蜕膜NK细胞协同miR-18a对人正常滋养细胞浸润能力的影响

摘要

目的研究蜕膜NK细胞(decidual natural killer,dNK)能否作为母-胎界面中与滋养细胞直接接触的细胞介质,通过其分泌的相关细胞因子,协同子痫前期相关微小RNA-18a(miR-18a)影响人正常滋养细胞(HTR8)浸润能力,参与子痫前期(pre-eclapmpsia,PE)发病。方法收集2017年9月-12月于西安医学院第一附属医院妇科行人工流产患者的早孕蜕膜组织(11例),梯度密度离心联合流式细胞术分选、纯化dNK细胞;在HTR8细胞中转染miR-18a前体分子,共分3组:miR-18a过表达组、miR-18a抑制组、NC组(对照组);将dNK与上述3组HTR8细胞分别共培养;实时定量PCR(RT-qPCR)检测转染后HTR8细胞中miR-18a mRNA的表达。ELISA检测共培养24 h后各组上清液中白细胞介素8(interleukin 8,IL-8)的表达;Transwell实验分3组:共培养组、单纯培养组、对照组;检测dNK与miR-18a抑制组HTR8细胞共培养上清对滋养细胞浸润能力的影响。结果与对照组相比,miR-18a过表达和抑制均获得明显效果(均P<0.001);dNK与抑制组HTR8共培养24 h后,上清液中IL-8的表达低于对照组[(508.35±28.22)ng/L,P<0.001];与单纯培养组相比,共培养组HTR8细胞浸润能力增强(367.11±88.26,P<0.001)。结论 dNK细胞能够通过其分泌细胞因子IL-8,并协同miR-18a共同影响滋养细胞浸润能力,从而可能参与PE发病过程。