组织化学

摘要： 采用组织化学方法对海金沙(Lygodium japonicum(Thunb.)Sw.)卵发生进行了研究。高碘酸-锡夫反应(PAS反应)结果显示:颈沟和腹沟细胞外产生的黏性物质为多糖类物质;在卵细胞发生早期颈卵器细胞内均含有质体,且淀粉粒含量丰富,随着颈卵器的发育,卵细胞以及颈沟和腹沟细胞内淀粉粒数量和体积均逐渐减少,最后退化消失。苏丹黑B反应结果显示:海金沙颈沟和腹沟细胞外产生的黏性物质也含有脂类物质,而卵细胞内并未有明显脂类物质产生;卵细胞质膜处也并没有糖类或脂类物质的积累。本研究从组织化学角度佐证了海金沙的特殊性,即既有原始蕨类的特征,又有进化蕨类的特征。

摘要： 以蕨类模式植物水蕨(Ceratopteris thalictroides L.Brongn.)为供试材料,设置不同质量浓度布雷菲德菌素A(BFA)分别处理10、20、30 h,采用光学显微镜和电镜对其树脂切片进行了观察;在此基础上,进行高碘-酸锡夫反应(PAS)和苏丹黑B反应。结果显示:对照组(未经BFA处理)发育卵中期的水蕨卵细胞较大,核仁呈圆形,细胞内高尔基体、内质网等细胞器完整;卵细胞和腹沟细胞间的受精孔清晰可见,二者间的分离腔内仅有极少量的泡状分泌物;卵膜较厚,有明显的层次。而处理组卵细胞的受精孔和卵膜不典型,由数量较多、大小不一的囊泡组成;受精孔下方有较多的线粒体和少量的高尔基体分布;高尔基体、内质网等膜性细胞器已断裂;细胞核上方和卵膜下方均分布着大量的嗜锇性囊泡,分离腔中充满了絮状物质。组织定位显示:对照组的分离腔较空,而处理组分离腔内充满着多糖类物质。综上所述,BFA会对卵细胞中的内质网和高尔基体等膜性细胞器造成破坏,影响分泌系统的正常功能,进而影响卵膜及受精孔的形成。本研究结果为进一步探索受精孔形成的机制以及蕨类植物生殖生物学的研究奠定了基础。

摘要： 为了揭示矩镰荚苜蓿(Medicago archiducis-nicolai)地下芽越冬机理,采用石蜡切片法,通过组织化学染色,跟踪观测了该植物在自然越冬过程中地下芽的组织化学特征与分化过程。结果显示:在越冬期,地下芽内淀粉粒主要贮存在芽体皮层、髓部、芽尖外围幼叶、芽尖基层组织和叶原基底部,蛋白质主要贮存在芽尖生长锥、叶原基顶部和芽体形成层;秋末冷适应期,地下芽芽体快速伸长,芽内淀粉粒开始急速降解,但与其他时期相比,淀粉总含量仍处较高水平;进入初冬期后,随气温的下降,芽分化与伸长生长开始减慢,到隆冬冻胁迫期,芽锥和芽体生长停止,芽内淀粉几乎全部降解;之后随气温回升,芽体开始恢复生长,但芽锥分生生长直至返青期才开始恢复。分析表明,矩镰荚苜蓿越冬期间地下芽生长停滞和芽内淀粉粒含量降低是其休眠态转变的重要标志,休眠芽通过淀粉粒水解代谢,增加细胞可溶性糖浓度、降低细胞冰点是其抵御冬季低温胁迫的适应机制。

摘要： 【目的】对紫金龙各营养器官的组织显微结构和组织化学定位进行研究,明确紫金龙各器官的组织构造特点和4种化学成分的分布积累特征。【方法】分别制作紫金龙根、茎和叶片的横切片,运用显微镜观察并分析各营养器官的组织结构,利用组织化学定位方法对黄酮、多糖、生物碱及皂苷等多类成分进行定位及分布特征分析。【结果】明确了紫金龙各器官的组织形态及构造特点;黄酮类成分主要分布在皮层基本薄壁组织、维管束、少数乳汁管及叶肉等组织细胞中。生物碱类成分主要分布在皮层基本薄壁组织、维管束及叶肉等组织细胞中。多糖及皂苷类成分则主要分布在皮层基本薄壁组织、维管束及叶肉和叶表皮等组织细胞中。4类物质在各器官的分布量为根>茎>叶。【结论】紫金龙各营养器官的显微构造特征可以作为原植物及药材的鉴别依据。根、茎、叶3种营养器官均有黄酮、生物碱、多糖及皂苷的分布,但各自分布的部位及组织细胞有所不同。研究结果可为紫金龙资源的开发利用提供参考依据。

摘要： 本研究以实验动物的肝组织为材料选择10种不同的固定液,观察比较其对组织化学冰冻切片的影响,为组织化学实验做出高质量的冰冻切片提供实验基础。取实验动物的肝组织,冰冻切片后分别用10种固定液进行固定,然后进行糖组织化学染色,观察各组的细胞组织结构形态,细胞核、细胞质染色和核质对比度,以及结构清晰度等情况。结果表明,10种固定液都可用于固定肝组织化学冰冻切片,但通过镜下观察形态、染色效果、核浆对比度及结构清晰度各有差异。4%甲醛、4%多聚甲醛、4%中性甲醛等效果较好,配制简便,宜继续使用。AF固定液、Carnoy固定液,可酌情使用。AAF、AFA、EAF固定液及Bouin固定液,均可不再使用。甲醇效果较好,且无须配制、价格便宜、使用方便,宜普遍使用。

摘要： 目的研究Cd^(2+)、Cu^(2+)、Ni^(2+)、Pb^(2+)等重金属离子对牛蛙(Rana catesbiana)消化道黏膜过氧化物酶(peroxidase,POX)、非特异性酯酶(nonspecific esterase,NSE)、琥珀酸脱氢酶(succinate dehydrogenase,SDH)、酸性磷酸酶(acid phosphatase,ACP)、碱性磷酸酶(alkaline phosphatase,ALP)、腺苷三磷酸酶(adenosine triphosphatase,ATPase)等6种重要酶活性的影响。方法在牛蛙消化道8个部位取样,采用冰冻切片和酶组织化学染色方法检测酶活性。选取酶活性较高的部位,用不同浓度的重金属溶液处理组织后检测重金属离子对酶活性的影响。结果POX主要分布于直肠,Cd^(2+)、Cu^(2+)、Ni^(2+)对其活性有不同程度抑制作用。NSE主要分布于十二指肠,Ni^(2+)、Pb^(2+)对其活性有显著抑制作用。SDH主要分布于胃体,其他部位酶活性较低,4种重金属对其活性都有显著抑制作用;相较于其他酶,SDH活性受影响程度更明显。ACP主要分布于胃幽门,Cu^(2+)、Pb^(2+)对其活性存在显著抑制作用。ALP主要分布在十二指肠,其它部位酶活性较低,Cu^(2+)、Pb^(2+)对其活性有显著抑制作用。ATPase主要分布于空肠,4种重金属都显著抑制其活性。结论牛蛙消化道黏膜不同酶对重金属离子的敏感性不同,SDH对重金属离子的敏感性最高,ATPase活性亦受四种重金属离子的抑制作用,表明重金属离子会通过抑制牛蛙能量代谢的过程影响其消化吸收功能。

摘要： 白麻是中国西北干旱区一种重要的生态型蜜源经济植物,揭示白麻花蜜腺泌蜜的方式和规律对白麻植物资源的开发利用十分必要。以不同花期的新疆产白麻花为试验材料,通过石蜡切片技术和组织化学染色,借助光学显微镜、扫描电镜等仪器,观察研究白麻花蜜腺的形态特征、组织结构及其发生发育规律。研究结果表明:白麻花蜜腺着生于五浅裂的肉质环状花盘裂片上、位于每一花丝基部的内侧,形状为椭圆形,数量5个;蜜腺由分泌表皮、产蜜组织细胞和维管束组成,其中,蜜腺分泌表皮细胞变形突起并随表面角质层形成指状结构。组织化学反应发现,花蜜腺在发育过程中无淀粉粒变化,但具有蛋白质和多糖的消长变化。因此,白麻花泌蜜的可能途径是蜜汁由产蜜组织合成并经由蜜腺表面的指状突起渗透到植物体外,而不是从气孔泌出。此外,白麻花瓣内外表面的单细胞乳突亦具有分泌特性。

摘要： 采用冰冻切片法、徒手切片法,利用亮视野显微镜、荧光显微镜、偏振光和扫描电子显微镜,对卷丹进行显微结构研究;利用荧光和组织化学染色的手段对卷丹进行组织化学研究.结果表明:(1)卷丹鳞叶内表皮和外表皮都由1层紧密排列的长方形细胞构成,外表皮细胞较长,大小为(230±60)μm×(50±10)μm,垂周壁略微弯曲,内表皮细胞大小为(120±30)μm×(70±10)μm,垂周壁微弯曲或浅波状;内表皮和外表皮都分布有少量气孔,无副卫细胞.(2)卷丹鳞叶有12～16个维管束,导管为螺纹导管.(3)薄壁细胞所含淀粉粒较多,都为单粒,卵圆形和长椭圆形,脐点偏心,层纹清晰可见.(4)荧光显微及组织化学染色表明,生物碱、多酚类和脂类物质主要分布在内表皮和外表皮细胞中,而多糖和皂苷类物质在内表皮、外表皮以及叶肉细胞中都有分布.卷丹不同部位的表皮、淀粉粒特征较为一致,维管束数目一定,大小差别较大.组织化学研究结果为百合的加工、评价、鉴定及进一步研究提供了基础.

摘要： 解剖壳长(53.24±2.23)mm缢蛏Sinonovacula constricta的外套膜组织,经H·E染色和特殊染色等组织学和组织化学方法研究了外套膜组织结构与细胞化学成分.组织学观察表明:外套膜由边缘膜和中央膜组成,无边缘膜突起;边缘膜由内外侧上皮、结缔组织、肌纤维及分布在其中的粘液细胞组成.组织化学研究显示:上皮细胞和分泌细胞内含物中含有丰富的糖类;外侧上皮和肌纤维蛋白质含量较高;在外侧上皮中检测到较强的碱性磷酸酶(ALP)活性.本研究结果可为解决缢蛏贝壳易破损、运输中大量死亡等问题提供参考.

摘要： 苦马豆为豆科苦马豆属的药用植物,别名羊尿泡、铃铛草等.文章对苦马豆营养器官的结构做详细的解剖学、组织化学研究,研究结果表明:苦马豆根的初生木质部呈星芒状,主要有导管和管胞组成,这些管状分子的孔径大小不同,大都充满内含物,初生木质纤维和初生韧皮纤维发达,在外皮层薄壁细胞中有分泌囊.木质部为二原型、四原型,无髓.经明矾苏木精染色,发现薄壁细胞内含有脂类.在次生生长的过程中，木薄壁细胞数目的增多和体积的增大将表皮破坏，分泌细胞团分布在栓内层，茎具棱，表皮气孔器下陷，可见明显的孔下室，有的表皮细胞向外突起，形成分泌毛，叶上、下表皮细胞中有大量内含物，可能具分泌功能;表皮细胞切向壁向外凸起，其表面角质化，有鳞片;下陷的气孔器外拱盖单层，内缘为不规则波状;上表皮无毛，表皮细胞垂周壁式样为平直-弓形，细胞壁均匀加厚;下表皮具二叉状平伏的单毛，孔下室明显，栅栏组织中的分泌囊比在海绵组织中多;主脉的表皮细胞壁及角质层均强烈加厚，横切面呈齿状。

摘要： 本文采用常规石蜡组织切片及阿利新兰一过碘酸雪夫试剂染色方法对四指马鲅稚鱼、幼鱼和成鱼消化道中黏液细胞的组织化学特征进行观察研究，比较不同发育阶段其消化道黏液细胞发育的差异，分析各发育阶段鱼体的消化生理及其免疫屏障形成的机制，以期为该鱼人工育苗及幼鱼期免疫预防方面提供理论依据。

摘要： 利用离析技术、显微观察和组织化学鉴定等方法,对白木香的木质部结构及组织化学进行了研究.结果表明,木质部由五部分组成:髓心、内涵韧皮部、木射线、导管、纤维管胞.内涵韧皮部呈多孔型均匀分布；木射线单列(双列少见)异型Ⅲ;管孔排列为径向管孔团、复管孔、管孔链和单管孔;导管侧壁有互列纹孔式和附物纹孔;纤维管胞侧壁有单斜附物纹孔；径列条及栓塞首次在白木香中发现；并进一步证实淀粉、还原性糖和挥发性成分在不同年龄的木质部里含量及储存部位存在差异.本研究为沉香的形成提供基本的解剖学证据.

摘要： 采用石蜡切片法观察了文心兰'Milliongolds'花芽的形态发生和结构发育过程,用石蜡切片高碘酸席夫反应法(PAS法)和汞溴酚蓝组织化学染色法研究糖和蛋白质在文心兰花芽分化过程中的变化.研究表明:文心兰花芽的分化进程可以分为未分化期、花蕾原基分化期、萼片原基分化期、花瓣原基分化期、合蕊柱及花粉块分化期6个时期.糖和蛋白质主要以颗粒状分布在各器官的原基顶端及其周围.在花序原基分化期,细胞中糖的含量较少,而蛋白质含量丰富且整体分布均匀.随着花芽的继续分化,糖和蛋白质含量在花萼原基分化期最为丰富,在花瓣原基时期含量明显减少.进入合蕊柱及花粉块分化期时,糖和蛋白质在合蕊柱及花粉块着生处最为集中.

摘要： 组织化学染色具有程序化、标准化的特性，尽管操作不复杂，但需要在日常工作中多学习，多实践，积累经验，文章对组织化学染色常见问题进行了总结，并提出了相应的解决方法。

摘要： 本研究旨在确认缓殖子内穿孔素的存在,进而观察其在缓殖子形成和释放中的作用.利用RT-PCR从弓形虫RNA中扩增弓形虫PLP1基因片段,定向克隆入原核细胞表达载体pET-28a(+),转染大肠杆菌(E.coli),以组氨酸结合柱亲和层析法纯化表达产物.以重组蛋白分别免疫小鼠和白兔,获得鼠源和兔源高滴度抗体.小鼠经口感染Pru虫株,分别在感染后15天、30天、60天、90天和120天取小鼠脑组织,分别制作冰冻切片和石蜡切片.观察石蜡切片脑组织中包囊,并利用间接免疫荧光(IFA)和免疫组织化学技术(IHC)证实了PLP1在缓殖子中持续表达.分别用兔源抗体和鼠源抗体分别标记TgPLP1,利用IFA确认TgPLP1与TgMIC3共定位于缓殖子的微线体.应用realtimE-PCR检测体外培养Pru虫株过程中TgBAG1和TgPLP1表达水平,结果显示在Pru株从速殖子转换为缓殖子的过程中TgPLP1表达量显著下降.PLP1在弓形虫缓殖子发育过程中的作用还有待于进一步探讨.

摘要： 本文通过分析5例闭合性颈部损伤致死尸检资料,并结合相关文献,讨论其法医学鉴定要点及注意事项，并探讨了影像学或组织化学等技术的应用价值。

摘要： 黄麂作为国家列入保护的频危珍稀动物之一，其种群数量正在日益减少，不分季节地特别是在夏季雌兽怀孕期滥施捕杀是其频危灭绝主要原因之一，另外因疾病死亡也是黄麂数量减少的重要因素。目前尚未引起人们的足够重观，相关的疾病研究也比较少。本研究采用组织病理学和组织化学等方法，对北京动物园5例发病死亡的黄麂各个器官的组织病理学变化进行了系统地观察。

摘要： 通过胆碱酯酶染色及抗体的免疫组织化学检查,研究组织化学在先天性巨结肠(Hirschsprung disease,HD)及其类缘病(Hirschsprung's allied disease,HAD)的诊断及鉴别诊断中的应用。实验结论得出：饿黑法可用于HD的术前诊断，快速法比较适合用于术中快速诊断。Bcl-2, CR的特异性表达，在HAD及新生儿HD的诊断中能起到重要的作用。BMP2和BMP4在肠无神经节细胞症病变肠管段的肠神经系统内存在表达异常，且二者的表达水平与病变部位存在正相关性。GDNF在病变肠道中胚层表达量明显减低，有可能作为肠无神经节细胞症的一个诊断指标用于临床诊断。

摘要： 目的：研究药用植物的结构、发育及其与主要药用成分积累的关系。方法：植物解剖学方法、组织化学定位及植物化学技术相结合。结果：通过对11种、2属药用植物的研究,其主要药用成分多数贮存在药用部分的薄壁组织中,少数贮存在分泌结构内;其量一般在营养生长期高,生殖生长期低,果后又升高不同年生药用植物的生物产量都逐年上升,而药用成分的量则各年不同。结论：药用植物的最佳采收季节和年限应以其生物产量和主要药用成分总量达最高值为准。

摘要： 本公开提供用于经由亲和染色来检测NTRK重排情况的材料和方法。用与TrkA、TrkB和/或TrkC的保留部分结合的生物标志物特异性试剂(例如抗体)对样品进行染色。评估染色模式，并且通过检测所述样品是否具有至少阈值数量的具有阈值染色强度的细胞来确定Trk融合的存在情况。在一些情况下，无论染色定位模式如何，均应用相同的评定方法。在其他情况下，细胞质定位和/或膜定位由第一方法评定，而核定位由第二方法评定。本文所公开的方法可应用于所有非内分泌实体肿瘤类型。

摘要： 本发明公开一种转基因牡丹愈伤组织的GUS基因组织化学染色方法，将转基因牡丹愈伤组织从培养基中取出，用蒸馏水洗去残留菌体，放入离心管中，加入Buffer A至没过愈伤组织，置于24°C环境中，侵泡1 h，用移液枪将Buffer A吸出，加入Buffer B至没过愈伤组织，置于24°C黑暗环境中染色过夜或数小时，至愈伤组织出现蓝色。本发明将原GUS基因组织化学染色方法中的37°C优化为24°C。将试验筛选得到的增殖生长良好的愈伤组织进行GUS组织化学染色的检测，试验结果成功检测到GUS活性的表达，愈伤组织碎块呈蓝色，表明新生的愈伤组织中存在GUS活性位点。

摘要： 本发明属于免疫组织化学技术领域，公开了一种猪不同部位脂肪组织交感神经免疫组织化学染色优化方法，石蜡切片脱蜡水化后，进行抗原修复；利用丙酮固定后，血清封闭，一抗孵育；利用过氧化氢阻断后，进行二抗孵育；进行DAB显色，核复染后，脱水封片；进行显微镜镜检，石蜡切片免疫组化结果判读。通过本发明的优化实验步骤，染出了效果较好的组织学切片；一是加入了丙酮固定这一实验步骤，可以很好的达到使细胞通透且去除一部分油脂的效果，使得抗体更好结合组织抗原的效果；二是调整过氧化氢阻断的顺序，在一抗孵育之后，再进行过氧化氢阻断的步骤。因为在过氧化物阻断后，一些抗原表位被过氧化物修饰了，降低了抗原抗体的结合。

摘要： 本发明公开一种转基因牡丹愈伤组织的GUS基因组织化学染色方法，将转基因牡丹愈伤组织从培养基中取出，用蒸馏水洗去残留菌体，放入离心管中，加入Buffer？A至没过愈伤组织，置于24°C环境中，侵泡1？h，用移液枪将Buffer？A吸出，加入Buffer？B至没过愈伤组织，置于24°C黑暗环境中染色过夜或数小时，至愈伤组织出现蓝色。本发明将原GUS基因组织化学染色方法中的37°C优化为24°C。将试验筛选得到的增殖生长良好的愈伤组织进行GUS组织化学染色的检测，试验结果成功检测到GUS活性的表达，愈伤组织碎块呈蓝色，表明新生的愈伤组织中存在GUS活性位点。

摘要： 一套用于对组织切片进行免疫化学染色及保存的载玻片，其载物单元的承载面上具有不同深度、形状的用于容纳组织切片的凹槽，凹槽内表面光滑，每个凹槽对应有一块封片单元，封片单元片与所述凹槽的形状相匹配，封片单元上以其中心为基点，分布有纵横垂直交叉的直线，形成边长为10 um的每个方格，且封片单元的边缘设有密封圈。该套载玻片有效避免了现有免疫组织化学检测过程中容易造成组织切片脱落，抗体溢出、盖玻片移位以及组织转移受损等问题，且结构简单，成本低廉，能较好的保证组织切片和盖玻片的稳定性以及抗体与组织接触反应的有效性，同时通过封片单元上的刻度线可对受检测组织的大小和面积进行测算。

摘要： 本公开提供了用于直接免疫组织化学(IHC)染色和直接免疫细胞化学(ICC)技术的方法、试剂盒、和组合物，包括应用于多重试验、化学染色的样品、和细胞学样品。

摘要： 本发明公开了一种基于组织化学定位与化学成分分析的钩藤生物碱检测方法，以钩藤根、茎徒手切片进行生物碱染色，根据染色结果剥离各着色部位并测定其总生物碱，明确生物碱储存结构部位和含量，以此鉴别钩藤药材并确定药材的综合开发利用策略。传统方法采收钩藤药材时，其根、茎、叶均未被利用，造成资源极大浪费。本发明以钩藤根、茎为材料，进行生物碱染色观察及总生物碱提取，从而确定生物碱在钩藤中的积累部位及含量，并作为判定钩藤药材质量的有效方法，旨在改进其药材的传统利用方式，将根、茎、叶加以综合利用，以实现其经济效益的最大化。

摘要： 本发明涉及一种NG‑2免疫组织化学抗体，属于生物医药技术领域。NG‑2免疫组织化学抗体，包括重链可变区和轻链可变区，重链可变区的氨基酸序列如SEQ ID NO.1所示；轻链可变区的氨基酸序列如SEQ ID NO.2所示；或重链可变区的氨基酸序列如SEQ ID NO.3所示；轻链可变区的氨基酸序列如SEQ ID NO.4所示。本发明提供一种NG‑2免疫组织化学抗体在制备与NG‑2相关的正常细胞和肿瘤细胞鉴别诊断试剂盒中的应用；NG‑2免疫组织化学抗体在制备鉴别食管鳞状细胞癌和食管基底样鳞状细胞癌的诊断试剂盒中的应用。

摘要： 本实用新型公开了一种用于免疫组织化学染色试剂涂敷均匀的卡板，包括连接板，所述连接板底部设置有涂抹机构，所述涂抹机构包括涂抹板、涂抹槽、卡口与涂抹线，所述涂抹板设置于连接板底部，所述卡口开设于涂抹板底部中间，所述涂抹槽开设于涂抹板内，所述涂抹槽设置于卡口顶部中间，且所述涂抹槽与卡口相连通，所述涂抹线设置于涂抹板底面处于涂抹槽的部位，所述连接板顶部设置有辅助机构，辅助机构包括辅助组件与放置组件，本实用新型机构简单，设计合理，通过该卡板，能有效避免涂抹试剂过程中损坏组织样品，同时操作过程无需特别谨慎，操作简单便捷，可在相同时间内处理更多组织样品，提高效率，提高成品率。

摘要： 本实用新型公开了一种免疫组织化学抗原修复洗片一体机，包括：修复单元、加热单元、降温单元、冲洗单元；所述修复单元设于所述加热单元内，且设有至少一组；所述加热单元设于所述降温单元内；所述冲洗单元与所述修复单元连接，并向所述修复单元输出冲洗液。本实用新型可优化温度控制、提高实验效率。