动物进行电磁辐射处理；比较电磁辐射处理前后试验动物海马CA3区胆碱能神经元激活或抑制对试验动物行为的影响，若对试验动物行为的影响具有统计学意义，则利用所述电磁辐射条件构建电磁辐射动物脑损伤模型。本发明能够较好地构建电磁辐射动物脑损伤模型，为阐明电磁辐射脑损伤效应的分子机理及其防治药物研发增加了可能性。

摘要： 本发明提供一种促进海马神经元细胞再生的中药组合物，由下列成分组成：刺五加5‑20重量份；巴戟天5‑20重量份；郁金5‑20重量份；远志1‑15重量份；柏子仁5‑20重量份；五味子3‑15重量份；香附5‑20重量份；莲子心1‑10重量份；法半夏3‑15重量份；三七1‑10重量份。该中药组合物可促进海马神经元细胞再生，调节5‑HT1AR介导的CAMP‑CREB‑BDNF通路，进而起到治疗抑郁症的效果。

摘要： 本公开涉及一种脐带间充质干细胞在制备修复海马神经元缺氧损伤的药物中的用途，所述脐带间充质干细胞具有如下标志物特征：高表达CD73、CD90和CD105，不表达CD14、CD34和HLA‑DR。所述脐带间充质干细胞能够有效修复缺氧损伤的海马神经元体系，且修复过程无需直接接触神经元，表现出远距离修复效果。

摘要： 本发明提供了一种基于生物信息学手段结合拉曼光谱的对海马神经元衰老基因鉴定的方法以及基于所述方法鉴定获得的具有预测和/或诊断用途的分子标记。本发明还创新性的使用体外培养海马神经元上清液的拉曼光谱的峰位强度水平作为筛选模型，用于鉴定海马神经元衰老生物标志物。本发明鉴定获得的分子标记，以及构建的鉴定模型在制备用于预测或检测海马体衰老的产品中的具有广阔的应用前景。

摘要： 本发明属于医学研究领域，涉及一种增加海马神经元树突分支及树突棘数量的靶基因、药物及应用。公开了Nmnat2基因在作为增加海马神经元树突分支及树突棘数量的靶点中的应用。还公开了一种增加海马神经元树突分支及树突棘数量的药物，所述药物为上调Nmnat2基因表达的生物或化学制剂。以期用于制备提高海马神经元树突分支及树突棘数量的药物及未来用于开发治疗阿尔茨海默症的药物。