耶尔森菌

摘要： 目的 了解北京市市售生禽肉及社区居民冰箱中耶尔森菌污染状况、生物型、血清型、毒力基因携带情况、抗生素敏感性以及分子特征.方法 分批采集北京市区超市和农贸市场冷冻冷藏生禽肉60件和同期社区居民冰箱涂抹60件,进行耶尔森菌病原学检测.对分离菌株进行生物分型、血清凝集、PCR毒力基因检测、抗生素敏感性、PFGE分子分型等研究.结果 生禽肉和居民冰箱耶尔森菌检出率分别为21.67％(13/60)和6.67％(4/60).17株耶尔森菌对氯霉素、环丙沙星等10种抗生素100％敏感,对头孢唑林、氨苄西林耐药率较高,分别为76.47％(13/17)、52.94％(9/17).2株小肠结肠炎耶尔森菌对11种抗生素耐药.除2株中间耶尔森菌不能被NotI酶切外,其他15株耶尔森菌得到14种PFGE带型,相似度为0～100％.结论 耶尔森菌是北京市市售生禽肉及社区居民冰箱潜在污染源,对头孢唑林、氨苄西林耐药率较高,PFGE带型多态性分布.

摘要： 冰箱到底有多脏?全球卫生理事协会发布的《家庭卫生报告》中指出,家里最脏的地方,排名第一的是浴室密封胶,第二就是冰箱内部,平均每平方厘米有1140万个细菌,远超马桶。想不到吧?我们每天吃下去的食物,竟然存放在这样一个细菌的大本营里。冰箱里,藏着致病菌冰箱里,藏着很多能引起胃肠炎症状的细菌,如沙门氏菌、李斯特菌、大肠杆菌、金色葡萄球菌、耶尔森菌、霉菌等。

摘要： 目的:探究腹泻粪便中小肠结肠炎耶尔森菌检验的价值结果评价.方法:本次实验研究对象为感染性腹泻患者32例,本次实验的研究时间为2015年6月到2018年6月间,根据患者的检测方法不同进行分组,分为实验组与对照组,每组患者为16例,实验组患者采用RT-PCT方法检验,对照组患者采用培养法进行检验,对比两组患者的阳性检出率.结果:实验组患者的阳性检出率与对照组患者相比显著较高,统计学意义存在(P<0.05).结论:采用RT-PCR检验腹泻粪便中小肠结肠炎耶尔森菌阳性检出率较高,利于确诊患者腹泻疾病的类型,该种检测方式值得在临床中推广.

摘要： 目的探讨小肠结肠炎腹泻不同检验方法对粪便中耶尔森菌检查结果。方法对59例患者实施不同的检查方法,分析检查方式的临床价值。收集患者粪便,放置到Cary-Blair保存液中进行存放,抽取标本0.5g,加入氯化钠注射液,剂量为50mL混合之后,放置到菌液中实施培养常规培养法以及RT-PCR方式培养。结果检查阳性率方面,RT-PCR对疾病阳性率检出率33.90%高于常规培养阳性检出率16.95%,两组比较,存在一定差异,具有统计学意义(P<0.05)。RT-PCR法培养阳性中男女患病比例,并发症发生率与RT-PCR法培养阴性数据比较差异有统计学意义,P<0.05。结论针对小肠结肠炎腹泻患者实施不同方法对其粪便中的耶尔森菌进行检验可发现,RT-PCR整体诊断价值高,检出率高,有利于为医师提供诊断依据,从而实施科学、合理治疗,符合临床需求,值得推广。

摘要： 目的 探讨小肠结肠炎腹泻不同检验方法对粪便中耶尔森菌检查结果.方法 对59例患者实施不同的检查方法,分析检查方式的临床价值.收集患者粪便,放置到Cary-Blair保存液中进行存放,抽取标本0.5 g,加入氯化钠注射液,剂量为50mL混合之后,放置到菌液中实施培养常规培养法以及RT-PCR方式培养.结果 检查阳性率方面,RT-PCR对疾病阳性率检出率33.90％高于常规培养阳性检出率16.95％,两组比较,存在一定差异,具有统计学意义(P＜0.05).RT-PCR法培养阳性中男女患病比例,并发症发生率与RT-PCR法培养阴性数据比较差异有统计学意义,P＜0.05.结论 针对小肠结肠炎腹泻患者实施不同方法对其粪便中的耶尔森菌进行检验可发现,RT-PCR整体诊断价值高,检出率高,有利于为医师提供诊断依据,从而实施科学、合理治疗,符合临床需求,值得推广.

摘要： 目的:比较不同检验方法对腹泻患者粪便中小肠结肠炎耶尔森菌的检验效果,为临床诊断提供依据。方法:选择2016年1月至2018年5月期间在商丘市立医院接受检验的150例腹泻患者作为研究对象。采用随机数据表法将所有患者分为观察组和对照组,对照组患者样品采用传统培养的方法进行检验,观察组患者样品采取实时荧光定量聚合酶链式反应(RT–PCR)法进行检验,比较两组患者样本小肠结肠炎耶尔森菌检验阳性率。结果:观察组患者样本检出率高达78.67%,而对照组仅为46.67%,两组比较,差异具有统计学意义(P<0.05)。结论:用RT–PCR检验法检验腹泻患者粪便中的小肠结肠炎耶尔森菌比培养检验法准确率更高,更有利于临床对疾病的诊治。

摘要： 目的查明行业标准推荐caf1基因引物（简称行标caf1引物）进行PCR检测时，在一些非鼠疫菌上出现非特异性条带的原因，并提出解决办法。方法共选取112株菌进行试验，其中鼠疫菌40株、非鼠疫菌72株；提取菌株DNA，并对caf1基因进行PCR扩增；选择出现非特异性条带的7株菌株，进行切胶回收、纯化以及TA克隆测序；针对caf1基因重新设计引物，对被试菌株进行验证。结果使用行标caf1引物扩增40株鼠疫菌，均未出现非特异性条带，扩增72株非鼠疫菌，有58株扩增出400、500、600、700、800、900、1 000 bp的非特异性条带。经克隆和测序，在非特异性产物的基因序列中均出现行标caf1引物的反向引物序列及反向引物的反向互补序列。重新设计caf1引物，扩增72株非鼠疫菌，均未出现非特异性条带。结论行标caf1引物在筛查鼠疫菌时会出现非特异性条带，使用新caf1引物可有效避免这一情况，提高检测的准确性。

摘要： 目的：近年来国内暴发较少见报道，主要以散发为主，有明显的地域性分布。为了解小肠结肠炎耶尔森菌在高密地区家禽家畜等宿主动物中的带菌情况，特开展本项研究。 方法：对2010-2013年在高密地区采集的1111份家禽家畜动物粪便标本进行该病菌的分离鉴定，对阳性菌株进行血清分型、生物分型毒力因子检测。rn 结果：检出小肠结肠炎耶尔森菌菌株分布在3个生物型中，其中:1A型114株(89.06%)，生物3型2株(1.56%)，生物4型1株(0.78%);其它11株(8.59%)。对样本检出小肠结肠耶尔森菌菌株进行ail、ystA,ystB、virF,yadA、rbfc和foxA相关毒力基因检测，其中1株O: 3血清型携带毒力因子ail+、ystA+,virF+,rbfc+;仅携带ystB十基因的菌株为72株:不携带上述基因的菌株为16株，其中:0:1,2血清型1株，0:8血清型1株，不定型血清型14株。rn 结论：通过检测发现，高密地区家禽家畜中广泛携带该菌，在猪粪中检测到国内流行血清型0:3型菌株，且携带毒力因子ail+、ystA+,virF+,rbfc+，是潜在的传染源，因此高密地区应继续加强小肠结肠炎耶尔森菌的检测工作，同时加强小肠结肠炎耶尔森菌病的流行病学监测，预防此病在人群中感染。

摘要： 小肠结肠炎耶尔森菌广泛分布于自然界中,是在一些比较寒冷的国家或季节下能够生长的为数不多的几种肠道致病菌之一,该菌引起的疾病亦被称为"冰箱病",除引起胃肠道症状外,还可引起关节炎,结节性红斑及肠系膜淋巴炎等疾患,甚至引起败血症,造成死亡.该菌还是重要的食源性致病菌,其原因都是食用了被小肠结肠炎耶尔森菌污染食品引起的.为了解高密市小肠结肠炎耶尔森菌动物带菌及家畜家禽肉污染情况，对不同种类动物及其生熟肉制品进行病原菌监测，并对分离到的的菌株进行血清分型、生物分型及毒力因子检测。国外许多地区都曾报道过非致病菌株造成的爆发流行，必须引起足够的重视，进一步加强本地区小肠结肠炎耶尔森菌监测工作。

摘要： 目的:从腹泻水貂小肠、肝脏分离到大肠杆菌,该菌可引起水貂发病死亡.为了解大肠杆菌引起水貂腹泻的机理,进行了小肠结肠炎耶尔森菌HPI毒力岛基因的检测,并对其菌株做毒力试验.rn 方法:用PCR扩增法检测毒力岛基因irp2和fyua,小鼠腹腔注射检测菌株毒力.rn 结果:从3个貂场腹泻病死水貂脏器以及粪便中分离出血清型分别为O78、O29和O38的大肠杆菌,对3个血清型大肠杆菌进行毒力岛检测,均检出携带小肠结肠炎耶尔森菌HPI毒力岛基因irp2和fyua.3个血清型O78、O29和O38的大肠杆菌均使小鼠发病死亡.rn 结论:水貂腹泻是由携带小肠结肠炎耶尔森菌HPI毒力岛基因irp2和fyua的大肠杆菌引起,该菌对水貂的健康具有潜在的威胁.

摘要： 目的：了解宁夏小肠结肠炎耶氏菌主要毒力基因分布和致病性小肠结肠炎耶尔森菌分子分型特征。方法：用聚合酶链反应分析宁夏1997-2010年分离的283株小肠结肠炎耶尔森5种毒力基因(ail、ystA、ystB、yadA、virF)，用限制性内切酶NotI酶切致病性小肠结肠炎耶氏菌染色体DNA进行脉冲场凝胶电泳(PFGE)，利用BioNumerics软件进行聚类分析。结果：209株O:3、0:9血清型小肠结肠炎耶氏菌中ail、ystA、yadA、virF毒力基因阳性的占97.8％；O:8血清型和未开展血清分型的菌株5种毒力基因全部阴性；11株0:5血清型有9株5种毒力基因全部阴性。将致病性菌株进行PFGE分型，根据染色体DNA的NotI酶切图谱，将29株0:3血清型分成12个PFGE带型，包含5株以上的优势PFGE带型有2种。180株0:9血清型菌株分成13个PFGE带型，包含10株以上的优势PFGE带型有4种，各自是从同一地区猪与家鼠、猪与犬、猪与野兔分离。结论：宁夏0:3、0:9血清型小肠结肠炎耶氏菌具有致病性，0:3逐步成为如今的优势血清型，在不同年代变异很小，家鼠、犬与野兔的感染可能与接触猪的粪便相关联。0:5、0:8与血清未分型的菌株无致病性。

摘要： 目的：了解鼠疫菌等实验菌株在不同培养基上的生长情况，为耶尔森菌选择培养基在鼠疫菌分离培养中的应用提供理论和实验依据。方法：将9种实验菌株分别接种营养琼脂培养基、赫氏培养基、耶尔森菌选择培养基进行分离培养。结果：9种实验菌株在营养琼脂培养基、赫氏培养基上生长良好,而在耶尔森菌选择培养基上只有鼠疫菌、小肠结肠炎耶尔森菌、假结核耶尔森菌生长，其他实验菌受到抑制未生长。结论：耶尔森菌选择培养基在鼠疫菌的分离培养中优于营养琼脂培养基和赫氏培养基。

摘要： 目的：制造鼠疫菌V抗原的鼠单克隆抗体，经抗体表位分析建立单抗系统，并通过此单抗系统建立免疫学检测鼠疫菌V抗原含量的方法，进行鼠疫疫苗研制中V抗原的质量控制。rn 方法：用鼠疫菌V抗原免疫雌性BALB/c小鼠，取小鼠脾细胞与骨髓瘤细胞融合，经筛选和克隆化培养，获得多株分泌V抗原单克隆抗体的杂交瘤细胞，用各株细胞制造小鼠腹水得到单抗，用辣根过氧化物酶进行标记，经组位抑制法进行表位分析，检测单抗的特异性。通过将针对各表位的单抗进行组合配对优化模式的分析，建立双抗体夹心ELISA测定V抗原含量的方法，并验证了方法的专属性、准确性、精密度和线性范围。rn 结果：得到四株鼠疫菌v抗原单克隆抗体，Western blot表明单抗均识别参考抗原制品中相对分子量36 kD的V抗原蛋白，这些单抗分为针对三个不同V抗原表位;筛选其中两株单抗建立的双抗体夹心ELISA法检测V抗原含量具有较高的特异性和相关性，灵敏度最低检测值为10ng/ml。rn 结论：建立了鼠疫菌V抗原的单抗系统和双抗体夹心ELISA免疫学定量检测方法。建立实验室参比品。以抗原和单抗参考制品及测定标准曲线可进行疫苗质量控制，同时也适用于其它鼠疫研究。

摘要： 目的：制造鼠疫菌V抗原的鼠单克隆抗体，经抗体表位分析建立单抗系统，并通过此单抗系统建立免疫学检测鼠疫菌V抗原含量的方法，进行鼠疫疫苗研制中V抗原的质量控制。rn 方法：用鼠疫菌V抗原免疫雌性BALB/c小鼠，取小鼠脾细胞与骨髓瘤细胞融合，经筛选和克隆化培养，获得多株分泌V抗原单克隆抗体的杂交瘤细胞，用各株细胞制造小鼠腹水得到单抗，用辣根过氧化物酶进行标记，经组位抑制法进行表位分析，检测单抗的特异性。通过将针对各表位的单抗进行组合配对优化模式的分析，建立双抗体夹心ELISA测定V抗原含量的方法，并验证了方法的专属性、准确性、精密度和线性范围。rn 结果：得到四株鼠疫菌v抗原单克隆抗体，Western blot表明单抗均识别参考抗原制品中相对分子量36 kD的V抗原蛋白，这些单抗分为针对三个不同V抗原表位;筛选其中两株单抗建立的双抗体夹心ELISA法检测V抗原含量具有较高的特异性和相关性，灵敏度最低检测值为10ng/ml。rn 结论：建立了鼠疫菌V抗原的单抗系统和双抗体夹心ELISA免疫学定量检测方法。建立实验室参比品。以抗原和单抗参考制品及测定标准曲线可进行疫苗质量控制，同时也适用于其它鼠疫研究。

摘要： 目的：制造鼠疫菌V抗原的鼠单克隆抗体，经抗体表位分析建立单抗系统，并通过此单抗系统建立免疫学检测鼠疫菌V抗原含量的方法，进行鼠疫疫苗研制中V抗原的质量控制。rn 方法：用鼠疫菌V抗原免疫雌性BALB/c小鼠，取小鼠脾细胞与骨髓瘤细胞融合，经筛选和克隆化培养，获得多株分泌V抗原单克隆抗体的杂交瘤细胞，用各株细胞制造小鼠腹水得到单抗，用辣根过氧化物酶进行标记，经组位抑制法进行表位分析，检测单抗的特异性。通过将针对各表位的单抗进行组合配对优化模式的分析，建立双抗体夹心ELISA测定V抗原含量的方法，并验证了方法的专属性、准确性、精密度和线性范围。rn 结果：得到四株鼠疫菌v抗原单克隆抗体，Western blot表明单抗均识别参考抗原制品中相对分子量36 kD的V抗原蛋白，这些单抗分为针对三个不同V抗原表位;筛选其中两株单抗建立的双抗体夹心ELISA法检测V抗原含量具有较高的特异性和相关性，灵敏度最低检测值为10ng/ml。rn 结论：建立了鼠疫菌V抗原的单抗系统和双抗体夹心ELISA免疫学定量检测方法。建立实验室参比品。以抗原和单抗参考制品及测定标准曲线可进行疫苗质量控制，同时也适用于其它鼠疫研究。

摘要： 目的：制造鼠疫菌V抗原的鼠单克隆抗体，经抗体表位分析建立单抗系统，并通过此单抗系统建立免疫学检测鼠疫菌V抗原含量的方法，进行鼠疫疫苗研制中V抗原的质量控制。rn 方法：用鼠疫菌V抗原免疫雌性BALB/c小鼠，取小鼠脾细胞与骨髓瘤细胞融合，经筛选和克隆化培养，获得多株分泌V抗原单克隆抗体的杂交瘤细胞，用各株细胞制造小鼠腹水得到单抗，用辣根过氧化物酶进行标记，经组位抑制法进行表位分析，检测单抗的特异性。通过将针对各表位的单抗进行组合配对优化模式的分析，建立双抗体夹心ELISA测定V抗原含量的方法，并验证了方法的专属性、准确性、精密度和线性范围。rn 结果：得到四株鼠疫菌v抗原单克隆抗体，Western blot表明单抗均识别参考抗原制品中相对分子量36 kD的V抗原蛋白，这些单抗分为针对三个不同V抗原表位;筛选其中两株单抗建立的双抗体夹心ELISA法检测V抗原含量具有较高的特异性和相关性，灵敏度最低检测值为10ng/ml。rn 结论：建立了鼠疫菌V抗原的单抗系统和双抗体夹心ELISA免疫学定量检测方法。建立实验室参比品。以抗原和单抗参考制品及测定标准曲线可进行疫苗质量控制，同时也适用于其它鼠疫研究。

摘要： 本文描述了用于表达鼠疫耶尔森氏菌F1‑V融合蛋白的质粒构建体的产生。在所公开的质粒中，所述F1‑V融合蛋白编码序列与大肠杆菌htrA启动子可操作地连接，并且与大肠杆菌HlyA分泌信号序列框内融合。还描述了包含所述F1‑V融合蛋白表达质粒的肠道沙门氏菌血清变型伤寒沙门氏菌菌株Ty21a，例如用作抗鼠疫的口服疫苗。

摘要： 本发明公开了一种快速区分小肠结肠炎耶尔森氏菌与中间型耶尔森氏菌的检测方法，利用基质辅助激光解析电离飞行时间质谱检测小肠结肠炎耶尔森氏菌与中间型耶尔森氏菌的肽指纹图谱，根据两种耶尔森氏菌特征峰的不同，鉴定其特征蛋白，区分小肠结肠炎耶尔森氏菌与中间型耶尔森氏菌。本发明采用的方法比现有的传统生化实验鉴定时间缩短1‑2天，可以快速区分小肠结肠炎耶尔森氏菌与中间型耶尔森氏菌，实现快速检测。该方法自动化程度高，检测时间短，有效降低一线检测人员接触食源致病菌的几率，减少食源致病菌对人和环境污染的风险。

摘要： 本发明提供了一种检测鼠疫耶尔森氏菌的试剂，它包括上游引物、下游引物、荧光探针和淬灭探针。本发明还提供了利用上述试剂荧光定量PCR检测鼠疫耶尔森氏菌的方法。本发明根据鼠疫耶尔森氏菌6MD质粒上特有的致病基因-血浆凝固酶及胞浆素原活化因子pla基因，设计引物和探针，与整个genebank数据库进行BLAST检索，发现其只对鼠疫菌上的pla基因序列特异，和其它物种的核酸序列无同源，保证了检测方法的特异性。该方法可在同一管内实现DNA的扩增和同步检测，而无需在PCR后进行凝胶电泳分析，对样本的定量检测只需2小时左右即可完成，具有操作简便，高效、快速、特异的优点。

摘要： 本发明涉及一种小肠结肠炎耶尔森氏菌选择性增菌培养基，包括组合营养剂和组合抑菌剂，组合营养剂包括胰酪胨、山梨醇、蔗糖、鸟氨酸、氯化钠，组合抑菌剂包括牛胆盐、十二烷基磺酸钠、头孢菌素和新生霉素。本发明的小肠结肠炎耶尔森氏菌选择性增菌培养基及其制备方法，含有组合营养剂，能有效促进小肠结肠炎耶尔森氏菌的生长；含有组合抑菌剂，能有效抑制革兰氏阳性菌的生长，抑制大肠杆菌等革兰氏阴性菌的生长，同时对小肠结肠炎耶尔森氏菌的生长无影响。本发明的培养基可实现对样品中小肠结肠炎耶尔森氏菌的选择性富集增菌培养，优化传统培养法的检测步骤，缩短检测时间，提高检出率，使样品中小肠结肠炎耶尔森氏菌更易检测和鉴别。

摘要： 本文描述了用于表达鼠疫耶尔森氏菌F1-V融合蛋白的质粒构建体的产生。在所公开的质粒中，所述F1-V融合蛋白编码序列与大肠杆菌htrA启动子可操作地连接，并且与大肠杆菌HlyA分泌信号序列框内融合。还描述了包含所述F1-V融合蛋白表达质粒的肠道沙门氏菌血清变型伤寒沙门氏菌菌株Ty21a，例如用作抗鼠疫的口服疫苗。

摘要： 本发明提供了一种鼠疫耶尔森氏菌菌蜕、其制备方法及作为疫苗的应用。所述菌蜕具有完整的外膜结构，无需佐剂接种小鼠即能够诱导机体产生保护性抗体，产生较强的免疫记忆，可保护小鼠免受强剂量鼠疫活菌株的攻击，与活疫苗相比具有更高的安全性。

摘要： 本发明公开了假结核耶尔森氏菌效应蛋白及其应用，属于生物化学、分子生物学和基因工程等技术领域，包括：Tce1，其氨基酸序列如SEQ ID NO:1所示或某一个位点氨基酸的突变；和/或Tce2，其氨基酸序列如SEQ ID NO:3所示或某一个位点氨基酸的突变。所示的氨基酸序列中通过替换、缺失或插入一个或几个氨基酸所获得的具有同等活性的蛋白质。本发明还提供了所述效应蛋白的编码基因、表达载体、工程菌，类假结核耶尔森氏菌效应蛋白的分离纯化方法，所述蛋白在辅助治疗肠道耐药致病细菌感染药物制备过程中的应用。本发明涉及的Tce1、Tce2效应蛋白具有更安全、更广谱的杀菌活性。

摘要： 本发明公开了一种假结核耶尔森氏菌抗真菌蛋白、应用及分离纯化方法，所述蛋白的氨基酸序列由SEQ ID NO:1所示，或在SEQ ID NO:1所示的氨基酸序列中经取代、缺失或插入一个或多个氨基酸序列获得具有同等活性的蛋白。本发明还提供了所述抗真菌效应蛋白的编码基因、表达载体或工程菌，本发明还提供了假结核耶尔森氏菌抗真菌蛋白的分离纯化方法。所述蛋白在抗真菌药剂中的应用以及所属蛋白的编码基因在转化植物中的应用。本发明涉及的YPK_D305抗真菌基因属于一个新型几丁质酶，该基因具有更高的抗真菌活性，靶向作用真菌范围也更广泛，为病原真菌防治提供策略和途径，具有较大的学术价值和潜在的应用前景。

摘要： 本发明涉及一种检测炭疽杆菌、鼠疫耶尔森菌及嗜肺军团菌多重实时荧光PCR的引物、探针序列及方法，该引物、探针序列包括炭疽杆菌、鼠疫耶尔森菌及嗜肺军团菌引物探针序列集；该方法的步骤包括选取引物对和探针、制备目标基因的质粒标准品、建立反应体系和选择荧光检测通道。本发明设计的各引物对和探针特异性和工作性能良好，可建立检测炭疽杆菌、鼠疫耶尔森菌及嗜肺军团菌的多重实时荧光PCR方法，具有结果可靠和准确灵敏、操作简便、省时省力、成本低、效率高等优点。

摘要： 本发明涉及一种检测炭疽杆菌、鼠疫耶尔森菌及嗜肺军团菌多重实时荧光PCR的引物、探针序列及方法，该引物、探针序列包括炭疽杆菌、鼠疫耶尔森菌及嗜肺军团菌引物探针序列集；该方法的步骤包括选取引物对和探针、制备目标基因的质粒标准品、建立反应体系和选择荧光检测通道。本发明涉及的各引物对和探针特异性和工作性能良好，可建立检测炭疽杆菌、鼠疫耶尔森菌及嗜肺军团菌的多重实时荧光PCR方法，具有结果可靠和准确灵敏、操作简便、省时省力、成本低、效率高等优点。