miR-200c

摘要： 目的探讨miR-200b与miR-200c靶向DNA甲基转移酶1(DNMT1)、DNMT3A和DNMT3B对卵巢癌细胞顺铂耐药性的影响。方法以人卵巢癌细胞株(A2780)、人卵巢癌顺铂耐药细胞株(A2780/DDP)作为研究对象,实时荧光定量PCR(qRT-PCR)检测A2780、A2780/DDP细胞株中miR-200b与miR-200c表达量。耐药细胞株A2780/DDP转染后分为si-miR-200b组、si-miR-200c组、si-NC组,MTT法检测转染后3组细胞IC50值;蛋白印迹免疫法(Western blotting)检测转染后3组细胞DNMT1、DNMT3A和DNMT3B蛋白表达水平;流式细胞术检测转染后细胞凋亡率。结果qRT-PCR结果显示A2780细胞系中miR-200b与miR-200c表达高于A2780/DDP细胞系(P<0.05)。si-miR-200b组和si-miR-200c组IC50值、DNMT1、DNMT3A和DNMT3B蛋白表达水平低于si-NC组(P<0.05)。结论miR-200b与miR-200c高表达能抑制DNMT1、DNMT3A和DNMT3B基因表达,从而逆转卵巢癌细胞对顺铂的耐药性。

摘要： 目的探讨外周血miR-200c水平对移植异基因造血干细胞后急性移植物抗宿主病(aGVHD)发生的预测作用。方法选择2014年1月至2018年10月在昆明医科大学第一附属医院血液科行异基因造血干细胞移植(Allo-HSCT)的51例患者作为研究对象,根据移植后是否发生aGVHD原则分为实验组(发生aGVHD)33例、对照组(未发生aGVHD)18例。抽取肘部外周血5 mL,RT-qPCR检测两组miR-200c,分析两组miR-200c表达差异。结果两组患者均移植成功,且恢复造血功能,恢复时间为18 d,其中33例发生aGVHD,18例未发生aGVHD,发生率为64.71%;实验组在移植前、移植后7、14、及72 d时,miR-200c表达均低于对照组(P<0.05);aGVHD发生后外周血中miR-200c显著低于发生前(P<0.001);与aGVHDⅠ度相比,aGVHDⅡ度患者外周血中miR-200c表达下调(P<0.05),与Ⅱ度相比,aGVHDⅢ度患者外周血中miR-200c表达下调(P<0.001);miR-200c高表达组患者2年总生存率高于低表达组(P<0.05);miR-200c对aGVHD疾病产生诊断价值较好。结论miR-200c水平降低与异基因造血干细胞移植后aGVHD的发生相关;随着aGVHD严重程度升高miR-200c表达水平降低,miR-200c低表达患者生存率较差。miR-200c可作为早期诊断和预测aGVHD的标志物。

摘要： 目的 分析胃癌组织中miR 200c/141CpG岛的甲基化水平对miR-200c/141表达水平的影响.方法 采用实时定量PCR(qRT-PCR)方法以及BS-MSP方法检测胃癌组织以及癌旁组织中miR-200c/141CpG岛的甲基化水平以及表达.运用统计学方法分析胃癌组织中miR-200c/141CpG岛的甲基化水平与miR-200c/141表达水平的关系.结果 通过观察可知,在胃癌组织中,miR-200c/141CpG岛的甲基化水平有明显提高,而miR-200c(Homo sapiens miR-200c)以及miR-141的水平有明显下降,这说明miR 200c/141CpG岛的甲基化水平与miR-200c/141表达水平为负相关关系.结论 在胃癌组织中,miR-200c以及miR-141的水平随着miR-200c/141CpG岛的甲基化水平的升高而降低.

摘要： 目的 探究血清微小RNA-200C(miR-200C)、微小RNA-101(miR-101)、肝肠钙黏蛋白(CDH17)及糖类抗原72-4(CA72-4)联合诊断胃癌的价值.方法 选择2017年1月至2019年2月三门峡市中心医院收治的150例胃癌病人及同期收治的50例胃良性疾病病人及50例健康体检者作为研究对象,分别纳入胃癌组、胃良性疾病组及对照组,采用实时荧光定量-反转录聚合酶链式反应检测血清miR-200C、miR-101水平,采用酶联免疫吸附法、电化学发光免疫分析法检测血清CDH17及CA72-4浓度,分析各指标与胃癌临床参数的关系及其诊断价值.结果 胃癌组病人血清miR-200C[(1.10±0.22)(0.68±0.15)、(0.95±0.20)]、miR-101[1.45(0.29,2.01)、0.30(0.10,0.65)、1.32(0.33,1.85)]表达水平显著低于良性组及对照组,CDH17[38.59(18.59,68.66)、88.12(33.25,152.12)、41.74(25.14,75.45)]、CA72-4[5.22(3.09,15.14)、17.15(6.71,32.12)、6.42(2.71,17.63)]水平显著高于良性组及对照组(P<0.05).血清miR-200C、miR-101、CDH17与胃癌病人浸润深度、淋巴结转移、脉管浸润、临床分期相关(P<0.05);CA72-4与胃癌病人淋巴结转移相关(P<0.05).miR-200C、miR-101、CDH17及CA72-4诊断胃癌的曲线下面积分别为0.899、0.904、0.871、0.793;其中miR-101诊断曲线下面积最大.miR-200C、miR-101、CDH17分别联合CA72-4诊断胃癌的曲线下面积为0.956、0.947、0.961,四种联合诊断曲线下面积最大,其曲线下面积为0.995.结论 miR-200C、miR-101、CDH17、CA72-4对胃癌有一定诊断效能,相比于单项检测常见肿瘤标志物CA72-4,miR-200C、miR-101、CDH17诊断价值更高,临床上可通过联合多种指标共同诊断以提高诊断效能.

摘要： 目的 探究退变腰椎间盘髓核组织中酪氨酸激酶受体B(tyrosine kinase receptor B,TrkB)、N-Myc下游调节基因2(N-myc downstream regulatory gene 2,NDRG2)表达变化,并分析两者与衰老髓核细胞之间的相关性.方法 选取2018年1月～2020年4月于本院行腰椎手术摘除的髓核组织标本75份,依据髓核退变程度Pfirrmann分级,划分为Ⅱ级组、Ⅲ级组、Ⅳ级组,各25例.采用细胞衰老β-半乳糖苷酶(senescence-associatedβ-galactosidase,SA-β-gal)试验检测髓核组织中衰老髓核细胞占比,采用RT-PCR技术检测微小RNA-200c(microRNA-200c,miR-200c)、TrkB mRNA及NDRG2 mRNA、P53 mRNA相对表达量,采用Western blotting法测定TrkB、NDRG2蛋白表达,并采用Pearson相关性分析TrkB、NDRG2表达与衰老髓核细胞的关系.结果 三组髓核组织中的衰老髓核细胞百分比比较,存在显著差异(F=145.315,P<0.001).三组miR-200c、TrkB mRNA、TrkB蛋白相对表达量比较,存在显著差异(P<0.05).三组P53 mRNA、NDRG2 mRNA与NDRG2蛋白相对表达量比较,Ⅱ级组<Ⅲ级组<Ⅳ级组,差异均有统计学意义(P<0.05).Pearson相关性分析显示,髓核组织中髓核细胞占比与TrkB mRNA相对表达量、TrkB蛋白相对表达量呈显著负相关(P<0.05),与NDRG2 mRNA相对表达量、NDRG2蛋白相对表达量呈显著正相关(P<0.05);miR-200c与TrkB mRNA呈显著负相关(r=-0.792,P<0.05),P53 mRNA与NDRG2 mRNA呈显著正相关(r=0.974,P<0.05).结论 TrkB、NDRG2可参与腰椎间盘退变病理过程,或经介导腰椎间盘髓核细胞衰老,促使椎间盘退变.

摘要： 目的 研究骨肉瘤中miR-200c表达水平与病理特征、病情转归的相关性并探究其潜在靶基因.方法 回顾性选择2016年4月至2018年12月期间在华中科技大学同济医学院附属协和医院诊断为骨肉瘤的52例患者.观察骨肉瘤组织与瘤旁组织中miR-200c表达水平的变化;比较不同病理特征骨肉瘤中miR-200c表达水平;随访生存时间、绘制K-M曲线并进行Long-rank检验,分析不同miR-200c表达水平骨肉瘤患者的生存情况;分析骨肉瘤中AKT通路基因的表达及其与miR-200c的相关性.结果 骨肉瘤组织中miR-200c的表达水平(0.47±0.09)明显低于瘤旁组织(1.06±0.20),差异有统计学意义(P<0.05).EnnekingⅡb-Ⅲ期、有淋巴结转移的骨肉瘤组织中miR-200c的表达水平明显低于EnnekingⅠ-Ⅱa期、无淋巴结转移的骨肉瘤组织,差异有统计学意义(P<0.05).骨肉瘤中miR-200c低表达患者的整体生存情况较miR-200c高表达患者恶化.骨肉瘤组织中蛋白激酶B(AKT)、哺乳动物雷帕霉素白蛋白(mTOR)的表达水平分别为1.88±0.31、1.73±0.30,明显高于瘤旁组织(1.04±0.18、1.02±0.19),差异均有统计学意义(P<0.05).AKT、mTOR与miR-200c的表达水平呈负相关(r=-0.315,-0.228,P<0.05).结论 骨肉瘤中miR-200c呈低表达趋势并且能够促进肿瘤病理进程、影响远期生存,靶向AKT/mTOR是其可能机制.

摘要： 目的 探讨miR-200c对人绒毛膜滋养细胞迁移、侵袭及上皮—间质转化(EMT)的影响,并探讨其可能的分子机制.方法 将人绒毛膜滋养细胞HTR-8/SVneo分为过表达组、沉默组及对照组,应用脂质体转染法分别转染miR-200c模拟物(miR-200c mimics)、miR-200c抑制物(miR-200c inhibitor)、miRNA阴性对照(miR-NC).采用实时荧光定量PCR法检测各组细胞miR-200c表达,细胞划痕实验和Transwell侵袭实验观察各组细胞迁移和侵袭能力(分别以细胞迁移率和侵袭细胞数表示),Western blotting法检测各组细胞中EMT相关蛋白(E-cadherin、N-cadherin、Fibro-nectin)和Notch1蛋白相对表达量.双荧光素酶报告基因实验验证miR-200c与Notch1的靶向关系.结果 过表达组、对照组和沉默组细胞miR-200c相对表达量依次降低,细胞迁移率和侵袭细胞数依次升高,组间两两比较P均0.05).结论 miR-200c能够抑制人绒毛膜滋养细胞的迁移、侵袭及EMT,其机制可能与靶向调控Notch1有关.

摘要： 目的 探讨血清miR-200C、癌胚抗原(CEA)、糖类抗原-199(CA-199)和糖类抗原-724(CA-724)对胃癌患者的单一或联合检测的诊断价值.方法 回顾性选择2018年6月至2020年11月南京中医药大学附属南京市中西医结合医院确诊并收治的胃癌患者83例为研究组,另选择同期来院进行健康体检的正常人51例作为对照组.分别于胃癌患者手术当天、术后第7天、健康受试者体检当天早晨采抽取5 mL空腹静脉血,采用实时荧光定量聚合酶链式反应(RT-PCR)法检测两组受试者血清中miR-200C相对表达水平,采用电化学发光免疫分析仪测定CEA、CA-199和CA-724水平,分析胃癌患者术前血清中miR-200C表达水平与病理特征间的关系,采用受试者工作特征(ROC)曲线判断各因子对胃癌的诊断价值.结果 研究组胃癌患者血清中miR-200C相对表达水平(0.668±0.191)明显低于对照组(1.106±0.237),差异有统计学意义(P<0.05).淋巴结转移为N2～N3期的胃癌患者血清中miR-200C表达水平明显低于N0～N1期的患者,TNM分期为Ⅲ、Ⅳ期的胃癌患者血清中miR-200C表达水平明显低于Ⅰ～Ⅱ期的患者,差异均有统计学意义(P<0.05).术前胃癌患者血清中miR-200C相对表达水平(0.668±0.191)明显低于术后胃癌患者(0.843±0.207),差异有统计学意义(P<0.05).血清miR-200C检测胃癌的曲线下面积(AUC)为0.772,灵敏度及特异度分别为79.01％和68.63％;CEA检测胃癌的AUC为0.678,灵敏度及特异度分别为36.14％和84.31％;CA-199检测胃癌的AUC为0.641,灵敏度及特异度分别为37.35％和82.35％;CA-724检测胃癌的AUC为0.615,灵敏度及特异度分别为38.55％和80.39％;miR-200C检测胃癌的AUC明显高于CEA、CA-199和CA-724(P<0.05);四者联合检测胃癌的AUC为0.905,灵敏度及特异度分别为91.57％和74.51％.结论 miR-200C在胃癌患者血清中的表达水平呈下降趋势;血清miR-200C水平与患者淋巴结转移及TNM分期有关;血清miR-200C作为胃癌诊断标志物具有较高灵敏度及特异度,单独或与CEA、CA-199和CA-724联合检测对胃癌诊断具有重要价值.

摘要： 目的探讨莱菔硫烷(SFN)对肺癌干细胞增殖与自我更新的影响及其调控机制。方法MTT法检测SFN对肺腺癌细胞株H460和A549细胞增殖的影响;肿瘤球形成实验、蛋白印迹法等检测SFN处理前后肺腺癌细胞肿瘤球形成能力、干性相关基因(如β-catenin、Klf4、c-myc)表达水平等;NGS测序法分析SFN对肿瘤细胞miRNAs表达谱的影响;qRT-PCR验证SFN对重点miRNAs转录水平的改变;蛋白印迹法检测SFN对肿瘤细胞DNA甲基化转移酶(DNMTs)表达的影响;构建miR-200c启动子-GFP质粒,细胞免疫荧光、甲基化PCR法和DNA测序法检测SFN对肿瘤球和miRNA启动子甲基化水平的影响。结果SFN(5.0μmol/L)处理肺腺癌细胞肿瘤球后miRNAs表达谱发生显著变化,其中miRNA-200c增高最为明显。与对照组比较,SFN-S组H460和A549细胞β-catenin、Klf4、c-myc和Vimentin等蛋白表达下降,DNMT1和DNMT3a蛋白表达水平也明显降低。与对照组比较,SFN-S组稳定表达pEGFP-R200c质粒的H460和A549细胞肿瘤球直径显著减少,而肿瘤球荧光强度增加,GFP蛋白表达上调。上述表达pEGFPR200c质粒细胞株中miR-200c启动子区域存在9个CpG丰富区域位点,其甲基化水平在对照组、SFN-S组和5-Aza-dC组分别为88.9%、44.4%、38.8%。结论SFN可能经由表观遗传学水平下调miR-200c启动子甲基化水平,促进miR-200c的转录,从而调控肺癌干细胞的干性相关基因表达。

摘要： Tet methylcytosine dioxygenase 2(TET2)acts as an antioncogene that is investigated in different cancers.But the effects of TET2 in renal cell cancer(RCC)is still known little.Here,quantitative real-time PCR(qRT-PCR),Western blot,and immunofluorescence were performed to exam gene and protein expression.Cell proliferation was measured using Cell Counting Kit-8(CCK-8).Transwell assay was performed to detect cell metastasis viability.Flow cytometry was performed to analyze the cell cycle and cell apoptosis.The effects of TET2 on RCC growth in vivo was analyzed using a mouse xenograft model.We found that TET2 and miR-200c were decreased in RCC tissues,and hypermethylation of miR-200c promoter was found.Overexpression of TET2 promoted miR-200c expression by reducing miR-200c promoter methylation.Additionally,overexpression of TET2 or miR-200c suppressed cell growth and metastasis.Also,knockdown of miR-200c could moderate TET2 mediated cell growth inhibition.Furthermore,we found miR-200c directly regulates Stearoyl-CoA desaturase(SCD)gene expression.Moreover,in vivo experiment results confirmed that TET2 inhibited tumor growth.In conclusion,TET2 acts as an antioncogene in RCC by regulating the miR-200c-SCD axis and providing a potential target for RCC diagnosis and treatment.

摘要： 本发明涉及用于调节肝炎病毒复制的方法和医药组合物，其涉及miR‑130a RNA、miR‑130b RNA、miR‑204 RNA、miR‑1236 RNA或其组合。

摘要： 本发明涉及一种用于检测急性高山病的microRNA标志物及其在制备急性高山病检测试剂盒中的应用。通过定量PCR等的方法检测被测者血中的microRNA‑676‑3p、microRNA‑181b‑5p、microRNA‑193b‑5p的含量，并与正常microRNA水平比较来诊断急性高山病，该急性高山病分子标志物microRNA灵敏度高，特异性强，操作方便，安全无创伤及易于大量筛查，且联合使用效果更优。

摘要： 本发明涉及一种用于检测急性高山病的microRNA标志物及其在制备急性高山病检测试剂盒中的应用。通过定量PCR等方法检测被测者血中的microRNA‑676‑3p、microRNA‑181b‑5p、microRNA‑3591‑3p的含量，并与正常microRNA水平比较来诊断急性高山病，该急性高山病分子标志物microRNA灵敏度高，特异性强，操作方便，安全无创伤及易于大量筛查，且联合使用效果更优。

摘要： 本发明公开了MiR-17，miR-20a，miR-29c和miR-223作为鼻咽癌分子标志物的应用。本发明提出利用血清中4个微小RNA作为鼻咽癌的分子标志物并提出了检测方法：抽取外周血血清中总RNA，并逆转录为cDNA，实时定量PCR法获得4个微RNA Ct值，通过公式A＝(Ct

摘要： 本发明公开了一种miR‑486、miR‑146b和miR‑15b探针设计方法，所述具体方法步骤如下：步骤一：设计茎环‑miR‑486序列为SH‑(CH2)6‑AAA AAC TCG GGG CAG CTC AGT ACA GGA TTT TT‑6‑FAM。本发明通过设计三种茎环结构3′端修饰了不同荧光分子，FAM修饰茎环‑miR‑486，Cy5修饰茎环‑miR‑146b，Cy3修饰茎环‑miR‑15b，5′端通过金‑巯键修饰到金纳米表面，由于茎环的特殊结构，荧光分子将与金纳米表面接触，荧光猝灭，当目标miRNA存在，由于碱基互补配对，打开茎环结构，使得荧光信号分子远离金纳米表面，从而可检测到相应荧光信号大大增加，实现了对转录因子三种miRNA的快速同时检测，具有良好的灵敏度和特异性。

摘要： 本发明涉及一种用于检测急性高山病的microRNA标志物及其在制备急性高山病检测试剂盒中的应用。通过定量PCR等方法检测被测者血中的microRNA‑676‑3p、microRNA‑181b‑5p、microRNA‑3591‑3p的含量，并与正常microRNA水平比较来诊断急性高山病，该急性高山病分子标志物microRNA灵敏度高，特异性强，操作方便，安全无创伤及易于大量筛查，且联合使用效果更优。

摘要： 本发明涉及一种用于检测急性高山病的microRNA标志物及其在制备急性高山病检测试剂盒中的应用。通过定量PCR等的方法检测被测者血中的microRNA‑676‑3p、microRNA‑181b‑5p、microRNA‑193b‑5p的含量，并与正常microRNA水平比较来诊断急性高山病，该急性高山病分子标志物microRNA灵敏度高，特异性强，操作方便，安全无创伤及易于大量筛查，且联合使用效果更优。

摘要： 本发明涉及用于调节肝炎病毒复制的方法和医药组合物，其涉及miR‑130a RNA、miR‑130b RNA、miR‑204 RNA、miR‑1236 RNA或其组合。

摘要： 本发明涉及医学生物检测技术领域，本发明提供了一种用于检测血浆或血清中的hsa-mir-135a、hsa-mir-302d及hsa-mir-10b的含量，来预测肝癌发生或转移的试剂或试剂盒、及其相应的检测方法。本发明为早期诊断肝癌的发生、预测肝癌的转移提供了新的手段，以便尽早进行临床干预，防止病情进展，改善患者预后。

摘要： 本发明描述利用例如miR-409-5p抑制剂的miRNA抑制剂治疗癌症、癌症转移和耐药性癌症的方法。本发明也描述使用miRNA作为生物标记物；例如用于预测对癌症药物的反应性，检测癌症的疾病状态的方法。