藻蓝蛋白

摘要： 目的:对人工养殖的葛仙米藻胆蛋白和藻蓝蛋白在S180荷瘤小鼠肿瘤生长的影响及作用机制研究。方法:通过考察S180荷瘤小鼠肿瘤体积、小鼠脏器指数和肿瘤组织切片观察,对葛仙米中藻胆蛋白、藻蓝蛋白的体内抗肿瘤活性进行评价,并初步研究了其作用机制。结果:体内抗肿瘤作用结果显示,葛仙米藻胆蛋白12.5、25、50 mg/kg剂量组对小鼠肉瘤S180的抑瘤率分别为11.19%、20.14%、37.65%。葛仙米藻蓝蛋白12.5、25、50 mg/kg剂量组对小鼠肉瘤S180的抑瘤率分别为19.74%、35.00%、52.06%。藻蓝蛋白能够明显促进抑癌蛋白P53和促凋亡蛋白Bax的表达,抑制凋亡抑制蛋白Bcl2的表达。结论:葛仙米藻蓝蛋白高剂量组可显著减少S180肉瘤细胞的增殖,葛仙米藻蓝蛋白低、中剂量和葛仙米藻胆蛋白高剂量也有一定的抑制作用,人工养殖的葛仙米中藻胆蛋白和藻蓝蛋白具有较好的体内抗肿瘤活性。

摘要： 分子印迹技术由于其优异性能而被应用于多个领域中,在大多数情况下,其目标对象为小分子,对于生物大分子的印迹研究仍属于少数,但已取得了初步的进展,证明了分子印迹技术在生物大分子的检测和富集方面具有良好发展态势。本文主要总结了分子印迹在蛋白质印迹中的研究进展,分别介绍分子印迹对藻蓝蛋白、人血清白蛋白和肿瘤细胞标志蛋白的应用,分析了分子印迹蛋白质技术存在的挑战,并对该项技术的发展进行了展望。

摘要： 本文旨在研究聚球藻PCC7002(Synechococcussp. PCC7002,简称“聚球藻”)藻蓝蛋白(Phycocyanin,PC)的提取纯化及热致褪色机理,通过高压均质、壳聚糖絮凝和硫酸铵盐析提取纯化藻蓝蛋白,并采用色泽指标、UV-Vis光谱、荧光发射光谱、粒径电位、FTIR光谱、SDS-PAGE电泳研究其在热处理(50、60、70、80、90°C,30 min)过程中褪色的机理。结果表明:藻蓝蛋白的最适提取条件是将藻粉溶于0.04 mol/L的NaCl溶液中使其浓度达到2 mg/mL并在80 MPa下均质7 min,此时藻蓝蛋白得率为10.5081%±0.0936%;经0.15 mg/mL壳聚糖絮凝、50%饱和硫酸铵盐析后,藻蓝蛋白纯度可由0.6950±0.0043提高至1.9084±0.2621。进一步研究藻蓝蛋白的热致褪色机理发现:从60°C开始,脱辅基蛋白空间结构的破坏使蛋白骨架维持的藻蓝胆素天然构象发生转变、藻蓝蛋白紫外吸收和特征荧光大幅下降,藻蓝蛋白的蓝色色泽因此大幅消褪;粒径结果表明,藻蓝蛋白在60°C时开始聚集,而80°C下形成的更大聚集体可能将四吡咯发色团包埋于其内,使得藻蓝蛋白色泽消褪程度加深;此外,FTIR光谱和SDS-PAGE表明热处理过程中藻蓝蛋白β亚基的破坏程度可能远高于α亚基,且被破坏的结构主要是α-螺旋。综上,维持藻蓝蛋白脱辅基蛋白结构或者发色团依托蛋白结构的稳定,是藻蓝蛋白热处理过程中呈色稳定的关键。本研究结果为藻蓝蛋白在热处理过程中护色措施的研究提供了一定的理论依据。

摘要： [目的]探讨藻蓝蛋白(C-PC)联合光动力疗法对SW1990胰腺癌细胞的抑制作用,并从免疫调节方面初步探讨其作用机制。[方法]实验分成6组:正常组、模型组、CY组、激光照射组、藻蓝蛋白组(C-PC组)、藻蓝蛋白+激光照射组(C-PC+激光照射组)。除正常组外,余组将SW1990细胞接种于小鼠右前肢腋窝处构建小鼠异体移植瘤模型。造模成功后测量肿瘤直径,称量脾重,计算脾指数、肿瘤体积及抑瘤率。采用ELISA法测定小鼠脾细胞培养液和血清中TNF-α的水平以及血清中IL-6的水平。[结果]与模型组比较,C-PC组瘤重显著减少(P0.05);与模型组比较,C-PC组、C-PC+激光照射组均能显著增加小鼠TNF-α及IL-6的水平(P0.05)。[结论]藻蓝蛋白联合光动力疗法能有效抑制肿瘤的生长,提高患癌小鼠免疫器官脾脏的免疫功能,增强患癌小鼠血清中TNF-α和IL-6的表达以及脾细胞培养液上清中TNF-α的表达水平,增强机体的体液免疫功能,提示藻蓝蛋白联合光动力疗法可能通过调节机体的免疫功能来达到抑制肿瘤生长的目的。

摘要： 藻类作为一类具有经济价值的养殖对象,在世界范围内广泛培养。藻类藻胆体中的光能色素--藻蓝蛋白以天然的蓝色、广泛的生理功能特性而受到越来越多的关注,其抗炎、抗肿瘤、抗氧化、免疫调节等生理功能已被充分验证。然而,纯化的藻蓝蛋白水溶后易发生沉淀或解离,对温度、pH值、光照、离子等环境因素表现出较强的敏感性。在其色泽稳态方面,通过颗粒、乳液等纳米结构提高藻蓝蛋白的稳定性,从而在食品加工、生产和储运等过程中保持稳定。在其活性保持方面,通过对藻蓝蛋白进行物理、化学改性,或通过构建纳米载体递送藻蓝蛋白,以提高藻蓝蛋白的生物可利用度。此外,藻蓝蛋白具备荧光大分子的特性,在纳米壁材、金属纳米颗粒、荧光探针等领域有较大的应用空间。本综述对现有研究成果进行归纳总结,为藻蓝蛋白的开发利用提供参考。

摘要： 目的:明确新分离的一株嗜热微藻的分类地位,观察其所含藻蓝蛋白的稳定性,从而了解其藻蓝蛋白可能的应用价值。方法:采用光学显微镜进行细胞形态观察,基于16S rDNA序列建立系统发育树,从而对藻株进行分类鉴定;通过超声波破碎的方法获得藻蓝蛋白粗提液,改变温度、光照强度、pH等条件存放藻蓝蛋白溶液,用分光光度计观察溶液吸光度的变化来反映藻蓝蛋白的稳定性。结果:该藻为杆状单细胞结构,直或有时弯曲,二分裂殖,系统发育树显示该分离藻株为嗜热聚球藻属的一支。提取得到纯度为0.941,色价为196.53的藻蓝蛋白粗提物,得率为11.37%(对藻干物质)。该藻蓝蛋白在60°C保持3.5 h,色值不变;6000 lux光照7 d色值可保持在91.4%左右;在pH4.0~8.0保持3.5 h色值稳定,但在强酸和强碱性环境下藻蓝蛋白的稳定性明显下降。结论:所分离的藻株为嗜热聚球藻属的一支,其所含的藻蓝蛋白具有良好的热、光和酸碱稳定性,在食品加工领域具有良好的应用前景。

摘要： 为探究不同纯度藻蓝蛋白抗氧化动力学特点,利用2,2′-联氮-双(3-乙基苯并噻唑啉-6-磺酸)(2,2′-azino-bis(3ethylbenzothiazoline-6-sulfonic acid),ABTS)阳离子自由基法,测定并建立5种不同纯度藻蓝蛋白清除ABTS阳离子自由基的剂量、时间变化关系,并建立准一级、准二级反应动力学模型,拟合得出反应速率常数,同时分析建立反应速率常数与藻蓝蛋白纯度、色基含量及蛋白质含量的关系.结果发现,5种藻蓝蛋白均能较好地清除ABTS阳离子自由基,其清除率与藻蓝蛋白呈线性量效关系,准二级反应动力学能更好地拟合藻蓝蛋白对ABTS阳离子自由基清除率,且藻蓝蛋白清除ABTS阳离子自由基反应的动力学速率常数与藻蓝蛋白的蛋白质含量纯度成正相关,与藻蓝蛋白的色基相关性不显著或呈负相关,表明藻蓝蛋白对ABTS阳离子自由基起主要清除作用的是藻蓝蛋白中蛋白质部分.

摘要： 为深入探讨藻蓝蛋白中起抗氧化作用的基团,本实验采用铁离子总还原能力法、2,2'-联氮-双(3-乙基苯并噻唑啉-6-磺酸)(2,2'-azino-bis(3ethylbenzothiazoline-6-sulfonic acid),ABTS)阳离子自由基法、邻苯三酚自氧化法、氧自由基吸收能力法测定5种不同藻蓝蛋白的抗氧化活性并分析其抗氧化活性与蛋白质量浓度、色基含量和藻蓝蛋白纯度的关系.结果 表明,在铁离子总还原能力、ABTS阳离子自由基等以电子转移为主的抗氧化体系中,藻蓝蛋白的抗氧化活性与蛋白质量浓度呈正相关,说明在上述两种体系中,藻蓝蛋白中起抗氧化作用的主要基团是蛋白质;在邻苯三酚自氧化的活性氧体系中,藻蓝蛋白的抗氧化活性与蛋白质量浓度呈正相关,与色基含量呈负相关,表明在该体系中,藻蓝蛋白中发挥抗氧化作用的基团是蛋白质;在氧自由基吸收能力基于氢原子转移的抗氧化体系中,藻蓝蛋白的抗氧化活性与色基及纯度呈正相关,说明在该体系中,色基是藻蓝蛋白发挥抗氧化作用的主要基团.

摘要： 藻蓝蛋白是一种罕见的天然蓝色素,也是优质的植物蛋白,具有抗氧化、抗癌、抗炎、增强免疫力等生理活性.该文主要对藻蓝蛋白制备工艺、稳定化技术及生理活性等进行综述,以期为藻蓝蛋白的开发利用提供参考.

摘要： 藻蓝蛋白是螺旋藻中一种主要功能性蛋白质,能占到螺旋藻(干基)的20％,也是一种天然着色剂(CNS:08.137).根据纯度(purity,P)藻蓝蛋白分为食品级(P>0.7)、试剂级(0.74.0)等多种规格,可以广泛应用于食品、化妆品及医药等领域;但藻蓝蛋白的光、热易敏性,以及不耐受酸碱的特性,造成藻蓝蛋白的产业化应用尚未普及.本文对近5年来螺旋藻中藻蓝蛋白的提取纯化研究进展进行了回顾总结,系统分析、比较了藻蓝蛋白分离、纯化的影响因素;同时对藻蓝蛋白稳态化的研究进展进行了概述,旨在为藻蓝蛋白的精深加工、应用推广提供系统性认识.

摘要： 分子印迹聚合物材料(MIPs)已广泛用于样品前处理与传感分析.其中,核-壳结构MIPs,即在核层表面进行印迹形成壳层,不仅具有更高印迹位点利用率及更快传质、识别速率,而且更便于在MIPs中引入多种性能(如:荧光),所以备受青睐.以二氧化硅、量子点纳米粒子为核,制备了3种新型核-壳MIPs,借助量子点、有机荧光染料的光学特性,发展了高效的分子印迹荧光传感器,成功用于复杂基质中藻蓝蛋白和有机小分子污染物的快速、灵敏检测.

摘要： 随着海洋生物药学研究的不断深入,从海洋生物中寻找高效,低毒副作用的抗肿瘤药物也成为近年来肿瘤研究的新领域.螺旋藻藻蓝蛋白(C-phycocyanin,C-PC)具有抗病毒、抗氧化、抗肿瘤等多种生物学功能,有重要的开发利用价值.国内外关于藻蓝蛋白的抗肿瘤作用及其机制的研究已有报道,而关于其分离后的亚基,以及藻蓝蛋白及其亚基在新剂型中的抗肿瘤效应研究报道很少.随着生物和新剂型技术的发展和应用,获得分子量更小、抗肿瘤效应更强的藻蓝蛋白亚基,酶解产物和新制剂更具研究开发潜力,围绕藻蓝蛋白、藻蓝蛋白亚基及其相关制剂在肿瘤中的应用进行了综述.

摘要： 目的：研究藻蓝蛋白对糖尿病大鼠胰岛细胞功能的影响及其可能的机制.rn 方法：健康雄性Wistar大鼠32只,应用高脂高糖饲料喂养联合小剂量链脲佐菌素(STZ)腹腔注射方法建立2型糖尿病大鼠模型,藻蓝蛋白、二甲双胍灌胃治疗,免疫组化技术检测胰岛细胞中核因子κB (NFκB)和NFκB抑制蛋白(IκB)的表达.rn 结果：大鼠造模成功后空腹血糖明显升高,经干预治疗后,藻蓝蛋白组、二甲双胍组大鼠空腹血糖比模型组显著降低(P＜0.05).糖尿病大鼠胰岛细胞NFκB表达明显增高,IκB表达明显下降.经藻蓝蛋白和二甲双胍治疗后,大鼠胰岛细胞NFκB表达较糖尿病模型组均明显降低,而IκB表达较糖尿病组显著增强(P＜0.05).rn 结论：藻蓝蛋白可抑制2型糖尿病大鼠胰岛细胞Iκ B/NFκB通路的活性,对胰岛细胞具有一定的保护作用.

摘要： 目的：通过分析藻蓝蛋白对果蝇寿命的影响，探讨藻蓝蛋白的抗衰老作用。方法：以黑腹果蝇为研究对象,分别观察掺入藻蓝蛋白P1(0.25％、0.50％)和藻蓝蛋白P2(0.25％、0.50％)的加蛋白培养基对果蝇寿命的影响。结果：喂饲藻蓝蛋白P1和藻蓝蛋白P2的雌果蝇平均寿命天数较对照组明显延长(P＜0.01)。试验组雄果蝇平均寿命均与对照组无显著差异。结论：藻蓝蛋白可显著延长雌果蝇寿命。

摘要： 本文分析了藻蓝蛋白(PC)对体外诱导HepG2细胞损伤的保护作用,分别用CCl4和H2O2诱导HepG2细胞损伤模型,加入PC(31.25～250μg/ml)作用48h,观察细胞形态学变化,MTT法检测细胞存活率,同时检测培养上清中谷丙转氨酶(GPT)水平,测定细胞中丙二醛(MDA)和谷胱甘肽(GSH)含量,超氧化物歧化酶(SOD)活性。结果表明,PC可明显降低由CCl4或H2O2升高的HepG2细胞中MDA含量及培养上清中GPT水平,还可使CCl4或H2O2降低的细胞存活率及细胞中GSH含量和SOD活性明显升高。提示PC对体外肝细胞损伤有直接保护作用,该作用可能与其抗氧化作用有关。

摘要： 螺旋藻直线型突变株(Sp-Dz)是一种新型的藻种,它具有蛋白含量高,生长速度快,上浮性好的优点.以其为藻种进行培养,对其蛋白提取物采用DEAE-Sepharose Fast Flow柱纯化后得到藻蓝蛋白,同时采用了SDS-PAGE、紫外可见光谱、红外光谱对藻蓝蛋白产品进行表征,并测定了其抗肿瘤、抗氧化活性.研究结果表明:藻蓝蛋白的亚基分子质量为35.9 KDr,最大吸收光谱在620 nm处,二级结构中主要以α-螺旋结构为主.生物活性结果显示:藻蓝蛋白的抗氧化活性受自由基类型的影响很大,对DPPH自由基比对羟基自由基的清除作用强;对不同肿瘤细胞都有一定抑制作用,但敏感性不同,其中藻蓝蛋白对人肝细胞性肝癌细胞BEL-7402抑制效果最强.

摘要： 对鱼腥藻色素蛋白的大规模提取方法进行了研究，对提取藻蓝蛋白前样品的处理方法及其对色素产率的影响，进行了比较研究。分别用反复冻融，冷冻干燥，烘干三种方法对样品进行预处理。经0.2mol/L磷酸缓冲液反复浸提至上清液透明，结果表明，冷冻干燥法获得的藻蓝蛋白产率最高，达到43.24mg/g，烘干法产率最低，只有2.34mg/g。

摘要： 超早期溶栓疗法使血栓阻塞的脑血管再通，缺血脑组织血流恢复，对缺血性脑血管病有较好的临床疗效，但溶栓最关键的问题是要在极短的治疗时间窗(3h)内实施，超过治疗时间窗反而会加重缺血脑组织的再灌注损伤，因而限制了该疗法的应用。rn 以往的研究证实，藻蓝蛋白可明显改善大鼠脑缺血再灌注后的神经行为功能，减少脑梗死体积，抑制神经细胞凋亡和下调细胞色素C(CytC)和半胱天冬酶-3(Caspase-3)等基因表达，对神经元损伤具有一定的保护作用。本研究旨在原有基础上，进一步探讨藻蓝蛋白在脑缺血再灌注损伤中的神经保护作用和机制。

摘要： 超早期溶栓疗法使血栓阻塞的脑血管再通,缺血脑组织血流恢复,对缺血性脑血管病有较好的临床疗效,但溶栓最关键的问题是要在极短的治疗时间窗(3h)内实施,超过治疗时间窗反而会加重缺血脑组织的再灌注损伤,因而限制了该疗法的应用.这迫使人们不断地探索脑缺血再灌注损伤的病理生理和神经保护机制,寻求治疗时间窗更长、更安全有效的神经保护剂.藻蓝蛋白是一利藻蓝胆素蛋白质,由开链四吡咯化合物和脱辅蛋白通过硫链键结合,具有促进动物细胞的再生,清除自由基,抑制肿瘤,抗辐射,抗过敏,抗疲劳,抗病毒,增强免疫力和抗炎作用.以往的研究证实,藻蓝蛋白可明显改善大鼠脑缺血再灌注后的神经行为功能,减少脑梗死体积,抑制神经细胞凋亡和下调细胞色素C(CytC)和半胱天冬酶-3(Caspase-3)等基因表达,对神经元损伤具有一定的保护作用.本研究旨在原有基础上,进一步探讨藻蓝蛋白在脑缺血再灌注损伤中的神经保护作用和机制.

摘要： 立足分子印迹技术,结合刺激响应、荧光等技术,用于复杂水样与食品中酚类环境雌激素、藻蓝蛋白等的高选择分离和富集,实现其高灵敏检测.具体阐述了中空核-多孔壳温敏印迹微球的制备及其温控萃取水样和食品中双酚A、磁性核壳印迹微球的制备及其用于环境和食品中17β-雌二醇检测去除、磁性印迹微马达的合成及选择性识别和去除海水中的藻蓝蛋白、基于分子印迹光子水凝胶比色检测胆固醇、基于量子点的蛋白质介孔印迹微球的合成及用于荧光检测藻蓝蛋白、分子印迹聚合物包覆的金纳米簇对BPA的荧光传感检测。

摘要： 本发明提供一种藻蓝蛋白保护剂及其制备方法和藻蓝蛋白组合物与保湿化妆品。所述藻蓝蛋白保护剂，包括以下组分：甘油、丁二醇、氯化钠以及苯甲酸钠。本发明的藻蓝蛋白保护剂，一方面可以防止蛋白质聚集，从而减少藻蓝蛋白在溶液中沉淀；另一方面可以有效抑制细菌生长，从而使得藻蓝蛋白在溶液中能够保持原有的亮蓝色。

摘要： 本发明提供一种同时分离纯化试剂级的藻蓝蛋白与别藻蓝蛋白的方法，先将蓝藻破壁并固液分离得到藻胆蛋白粗提液，再进行两步盐析，获得沉淀后用磷酸盐缓冲液溶解，并用磷酸盐缓冲液作为透析液将溶解后的溶液透析，以获得透析后的藻胆蛋白溶液，最后进行纤维素柱层析以及羟基磷灰石柱层析，以获得了试剂级的藻蓝蛋白和试剂级的别藻蓝蛋白。本发明以水华新鲜蓝藻为原料，通过采用盐析联合柱层析分离纯化试剂级藻蓝蛋白和试剂级别藻蓝蛋白，与传统层析法工艺相比，在兼顾蛋白质回收率的前提下，能同时提取纯化两种高纯度的藻蓝蛋白和别藻蓝蛋白，提高了蓝藻细胞中高价值蛋白综合提取纯化的效率，并且可以放大。

摘要： 本发明公开一种同时分离高纯度的藻蓝蛋白和别藻蓝蛋白的方法与应用。本发明将螺旋藻干粉反复冻融，超声破碎，离心，上清为藻胆蛋白粗提液；接着加入硫酸铵，饱和度为25～35％时取上清；再加入硫酸铵，饱和度为60～70％时取沉淀，透析沉淀，得到初步纯化的藻胆蛋白提取液，将其上样到羟基磷灰石柱子；收集含0.1～0.2M氯化钠的pH6.5～7.2、0.02～0.03M磷酸盐缓冲溶液和含0.1～0.2M氯化钠的pH6.5～7.2、0.1～0.12M磷酸盐缓冲溶液，前者为藻蓝蛋白，后者为别藻蓝蛋白。该制备方法能同时获得纯化因子达到4.5的藻蓝蛋白和3的别藻蓝蛋白及其含硒、碲类似物，并对其纯化规模进行放大，一次层析可获得克级的高纯度蛋白，大大降低纯化成本，能用于生产藻蓝蛋白和别藻蓝蛋白。

摘要： 一种从蓝藻中快速分离纯化C-藻蓝蛋白和异藻蓝蛋白的方法，属于藻蓝蛋白分离纯化技术领域。本发明应用经冻溶和低离子强度溶涨快速提取C-藻蓝蛋白和异藻蓝蛋白，然后经硫酸铵沉淀进行初步纯化，最后利用琼脂糖凝胶FF(DEAE Sepharose Fast Flow)离子交换层析技术，用恒定的离子强度、pH梯度的缓冲液进行洗脱，一步法可以得到高纯度的C-藻蓝蛋白和异藻蓝蛋白。本方法操作简便，省时省力，对设备要求简单，得率高并且大大降低了CPC和APC的制备成本，从而为将CPC和APC应用于超灵敏的生物医学检测奠定了基础。

摘要： 本发明提供一种同时制备藻蓝蛋白和别藻蓝蛋白的方法，其特征在于采用如下步骤：(1)制备螺旋藻藻胆蛋白粗提物，(2)羟基磷灰石装柱及平衡层析柱，(3)分别洗脱藻蓝蛋白和别藻蓝蛋白，(4)洗脱液的浓缩、脱盐及冷冻干燥，最终获得藻蓝蛋白和别藻蓝蛋白。本发明以人工养殖的钝顶螺旋藻纯藻粉为原料，采用羟基磷灰石柱层析法一次性分离了藻蓝蛋白和别藻蓝蛋白两种蛋白，作为生产原料的螺旋藻藻粉则可以直接从市场上批量购买，价格低廉且纯度高，简化了从鲜活藻体中制备藻蓝蛋白和别藻蓝蛋白的繁琐步骤，用作柱料的羟基磷灰石可以自制，简单易行，且降低了生产成本，是目前较为理想的同时制备藻蓝蛋白和别藻蓝蛋白的方法。

摘要： 本发明提供一种藻蓝蛋白保护剂及其制备方法和藻蓝蛋白组合物与保湿化妆品。所述藻蓝蛋白保护剂，包括以下组分：甘油、丁二醇、氯化钠以及苯甲酸钠。本发明的藻蓝蛋白保护剂，一方面可以防止蛋白质聚集，从而减少藻蓝蛋白在溶液中沉淀；另一方面可以有效抑制细菌生长，从而使得藻蓝蛋白在溶液中能够保持原有的亮蓝色。

摘要： 本发明提供一种同时分离纯化试剂级的藻蓝蛋白与别藻蓝蛋白的方法，先将蓝藻破壁并固液分离得到藻胆蛋白粗提液，再进行两步盐析，获得沉淀后用磷酸盐缓冲液溶解，并用磷酸盐缓冲液作为透析液将溶解后的溶液透析，以获得透析后的藻胆蛋白溶液，最后进行纤维素柱层析以及羟基磷灰石柱层析，以获得了试剂级的藻蓝蛋白和试剂级的别藻蓝蛋白。本发明以水华新鲜蓝藻为原料，通过采用盐析联合柱层析分离纯化试剂级藻蓝蛋白和试剂级别藻蓝蛋白，与传统层析法工艺相比，在兼顾蛋白质回收率的前提下，能同时提取纯化两种高纯度的藻蓝蛋白和别藻蓝蛋白，提高了蓝藻细胞中高价值蛋白综合提取纯化的效率，并且可以放大。

摘要： 本发明公开一种同时分离高纯度的藻蓝蛋白和别藻蓝蛋白的方法与应用。本发明将螺旋藻干粉反复冻融，超声破碎，离心，上清为藻胆蛋白粗提液；接着加入硫酸铵，饱和度为25～35％时取上清；再加入硫酸铵，饱和度为60～70％时取沉淀，透析沉淀，得到初步纯化的藻胆蛋白提取液，将其上样到羟基磷灰石柱子；收集含0.1～0.2M氯化钠的pH6.5～7.2、0.02～0.03M磷酸盐缓冲溶液和含0.1～0.2M氯化钠的pH6.5～7.2、0.1～0.12M磷酸盐缓冲溶液，前者为藻蓝蛋白，后者为别藻蓝蛋白。该制备方法能同时获得纯化因子达到4.5的藻蓝蛋白和3的别藻蓝蛋白及其含硒、碲类似物，并对其纯化规模进行放大，一次层析可获得克级的高纯度蛋白，大大降低纯化成本，能用于生产藻蓝蛋白和别藻蓝蛋白。

摘要： 一种从蓝藻中快速分离纯化C－藻蓝蛋白和异藻蓝蛋白的方法，属于藻蓝蛋白分离纯化技术领域。本发明应用经冻溶和低离子强度溶涨快速提取C－藻蓝蛋白和异藻蓝蛋白，然后经硫酸铵沉淀进行初步纯化，最后利用琼脂糖凝胶FF(DEAE Sepharose Fast Flow)离子交换层析技术，用恒定的离子强度、pH梯度的缓冲液进行洗脱，一步法可以得到高纯度的C－藻蓝蛋白和异藻蓝蛋白。本方法操作简便，省时省力，对设备要求简单，得率高并且大大降低了CPC和APC的制备成本，从而为将CPC和APC应用于超灵敏的生物医学检测奠定了基础。

摘要： 本发明提供一种同时制备藻蓝蛋白和别藻蓝蛋白的方法，其特征在于采用如下步骤：(1)制备藻胆蛋白粗提物，(2)羟基磷灰石装柱及平衡层析柱，(3)分别洗脱藻蓝蛋白和别藻蓝蛋白，(4)洗脱液的浓缩、脱盐及冷冻干燥，最终获得藻蓝蛋白和别藻蓝蛋白。本发明以人工养殖的钝顶螺旋藻纯藻粉为原料，采用羟基磷灰石柱层析法一次性分离了藻蓝蛋白和别藻蓝蛋白两种蛋白，作为生产原料的螺旋藻藻粉则可以直接从市场上批量购买，价格低廉且纯度高，简化了从鲜活藻体中制备藻蓝蛋白和别藻蓝蛋白的繁琐步骤，用作柱料的羟基磷灰石可以自制，简单易行，且降低了生产成本，是目前较为理想的同时制备藻蓝蛋白和别藻蓝蛋白的方法。