细胞浸润

摘要： 马立克氏病是由马立克氏病病毒引起的一种鸡淋巴组织增生性传染病。以外周神经、皮肤和虹膜在内的各种器官和组织的单核性细胞浸润为特征,能在多个器官上形成肿瘤或造成器官的明显肿大。本病传染性强,在病原学上与鸡的其它淋巴肿瘤病不同。该病存在于世界所有养禽国家和地区,危害较大。目前已广泛使用火鸡疱疹病毒疫苗进行预防,本病的损失有所下降,但是免疫失败还是屡有发生。

摘要： 目的筛选骨关节炎(OA)关节滑膜组织差异表达基因并分析其生物学功能,探讨核心差异表达基因与免疫细胞浸润的相关性。方法从Gene Expression Omnibus数据库筛选符合条件的基因芯片GSE55235、GSE55457、GSE1919和GSE12021,筛选上述四个数据集共有的正常和OA关节滑膜组织差异表达基因,应用DA⁃VID对差异表达基因进行生物学功能分析。采用STRING在线分析平台构建差异表达基因蛋白质互作网络,筛选核心差异表达基因。采用CIBERSORT方法分析正常和OA关节滑膜组织免疫细胞浸润情况以及核心差异表达基因与免疫细胞浸润的相关性。结果相对于正常关节滑膜组织,OA关节滑膜组织差异表达基因共1418个,其中692个上调、726个下调。OA和正常关节滑膜组织差异表达基因本体功能主要有酰胺结合、DNA结合转录因子结合、糖胺聚糖结合等,参与的信号通路主要有人类T细胞白血病病毒感染、TNF信号通路、类风湿性关节炎等。RPL37A、MYC、CDC20是OA的关节滑膜组织核心差异表达基因。与正常滑膜组织相比,OA患者关节滑膜组织中记忆B细胞、浆细胞、辅助性T细胞和静息肥大细胞所占比例较多,而静息记忆性CD4^(+)T细胞、嗜酸性粒细胞和活化肥大细胞所占比例较少(P均<0.05);RPL37A、MYC、CDC20与免疫细胞浸润关系密切(P均<0.05)。结论OA关节滑膜组织差异表达基因共1418个,其中692个上调、726个下调,基因本体功能主要有酰胺结合、DNA结合转录因子结合等,参与人类T细胞白血病病毒感染、TNF信号通路等;OA的核心差异表达基因是RPL37A、MYC、CDC20,与免疫细胞浸润关系密切。

摘要： 目的探讨多模式镇痛对坐骨神经慢性收缩损伤(CCI)大鼠腰椎背根神经节(DRG)的作用及机制。方法30只雄性Sprague Dawley(SD)大鼠随机均分为对照组(暴露右侧坐骨神经、不结扎)、模型组(行右侧CCI术损伤坐骨神经)及多模式镇痛组[行CCI术,管饲法(曲唑酮)联合腹腔注射(加巴喷丁)镇痛处理,术后第1天开始连续给4 d];术后第14天采用挖洞和筑巢试验检测各组大鼠的挖土重量和筑巢能力,采用痛觉测试仪检测术后第3、7及14天各组大鼠的疼痛阈值;术后第14天麻醉处死各组大鼠,取手术侧腰椎DFG,采用免疫荧光染色法检测腰椎DRG中CD3+T细胞,采用蛋白印迹法检测腰椎DRG中神经生长因子(NGF)、血管紧张素Ⅱ(AngⅡ)、血管紧张素2型受体(AT2 receptor)、磷酸-p38 MAPK(P-p38 MAPK)单克隆抗体、磷酸-p44/pp42 MAPK(P-p44/p42 MAPK)和p42/p44 MAPK(ERK1/2)的表达。结果各组大鼠手术后挖土重量和筑巢能力得分均表现为模型组多模式镇痛组>对照组(P多模式镇痛组>模型组(P多模式镇痛组>对照组(P<0.05)。结论多模式镇痛可缓解CCI大鼠外周神经损伤,其机制与抑制腰椎DRG中AngⅡ/AT2 receptor信号级联反应和MAPK信号通路的激活,减少CD3+T细胞向DRG的浸润有关。

摘要： 目的 探讨建立一种快速识别活体小鼠血管内外淋巴细胞的方法.方法 C57 BL/6J小鼠随机分为CD45-APCcy7抗体注射组(n=6)、CD45-BV570抗体注射组(n=3)和对照组(n=3).抗体注射组小鼠经内眦静脉丛注射抗小鼠CD45抗体(3μg/只或5μg/只),对照组小鼠注射同等体积的磷酸缓冲盐液(phosphate buffer saline,PBS),注射后2.5 min摘眼球取外周血,3 min时断颈处死小鼠,取淋巴结(lymph node,LN)、脾脏(spleen,SP)、骨髓(bone marrow,BM)、肝脏和肺脏与外周血一同制备单个核细胞悬液,每组细胞均进行CD4和CD8分子表面染色,流式细胞仪上机检测.结果 流式细胞仪检测结果显示CD45-APCcy7抗体注射组小鼠给予3μg/只和5μg/只两个剂量后,外周血中CD4+和CD8+细胞95％以上均为CD45+细胞[CD4+细胞:3 μg/只和5μg/只CD45+细胞百分率为(96.20±1.50)％比(98.77±1.88)％,t=1.85,P＞0.05;CD8+细胞:3μg/只和5μg/只CD45+细胞百分率为(99.27±0.75)％比(99.93±0.12)％,t=1.52,P＞0.05],表明此两种剂量均可实现血管内淋巴细胞几乎全部活体、快速染色.在3 μg/只注射剂量下,使用同一克隆号不同荧光标记的抗CD45抗体检测时,外周血中95％以上CD4+和CD8+细胞均可被染色为CD45+.在CD45-APCcy7抗体注射组和CD45-BV570抗体注射组CD4+细胞中CD45+细胞百分率分别为(96.20±1.50)％和(99.43±0.98)％;而CD8+细胞中CD45+细胞百分率分别为(99.27±0.75)％和(99.90±0.17)％均高于对照组(t值分别为111.10,175.40,229.00,994.90,P值均＜0.05).淋巴器官和非淋巴器官染色结果表明,抗CD45抗体可清楚地区分CD45+和CD45-细胞群,两种不同标记的抗体对CD45+细胞染色的百分率分别为LN[(0.35±0.23)％比(0.61±0.13)％;t=1.69,P＞0.05]、SP[(1.07±0.28)％比(2.87±1.13)％;t=2.85,P＞0.05]、BM[(0.85±0.24)％比(1.68±0.73)％;t=1.89,P＞0.05]、肝脏[(15.53±5.20)％比(19.60±9.36)％;t=0.66,P＞0.05]和肺脏[(29.97±6.14)％比(41.03±21.78)％;=0.85,P＞0.05],各组织中统计学分析结果差异均无统计学意义.结论 本实验建立了一种快速检测并区分血管内外淋巴细胞的方法,且可联合多种标记抗体一起检测,是一种高效、快速、准确的活体小鼠淋巴细胞检测手段.

摘要： 目的 探讨转化生长影响因子(TGIF)过表达对人乳腺癌MCF-7细胞体外迁移和侵袭能力的影响.方法 将对数生长期MCF-7细胞分为MCF-7-TGIF组和MCF-7-空质粒(EV)组,分别加入TGIF质粒和EV进行转染.取转染后对数生长期的MCF-7-TGIF组和MCF-7-EV组细胞,四甲基偶氮唑盐比色法检测2组细胞增殖能力,划痕实验检测2组细胞迁移能力,Transwell小室实验检测2组细胞侵袭能力,Western blot法检测2组细胞中Anti-Flag蛋白、β连环蛋白(β-catenin)、上皮型钙黏附蛋白(E-cadherin)和神经型钙黏蛋白(N-cadherin)表达水平.结果 MCF-7-TGIF组细胞中检测到Anti-Flag蛋白表达,TGIF过表达的人乳腺癌细胞株构建成功.接种24、48、72、96 h后,MCF-7-TGIF组细胞增殖能力与MCF-7-EV组比较差异均无统计学意义(P>0.05).细胞划痕培养48 h后,MCF-7-EV组和MCF-7-TGIF组细胞相对迁移能力分别为1.00±0.12和1.63±0.09,MCF-7-TGIF组细胞相对迁移能力高于MCF-7-EV组(P<0.05).MCF-7-TGIF组和MCF-7-EV组细胞相对侵袭能力分别为1.00±0.08和1.76±0.14,MCF-7-TGIF组细胞侵袭能力显著高于MCF-7-EV组(P<0.05).MCF-7-TGIF组细胞β-catenin蛋白相对表达量显著高于MCF-7-EV组(P<0.05),2组细胞E-cadherin和N-cadherin蛋白相对表达量比较差异无统计学意义(P<0.05).结论 过表达TGIF在体外可促进人乳腺癌MCF-7细胞的迁移和侵袭,其机制可能与Wnt/β-catenin信号通路有关,TGIF可能参与了乳腺癌细胞的迁移和侵袭过程.

摘要： 【目的】探讨在小鼠耳肿模型炎症反应发生早期Periostin对中性粒细胞的调控作用。【方法】每组取30只,肿耳模型采用DNFB(1-氟-2,4-二硝基苯)致敏剂分别涂抹野生型小鼠(WT)和Periostin-/-小鼠(POSTN-/-)。在造模后24 h,使用螺旋测微器分别进行耳廓厚度测量;免疫组化染色、流式细胞分析的方法检测耳廓组织炎症细胞以及中性粒细胞浸润情况;实时荧光定量PCR(Q-PCR)分析中性粒细胞相关细胞因子、趋化因子的表达水平。【结果】致敏剂致耳肿模型前2组小鼠耳朵厚度经测量无统计学差异(P>0.05),致敏后24 h经测量POSTN-/-组耳廓肿胀程度大于WT组(P<0.05);HE染色显示POSTN-/-组炎症细胞浸润数目多于WT组(均P<0.05);免疫组化染色和流式细胞分析显示耳肿组织中中性粒细胞浸润比率POSTN-/-组高于WT组(P<0.05);qRT-PCR检测耳肿组织中的中性粒细胞相关细胞因子和趋化因子表达水平POSTN-/-组高于WT组(均P<0.05)。【结论】Periostin在小鼠耳肿炎症反应早期减少了中性粒细胞的浸润从而一定程度参与抑制炎症反应发生发展。

摘要： 目的研究蜕膜NK细胞(decidual natural killer,dNK)能否作为母-胎界面中与滋养细胞直接接触的细胞介质,通过其分泌的相关细胞因子,协同子痫前期相关微小RNA-18a(miR-18a)影响人正常滋养细胞(HTR8)浸润能力,参与子痫前期(pre-eclapmpsia,PE)发病。方法收集2017年9月-12月于西安医学院第一附属医院妇科行人工流产患者的早孕蜕膜组织(11例),梯度密度离心联合流式细胞术分选、纯化dNK细胞;在HTR8细胞中转染miR-18a前体分子,共分3组:miR-18a过表达组、miR-18a抑制组、NC组(对照组);将dNK与上述3组HTR8细胞分别共培养;实时定量PCR(RT-qPCR)检测转染后HTR8细胞中miR-18a mRNA的表达。ELISA检测共培养24 h后各组上清液中白细胞介素8(interleukin 8,IL-8)的表达;Transwell实验分3组:共培养组、单纯培养组、对照组;检测dNK与miR-18a抑制组HTR8细胞共培养上清对滋养细胞浸润能力的影响。结果与对照组相比,miR-18a过表达和抑制均获得明显效果(均P<0.001);dNK与抑制组HTR8共培养24 h后,上清液中IL-8的表达低于对照组[(508.35±28.22)ng/L,P<0.001];与单纯培养组相比,共培养组HTR8细胞浸润能力增强(367.11±88.26,P<0.001)。结论 dNK细胞能够通过其分泌细胞因子IL-8,并协同miR-18a共同影响滋养细胞浸润能力,从而可能参与PE发病过程。

摘要： 糖尿病肾病(DN)的是一种慢性炎性疾病,巨噬细胞浸润是其重要病理特征.近期研究发现,髓系细胞触发受体-1(TREM-1)作为炎症激发及级联放大的关键介质,能调节巨噬细胞迁移功能.活性维生素D(VD)具有显著肾保护作用,但其对于DN状态下巨噬细胞浸润及TREM-1表达的影响尚不清楚.本研究旨在探讨VD抑制DN大鼠巨噬细胞浸润中TREM-1的表达，探明VD对TREM-1的影响与TREM-1对巨噬细胞粘附和迁移功能的作用。

摘要： 目的:研究皮肤鳞状细胞癌(CSCC)和正常皮肤组织中Livin基因的表达与CD3+T细胞浸润情况,探讨它们在CSCC发生、发展中的可能作用.方法:采用免疫组织化学SP法检测40例CSCC组织和10例正常皮肤组织Livin蛋白的表达及CD3+T细胞的浸润情况.结果:Livin蛋白在CSCC中阳性表达率为70.00％(28/40),正常皮肤组织中Livin无表达.Livin蛋白的阳性表达率及CD3+T细胞的数量均与CSCC的病理分级、淋巴结转移有关,但二者之间无显著相关性.结论:Livin蛋白可作为判断CSCC恶性程度、评价预后的指标.CD3+T细胞可成为反映机体抗肿瘤特异性细胞免疫状态和生物学行为及判断患者预后的重要指标.

摘要： 本文旨在探讨肾移植急性排斥反应患者肾组织CD20浸润是否为判断预后的指标。观察不同时期急性排斥反应CD20细胞浸润程度和预后间的关系。研究指出：CD20阳性B淋巴细胞与其他单个核细胞有所不同在2周内发生的急性排斥反应中浸润较少。大于2周发生的急性细胞性排斥反应，CD20细胞浸润程度与预后没有关系，而整体急性细胞性排斥反应中，CD20细胞浸润细胞增多预后不良，可能与低密度CD20细胞组中极早期排斥反应比例较高有关。

摘要： 嗜酸性多发性肌炎，临床表现与多发性肌炎相似，表现为近端肌肉无力，可累及颈屈肌，不伴有皮肤受累。可累及全身其他系统，心脏受累最常见。CK和醛缩酶是正常值的10倍。肌肉病理示肌纤维坏死和嗜酸粒细胞浸润。该病可使用糖皮质激素治疗，但效果反应不一。嗜酸性多发性肌炎需与多种疾病进行鉴别，包括寄生虫感染，因二者治疗相反，故注意鉴别十分必要。此外还需与自身免疫性疾病鉴别，主要包括各种血管炎，如结节性多动脉炎或伴有血管炎的嗜酸性肉芽肿(以前称Churg-Straus syndrome)，甚至一些特发性炎症性肌病的多发性肌炎和皮肌炎形式。此外，有报道称y -sarcoglycanopathy中也可见嗜酸细胞浸润。

摘要： 犬小干线虫性皮炎是由小杆线虫属幼虫引起。小杆线虫属中营自由生括的类圆小杆线虫的幼业侵入毛囊，引起毛囊炎。木病例的组织切片可见虫体形成肉芽肿病灶，切面虫体较完整，可见嗜酸性粒细胞、淋巴细胞及组织细胞浸润，虫体形态学基本符合小杆线虫特征。根据切片所见虫体特征，及患犬无贫血，腹泻、呕吐等全身反应，因此可以排除钩虫感染。根据虫体形态学特扯、动物感染寄生虫后的症状，以及寄生上的接触史和小杆线虫的感染途径特征，结合文献资料和治疗结果显终本报告的病例诊断为小杆线虫性皮炎。

摘要： 嗜酸细胞性胃肠炎是一种少见疾病，以胃肠道的某些部位弥漫性或局限性嗜酸性粒细胞浸润为特征。临床表现为腹部痉挛性疼痛，可伴恶心、呕吐、发热等，部分患者有特殊食物过敏史。约80%的患者外周血嗜酸性粒细胞高达15%～70%。Kaijser于1937年首先报道，迄今世界文献报道约300余例左右。而同时合并嗜酸性胆囊炎者极为罕见，国内仅见嗜酸性胃肠炎的报道。EG根据嗜酸性粒细胞浸润的部位不同，临床上分三型：粘膜型、肌层及浆膜型，某科于2007年4月9日收治了一名以浸润粘膜层为主的EG并发EC的老年患者，主要临床表现为腹痛、腹泻，伴有外周血及骨髓中嗜酸性粒细胞增多，急性胆囊炎症状，本文对该患者的护理经验进行了总结。

摘要： 哮喘是由多种炎症细胞和细胞组份参与的气道慢性炎症性疾患，多数学者认为机体Th1/Th2平衡失调是导致哮喘发病的主要原因，即哮喘患者体内Th0向Th2分化过度，Th2淋巴细胞分泌IL-4、IL-5等细胞因子，介导气道嗜酸粒细胞等多种炎症细胞浸润，导致哮喘发病。另一方面，Th1细胞通过分泌IFN-γ而抑制Th2的功能，对哮喘气道炎症具有抑制作用。GATA-3是GATA家族锌指蛋白成员，在Th2的发育中起关键作用，同时抑制Th1的功能。基于此，建立了OVA致小鼠哮喘模型，检测气道炎症细胞浸润，脾细胞培养上清液和BALF中IL-4和IFN-γ的浓度，脾细胞和肺组织GATA-3 mRNA的表达水平，旨在探讨转录因子GATA-3 mRNA在哮喘小鼠体内表达与气道炎症和细胞因子表达的关系。

摘要： 树突状细胞(dendritic cells DC),是目前发现的功能最强的抗原递呈细胞(antigen presenting cells,APC)，在很多病理过程中唯一激活初始型T细胞反应。DC是否参与了机体对MPAHG的反应及可能的机制目前还不清楚，国内外也未见系统性研究该材料对DC影响的报道，本实验对其进行初步的探讨，研究指出膨体聚四氟乙烯(ePTEE)的组织相容性最好，炎症反应最轻，MPAHG与之最接近，至于MPAHG植入机体后是否具有潜在的抗原性还有待进一步研究。

摘要： 目前研究普遍认为,慢性支气管炎是以中性粒细胞浸润为主的慢性气道炎症,髓过氧化物酶(MPO)是中性粒细胞活性的标志物,白细胞计数和分类及MPO活性的测定均可代表细胞浸润情况,但已有研究只是针对慢性支气管炎的稳定期或发展后期进行分析,本研究拟探讨在这一慢性炎症过程的形成早期和发展过程中炎症细胞特点.以寻找相应的炎症标志物,为早期适时采取干预及治疗提供依据.

摘要： 提供了一种促实体瘤浸润的增强型CART细胞及其制备方法和细胞药物，属于CART细胞技术领域。该CART细胞含有第一核酸序列和第二核酸序列，其对实体瘤肿瘤组织的浸润能力高，对肿瘤细胞的杀伤能力强。

摘要： 本公开的实施方案提供了促进癌症治疗的方法和组合物，包括至少因为它们涉及逃避肿瘤微环境的疗法。在具体实施方案中，组合物被用于利用肿瘤浸润性淋巴细胞和/或改造的T细胞的疗法，所述肿瘤浸润性淋巴细胞和/或改造的T细胞被保护免受来自肿瘤微环境的免疫抑制，因为它们被改造成减少或消除转化生长因子‑β受体2和/或T‑细胞‑Ig‑和‑ITIM‑结构域和/或CD7基因的表达。

摘要： 本发明是一种鉴定T细胞受体的同源抗原的方法，其使用来自患者的肿瘤细胞与来自患者的T细胞的组合的新抗原并使用细胞分选、基因组测序，表达TCR基因，将肿瘤新抗原呈递在MHC复合体上并在TCR识别出现之处对T细胞进行独特地条形码编码，以将TCR识别复合体中的所有组分标签化。

摘要： 本发明公开了CD8+肿瘤浸润淋巴细胞作为标志物在食管小细胞癌预后判断中的应用。本发明首次发现食管小细胞癌组织中CD8+肿瘤浸润淋巴细胞数量与食管小细胞癌预后相关：CD8+肿瘤浸润淋巴细胞的数量越多，则食管小细胞癌患者预后越好；CD8+肿瘤浸润淋巴细胞数量越少，则食管小细胞癌患者预后越差。因此，将CD8+肿瘤浸润淋巴细胞作为标志物，通过检测其数量预测食管小细胞癌患者的预后。本发明具有重要的应用价值。

摘要： 本发明公开了一种促实体瘤浸润的增强型CART细胞及其制备方法和细胞药物，涉及CART细胞技术领域。本发明公开的CART细胞含有第一核酸序列和第二核酸序列。该CART细胞对实体瘤的肿瘤组织具有更高的浸润能力，其对肿瘤细胞的杀伤能力更强，其具有广阔的临床应用前景，本发明为使用CART细胞治疗实体瘤提供了一种新的治疗思路和策略。

摘要： 本文描述用于诊断、成像和量化非钙化动脉粥样硬化斑块的组合物和方法。本文描述的组合物的实施方案包括甘露糖基化葡聚糖化合物和其它碳水化合物分子，所述碳水化合物分子例如包括诊断剂和诊断部分。本文体现的化合物和方法产生用于成像、解剖学定位和量化非钙化动脉粥样硬化斑块的优异定位和结果。

摘要： 本公开涉及一种扩增肿瘤浸润淋巴细胞中肿瘤杀伤T细胞的方法，该方法包括如下步骤：a、将单核细胞悬液与饲养层物料悬液混合，并进行悬浮培养96‑120h，得到第一培养物；其中，饲养层物料包括经辐照灭活后的3D肿瘤类器官；b、将第一培养物与肿瘤浸润淋巴细胞培养基混合，并进行悬浮培养65‑72h，得到第二培养物；c、将第二培养物与肿瘤浸润淋巴细胞培养基混合，并进行悬浮培养72‑96h，得到第三培养物；d、去除第三培养物中的饲养层物料，分离得到肿瘤杀伤T细胞。通过上述技术方案，本公开能够实现肿瘤杀伤T细胞的体外定向扩增，大幅提高肿瘤杀伤T细胞的扩增效率及肿瘤杀伤活性，同时还能提高不同扩增批次间扩增效率的一致性。

摘要： 本发明公开了一种用于肿瘤浸润性淋巴细胞快速培养的饲养细胞的制备方法，本发明所用技术为利用丝裂霉素C来处理外周血淋巴细胞得到饲养细胞，然后用饲养细胞与预培养的肿瘤浸润性淋巴细胞进行共培养。采用本发明的方法制作的饲养细胞扩增肿瘤浸润性淋巴细胞的效率与利用γ射线照射制作的饲养细胞扩增肿瘤浸润性淋巴细胞的效率相比效果更好，同时利用此法的成本显著降低。本发明方法制备方法简单易行，可以广泛推广应用。

摘要： 本发明涉及一种过继细胞疗法(ACT)中所用的肿瘤浸润淋巴细胞(TIL)的离体扩增方法及其应用。

摘要： 在一些实施方案中，公开了涉及分离的人工抗原呈递细胞(aAPC)的组合物和方法，包括aAPC，其包含用一种以上病毒载体转导的骨髓细胞，例如MOLM‑14或EM‑3骨髓细胞，其中，骨髓细胞内源性表达HLA‑A/B/C、ICOS‑L和CD58，并且其中，所述一种以上病毒载体包含编码CD86的核酸和编码4‑1BBL和/或OX40L的核酸，并转导骨髓细胞以表达CD86和4‑1BBL和/或OX40L蛋白。在一些实施方案中，还公开了用aAPC扩增肿瘤浸润淋巴细胞(TIL)的方法和用aAPC扩增后使用TIL治疗癌症的方法。