耐药逆转

摘要： 目的 探讨血根碱对乳腺癌耐药细胞株的耐药逆转作用及机制.方法 CCK8法检测亲本MCF-7细胞、耐药株MCF-7/ADR细胞及血根碱处理后耐药株IC_(50)的变化;罗丹明123实验鉴定重要耐药蛋白P-gp功能变化;Western blot法鉴定亲本细胞、耐药细胞、血根碱和AKT激动剂IGF-1处理后相关蛋白(P-AKT、AKT、P-gp)的表达水平.结果 与亲本MCF-7细胞相比,ADR、CTX和5-FU对MCF/ADR耐药细胞的IC_(50)明显增高;罗丹明123在MCF-7/ADR细胞胞内蓄积减少,外排功能加强;MCF-7/ADR耐药细胞P-gp表达明显升高.8μmol/L血根碱能显著降低MCF-7/ADR细胞的IC_(50)和罗丹明123外排功能,并能降低P-gp蛋白的表达.8μmol/L血根碱作用后,AKT通路活性明显被抑制,P-gp蛋白表达明显降低;进一步在血根碱作用后应用AKT通路激动剂IGF-1,则P-gp蛋白表达明显升高.结论 MCF-7/ADR细胞具有多药耐药特性,其耐药机制主要为提高P-gp蛋白的表达;血根碱能明显逆转MCF-7/ADR细胞的多药耐药性,其耐药逆转机制主要是通过抑制AKT通路活性进而降低P-gp蛋白表达实现的.

摘要： 目的探究冬凌草甲素(Ori)逆转乳腺癌MCF-7细胞对氟维司群(Ful)耐药的机制。方法在体外诱导构建乳腺癌获得性Ful耐药细胞株MCF-7/Ful;采用MTT法检测MCF-7细胞和MCF-7/Ful细胞的相对细胞活力,Ori对MCF-7/Ful细胞的抑制率;采用CompuSyn软件分析Ori和Ful的协同效应;将MCF-7/Ful细胞随机分为空白对照组、Ful组(5μmol/L)、Ori组(8μmol/L)、Ful(5μmol/L)+Ori(8μmol/L)组,采用Western blot法检测各组细胞中磷脂酰肌醇-3-激酶(PI3K)/蛋白激酶B(Akt)信号通路相关蛋白的磷酸化情况。采用MCF-7/Ful细胞制备裸鼠移植瘤耐药模型,随机分为空白对照组、Ful组(80μmol/g)、Ori组(50μmol/g)、Ful(80μmol/g)+Ori(50μmol/g)组,计算肿瘤质量和抑瘤率,验证Ori在体内的耐药逆转作用。结果MTT法检测结果显示,当Ful≥10μmol/L时,MCF-7/Ful细胞的相对细胞活力显著高于MCF-7细胞(P<0.05),耐药性显著增强;Ori对MCF-7/Ful细胞具有明显的抑制作用,与Ful联合使用对MCF-7/Ful细胞的抑制率显著升高(P<0.05或P<0.01),逆转耐药效果显著增加。Western blot法检测结果显示,与Ful组比较,Ful+Ori组细胞中PI3K、Akt磷酸化水平均显著降低(P<0.05或P<0.01)。体内实验结果显示,Ful+Ori组裸鼠的肿瘤体积和质量显著下降,抑瘤率为(63.90±4.11)%,较Ful组显著升高(P<0.01)。结论Ori可以逆转乳腺癌MCF-7细胞对Ful的耐药性,此作用可能是通过调控PI3K/Akt信号通路实现的。

摘要： 乳腺癌是女性常见的恶性肿瘤,激素受体(HR)在乳腺癌发生、发展过程中具有重要作用。约70%的乳腺癌患者表现为HR阳性。目前,临床对HR阳性乳腺癌的辅助治疗主要采用内分泌治疗方案。多数HR阳性乳腺癌患者可从内分泌治疗中获益,近期疗效良好,但乳腺癌内分泌治疗易产生耐药性,不利于患者完成全部治疗方案,影响预后。研究表明,乳腺癌内分泌治疗耐药是限制内分泌治疗疗效的主要因素。逆转内分泌治疗的耐药性,或可使HR阳性乳腺癌患者继续接受甚至完成治疗。已有研究证实,DNA甲基转移酶参与了乳腺癌内分泌治疗的耐药过程,目前已有组蛋白去乙酰化酶(HDAC)、DNA甲基化转移酶(DNMT)抑制剂研发问世并逐渐进入临床研究或应用阶段。本文对内分泌治疗耐药的机制进行回顾,对逆转乳腺癌内分泌治疗耐药的表观遗传学机制及相关研究进展进行综述。

摘要： 目的:探讨益肺解毒方(YFJDF)含药血清逆转人肺腺癌A549/DDP细胞耐药性及诱导其凋亡的机制。方法:制备YFJDF含药血清,CCK8法分别检测不同浓度的顺铂对A549、A549/DDP细胞的增殖抑制率,不同浓度YFJDF对A549、A549/DDP细胞的增殖抑制率,YFJDF联合各浓度顺铂对A549/DDP细胞的增殖抑制率,并根据结果计算IC50值、A549/DDP细胞对顺铂的耐药指数及YFJDF逆转A549/DDP细胞的逆转耐药倍数。流式细胞术检测各组细胞凋亡率、West-blot检测各组细胞Bax、Bcl-2蛋白的表达水平。结果:不同浓度的DDP作用A549、A549/DDP细胞48 h后,其IC50值分别为4.49 μg/mL和45.09 μg/mL,计算出的耐药指数为10.05倍。不同浓度YFJDF对A549/DDP细胞的增殖有抑制作用,并且随着YFJDF浓度的升高和药物作用时间的延长对A549/DDP细胞的抑制作用也逐渐增加,选择中剂量的YFJDF、并作用48 h用于后续逆转实验。YFJDF联合各浓度顺铂对A549/DDP细胞的抑制作用更为明显,其48 h的IC50值为29.37 μg/mL,逆转倍数为1.53倍。流式细胞仪检测结果显示:YFJDF + DDP组细胞凋亡率显著增加,可达到69.3%;Western blot结果显示:YFJDF + DDP组Bax的表达量显著增加、Bcl-2的表达量明显减少。结论:益肺解毒方能逆转A549/DDP细胞对顺铂的耐药,其机制可能是促进顺铂诱导A549/DDP凋亡。

摘要： 中国恶性肿瘤的发病率和病死率一直居高不下,不仅严重威胁着人们的生命健康,也极大地加重了国民经济负担.手术切除在实体肿瘤治疗中占有重要地位,但仍有部分肿瘤术后发生复发及转移.丙泊酚作为目前最为常用的全身麻醉药物之一,广泛用于肿瘤手术治疗中.近年来,研究发现丙泊酚维持麻醉对肿瘤手术患者的预后有利,且丙泊酚可通过多种信号通路抑制肿瘤细胞的增殖、转移,减轻免疫抑制,改善对化疗药物的敏感性.本综述就近年来丙泊酚抑制肿瘤的相关机制进行整理和总结.

摘要： 目的:研究中药柴芩通淋片(chaiqintonglin,CQTL)在连续用药后对临床分离泌尿系感染大肠埃希菌耐药特性的影响.方法:首先微量稀释法分别测定柴芩通淋片及临床常用抗生素对临床分离大肠埃希菌的最小抑菌浓度(minimal inhibitory concentration,MIC),而后用1/4 MIC浓度的柴芩通淋片对20株耐药大肠埃希菌进行连续用药5代,分别检测5次用药后20株耐药大肠埃希菌对各类常用抗生素药物敏感性变化,选择前后药物敏感性变化显著的细菌观察菌落形态并进行连续10代培养,通过测定常用抗生素MIC值变化情况判断其是否具有稳定遗传特性.结果:常用抗生素MIC值测定结果表明20株菌均为多重耐药菌株,柴芩通淋片在0.24 g/mL时为20株中9株菌的最低抑制耐药菌株浓度.经过1/4 MIC柴芩通淋片对20株大肠埃希菌连续作用后,其中3株出现对头孢他啶敏感性恢复.对出现头孢他啶敏感性恢复的菌株连续空白培养10代,其MIC值未发生变化.结论:经过1/4 MIC柴芩通淋片连续作用后,可恢复部分临床大肠埃希菌对头孢他啶药物敏感性作用,其耐药性的恢复具有稳定遗传特性.

摘要： 目的:探讨表没食子儿茶素没食子酸酯全乙酰化衍生物(Ac-EGCG)逆转人口腔鳞癌耐药细胞多药耐药的作用机制,为筛选逆转多药耐药天然药物提供参考依据.方法:采用MTT法检测Ac-EGCG对人口腔鳞癌耐药细胞KBV200的抑制作用及逆转耐药作用,实时定量PCR检测Ac-EGCG作用于KBV20048 h后多药耐药1型基因(MDR1)、谷胱苷肽-S-转移酶-π(GST-π)、拓扑异构酶Ⅱ(TopoⅡ)、肺耐药蛋白(LRP)基因的表达情况.结果:①Ac-EGCG对人口腔鳞癌耐药细胞KBV200作用48 h的IC50、IC10值分别为609.5 mg/L、98.2 mg/L;20 mg/L、40 mg/L、80 mg/L Ac-EGCG对长春新碱(VCR)的逆转倍数分别为1.38、2.12、3.26倍;随着Ac-EGCG浓度增加,对KBV200的抑制率和耐药逆转作用增加(P<0.05),呈浓度依赖性.②实时定量PCR检测结果显示:Ac-EGCG可下调人口腔鳞癌耐药细胞KBV200中MDR1、GST-π、TopoⅡ基因的表达,分别下调5.09、2.12、2.46倍(P<0.05).结论:Ac-EGCG对人口腔鳞癌耐药细胞的增殖有抑制作用,对其耐药具有一定逆转作用.

摘要： 目的 观察加入逆转剂量米非司酮(MIF)的人上皮性卵巢癌耐药细胞系SKOV3/DDP耐药情况.方法 取对数生长期的人上皮性卵巢癌细胞系SKOV3、SKOV3/DDP细胞,MTT法观察MIF对SKOV3、SKOV3/DDP细胞增殖的影响,测算细胞增殖抑制率,筛选MIF的非细胞毒性剂量(以此为逆转剂量).MTT法测算SKOV3/DDP细胞对顺铂(DDP)的耐药指数(RI).取适量SKOV3/DDP细胞,分为A、B两组,A组加入RI剂量的的DDP,B组加入RI剂量的的DDP+5 μmol/L的MIF,分别于培养24、48、72 h时MTT法测算细胞IC50,计算MIF对SKOV3/DDP细胞的耐药逆转倍数(RF).利用流式细胞术(FCM)检测加入5μmol/L MIF后SKOV3/DDP后的细胞周期.结果 不同浓度的MIF均可抑制SKOV3、SKOV3/DDP的增殖,且呈剂量依赖性.MIF对SKOV3/DDP的逆转剂量为5 μmol/L.SKOV3、SKOV3/DDP对DDP的IC50分别为3.22、14.83 μg/mL,SKOV3/DDP对DDP的RI为4.61.培养24、48、72 h时A组IC50分别为(23.13 ±0.83)、(14.83 ±0.52)、(10.07 ±0.56)μg/mL;B组分别为(17.06±0.53)、(7.77±0.47)、(4.06 ±0.69) μg/mL,MIF对SKOV3/DDP细胞耐药性的RF分别为1.36、1.91、2.48.培养24、48、72 h时,加入5μmol/L MIF的SKOV3/DDP细胞G0/G1期所占比例逐渐增加(48.7％、53.9％、55.1％、59.0％),S期所占的比例则逐渐减小(13.5％、9.6％、7.7％、5.8％).结论 加入5 μmol/L的MIF可抑制SKOV3/DDP细胞增殖,5μmol/L的MIF可减轻SKOV3/DDP细胞对DDP耐药性.MIF减轻SKOV3/DDP细胞对DDP的耐药性机制可能为MIF将SKOV3/DDP细胞周期阻滞于G0/G1期.

摘要： 目的:研究青蒿琥酯(artesunate,Art)逆转CD+7难治急性髓系白血病(CD+7 AML)细胞对柔红霉素(daunorubicin,DNR)的耐药作用及其机制.方法:实验分为生理盐水对照组(NS组)、Art组(0、0.01、0.1、1μmol/L)、DNR组(0、0.02、0.2、2 mg/L)、Art(0、0.01、0.1、1μmol/L)+DNR(0、0.02、0.2、2 mg/L)联合组.Art、DNR、Art+DNR作用CD+7 AML细胞48 h后,CCK-8法检测细胞生长的抑制率,流式细胞术检测细胞凋亡率以及细胞内DNR含量,72 h后Western blot定量检测P170蛋白.结果:与单独应用Art或DNR相比,Art+DNR处理后,CD+7 AML细胞的抑制率、凋亡率和细胞内DNR含量均显著增加(P<0.05),而细胞内P170抗原表达显著降低(P<0.05).结论:Art可通过下调CD+7 AML细胞P170抗原表达,增加细胞内DNR的药物浓度,从而增强疗效、逆转耐药.

摘要： 目的 探讨鼻咽癌多药耐药基因的表达及药物逆转机制.方法 取人鼻咽低分化鳞癌细胞系HNE1,用新辅助化疗药奈达铂(NDP)作为体外诱导剂,建立耐NDP的人鼻咽癌细胞系HNE1/NDP.qRT-PCR和免疫印迹检测HNE1和HNE1/NDP中多药耐药基因1(MDR1)、多药耐药相关蛋白1(MRP1)和P-糖蛋白(P-gp)的mRNA和蛋白表达差异;不同浓度的贝伐单抗(5、10、20、40、80μg/ml)处理HNE1和HNE1/NDP,48 h后CCK8法检测贝伐单抗对HNE1和HNE1/NDP细胞的增殖作用.不同浓度贝伐单抗联合1 ug/ml奈达铂处理HNE1/NDP后,CCK8检测贝伐单抗对HNE1/NDP的耐药逆转作用.流式细胞仪检测贝伐单抗处理HNE1/NDP细胞后细胞凋亡率.结果 qRT-PCR和免疫印迹结果显示HNE1/NDP中MDR1、MRP1和P-gp的mRNA和蛋白表达显著上调;贝伐单抗呈浓度依赖性地抑制HNE1和HNE1/NDP细胞的增殖,同时逆转HNE1/NDP的耐药性;qRT-PCR结果显示贝伐单抗处理HNE1/NDP细胞后,抑制MDR1、MRP1和P-gp的mRNA表达.PI染色结果显示贝伐单抗促进HNE1/NDP细胞的凋亡.结论 贝伐单抗通过下调多药耐药相关基因的表达,同时促进HNE1/NDP细胞凋亡,从而实现耐药逆转作用.

摘要： 拓扑替康(,TPT)是治疗复发性卵巢癌的首选药物之一,由于耐药性的产生,常最终导致治疗失败。研究表明,多药耐药蛋白3(MRP3)通过ATP供能,将化疗药物泵出细胞外而导致临床耐药。因此,MRP3可能成为反义核酸治疗的良好靶分子。rn 本研究采用包含MRP3 mRNA翻译起始位点的反义寡脱氧核苷酸(ASODN)转染人卵巢癌拓扑替康耐药细胞(SKOV3/TPT),旨在观察MRP3 ASODN对SKOV3/TPT细胞的耐药逆转作用,为逆转耐药提供实验依据。

摘要： 胃癌是常见的恶性肿瘤，化疗是主要的治疗手段之一，但由于化疗疗效不高，复发及转移率较高，预后差.现认为，影响化疗疗效主要与肿瘤多药耐药有关，而多药耐药最主要机制是P-糖蛋白的过度表达.探讨其在胃癌中的表达并有效的加以逆转，是提高化疗疗效的重要途径. 本文应用免疫组织化学SP法分析了62例具有完整随访资料的胃癌中P-gp 的表达情况.结果发现:P-gp阳性表达为82.2％，其表达与病理类型、分化程度、浸润深度及淋巴结转移状况无关(P＞0.05)，是独立的生物学指标.P-gp 的表达与生存期相关.P-gp阳性者生存期短，阴性者生存期长.(X2=9.055，P=0.011)。丹参在体外实验中被证实具有多药耐药的逆转作用，为探讨其在体内的逆转作用，选取该院2000年～2001年胃癌手术患者24例，术前胃镜活检病理学诊断为胃癌的病例进行P-gp检测，高表达病例随机分为二组，A组:术前3天始用丹参12g/d，ivgtt，连用3天，术前1天加用ADM 10mg/m2，iv；B组:术前1天用ADM 10mg/m2 ，iv.术后取新鲜标本，应用光镜、电镜进行形态学观察，并制备胃癌单细胞悬液，经细胞裂解沉淀，提取上清液过滤后，应用精密的高效液相色谱法测定细胞内药物浓度，对丹参临床应用进行初步探讨.结果如下:(1)光镜下可见丹参+ADM组可见胃癌细胞肿胀变性，并见点灶状坏死及斑片状凝固性坏死.单纯用阿霉素组胃癌细胞未见明显肿胀变性，未见坏死.(2)电镜下丹参+ADM组细胞受药物作用后早期发生的超微结构变化，包括线粒体肿胀、内质网扩张等均强于单用ADM组.(3)丹参+ADM组胃癌细胞内药物浓度(133.07 ±78.29 ng/106个细胞)明显高于单用ADM组(45.76 ±49.25 ng/106个细胞)，二组比较有显著差异(P＜0.05). 研究结果表明：胃癌是P-gp表达水平较高的肿瘤之一.P-gp表达与肿瘤病理类型、分化程度、浸润深度及淋巴结转移无关，是独立的生物学表型，与肿瘤恶性度无关，不宜作为肿瘤恶性度指标，但可作为判断预后的独立指标.丹参的应用使化疗药物ADM对胃癌细胞毒性增强，细胞变性坏死加重，细胞内ADM浓度增加，对P-gp介导的耐药有一定逆转作用.为中药临床逆转打下初步基础.

摘要： 目的：研究中药汉防已提取的生物碱汉防己甲素逆转肺癌耐药产生与凋亡发生的机理。rn 方法：采用不同浓度汉防己甲素阿霉素作用于人肺癌敏感株GLC-82和阿霉素耐药株GLC-82/ADR细胞，通过MTT法检测抗肿瘤药物的细胞毒作用，流式细胞仪检测多药耐药相关蛋白表达，碘化丙啶染色检测细胞凋亡。rn 结果：GLC-82/ADR耐药株耐药指数为，5.43，汉防己甲索作用耐药肺癌细胞候其耐药指数降至1.89，GLC-82/ADR耐药株细胞在12h MRP蛋白表达率(％)为60.25±8.71，汉防己甲素作用耐药肺癌细胞后其表达率(％)降至32.21±4.79(P<0.01)；GLC-82/ADR耐药株细胞在24h凋亡率(％)为13.37±2.65，汉防己甲素作用耐药肺癌细胞后其凋亡率(％)升至76.08±12.26(P<0.01)。rn 结论：汉防己甲素可以逆转GLC-82/ADR耐药肺癌细胞对阿霉素明显耐药，下调化疗耐药肺癌细胞MRP蛋白表达，协同阿霉素增强对化疗耐药肺癌细胞凋亡作用。

摘要： 目的：研究中药汉防已提取的生物碱汉防己甲素逆转肺癌耐药产生与凋亡发生的机理。rn 方法：采用不同浓度汉防己甲素阿霉素作用于人肺癌敏感株GLC-82和阿霉素耐药株GLC-82/ADR细胞，通过MTT法检测抗肿瘤药物的细胞毒作用，流式细胞仪检测多药耐药相关蛋白表达，碘化丙啶染色检测细胞凋亡。rn 结果：GLC-82/ADR耐药株耐药指数为，5.43，汉防己甲索作用耐药肺癌细胞候其耐药指数降至1.89，GLC-82/ADR耐药株细胞在12h MRP蛋白表达率(％)为60.25±8.71，汉防己甲素作用耐药肺癌细胞后其表达率(％)降至32.21±4.79(P<0.01)；GLC-82/ADR耐药株细胞在24h凋亡率(％)为13.37±2.65，汉防己甲素作用耐药肺癌细胞后其凋亡率(％)升至76.08±12.26(P<0.01)。rn 结论：汉防己甲素可以逆转GLC-82/ADR耐药肺癌细胞对阿霉素明显耐药，下调化疗耐药肺癌细胞MRP蛋白表达，协同阿霉素增强对化疗耐药肺癌细胞凋亡作用。

摘要： 目的：研究中药汉防已提取的生物碱汉防己甲素逆转肺癌耐药产生与凋亡发生的机理。rn 方法：采用不同浓度汉防己甲素阿霉素作用于人肺癌敏感株GLC-82和阿霉素耐药株GLC-82/ADR细胞，通过MTT法检测抗肿瘤药物的细胞毒作用，流式细胞仪检测多药耐药相关蛋白表达，碘化丙啶染色检测细胞凋亡。rn 结果：GLC-82/ADR耐药株耐药指数为，5.43，汉防己甲索作用耐药肺癌细胞候其耐药指数降至1.89，GLC-82/ADR耐药株细胞在12h MRP蛋白表达率(％)为60.25±8.71，汉防己甲素作用耐药肺癌细胞后其表达率(％)降至32.21±4.79(P<0.01)；GLC-82/ADR耐药株细胞在24h凋亡率(％)为13.37±2.65，汉防己甲素作用耐药肺癌细胞后其凋亡率(％)升至76.08±12.26(P<0.01)。rn 结论：汉防己甲素可以逆转GLC-82/ADR耐药肺癌细胞对阿霉素明显耐药，下调化疗耐药肺癌细胞MRP蛋白表达，协同阿霉素增强对化疗耐药肺癌细胞凋亡作用。

摘要： 目的：研究中药汉防已提取的生物碱汉防己甲素逆转肺癌耐药产生与凋亡发生的机理。rn 方法：采用不同浓度汉防己甲素阿霉素作用于人肺癌敏感株GLC-82和阿霉素耐药株GLC-82/ADR细胞，通过MTT法检测抗肿瘤药物的细胞毒作用，流式细胞仪检测多药耐药相关蛋白表达，碘化丙啶染色检测细胞凋亡。rn 结果：GLC-82/ADR耐药株耐药指数为，5.43，汉防己甲索作用耐药肺癌细胞候其耐药指数降至1.89，GLC-82/ADR耐药株细胞在12h MRP蛋白表达率(％)为60.25±8.71，汉防己甲素作用耐药肺癌细胞后其表达率(％)降至32.21±4.79(P<0.01)；GLC-82/ADR耐药株细胞在24h凋亡率(％)为13.37±2.65，汉防己甲素作用耐药肺癌细胞后其凋亡率(％)升至76.08±12.26(P<0.01)。rn 结论：汉防己甲素可以逆转GLC-82/ADR耐药肺癌细胞对阿霉素明显耐药，下调化疗耐药肺癌细胞MRP蛋白表达，协同阿霉素增强对化疗耐药肺癌细胞凋亡作用。

摘要： 目的：研究中药汉防已提取的生物碱汉防己甲素逆转肺癌耐药产生与凋亡发生的机理。rn 方法：采用不同浓度汉防己甲素阿霉素作用于人肺癌敏感株GLC-82和阿霉素耐药株GLC-82/ADR细胞，通过MTT法检测抗肿瘤药物的细胞毒作用，流式细胞仪检测多药耐药相关蛋白表达，碘化丙啶染色检测细胞凋亡。rn 结果：GLC-82/ADR耐药株耐药指数为，5.43，汉防己甲索作用耐药肺癌细胞候其耐药指数降至1.89，GLC-82/ADR耐药株细胞在12h MRP蛋白表达率(％)为60.25±8.71，汉防己甲素作用耐药肺癌细胞后其表达率(％)降至32.21±4.79(P<0.01)；GLC-82/ADR耐药株细胞在24h凋亡率(％)为13.37±2.65，汉防己甲素作用耐药肺癌细胞后其凋亡率(％)升至76.08±12.26(P<0.01)。rn 结论：汉防己甲素可以逆转GLC-82/ADR耐药肺癌细胞对阿霉素明显耐药，下调化疗耐药肺癌细胞MRP蛋白表达，协同阿霉素增强对化疗耐药肺癌细胞凋亡作用。

摘要： 目的：研究中药汉防已提取的生物碱汉防己甲素逆转肺癌耐药产生与凋亡发生的机理。rn 方法：采用不同浓度汉防己甲素阿霉素作用于人肺癌敏感株GLC-82和阿霉素耐药株GLC-82/ADR细胞，通过MTT法检测抗肿瘤药物的细胞毒作用，流式细胞仪检测多药耐药相关蛋白表达，碘化丙啶染色检测细胞凋亡。rn 结果：GLC-82/ADR耐药株耐药指数为，5.43，汉防己甲索作用耐药肺癌细胞候其耐药指数降至1.89，GLC-82/ADR耐药株细胞在12h MRP蛋白表达率(％)为60.25±8.71，汉防己甲素作用耐药肺癌细胞后其表达率(％)降至32.21±4.79(P<0.01)；GLC-82/ADR耐药株细胞在24h凋亡率(％)为13.37±2.65，汉防己甲素作用耐药肺癌细胞后其凋亡率(％)升至76.08±12.26(P<0.01)。rn 结论：汉防己甲素可以逆转GLC-82/ADR耐药肺癌细胞对阿霉素明显耐药，下调化疗耐药肺癌细胞MRP蛋白表达，协同阿霉素增强对化疗耐药肺癌细胞凋亡作用。

摘要： 目的：探讨蝎毒多肽(peptide extract from scorpion venom,PESV)对白血病干细胞(leukemic stem cell,LSC)在体内多药耐药(multidrug resistance,MDR)的影响. 方法：培养K562/A02细胞,在对数生长期收集并经免疫磁珠法分选出K562/A02干细胞备用;40只BABL/c裸鼠,取5只注射K562/A02干细胞形成皮下瘤块备用;采用随机数字表法将35只小鼠分为正常对照组、模型组、耐阿霉素(Adriamycin,ADM)组、PESV组和ADM+PESV高、中、低剂量组,每组5只.正常对照组不作处理,其余各组包埋瘤块组织,造模后模型组给予1mL生理盐水腹腔注射,每天1次;ADM组腹腔注射ADM0.05mg,隔天1次;PESV组腹腔注射PESV2μg,每天1次;ADM+PESV高、中、低剂量组腹腔注射ADM0.05mg,隔天1次,同时给予PESV(5、2、1μg)腹腔注射,每天1次.给药14天.流式细胞术检测P-糖蛋白(P-glycoprotein,P-gp);RT-PCR检测乳腺癌耐药蛋白(breast cancer resistance protein,BCRP)、多药耐药基因1(multidrug resistance1,MDR1)mRNA表达;免疫组化法检测乙醛脱氢酶1(aldehyde dehydrogenase1,ALDH1);Western blot检测磷脂酰肌醇3激酶(phosphoinositide3-kinase,PI3-K)蛋白;ELISA检测核转录因子NF-κB含量. 结果：K562/A02细胞经免疫磁珠分选前后的CD34+CD38-细胞比率分别为31.5％、92.8％,耐药率(IC50)分别为(60.33±10.68)μg/mL、(58.33±9.72)μg/mL.造模组裸鼠成瘤率100％.与模型组比较,ADM组各项检测指标比较,差异无统计学意义(P＞0.05);PESV组BCRP、MDR1mRNA和NF-κB因子水平比较,差异均有统计学意义(P＜0.05);ADM+PESV高、中、低剂量组P-gp值降低,PI3-K蛋白表达下调(P<0.05),ADM+PESV高、中剂量组BCRP mRNA表达降低,MDR1mRNA表达升高,差别均有统计学意义(P<0.05),ADM+PESV高剂量组PI3-K蛋白表达下调,差异有统计学意义(P<0.05).分别与ADM组和PESV组比较,ADM+PESV高剂量组P-gp、BCRP mRNA、MDR1mRNA、PI3-K和NF-κB水平明显均下调,差异有统计学意义(P＜0.05).各组ALDH1阳性率比较,差异均无统计学意义(P＞0.05). 结论：PESV联合ADM具有下调白血病K562/A02干细胞P-gp、BCRP、MDR1、PI3-K、NF-κB的表达水平,可以增强白血病K562/A02干细胞在体内对ADM的敏感度,具有逆转其多药耐药作用.

摘要： 目的：探讨蝎毒多肽(peptide extract from scorpion venom,PESV)对白血病干细胞(leukemic stem cell,LSC)在体内多药耐药(multidrug resistance,MDR)的影响. 方法：培养K562/A02细胞,在对数生长期收集并经免疫磁珠法分选出K562/A02干细胞备用;40只BABL/c裸鼠,取5只注射K562/A02干细胞形成皮下瘤块备用;采用随机数字表法将35只小鼠分为正常对照组、模型组、耐阿霉素(Adriamycin,ADM)组、PESV组和ADM+PESV高、中、低剂量组,每组5只.正常对照组不作处理,其余各组包埋瘤块组织,造模后模型组给予1mL生理盐水腹腔注射,每天1次;ADM组腹腔注射ADM0.05mg,隔天1次;PESV组腹腔注射PESV2μg,每天1次;ADM+PESV高、中、低剂量组腹腔注射ADM0.05mg,隔天1次,同时给予PESV(5、2、1μg)腹腔注射,每天1次.给药14天.流式细胞术检测P-糖蛋白(P-glycoprotein,P-gp);RT-PCR检测乳腺癌耐药蛋白(breast cancer resistance protein,BCRP)、多药耐药基因1(multidrug resistance1,MDR1)mRNA表达;免疫组化法检测乙醛脱氢酶1(aldehyde dehydrogenase1,ALDH1);Western blot检测磷脂酰肌醇3激酶(phosphoinositide3-kinase,PI3-K)蛋白;ELISA检测核转录因子NF-κB含量. 结果：K562/A02细胞经免疫磁珠分选前后的CD34+CD38-细胞比率分别为31.5％、92.8％,耐药率(IC50)分别为(60.33±10.68)μg/mL、(58.33±9.72)μg/mL.造模组裸鼠成瘤率100％.与模型组比较,ADM组各项检测指标比较,差异无统计学意义(P＞0.05);PESV组BCRP、MDR1mRNA和NF-κB因子水平比较,差异均有统计学意义(P＜0.05);ADM+PESV高、中、低剂量组P-gp值降低,PI3-K蛋白表达下调(P<0.05),ADM+PESV高、中剂量组BCRP mRNA表达降低,MDR1mRNA表达升高,差别均有统计学意义(P<0.05),ADM+PESV高剂量组PI3-K蛋白表达下调,差异有统计学意义(P<0.05).分别与ADM组和PESV组比较,ADM+PESV高剂量组P-gp、BCRP mRNA、MDR1mRNA、PI3-K和NF-κB水平明显均下调,差异有统计学意义(P＜0.05).各组ALDH1阳性率比较,差异均无统计学意义(P＞0.05). 结论：PESV联合ADM具有下调白血病K562/A02干细胞P-gp、BCRP、MDR1、PI3-K、NF-κB的表达水平,可以增强白血病K562/A02干细胞在体内对ADM的敏感度,具有逆转其多药耐药作用.

摘要： 本发明涉及癌细胞耐药性的标志物、逆转癌细胞耐药性的制剂组合及其应用。该标志物包括癌相关成纤维细胞的CCL5趋化因子及其编码的基因，所述CCL5趋化因子的表达水平与癌细胞耐药性成正相关。该制剂组合包括抑制癌细胞复制的PARP抑制剂和用于调节所述PARP引起的癌细胞耐药性的逆转剂。该逆转剂包括下调癌相关成纤维细胞CCL5表达的调节剂、CCL5的中和抗体和NF‑κB信号抑制剂中的至少一种。采用下调CCL5表达相关调节剂、CCL5中和抗体和/或靶向NF‑κB抑制剂可逆转PARP抑制剂诱导的CAFs活化作用，抑制PARP抑制剂引起的癌细胞耐药性，提升PARP抑制剂杀伤癌细胞的效果。

摘要： 本发明公开了DNMT1蛋白抑制剂在制备逆转MTX耐药肿瘤细胞耐药性的药物中的应用，属于医药技术领域。本发明针对MTX耐药且DHFR基因高度扩增的恶性肿瘤细胞，以DNMT1为靶点，降低DHFR基因的扩增程度，减少细胞内的DMs，同时，干扰DNMT1可抑制DNA双链断裂的损伤应答信号，消减HR和A‑EJ对DSBs的修复作用从而逆转肿瘤耐药，提高肿瘤治疗的效率。本发明为MTX作为主要治疗药物且易产生耐药性的恶性肿瘤的生物治疗提供新的靶向性治疗方案，并揭示肿瘤耐药细胞中DNMT1参与DMs形成以及肿瘤耐药的机制，有助于更全面解析因DSBs引发的肿瘤发生发展及耐药的过程，为逆转肿瘤耐药提供新策略。此外，本发明对于深入了解化疗耐药的本质以及寻找个体化治疗的耐药靶点也具有非常积极的意义。

摘要： 本发明公开了一种与肿瘤细胞MTX耐药性相关的circRNA及其在逆转肿瘤细胞对MTX耐药中的应用。本发明选取HT‑29 MTX敏感及含DMs的MTX耐药细胞系作为研究对象，通过二代测序、验证及优选，获得在MTX耐药细胞中高表达的circRNA，命名为circRNA7746，通过建立荷瘤小鼠的MTX治疗模型结合PCR及琼脂糖凝胶电泳方法，进一步确定了circRNA7746的表达量与肿瘤细胞对氨甲蝶呤(MTX)耐药性程度正相关。利用病毒转染方法分别检测了干扰circRNA7746对细胞耐药性、DHFR基因的扩增程度及扩增形式及微核外排的影响，确定了抑制circRNA7746可以促进DMs外排，逆转肿瘤细胞对MTX耐药。本发明的提出为肿瘤治疗提供新的靶点，为有效地对抗MTX耐药提供了有效技术手段。

摘要： 本发明公开了MSH3蛋白抑制剂在制备逆转MTX耐药肿瘤细胞耐药性的药物中的应用，属于医药技术领域。本发明针对MTX耐药且DHFR基因高度扩增的恶性肿瘤细胞，以MSH3为靶点，降低基因扩增程度，消减细胞内的DMs和HSR，同时，干扰MSH3可抑制HR、NHEJ和A‑EJ对DSBs的修复作用从而逆转肿瘤耐药，提高肿瘤治疗的效率。本发明为MTX作为主要治疗药物且易产生耐药性的恶性肿瘤的生物治疗提供新的靶向性治疗方案，为有效地对抗MTX耐药提供了科学的依据。此外，本发明对于深入了解化疗耐药的本质以及寻找个体化治疗的耐药靶点也具有非常积极的意义。

摘要： 本发明公开了MSH2抑制剂在制备逆转MTX耐药肿瘤细胞耐药性的药物中的应用，属于医药技术领域。本发明针对MTX耐药且DHFR基因高度扩增的恶性肿瘤细胞，以MSH2为靶点，抑制DSBs的修复，减少DMs和HSRs的形成；同时使含有DHFR扩增基因的微芽/微核形成增多，导致细胞内DHFR基因剂量减少，使细胞对MTX的耐药能力降低，进而逆转MTX耐药肿瘤细胞的耐药情况，提高肿瘤治疗的效率。本发明为MTX作为主要治疗药物且易产生耐药性的恶性肿瘤的生物治疗提供新的靶向性治疗方案，为有效地对抗MTX耐药提供了科学的依据。此外，本发明对于深入了解化疗耐药的本质以及寻找个体化治疗的耐药靶点也具有非常积极的意义。

摘要： 本发明属于医药生物技术领域，公开了一种可用于检测前列腺癌对多西他赛耐药性的分子标志物，所述分子标志物为CRIP2基因或CRIP2蛋白；CRIP2基因或CRIP2蛋白在DTX耐药前列腺癌细胞中的表达量明显高于正常前列腺癌细胞，差异具有统计学意义，因此，通过测定CRIP2基因或CRIP2蛋白的表达量可以作为判断用药者对DTX药物耐药性/敏感性的依据之一。而且，通过敲低DTX耐药前列腺癌细胞中CRIP2基因的表达水平，能提高DTX耐药前列腺癌细胞对DTX的敏感性，同时，干扰CRIP2基因后能够明显抑制DTX耐药前列腺癌细胞的增殖，因此，CRIP2基因可作为逆转前列腺癌DTX耐药的作用靶点，通过抑制CRIP2基因的表达和/或功能能够逆转肿瘤细胞对多西他赛耐药性，对前列腺癌治疗具有重要的意义。

摘要： 本发明涉及癌细胞耐药性的标志物、逆转癌细胞耐药性的制剂组合及其应用。该标志物包括癌相关成纤维细胞的CCL5趋化因子及其编码的基因，所述CCL5趋化因子的表达水平与癌细胞耐药性成正相关。该制剂组合包括抑制癌细胞复制的PARP抑制剂和用于调节所述PARP引起的癌细胞耐药性的逆转剂。该逆转剂包括下调癌相关成纤维细胞CCL5表达的调节剂、CCL5的中和抗体和NF‑κB信号抑制剂中的至少一种。采用下调CCL5表达相关调节剂、CCL5中和抗体和/或靶向NF‑κB抑制剂可逆转PARP抑制剂诱导的CAFs活化作用，抑制PARP抑制剂引起的癌细胞耐药性，提升PARP抑制剂杀伤癌细胞的效果。

摘要： 本发明公开了DNMT1蛋白抑制剂在制备逆转MTX耐药肿瘤细胞耐药性的药物中的应用，属于医药技术领域。本发明针对MTX耐药且DHFR基因高度扩增的恶性肿瘤细胞，以DNMT1为靶点，降低DHFR基因的扩增程度，减少细胞内的DMs，同时，干扰DNMT1可抑制DNA双链断裂的损伤应答信号，消减HR和A‑EJ对DSBs的修复作用从而逆转肿瘤耐药，提高肿瘤治疗的效率。本发明为MTX作为主要治疗药物且易产生耐药性的恶性肿瘤的生物治疗提供新的靶向性治疗方案，并揭示肿瘤耐药细胞中DNMT1参与DMs形成以及肿瘤耐药的机制，有助于更全面解析因DSBs引发的肿瘤发生发展及耐药的过程，为逆转肿瘤耐药提供新策略。此外，本发明对于深入了解化疗耐药的本质以及寻找个体化治疗的耐药靶点也具有非常积极的意义。

摘要： 本发明涉及癌细胞耐药的标志物、逆转癌细胞耐药的制剂组合及其应用。该标志物为CEBPB基因及其表达的C/EBPβ蛋白，CEBPB基因及其蛋白调控癌细胞的DNA损伤修复信号。本发明发现C/EBPβ介导PARP抑制剂耐药，是同源重组修复通路的关键调控因子；通过对C/EBPβ靶向治疗可以诱导产生HRD，从而相应地恢复癌细胞对PARP抑制剂的敏感性，降低或解除PARP抑制剂的获得性耐药。

摘要： 一种同载肿瘤耐药逆转剂和逆转剂增效剂的抗癌缓释注射剂由缓释微球和溶媒组成。其中缓释微球以缓释辅料为载体，溶媒为含助悬剂的特殊溶媒。微球中的抗癌有效成分为选自奈拉滨、替匹法尼、罗纳法尼、戊司泊达等的肿瘤耐药逆转剂和/或选自羟基喜树硷、米托唑胺、多西他赛、奥沙利铂、庚铂、异环磷酰胺、洛莫司汀、雌莫司汀、福莫司汀、萨莫司汀或替尼泊甙的逆转剂增效剂；缓释辅料选自聚苯丙生、双脂肪酸与癸二酸共聚物、聚(芥酸二聚体－癸二酸)、聚(富马酸－癸二酸)、EVAc等；助悬剂的黏度为100cp－3000cp(25°C－30°C时)，选自羧甲基纤维素钠等。缓释微球还可制成缓释植入剂，肿瘤内或瘤周注射或放置可增强放化疗等非手术疗法的治疗效果。