快速鉴定

摘要： 本试验通过基质辅助激光解吸电离飞行时间质谱(MALDI-TOF MS)对临床分离的1株羊源多杀性巴氏杆菌进行了快速鉴定,取得了与VITEK2 Compact传统生化方法和16S rRNA测序方法一致的结果。MALDI-TOF MS对分离菌株的鉴定分数为2.371,达到了种水平的鉴定。从分离到纯菌落到获得有效的鉴定结果,MALDI-TOF MS仅需要约30 min,而VITEK2需要约4 h,16S rRNA测序方法需要至少2 d。因此,MALDI-TOF MS可以实现对临床分离的多杀性巴氏杆菌菌株的快速、准确鉴定,对进一步改善动物巴氏杆菌病的临床诊治具有重要意义。

摘要： 流感是一种急性呼吸道疾病,由甲型、乙型和丙型等流感病毒引起。其中,甲型和乙型流感病毒可导致季节性流行甚至全球大流行。流感病毒神经氨酸酶(NA)是病毒复制、传播和发病机制中的关键酶,因而研发神经氨酸酶抑制剂(NAIs)是对抗流感感染的有效途径之一。在中国,许多用于清热解毒的中药单独使用或作为中药配方来治疗流感显示出良好的疗效,但如何从中药中快速分离出活性物质是一个难题。

摘要： 为进一步提高野生动物疫情监测、病原检测鉴定和应急防控的时效性,建立了对鸟类拭子样品直接进行禽流感病毒(Avian influenza virus,AIV)核酸检测鉴定的二次PCR方法。对比试验结果显示,该方法可行性较高,具有与实时荧光定量PCR(real-time quantitative PCR,qPCR)方法等同的特异性和敏感性。禽流感病毒核酸二次PCR检测方法的建立,有利于基层监测单位在缺乏病毒分离技术和qPCR等实验条件的情况下,利用现有条件,就近、及时地开展野鸟样品的禽流感病毒检测工作。

摘要： 运用基质辅助激光解吸电离飞行时间质谱(matrix-assisted laser desorption/ionization time of-flight mass spectrometry,MALDI-TOF-MS)技术快速鉴定食品中空肠弯曲菌。通过对该方法的样品前处理的选择、稳定性、特异性等方面进行研究,确定了方法的可行性。结果表明,MALDI-TOF-MS鉴定方法准确,快速,稳定性好,能够准确快速地区分弯曲菌近缘菌株,并与VITEK生化鉴定结果高度一致,在准确性和时效性上均有较大提高。MALDI-TOF-MS方法适用于食品中空肠弯曲菌的快速筛检。

摘要： 【目的】瘤胫实蝇为我国进境植物检疫性有害生物。寄主范围广、危害大,形态与其同属近缘种相似,传统鉴定方法是将果蔬上的各虫态饲养至成虫后进行分类鉴定,鉴定周期较长,影响口岸进境果蔬快速通关,而采用分子鉴定不仅快速且不受虫态影响。【方法】选用瘤胫实蝇为鉴定靶标,番石榴实蝇、锈红果实蝇等19种实蝇作阴性对照,应用种特异性技术,基于mtDNA COⅠ线粒体基因序列,研究筛选并设计一对种特异性引物(SS-COⅠ)LJF400和LJR564,进行PCR扩增并将PCR产物进行电泳检测。【结果】种特异性引物仅对靶标种瘤胫实蝇的COⅠ基因有扩增能力,能扩增出一条单一的长度约165 bp清晰的条带,而对其余阴性对照种均不具有扩增效果,未出现任何条带。【结论】设计的种特异性引物具高特异性,能够快速准确鉴定瘤胫实蝇,适用于各种虫态,对瘤胫实蝇的检疫鉴定和进境果蔬的快速通关具有重要意义。

摘要： 目的建立焦磷酸测序对药品中5种致病菌的快速鉴定方法。方法通过信息网站及专业设计软件设计引物,扩增后进行电泳与焦磷酸测序,测序结果与Genebank库相应基因序列进行比对。结果5种致病菌测序结果与Genebank库相应基因序列匹配率均在93%以上,均能得到良好的鉴定结果。结论焦磷酸测序方法可以实现对5种致病菌的快速鉴定,大大提高鉴定效率。

摘要： 为快速鉴定从鸡胴体中分离的一株革兰氏阴性菌,应用基质辅助激光解吸电离飞行时间质谱(matrix-assisted laser desorption/ionization time of-flight mass spectrometry,MALDI-TOF-MS)技术对其进行鉴定。采用细菌分离纯化、MALDI-TOF-MS法鉴定,并以VITEK传统生化验证MALDI-TOF-MS鉴定结果的准确性。应用MALDI-TOF-MS法鉴定的空肠弯曲菌,鉴定分数为2.538,鉴定结果与VITEK一致。MALDI-TOF-MS方法能够快速、准确鉴定分离的空肠弯曲菌,为空肠弯曲菌的快速检测提供技术支撑。

摘要： 目的构建斑马鱼腺苷甲硫氨酸脱羧酶(amd 1)突变体,并运用聚合酶链式反应(PCR)技术对突变的碱基位点设计特异性引物,以建立快速鉴定短片段缺失的方法。方法利用CRISPR/Cas9系统构建斑马鱼amd1突变体;运用整胚原位杂交技术分析AMD1在野生型(WT)和amd1纯合子斑马鱼胚胎中的表达;根据突变体的突变位点设计鉴定引物,用PCR和琼脂糖凝胶电泳检测,并使用二代测序技术验证。结果斑马鱼amd1突变体构建成功;受精后24 h,在WT斑马鱼胚胎中AMD1主要在头部、眼睛、体节及内胚层区域表达,而在amd1纯合子斑马鱼胚胎中AMD1的表达明显降低。运用amd 1-screen-(3)-5′引物进行PCR时,在WT斑马鱼胚胎中可获正常条带;而在amd 1纯合子斑马鱼胚胎中未能获得相应条带。结论斑马鱼amd1突变体被成功构建;amd 1-screen-(3)-5′被确定为最佳鉴定引物。

摘要： 为探究3种太和香椿挥发性成分差异,并建立一种香椿品种的快速鉴别方法,该研究采用气相色谱-离子迁移谱技术对3种香椿中的挥发性成分进行检测分析。根据各组分的保留时间和离子漂移时间,对检测出的物质进行定性分析,确定化合物名称。利用LAV软件中的Gallery Plot插件,构建香椿样品的挥发性成分指纹图谱,比较不同香椿样品的挥发性成分差异。定性分析结果显示,3种香椿中共鉴定出挥发性物质47种,相对含量最高的为醇类化合物,以2-己烯醇最高,表现为草木香和果香。由主成分分析图可以直观看出,3种不同香椿样品得到明显区分,不同样品间具有明显的归属区域。该研究可以为香椿的快速鉴定和分类提供了一种简单、快速的方法,具有较大的应用前景。

摘要： 对149批面膜产品进行微生物检验,其中4批菌落总数不符合规定。对不合格样品中分离纯化的菌落用MALDITOF MS、16S rDNA测序比对、VITEK 2生化试验3种方法进行鉴定,结果均为日勾维多细菌源菌(Pluralibacter gergoviae);检出菌与日勾维多细菌源菌标准菌株CICC 24132和一株食品中检出的日勾维多细菌源菌共6株菌在MALDI Biotyper 3及VITEK 2生化反应基础上进行分析分型,经MALDI Biotyper 3对6株菌的蛋白图谱进行聚类分析,来源于面膜中的4株菌亲缘关系比较近;经对比VITEK 2生化试验发现,6株日勾维多细菌源菌生化反应存在差异,其中来源于同一生产厂家的3批面膜检出菌生化反应基本相同。结果表明,MALDI-TOF MS快速鉴定结果可信;经MALDI Biotyper 3聚类分析及生化反应的结果分析,可将4株面膜中分离的日勾维多细菌源菌分成两个亚型,从同一厂家3批不合格样品中检出的污染菌具有高度同源性。

摘要： 粉煤灰作为混凝土掺合料,不仅能降低混凝土生产成本,还能改善混凝土施工性能和耐久性,但粉煤灰质量波动严重影响混凝土质量控制.本文通过试验总结出粉煤灰质量快速鉴定方法.

摘要： 本研究以软件工程原理和专家系统技术为基础，采用二叉树检索技术和Delphi编程语言，研制外来检疫性有害生物计算机快速鉴定系统，结合检疫性有害生物信息与鉴定系统的特点，进行系统的开发和完善。依据二叉树检索技术进行有害生物鉴定，是指根据生物分类学的特点，将生物物种分类的两项式检索表用数据库表示成系统知识库，再利用计算机数据结构中二叉树结构的分枝节点，采用自上而下的正向搜索技术来实现其推理过程，并借此对有害生物进行鉴定、分类。

摘要： 目前我国没有专门针对于震后砌体结构快速鉴定的规范或规程，为此提出一种应用于震后砌体结构快速评估的方法。该方法在分析砌体结构常见震害的基础上，对地震中构件的破坏程度提出了定量和定性的判断标准;利用模糊数学方法对各类构件进行安伞等级评价，形成隶属度判断矩阵;采用层次分析法对各类构件、各结构层进行权重评价;依据等级隶属度判断矩阵和各类构件、各结构层的权重进行综合分析，得出整体结构的安全性评价。建议的方法简单易行，层次清晰，鉴定结果较为真实精确。并且依照建议方法可以容易编制计算机程序，使鉴定工作程序化，消减了工作量，并对震后紧急情况下应急救援政策的制定、救灾措施的实施和开展提供科学的决策依据。

摘要： 目的：探索建立快速鉴定结核分枝杆菌复合群的方法学.方法：采用重组酶介导核酸扩增技术((Recombinase Aid Amplification,RAA),针对保守的插入序列IS6110和IS1081设计引物和探针,在35-40°C环境中对结核分支杆菌复合群,非结核分支杆菌,临床常见细菌和真菌进行检测.结果：针对IS6110和IS1081序列合成设计的引物和探针,能有效扩增结核分枝杆菌复合群DNA,而对细菌真菌和非结核分支杆菌均无扩增;在39°C条件下20min即可得到扩增结果;最低扩增为103拷贝.结论：RAA方法检测结核分支杆菌具有高灵敏度和高特异性,可对分枝杆菌复合群的进行快速可靠的检测.

摘要： 目的：香蕉(Musa spp.)是世界重要的水果和粮食作物,种质资源丰富,经过长期的演化香蕉的倍性十分复杂.利用流式细胞术测定植物的染色体倍性,具有制样简单,样本处理量高等优点,目前该技术已经成为植物染色体倍性分析的主流方法.本研究利用流式细胞术快速测定了169个香蕉种质资源的倍性,以期为香蕉遗传进化以及杂交育种研究提供理论依据.方法：研究以小果野蕉(AA)为内参,分析了包括香牙蕉(M.AAACavendish)、大蕉(M.Dajiao)、粉蕉(M.ABBPisangAwak)、棱指蕉(M.ABB Bluggoe)、龙牙蕉(AAB)、贡蕉(AA)、野生蕉等不同类型香蕉种质资源的染色体倍性.结果：分析发现野生蕉、贡蕉均为二倍体,香牙蕉、棱指蕉、龙牙蕉均为三倍体,大蕉和粉蕉多数为三倍体,但是畦头大蕉、景洪野大蕉、粉杂1号为四倍体.同时本研究明确了海南红蕉为三倍体、飞亚-25为三倍体;大蕉与野生蕉杂交后代为四倍体,粉蕉与野蕉杂交后代为三倍体.

摘要： 利用16S-23S rDNA间隔区(ISR)长度和序列的多态性,结合16S rDNA和23S rDNA的保守性,分别在16S rDNA末端和23S rDNA前端保守区设计上下游引物,进行PCR扩增.结果为21株猪链球菌均扩增出长度约为1200bp的片段,8株马链球菌兽疫亚种均扩出约1300 bp的片段,其他属菌株和阴性对照无结果.因此,由PCR产物长度的不同就可快速区分猪链球菌和马链球菌兽疫亚种,这种基于ISR的PCR技术为鉴别病原微生物提供了更加简捷的方式.对2株代表菌(HA9801,ATCC 35246)的16S-233S rDNA ISR进行测序发现,猪链球菌和马链球菌兽疫亚种的ISR差异主要表现为碱基的缺失.

摘要： 目的 建立基于新型Taqman荧光探针的荧光实时(Real-time)PCR方法用于空肠弯曲菌的筛选检测与快速鉴定。空肠弯曲菌(Campylobacter jejum)是近十几年来在世界范围内广泛重视的人畜共患病原菌，可以导致人类的急性肠炎与食物中毒，并能引发格林-巴利综合征等并发症。为更好地利用分子生物学技术对空肠弯曲菌进行快速、准确的基因检测。本研究从样品增菌液与单菌落中提取细菌DNA，建立了针对空肠弯曲菌特异的hipO(hippuricase，马尿酸酶)基因的Real-time PCR方法，用于空肠弯曲菌的快速筛选检测与可疑菌落快速鉴定。试验结果表明，该方法检测细菌的灵敏度为1～10CFU，人工布菌鸡肉的检测灵敏度为1～10CFU。本研究所建立的空肠弯曲菌荧光实时PCR方法具有准确、可靠、快速的特点。

摘要： 为了探索大猿叶虫的遗传多样性水平及种群快速鉴定的方法，利用7种限制性内切酶对其4个地理种群的线粒COI基因进行PCR-RFLP)分析。结果表明：利用AseⅠ，MboⅠ，NlaⅢ和RsaⅠ在大猿叶虫4个地理种群中均没检测到多态性;利用AluⅠ和DraⅠ只检测到种群间的多态性;利用HaeⅢ既检测到了种群间的多态性，又在山东种群中检测到种群内多态性。根据酶切图谱，共发现4种单倍型，单倍型的特异性可以作为种群鉴别的标志。根据限制性片段共享度，利用POPGEN3.2计算4个种群的遗传距离，并利用MEGA3.1进行聚类分析，结果表明大猿叶虫4个地理种群间的遗传距离大小与其相对地理距离的远近不相符，其遗传变异程度与其滞育的特征也不相符。结果提示线粒体COI基因的PCR-RFLP分析可以用于大猿叶虫不同地理种群的识别，但不适合对其进行遗传多样性分析。

摘要： 桔小实蝇、木瓜实蝇、杨桃实蝇和菲律宾实蝇的成虫和幼虫的形态特征十分相近，本文对4种实蝇的线粒体DNA全序列进行测定，序列在GenBank上登录(登录号分别为：DQ917577，DQ917578，EF014414，DQ995281)，并对4个种的线粒体DNA全序列进行序列分析，为建立基于线粒体DNA序列分析的快速鉴定方法提供基础。

摘要： 目的:建立反相离子对-超高效液相色谱(RPIP-UPLC)对硫酸多糖的分离方法，并通过电喷雾离子源-四极杆-飞行时间质谱(ESI-Q-TOF-MS)寡糖结构进行解析。方法:庚胺作为离子对试剂，甲醇/水作为梯度洗脱溶剂，κ-卡拉胶寡糖通过BEH C18反相柱分离后，分别在正、负离子模式下进行四极杆-飞行时间质谱分析。结果:聚合度3-45的κ-卡拉胶寡糖在BEH C18柱上得到很好的分离，从每一个色谱峰对应的质谱图中可以准确获得直至27糖的各寡糖结构信息，均为奇数糖，与聚丙烯凝胶电泳结果吻合。结论:RPIP-UPLC-Q-TOF-MS分析κ-卡拉胶寡糖，能够快速得到更多、更准确的寡糖结构信息，对卡拉胶寡糖的快速鉴定和结构解析具有重要的意义。

摘要： 本发明公开了一种番茄可溶性固形物相关的SNP标记,所述SNP标记位于番茄基因组第6号染色体37559435bp处的碱基C或T。本发明还公开了一种快速鉴定或辅助鉴定番茄可溶性固形物的dCAPS分子标记辅助育种方法，将所述SNP位点作为鉴定番茄可溶性固形物含量的dCAPS标记，将该标记命名为BR1‑dCAPS标记。本发明还提供一种快速鉴定或辅助鉴定番茄可溶性固形物含量的方法，通过对待测番茄进行所述的SNP标记的检测，鉴定或辅助鉴定番茄可溶性固形物含量。本发明应用于番茄可溶性固形物含量有关育种和辅助育种中，可快速筛选得到不同含量的番茄可溶性固形物材料，既避免了环境因子对表型鉴定的影响又大大缩短了育种周期，是一种快捷有效的先进育种手段。

摘要： 本发明涉及生物技术领域，特别涉及一种咖啡果小蠹的特异性SS‑COI引物对、鉴定试剂盒和快速鉴定方法。该特异性SS‑COI引物对由SEQ ID NO：1所示的上游引物和SEQ ID NO：2所示的下游引物组成。本发明特异性SS‑COI引物和方法实现了对咖啡果小蠹的快速分子鉴定，方法简单，便于操作，耗时短；鉴定范围广、灵敏度高。

摘要： 本发明涉及五指毛桃的RPA快速鉴定方法及鉴定用RPA引物，具体涉及一种食药同源五指毛桃的鉴定方法；此外本发明还涉及鉴定五指毛桃的特异性RPA引物。本发明旨在鉴别药食同源的广东道地药材五指毛桃真伪，通过设计特异性的RPA引物，优化RPA反应条件，并结合样品DNA快速提取方法，以达到快速、准确的鉴定五指毛桃药材真伪的目的。

摘要： 本发明公开了一种快速鉴定核盘菌突变体致病性强弱的方法，以油麦菜为宿主，分别以待鉴定核盘菌突变体和野生型为模板，利用核盘菌对植物叶片进行侵染，将待鉴定核盘菌造成的植物的侵染面积与野生型核盘菌造成的侵染面积进行比较，来判断所待鉴定核盘菌突变体致病性强弱。本发明方法可以用于核盘菌致病基因的辅助筛选，为后续的基因筛选提供可靠的依据，结果客观、准确性高，抗病性评判依据直观、简洁明了，可做到快速筛选，方便排除大量与致病性无关的突变基因，省时省力。该方法易于操作，可重复性好，适用于大批量的筛选，可用于研究核盘菌‑油菜互作机理研究，进而指导植物（如油菜）抗病性的育种和油料安全生产。不仅节约生产成本而且大大提高选择效率，进而加快植物育种进程。

摘要： 一种快速鉴定红螯螯虾遗传性别的PCR扩增引物、试剂盒及鉴定方法，属于分子生物学技术领域。本申请的PCR扩增引物包括性别标记特异引物和内参基因引物，所述性别标记特异引物上游序列如SEQ ID NO.1所示，所述性别标记特异引物下游序列如SEQ ID NO.2所示，所述内参基因引物上游序列如SEQ ID NO.3所示，所述内参基因引物下游序列如SEQ ID NO.4所示。本申请的PCR扩增引物能够在红螯螯虾早期鉴定出其遗传性别；本申请的方法操作简便、可进行大批量鉴定，鉴别快速、结果直观准确。

摘要： 本发明提供一种快速鉴定瓦氏黄颡鱼群体耐低氧能力试剂盒及鉴定方法，涉及水产生物技术领域，本发明所述鉴定瓦氏黄颡鱼群体耐低氧能力的试剂盒，包括两个基因的特异性正向引物和特异性反向引物，其引物序列分别如SEQ ID NO.1、SEQ ID NO.2、SEQ ID NO.3、SEQ ID NO.4所示。采用本发明的研究方法，瓦氏黄颡鱼在低氧胁迫12小时后，通过测定肝脏组织两个基因的相对表达量，划定其相对表达量的区间，判断待测群体的耐低氧能力。本发明为初步筛选瓦氏黄颡鱼耐低氧群体提供方法。

摘要： 本发明涉及生物技术领域，公开了用于快速鉴定生姜品种纯度的引物组组合，包括如下引物组中的任意一组或多组：引物组SJ1、引物组SJ2、引物组SJ3、引物组SJ4、引物组SJ5、引物组SJ6、引物组SJ7、引物组SJ8、引物组SJ9、引物组SJ10、引物组SJ11、引物组SJ12、引物组SJ13；还公开了鉴定方法和应用。本发明应用SRAP分子标记技术以更灵敏和高效的鉴定手段对生姜品种进行准确鉴定，与常规的形态检验相比，本发明的引物组和鉴定平台的检测结果更稳定、可靠，且具有快速简单、直观实用等特点，可应用于生姜品种纯度的快速鉴定、亲缘关系分析、品种知识产权保护和分子标记辅助育种等方面。

摘要： 本发明提供一种类鼻疽伯克霍尔德菌鉴定图谱数据库以及类鼻疽伯克霍尔德菌快速鉴定方法，所述数据库中包含类鼻疽伯克霍尔德菌的分子量2000～20000的蛋白质图谱，所述蛋白质图谱由不同分子量蛋白质的质何比及其相对强度绘制而成；本发明还公开了图谱中共38个特征峰数据。本发明公开的类鼻疽伯克霍尔德菌快速鉴定方法，包括以下步骤：1)将检测细菌接种于平板，接种好的平板置于35～37°C恒温箱培养20～48h；2)挑取平板上的单个菌落，涂靶板，菌膜晾干后立即加基质液，晾干后采用MALDI‑TOF MS检测；所得图谱与数据库中的图谱进行比对，Log(score)≥2.0时，判为阳性。采用本发明图谱数据库及快速鉴定方法，类鼻疽伯克霍尔德菌的鉴定准确率达到99.9％以上，实现了类鼻疽伯克霍尔德菌的快速准确鉴定。

摘要： 本发明涉及病原微生物的快速鉴定仪器及鉴定方法，属于微生物鉴定技术领域。病原微生物的快速鉴定仪器包括白光成像单元与拉曼单元，白光成像单元用于拍摄样品白光像，实现细胞自动识别和定位，拉曼单元用于测量病原微生物细胞拉曼光谱，得到病原微生物细胞的指纹特征，当拍摄白光像识别细胞时，白光成像单元移入光路，拉曼单元移出光路，当测量拉曼信号时，白光成像单元移出光路，拉曼单元移入光路。与现有技术相比，本发明由于不需要增菌和分离培养，大大缩短了微生物鉴定的时间。在使用本发明的仪器与方法进行测试中，最快只需要几分钟即可得到原有1‑3天才能得到的结果。

摘要： 本实用新型公开了一种可快速鉴定古陶瓷真品或仿品的鉴定装置，包括机壳，所述机壳的顶端连接有机盖，所述机壳内壁的各面均安装有摄像机，所述机壳内壁位于摄像机的内侧安装有玻璃板，所述机壳的底端安装有伺服电机，所述机壳内壁的两侧均安装有电动推杆。本实用新型通过设置清理刷与卡块，在使用该装置时，在长时间使用后，玻璃板表面会粘附一些尘埃，影响拍摄，此时控制伺服电机运作，伺服电机通过丝杆带动移动块进行运动，移动块带动清洁刷对玻璃板内壁进行清理，在需要对清理刷进行更换清洗时，通过按动推钮，推钮通过推杆推动卡块向一侧运动，使卡块脱离卡槽的内壁，此时便可将清理刷进行取出。