脂肪细胞分化

摘要： 长链非编码RNA(long non-coding RNA,lncRNA)是一类具有较高组织细胞特异性、不具有编码功能的RNA片段,广泛参与各种生物反应过程。脂肪性状是肉用家畜的重要经济性状,其沉积部位和数量是影响肉质的重要因素。近些年研究表明lncRNA分别从转录、转录后和表观遗传等不同作用水平调控动物脂肪细胞分化。本文在概述lncRNA生物学特性的基础上,对家畜脂肪细胞分化相关的lncRNA及可能的作用机制研究进行综述,以期为构建动物脂肪细胞分化的调控网络提供参考。

摘要： 牧医所揭示绵羊胚胎期脂尾发育模式近日,中国农业科学院北京畜牧兽医研究所畜禽种质资源保护与利用科技创新团队研究揭示了绵羊胚胎期脂尾发育模式,探明了尾脂发育关键时间节点,发现了调控脂肪细胞分化和脂肪沉积的重要基因。

摘要： 民猪具有良好的抗寒能力,研究表观遗传对民猪脂肪细胞分化的影响,揭示民猪脂肪细胞分化的分子机制,将为探索民猪抗寒性状形成原因提供依据。在体外培养的民猪前脂肪细胞培养液中分别添加不同浓度5-Aza-CdR和TSA处理一定时间,MTT法和流式细胞术检测前脂肪细胞活率,确定最适处理浓度;用最适浓度的5-Aza-CdR和TSA处理前脂肪细胞诱导形成成熟脂肪细胞后,分别检测细胞中表观遗传相关基因DNMT1、DNMT3B、ALDH1A3和ALDH1A9,以及脂肪细胞棕色化相关基因ZNF423、PPARα、NCOR1和EBF2的mRNA相对表达量,并用油红O染色观察脂滴形成情况。结果表明,在本实验研究条件下,500 nmol/L的5-Aza-CdR处理48 h和150 nmol/L的TSA处理24 h是对前脂肪细胞生长影响最小的最高浓度,作为后续实验的细胞处理浓度。5-Aza-CdR处理前脂肪细胞后能够降低成熟脂肪细胞中DNMT1、DNMT3B、ZNF423、PPARα、NCOR1和EBF2基因的mRNA相对表达量(P<0.05),并抑制脂滴生成。TSA处理后,成熟脂肪细胞中ALDH1A3和ALDH1A9基因的mRNA相对表达量略有降低,ZNF423、PPARα、NCOR1和EBF2基因的mRNA相对表达量上升(P<0.05)。综上所述,猪脂肪细胞的分化受到表观遗传试剂5-Aza-CdR和TSA的影响,5-Aza-CdR处理会促进前脂肪细胞向棕色脂肪方向分化,同时抑制白色脂肪形成和沉积,而TSA的作用则正好相反。

摘要： 目的 探究异补骨脂素对于促进大鼠骨髓间充质干细胞向成骨分化及抑制其向脂肪细胞分化的实际作用.方法 从动物实验有限公司处购买10只实验用清洁级Wistar大鼠,杀死后取双侧股骨和胫骨,获得骨髓,并提取充质干细胞.由研究组自行制备成骨细胞诱导溶液以及成脂细胞抑制诱导溶液后.其中成骨细胞诱导实验,将异补骨脂素浓度分为0.1、1、10μmol/L共3组进行,作为补充试验的补骨脂素组,浓度为10μmol/L;成脂细胞抑制诱导实验中的异补骨脂素浓度为1μmol/L.结果 异补骨脂素对大鼠骨髓间充质干细胞的CFU-f、ALP阳性CFU-f的促进作用十分明显,且随着异补骨脂素添加计量的增多,单位时间内CFU-f的形成效率也呈现显著的上升趋势.当浓度达到1μmol/L时,作用程度达到最大值,再度提升浓度,CFU-f的形成效率并未出现显著提升.与未接受任何定向引导的常规干细胞相比,实验组干细胞脂肪滴的数量呈显著下降的趋势,且脂肪细胞体积明显减少.结论 异补骨脂素对促进大鼠骨髓间充质干细胞向成骨细胞分化并抑制其向脂肪细胞分化的作用较为明显.

摘要： 为研究小鼠的蛋白磷酸酶1调节亚基3C(protein phosphatase 1 regulatory subunit 3C,PPP1R3C)基因在脂肪细胞分化中的功能,本研究以小鼠3T3-L1前脂肪细胞为材料,通过基因过表达、干扰及实时定量PCR等实验,分析了PPP1R3C基因对成脂分化的影响,并初步探讨了它对成脂分化影响的机制.结果显示,在3T3-L1前脂肪细胞中,过表达PPP1R3C基因,可促进脂肪细胞分化和成脂标志基因的表达;而敲低PPP1R3C基因的表达,则抑制脂肪细胞的分化和成脂标志基因的表达.进一步研究发现在3T3-L1中敲低固醇调节元件结合转录因子1(sterol regulatory element binding transcription factor 1,SREBP1)基因的表达,则PPP1R3C基因的表达也下调,提示PPP1R3C影响成脂分化可能是通过SREBP1对PPP1R3C的调控来实现的.以上结果表明,PPP1R3C对3T3-L1前脂肪细胞分化具有促进作用,PPP1R3C是一个新的成脂分化调控因子.

摘要： 为探讨新橙皮苷对脂肪细胞脂肪形成的影响及其作用机制,采用MTS法检测新橙皮苷对3T3-L1前脂肪细胞的细胞活力的影响,确定新橙皮苷的作用浓度后,油红O染色法和分光光度法测定3T3-L1脂肪细胞的分化及胞内甘油三酯的含量,RT-PCR测定脂肪形成相关基因CCAAT增强子结合蛋白 α(CCAAT/enhancer binding proteinα,C/EBPα)和过氧化物酶体增殖激活受体 γ(Peroxisome proliferators-activated receptorγ,PPARγ)mRNA表达,Western蛋白印迹法检测蛋白激酶B(Protein kinase B,PKB/Akt)、糖原合成酶激酶3β(Glycogen synthase kinase3β,GSK3β)和糖原合成酶(Glycogen synthase,GS)的磷酸化水平;利用GSK3β选择性的抑制剂LiCl作用3T3-L1脂肪细胞后,检测新橙皮苷对3T3-L1细胞分化、胞内甘油三酯含量、C/EBPα、PPARγ及aP2蛋白表达的影响.结果表明,新橙皮苷能极显著抑制脂肪细胞分化和胞内甘油三酯的形成(P<0.01),激活Akt信号通路,促进p-Akt和p-GSK3β水平增加,极显著抑制C/EBPα、PPARγ、aP2 mRNA和蛋白表达(P<0.01).新橙皮苷的这些影响部分地被GSK3β抑制剂LiCl所抑制(P<0.01).新橙皮苷能够通过激活Akt/GSK3β信号通路抑制脂肪细胞分化.

摘要： 目的 研究2,2',4,4'-四溴联苯醚(BDE-47)对小鼠胚胎成纤维细胞3T3-L1分化的影响,为揭示环境肥胖因素的作用规律提供依据.方法 将3T3-L1细胞分为5组BDE-47干预组(25、18.75、12.5、7.5、2.5μmol/L)、阳性对照组(加1 μmol/L 2,4-噻唑烷二酮)和阴性对照组(加0.1％二甲基亚砜),诱导分化第8 d油红O染色处理并检测吸光度值(OD)观察脂肪细胞脂滴聚集情况;采用三酰甘油(TG)酶法测定细胞培养液的TG含量;采用RT-PCR法测定脂联素和过氧化物酶体增殖子激活受体γ(PPARγ)的mRNA表达.结果 7组3T3-L1细胞油红O染色阳性面积、OD值、TG含量及脂联素和PPARγ的mRNA表达量差异均有统计学意义(P＜0.05).不同浓度BDE-47组的油红O染色阳性面积、OD值均高于阴性对照组(P＜0.05).18.75 μmol/L BDE-47组TG含量高于阴性对照组(P＜0.05).25、18.75、12.5、7.5 μmol/L BDE-47组和阳性对照组PPARγ的mRNA相对表达量均高于阴性对照组(P＜0.05);12.5 μmol/L BDE-47组 PPARγ 的mRNA相对表达量均高于25、18.75、7.5、2.5 μmol/L BDE-47组和阳性对照组(P＜0.05).12.5、7.5 μmol/L BDE-47组和阳性对照组脂联素的mRNA相对表达量均高于阴性对照组(P＜0.05);12.5 μmol/L BDE-47组脂联素的 mRNA 相对表达量均高于25、18.75、2.5 μmol/L BDE-47组(P＜0.05).不同浓度BDE-47组的PPARγ和脂联素mRNA表达量近似倒"U"型分布.结论 BDE-47对小鼠3T3-L1细胞分化起促进作用,低浓度的BDE-47可能通过激活PPARγ活性诱导脂肪细胞分化.

摘要： 脂肪细胞定向和分化因子1(ADD1)是1种重要的核转录因子,在脂肪细胞的分化过程中起着重要作用.文章介绍了ADD1基因的生物学特点,以及对畜禽ADD1基因的研究进展,为深入研究ADD1基因的功能提供参考.

摘要： 分泌卷曲相关蛋白4(SFRP4)是Wnt信号通路的抑制因子,在人类个体发育过程中发挥重要作用。同时,SFRP4基因表达和蛋白分泌异常导致机体发生病理变化。本文介绍了SFRP4基因和蛋白的结构特征、组织分布以及胚胎发育过程中的表达变化。临床研究发现,糖尿病患者血清中SFRP4蛋白水平显著升高,其与胰岛素分泌呈负相关。作为Wnt信号通路的抑制因子,SFRP4在调控脂肪形成、糖代谢以及胰岛素抵抗等生理和病理生理过程中扮演着重要角色。近年来,SFRP4在肥胖、脂质代谢紊乱以及糖尿病发生中的病理作用引起了广泛关注,并取得了重要进展。对其进一步系统深入的研究,不仅可以揭示肥胖、脂质代谢紊乱和糖尿病发生的新机制,也有望发现临床药物治疗新靶点。

摘要： Krupple like factor 3(KLF3)，又叫碱性KLF因子(bKLF)，是KLFs蛋白家族的一个成员。KLF3在哺乳动物脂肪细胞分化中发挥重要作用。KLF3通过其核心区域PXDLT(S)motif与辅助抑制因子C-末端结合蛋白(CtBP)结合，形成KLF3-CtBP复合体，发挥转录调控作用。KLF3调控脂肪细胞分化的机制还不清楚，敲除KLF3后C/EBPα和PPARγ基因表达显著上调，有学者提出KLF3可能通过形成KLF3-CtBP复合体抑制C/EBPα基因表达，但目前尚无直接证据。KLF3基因在鸟类中还没有研究报道。

摘要： 介绍了应用抑制性消减杂交技术构建诱导分化前及诱导分化后的人前体脂肪细胞系SW872细胞差异表达基因的cDNA文库的技术方法，并成功筛选、克隆脂肪细胞分化差异性表达基因，为从分子水平研究肥胖的发生发展机制提供线索。

摘要： 脂肪细胞分化除甘油三酷大量沉积外还伴随着线粒体的大量增殖及氧化呼吸功能的增强，但这一现象在前体脂肪细胞分化过程中的意义尚不明确，线粒体发育规律还不明晰。PGC-1p是转录辅助活化因子PGC-1家族中的成员。PGC-1日在抵抗高脂日粮诱导的肥胖，肝脏脂肪合成以及肌肉细胞、肝细胞和棕色脂肪细胞线粒体生物合成等方面发挥着重要作用。研究表明，无论在白色还是棕色脂肪细胞分化过程中，PGC-1p表达均明显升高，这提示PGC-Ip与线粒体发育及脂肪细胞的分化之间存在着潜在的联系。但PGC-1p在白色脂肪细胞线粒体发育及脂肪细胞分化中的作用及其机理的研究尚未见报道。本文分离培养18日龄SD雄性大鼠前体脂肪细胞，采用荧光免疫组化、流式细胞术、酶活测定、SQ RT-PCR,电镜及HPLC技术等方法研究了细胞分化过程中线粒体的发育规律及PGC-1家族和线粒体氧化呼吸相关基因的时序表达变化;采用油红O染色及提取法、Western blotting, SQ RT-PCR,超表达、化学合成、脂质体转染等技术检测了超表达和沉默PGC-1p基因后对前体脂肪细胞线粒体发育相关基因及ATP生成、分化转录因子和关键基因及甘油三酯合成的影响。

摘要： Bone morphogenetic protein 7(BMP7)是骨形态发生蛋白(Bonemorphogenetic pro-teins，BMPs)家族的一员，研究发现BMP7基因在哺乳动物的棕色脂肪组织分化调控中发挥重要作用，然而目前还没有BMP7基因作用于鸟类脂肪细胞分化的研究，本研究以东北农业大学肉鸡高、低脂系和鸡前脂肪细胞为实验材料，采用半定量RT-PCR的方法分析BMP7基因在脂肪细胞分化各个时间点的表达规律，结合BMP7基因序列分析结果，推测BMP7在鸡脂肪细胞分化过程具有一定的调控作用。

摘要： 过量体脂是代谢综合征决定因素之一,脂肪组织胰岛素抵抗在其中发挥着重要的作用。白色脂肪组织中肾素-血管紧张素系统(Renin-AngiotensinSystem,RAS)各成分可促进肥胖及肥胖相关性病变的发生与发展,但其中机制不明且相关研究中存在着相互矛盾的结果。可能的原因有二:一是种属特异性，即多数研究中应用的鼠3T3-L1前脂肪细胞株与人前脂肪细胞之间存在的反应性差异。二是部位特异性，即研究较多的人外周前脂肪细胞与内脏来源的前脂肪细胞之间的差异。基于上述原因，本项研究观察了RAS阻断剂对原代培养的人内脏和外周前脂肪细胞分化及其胰岛素敏感性的影响。

摘要： 目的：观察胰岛素受体底物-1表达受阻对小鼠3T3-L1前脂肪细胞分化和PPARγ表达的影响。rn 方法：针对小鼠IRS-1基因开放阅读框上的2个区域合成shRNA(M和MH),以pGenesil-1 vector为载体构建带绿色荧光蛋白(Green Fluorescence Protein,GFP)靶标的shRNA质粒。以脂质体Lipofectamin TM 2000介导转染3T3-L1前脂肪细胞,并设阴性对照(HK)载体转染组。细胞转染后,G418筛选稳定表达的阳性克隆并通过Western blot鉴定。应用3-异丁基-1-甲基黄噤呤(3-isobutyl-1-methylxanthine,lBMx)0.5mM,地塞米松(Dexamethasone,DEX)10-6M和胰岛素(Insulin,Ins)5 μg/mL分别诱导小鼠3T3-L1前脂肪细胞空白对照组、阴性对照(HK)载体转染组、M和MH转染组分化,在诱导分化的不同时间点收集细胞。用Western Blot检测PPARγ的表达。脂肪细胞内脂滴用油红O染色观察。rn 结果：与空白对照组、阴性对照组和转染M组IRS-1 shRNA质粒的3T3-L1前脂肪细胞相比,转染MH组IRS-1shRNA质粒的3T3-L1前脂肪细胞IRS-1蛋白表达水平降低70％以上;而MH转染组细胞PPARY蛋白的表达与前三组3T3-L1前脂肪细胞比较无改变。前三组3T3-L1前脂肪细胞诱导分化为成熟脂肪细胞成功，PPARy蛋白的表达存脂肪细胞分化成熟过程中逐渐增高，油红O染色显示，随着脂肪细胞的分化成熟，桔红色脂滴逐渐增多；而转染MH组IRS-1 shRNA质粒的3T3-L1前脂肪细胞经诱导，油红O染色桔红色脂滴显著减少，直到分化的第8天，才见少许桔红色脂滴，且PPARγ蛋白的表达无变化。rn 结论：IRS-1基因沉默后可抑制3T3-L1前脂肪细胞的分化，并在分化过程中抑制PPARγ的表达,说明IRS-1通过调节PPARγ的表达或与PPARγ共同作用在3T3-L1前脂肪细胞的分化中发挥决定性作用。

摘要： 目的:研究从中国传统中药地黄中得到的粗提物TCM对3T3-L1脂肪细胞分化过程的影响,探讨可能的分子机制. 方法:用3T3-L1前脂肪细胞株建立成熟的体外诱导脂肪细胞分化的药理模型,通过细胞形态学直接观察、核酸斑点杂交、RT-PCR及WesternBlot等分子生物学技术检测TCM对脂肪细胞分化的影响和对分化过程中转录调控因子基因表达的影响以及对这些因子调控的脂类代谢关键酶基因表达的影响. 结果:TCM处理组3T3-L1脂肪细胞分化程度明显低于对照组,并随TCM浓度升高而加强,TCM在mRNA和蛋白水平抑制脂肪细胞转录因子C/EBPα和脂肪细胞特征蛋白422/aP2的表达,TCM促进另一特征基因leptin的mRNA表达. 结论:TCM抑制3T3-L1脂肪细胞的分化过程,可能是通过抑制转录因子C/EBPα进而抑制脂肪细胞特征基因的表达。

摘要： 目的：探讨穿心莲内酯抑制脂肪细胞分化和脂滴堆积作用及机制.方法：将不同浓度穿心莲内酯分别作用与3T3-L1脂肪细胞,采用高内涵细胞成像技术,分析穿心莲内酯对脂肪脂滴形成的作用,以及对PPARγ和C/EBPα表达的影响.结果：穿心莲内酯剂量依赖降低脂滴堆积,在30μM显著降低PPARγ和C/EBPα的表达(P<0.0001).结论：穿心莲内酯通过降低PPARγ-C/EBPα表达抑制脂肪细胞分化,降低脂滴过度堆积.

摘要： microRNAs(miRNAs)是一类长度为18～26nt的非编码调控单链小分子RNA，一般来源于染色体的非编码区域，由一段具有发卡环结构的长度为70～80nt的miRNA前体(pre-miRNA)剪切后生成，通过与靶mRNA特异性的碱基配对引起靶mPNA的降解或者抑制其翻译，从而对基因进行转录后表达的调控。近年来miRNA的功能和作用成为分子生物学界关注的重点，它参与生命过程中一系列重要进程，包括早期胚胎发育、细胞增殖、细胞凋亡、细胞死亡、脂肪代谢等生命活动，它在表达上具有组织和时间上的特异性。是调节其他功能基因表达的重要调控分子。已有的研究证实，一些miRNAs在脂肪分化过程中起着重要的作用，本文旨在探讨miR-23a在脂肪分化过程中的作用。

摘要： 2型糖尿病是一个严重的、全球性的慢性疾病,遗传和环境等因素的改变可导致2型糖尿病的发生。尽管胰岛素抵抗(insulin resistance,IR)被认为贯穿2型糖尿病发生、发展的全过程,但其形成的主要病理机制还不十分清楚。微小RNA(miRNAs)是一类内源性非蛋白编码的长度约为20～25 nt的小分子RNA,能在转录后水平调节基因的表达。近年来研究发现miRNAs参与生命过程中一系列的重要进程,如个体发育、器官形成、细胞分化、增殖与凋亡等生物学过程。特别是近年发现miRNAs参与2型糖尿病发生发展的调节。作者采用高糖高胰岛素诱导3T3-L1脂肪细胞胰岛素抵抗模型，通过miRNAs芯片检测，发现脂肪细胞和胰岛素抵抗脂肪细胞中存在79个差异表达的miANAs ；应用生物信息学方法，筛选了3个可能与IR相关的miRNAs，并分析它们可能作用于共同的靶基因PI3K P85 (Pik3r1)。

摘要： 本发明属于动物细胞培养技术领域，具体涉及一种利用猪去分化脂肪细胞诱导分化形成骨骼肌细胞的方法。本发明通过胶原酶消化法分离猪皮下脂肪组织的成熟脂肪细胞，去分化形成去分化脂肪细胞(DFAT细胞)。DFAT细胞与间充质干细胞(mesenchymal stem cells,MSCs)具有相似的功能特性，能够在体外高效增殖和诱导多向分化。另外，本发明成功将猪DFAT细胞在体外利用半乳糖凝集素‑1(Galectin‑1)蛋白的诱导，分化形成能够表达骨骼肌细胞特异性标志分子的多核细胞。

摘要： 本发明提供了一种小鼠前脂肪细胞3T3‑L1的诱导分化剂及诱导分化方法。所述的诱导分化剂组成为：3‑异丁基‑1‑甲基黄嘌呤，胰岛素，地塞米松，罗格列酮，FBS。诱导分化方法为：3T3‑L1细胞常规复苏培养后用含有所述诱导分化剂的高糖DMEM培养液培养，再用含胰岛素和10％FBS的高糖DMEM培养液培养，之后用含10％FBS的高糖DMEM培养液半液换液法培养。本发明的方法分化周期短，仅为6‑7天，前脂肪细胞转化率高，且细胞分化一致，将极大地促进脂肪代谢疾病研究的开展。

摘要： 本发明公开了一种猪成熟脂肪细胞快速去分化为前体脂肪细胞的培养方法，包括以下步骤：a.猪成熟脂肪细胞的分离；b.天花板培养法去分化猪成熟脂肪细胞；c.去分化脂肪细胞的传代培养。本发明提供的方法能够廉价、快速而高效的获得大量去分化的脂肪细胞，所使用的培养基价格低廉，去分化的代价较低，可以大范围的推广使用。

摘要： 本发明属于动物细胞培养技术领域，具体涉及一种利用猪去分化脂肪细胞诱导分化形成骨骼肌细胞的方法。本发明通过胶原酶消化法分离猪皮下脂肪组织的成熟脂肪细胞，去分化形成去分化脂肪细胞(DFAT细胞)。DFAT细胞与间充质干细胞(mesenchymal stem cells,MSCs)具有相似的功能特性，能够在体外高效增殖和诱导多向分化。另外，本发明成功将猪DFAT细胞在体外利用半乳糖凝集素-1(Galectin-1)蛋白的诱导，分化形成能够表达骨骼肌细胞特异性标志分子的多核细胞。

摘要： 本发明涉及生物医学领域，具体地说是涉及将来自脂肪组织的干细胞在体外向脂肪细胞定向诱导分化的方法，利用此方法可提供大量的细胞，用于组织工程脂肪组织的构建，制备弥补软组织凹陷、组织修复以及正常组织的填充物。应用本方法得到的脂肪细胞群，不仅可以用于面部皮下凹陷性缺损或畸形的修复、身体其他部位软组织凹陷的填充、生殖器的改型塑造填充，还可以用于膨体、硅胶片、人工骨粉填充后仍留存少部分凹陷的矫正及美容。因此，市场价值潜力巨大，具有广阔的应用前景。

摘要： 本发明提供了一种小鼠前脂肪细胞3T3‑L1的诱导分化剂及诱导分化方法。所述的诱导分化剂组成为：3‑异丁基‑1‑甲基黄嘌呤，胰岛素，地塞米松，罗格列酮，FBS。诱导分化方法为：3T3‑L1细胞常规复苏培养后用含有所述诱导分化剂的高糖DMEM培养液培养，再用含胰岛素和10％FBS的高糖DMEM培养液培养，之后用含10％FBS的高糖DMEM培养液半液换液法培养。本发明的方法分化周期短，仅为6‑7天，前脂肪细胞转化率高，且细胞分化一致，将极大地促进脂肪代谢疾病研究的开展。

摘要： 本公开内容涉及具有促进成骨细胞分化和抑制脂肪细胞分化的活性的化合物及其制备方法。本公开内容的新型化合物增加参与成骨细胞分化的基因ALP的表达，调节参与脂肪细胞分化的基因PPARγ、aP2和CD36的表达，增加卵巢切除的骨质疏松症动物模型的骨矿物质密度(BMD)，并且减少骨髓中的脂肪细胞。因此，该组合物可以用作可用于代谢性骨病或肥胖症的药物的活性成分。

摘要： 提供作为裸藻提取物新使用方法的新的脂肪细胞分化抑制剂、PPARγ表达抑制剂、C/EBPα表达抑制剂、用于抑制脂肪细胞分化的食品组合物以及用于抑制脂肪细胞的化妆材料组合物。新的脂肪细胞分化抑制剂、PPARγ表达抑制剂、C/EBPα表达抑制剂、用于抑制脂肪细胞分化的食品组合物以及用于抑制脂肪细胞分化的化妆材料组合物含有裸藻水性溶剂提取物作为活性成分。裸藻水性溶剂提取物可以是例如裸藻水提取物或热水提取物。

摘要： 本发明提供一种诱导大鼠骨髓间充质干细胞向脂肪细胞分化的试剂盒及方法。该试剂盒包括脂肪细胞诱导培养液和脂肪细胞鉴定液。诱导培养液包括细胞培养液A、细胞培养液B、细胞培养液C、细胞培养液D、细胞培养液E。脂肪细胞鉴定液包括细胞固定液、染色剂、洗涤剂A和洗涤剂B。所述细胞培养液A为α-MEM液体培养基；细胞培养液B为胎牛血清；细胞培养液C为地塞米松溶液；细胞培养液D为1-甲基-3-异丁基黄嘌呤溶液；细胞培养液E为胰岛素溶液；细胞固定剂为多聚甲醛溶液；染色剂为油红O溶液；洗涤剂A为60％异丙醇溶液；洗涤剂B为双蒸水。

摘要： 本公开内容涉及具有促进成骨细胞分化和抑制脂肪细胞分化的活性的化合物及其制备方法。本公开内容的新型化合物增加参与成骨细胞分化的基因ALP的表达，调节参与脂肪细胞分化的基因PPARγ、aP2和CD36的表达，增加卵巢切除的骨质疏松症动物模型的骨矿物质密度(BMD)，并且减少骨髓中的脂肪细胞。因此，该组合物可以用作可用于代谢性骨病或肥胖症的药物或保健功能食品的活性成分。