精细胞

摘要： 减数分裂后的单倍体精子细胞经过一系列剧烈形态及结构变化,包括细胞质丢弃、细胞核压缩、顶体和鞭毛形成等,最终发育为高度特化的精细胞或精子,此过程被称为精子形成(spermiogenesis)^([1~3])。基于精子细胞的形态变化,研究人员将小鼠的精子形成过程划分为16个步骤:第1~8步球形精子细胞期,第9~11步延长形精子细胞期,第12~14步长形精子细胞期,第15~16步精子细胞则基本发育完成,呈现典型的弯钩状^([4])。

摘要： 减数分裂是生物繁殖进行有性生殖的重要生理过程,是遗传的细胞学基础,进行减数分裂的细胞主要是动物精原细胞和卵原细胞,减数分裂与受精作用对于维持每种生物前后代体细胞中染色体数目的恒定,对生物的遗传和变异都具有十分重要的作用。细胞减数分裂时染色体或染色体上的基因发生异常会产生多种异常配子,它们会通过受精作用传递给后代,这也是造成生物多样性的原因之一。结合异常配子类型,合理分析其形成的原因并在真实情境中加以应用,对培养学生生命观念、科学思维、科学探究、社会责任感具有极其重要的作用,也是发展学生生物学核心素养的有效途径。

摘要： Flow cytometry (FCM) is used for multi parameter and rapid quantitative analysis of biological particles,such as all cells,microorganisms and synthetic microspheres in fast line flow state.It is also a modern cell analysis technology for the separation of specific groups.In recent years,FCM has been applied in the field of assisted reproductive medicine.FCM plays an important role in the diagnosis of immune infertility and predicting the fertilization ability of sperm.This article aims to review FCM application in peripheral immune cell surface marker detection for infertility patients,and research on the structure and function of sperm cell.%流式细胞术是利用流式细胞仪对处在快速直线流动状态中的生物颗粒,如各种细胞、微生物及人工合成微球等进行多参数、快速定量分析;同时也可以对特定群体加以分选的现代细胞分析技术.流式细胞术在辅助生殖医学领域得到了大量应用,在判断免疫性不孕、预测精子受精能力等技术中发挥重要作用.本文就流式细胞术在不孕不育患者外周血免疫细胞表面标志物的检测,精子细胞结构和功能学分析方面的研究进展作简要介绍.

摘要： 睾丸对于男人的重要性不言而喻,其既控制着男人的生育,也控制着男人的性功能。因其具有两大功能,即负责生产精子和性激素。男性睾丸的曲细精管上皮有两类细胞：支持细胞和精细胞。前者具有支持和营养精细胞的作用,而后者可发育成精子。精子是男性成熟的生殖细胞,它们的发育是由不成熟的精原细胞开始。精子成熟后,脱落到曲细精管的管腔中。

摘要： In this study,the feasibility of utilizing male mouse germ cells in testis and electrical cell-substrate imped?ance sensor(ECIS)was explored to build a cell-based bitter biosensor,which can sensitively and specifically respond to bitter compounds. Male mouse germ cells express lots of bitter receptor T2Rs(G protein coupled receptors)which can sensitively and specifically respond to bitter compounds,when active by ligands will affect cell morphology in a specific manner. The best cell density was explored;cell-impedance response profiles of germ cells to two bitter com?pounds were investigated by analyzing the response intensity under various concentrations,The linear detection range of PTC is 10μmol/L~200μmol/L,the detection limit is 4μmol/L;the linear detection range of quinine is 62.5μmol/L~1000μmol/L,the detection limit is 4μmol/L; Furthermore,impedance responses to five basic tastes were exam?ined to evaluate the specificity of cell-based bitter biosensor in bitter detection. The results revealed that this hybrid bitter biosensor could respond to those bitter compounds in a dose-dependent manner. And it could respond to bitter compounds specifically. This biosensor may provide a promising approach for detecting various bitter compounds.%本文设计了一种基于雄鼠精细胞的细胞阻抗传感器用于苦味物质的特异性检测.雄鼠精细胞内含有大量T2Rs受体(G蛋白偶联受体)可以对苦味物质产生特异性响应,苦味受体被苦味物质激活后产生的响应会引起细胞形态骨架的变化,从而可以被细胞阻抗传感器检测.本文探索了实验的最佳细胞密度,检测了苯硫脲和奎宁两种常见的苦味物质的响应,苯硫脲检测范围为10μmol/L~200μmol/L,检出限为4μmol/L;奎宁检测范围为62.5μmol/L~1000μmol/L,检出限为40μmol/L.传感器阻抗值增量与苦味物质浓度呈一定的线性相关性.此外,论文对该味觉传感器的特异性进行了测试分析,表明了基于细胞传感器的检测方法为代替动物和人的苦味测试提供了一种可能的新的手段.

摘要： 目的 探讨无血清条件下应用插入式细胞培养皿(Transwell小室)对小鼠睾丸间质细胞—支持细胞—生精细胞的双室培养技术.方法 取60日龄C57BL/6雄性小鼠睾丸间质细胞和15日龄雄性小鼠睾丸支持细胞与生精细胞混合细胞团双室共培养,不添加血清.每日在倒置显微镜下观察生精细胞的形态和生长情况,苏木精染色观察生精细胞形态,染色体倍性分析检测细胞分化情况.结果 在培养1周后,可见圆形精于细胞出现,2周后可见长形精子细胞,3周后可见较短鞭毛,生精细胞可存活8周;培养1周时,流式细胞术可检测出单倍体细胞,单倍体细胞百分比随培养时间延长而增加.结论 应用双室无血清培养体系体外培养小鼠生精细胞可获得精子且生精细胞存活时间较长.

摘要： 被子植物的有性生殖过程复杂精巧并深藏于母体组织内进行,一直以来难以对该过程进行直接的细胞学和分子生物学研究。如今在多种植物中获得了有活力而无污染的配子细胞和早期胚胎,结合少量细胞m RNA提取技术、基因组深度测序以及离体授精系统等技术,人们已能对被子植物受精过程中的配子识别、配子融合、合子激活等重要发育事件进行深入分析。本文对有代表性的被子植物配子和早期胚胎的分离技术及其在受精作用研究中的应用、存在的问题和前景进行了总结,旨在为植物生殖发育研究提供帮助。

摘要： 被子植物的有性生殖过程复杂精巧并深藏于母体组织内进行,一直以来难以对该过程进行直接的细胞学和分子生物学研究.如今在多种植物中获得了有活力而无污染的配子细胞和早期胚胎,结合少量细胞mRNA提取技术、基因组深度测序以及离体授精系统等技术,人们已能对被子植物受精过程中的配子识别、配子融合、合子激活等重要发育事件进行深入分析.本文对有代表性的被子植物配子和早期胚胎的分离技术及其在受精作用研究中的应用、存在的问题和前景进行了总结,旨在为植物生殖发育研究提供帮助.

摘要： 镉是一种有毒的重金属,由于其能长期蓄积于体内,对人体健康造成危害.以前的研究表明,镉可以诱导DNA损伤和自噬.自噬可以稳定遗传物质和促进DNA完整性.本研究为了检测镉在精子细胞中诱导自噬的机制和作用.小鼠精母细胞来源的(GC-2)细胞株,用20μM氯化镉处理24小时.检测活性氧(ROS),DNA损伤,自噬及分子信号通路ATM/AMP激活蛋白的表达测定激酶(AMPK)/mTOR的激活水平. 结果表明,镉通过诱导GC-2细胞的ROS产生,导致精细胞DNA损伤,当DNA损伤感受器ATM被激活后,将激活自噬信号通路AMPK/mTOR,进而诱导自噬发生.褪黑素是一种众所周知的抗氧化剂,可以改善DNA损伤,本研究发现褪黑素通过抑制AMPK/mTOR信号通路,抑制自噬发生.此外,当AMPKα被干扰后,通过镉处理GC-2细胞,将抑制自噬的发生,进而增加DNA损伤.这些研究结果证明了自噬在DNA损伤中的保护作用,并提示镉主要通过激活ATM/AMPK/mTOR信号通路诱导自噬的发生.

摘要： 目的：探讨十氯酮对雄性秀丽隐杆线虫精细胞的毒性效应及其与氧化应激损伤作用的关系. 方法：L1期线虫分别暴露于四个染毒剂量组(0.02、0.2、2、20μg/L),同时设空白对照组(M9溶液),48小时后,计数后代数目和观测世代时间;通过CM-H2DCFDA探针处理后观测线虫体内活性氧自由基(ROS)水平;荧光显微镜观测JK2868线虫的远端顶细胞(DTC)荧光强度;二脒基苯基吲哚(DAPI)染色后计数性腺有丝分裂区生殖细胞数;显微镜明场下观测线虫精子畸形率和体外活化率. 结果：十氯酮高剂量组与空白对照组比较后代数目减少、世代时间延长(P＜0.05);中高剂量组不同程度引起了线虫体内ROS水平的升高(P＜0.05);各剂量组JK2868线虫与空白对照组比较其DTC细胞荧光强度降低(P＜0.05);有丝分裂区生殖细胞数目各剂量组较空白对照组降低(P＜0.05);精子畸形率、体外活化率各剂量组间也有差异(P＜0.05). 结论：氧化应激损伤可能是十氯酮暴露后引发生殖毒性作用的重要机制.

摘要： [目的]本研究以环磷酰胺(cyclophosphamide)为精子致畸物，应用模式动物秀丽隐扦线虫进行雄性生殖毒性评价模型的建立，探索可行的阳性评价指标。[方法]将L4期him-5突变体幼虫在0.02、0.2、2.0、20.0mg/L的环磷酰胺中暴露48 h后，观察him-5突变体精细胞的变化特征。结果实验结果显示不同浓度的环磷酰胺均降低him-5突变体的生殖能力，高浓度组与对照组差异具有统计学意义。4种浓度均引起线虫精细胞变小、活化率降低，与对照组具有显著性差异，在暴露浓度大于2.0mg/L时精细胞形态异常改变明显。线粒体荧光探针标记显示精子体内运动能力未受损。rn [结论]秀丽隐杆线虫对生殖毒物具有较高的敏感性，在生殖毒性评价模型构建方面具有潜在的价值。

摘要： 本发明公开了大菱鲆精细胞变态阶段的细胞学划分方法，包括：固定、预染色、脱水与包埋、醋酸双氧铀染色、柠檬酸铅染色、制片分析，将大菱鲆精细胞变态过程划分为8个阶段：包括精细胞Ⅰ‑Ⅶ期和成熟精子。有益效果为：本细胞学划分方法克服了普通组织学切片观察中由于放大倍数有限导致无法区分不同变态时期精细胞的问题，预染色有助于提高染色均匀度、组织结构清晰度以及组织染色反差度，可优化染色效果，显著增强精细胞组织结构的图像清晰度；大菱鲆精细胞变态阶段的细胞学划分方法不仅填补了鲆鲽鱼类精细胞变态阶段划分的研究空白，同时还可以应用于其他海水鱼类的精细胞变态阶段的细胞学划分。

摘要： 本发明描述了用于使用免疫荧光结合流式细胞仪，调查精子中衣原体、病毒和其他感染原的存在的方法。此方法是通过使用一种DNA缓和过程，用于检测精细胞内的细胞内微生物体，以及用于检测附着于精子表面的微生物体。

摘要： 本发明提供了及一种贝类精巢生精细胞解离和分离的方法，属于海洋贝类细胞的分离技术领域。将增殖期贝类精巢破碎，依次用质量浓度0.1％胶原酶Ⅳ溶液消化和质量百分浓度0.25％胰蛋白酶溶液消化，解离精巢获得单细胞悬液；配制体积浓度10％、22％和35％的Percoll溶液，按浓度由大到小的顺序装入同一离心管中，向离心管的顶层加入贝类生精细胞单细胞悬液，离心，分别收集3层细胞。采用两步酶解法可将精巢组织中的生精细胞成功解离为单细胞悬液，细胞存活率可高到96.62％，并可在体外进行正常培养。同时分离出较高纯度的精原细胞和精母细胞，为研究贝类配子发生和繁育机制提供重要的材料，具有较高的指导意义和应用价值。

摘要： 本发明公开了大菱鲆精细胞变态阶段的细胞学划分方法，包括：固定、预染色、脱水与包埋、醋酸双氧铀染色、柠檬酸铅染色、制片分析，将大菱鲆精细胞变态过程划分为8个阶段：包括精细胞Ⅰ‑Ⅶ期和成熟精子。有益效果为：本细胞学划分方法克服了普通组织学切片观察中由于放大倍数有限导致无法区分不同变态时期精细胞的问题，预染色有助于提高染色均匀度、组织结构清晰度以及组织染色反差度，可优化染色效果，显著增强精细胞组织结构的图像清晰度；大菱鲆精细胞变态阶段的细胞学划分方法不仅填补了鲆鲽鱼类精细胞变态阶段划分的研究空白，同时还可以应用于其他海水鱼类的精细胞变态阶段的细胞学划分。

摘要： 本发明描述了用于使用免疫荧光结合流式细胞仪，调查精子中衣原体、病毒和其他感染原的存在的方法。此方法是通过使用一种DNA缓和过程，用于检测精细胞内的细胞内微生物体，以及用于检测附着于精子表面的微生物体。

摘要： 本发明公开了一种冷冻保存的牛生精细胞体外培养方法，将新鲜牛睾丸组织进行程序化冷冻或玻璃化冷冻；将牛睾丸组织进行冷冻复苏，然后制备单细胞悬液；利用制备的单细胞悬液制备饲养层细胞；利用制备的饲养层细胞进行支持细胞与生精细胞共培养。与现有技术相比，本发明能有效的保证一次性采集足够的样品，并在低温条件下储藏和运输，且能利用冷冻复苏后的样品进行酶消化得到活率较高的生精细胞。经过冷冻复苏后的生精细胞，能在体外进行长期的培养与传代，为后续的细胞实验奠定了基础。具有操作简单、不受时间和距离限制的特点，能减少采样次数与成本。

摘要： 通过电泳使精细胞与化合物分离的方法，包括使精细胞接受阴极与阳极之间的电势，使得精细胞与化合物分离，以及相关的方法，包括将所述精细胞用于子宫内授精的方法。

摘要： 本发明公开了一种大鼠原代生精细胞体外分离的方法，采用的方案包括：1)取新鲜离体大鼠双侧睾丸，剥除被膜及血管，获得睾丸组织；2)将睾丸组织消化处理制备单细胞悬液；3)将单细胞悬液培养直至非生精细胞贴壁后，吸出未贴壁的悬浮细胞，对悬浮细胞采用Percoll法分离获得生精细胞。本发明为体外研究大鼠睾丸生殖功能奠定基础，该方法实现了体外分离和培养大鼠睾丸生精细胞，并证实这种方法分离和培养的生精细胞体外存活率高，且存活时间较长。利用该方法能获得正常的大鼠睾丸生精细胞，花费少，操作简单，可重复度高，能满足多种实验需求，值得大范围推广。

摘要： 本发明提供了及一种贝类精巢生精细胞解离和分离的方法，属于海洋贝类细胞的分离技术领域。将增殖期贝类精巢破碎，依次用质量浓度0.1％胶原酶Ⅳ溶液消化和质量百分浓度0.25％胰蛋白酶溶液消化，解离精巢获得单细胞悬液；配制体积浓度10％、22％和35％的Percoll溶液，按浓度由大到小的顺序装入同一离心管中，向离心管的顶层加入贝类生精细胞单细胞悬液，离心，分别收集3层细胞。采用两步酶解法可将精巢组织中的生精细胞成功解离为单细胞悬液，细胞存活率可高到96.62％，并可在体外进行正常培养。同时分离出较高纯度的精原细胞和精母细胞，为研究贝类配子发生和繁育机制提供重要的材料，具有较高的指导意义和应用价值。

摘要： 本发明公开了一种生物提取用高精细胞级胶体磨，属于生物设备技术领域，包括研磨筒，研磨筒内部两端安装有静研磨块，静研磨块内部设有动研磨块，动研磨块下端连接有研磨轴，研磨轴下端连接有研磨电机的输出轴，研磨筒下端两侧安装有支撑腿，支撑腿底端之间安装有限位板，限位板上端中部安装有限位槽，限位槽内部两端安装有限位块，限位块上端安装有滑块，滑块中部安装有转动杆，滑块上端铰接有连杆，连杆上端铰接有调节板，调节板上端固定安装有研磨电机。本发明，实现着对动研磨块与静研磨块之间距离的调整，满足着生物提取物研磨时精度的调整，适用范围广，且操作简单，可靠性高，实用性强。